研究文章|gydF4y2Ba开放获取gydF4y2Ba
马库斯·施密德,桑德拉Prols Daniel m . Kainz Felicia Hammann Andreas稳定gydF4y2Ba,gydF4y2Ba ”gydF4y2Ba水解乳清蛋白对乳清蛋白的分子相互作用和交联密度Isolate-Based电影gydF4y2Ba”,gydF4y2Ba国际高分子科学杂志》上gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 卷。gydF4y2Ba2016年gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 文章的IDgydF4y2Ba3723758gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 9gydF4y2Ba 页面gydF4y2Ba,gydF4y2Ba 2016年gydF4y2Ba。gydF4y2Ba https://doi.org/10.1155/2016/3723758gydF4y2Ba
水解乳清蛋白对乳清蛋白的分子相互作用和交联密度Isolate-Based电影gydF4y2Ba
文摘gydF4y2Ba
水解WPI的数量的影响(h-WPI)在WPI-based电影technofunctional迄今为止,电影的属性和结构并未系统地研究。因此本研究的主要目的是探讨定量和定性的分子相互作用和结构这些电影。不同的缓冲系统被用于溶解性研究获得质的分子相互作用的信息。肿胀的研究提供定性表述WPI网络执行的。此外,交联密度(CLD) WPI-based电影源自肿胀的测试。测量结果表明,增加显著降低了CLD h-WPI内容。电影的CLD值与h-WPI含量0%和50%gydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba厘米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba和gydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba厘米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba。研究表明,共价相互作用影响屏障属性比通过二硫化物键交联密度。一般来说,肿胀的结果测试与溶解度的研究。gydF4y2Ba
1。介绍gydF4y2Ba
食品包装的主要功能是保护食物免受外部影响如氧气和水蒸气(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。食品包装材料必须提供足够的屏障对这些气体,特别是对于应用程序与敏感的食品。这通常是确保通过合并屏障食品包装材料的多层结构。诸如此类的屏障材料通常来源于石化资源。然而,对可降解包装材料的需求正在增长。gydF4y2Ba
因此,大量的作品发表在生物可降解包装材料来自可再生资源,比如小麦谷蛋白,大豆蛋白、酪蛋白和乳清蛋白(gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。乳清分离蛋白(WPI)基于电影展示优秀的屏障属性分类它们适合包装的新生物材料的应用程序(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
乳清分离蛋白乳清蛋白质的混合物不同。这些蛋白质可以通过热相连,酶,和化学治疗gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。治疗期间的蛋白质形成分子间化学键导致聚合物网络。最强的交叉连接都是共价二硫化物桥梁。的屏障性质WPI-based电影可以提高通过增加强大的分子间的相互作用,例如共价交叉连接的数量(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。然而,更多的共价相互作用也改善屏障属性。在这项研究中二硫化物和共价相互作用的影响进行定量定性分析的屏障属性对氧气和水蒸气。结果应能使材料开发人员实现的最佳屏障属性包装解决方案与经济生产方法。gydF4y2Ba
WPI的定性测定分子间的相互作用可以通过使用不同的缓冲系统进行溶解度测试。这些缓冲区包含化学成分如硫脲,尿素,或影响某些分子间二硫苏糖醇能特别债券。结论多肽链之间的相互作用的类型可以通过比较蛋白质溶解度的不同的缓冲系统(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。然而,作者的知识,没有其他的研究调查乳清蛋白质的交联密度(CLD)电影。CLD交叉连接的绝对值在摩尔gydF4y2Ba厘米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba或摩尔gydF4y2BaggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。在这项研究中配方具有不同比例的本地和水解乳清蛋白。,平均分子量的蛋白质电影不同,导致不同的两个交叉连接之间的分子量(gydF4y2Ba)。确定CLD以及gydF4y2Ba价值,肿胀的研究已经进行了。然而,CLD的测定值所需的额外测试,作为未知参数gydF4y2Ba必须计算。gydF4y2Ba是一个相互作用参数之间的蒸馏水和WPI-based电影。Peters等人根据。gydF4y2Ba9gydF4y2Ba)和卡里et al。gydF4y2Ba10gydF4y2Ba),gydF4y2Ba可以使用水蒸气吸附等温线确定测量。除了这些目标,的屏障属性不同WPI-based电影进行了分析和相关计算CLD值。gydF4y2Ba
2。材料和方法gydF4y2Ba
2.1。解决方案准备和涂料gydF4y2Ba
WPI和h-WPI混合电磁搅拌器(IKA, RH基本、Staufen、德国)给下面的批发价格指数:h-WPI比率:10:0,9:1,8:2,7:3、6:4和5:5。h-WPI和WPI的不同比例(10% w / w, BiPro Davisco食物International Inc .,年后,明尼苏达州,美国)被溶解在去离子水中使用电动搅拌器(全能料理机还有,Vorwerk德国Stiftung & Co .公斤,伍珀塔尔,德国)根据麦克休et al。gydF4y2Ba12gydF4y2Ba]。一升的解决方案被加热并将其保持在90°C下30分钟不断搅拌。冷却后,甘油(默克公司,达姆施塔特,德国)添加到实现增塑剂量的6.67% (wt %)的解决方案。后来混合物搅拌30分钟。最后,解决方案被转移到一个实验室的瓶子。样品在超声波脱气浴15分钟(DT 514 h, Bandelin电子GmbH & Co . KG,柏林,德国)。gydF4y2Ba
演员的电影被用于研究和确定technofunctional肿胀属性。电影铸造18 g±0.5 g WPI的配方是添加到聚苯乙烯培养皿(格林尼生物一个国际,120毫米×120毫米×14.5毫米)。通过使用这个量干电影以一个恒定的厚度gydF4y2BaμgydF4y2Bam。8字形运动进行的培养皿中实现均匀分布。然后培养皿放置在一个平面。存储时间是14天23°C和50% r.h.合著的电影很容易剥落的培养皿的帮助后切割刀和镊子干燥阶段。gydF4y2Ba
2.2。蛋白质溶解度的研究gydF4y2Ba
蛋白质溶解度的研究提供定性在蛋白质分子间相互作用的信息网络(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。六种不同的缓冲系统。这些组合所选的评议:0.1米磷酸缓冲(PP), 1 M硫脲(TH), 50 mM二硫苏糖醇(D)和8 M尿素(U)。这些不同的缓冲系统有能力打破特定蛋白质的分子相互作用网络。在表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba不同的缓冲系统,以及列出了交互影响(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba,gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
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存储WPI-based涂料(50%相对湿度和23°C)被剥落的聚四氟乙烯层和含氮量样本确定使用的计算方法根据小仲马干物质中的蛋白质含量。氮的总量在质量百分比乘以6.25倍的原始影片的蛋白质含量。这个值必须被称为干物质,这是决定使用一般方法的弗劳恩霍夫IVV thermographic分析仪LECO TGA 601(见方法描述gydF4y2Ba14gydF4y2Ba])。gydF4y2Ba
剥落蛋白溶解度测试影片与液态氮冷冻(林德AG),慕尼黑,德国)和使用实验室粉磨机(ZM评选100年f·库尔特Retsch GmbH & Co .公斤,汗,德国)。铣步骤应用于增加样品表面,从而使溶剂访问在提取蛋白质链。gydF4y2Ba
0.5克的蛋白质粉和10毫升的各自的缓冲区被添加到100毫升玻璃瓶杜兰实验室。提取步骤这些瓶子被置于水浴(25°C),用电磁搅拌器搅拌(Staufen IKA, RH基本,德国)。2.5小时后,悬挂在离心机15分钟20°C和000×16 g使用实验室离心机(σLaborzentrifugen GmbH, Osterode哈尔茨,德国)。迅速和敏感的布拉德福德蛋白质分析方法应用于确定上层清液中的蛋白质含量。它是基于颜色改变试剂的考马斯亮蓝g - 250 (CBBG)红色(吸收最大:470 nm)蓝色(吸收最大:595海里)的蛋白质。光度测量波长595 nm(执行gydF4y2Ba15gydF4y2Ba,gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
与BSA校准测量标准蛋白质浓度使用解决方案和执行5、10、15、20gydF4y2BaμgydF4y2BaggydF4y2Ba毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。校准曲线的准备后,蛋白质提取与蒸馏水稀释,使测量校准范围内。predilution一步需要高蛋白质浓度。所有样本混合彻底使用Vibrofix VF1电子搅拌器实现均匀分布。800年gydF4y2BaμgydF4y2BaL 200稀释蛋白质提取的混合gydF4y2BaμgydF4y2BaL颜色试剂CBBG 1.5毫升试管。完全同质的混合物是通过使用单一小池搅拌器。通常样品在室温下孵化了20分钟。孵化期后,进行光度测量使用WinASPECT +程序(德国耶拿分析仪器公司,耶拿,德国)的波长595 nm。测量空气作为参考。所有值测定六次进行统计分析。gydF4y2Ba
蛋白质溶解度的计算进行了使用以下方程。浮在表面的蛋白质含量的比值电影至关重要的蛋白质含量(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba 在可溶性蛋白质(%)由各自的缓冲可溶性蛋白质的含量和蛋白质(gydF4y2BaμgydF4y2BaggydF4y2Ba毫升gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba是蛋白质浓度与布拉德福德试验确定。gydF4y2Ba缓冲溶液的体积用于提取(毫升),gydF4y2Ba样品的质量吗gydF4y2BaDF是布拉德福德试验中使用的稀释因子,在干物质和蛋白质样品的干物质含量(%)。gydF4y2Ba
2.3。肿胀的研究来确定交联的程度gydF4y2Ba
根据DIN EN ISO 175:2000肿胀的程度(DoS)是为了计算CLD决定的。电影演员降至60毫米×60毫米大小使用邮票(60毫米×60毫米)和刀具。前的干膜重肿胀测试(gydF4y2Ba),放置在一个preweighted样本容器(广口玻璃,耐尔根,卡尔罗斯GmbH Co。公斤,体积:500毫升)。288毫升蒸馏水的温度23°C在试样容器添加到干电影(8毫升的肿胀介质每平方厘米的面积标本建议根据DIN EN ISO 175:2000)。容器被关闭盖子和储存在23°C和50%相对湿度为24小时。的肿胀时间24小时后,肿胀的样本从容器中删除和附着液体迅速删除使用薄纸(凯特琳+面部组织,Metsa tissue有限,沃顿在泰晤士河上,萨里,英国)。样品质量(gydF4y2Ba)测量立即使用精密天平(1702年缝匠肌、缝匠肌AG)、哥廷根、德国)。那么电影在65°C下干高空气循环干燥箱,直到重量恒常性。干电影再次重使用精密天平(gydF4y2Ba)。自gydF4y2Ba是实际重量的高分子膜肿胀试验,它用于计算DoS和交联密度。gydF4y2Ba
DoS可以计算如下:gydF4y2Ba 在DoS的肿胀程度(%)gydF4y2Ba肿胀的重量是电影后肿胀[g],然后呢gydF4y2Ba是重量的纯电影(没有肿胀介质)[g]。gydF4y2Ba
以确保最佳统计评估,5倍的决心。gydF4y2Ba
2.4。交联密度的测定水蒸气吸附等温线gydF4y2Ba
水蒸气吸附等温线(WVSI)与SPS SPS-1吸附测试系统测量gydF4y2BaμgydF4y2Ba高负荷(ProUmid GmbH,乌尔姆,德国)在一个恒定的温度23°C。WPI-based把电影切成圆形,直径50毫米。已知数量的减少样本放入小碗,使用内置精密天平称重测量期间。测量开始的相对湿度为50%。当样品质量没有改变超过0.002毫克gydF4y2Ba最小值gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba300分钟或材料受到最多1500分钟的调整相对湿度,记录样品的重量。接下来的测量相对湿度增加了10%,体重测量又开始了。10%到90%的相对湿度增加在步骤r.h.合著步骤,然后减少10%到0%的r.h.合著,finally increased again to the starting value of 50% r.h. In every step the sample weight was measured once the mentioned conditions were fulfilled.
交联密度(摩尔ggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba)通常被定义为(gydF4y2Ba18gydF4y2Ba,gydF4y2Ba19gydF4y2Ba]gydF4y2Ba 在哪里gydF4y2Ba数量平均分子量的聚合物之间的交叉连接(ggydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
本文定义的交联度也与交联的摩尔分数单位(gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba 在哪里gydF4y2Ba是分子量的意思是氨基酸的批发价格指数(ggydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),gydF4y2Ba数量平均分子量的聚合物之间的交叉连接(ggydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba]。这个定义表明直接参与交叉连接的氨基酸比例,因此一个说明性的值。用过的gydF4y2Ba是123.3克gydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba(见补充信息在网上gydF4y2Bahttp://dx.doi.org/10.1155/2016/3723758gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba
可以使用Flory-Rehner方程由肿胀实验(gydF4y2Ba21gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba 在哪里gydF4y2Ba数量平均分子量的聚合物之间的交叉连接(ggydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),gydF4y2Ba摩尔体积的去离子水(厘米gydF4y2Ba3gydF4y2Ba 摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),gydF4y2Ba是WPI胶片密度gydF4y2BaggydF4y2Ba厘米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba,gydF4y2Ba肿胀的凝胶聚合物的体积分数gydF4y2Ba,gydF4y2Ba是WPI膜与水的相互作用参数[-]。gydF4y2Ba
假设一个二进制混合WPI电影(gydF4y2Ba)和水(gydF4y2Ba)存在。增塑剂甘油被忽视,因为水膨胀中溶解出来的WPI电影在日益严峻的考验。在肿胀的凝胶聚合物的体积分数gydF4y2Ba被定义为gydF4y2Ba 在哪里gydF4y2Ba是质量的聚合物凝胶肿胀[g],gydF4y2Ba是WPI胶片密度(ggydF4y2Ba厘米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba),gydF4y2Ba是肿溶剂水凝胶的质量[g],然后呢gydF4y2Ba是水的密度(ggydF4y2Ba厘米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
相互作用参数gydF4y2Ba是由拟合Flory-Huggins方程最小二乘的方法测量WVSI使用Excel求解工具。Flory-Huggins方程简化的形式定义为(gydF4y2Ba24gydF4y2Ba,gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]gydF4y2Ba 在哪里gydF4y2Ba是不同的化学势WPI电影和水的混合物(JgydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),gydF4y2Ba理想气体常数[JgydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba KgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba),gydF4y2Ba是温度[K],gydF4y2Ba体积分数的聚合物凝胶肿胀[-],然后呢gydF4y2Ba是交互参数[-]。gydF4y2Ba
方程(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba)中使用的形式gydF4y2Ba 拟合过程由于不平衡影响的对数水活动的平方误差的总和(SSE)在低水活动。gydF4y2Ba
2.5。统计方法gydF4y2Ba
多个gydF4y2Ba以及执行,以确定是否有任何重大的实验治疗的区别gydF4y2Ba至少五个复制。gydF4y2Ba
高斯误差传播被用来估计的不确定性的传播gydF4y2Ba。均值的95%置信区间总是围捕。如果第一个有效数字的置信区间是3或更高,置信区间是一个重要的数字四舍五入。如果第一个有效数字是一个或两个,置信区间是四舍五入到两位有效数字。gydF4y2Ba
12.0软件Visual-XSel (CRGRAPH,慕尼黑,德国)使用。此外,所有正态分布的测量数据进行了测试,与格拉布的测试被用于检测和消除异常值的数据集。gydF4y2Ba
剩余标准错误(交易所)拟合曲线的定义是gydF4y2Ba 在哪里gydF4y2Ba是数量的观察,gydF4y2Ba是价值的gydF4y2Ba我gydF4y2Ba.观察,gydF4y2Ba预计/模拟值和gydF4y2Ba回归系数的个数。gydF4y2Ba
3所示。结果与讨论gydF4y2Ba
3.1。交联密度和交联度gydF4y2Ba
水蒸气的吸附材料的特点是水蒸气吸附等温线(WVSI) [gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba电影展示了WPI-based WVSI结果不同h-WPI和WPI内容、计算gydF4y2Ba值和剩余标准错误(交易所)。gydF4y2Ba
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BioZate5_5 WVSI曲线和拟合Flory-Huggins模型曲线如图(0.044)的交易所gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
由于没有显著差异之间的交互参数决定的,意味着交互参数gydF4y2Ba及其95%置信区间计算gydF4y2Ba。这是假设gydF4y2Ba可以减少与增加h-WPI内容(说明更好的互动水WPI)由于更高的溶解度随着h-WPI的电影内容(见溶解度的研究)。这种效果不能观察到,表明纯水和WPI的相互作用参数与h-WPI大概一样。gydF4y2Ba
如文献所述(gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba)计算是不可能的gydF4y2Ba使用吸附等温线因为Flory-Rehner弹性项方程对结果没有显著影响。因此肿胀测试预成型的。结果表中可以看到gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
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相对应的95%置信区间是20到40%之间的相对误差gydF4y2Ba。样品的相对误差BioZate5_5甚至67%,应该只被视为一种倾向在非常高的h-WPI WPI-based电影内容。低精度的原因的肿胀度很高的电影。甚至电影没有h-WPI内容有一个DoS的400%左右。DoS h-WPI比增加而增大。例如,肿胀的凝胶聚合物的体积分数的样本BioZate5_5只有5%导致1100%的DoS。这些非常高的DoS肿胀的电影的处理极为困难导致高测量误差与高h-WPI电影内容。在低h-WPI内容的测量误差gydF4y2Ba大多数的错误gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
不过似乎测试的准确性高。假设所有cysteine-residues参与交联,一个gydF4y2Ba5947克的gydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba理论上计算示例BioZate10_0(见补充信息)。在日益严峻的考验gydF4y2Ba8700克的gydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba是确定。因为它是不可能的,所有的巯基共同形成交叉连接,这个结果似乎是合理的。此外,置信区间内的理论价值。gydF4y2Ba更高比例的增加水解WPI导致CLD的减少和医生除了BioZate9_1示例。gydF4y2Ba
一般越来越h-WPI比率更期间可溶性肽肿胀的测试。假设所有的塑化剂溶解样品BioZate10_0有7%左右的蛋白质质量损失在肿胀试验样本BioZate5_5损失了21%的原始质量。但无显著差异gydF4y2Ba测量样本hWPI内容之间的0%和10%。也没有显著增加的蛋白质质量损失在BioZate10_0肿胀试验和BioZate9_1测量。这可能表明,在h-WPI低于10%的大部分内容h-WPI肽可以债券WPI蛋白质。gydF4y2Ba
根据样品计算医生BioZate10_0和BioZate9_1约1.4 - -1.5%的蛋白质参与交联导致CLD约gydF4y2Ba摩尔gydF4y2BaggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。在文学CLD有时乘以密度。在这种情况下,CLDgydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba厘米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba如图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。艾哈迈德et al。gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]CLD测量值和空之间的天然橡胶gydF4y2Ba和gydF4y2Ba摩尔gydF4y2Ba厘米gydF4y2Ba−3gydF4y2Ba。通过比较结果可以推断WPI-based电影CLD略低于天然橡胶。然而WPI-based电影热固性属性显示为机械研究显示[早些时候gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。这表明共价相互作用有一个更大的影响力在WPI-based电影比预期的性能。这些共价相互作用主要是必须否定被水导致的肿胀的> 400%比得上天然橡胶聚合物(比较gydF4y2Ba18gydF4y2Ba])。gydF4y2Ba
增加了CLD h-WPI比率至20%减半gydF4y2Ba摩尔gydF4y2BaggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba没有hWPI相比,电影。与一个hWPI CLD减少30%的比例gydF4y2Ba摩尔gydF4y2BaggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。进一步增加hWPI比率没有CLD的显著下降。在这些高hWPI比率只有0.22 - -0.36%的蛋白质参与形成共价交叉连接可以衡量的。根据Sothornvit Krochta [gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba)较弱的蛋白质网络交互使用短链hWPI形成。一般来说,这并不构成共价二硫化物桥梁形成少的事实。硫化物组可以由短链“占领”,不会导致聚合物网络如图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。这可能导致更高的gydF4y2Ba值随着hWPI比率。gydF4y2Ba
3.2。蛋白质溶解度的研究gydF4y2Ba
蛋白质的溶解性研究的结果显示在图gydF4y2Ba4gydF4y2Ba。它清楚地显示了增加蛋白质溶解度与增加比例的h-WPI所有缓冲系统。这是按照Damodaran [gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba)描述蛋白质的溶解度增加电影当蛋白质分解成更小的肽单位。gydF4y2Ba
然而,在图gydF4y2Ba4gydF4y2Ba可以看出,相比其他缓冲系统的蛋白质溶解度的增加不成比例地PP-TH-buffer当配方h-WPI是增加的内容。这个特定的缓冲主要是影响疏水作用。因此这个结果表明,增加的比例h-WPI也喜欢这个特殊的共价相互作用的形成。gydF4y2Ba
溶解度最高的70%可以通过裂开氢键和二硫化物桥梁。氢键发挥重要作用在稳定蛋白质二级结构之间也形成合适的侧链(gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba]。使用尿素缓冲区可以打通这些氢键减少蛋白质的共价交联链。可以更好的可溶性non-cross-linked蛋白质链。二硫化物键可以防止部分演变过程并形成蛋白质分子之间的联系。因此,可以进一步提高溶解度裂开另外二硫化物键。gydF4y2Ba
60 - 75%的使用h-WPI肽分子量小于2 kDa。的意思是乳清蛋白的分子量为41.7 kDa。h-WPI肽与WPI蛋白质相比小得多,大概是一个更高的流动的解决方案。蛋白质的溶解度在PP + U + TH缓冲减少约8%在小h-WPI比率相比纯批发价格指数。在二硫化物键破坏性的缓冲区(PP + TH + D)溶解度增加16%左右。这可能表明,短hWPI肽可以定位并安排更好的解决形式与其他蛋白质二硫化物键形成更大、更不溶性蛋白质聚合。类似的观察也是CLD的测量。与低h-WPI CLD的10%的浓度gydF4y2Ba摩尔gydF4y2BaggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba相比gydF4y2Ba摩尔gydF4y2BaggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba没有h-WPI。因此可以认为一个hWPI比率不到10%提高了二硫化物键交联导致cld更高。gydF4y2Ba
3.3。CLD相关属性与障碍gydF4y2Ba
为了评估是否有相关性CLD,导致technofunctional属性,如屏障属性,有必要比较观察CLD值与渗透率属性已经发表的施密德et al。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。这是可能的和合理的,因为它们使用相同的配方作为研究对象。gydF4y2Ba
表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba显示了氧渗透率(OP)以及水汽传输速率(WVTR)不同h-WPI WPI-based电影内容。OP的膜厚度值标准化100gydF4y2BaμgydF4y2Bam。WVTR膜厚度测量值是有效的。h-WPI率之间没有显著相关性和OP值被观察到。因此,通过改变CLD屏障属性是没有太大的影响值。样品Biozate10_0 BioZate6_4显示OP值约80 - 150厘米gydF4y2Ba3gydF4y2Ba (STP)gydF4y2Ba米gydF4y2Ba−2gydF4y2Ba dgydF4y2Ba−1gydF4y2Ba 酒吧gydF4y2Ba−1gydF4y2Ba。高倾向OP只是BioZate5_5辨认。结果Sothornvit和KrochtagydF4y2Ba29日gydF4y2Ba)也决定收效甚微的h-WPI OP值从而证实。gydF4y2Ba
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WVTR值显示还与改变h-WPI比率无显著相关性。这个结果符合Sothornvit和KrochtagydF4y2Ba32gydF4y2Ba]分析了h-WPI浓度的影响在WVTR值(gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba
通常,乳清蛋白结构和CLD WVTR有影响。然而,这项研究表明,造成最大CLD二硫化物债券似乎是过低的显著改善屏障属性。大概能达到更高的CLD与转谷氨酰胺酶导致障碍的一个重要改进性能的因素五(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。在这项研究中没有观察到CLD和屏障属性之间的相关性。因此可以认为WPI-based电影的屏障性能主要受共价相互作用在使用非酶的治疗。gydF4y2Ba
4所示。结论gydF4y2Ba
交联度的定量计算以及交联密度的测定在不同电影配方肿胀的帮助下执行测试。失踪的溶度参数gydF4y2BaχgydF4y2Ba对CLD从水蒸气吸附等温线计算确定。意味着交互参数确定gydF4y2Ba。gydF4y2Ba
医生与增加h-WPI WPI-based电影内容大大减少从1.42%降至0.22%。没有显示h-WPI CLD WPI-based电影gydF4y2Ba摩尔gydF4y2BaggydF4y2Ba−1gydF4y2Ba这是略低于天然橡胶。溶解度和肿胀试验研究表明,CLD h-WPI比率的6%上升到10%。假设h-WPI越短肽可以形成容易二硫化物债券由于其高流动性的解决方案。因此,WPI蛋白质可能更容易通过h-WPI肽连接。在更高h-WPI内容CLD减少类似于医生。屏障属性对水蒸气和氧气没有重大改变与增加h-WPI内容所观察到的施密德et al。gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。这可能表明,WPI屏障性质也主要是测量cld由于共价相互作用的影响。gydF4y2Ba
总之,二硫键的数量的定量评估肿胀试验(确定各自CLD)在WPI-based电影。溶解度的研究可以确定不同的分子相互作用的电影。一般来说,肿胀的定量结果研究证实蛋白质溶解度的研究的结果。gydF4y2Ba
相互竞争的利益gydF4y2Ba
作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba
确认gydF4y2Ba
这项工作是支持的德国研究基金会(DFG)和慕尼黑工业大学(TUM)框架的开放获取出版计划。作者感谢脱硫和TUM他们的支持。gydF4y2Ba
补充材料gydF4y2Ba
假定WPI成分和体重意味着氨基酸和理论计算gydF4y2Ba米gydF4y2BacgydF4y2Ba在100%交联出版物中使用不同的计算。gydF4y2Ba
引用gydF4y2Ba
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