化学成分在物理过程中的变化及营养成分分析GydF4y2BaMalus Halliana.GydF4y2Bakoehne茶GydF4y2Ba

摘要GydF4y2Ba

建立了同时测定槲皮苷、3-羟基根皮苷、根皮苷物理过程中含量变化的高效液相色谱法GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶。同时，使用蒽酮硫酸比色测定法测定营养组合物，分别测定总糖和还原糖的直接滴定测定，以便为质量控制和茶叶生产提供理论依据。结果表明，槲皮素，3-羟丙嗪和氟氮的回归方程在0.0972-12.15的范围内是线性的 μ.GydF4y2BaG （GydF4y2Ba 8），0.0932〜11.65 μ.GydF4y2BaG （GydF4y2Ba 1），和0.9〜112.5 μ.GydF4y2BaG （GydF4y2Ba 6）分别。平均回收率范围为98.19％至99.35％。通过分光光度检测和Soxhlet提取检测测量粗蛋白和粗脂肪的含量。总糖，还原糖，脂肪和蛋白质的含量分别为6.8g / 100g，8.5mg / 100g，2.399g / 100g和4.362g / 100g，GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶。GydF4y2Ba

1.介绍GydF4y2Ba

Malus Halliana（M. Halliana）GydF4y2BaKoehne,属于蔷薇科,是丰富,广泛分布在江苏、浙江、安徽、山西、四川和云南省在中国,生长在丛林的斜坡或流,通常栽培观赏行业(GydF4y2Ba1GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba中药学GydF4y2Ba记录它的味道是轻盈，苦涩和平坦的，它可以调节月经功能和血液和治疗细胞鼠[GydF4y2Ba2GydF4y2Ba］．在民间医学中，它被作为传统中草药用于治疗创伤、骨折和出血[GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba］．近年来，更多的研究集中在园艺插枝、栽培、育种等方面[GydF4y2Ba4.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba5.GydF4y2Ba］．这GydF4y2BaM. Halliana-GydF4y2Ba衍生健康饮品已被开发出来[GydF4y2Ba6.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

饮用茶不仅可以在人体中添加一些必要的微量元素，而且还有对人体的药理功能和健康影响。现代医学研究表明，它不仅可以防止血栓形成，降低血液粘度，增加高密度脂蛋白，并降低身体的毛细血管渗透性和脆性，而且还具有一定的预防作用对心血管和脑血管疾病和抗衰症的影响[GydF4y2Ba7.GydF4y2Ba］．饮用茶可以让人兴奋，有利尿的影响，导致灭菌，具有抗炎，心脏等效果，增强记忆，并防止糖尿病[GydF4y2Ba8.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba9.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

本集团在早期进行了一系列相关的研究，包括化学成分[GydF4y2Ba3.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba10.GydF4y2Ba那GydF4y2Ba11.GydF4y2Ba，药理活性[GydF4y2Ba12.GydF4y2Ba-GydF4y2Ba15.GydF4y2Ba]和内容确定[GydF4y2Ba15.GydF4y2Ba］．黄酮类化合物是GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba而药理学调查表明它具有抗氧化剂[GydF4y2Ba12.GydF4y2Ba]，肝保护剂[GydF4y2Ba13.GydF4y2Ba]，GydF4y2Baα.GydF4y2Ba-Glucosidase抑制[GydF4y2Ba14.GydF4y2Ba]，酪氨酸酶激活[GydF4y2Ba15.GydF4y2Ba，和抗菌的[GydF4y2Ba16.GydF4y2Ba)活动。GydF4y2Ba

迄今为止,只有GydF4y2BaM. hppehensis.GydF4y2Ba宁清茶是中国三峡地区广泛使用的夏季清凉饮品[GydF4y2Ba17.GydF4y2Ba］．主要成分是phloridzin [GydF4y2Ba18.GydF4y2Ba的制备方法及其作为抗糖尿病、降血脂、抗氧化和抗肿瘤药物的应用GydF4y2BaM. hppehensis.GydF4y2Ba茶提取物（ZL 200710053716.8）。GydF4y2Ba

我们以前的研究发现，Phloridzin也是主要成分GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba树叶 [GydF4y2Ba11.GydF4y2Ba］．虽然自然资源GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba富裕，没有研究质量控制和营养成分的分析GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是在文献中提供的。我们的研究是通过传统的茶处加工技术开发GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶叶，以及槲皮素，3-羟基氯胺和氟氮的含量GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba使用高效液相色谱（HPLC）测量茶。在分离和纯化的情况下GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶叶，我们发现茶中含有的Quercirlin，3-羟丙嗪和氟辛比其他类黄酮，例如Juglanin，Avicularin，Afzelin和5,7-二羟基苯酮。此外，文献综述发现这三种化合物的活动GydF4y2Ba马鲁斯GydF4y2Ba据报道，属。在综合分析中，我们将这三种化合物用作研究对象。相同组成的变化的对比分析GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba还进行了加工前后的茶。同时，主要营养成分GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba研究了茶。进一步研究质量控制标准和营养成分GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶对于为质量控制和茶叶生产提供理论依据至关重要。GydF4y2Ba

2.材料和方法GydF4y2Ba

2.1。材料和试剂GydF4y2Ba

通过我们的实验室制备Quercitrin，3-羟丙苄啶和纯度，纯度大于98％。乙腈（HPLC级）购自Avantor Performance Material，Inc。（美国）。甲醇（HPLC等级）购自天津盾精细化工有限公司水是沃哈哈纯净的水。GydF4y2Ba

葡萄糖标准溶液系列(10~100GydF4y2Baμ.GydF4y2BaG / ml）：使用恒温培养箱（LZJS，南海Masson Technology Industry Co.，Ltd.）在恒温下，在恒温下恒温称重葡萄水（江水天翼华功有限公司）通过恒温（LZJS。）105°C。将计量的体积填充到1000ml至1000ml，然后摇动井，分别从中吸收1,2,4,6,8和10mL。然后将它们转移成六个容量烧瓶（100mL），分别用水稀释至体积，并摇动良好。它们储存在0-4°C冰箱中两周。GydF4y2Ba

2.2。植物GydF4y2Ba

从河南金明区收集风干叶（中国河南市开峰）。其中，第一批样品于2016年3月11日收集，第二批集于2016年3月16日收集，第三批在2016年3月21日收集。该植物被确定为GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba李长勤教授(河南大学，开封，中国)。凭证标本保存于河南大学天然产物研究所(编号20160312)。GydF4y2Ba

2.3。的准备GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶GydF4y2Ba

行进GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba叶子被使用。这GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是通过去酶、揉搓、干燥和相同的过程制成的。专利中描述了特定茶叶的加工过程[GydF4y2Ba19.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

2.4。化学成分分析GydF4y2Ba

2.4.1。标准溶液和测试样品溶液的制备GydF4y2Ba

在486,466和4500的浓度下在甲醇中制备三种槲皮素，3-羟丙替辛和氟苄啶的标准溶液 μ.GydF4y2BaG·ML.GydF4y2Ba^-1GydF4y2Ba并分别储存在4°C。GydF4y2Ba

M. Halliana.GydF4y2Ba将叶子或茶（0.02g，50目）与离心管中的1ml甲醇溶液混合。将固体和液体的混合物以5000 r·min离心GydF4y2Ba^-1GydF4y2Ba超声(50 min, 500 W)提取后5 min。提取液以0.22过滤GydF4y2Baμ.GydF4y2Bam微孔膜。将随后的滤液作为试验样品溶液。GydF4y2Ba

2.4.2。开发HPLCGydF4y2Ba

采用LC-20AT高效液相色谱(日本岛岛)，系统配有除气器、四元梯度低压泵、CTO-20AC柱炉、SPD-M20A紫外检测器、SIL-20AC自动进样器。采用液相色谱数据处理系统进行数据采集和处理。GydF4y2Ba

两种色谱分离步骤都在Agilent TC-C上进行GydF4y2Ba_18.GydF4y2Ba柱（4.6 mm×250 mm，5 μ.GydF4y2Bam)柱温为25℃。流动相流速为0.8 mL·minGydF4y2Ba^-1GydF4y2Ba。UV检测波长设定为270nm。所有注射体积为10 μ.GydF4y2Bal流动相为乙腈-1%磷酸(20:80,v/v);标准溶液和样品提取液的HPLC图谱如图所示GydF4y2Ba1GydF4y2Ba。GydF4y2Ba

2.5。营养成分分析GydF4y2Ba

2.5.1。粗蛋白质含量的测定GydF4y2Ba

0.5010 g(40目)GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶粉被精确称重。根据如中国国家标准（GB 5009.5-2016）中所述的方法测定粗蛋白的提取方法，并使用紫外分光光度法测量蛋白质含量。同时，用相同的方法进行空白实验来计算总氮含量。蛋白质含量如下：蛋白质含量=总氮×6.25。GydF4y2Ba

2.5.2。粗脂肪含量的测定GydF4y2Ba

5.001克GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶粉被精确称重。如前所述，通过SOXHLET提取方法测量粗脂肪（GB 5009.6-2016）。脂肪含量配方如下：脂肪含量=GydF4y2Ba ,在那里GydF4y2Ba是指吸收瓶和粗脂肪的质量（g）;GydF4y2Ba表示吸收瓶的质量(g);GydF4y2Ba是样品的质量（g）。GydF4y2Ba

2.5.3。还原糖的含量测定GydF4y2Ba

M. Halliana.GydF4y2Ba茶粉准确称量为4.0036 g。还原糖提取方法参照国家标准(GB 5009.7-2016)的方法进行测定，采用直接滴定法进行校准。还原糖配方如下:还原糖含量GydF4y2Ba 。GydF4y2Ba

是质量的还原糖(毫克);GydF4y2Ba在校准（m1）中是样品溶液的消耗量;GydF4y2Ba是样品的质量（g）。GydF4y2Ba

2.5.4。总可溶性糖的含量测定GydF4y2Ba

0.1克GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶粉被精确称重并提取。根据先前描述的方法测定总可溶性糖含量[GydF4y2Ba20.GydF4y2Ba］．同时，用于确定总可溶性糖的方法与用于确定还原糖含量的方法相同。可溶性糖配方如下：总糖的质量百分比=GydF4y2Ba (GydF4y2Ba是标准曲线的糖浓度（GydF4y2Baμ.GydF4y2Bag / mL);GydF4y2Ba稀释比例;GydF4y2Ba为样品总体积(mL);GydF4y2Ba是样品质量（g））。GydF4y2Ba

3.结果与讨论GydF4y2Ba

3．1．化学成分分析GydF4y2Ba

3.1.1。线性GydF4y2Ba

原液标准溶液(0.2,1,5,10,15,20和25GydF4y2Baμ.GydF4y2Bal）精确地注入到用于构建校准曲线的色谱仪器，并且注射槲皮蛋白的相应样品尺寸为0.0972,0.486,2.43,4.86,7.29,9.72和12.15 μ.GydF4y2Ba分别为g;注射的3-羟基根苷对应的进样量分别为0.0932、0.466、2.33、4.66、6.99、9.32、11.65GydF4y2Baμ.GydF4y2Ba分别为g;注射根皮苷对应的进样量分别为0.9、4.5、22.5、45.00、67.5、90.00、112.5GydF4y2Baμ.GydF4y2Ba分别g。通过绘制峰面积与进样质量(GydF4y2Baμ.GydF4y2Bag）每种化合物。结果呈现在表中GydF4y2Ba1GydF4y2Ba。这GydF4y2Ba数值范围为0.9991 ~ 0.9998，线性良好。GydF4y2Ba

3.1.2。精确GydF4y2Ba

10. μ.GydF4y2Ba将每种标准原液的L精确注射到色谱仪器中。在一天内6个重复分析原液，以确定开发的分析的精密度。3种化合物峰面积的相对标准偏差(rsd)分别为0.35%、0.35%和0.79%。结果表明，该方法可用于根皮苷、3-羟基根皮苷和槲皮苷的定量分析。GydF4y2Ba

3.1.3。稳定GydF4y2Ba

在最佳提取条件下制备样品溶液，并在室温下置于10个 μ.GydF4y2Ba将L的样品溶液注入到0,3,6,9,12和24小时的色谱仪器中。三种化合物的峰面积的RSD分别为0.25％，0.45％和0.41％。结果表明，样品溶液在室温下在24小时内基本稳定。GydF4y2Ba

3.1.4。重复性GydF4y2Ba

在最佳提取条件下处理六种测试样品溶液，10 μ.GydF4y2Ba然后将每种溶液的L注射到色谱仪器中以分析。三种化合物的峰值区域的RSD分别为0.33％，2.38％和1.24％，表明分析方法具有可接受的可重复性水平。GydF4y2Ba

3.1.5。恢复GydF4y2Ba

九批叶子和鲜花样品GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba编写并分为三组。然后将三种不同量的三种标准物质加入到叶子和花样中。根据最佳提取条件制备尖刺样品。分析物的所有计算回收率范围为98.19至99.35％，RSD分别为1.6％，1.4％和1.9％。结果表明，该方法是合理可行的。GydF4y2Ba

3.1.6。样品分析GydF4y2Ba

在表中提出了氟苄啶，槲皮素和3-羟丙替三苯胺的质量级分GydF4y2Ba2GydF4y2Ba ， 分别。GydF4y2Ba

3．2.营养成分分析GydF4y2Ba

3.2.1之上。粗蛋白质含量的测定GydF4y2Ba

根据上述实验方法，拉伸粗蛋白的标准曲线。我们提取了提取物GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba并测定了其粗蛋白质含量。进行6个重复的田间试验，数据以平均值表示。GydF4y2Ba

的吸光度GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba将茶叶代入标准曲线，粗蛋白质含量为0.0136GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是4.362克/ 100克。蛋白在体内发挥着重要作用，为蛋白质代谢提供了功率和能量，并保持了各种组织的正常运行。它还可以增强抗体抵抗，缺氧和疲劳性，具有高的营养价值，这是老体的重要营养蛋白[GydF4y2Ba21.GydF4y2Ba］．粗蛋白质含量GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是4.362克/ 100克，解释说它具有更多的氨基酸，可促进茶叶中的芳香。茶汤中所述氨基酸胶体，这在保持饮料和胶体溶液的稳定性方面发挥了重要作用。它还具有咖啡因引起的神经系统兴奋的抵消功能。所以GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶可以增强耐抗体，缺氧和疲劳性，营养价值高。GydF4y2Ba

3.2.2。粗脂肪含量的测定GydF4y2Ba

根据该方法和配方，提取的粗脂肪GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是2.399克/ 100克。茶叶中的脂质组合物在茶香的形成中发挥了积极作用，这可以加速脂溶性维生素的吸收并预防维生素缺乏症。茶叶中的脂肪含量较低，通过医学研究确认，但它具有改善人类免疫力，预防癌症等功能。因此，具有肝病，高血压，高脂血症和胰腺功能的特殊人口，除了普通人之外，还可以轻松饮用这一点。GydF4y2Ba

3．2．3．还原糖含量的测定GydF4y2Ba

富含酒石酸酯溶液消耗GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是9.98。根据公式，还原糖GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是8.5毫克/ 100克。GydF4y2Ba

3.2.4。可溶性总糖含量的测定GydF4y2Ba

根据上述方法，用梯度稀释液将标准葡萄糖稀释成六个浓度;然后将该系列葡萄糖标准溶液浓度作为横坐标和吸光度作为纵坐标，以制备标准曲线并计算回归方程;等式是GydF4y2Ba 。GydF4y2Ba

将总可溶性糖的吸光度带入方程，绘制样品总糖含量的标准曲线，并对所有田间试验结果进行6次重复，数据均表示为平均值。根据所述方法和配方，提取的总可溶性糖GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是6.8克/ 100克。GydF4y2Ba

总糖和还原糖的含量作为评估植物营养的标准，是食品味和营养的重要组成部分。茶多糖具有抗糖尿病，低血脂，抗氧化和免疫调节功能[GydF4y2Ba22.GydF4y2Ba］．从总可溶性糖和还原糖的结果来看，GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶可以在预防和治疗这些疾病中作为医疗保健食品开发。GydF4y2Ba

4。结论GydF4y2Ba

由糖和非糖组分组成的糖苷的含量高于其他药物，如根，果皮，花和水果。糖苷作为活性成分在许多中药中的各种酶共存。因此，它们可以被那些酶水解。因此，含有糖苷的中药药物可以通过油炸，烹饪和其他方法抑制酶活性并保护糖苷，可以有效地控制糖苷酶溶液[GydF4y2Ba23.GydF4y2Ba］．GydF4y2Ba

数字GydF4y2Ba2GydF4y2Ba结果表明，三种黄酮类化合物的含量均为全株GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶的含量高于原始叶子，其氯辛含量最高。可能的原因是降低糖苷消化能力和糖苷成分含量GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶经翻炒后增加，或有部分成分通过溶解和分解而转变为新的成分。不同的GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba不同来源茶叶中3-羟基根皮苷和根皮苷含量呈现先降低后升高的趋势，槲皮苷含量呈现先升高后降低的趋势。与我们之前的相关研究相比[GydF4y2Ba15.GydF4y2Ba[]，发现不同采收期三种黄酮类化合物的含量存在显著差异。GydF4y2Ba

其中根皮苷为主要成分GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba[GydF4y2Ba11.GydF4y2Ba]，具有抗体，改善内存，抗氧化剂，抗癌，雌激素和抗生素活动[GydF4y2Ba24.GydF4y2Ba-GydF4y2Ba26.GydF4y2Ba，是葡萄糖转运的竞争性抑制剂[GydF4y2Ba27.GydF4y2Ba］．根皮苷具有低毒的特点，在食品、新药、天然保健食品等方面有广泛的应用。GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba是我国独特的植物之一，在各地区栽培，但主要作为观赏植物。由于其资源丰富，分布广泛，易于育种、扦插和嫁接，为规模化生产提供了有利条件。加工茶GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba类似于绿茶生产过程，可以在夏季和秋季收获。我们的研究开发了GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶作为医疗保健饮用，并建立了同时测定槲皮素，3-羟基丙烯苷和氟氮的HPLC方法;同时，对相同的组成的分析变化GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba加工前后的茶是对比的。GydF4y2Ba

通过分析主要营养素GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶叶，我们发现营养素的多样性，含有总糖，还原糖，粗蛋白，粗脂肪等营养素，是茶营养特性。因此，营养物质的营养物质GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶是相当高的，一些营养素非常丰富，这有助于全面了解饮茶的益处。这项研究表明GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶有食物和营养保健价值的一定发展。我们认为，在综合分析主要营养成分和疗效组分后，它将变得非常流行GydF4y2BaM. Halliana.GydF4y2Ba茶。GydF4y2Ba

利益冲突GydF4y2Ba

作者声明没有利益冲突。GydF4y2Ba

作者的贡献GydF4y2Ba

尹振华和张勇对这一工作做出了同样的贡献。GydF4y2Ba

致谢GydF4y2Ba

这项工作得到了河南省大学科技创新团队（16IRTSTHN019），河南省科技机科技机构重点项目（152102310171; 17B360005），郑州市科技机构重点项目（20150341）和项目开峰市科技机局（1603111）。GydF4y2Ba

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