的反应黑曲霉接种番茄上暴露于汽相芥末精油的短期或长期和感官评价治疗西红柿

文摘

芥末精油(EO)的抑制作用在汽相对抗黑曲霉是评估在体外和在活的有机体内(西红柿)。模具反应西红柿短或长时间暴露于选定的浓度芥末EO也被评估。此外,感官评价还表现在对待西红柿并与参与的。最低抑制浓度(MIC)为研究EO由反向培养皿法决定。麦克风的在体外和在活的有机体内芥末光电测试为3.08μ信用证 。在体外和在活的有机体内结果表明蒸汽芥末光电对抗的有效性答:尼日尔。研究EO包含高度挥发性有机化合物有很强的抑制效应,即使应用在短时间内,因此可以被认为是一个好的选择传统合成抗菌素不损害选择感官属性。

1。介绍

番茄(茄属植物lycopersicuml .)是世界范围内最种植水果之一;据粮食及农业组织(粮农组织)的联合国,从2012年到2013年近1.62亿吨的西红柿生产在世界范围内,中国是最大的生产国(在此期间超过5000万吨)。代表墨西哥生产3.433567万亿吨产量355254公斤/公顷,把它放在前十这种水果的主要生产国和最大的出口国1,2]。然而,西红柿很容易受到各种疾病引起的生物制剂,如真菌、细菌和病毒,导致巨大的生产和经济损失,这在某些情况下可达一半的生产(3]。黑曲霉是高致病性真菌的植物,因为它能够通过伤口或征服自然植物组织的空缺,从而恶化相应产生。答:尼日尔被报道为感染许多易腐产品的主要原因,包括番茄,在收获的季节,存储和运输(4,5]。Ruiz-Martinez et al。2)开发了各种方法来预防或延缓番茄果实的恶化,包括使用低温,食用涂料、控制大气,和化学治疗。然而,如今消费者喜欢的产品少或没有合成添加剂;因此,寻找新的保护方案是一个广泛的领域感兴趣的食品工业(6- - - - - -9]。使用精油(EOs)从植物天然抗菌药物增加了近年来,由于多个报告证明这些EOs有抗真菌、抗菌和/或杀虫活动(10- - - - - -14]。特别是,芥末精油已经彻底研究以相对较低的浓度(鉴于其有效的抗菌效果15- - - - - -20.]。芥末EO或其主要组件,异硫氰酸烯丙酯,已经纳入食用电影或封装在不同的矩阵与合理的抗菌和抗真菌的影响15,19];然而,这些相同的作者还提到,他们的应用程序到食品仍然是有限的由于他们的高波动性和强烈的气味15,16,19,20.]。不同的策略已经被测试,以减少对食物的气味影响使用芥末EO时,如控释通过封装(19]。另一种方法可能是食物的接触芥末EO在汽相时间选择16,20.]。因此,在这项研究的抗真菌作用的EO芥末(芸苔属植物黑质)在汽相评估;此外,接种番茄被用作一个生物模型来评估研究光电的抑制作用,当暴露在短期或长期的影响以及选择治疗方法在治疗西红柿的感官属性与参与的。

2。材料和方法

2.1。精油

从Grupo Tecnaal芥末EO购买(Aromaticos Quimicos Potosinos, SA de简历,墨西哥);石油一直amber-flasks冷藏(4°C)条件下,直到使用。分析了芥末EO如前所述,Aguilar-Gonzalez et al。20.通过气相色谱与质谱(gc - ms)。其主要化合物的识别与数据库是由比较的国家标准与技术研究院。

2.2。抗真菌化验

答:尼日尔(写明ATCC 1015)是获得食物的文化收藏在美洲大学de las普埃布拉微生物实验室。消毒potato-dextrose琼脂(PDA)偏(美国正欲和公司Bioxon)是按照制造商的指示准备保持研究模具文化10 d 25°C(实验室,Inc .,梅尔罗斯公园,美国)。孢子被清洗的表面偏收获10毫升无菌水和调整停赛10⁶使用血细胞计数器孢子/毫升(21]。

2.3。在体外测试:最低抑制浓度测定

芥末EO最低抑制浓度(MIC)是由反向培养皿法据Yun et al。22)和Aguilar-Gonzalez et al。20.),浇注0.0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,0.6,0.7,0.8,0.9,1.0μ使用0.1 - -1.0 L的精油(μL micro-Eppendorf吸管)消毒绘画纸®1号滤纸(6.0毫米)放置在盘盖的中心。PDA板块(60×15毫米)在中心接种5μL孢子悬液,用保鲜膜®,和孵化 °C。霉菌菌落直径测量每日10天用游标卡尺。每一个实验进行了一式三份。

2.4。在活的有机体内测试:确定汽相抗真菌活性的EO接种番茄

成熟的西红柿茄属植物lycopersicuml . Saladette品种)在当地市场购买(乔鲁拉,普埃布拉,墨西哥)。水果是同一天购买,防止恶化在存储或操作。他们消毒10毫升/ L NaClO 10分钟,然后用无菌水清洗解决方案,允许在室温下干燥10分钟。

每个番茄接种用5毫升注射器的针头打开1毫米深的伤口在阀杆和放置4分5整除μL的答:尼日尔孢子悬在每个伤口。然后,每个番茄都放置在一个1.85升密封透明的塑料容器。一块40毫米²的绘画纸1号滤纸贴上面的容器内壁的麦克风的EO倒(测试浓度调整到1.85升的容器的体积)。接种番茄,没有EO容器,担任控制。容器被关闭,把颠倒,与封口膜密封,防止蒸汽泄漏。接种番茄是孵化10 d在室温和受光,每天监测和霉菌生长。每个实验进行了5次。

2.5。抗真菌活性的芥末精油在汽相接种番茄短时间的治疗

因为芥末EO先前报道非常有效预防霉菌增长(8,23- - - - - -26),选择额外的实验:接种番茄准备之前和前面所述确定麦克风被用来评估的有效性芥末EO在汽相申请时间很短暂。在第一个实验中,麦克风,麦克风(2米),两倍和三倍麦克风(3米)的芥末精油倒在滤纸上,放置在塑料容器,用保鲜膜封起来的,和暴露1,2,4,或者24小时;这些疗法后,番茄没有EO被放置在清洁和密封的容器。在第二个实验中,接种番茄暴露在麦克风,麦克风(3/4)((3/4)M),一半的麦克风((1/2)M)和(1/4)麦克风((1/4)M)的芥末EO 30分钟,45分钟,1 h,或24 h正如上面提到的,然后是番茄也没有EO放置在清洁和密封的容器。

在两个实验中,孵化治疗分配10 d后25°C,监控模具每天增长。给伤口注射模具的数量增长记录每个测试实验条件;这是执行5次。

2.6。感官评价

西红柿暴露于芥末EO持续很短的时间受到感官评价;这些西红柿是准备根据上述方法,但是没有真菌接种。相应的治疗后,每个番茄切成2厘米,以确保适当的数量的皮和果肉为感官分析在每一块。评估处理30分钟,(3/4)M 24 h,并为24小时(1/2)M。每处理番茄是感官评估正确的治疗一段时间后(0)和竣工后两天敞口EO为了比较研究效果评估的时间属性。25未经训练的法官评价气味、味道和总体可接受性。九分享乐尺度是用来评估研究样本中,1分代表属性最不喜欢和9分表示最喜欢的属性。分数在6被认为是可以接受的;此外,法官的评论关于评估产品被鼓励。

2.7。统计分析

光电测试评估的影响在这个工作是由方差分析和图基测试( )使用Minitab 16个软件(一款统计软件,Inc .)州立大学,宾夕法尼亚州,美国)。

3所示。结果与讨论

化学分析结果类似之前报道了芥末EO Aguilar-Gonzalez et al。20.]。确定化合物的研究芥末EO表明,它的主要成分是异硫氰酸烯丙酯(AITC)出现在98.4%的比例。这些结果与先前的报道也比较Suhr和尼尔森(25和林等。27]。

3.1。的决心在体外麦克风的芥末EO

表1礼物答:尼日尔获得的平均菌落直径为汽相芥末EO在麦克风测试。它可以观察到的最低体积(0.1进行测试μL)足以抑制真菌生长,所以EO的浓度,导致总没有霉菌增长10 d后孵化和定义为麦克风是3.08μL芥末EO / ,类似报道结果Aguilar-Gonzalez et al。20.),芥末EO抑制葡萄孢菌。图里奥et al。28]报道的78 - 156μ信用证百里香EO, 5000 - 10000μ信用证茴香EO, 156 - 312μ信用证柠檬香油的中等收入国家答:尼日尔当应用通过蒸汽接触;在我们的例子中(3.08获得的麦克风μ信用证)是低得多。

另一方面,吴et al。26报道一个在体外电子商务_95年(有效的浓度,抑制孢子95%的人口)的1.43 g / L AITC(研究的主要化合物芥末EO和主要负责其抑制作用)在汽相对抗青霉菌expansum和0.69 g / Lb .灰质7 d的连续流治疗后,稍低浓度相比,获得的在我们的例子中,可能由于受控大气测试他们的高灵敏度和/或模具进行了研究。

3.2。汽相抗真菌活性测定的EO接种番茄

接种番茄没有暴露在汽相芥末EO提出生长在每一个伤口接种前10 d。然而,当测试麦克风(3.08μ信用证芥末EO),没有接种过的水果/伤口答:尼日尔增长。这些发现表明,在我们的案例中在体外结果证实了在在活的有机体内测试。EOs的作用机制仍不清楚,因为他们是复杂的混合物的成分,有几个目标微生物;因此,很难预测特定EO特定微生物的易感性。然而,一些研究表明,挥发性化合物妥协时,细胞代谢穿透细胞;其他研究提出模具的细胞膜的完整性被破坏导致释放细胞内容(29日- - - - - -31日]。Inouye et al。32)报道,EOs含有醇、酮、酯、氧化物和碳氢化合物主要成分表现出更强的抑制活性,当应用于汽相相比,他们的应用程序在液相对几种微生物。

3.3。在汽相抗真菌活性的芥末EO接种番茄短时间的治疗

表2礼物的伤口(接种答:尼日尔)番茄显示霉菌增长10 d后孵化暴露于芥末EO蒸汽,揭示10 d后孵化,抑制的一种有效的治疗方法答:尼日尔增长接种番茄在于揭露他们麦克风(3.08成立于这项工作μ芥末EO / L30分钟)。也有效的其他治疗方法包括暴露的水果(3/4)M (2.31μ信用证(1.54)或(1/2)米μ信用证为24小时)。另一方面,答:尼日尔增长在第四天开始孵化的西红柿接触(1/4)M (0.77μ信用证);对于其他卷测试,模具增长开始直到孵化6天,而对于卷高于麦克风(2米和3米)模具没有增长,如预期。此外,“控制”接种番茄呈现增长,预期。尽管在这个实验中答:尼日尔长在大多数接种番茄,上有一个延迟它的增长所产生的接触芥末EO蒸汽而抑制总也观察到在选定的情况下,根据芥末EO的体积和时间接触其蒸气所产生的挥发性化合物。玛丽et al。8)进行了类似的研究以评估AITC蒸汽p . expansum接种梨;他们的研究结果表明,最好的治疗方法是通过让梨24 h 5 g / L AITC-enriched大气(在连续流,即。、气氛控制);在我们的例子中,低浓度的芥末EO同期所需的时间;这可能是由于每个水果的pH值的差异和/或不同的模具敏感性。另一方面,吴et al。26]在汽相测试AITC苹果接种p . expansum和b .灰质,报告一个电子商务_95年1.43 g / Lp . expansum和0.69 g / Lb .灰质以及为他们在体外结果;这些浓度低于那些在我们的情况下获得的。然而,他们的长度在活的有机体内治疗4 d(在连续流),这可能导致更少数量的AITC需要确保一个成功的抑制作用。根据尹等。22),AITC是一种小分子和更多的挥发性比其他化合物存在于几个EOs,香芹酚、肉桂醛等;因此,这可能是原因之一的芥末EOs的有效性。吴et al。19包含AITC)报道,微胶囊能有效地调节释放这种化合物,降低其强大/刺激性气味时,仍然保持其抗菌作用应用于绿色西红柿;这些作者的报道,存储时间microcapsule-AITC番茄是长期治疗,而感官质量的西红柿比控制番茄(参与)。

3.4。感官评价

表3礼物感觉结果为汽相芥末EO处理番茄与麦克风的EO 30分钟。统计分析表明没有明显差异( )评估样本之间的属性;然而,气味差异当比较样本检测出不同的日子。小组成员不了解测试汽相芥末EO治疗;只有三个小组成员发现“蒜”风味,而两个报道的“辣”味M30西红柿在天零,但没人任何类似的评论报道的第二天评价的西红柿。

表3也带来了感官结果为汽相芥末EO处理番茄(3/4)麦克风和麦克风24 h (1/2)。统计分析显示,没有明显差异( )在评价属性比较样本同一天;然而,有不同的味道和总体可接受性,当比较不同样本的日子。在这种情况下,只有一个专家报道第二天的“洋葱”风味评价番茄(3/4)M 24 h。

选中的评论关于西红柿感官评估包括以下:“有光大蒜味”;“番茄”的纹理样本的特征;“天然番茄味道”;“我可以检测一个辣的味道”;“不好的气味,但优秀的味道”;“我真的很喜欢它。“根据戈尼et al。33]汽相使用EOs的优点之一是,他们分散的组件通过大气中往往不会大大影响食品的感官性质处理这些EOs;然而,感官污染似乎取决于EO蒸汽浓度、曝光时间和天经过治疗后明显Tzortzakis[的工作34],“樱桃番茄的甜蜜是减少暴露在桉树和肉桂EO蒸汽8 h在20°C和3 - 5 d后13°C。黄等。35评估AITC的作用,过氧化氢,醋酸,和乳酸菠菜叶子的感官品质;在这种情况下,雾化治疗并不影响感官质量的存储的菠菜10 d后,他们报告说,检测到的气味AITC褪色在存储和没有可检测后第五天。重要的是要建立一个芥末味道(或相似的)可以考虑兼容番茄以及其他的类似于草本天然香料。此外,很可能使用了EO结合其他EOs可能导致协同抑制作用有关的食物通常不辣或草药味道,浓度不影响他们的香味或香味36]。尽管关于芥末EO结果可能暗示这精油是非常有效的;活性物质添加到食品的浓度可以妥协他们有益于身心健康以及感官属性。因此,进一步的研究在实际应用之前可能是必要的食品行业。

4所示。结论

研究了芥末EO在汽相是有效的答:尼日尔,模具广泛不利于水果和蔬菜。研究主要的抑制性活动表现出的EO可以归因于其主要确定化合物,异硫氰酸烯丙酯,防止的发展答:尼日尔感染的大多数测试进行接种番茄,即使申请时间很短暂。因此,它可以被看作是一个替代传统抗生素合成化学品使用。芥末EO可以用来抑制霉菌生长而不影响选择感官属性。还需要进一步的研究来研究这些化合物的剩余效应并建立如果他们可以安全使用抗真菌药物在其他食品。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢国家科学技术委员会(CONACyT)墨西哥普埃布拉和美洲大学de las (UDLAP)他们对这个项目的金融支持。a . e . Aguilar-Gonzalez欣然承认从CONACyT和UDLAP支持她的博士学位研究。

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