文摘

这项研究的目的是评估血液、生化和血清学调查结果在健康犬类管理后的献血者CaniLeish®疫苗。27 client-owned狗被包括在研究和安排根据接种阶段分为3组。全血细胞计数(CBC)和血涂片检查,血清生化概要(SBP)、血清蛋白电泳(SPE)和血清学测试l . infantum在不同的时间进行。此外,在一群狗IgA, IgM,免疫球蛋白被量化。没有发现统计学意义CBC和SBP。在10.7%的情况下发生轻微hyperproteinemia。在SPE绝对值β1-globulins(组2和组2 - 3)β2-globulins(组3)被发现修改( )。免疫球蛋白g值统计不同( 第三次免疫后)6 - 8个月(组2)和IgM和免疫球蛋白g值统计不同的2个月后(组3)。IFAT积极样本20.8%(组1),15.0%(组2),52.8%(组3)。Leish速度 ™测试总是负面的。修改发现可能是由于免疫或炎症反应的发展由于疫苗。管理CaniLeish疫苗犬献血者可能是一个安全的实践和不影响他们的健康状况。

1。介绍

犬利什曼病是由一个细胞内的原生动物婴儿利什曼虫通过白蛉传播的属Phlebotomus。从感染到临床疾病进展发生如果犬细胞介导免疫反应不足和巨噬细胞内寄生虫数量的增加在许多器官和组织(1]。

犬利什曼病的预防需要包括一个综合的方法措施对狗和关注环境(2- - - - - -4]。一种犬疫苗,调节细胞介导免疫反应对原生动物自2012年以来一直在意大利(CaniLeish、Virbac、法国)。它减少了开发的风险,与寄生虫后,从积极感染症状的疾病5- - - - - -7]。此外,它可以帮助那些被感染的狗尽管疫苗接种,根据最近的一项研究表明使用动物接种诊断,因为疾病严重程度似乎通常与高皮肤寄生虫加载和他们的传染性8]。

因此,利什曼病的控制尤为重要,犬献血者因为传染性病原体通过输血传播的风险从献血者血液制品,运营商的感染,是证明9- - - - - -11]。总的来说,原生动物疾病潜伏期长,在受感染动物亚临床的持久性,纯种马[中存活的可能性10,11]。

意大利最近修订的指导方针对兽医输血医学建立了由卫生部(12)表示,献血者狗健康的动物和应该接受完整的临床检查和实验室测试包括hematobiochemical概要和血清学试验,使用IFAT或PCR婴儿利什曼虫,犬埃立克体属,红孢子虫属phagocytophilum,立克次氏体rickettsii,和巴贝西虫犬属(13]。

为了增加利什曼病的预防献血者,利什曼病疫苗可以使用。作者的知识没有数据已经发表的评价CaniLeish管理后血液和生化研究。因此,本研究的目的是评估血液、生化、和血清学调查结果在一群健康的狗参加自愿献血者项目输血兽医中心,比萨大学接收与CaniLeish免疫的全覆盖。

2。材料和方法

2.1。选择标准

研究2013年2月到2014年7月发生在该地区北部的托斯卡纳,意大利。27 client-owned狗参与自愿献血者比萨大学的项目包括(书面同意之前收集到的所有业主)。下面的选择标准是用来包括献血者:狗狗的红细胞抗原(DEA) 1负,没有任何疾病的临床症状或体征,全血细胞计数(CBC)的值(ProCyte Dx®、Idexx、意大利)和血涂片检查,血清生化概要(SBP)(总蛋白、白蛋白、尿素、碱性磷酸酶和丙氨酸转氨酶)(Liasys®, Assel,意大利),和血清蛋白电泳(SPE)琼脂糖凝胶(相当®、Interlab、意大利)的参考范围内的兽医临床病理学大学实验室:消极的血清学婴儿利什曼虫使用免疫荧光抗体试验(IFAT) (14)和速度Leish ™测试,负面血清学犬埃立克体属和红孢子虫属phagocytophilum使用IFAT [15]。任何血清学积极性滴定度从1:40是一个排斥导致从献血者程序。此外,所有的狗都收到了常规保护皮肤,两驱和/或antifeeding药物局部应用。

2.2。疫苗管理

冻干CaniLeish疫苗(Virbac、法国)存储+ 4 / + 10°C是重组的溶剂(大约1毫升)和威瑟斯地区进行皮下注射,后跟一个温柔的按摩。狗为了监控30分钟观察发病可能的过敏反应。业主被建议向作者报告任何可疑的反应或可能出现的负面影响,在这种情况下他们会进行了控制。疫苗是根据制造商的说明的协议表示:3接种的第一个周期,每个人每3周,和年度助推器进一步管理。

2.3。研究设计

27犬献血者(17雌性,10男性;14个拳击手,8混合品种,3金毛,1魏玛猎狗,1边境牧羊犬;2 - 7岁)被纳入研究。狗被分成三个组根据接种阶段。组1包括6狗经历了第一和第二年度的支持者,因为他们已经完成了第一个循环免疫的兽医。组2包括12个狗,它接受了第一个周期的免疫和第一年度助推器。组3包括9狗,这只接受免疫接种的第一个周期。《纽约时报》( 在天的控制 (第一次免疫), (第二次免疫), (第三次免疫), (第三次免疫后两个月), (第三次免疫后6 - 8个月), (首次年度助推器), (第二届助推器)。约10毫升的血退出颈静脉、头静脉进行实验室分析。组1只血清学检测(IFAT)l . infantum和速度Leish )进行 , , , 。组2,CBC血涂片检查,血清生化概要(总蛋白、白蛋白、尿素、碱性磷酸酶和丙氨酸转氨酶)、血清电泳,IFATl . infantum和速度Leish 提供在 , , , , 。在3组,相同的组2进行实验室检测 , , , 。组2和组3一起评估组2 - 3只要有可能,做个比较。此外,子群的狗(10/12组2和组3)的7/9 IgA(免疫球蛋白),IgM,和免疫球蛋白分数量化,分别 和 使用由Tvarijonaviciute[描述的方法16]。简单地说,商业套件(奥林巴斯欧洲GmbH)上运行自动分析仪(奥林巴斯AU600,奥林巴斯欧洲GmbH,汉堡,德国)根据制造商的指示。

2.4。统计数据

数据分布是通过D 'Agostino-Pearson评估测试。克鲁斯卡尔-沃利斯检验执行CBC, SBP和SPE数据,而对于免疫球蛋白Wilcoxon测试提供了。对所有的测试来说,意义是设置为 。使用商业软件进行统计分析(MedCalc®软件v.14.8.1.0 Mariakerke,比利时)。

3所示。结果

3.1。Hematobiochemical分析

没有统计学意义来自CBC和SBP的数据被发现(数据未显示)。然而,轻微hyperproteinemia高达8.4 g / dL(参考范围5.8 - -7.8 g / dL)在10.7%的情况下发生。SPE的结果如表所示1使用中值绝对值和95%置信区间。我们的数据显示统计学意义( )β1-globulins组2和组3和β2-globulins组3。表2和3报告的结果量化IgA, IgM,分别和免疫球蛋白组2和3。免疫球蛋白g值统计不同( ) 组2,IgM和免疫球蛋白g值统计不同( ) 组3。

表1
主要血清蛋白电泳分数报告组2和3的绝对值。
表2
免疫球蛋白浓度在2组(10只狗)。
表3
狗免疫球蛋白浓度在3组(7)。
3.2。血清学测试

IFAT报道在表的结果4(和数字1,2,3)。在组1,20.8%的犬类样本正滴定度较低(1:80),在第2组中,15.0%的样本正以相当低的滴定度(主要是1:80年,一条狗,1:320),而且,在3组,52.8%的样本是积极的,而低和高滴定度(主要是1:80和1:160年,一条狗,1:320)。在细节,组2两只狗 和三只狗 (在最初的免疫)显示变量滴定度到1:320。在以下监控,只有一条狗是不断积极的观察。在3组的大部分狗都显示出积极的滴定度IFAT后初始免疫( ),这一趋势的观察其他两个集合点。所有速度Leish 测试-在整个研究期间。

表4
IFATl . infantum三组的狗。

图1
IFAT积极性(%),组1。

图2
IFAT积极性(%)、组2。

图3
IFAT积极性(%)、组3。

4所示。讨论

在目前研究狗的血清学地位CaniLeish管理监控后第二届助推器。没有出版物,这家评估长期IFAT滴定度修改在接种疫苗的狗。总的来说,积极性不高和趋势是各种各样的狗。在组1记录的患病率是20.8%,15.0%在2组,3组52.8%。许多以前的研究报告增加IFAT疫苗接种后滴定度。Sagols等人证明了狗接种2周的血清转化到4个月后第三个开枪的滴定度逐渐减少以下监控(17]。莫雷诺等人表示增加IFAT滴定度在所有20周接种狗8 - 12(最大滴定度1:500),在第一次注射后,一条狗的滴定度仍有1:200在30周6]。所有的狗成为负面IFAT(滴定度< 1:200)在42周。此外,在另一项研究Sagols等人测试31接种狗3 - 4周后从第一年度助推器证明增加IFAT滴定度(18]。最近,Sagols等人调查了后续的体液免疫反应在第一年度辅助记录的进化IFAT滴定度类似于瞬态概要文件获得主要的疫苗接种后(19]。然而,IFAT结果进行解释时应特别谨慎在接种疫苗的狗,因为它们从非特异性获得测试来检测所有免疫球蛋白抗体整个寄生虫,由于接触寄生虫和由于免疫反应的发展。先前的研究显示所有速度Leish Sagols等人 分析仍然是负的,所以由IFAT抗体检测技术并没有被这个测试(检测试纸anti-kinesin抗体测试)(17- - - - - -19]。因此,Sagols等人证明了这种快速测试可靠检测抗体由于接触寄生虫。另一方面,Solano-Gallego等人指出,快速血清学测试的灵敏度用于狗筛选前接种CaniLeish相当低(20.]。因此,很可能有些狗会了利什曼虫来华的接种疫苗的时候,这将是一个复杂的因素评估疫苗功效。此外,欧洲食品安全局AHAW面板显示在接种疫苗抗体引起狗不能歧视与当前血清学方法(21]。直到接种疫苗的出现在欧洲,标准的指导方针建议IFAT至少4次实验室的滴定度截止电平是疾病的象征,水平阈值和4次阈值提出了一个怀疑的疾病22]。如今,文献认为最有用的诊断方法进行调查感染生病的感染和临床健康犬包括特定血清的检测反利什曼虫抗体定量血清学技术和示范的寄生虫DNA组织运用特定的分子技术(1,4,21,22]。

作者的知识,没有以前的数据跟踪和监控的狗接种疫苗通过hematobiochemical和SPE分析发表。我们的研究结果为SPE显示一些球蛋白分数的增加(β球蛋白),可以归因于疫苗引发的免疫反应。蛋白质迁移在每个部分应单独调查,但这并不是这项研究的目标。此外,修改在Ig量化可以归因于疫苗引发的免疫刺激。总免疫球蛋白反的显著增加利什曼虫接种疫苗后抗体与CaniLeish还演示了在其他的研究5,7]。

在我们的研究范围包括狗的数量少,他们不同的疫苗接种阶段,缺乏血PCR分析排除传播的可能性l . infantum通过纯种马,缺乏ELISA检测剂量IgG1和IgG2水平评估类型的免疫反应。研究仍在继续,进一步将发表的数据。

5。结论

总之,采用疫苗在一群CaniLeish献血者,通常健康的狗,因为他们经常监视全年长,可能是一个安全的做法。在总蛋白疫苗接种只有最小的修改后的内容,一些球蛋白分数,IgM和免疫球蛋白,轻度增加IFAT滴定度。

信息披露

本文部分提出以抽象的形式在16 ESVCP年度国会1 st-4th 2014年10月,意大利米兰。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

确认

本研究支持的犬利什曼病工作组以及希尔宠物营养。