安全的技术和程序的间质血管部分治疗:从抽脂手术到电池管理

文摘

背景。间质血管分数(SVF)治疗已经完成在过去的六年里我们组治疗421个病人的5个临床中心。自体SVF,这是一个物质含有干细胞,lipoaspirate隔绝,与富含血小板血浆(PRP)混合,和管理的退化性疾病,患者的自身免疫疾病,创伤,老化,和其他疾病的病因不明。本研究旨在确定SVF和PRP的安全是通过注入,脊柱和关节内注射。方法。lipoaspirate tissue-dissociating酶处理,然后,通过离心,SVF孤立。此外,血液从每个病人,PRP是孤立的。自体PRP和SVF管理所有科目通过静脉注射(IV)。内的少数民族人口收到额外的脊柱或关节内注射。干预的类型是由每一个疾病的评估。每个病人的细胞剂量和不良事件记录和分析。结果。细胞被认为是安全的剂量小于100亿SVF细胞在生理盐水的250 cc,静脉注射,少于10亿SVF,关节和脊柱注射。没有严重的不良事件和治疗成功。任何观察到的不良事件被确定由于脊柱或关节内注射和SVF或PRP无关。结论。我们的研究结果显示,高剂量的管理SVF直到100亿年通过注入细胞多数的421例,脊柱,关节内注射是可行的而不造成重大不良事件,应精心设计的i ii期临床试验进一步研究解决治疗的安全性和有效性。

1。介绍

间充质干细胞(msc)可以从患者分离出脂肪组织通过一个简单的吸脂技术(1,2]。msc再生治疗尤其有用,因为他们是多功能细胞,可以分化成多种细胞类型(3]。lipoaspirate处理后,获得msc与内皮细胞,巨噬细胞,,和T细胞,周围的周在一起组成一个物质称为基质血管分数(SVF),在一个相对短的时间内,通常在2 - 3小时4,5]。培养SVF导致MSC隔离,和1 - 2 week-culture时期需要生产数以百万计的这些塑料附着纤维母细胞被称为MSC (6]。自体SVF萃取过程取代任何需要同种异体细胞培养(7),因此污染的风险,可以避免衰老的干细胞,或拒绝(8- - - - - -10]。此外,过程更便宜。因此,许多疗法进行使用自体SVF而非自体或同种异体msc (7]。

最近,研究人员报道msc在实验性自身免疫性疾病的免疫调节效应。msc可以抑制T细胞的增殖淋巴结脑脊髓炎,降低干扰素-γ生产的T细胞,显著抑制抗原特异性免疫球蛋白总产量,以及每一个免疫球蛋白的子类(11]。msc还会分泌减少促炎细胞因子il - 6和TNF等各种因素α这可能是有用的治疗炎症性疾病,如囊性纤维化肺病(12]。众所周知,msc分泌proangiogenic细胞因子,如血管内皮生长因子(VEGF),而(Angpt-1),肝细胞生长因子(HGF)和胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)促进细胞再生13]。迄今为止,基质或间充质干细胞应用程序被用于治疗许多疾病和条件,包括骨关节炎(14),类风湿性关节炎15),慢性阻塞性肺疾病(COPD) (16)、心脏病、莱姆病、节段性回肠炎结肠炎,自身免疫性疾病,糖尿病,下肢血管疾病,肾功能衰竭,神经系统症状,退行性椎间盘疾病,阴道干涩,尿失禁,脱发,脱发(17)、脂肪移植(18),多发性硬化(19),和色素性视网膜炎20.和审美目的21]。

富含血小板血浆(PRP)生长因子含量高(6,7]。在在体外研究中,PRP作为生长因子的来源来支持MSC增殖和分化6,22- - - - - -25),取代动物血清的使用。在动物和人类研究中,PRP是用于加速伤口愈合的过程(26),提高受伤的关节软骨的再生(6,7),修改肥厚性疤痕(21),减少坏死脂肪移植过程中经常发生(27]。

大多数研究人员显示SVF疗法的安全性和潜在的好处,和所有收集的数据显示一个安全程序的证据。事实上,SVF和PRP治疗已经完成了印尼自2011年以来。然而,2018年印尼最近的监管要求任何细胞疗法,包括SVF治疗,进行临床试验的基础上,为了证明安全性和有效性。在这篇文章中,我们报告我们的经历自2011年以来,结合SVF和PRP治疗治疗退化性疾病、自身免疫性疾病、创伤,和其他疾病,除了使用抗衰老的治疗。那些SVF和PRP加工使用的几种方法,包括商业设备和实验室开发的使用方法。本文的目的是提供支持的知识关于SVF和PRP制剂临床应用的过程;最高剂量的SVF已经通过输液管理,脊柱,关节内注射可容忍的副作用。此外,我们目前的预防措施避免将来不必要的副作用主要调查这种疗法的安全性和有效性的临床试验在某些疾病。

2。方法

这是一个回顾性研究涉及患者自体SVF和PRP治疗各种各样的条件。脂肪愿望过程大多是由单个运营商五个临床基地在雅加达,印度尼西亚。大部分的管理程序进行Hayandra诊所的医生与特定的能力(内科,神经学家、整形外科医生和延缓衰老的医生)。道德是获得健康研究伦理委员会,印度尼西亚、大学和Cipto Mangunkusumo医院(HREC-FMUI /而言不啻)批准信作品0249号/ UN2.F1 / ETIK / 2018。以前记录的医疗数据收集的诊所或医院的病历记录。

2.1。组病理

患者被分为5组,即涉及抗衰老的、退化性疾病、自身免疫性疾病、创伤,和听力损失等病因不明。退化性疾病包括糖尿病、退行性肌肉骨骼疾病,心血管和代谢疾病,中风,脑部疾病、呼吸系统疾病、肾功能衰竭、脑退行性疾病、眼科疾病、神经系统疾病,自闭症和生殖系统,而自身免疫性疾病和自身免疫性疾病。

2.2。SVF处理方法

SVF是细胞的不均匀混合物,包括内皮细胞、红细胞、成纤维细胞、巨噬细胞或其他免疫细胞,祖,周,msc (5]。在这项研究中,SVF指所有细胞类型的分数。SVF使用三种不同的处理方法,称为方法1、2和3。腹部脂肪组织的脂肪组织收集成人和儿童大腿儿科(低于15岁)。使用2.4毫米套管手动吸脂技术吸气与麻醉的肿起的技术。

在方法1,SVF隔绝lipoaspirate所描述的商业设备制造商。短暂,约15 - 600毫升的脂肪被注射器收集并存储在50毫升管。SVF细胞从脂肪中提取使用提取工具根据制造商的指导方针。脂肪与生理盐水洗3次,然后用商业孵化酶30分钟。样品离心10分钟,3000 rpm,收集SVF颗粒底部的管。这些细胞被过滤使用100µ米孔隙大小细胞过滤器(美国Gibco)。收集SVF,细胞离心10分钟,3000 rpm,在室温下。

方法2是可用的方法提供的干细胞实验室在雅加达。大约15 - 600毫升的脂肪是储存在50毫升管,然后用盐水洗净。脂肪组织被消化的酶为1小时37°C。脂肪是用生理盐水洗净,其次是在600×g离心5分钟。SVF上层清液都被丢弃。

方法三是HayandraLab发明的,因为之前的改进方法,并被称为H-Remedy方法(专利申请号P00201603083) [28]。Lipoaspirates(约15 - 600毫升)被H-Remedy酶消化和孵化1小时37°C, 300 rpm。孵化后,消化lipoaspirates被添加到低(1 g / L)杜尔贝科修改鹰的介质(DMEM)包含4毫米L谷氨酰胺(美国Gibco)灭活酶,其次是在600×g离心5分钟。然后,浮在表面的被丢弃。SVF颗粒在生理盐水稀释。细胞数量和生存能力被台盼蓝染色计数。计算活细胞使用以下公式: 在Df是稀释系数。

下面的公式是用来计算细胞生存能力:

在我们之前的出版物,SVF孤立使用每种方法的特点。培养SVF报告表达CD73, CD90和CD105没有或较少表达CD34、CD45 / CD11b / CD19 / HLA-DR,能够分化为软骨细胞,骨细胞,脂肪细胞,满足国际社会标准定义的msc的细胞治疗(24,25]。

2.3。富含血小板血浆处理方法

富含血小板血浆(PRP)使用两种不同的方法制备:商业工具(富含血小板血浆装备,AdiStem有限公司、香港)和传统的方法,这是HayandraLab发明并发展起来的。总之,24 cc的全血样品从每个各自收集病人,柠檬酸钠管,低速离心5分钟直到等离子层分开的红细胞(RBC)层。等离子体是吸气,收集,并受第二次离心步骤,要求高速另一个5分钟直到血小板集中底部的管。等离子体被直到最后剩余体积的等离子体在管3 cc。血小板的颗粒是resuspended在剩下的等离子管(3 cc),这被认为是灭活的PRP。这个3毫升的PRP随后激活使用氯化钙溶液直到血栓形成。凝块被孤立的PRP, PRP受到光激活(AdiLight-1 AdiStem有限公司,香港)。laser-activated PRP与SVF结合使用。光活化进行了增加抗炎细胞因子,如interleukin-1受体拮抗剂(IL1-RA)水平PRP (29日]。这个协议是应用于方法1、2、3。

指出,在使用商业套装,PRP制剂的协议是基于指令改变的设备制造商。方法1的最新协议表明,没有必要使用氯化钙PRP激活。然而,我们组发现血栓形成和删除从PRP重要在静脉注射的情况下,这要求不同的协议来生成最安全有效的治疗。

2.4。SVF管理

SVF颗粒在0.9%生理盐水,resuspended导致共有22毫升SVF悬挂。我们使用7毫升细胞悬液的质量控制(污染、内毒素和msc文化)。总共15毫升SVF悬浮混合3毫升自体PRP被激活之前使用氯化钙溶液,并由AdiStem有限公司Photobiostimulation光线疗法。总共20毫升SVF PRP悬挂注入一个输液袋,装有250毫升0.9%的生理盐水,如果总细胞数超过10亿人。如果细胞数量是少于10亿,生理盐水的体积是100毫升。SVF和PRP的混合在一起然后注入静脉注射对每个病人的持续时间30分钟。患者接受一个介于1和3之间独立的SVF-PRP注入。时间患者接受SVF-PRP过程也决定了数字注入足够数量的SVFs以来重复注入后才收到SVF使用H-Remedy方法处理了。此外,三个重复注入后只做我们验证方法来存储SVF在液体氮坦克和解冻细胞同时还导致了足够数量的细胞,是第三注入超过1亿个细胞。重复注射也取决于每个病人的情况和需求,取决于病人的医疗条件,如严重的疾病持续时间。 For example, patients with disease duration more than a year or with moderate to severe diseases were given at least two infusions. However, if cell number is sufficient for three infusions, patients not meeting those criteria also received three infusions. The first infusion was done on the day of their liposuction procedure, followed by another infusion in two weeks apart.

骨关节炎患者接受额外的关节内注射,共有3毫升在每个受影响的膝盖,使治疗更密切地关注一个特定的区域。患者出现脑瘫、自闭症、中风、帕金森病、痴呆也收到一个脊髓注射SVF当天的抽脂手术,同时接受他们的第一个SVF注入静脉注射,为了增强治疗的强度和力量。的情况下获得一个额外的注入,3毫升SVF和PRP混合物收集用于脊髓注射自闭症和大脑相关疾病或骨关节炎患者关节内注射。剩余的细胞悬液注入了包含250毫升的0.9%生理盐水输液袋,或100毫升取决于SVF号码。

2.5。数据收集和分析

421 SVF-PRP-treated患者进行回顾性分析,收集病人的人口从2011年9月到2018年8月。变量包括具体情况(性别、年龄、病理条件),SVF隔离方法,重复SVF治疗,SVF剂量,注入的方法,注入的位置,其他治疗方法执行,是否有任何不良反应的发生率。副作用或病人不适或投诉记录不良事件(AEs)。根据考米拉的类似研究et al。18),任何事件危及生命,导致住院或所需的主要医疗干预是归类为严重不良事件(节约)。所有其他事件,副作用,或病人投诉/不适收集不良事件(AEs)。数据分组根据病理情况,进一步分析了叙述地,见图和表。

3所示。结果

3.1。病人的人口统计和SVF过程

421名患者中,194名患者(46%)是男性,227名(54%)患者是女性。中位数年龄为55岁。最年轻的病人研究是1岁,最老的患者为86岁。

患者被分为16组(图根据病理条件1)。类别的分布,包括病人的数量,年龄,性别,脂肪细胞的体积处理,SVF处理方法,重复治疗,细胞剂量,每个疾病组和给药途径,提出了表1。

疾病组排序从最到最常见的情况下,按百分比值。前5名在研究糖尿病常见疾病,延缓衰老的,退化的肌肉骨骼疾病,心血管和代谢疾病,自闭症。其他治疗疾病中可以看到表1。

SVF主要是孤立使用H-Remedy方法(330例,78%),其次是商业工具(82例,19%),然后使用方法(9例,3%)使用最少的方法。所有患者接受SVF通过IV的管理,而一些收到额外的关节和脊柱注射,根据疾病和条件,考虑在综合评价。所有患者治疗期间当使用方法1和方法2时接受了只有一个治疗。方法3实现额外的一系列的注入,这是重要的终极治疗和治疗进展,在成功的治疗,观察记录。从一组330例,193例接受输液三大系列,123名患者接受一个输液,105名患者接受两个注入。每个输液在两周内收到。细胞计数后,孤立的可行性SVF从所有患者超过90%,不管SVF隔离方法,这是重要的治疗的疗效和安全性。细胞的分布通过第四剂量,关节内的,和脊髓注射提出了表2。

3.2。静脉注射

SVFs的浓度在第一注入收到的100万年到261.2亿年之间的421例患者不同的细胞。1和50亿之间的很大一部分患者接受SVFs(221例,52%),其次是下一个多数人收到1亿- 10亿SVFs(73例,17%)和去年多数小组收到100亿−SVFs(53名患者中,13%)。只有23个病人(5%)接受少于1亿SVFs。七个病人(2%)接受了超过100亿SVFs第一次输液。SVF记录尚未对44例(11%)在方法1组,为本研究的局限性。细胞注入的数量依赖于隔离过程和独特的构图SVFs脂肪组织内的每个人。总体而言,中等剂量的细胞群在第一SVF注入被计算为19.3亿。

第二SVF输液,收到的298名患者,注射SVFs多样的数量在00.3亿年到96.4亿年之间的细胞。一半的患者接受50亿−SVFs(147例,50%),其次是1亿年到10亿年SVFs(138例,46%)。9名患者(3%)接受SVFs从5到100亿个细胞,和4个病人(1%)接受少于1亿SVFs。SVFs注入的平均数量是10.2亿细胞。

例病人三SVF注入(193名患者),SVFs注射在第三和最后的数量介于01亿和30.4亿之间的细胞治疗。百分之七十四的患者(143例)收到了1亿年至10亿年间SVFs,剩下的患者(50例)收到SVFs 1到50亿之间。没有病人收到一封SVF注入含有少于1亿细胞或超过50亿细胞。总的来说,中位数SVF内细胞的数量在3^{理查德·道金斯}输液是06.4亿个细胞。细胞注入的数量比较每个病人的疗效和总体结果的治疗进展。

3.3。关节内注射

共有47名患者出现骨关节炎和其他肌肉骨骼疾病,特别是关于膝盖,收到SVF关节内注射在受影响的地区。SVFs注入的数量影响膝盖变化从100万到16亿个细胞。病人通常收到不到10亿个细胞(27例,57%)。关节内注射SVFs剂量的中位数是01.7亿SVFs每影响膝盖。13个病人(28%)接受少于1亿细胞,且仅3例(6%)获得1到50亿个细胞。数据丢失4骨关节炎患者(9%)。

3.4。脊髓注射

总共七十六名患者接受SVF通过脊髓注射。细胞的数量管理的中值为02.8亿,从00.01亿- 41.2亿细胞。超过一半的患者(47名患者中,62%)收到少于10亿SVFs,紧随其后的是病人少于1亿SVFs(13例,17%)。只有三个病人(4%)接受SVFs 1到50亿之间,这是最小的数量管理。数据丢失了13例(17%)使用方法1。

3.5。安全分析和管理

所有的评估患者立即血肿周围的入口网站抽脂过程和一般的炎症。每日服用三次温和止痛剂,进行为期三天的时间,是用来提供救援报告的症状,包括血肿、炎症和轻度至中度疼痛和不适。所有的病人记录,两名患者报告独特极端不适抽脂部位,并没有在最初的3天松了一口气。特别是这些患者被建议继续镇痛方案一个额外的两个星期。两个病人需要额外的疼痛管理,所有的症状都松了一口气在接下来的两个星期的治疗,使用温和的止痛药。

11例(3%)报告说,他们经历了颤抖,持续几分钟后程序和减少1安瓿的皮质类固醇后通过静脉输液管理。这期间只有副作用报道SVF孤立的使用方法1技术时,这有助于终止这种方法被使用。患者为期3天的口服药物治疗方案,规定后立即手术,包括头孢克肟扑热息痛或ketorolac或环丙沙星,作为每个病人的决定。SVF从这11个病人使用相同的批处理工具所提供的方法1加工制造商。进行微生物测试,来检查包的不育,由授权的实验室。这些测试证实,试剂(用于分离脂肪组织和自由干细胞)可疑的批处理,产生不良的结果,被污染肠杆菌属下水道和克雷伯氏菌oxytoca细菌。制造商已经发布未经消毒处理套件由于mal-production,因此我们小组从使用方法1使用一种新方法,称为方法2。

在方法1的时候,一个病人经历了左前下小脑动脉血栓形成。这个病人收到未激活的PRP由静脉注入,由于改变制造商的商业协议的PRP工具包。这个病人恢复最终成功的血栓切除治疗后,在医院进行。事件发生后,所有的患者都接受了PRP激活的氯化钙溶液,使成功的结果的。病人的人口(76例)治疗脊髓注射,五个病人(7%)报告经历头痛和不适,在注射后的第一周内持续。所有的病人发现的症状缓解一周内开始镇痛治疗。

4所示。讨论

综述了考虑可用出版物,相信我们的团队是第一个治疗患者的最大剂量SVF浓度记录,管理通过多个途径,包括静脉注射(IV),关节内的(IA)和脊髓注射。在实践中,我们使用钙chloride-light irradiation-activated PRP,第四是安全的管理,增强了治疗和患者产生更好的结果。先前的研究已经证明,光激活减少促炎interleukin-1a的生产,2,IL-5, il - 6和增加抗炎因子,il - 10,分泌在T细胞培养(30.]。用光线照射的好处来激活PRP在骨关节炎患者(31日]。罗德里格斯报道12类风湿性关节炎患者的治疗使用SVF包含16−4500万细胞/静脉注射,注射和每个病人收到最多四个。然而,没有明确的解释生理盐水的体积或输液的时间在这项研究[15]。在另一个第一阶段的临床试验,由考米拉et al ., 12例终末期慢性阻塞性肺病患者接受一个SVF注入(32]。SVF剂量给每个病人的范围变化从150年到3亿个细胞,结合1000毫升生理盐水。输液管理超过2小时的过程中,通过肘前的静脉。另一个同一作者的多中心研究发表,考米拉et al ., 246名患者接受自体SVF和PRP (18]。系统性症状和治疗的疾病包括慢性阻塞性肺病、心脏病、莱姆病、节段性回肠炎结肠炎、各种自身免疫性疾病,糖尿病,肾功能衰竭(18]。SVF是由静脉注射在通过丸推30−60分钟,时间和细胞剂量30至6000万细胞3−5毫升的0.9%生理盐水。另一个3−5毫升生理盐水注入线。在相同的研究中,93名患者出现神经系统症状治疗SVF通过腰椎穿刺鞘内,33例退行性椎间盘疾病患者治疗1毫升SVF intradiscal注入和PRP的混合物,264骨科患者的症状得到了关节内的SVF和PRP注入(3−5毫升),7个患者接受SVF和PRP注入脱发的头皮,患者和1接受肌肉SVF PRP注入5−10毫升SVF和PRP的混合物进入他们的腿目标血管疾病。其他一些患者接受SVF注入,以及脂肪转移过程,共有五个病人接受注射5毫升SVF和PRP在生殖器官退行性条件(18]。赖尔登等人发表三SVF治疗多发性硬化症病人的案例报告(33]。3名患者接受了两个25的静脉注射,28日和7500万年SVFs每10天,紧随其后的是多个鞘内和静脉输液的同种异体CD34 +和msc (33]。

我们观察到,大多数这些研究使用不超过1亿年出版SVFs,除了一项研究是由考米拉et al。32]。猜测的根本原因是使用这种小数量的注射SVFs临床应用可能无法调查人员隔离大量的细胞来自患者脂肪组织收集。大部分的干细胞研究也使用这个一般数量范围的干细胞,可能由于高成本和繁琐的技术需要提供大量的干细胞(34]。一个例外是人类脂肪中提取特定的自体msc (ADMSCs)研究Ra等人在脊髓损伤(SCI)患者(35]。在这个ADMSCs研究中,八SCI患者接受静脉输液4亿自体ADMSCs之一。这些细胞被分为四个剂量,导致一个输液袋由每100毫升1亿个细胞的生理盐水(100万细胞/毫升)。细胞被注入头静脉在3到4 h (35]。

我们认为,确定最佳剂量是建立一个有效的细胞疗法的关键一步。人们普遍预期,将适当的细胞的数量管理功效。四郎等人报道,更多的植入兔synovium-derived msc改善软骨再生动物模型(36]。另一个先前的研究报道,大量的软骨基质蛋白多糖和高复合材料组成的5×10⁷细胞组成的比低细胞密度(1×10⁶和1×10⁷msc) [37]。然而,这些与其他研究结果不一致。在剂量升级研究报道公园et al .,功效的人类脐带血液MSC对软骨修复MSC在低剂量(0.1、0.5和1×10⁷细胞)比高剂量(1.5×10⁷(细胞)38]。可能会适当考虑几个因素,如细胞的来源,特点,和路线和交付汽车电池管理,以及病人状况,确定最佳剂量的干细胞疗法。根据我们的临床经验,更大的患者症状改善时实现患者接受更高SVFs的数量。,这是合理的静脉注射时,干细胞旅行通过血流分布更集中的地区组织,导致只有可检测水平低的注入在靶组织细胞,与关节内注射的细胞相比,在身体的一个特定的区域(39]。此外,我们在前面已经证实在体外研究文化SVF隔绝糖尿病患者少殖民地形成比孤立的从非糖尿病的病人40]。岁从msc捐助者也获得了类似的调查结果也显示了生存能力,细胞生长,增加细胞衰老,超氧化物歧化酶(SOD)活性(41]。因此,它是重要的,可行的SVFs尽可能高,所以注射细胞可以达到靶组织的最优数量来弥补减少的生物功能的细胞衰老或退化性疾病,因此被最有效的再生。

接下来要考虑在决定细胞疗法的剂量是细胞剂量对患者的安全。在这项研究中,在所有情况下,大多数患者接受少于100亿SVFs。我们注意到6 7病人超过100亿SVFs没有报告任何不适或任何副作用的发生率。然而,我们认为最多的SVFs可以注入病人200亿个细胞,避免细胞因子出来后副作用。

在脊髓注射的情况下,8%的患者不适和脊髓注射后出现头痛的发生率。头痛可能是经验丰富的脊髓注射后由于脊椎穿刺针的重复插入和删除。在反复刺穿的脊髓,硬脑膜的泄漏变得更加可能。硬脑膜的泄漏,如果有少量的脑脊液逃脱,在大脑减少缓冲,因此较低压力系统周围的大脑造成适度的头痛。这种症状会持续而硬脑膜愈合。病人报告规定不适和头痛是温和的镇痛药物和发现的症状缓解一周内开始轻微的治疗。解决简单的症状,评估症状的发生率与不精确的针插入细胞的剂量,因为大多数的细胞对脊髓注射剂量小于10亿。不精确的针插入可以被认为是人类的错误,而不会关注治疗本身。

基于我们之前的研究中,我们还要注意,协议分离的细胞应该是可行的,优化细胞隔离(数量和可行性)42),也没有污染。报告的SVF高于中位数生存能力的最低可接受的可行性规范体细胞疗法,一般设定在70% (43]。生存能力的细胞产品70%以上没有展现出任何负面影响产品管理治疗的安全性和有效性。在这项研究中,所有SVFs加工能力超过90%,所以没有负面影响的报道作为低可行性细胞在这项研究的结果。

最普遍的副作用报道的发病率正在颤抖,这是决定是由于污染方法1的工具包。成为很重要的测试套件的不育或试剂用于细胞隔离,因为很明显,制造商不能保证装备不育。是决定使用方法的一个优点3隔离协议,在HayandraLab发达,是我们确保每个材料和处理方法是最小污染的风险,并确保不育和安全管理。

我们知道整个过程可能是一个污染源lipoaspirate集合本身,由于皮肤细菌的存在。在采取措施减少和防止严重的副作用,与细菌污染,我们给每个病人注射规定每个病人术前抗生素(第三代头孢菌素),为期3天的口服用药后立即发生过程中,由非甾体抗炎药和抗生素药物。意识到污染的另一个机会是肿瘤的污染。加西亚等人发现最小的污染出现在人类肿瘤MSC文化(44]。在我们的实践中,结合PRP SVF,是丰富的各种生长因子。肿瘤细胞可以利用这些生长因子来支持他们的增殖和迁移。考虑到今天没有结论性的结果呈现双峰干细胞对癌症病人的影响,我们认为非癌症患者选择是重要的自体SVF和PRP治疗的情况下,为了找到最合适的候选人为这个治疗,为了确保安全,并识别患者将受益最多。

我们的研究表明,SVF治疗是可行的,有效的和安全的治疗方法。作为一个自体SVF疗法,SVF疗法提出没有特定的威胁,从421个账户证明病人记录。细胞剂量,被认为是可以忍受的,没有病人的投诉或不适的浓度低于100亿SVFs 250 cc的生理盐水,静脉注射,少于10亿SVFs,关节和脊柱注射。我们建议体积的生理盐水用于静脉注射和输液速度应该SVF数量成比例的。SVFs数量更高,超过200亿个细胞,被认为是潜在的压倒性的和有害的病人和还未经过测试。大多数报道不良事件在这个研究是低风险的,可控的,暂时的,和预期的成果SVF过程。SVF可以结合PRP在临床实践和有利于患者的复苏,因为发现的结果通过临床的实现。

PRP包含高度浓缩血小板。马克思说的双重离心自体血液可以产生PRP的血小板浓度至少1×10⁶cell /µL几乎是5倍的全血中血小板浓度(45]。多数病人的血小板,特别是那些有糖尿病,是更容易聚合第二离心后,我们观察到实验室,这可能反映了他们的行为在血液循环46]。聚集的血小板释放各种细胞因子和生长因子,进而激活内皮(47]。循环免疫细胞激活内皮招募更多的血小板和坚持并形成斑块。斑块的破裂会损害内皮引起血栓形成和血管闭塞,可能发生在一个病人的PRP事先体外血小板激活。因此,静脉注射,PRP应该被激活之前注入为了避免血栓的形成。这个顺序注射已经证明成功和没有引起血栓形成的证据。SVF-PRP治疗,非癌患者肿瘤筛查是必要的,以避免污染在SVF并有效的在目前的临床治疗。

我们的研究结果显示,高剂量的管理SVF直到100亿年通过注入细胞多数的421例,脊柱,关节内注射是可行的而不造成重大不良事件。然而,我们的研究是回顾性的方式完成的,并没有设计成剂量升级研究,缺乏一些临床数据得出可靠结论确定SVF的最高剂量,为临床应用是安全的。尽管i ii期临床研究迫切需要解决的最高容许剂量SVF,重复,和安全,以及潜在的利益在某些疾病的治疗,我们的研究仍然为研究者和临床医生提供一些知识在同一地区改善他们的工作程序,如SVF-PRP处理和治疗。

5。结论

我们的研究结果显示,高剂量的管理SVF直到100亿年通过注入细胞多数的421例,脊柱,关节内注射是可行的而不造成重大不良事件,应精心设计的i ii期临床试验进一步研究解决治疗的安全性和有效性。

缩写

ADMSCs:	脂肪msc
慢性阻塞性肺病:	慢性阻塞性肺疾病
IA:	关节内的
四:	静脉注射
msc:	间充质干细胞
PRP:	富含血小板血浆
科学:	脊髓损伤
SVF:	间质血管分数。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

伦理批准

本研究健康研究委员会批准,医学院,印尼(作品0249号/ UN2.F1 / ETIK / 2018)。

同意

患者的知情同意前提供样品。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

KRN设计和改进的概念间质血管治疗一部分的协议;通知病人诊断、过程的过程中,风险和并发症,预后,其他治疗或药物治疗,之前获得知情同意,和患者药物治疗和管理计划;执行lipoaspirate隔绝大部分患者(95%以上);和评估手术前后病人的健康条件。MRA发明了基质血管部分隔离的协议。MRA、SSH和IRI验证协议。IRI, SSH、IAI和双胞胎进行基质血管部分隔离和收集的数据记录。爱尔兰共和军和IRI导致了数据采集、管理和统计分析。KRN,乌鸦,IRA,日本解释结果和讨论。爱尔兰共和军和RSZ写了篇文章。 KRN, KAW, JAP, and MRA reviewed the article. JAP came up with ideas for improving the quality of the article.

确认

作者承认H-Clinic,佛法Nugraha医院,CBC美容护理,Mandiri YPK预计今年医院,梅林达二医院和医院Thamrin Salemba权限访问病人的医疗记录,仅限于那些治疗间质血管HayandraLab分数由H-Remedy处理方法,科学研究的目的。

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