文摘

我们试图确定新生儿性激素产生的长期变化管理的功能在成年雄性大鼠中脑多巴胺能神经元。Sprague-Dawley老鼠皮下注射在产后第一天和分配给以下实验组:TP(丙酸睾酮1.0毫克/ 50μL);双氢睾酮(二氢睾酮1.0毫克/ 50μL);电动汽车(雌二醇戊酸酯0.1毫克/ 50μL);和控制(50芝麻油μL)。在产后60天,神经化学物质进行了研究以确定多巴胺含量nigra-ventral盖的面积和伏隔核中多巴胺的释放。分子(mRNA表达酪氨酸羟化酶)和细胞(酪氨酸羟化酶的免疫反应性)研究也执行。我们发现增加多巴胺含量物质nigra-ventral盖的TP和EV老鼠,除了在伏隔核多巴胺释放增加。然而,新生儿暴露于DHT的雄激素,并不影响中脑多巴胺能神经元。相应地,控制老鼠相比,水平的酪氨酸羟化酶信使rna和蛋白质在TP和EV老鼠已经显著增加,但不是在DHT老鼠,分别由qPCR和免疫组织化学。我们的研究结果表明雌激素的机制涉及增加酪氨酸羟化酶的表达,通过直接雌激素行动或芳构化的睾丸激素雌二醇在物质nigra-ventral盖的区域。

1。介绍

不同的不良刺激在生命的早期,在正常发展产生改变,持续至成年期和成年生活中可能是疾病的危险因素。卢卡斯的概念定义编程为“组织或器官的生理重定向一个刺激,一个敏感时期的发展,产生不良功能变化在成年期”(1]。动物研究最初集中在胎儿接触(“胎儿规划),但最近的研究编程的概念扩大到包括产后早期接触(新生儿的编程)。

1959年,凤凰et al。2)首次报道产生的长期影响雄激素对中枢神经系统(CNS)及其在生殖行为的影响(2]。早期研究表明,最大灵敏度雄激素的影响发生在妊娠期间,童年和青春期3,4]。近年来,它已经表明,环境污染物内分泌干扰作用:能够在大脑中产生各种各样的影响(审查[5])。例如,一些污染物,如多氯联苯(在新生儿期管理,通过哺乳),产生学习赤字和空间定位任务的变化在猴子和老鼠(评论[6])。此外,新生儿接触多溴二苯醚(PBDE),另一个内分泌紊乱,增加自发运动行为在成年大鼠(7]。有趣的是,作者表明,不同剂量的多溴二苯醚在新生儿期管理可以导致增加或减少nicotine-induced运动活动(7]。暴露在环境污染物影响特定神经元组包括中脑多巴胺能神经元。例如,新生儿或产后管理双酚A (BPA)的大鼠产生自发的运动行为的增加,伴随着下降为在黑质酪氨酸羟化酶(TH)免疫反应性(SN)和基因表达减少中脑多巴胺转运体(DAT)的原子核(8]。因此,文学中的证据表明,新生儿期的窗口对激素活性物质的影响,当暴露在化合物如内分泌紊乱或性激素可以产生长期影响的神经回路的功能。

在中枢神经系统中,睾酮(T)的生理作用是通过减少双氢睾酮(DHT)介导的细胞色素P450 5 -α还原酶(9雌二醇(E)或其芳构化₂),细胞色素P450芳香化酶(10]。在大脑中,细胞色素P450 5 -α还原酶存在于两个亚型(11,12];1型异构体表达类似的水平在女性和男性12),而只是表示在男性2型对碘氧基苯甲醚在胎儿发育阶段和产后期间的早期阶段(10]。另一方面,细胞色素P450芳香化酶是高度表达男性下丘脑在妊娠期间发展,然后逐步减少在新生儿阶段,通过童年和成年期(10]。同样的模式出现在雄性老鼠的下丘脑细胞色素P450芳香化酶活动13];然而,女性的大脑细胞色素P450芳香化酶活性是稳定在所有生命阶段(13]。有趣的是,在中脑,细胞色素P450芳香化酶活性最高的头两周新生儿阶段在雄性和雌性大鼠(13]。

多巴胺能神经元细胞的主要群体之一,中脑,属于黑和mesocorticolimbic电路(14]。黑SN的途径是由多巴胺能预测致密部纹状体(15- - - - - -18),而从腹侧被盖区(VTA)多巴胺能预测到伏隔核(NAcc)和前额叶皮层(PFC) mesocorticolimbic电路形式,或者奖励系统19- - - - - -22]。在后者,自然奖励提示如性(23)或食物(24),以及药物的滥用,25)增加NAcc细胞外多巴胺(DA)含量。

性激素受体表达在黑和mesocorticolimbic电路(26- - - - - -30.)和调节多巴胺能的关键蛋白质的表达功能,如酪氨酸羟化酶(TH)、儿茶酚胺合成的病原反应酶(29日,31日- - - - - -34]。性激素暴露在早期发育阶段或敏感期的生活已经与一些中枢神经系统障碍有关。在人类中,研究表明,增加雄激素水平在青春期与冒险行为相关联,如酒精依赖的开发和维护35]。此外,研究表明,增加羊水的性激素水平在胎儿阶段自闭症正相关(36]。动物研究表明,雄激素暴露在早期发展可能扮演一个角色发展的注意缺陷多动障碍(37]。在神经层面,新生儿减少雄性激素细胞外血清素水平在杏仁核(38),增加去甲肾上腺素(NA)和谷氨酸在腹内侧下丘脑39成年女性的老鼠。关于雌激素,我们之前发现新生儿接触雌二醇戊酸酯(EV)雌性老鼠增加DA含量tuberoinfundibular区域(39和黑通路40在成年。然而,新生儿的持久影响暴露于不同性激素对中脑多巴胺神经元已经几乎没有了。因此,本研究的目的是确定新生儿所带来的潜在变更管理丙酸睾酮(TP), DHT或电动车DA的内容和表达TH mRNA在成年雄性大鼠中脑多巴胺能神经元。

2。材料和方法

2.1。动物

93男性的雄性sd幼鼠从15升中被使用。剩下的雌性幼崽被分配到其他的研究。所有的动物都被安置在一个温控房间(°C)在12 h与灯光周期喂饲h,食物和水随意。所有实验程序是理学院的伦理委员会批准,瓦尔帕莱索大学和机构动物实验伦理委员会和科学委员会(FONDECYT)智利。是努力减少实验用动物的数量,他们的痛苦。

2.2。药品和试剂

丙酸睾酮(TP),二氢睾酮(DHT),雌二醇戊酸酯(EV),香油,多巴胺标准,EDTA,和1-octanesulfonic酸从Sigma-Aldrich购买,Inc .(圣路易斯,密苏里州,美国)。所有其他试剂的分析和分子级。

2.3。实验的程序

每组动物在产后一天single-injected (PND) 1 1.0毫克TP, 1.0毫克DHT, 0.1毫克EV,或麻油(控制)每只小狗。TP、DHT和电动车都溶解在50μL的香油。动物的幼崽被随机分为四组:控制(),TP ()、二氢睾酮(),电动汽车()。TP的剂量、DHT和电动车使用以前发表的(39,40,42,43]。所有的小狗都与哺乳期的母亲,直到断奶年龄患产后抑郁症的21。断奶后,动物被安置在组根据性别和治疗标准的笼子里。在患产后抑郁症的60岁组的老鼠被随机分配以下实验协议。

(我)DA含量测定。老鼠断头台斩首,大脑被删除。我们在4°C microdissected SN和VTA(切割作为一个组织)和纹状体;这些大脑组织在分析天平称重(Chyo模型jk - 180年,日本)如前所述[40,44,45]。大脑组织存储−80°C进行进一步分析。

(2)确定mRNA。老鼠斩首,大脑被删除。SN和VTA分别在4°C microdissected使用micropunch(哈里斯Micro-Punch,齿顶圆直径2.0毫米,Ted斗篷Inc .)、钙、美国)。脑部组织分析天平和储存在承压−80°C进行进一步分析。

(3)测定蛋白质。大鼠麻醉和灌注transcardially。大脑被移除,切成冠状切片为TH免疫组织化学。

(iv)决心NAcc DA的释放。使用在活的有机体内在麻醉动物大脑微量透析可把时程延长、基底和stimulated-K⁺DA细胞外水平通过高效液相色谱法测定耦合电化学检测。完成后的在活的有机体内实验中,大鼠被斩首安乐死。

2.4。实时聚合酶链反应

实时PCR用于确定信使rna编码TH改变SN和VTA的成年雄性老鼠暴露在性激素在患产后抑郁症的1。总RNA提取使用RNeasy迷你包(74104号、试剂盒、瓦伦西亚、钙、美国)制造商的指示。的总RNA进行了量化NanoDrop nd - 1000分光光度计(美国NanoDrop技术,威明顿、德)和4 ng的总RNA reverse-transcribed使用QuantiTect逆转录工具包(205314号、试剂盒、瓦伦西亚、钙、美国)。反应是在主组合包括8.0μL的总RNA基因组DNA(免费的),1.0μL Quantiscript逆转录酶,4.0μL Quantiscript RT缓冲区,1μL RT底漆的混合。反应被终止在95°C加热样品3分钟。

TH mRNA量化,所有样本分析在10一式三份μL反应,和一个标准的实时PCR反应混合制备包含以下组件:5.0μL (QuantiTect SYBR绿色PCR试剂盒(204143号、试剂盒、瓦伦西亚、钙、美国),2.8μ0.1 L nanopure和无菌水μL的底漆,2μL的互补。特定的基因扩增,45周期的标准协议是用于CFX96触摸实时PCR检测系统(Bio-Rad实验室,Inc .)、美国)。在95°C初始聚合酶激活后10分钟,primer-specific放大和量化周期运行在95°C 15秒和61.7°C,持续20秒。TH引物设计数据发表在基因库,向前访问NM_012740数量:5′-GGT-CTA-CTG-TCC-GCC-CGT-GAT-T-3′和反向5′-GAG-CTT-GTC-CTT-GGC-GTC-ATT-G-3′。规范化TH mRNA内容,核糖体18岁mRNA测量在每个协议,使用引物以前公布的(42)和商用,基因库访问数量X01117(18岁,向前5′柠檬酸AGA ACG AAA GTC GGA GG-3′和反向5′GGA猫CTA gg GCA柠檬酸CA-3′)。放大的18 s RNA进行了在不同的管,以避免干扰mrna的放大。反应管缺乏RT酶被用作PCR-negative控制。特异性的扩增子生成验证了通过执行融化曲线在每个反应。验证产品的rt - pcr反应,他们2.0%琼脂糖凝胶上分离,用溴化乙锭染色,而100个基点标准(数据未显示)。

2.5。为酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学

15雄性老鼠与水合氯醛麻醉(400毫克/公斤i.p)和生理盐水灌注transcardially p / v生理盐水(0.9%),其次是冰冷的固定剂解决方案(p / v多聚甲醛4%磷酸缓冲盐溶液(PBS) 0.1米与pH值7.4)。大脑从30分钟的头骨和后缀。大脑被脱水在48 h p / v蔗糖20%解决方案在4°C。后来,30μ米厚的冠状切片准备在低温恒温器(Kedee模型kd - 2950年,中国)。兴趣选择片从SN-VTA距前囱−5.4毫米的阿特拉斯Paxinos和沃森46];这些片放在24-well盘子和洗PBS 0.01 10分钟后孵化与H₂O₂在PBS (0.3% v / v) 30分钟。

冠状切片与PBS 0.01再洗两次10分钟然后孵化了1 h在屏蔽解决方案(Triton x - 100 v / v和门店0.4% 3%在PBS v / v)。孵化第一anti-TH兔抗体(Calbiochem目录数657012年,默克密理博,默克公司,达姆施塔特,德国)它是由稀释1:5000年屏蔽解决方案一夜之间用软风潮在4°C (47]。孵化后,切片与PBS 0.01洗4次每次10分钟。第二孵化它已经为2 h和s biotinilated anti-rabbit抗体(目录号码ba - 1000、向量实验室Inc .,伯林盖姆,CA,美国)在环境温度,在PBS稀释1:1000 0.01与BSA溶液0.2% p / v。之后,片洗4次与上面提到的相同的协议。片被孵化1 h和ABC工具包(kit Vectastain ABC,向量实验室Inc .,伯林盖姆,CA,美国),然后洗两次。显色染色的切片与民建联孵化(diaminobenzidine) 0.05%与H p / v₂O₂在PBS 0.025% v / v (Sigma-Aldrich轻拍:产品目录号d - 5905)。结束时的反应(5 - 10分钟),片洗2次,最后被放在幻灯片和固定Eukitt (Sigma-Aldrich目录:03989年,Inc .,圣路易斯,密苏里州,美国)。

片拍摄的双边与显微镜Motic相机(ba - 210, Motic,不列颠哥伦比亚,加拿大)在4 x区测定SN和VTA客观;下面的照片是在10 x TH-positive细胞计数与ImageJ软件(http://rsbweb.nih.gov/ij/)。对于每一个老鼠,SN和VTA中选择4片,然后手动计数进行盲目的三个独立调查人员使用参考内侧终端配件视神经束核(MT)。

2.6。SN-VTA多巴胺含量

根据执行组织均匀化气et al。48和我们之前的工作40]。简单地说,组织是在400年收集的μL(0.2米高氯酸然后在glass-glass均质机均质冰。匀浆离心机在12000 g×15分钟在4°C(模型Z233MK-2 Hermle LaborTechnik GmbH, Wehingen,德国)和合成上层清液过滤(0.2μm高效液相色谱一次性注射器过滤器过滤聚四氟乙烯,模型电子战- 32816 - 26日Cole-Parmer仪器公司,美国)。过滤后的上层清液注入一个高效液相色谱电化学检测耦合DA含量的测定。在1 N氢氧化钠颗粒是resuspended蛋白质Bio-Rad量化的分析(Bio-Rad实验室,Inc .)、里士满、钙、美国)使用牛血清白蛋白作为标准。DA含量是表示为皮克/毫克的蛋白质。

2.7。在活的有机体内大脑Microdialysis

在患产后抑郁症的60,动物深感麻醉与合唱水合物(400毫克/公斤,i.p。)和放置在一个立体定位器(型号68002,RWD生命科学有限公司,深圳,中国)。动物的体温维持在37°C电毯由一个温控器控制调节。四分之一的合唱水合物的初始剂量是每小时保持动物麻醉过程中实验。同心探测大脑微量透析可把时程延长(2 mm膜长度、模型CMA 11, 6000道尔顿截止,桑纳,瑞典)植入NAcc使用坐标根据Paxinos和华生的阿特拉斯(41](NAcc): 1.56毫米后,1.50毫米侧,和7.8毫米腹前囱)。Microdialysis探针与Krebs-Ringer灌注的磷酸盐缓冲剂(KRP mM:氯化钠120;氯化钾2.4;Na₂HPO₄0.9;不₂阿宝₄1.4;pH = 7.4)的速度1μL / min使用输液泵(模型210年RWD RWD生命科学有限公司,深圳,中国)。一段稳定的90分钟后,两个灌注样本收集每20分钟在3μ0.2米高氯酸的L。在40分钟,KRP改变为70毫米KRP-potassium (K⁺在20分钟)。在这20分钟(60至100分钟的灌注协议),KRP解决方案是通过探针的微量透析可把时程延长再灌注。所有的灌注实验样本保持在冰和储存在−80°C到分析。在每个实验中,动物被斩首安乐死,大脑很快被删除并存储在福尔马林。大脑的部分50μm是沾甲酚紫来验证显微镜下探针的位置。探针位置的一个例子是图所示2(一个)。

2.8。DA和DOPAC量化

10毫升每个洗干净的上层清液或透析液样本注入到高效液相色谱系统与以下设置:一个权力平等主义的泵(pu - 2080 +模型,Jasco有限公司,东京,日本),一个UniJet微内径列(mf - 8912, BAS,西拉斐特,美国),和一个电化学检测器(设定在650 mV, 0.5 nA;模型LC-4C, BAS,西拉斐特,美国)。流动相,0.05不包含₂阿宝₄0.27毫米、1.0毫米1-octanesulfonic酸、EDTA、和4.0% (v / v) CH₃CN (pH值调整到2.5),是80年泵的流量μL / min。DA水平评估通过比较各自的峰面积和洗脱时间的样本参考标准和使用校准曲线进行量化为每个神经递质(程序ChromPass, Jasco有限公司,东京,日本)。

2.9。统计分析

数据表示为±SEM。单向方差分析后跟Newman-Keuls事后测试是用来确定最终的组间显著差异。进行统计分析与GraphPad棱镜v5.0 (GraphPad软件,圣地亚哥,CA)。

3所示。结果

我们工作的目的是确定新生儿性激素暴露导致多巴胺能神经回路与运动相关的长期变化(黑通路)和激励(奖励系统)。这个接触性激素在早期发展阶段可能是脆弱性因素诱发神经发展障碍的成年。为了实现这一目标,我们使用高效液相色谱法(HPLC)耦合电化学生物样品的检测,以确定神经递质水平获得解剖大脑(组织内容)或microdialysates(细胞外水平)。我们还利用实时PCR和免疫组织化学确定基因和蛋白质表达的变化。

3.1。持久的新生儿性激素的影响政府在SN-VTA TH mRNA的表达

在我们的模型中,新生儿暴露EV和TP在雄性幼崽在TH mRNA表达显著增加患产后抑郁症的60在SN(图1(一)(,]和区域(图)1 (b)(,])。

3.2。持久的新生儿性激素的影响政府在SN-VTA TH蛋白表达

图2低和高放大显微照片显示TH-immunoreactive SN和VTA神经元控制,TP, DHT和EV雄性老鼠。新生儿暴露EV和TP在患产后抑郁症的60 TH蛋白表达增加SN(图3(一个)(,]和区域(图)3 (b)(,])。

3.3。持久的影响新生儿性激素SN-VTA和纹状体DA和DOPAC内容管理

图4显示新生儿的影响政府的TP, DHT或电动车SN-VTA DA含量(面板(a))和纹状体(面板(b))的成年雄性老鼠。新生儿接触TP或电动车生产SN-VTA DA含量的显著增加成年雄性大鼠(,]。然而,新生儿管理DHT(雄激素)并不影响DA内容(图4)。另一方面,纹状体DA含量是影响新生儿性激素管理与控制老鼠(图4 (b))[,]。

当我们分析的主要代谢物之间的比率在SN-VTA哒(DOPAC)和哒,我们观察到显著减少该值在电动汽车和控制老鼠(表1,)。相反,纹状体的比率(DOPAC / DA)大幅增加DHT和控制老鼠(表2,)。

3.4。持久的影响新生儿性激素NAcc DA发布管理

图5 (b)显示新生儿接触TP的影响,DHT或电动车NAcc DA释放成年雄性老鼠去极化刺激引起的。对于每一个实验组,KRP-K的灌注⁺生产增加NAcc DA发布关于自己的基线水平。然而,当比较大小NAcc DA的释放KRP-K引起的⁺在60分钟,我们观察到一个更大的影响在DA releasability TP和EV老鼠和DHT和控制大鼠(,]。

4所示。讨论

4.1。持久的新生儿性激素的影响政府的mRNA和蛋白表达TH和SN-VTA DA含量

我们的工作表明,SN-VTA DA含量影响成年雄性大鼠早期暴露在E₂- EV直接接触或间接通过芳构化部分T E₂在TP male-which产生mRNA和蛋白表达增加(数据1- - - - - -3),这导致SN-VTA DA含量的增加。我们没有发现类似的效果与新生儿暴露于DHT验证我们的“芳构化假说。“因此,结果表明,二氢睾酮,雄激素,没有造成中枢神经系统的变化参数测量,但观察到周组织有长期的影响。尽管TP的剂量或DHT(1毫克/公斤南卡罗来纳州。)在我们的研究中可以考虑使用高,生命早期阶段,类似的剂量已经被我们以前在以前的研究报告39)和其他研究组织(49,50),旨在引发明显的大脑神经内分泌的变化。

我们提出“芳构化假说”进行新生儿接触TP在雄性大鼠患产后抑郁症的1是基于高水平的细胞色素P450芳香化酶表达和活动大鼠中脑(51),这将促进T E的转换₂。虽然它已经表明,E₂通过结合雌激素受体(ERs),能够增加TH表达式在中脑多巴胺神经元的成年雌性啮齿动物(13,27- - - - - -29日),睾酮和雌二醇管理不太可能患产后抑郁症1留在血清直到患产后抑郁症的60多巴胺能神经元变性,导致直接影响成年。因此,TP和EV增加大脑中雌二醇水平在早期发展的窗口,它实际上可能会改变神经多巴胺能神经发生和细胞凋亡的祖细胞通过调节神经营养因子(审查[28])。这可能是原因TH-positive神经元数量的增加证明了在我们的研究中。此外,我们还注意到更多的表达在成年后。这是符合这一事实α基因敲除小鼠中脑多巴胺神经元的减少了TH蛋白质水平(52)与野生型小鼠相比。TH的调节雌激素主要发生的基因通路和涉及到绑定中的复杂雌激素反应元素TH基因(53]。我们认为,这种早期的长期效应增加血清雌二醇TH表达可能涉及长期的表观遗传调控的基因表达,为多个基因在不同模型中观察到的雌激素暴露的54]。但是我们不能排除这样一种可能性,即新生儿管理TP或电动汽车可能造成永久性大脑中的细胞色素P450芳香化酶表达的变化或在睾丸上如先前证明了Persky et al。55]。

TH mRNA和蛋白表达的增加在我们的工作可以负责增加DA含量在SN-VTA成年雄性大鼠暴露早期电动车或TP(图4)。在这方面,TP老鼠TH表达增加的幅度低于在EV老鼠,可能由于部分芳构化外生T E₂。从这个意义上说,我们之前证明新生儿接触EV增加腹内侧下丘脑(DA含量39在成年雌性老鼠[]和SN-VTA40]。

4.2。持久的影响新生儿性激素NAcc DA发布管理

多巴胺释放的去极化刺激诱导NAcc成年雄性大鼠暴露于电动汽车和TP在生命的最初几个小时大于DHT和控制老鼠。这种效应直接相关的高mRNA和蛋白表达TH(数字1,2,3(图)和DA内容4(一))SN-VTA EV和TP的老鼠。正如前面所讨论的那样,大NAcc DA释放KRP-K引起的⁺灌注是由新生儿暴露在高水平的E₂项目在成年雄性大鼠中脑多巴胺能神经元。

另一种可能性来解释早期性激素的影响政府对增加DA发布建议在体外实验用过冷室片下丘脑。贝克尔和拉米雷斯显示增加amphetamine-induced DA的释放在被阉割的成年雄性大鼠下丘脑切片相比,被阉割的成年雄性大鼠补充与TP (30.]。这是一个有趣的发现,因为它已被证明,被阉割的成年雄性老鼠SN-VTA TH表达水平高于完整的雄性老鼠(33)或与TP替换被阉割的雄性大鼠(30.]。在这个意义上,我们观察到的减少成年雄性大鼠的血清T水平与TP治疗新生地,电动汽车,或二氢睾酮,这可能与减少在成人睾丸的大小(见补充图1 b在网上补充材料http://dx.doi.org/10.1155/2016/4569785)。可能减少血清T水平观察成年男性对待新生地与DHT是由于高剂量的DHT使用我们,因为,工作的Persky et al .,他们使用低剂量的DHT和没有观察T血清T水平变化在成年期(55]。这项研究表明,早期接触电动汽车或TP产生增加NAcc DA释放通过雌激素效应由去极化刺激引起的新生儿暴露在E₂或者和增加内源性E的生产₂在成年后,证明了Persky等人使用新生儿管理TP (55]。

在行为层面,我们之前报道,在EV雌性老鼠,单一剂量的安非他命(1毫克/公斤i.p。)没有产生显著增加运动活动相比,控制雌性大鼠(40]。这是有趣的,因为在当前的研究中,我们观察到的比率减少DOPAC DA在雄性老鼠能够反映DA吸收减少,建议减少DAT的水平。从这个意义上说,这是主要的药物安非他命的目标和减少DAT表达可能与减少药物安非他命的效果。在文献中,支持这一假设在NAcc DAT表达的减少大鼠去卵巢后的骨骼状况(56)和减少DAT表达在大鼠纹状体暴露在BPA在产前及产后阶段(57]。

新生儿接触性激素,特别是发展的重要时期,可能引起长期的中枢神经系统的变化。从这个意义上说,E₂在新生儿期显示了重要影响多巴胺能通路;作为当前的工作证明,单一剂量的电动车或TP增加DA含量和TH表达式(限制酶的合成)在中脑边缘地区。这些变化还包括增加DA在NAcc发布。这些影响所产生积极调制TH表达式产生的雌激素,这表明可能存在一种E的芳构化作用₂T,雄激素,如DHT没有产生同样的效果。我们强烈认为,“芳构化假说”可能会批准在将来的研究中通过使用共同服用选择性的细胞色素P450芳香化酶抑制剂如曲唑和阿那曲唑以及TP。

最后,新生儿管理雌二醇或睾酮通过芳构化E₂在中脑多巴胺神经元产生持久的影响,与持续改变性激素有关。当前结果的重要性,作为接触种化合物在环境中生长发育的关键时期可能长期对大脑功能的影响。从这个意义上说,不同的环境污染作为环境激素可以永久地改变大脑中神经递质水平并产生持久的变化。在该领域进一步的研究是必要的,提供了参与帕金森病的多巴胺能电路,精神障碍和上瘾。

利益冲突

这项工作的作者宣称他们没有利益冲突。

作者的贡献

佩德罗·埃斯皮诺萨和罗克珊娜a·席尔瓦的贡献同样是这项工作的第一作者。

确认

这项工作是由FONDECYT批准号111 - 21205年Ramon Sotomayor-Zarate和年核NUmind格兰特数控130011 -巴勃罗·r·莫亚。作者感谢Meredith a .福克斯博士的评论。

补充材料