文摘

目前的研究旨在研究苯并噻唑的效果(蓝芽)水果质量和抵抗青霉菌italicum(p . italicum)。最近,这一综合介绍了蓝芽准备小说抒发的感应抵抗各种疾病的水果。然而,有报道称小蓝芽的影响在采后抗病性和水果质量的脐橙果实。在这项研究中,50 mg·L−1蓝芽的衰变速率显著降低果实在36天的存储20±0.5°C ( )。蓝芽显著抑制果实的重量损失率( )有效地保持较高的可溶性固形物(SSC),可滴定酸(TA),和维生素C (VC)内容与控制脐橙果实。此外,蓝芽显著抑制疾病发病率的增加和病变区域的橙色水果的挑战p . italicum( )。蓝芽治疗显著提高抗氧化能力(DPPH、abt自由基清除活性和还原能力)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性显著增加,过氧化氢酶(CAT)的活性在相反前( )。的活动β1,3-glucanase (GLU),苯丙氨酸ammonia-lyase (PAL)和查耳酮异构酶(十)明显高于在BTH-treated脐橙果实( )。我们的研究结果表明,蓝芽治疗可能是一种有前途的治疗方法对于维护的质量和抑制蓝模具采后在未来脐橙。

1。介绍

脐橙(素类l,Osbeck) is pretty popular among the consumers worldwide and is a favorite fruit due to its unique taste and high nutritional value. However, navel orange is susceptible to pathogenic fungi.青霉菌italicum和p . digitatum,导致蓝色模具和绿色模具,是主要的真菌1,2),占到总数的60 - 80%在柑橘类水果贮藏真菌衰变(3,4]。采后疾病被控制通过多种方法具体运用合成杀菌剂。然而,过度和滥用杀菌剂抵抗病原体引起的对合成杀菌剂和造成环境恶化和人类健康问题导致全球趋势探索小说自然选择减少或没有副作用。的感应电阻使用各种生物、化学或物理方式可能成为潜在的策略控制采后腐烂的水果(5]。一些外源性化合物如壳聚糖(6],水杨酸[7萜烯,柠檬烯(4),一氧化氮(8)被用来诱导抗病性的采后橙色水果。蓝芽的新报道模拟天然植物中水杨酸(SA)报道,高效诱导系统获得抗性(SAR)从各种微生物在植物保护的疾病。此外,据报道,无毒的植物,没有任何不愉快的环境影响(9]。蓝芽暴露可以引起抵抗疾病,甚至wound-mediated栓化在甜瓜等水果和蔬菜(10,香蕉11),草莓12,番茄13),和土豆14,15),有效减少疾病的发生。然而,根据作者的知识,没有研究解释了有效性控制蓝芽耳机的模具在脐橙。

目前的研究旨在考察蓝芽如何影响采后绿霉菌的生长所致p . italicum和质量的脐橙果实在存储。衰变率和水果的质量为36天的存储20±0.5°C进行调查,和抗氧化能力,抗氧化酶的活动,和抗病性相关酶活动脐橙果实后接种p . italicum也确定。

2。材料和方法

2.1。蓝芽肚脐水果和治疗

脐橙果实(素类l .等简历。纽霍尔)收获从果园在赣州城市,江西,中国商业成熟时期平均可溶性固体含量(SSC) 12°白利糖度。水果大小一致的和免费的伤口被挑选出的实验。脐橙果实被随机分为两组(每组由超过300个水果)和暴露与50 mg·L−1蓝芽(含0.05%渐变- 80)和去离子的H2O(控制,含0.05%渐变- 80)10分钟。的水果被风干之后,进一步在室温下2 h,脐橙也都用聚乙烯袋包装(每袋1橙色),保持在20±0.5°C, 85%相对湿度(RH) 36天。

某些质量参数测量在6、12、18、24、30周、36天后存储10 20±0.5°C使用每个复制的水果。这个测量新采摘的脐橙果实之前实验研究被任命为0天,和每个处理重复三次。

2.2。衰减率和果实品质参数测定

水果腐烂过程在室温下储存(20±0.5°C, RH 85% - -95%)是视觉检查在每个治疗组60水果。如果有明显的衰减症状,被认为是腐烂的水果。腐烂的水果的比例计算每6天的存储,和水果是列表的衰变率的总数的百分比会计调查总数水果腐烂的水果。

减肥被定义为减轻重量的百分比的初始重量脐橙果实在存储。SSC的果汁被手持折射仪化验(ATAGO PAL-1,东京,日本),表示为°白利糖度。TA在果汁化验使用滴定法和柠檬酸的百分比表示。维生素C含量的分光光度法(16),表示为毫克100克−1弗兰克-威廉姆斯。

2.3。病原体准备和接种

第二个实验是进行确定病变区域和接种感染率。出于这个原因,水果蓝芽处理或去离子水(控制)注射p . italicum。p . italicum是分离和纯化感染脐橙果实。的p . italicum在PDA培养基上培养25°C的一个星期,然后,孢子悬液(1×10吗5用无菌水孢子每毫升)准备。脐橙果实被穿在两个相反的点(3毫米×3毫米宽)在中间,然后,10μL孢子悬液的注入在每个受伤的区域。在存储、水果的数量有明显的疾病症状的被记录。每组三个复制20水果被用于接种感染率和病变区域的决心。果皮组织的病变10水果/复制采样,浸入液氮,储存在−80°C进行进一步分析。有三个复制在每个治疗。

2.4。衰减率、发病率和病变区域

脐橙的发病率与挑战p . italicum是由感染伤口的衰变的百分比会计总伤口/复制。接种的病变直径水果被游标卡尺测量。病变区域计算如下:病变面积=(毫米2)=π×(d/ 2)2。

2.5。抗氧化能力测定

脐橙样本(5克)被添加到30毫升甲醇溶液和超声波辅助提取的40分钟然后离心机13000 xg 15分钟。上层清液收集确定脐橙果实的抗氧化能力。1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)自由基清除能力,2,2’-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic酸(abt)自由基清除能力和还原能力测定太阳et al。17]。在517 nm DPPH自由基清除能力的测定。在734 nm abt自由基清除能力的测定。还原能力测定的吸光度测量在700海里。

2.6。酶活性的检测

1.0 g脐橙的均质在8毫升的50 mM pH值7.8 PBS包含0.8克·L−1聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和1毫米乙二胺四乙酸(EDTA)然后离心机在12000 xg 15分钟在4°C。上层清液用于SOD, POD和PPO活性测定。冷冻果皮组织(1 g)地面8毫升的50 mM PBS,含有2% PVP和5毫米(二硫苏糖醇)德勤猫提取。SOD活性化验后的台阶Prochazkova et al。18]。猫和POD活动是根据以前的报告(化验17]。PPO活性评估后刘et al。19]。SOD、CAT、POD和PPO活性表达为U·毫克−1蛋白质分−1。

冷冻果皮组织地最后粉末形式在8毫升的50 mM预冷硼酸缓冲包含0.5克PVP (pH值8.8),5毫米β巯基乙醇和2毫米EDTA PAL提取。PAL活性化验后的台阶路et al。20.]。冷冻果皮组织在8毫升的100毫米醋酸缓冲(pH值5.0)包含EDTA 1毫米和5毫米β巯基乙醇和GLU、提取。GLU活动,本活动是化验所描述的陈et al。2]。PAL活性表达为U·毫克−1蛋白h−1。GLU和CHT表示为U·毫克−1蛋白质。可溶性蛋白质含量在所有酶提取决心在布拉德福德的方法(21),使用牛血清白蛋白作为标准。

2.7。统计分析

数据分析与SPSS(18.0版本)。数据之间的差异显著性由邓肯的多个测试范围。

3所示。结果

3.1。蓝芽对脐橙的衰变率的影响

脐橙果实的衰变率增加了在室温下贮存时间的延长存储(图1(一))。蓝芽治疗显著地抑制脐橙的衰变率储存在20°C ( )。在存储的第36天,蓝芽的衰变率治疗橙色水果只有6.67%,对照组的四分之一。

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图1
蓝芽对衰减率的影响在存储和疾病发病率和病变区域的脐橙果实与挑战p . italicum在20°C。
3.2。蓝芽对发病率的影响和损伤区

病变直径后逐步扩大从第三天开始接触p . italicum。蓝芽显著降低发病率(图1 (b))和病变直径(图1 (c)在脐橙果实接种p . italicum与各自对照相比( )。

3.3。脐橙的蓝芽对果实品质的影响

在存储期间,在所有组体重增加,减肥治疗的蓝芽脐橙果实明显低于对照组12天后的存储( )(图2(一个))。所有样品的SSC最初增加,然后下降。与对照组相比,脐橙果蓝芽处理显示明显高于SSC后18天的存储( )(图2 (b))。助教内容略有增加,然后下降。助教内容BTH-treated脐橙果实显著高于对照组( )在早期阶段,没有显著差异(图24天后存储2 (c))。脐橙果实的VC含量控制逐渐减少。蓝芽有一个增加治疗脐橙果实18天蓝芽和VC的含量明显高于治疗保持VC内容后18天的存储(图2 (d))。

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图2
蓝芽对减肥的影响,SSC, VC, TA脐橙果实的内容存储在20°C。
3.4。蓝芽在抗氧化能力的影响

DPPH、abt自由基清除活性和还原能力接种后表现出类似的趋势,显示最初急剧增加,其次是减少(数字3(一个)- - - - - -3 (c))。水果蓝芽暴露于描述明显高于DPPH自由基清除潜力,abt自由基清除活性,减少权力在存储( )。

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图3
蓝芽对脐橙果实的抗氧化能力的影响与挑战p . italicum。
3.5。蓝芽对抗氧化酶的影响的活动

SOD的活性的变化,猫,和脐橙果实POD活动的挑战p . italicum如图4。SOD, CAT和POD活动脐橙最初出现在贮藏期,然后逐渐下降后(图存储一段时间4)。SOD和POD活动达到高峰后第四天存储,但蓝芽肚脐治疗水果2天达到高峰,显著高于控制脐橙果实( )。蓝芽猫的活动处理的脐橙果实显著低于控制水果( )。

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图4
蓝芽对SOD的活动的影响,猫,群脐橙果实与挑战p . italicum。
3.6。蓝芽对国防相关酶的影响的活动

PPO的活动,朋友、GLU、CHT脐橙果实的挑战p . italicum最初增加,后来被降低(图5)。PPO活性蓝芽处理水果明显低于其控制在存储(第六天 )。蓝芽PAL的活性在治疗显著高于控制脐橙后四天的存储( ),当GLU、活动明显高于与各自控制存储(48小时后 )。

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图5
蓝芽对PPO的影响,伙计,GLU,本活动脐橙果实与挑战p . italicum。

4所示。讨论和结论

蓝芽的诱导物,已知有潜力应用诱导特区生产水果和蔬菜(9]。在当前的研究中,50 mg·L−1蓝芽显著降低肚脐水果的衰减率在20°C存储( )。蓝芽显著地抑制肚脐的减肥水果( )有效地维护高SSC, VC, TA的内容后存储。所以,蓝芽可以减少脐橙的衰变率和维护质量在存储。此外,我们使用p . italicum蓝芽接种脐橙果实探讨如何减少脐橙果实的腐烂速度。

ROS是信号分子调节植物对病原的抗病性,和活性氧积累可以抑制病原体感染诱发过敏的反应(HR) [22]。然而,高水平的活性氧会导致氧化损伤,这可能使组织更容易受到病原体。因此,抗氧化剂酶和非酶的抗氧化剂的存在起着重要的作用在维护ROS在无毒的水平。SOD, CAT和POD是至关重要的抗氧化酶,有效地清除活性氧(23]。蓝芽显著提高SOD和POD活性,但抑制(图对猫的影响水平4)。也观察到类似的现象在壳聚糖处理的脐橙24]。蓝芽增加SOD和POD活动的可能保护脐橙果实细胞免受氧化损伤。蓝芽,描述明显高于DPPH, abt清除活动,并减少权力(图3),这是被视为一个额外的机制参与抑制疾病发病率的增加(图1)。因此,提高SOD和POD活动和较高的抗氧化能力在蓝芽脐橙果实有助于提高抗病能力。

phenylpropanoid相当重要的代谢途径和提供了多种物质特别是酚醛塑料,木质素,直接与抗病性数以百计的类黄酮。POD、PAL和PPO酶参与phenylpropanoid至关重要途径,导致木质素的生物合成25]。安南et al。26]发现,POD和PPO活性的增加SA处理柑橘类水果,有一个明确的增加POD和PPO活性与抗病性关系对蓝色的模具在柑橘类物种。蓝芽显著增强PAL活性和POD活性(数字3(一个)和2 (d)),它表示,蓝芽诱导脐橙果实抗疾病通过改善phenylpropanoid代谢通路。β1,3-glucanase (GLU)和几丁质酶(十)是两个重要的植物pathogenesis-related蛋白(27]可水解单独或协同破坏真菌细胞壁结构,因此有直接的抗菌效果。在这项研究中,蓝芽治疗显著增加GLU活动,本活动脐橙果实的挑战p . italicum,它表明,增强抗病性相关酶活性也蓝芽诱导抗病性的重要机制之一,在脐橙果实。

总之,我们的结果表明,蓝芽有前途的影响脐橙采后蓝色模具提高抵抗疾病。蓝芽的高架抗病治疗橙色水果可能归因于增强抗氧化能力和抗氧化酶活动ROS体内平衡,和蓝芽诱导防御反应的关键酶的活动。蓝芽可能是一种有前途的治疗方法对于维护的质量和抑制蓝模具用于采收后的脐橙在未来。

数据可用性

所有数据包括用于支持本研究的发现在纸上。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

这项研究是由中国自然科学基金会(没有。31560219)。