阴道微生物群和益生菌的使用

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人类的阴道是居住着一系列从池中微生物的50多个品种。乳酸杆菌是最常见的,特别是在健康女性。微生物群可以改变成分迅速,原因并不完全清楚。这可能导致感染或状态的生物与其他致病的潜在共存共生的。在绝经前女性最常见的泌尿生殖感染细菌性阴道炎(BV),一个条件特点是乳酸杆菌数量的损耗和革兰氏阴性厌氧菌的存在,或在某些情况下,革兰氏阳性球菌,有氧病原体。BV传统的治疗包括抗生素灭滴灵或克林霉素,然而,治疗复发率居高不下,这不是为了恢复乳酸杆菌。体外研究表明,乳酸菌压力会扰乱BV和酵母生物膜和抑制尿路病原体的生长。使用益生菌来填充阴道和预防或治疗感染已经考虑了一段时间,但只有最近有数据出现了显示效果,包括抗菌治疗的补充,提高治愈率,防止复发。

1。阴道的微生物群

微生物物种栖息在阴道束发挥重要作用在维护健康,预防感染。50岁以上的微生物物种已发现从阴道束1- - - - - -3]。这些物种不独立存在,在体外和人类的研究表明multispecies微生物群,通常伴有细菌性阴道炎(BV),存在于生物膜密度(4- - - - - -7),而乳酸杆菌占主导地位的微生物群可以分散在上皮细胞(4,5,8]。相比之下,肠道填充超过800种微生物,其中大部分在粪便排泄,和大量的设备齐全的致病性。尽管接近阴道肛门,阴道微生物的多样性远低于在肠道。多样性低的原因仍不清楚,但可能包括阴道接受能力差,不同的养分有效性相对于肠道,与土著生物竞争。肠道中发现的一些物种,如大肠杆菌和链球菌,也可以发现在阴道,表明适当的受体,营养物质和氧张力存在这些生物生长。

不同的方法被用来确定阴道微生物群的构成。每一种都有其优点和缺点。培养的方法允许识别和菌株用于进一步的实验。然而,在我们成长的能力仍然是一个主要的缺陷很多细菌物种,我们必须依靠nonculture方法确定阴道微生物群的广度。这是通过分析他们的核糖体DNA序列(3,9),用PCR和变性梯度凝胶电泳(DGGE) [2,5,10- - - - - -12],利用简并,普遍聚合酶链反应引物扩增的约555个碱基对地区普遍chaperonin-60基因(13]。

阴道粘膜的物种存在不同绝经前妇女和那些经历了更年期。微生物群的健康绝经前妇女通常是由乳酸菌物种,最常见的是l .内心的,l . crispatus,l . gasseri,l . jenesenii紧随其后的是l .嗜酸的酵母,l .杆菌l .短l .干酪乳杆菌l .养狐场l . delbrueckii唾液l, l .这种和喂食(2,5,9- - - - - -16]。随着越来越多的研究表现在健康女性阴道的有机体,一些女性可能会发现,没有一个lactobacilli-dominated微生物群(17]。然而,直到我们知道更多关于人口的动态,并确保它不会增加疾病的风险,乳酸杆菌仍将是生物体最重要的阴道健康。

因素如激素的变化(特别是雌激素),阴道的pH值和糖原内容都可以影响乳酸杆菌的能力遵守上皮细胞和殖民阴道16]。月经周期也会导致阴道微生物群的变化,用高浓度的雌激素增加依从性的乳酸杆菌阴道上皮细胞(18]。雌激素水平的下降与更年期有关,也有乳酸杆菌减少出现在绝经后妇女的阴道束5,11,12,19]。绝经后的妇女也更容易泌尿生殖感染、阴道的支持理论,殖民共生的乳酸杆菌作为保护这些病原体19,20.]。虽然这些生物的方法这样做仍然不清楚,似乎需要一个能够坚持和填充阴道上皮和粘蛋白层,抑制病原体从接管21- - - - - -24),以减少病原体毒力(25,26),调节宿主防御(27]。

激素替代疗法(HRT)改变了细菌的绝经后妇女的阴道束,和恢复lactobacilli-dominated状态,以及减少尿路感染(UTI)的发病率19]。在女性的研究结合马结合雌激素和黄体酮荷尔蒙替代疗法,只有1到3种细菌,主要是乳酸菌发现,87%的女性阴道粘膜的(5]。在绝经后妇女不接受荷尔蒙替代疗法,几乎所有受试者阴道粘膜填充超过1生物,其中许多致病潜力等拟杆菌、普氏菌、和加德纳菌属,与细菌性阴道炎(BV)有关,大肠杆菌和肠球菌,与泌尿道感染(5]。

而阴道束由乳酸杆菌似乎保护宿主免受一些阴道感染,它不完全防止其他物种的入侵。病原体仍然能够与这些共存共生的生物体,如由伯顿和里德(10),g .鞘突病原体与BV,阴道中检测出样本也包含一种乳酸菌。有趣的是,g .鞘突是流离失所以外的检测限制21天,后一个阴道内的滴剂益生菌乳酸杆菌(11]。随着越来越多的研究正在揭示多样性的阴道微生物群,似乎明显的平衡健康和患病的状态涉及到某种平衡或跷跷板效应,可以双向摆动方向取决于许多因素,如激素水平、冲洗、性行为、交互和宿主防御细菌(20.,21]。

Witkin et al。28)提出,先天免疫中发挥着重要作用从健康状态切换到BV。他们建议的机制是通过microbial-induced toll样受体表达的抑制和/或活动阻断炎性免疫、以及缺乏70 kda热休克蛋白的生产,和阴道mannose-binding凝集素浓度降低赤字的能力微生物杀死。三个最近的研究提供了进一步了解主人的角色。在女性易患泌尿道感染的一项研究中,他们发现外周血免疫缺陷共存与持续异常的微生物群(Kirjavainen et al。29日])。在绝经后妇女,BV相关主机抗菌因子的表达明显减少(30.]。当益生菌喂食GR-1管理绝经前妇女的阴道,它导致了3 536基因表达变化和表达水平的增加一些抗菌防御31日]。

2。无性的传播感染的阴道乳酸杆菌呼吸道和干扰

致病菌能够感染阴道、BV、酵母阴道炎,和尿导致每年估计有十亿或更多的病例(32- - - - - -35]。虽然有一些证据表明,致病微生物可以通过性伴侣,这些条件将讨论是无性的传播。其他评论充分地覆盖性传播感染(36,37]。

酵母阴道炎的特征是白色的放电,局部瘙痒和刺激。大多数情况下造成的白色念珠菌,但c . glabrata,c . krusei,c . tropicalis可以有问题35]。它是由微观检测诊断阴道涂片上的密集的酵母细胞的数量,通过体检和白色的存在,粘液样酵母放电。值得注意的是,乳酸杆菌往往发现酵母阴道炎患者,因此,感应感染,似乎不需要对酵母取代或杀死乳酸杆菌。

尿路感染时出现致病菌提升从阴道和复制,有时在,膀胱尿道上皮(32,38,39]。这些感染是常见的女性,估计有50%在一些时间在他们的生活。症状和体征包括耻骨弓上的疼痛、排尿困难、脓尿、排尿频率和痛苦,和偶尔血尿。无症状菌尿也常见,尤其是中老年人。最常见的病原体大肠杆菌,紧随其后的是粪肠球菌,和葡萄球菌saprophyticus(39]。诊断可以通过症状和体征,并包含在尿液样本生物/毫升的病原体。在部分患者中,大肠杆菌侵犯膀胱上皮和顽固的抗生素(形成致密的生物膜40]。在女性没有泌尿道感染的历史,他们的阴道和会阴是由乳酸杆菌(最常见的是殖民20.),而在复发性泌尿道感染的女性有一个逆乳酸杆菌和之间的联系大肠杆菌(41),这表明乳酸杆菌在预防感染中发挥作用。

生育年龄的妇女中最常见的泌尿生殖障碍是BV,上面所讨论的一个条件。BV患者的阴道微生物群通常包含一个广泛的物种比发现在健康的情况下,Atopobium阴道,拟杆菌spp。加德纳菌属鞘突,Mobiluncus,Megasphera,支,消化链球菌属,普氏菌(尤其普遍3,42- - - - - -46]。BV与多个物种的细菌发生在90%的情况下,基本上由阴道pH值升高(4.5)和乳酸杆菌的损耗。它影响所有年龄组的女性,通常是无症状(47]。当发生冲突症状和体征,包括可疑的气味,放电,和阴道的pH值4.5以上(48]。的确,这形成的基础常用Amsel BV诊断标准:至少3以下的标准:(1)释放胺或可疑的气味在添加10%氢氧化钾,(2)阴道pH值高于4.5,(3)发现至少20%的线索细胞(革兰氏阴性杆菌阴道细胞殖民地),和(4)银河系均匀阴道分泌物48]。革兰氏染色的方法称为纽金特得分也被使用(8]。它包括一个评分系统基于细菌的形态存在于阴道拭子样本。正常的分数给样本显示主要是革兰氏阳性棒表明乳酸杆菌,而主要的存在小弯曲形状的革兰氏阴性和革兰氏阳性球菌,以及乳酸杆菌的缺席,是BV的象征。BVBlue测试是另一个工具包用于诊断BV,并通过检测唾液酸酶由病原体相关条件(49,50]。值得注意的是,有氧阴道炎也被描述的阴道被生物如殖民大肠杆菌和enterococci51]。在怀孕期间,BV可以增加早产和低出生体重的风险(52,53]。与BV相关的其他问题包括盆腔炎、泌尿道感染,和增加对性传播疾病,包括艾滋病病毒(54- - - - - -57]。

生物与BV在阴道上皮细胞,形成致密的生物膜,这是与阻力增加有关lactobacilli-produced乳酸和过氧化氢(),通常是敌对的浮游生物(58]。生物膜也能诱导宿主某些炎症因子的表达,如il - 1和引发59]。目前还不知道生产的乳酸杆菌的临床对BV保护作用。患病率的增加过氧化氢生产在健康女性阴道乳酸杆菌作为理由相信这是一个保护因素(60),然而,这些研究乳酸杆菌文化恢复使用,也可以说是他们使用nonculture方法,l .内心的是最常见的孤立和不出现呢。可以隔离l .内心的文化,但它需要选择性的媒体和广泛的孵化。同一组发现的女性第阴道lcrispatus或ljenseniiBV的发病率明显低于女性阴道菌群不同(14]。然而,Alvarez-Olmos et al。61年)和Rosenstein et al。62年)发现第乳酸杆菌在85%和91.7%,分别与BV的女性。它可能是认为的高发病率第乳酸杆菌表明这种化合物是不保护32]。无论哪种方式,很难做出明确的结论。

麦克莱恩和McGroarty [63年)进行了体外研究显示,增加文化pH值降低的抑菌效果l .嗜酸的在g .鞘突国家反恐怖主义中心的11292 60%;抑菌效果降低30%时看到介绍了过氧化氢酶降解。借阅等。64年)发现的毒性第乳酸杆菌抑制了过氧化氢酶的存在但不产生乳酸杆菌没有受到影响。高浓度的第乳酸杆菌抑制的增长g .鞘突和拟杆菌bivius。然而,低浓度第乳酸杆菌必须结合髓过氧物酶和氯在阴道粘液,是有毒的方向g .鞘突毒性,最多5到6的pH值范围。pH值4.5抑制的增长g .鞘突自己这效果增加的上面的组合。一句话,可能是几个因素之一参与竞争与其他生物的阴道。

3所示。益生菌预防和治疗泌尿生殖感染

作为抗菌治疗泌尿生殖感染并不总是有效的,和问题仍然由于抗细菌和酵母,复发性感染(65年,66年),以及副作用,也就不足为奇了,替代疗法感兴趣的病人和他们的照顾者。假设复发是由于抗菌素未能消灭病原体,也许是因为生物膜阻力,或者毒性生物回来从其来源(人的内脏,或性伴侣)和攻击宿主的防御是次优的。年轻女孩患有泌尿道感染更容易在成年期反复发作,和整体许多泌尿道感染、BV、酵母阴道炎患者会复发(21,67年]。复发性感染也可能是由于消除共生的生物体的阴道抗菌,从而增加对开拓殖民地的病原体(68年,69年]。这是其中一个主要原因考虑使用益生菌、共生微生物作为一种补充,降低再感染的风险。在一个对120个孩童调查报告与持久的原发性膀胱输尿管的回流,l .嗜酸的处理日常和磺胺甲恶唑/甲氧苄氨嘧啶作为有效减少泌尿道感染的速度(),这表明益生菌可以提供预防性的选择(70年]。

益生菌乳酸杆菌的交货路线已经直观地通过直接滴注法入阴道。例如,每周的应用喂食GR-1和酵母B-54显示减少泌尿道感染复发从平均每年6到1.6 (71年]。乳酸杆菌的一个给定的应变能力坚持阴道细胞被认为是一个优势在暂时填充阴道71年,72年),创建一个环境有利于恢复主机的土著乳酸杆菌,而不是一个病原体的回归。乳酸杆菌的粘附uroepithelium不同物种间和菌株,通过体外研究(如图所示72年,可能是由糖蛋白和碳水化合物丰富的绑定醣脂类受体(73年]。不过,目前尚不清楚在体外粘连程度不同,说10个每个细胞,意味着有机体将成功或失败保护主机如果灌输入阴道。因此,附着力本身并不是预测成功的标准。一旦管理十亿或更多的活菌数,喂食GR-1和这种l .(原酵母)RC-14发现检测已经有三个星期或者更多,这取决于主机(74年,75年]。这意味着相关性在体外和体内的坚持。

交付的概念阴道乳酸杆菌口服,于2001年首次报道(76年,基于这个问题“如果尿路病原体可以这样做,为什么不能乳酸杆菌”?牛奶中的生物是基础,是恢复从直肠77年];因此支持概念,摄取菌株可以通过肠道,到达直肠阴道和潜在的提升。这是由他人独立确认(78年]。

以进行临床研究的角度为更多的女性提供访问这些菌株,两年的保质期胶囊配方开发并成功应用在大量的研究。每天口服剂量超过十亿生物发现保持lactobacilli-dominated阴道存在(79年]。干预影响阴道束的时间明显长于直接阴道滴剂,和将取决于生存能力的菌株经过胃和肠道78年]。此外,负载的乳酸杆菌,可以提供这种方式是通过阴道明显低于管理。然而,口服方法的优势可能是乳酸杆菌的能力减少酵母和病原菌的转移从直肠阴道的80年),这可能会降低感染的风险。在随机、安慰剂对照试验的64名健康女性,37%的病人喂食GR-1和这种l .RC-14益生菌组lactobacilli-dominated正常阴道微生物群从BV阴道菌群恢复相比安慰剂组的13% ()。在28天,60天的测试点,有乳酸杆菌治疗组的女性阴道乳酸杆菌的数量大于女性对照组(和resp)如图所示,显微镜和文化。这个口服益生菌疗法的能力来创建一个乳酸杆菌正常菌群,把一些科目从BV状态正常79年]超越概念验证阶段,为女性提供了一个方法来帮助保持阴道健康。的失败喂食GG是有效的,至少在一个小型研究[79年),强调了益生菌毒株特异性方面的使用。因此,一个不能也不应该利用数据从一个应变推断另一个未经测试的应变将提供相同的好处。

即乳酸杆菌作为抗感染防御的机制仍不完全清楚。正如上面所讨论的,这可能涉及到生产抗菌因子(81年),和维护的阴道的pH值4.5。它也可能是由于生物表面活性剂改变周围的表面张力,减少各种病原体的能力遵守(82年,83年]。这也许可以解释相对稀疏覆盖的上皮细胞在健康女性(8]。此外,乳酸杆菌已被证明绑定(coaggregate)一些病原体,这可能是一个手段来阻止他们的附着力,通过生产抗菌素杀死他们,防止其扩散到其他地区的阴道和膀胱84年]。10株乳酸杆菌中被评估中使用的益生菌的平板电脑,Mastromarino et al。85年)发现,在体外,加氏乳杆菌335年和唾液乳杆菌FV2能够coaggregateg .鞘突。当这些乳酸杆菌菌株结合短乳张阴道的平板电脑,附着力g .鞘突降低了57.7%,和60.8%的贴壁细胞取代。鲍里斯等al.found附着性能g .鞘突也受到影响嗜酸乳杆菌(73年]。

大家都知道有一段时间了Lactobacilllus产生细菌素可以抑制病原菌的生长,包括一些与BV有关,如g .鞘突(86年]。只有最近的一项研究显示在动物体内细菌素产量可能有影响。一个稳定的突变唾液乳杆菌UCC118没有产生特定细菌素无法保护小鼠免受李斯特菌肠道感染,而野生型,从而导致作者得出结论,细菌素产量可以抗感染防御的主要中介87年]。

相对较少的研究试图使用益生菌预防尿路感染。她et al。88年46)评估绝经前的女性4集BV和/或阴道念珠菌病在前一年,使用益生菌酸奶比较BV的复发与一个是巴氏杀菌。患者不接受长期抗生素或免疫抑制治疗,没有研究的毕业典礼前喝酸奶。他们被随机分配到两个治疗组和巴氏杀菌酸奶摄入150毫升()或酸奶含有l .嗜酸的在克隆形成单位()。酸奶是每天消耗两个月两个月没有酸奶紧随其后。BV有减少60%发作患者食用益生菌酸奶后只有一个月减少了25%发生在受试者接受巴氏杀菌酸奶()。经过两个月的酸奶消费,结果相似;然而,从两组25%的患者已经离开。产品完整性只是评估前学习和没有不良反应报告。

内里et al。89年在怀孕的前三个月)对84名女性进行了观察BV probiotic-containing酸奶的影响。受试者被随机分配到三个治疗组:插入棉条包含5%乙酸(),10到15毫升阴道冲洗包含克隆形成单位/毫升l .嗜酸的(),或没有治疗()。积极的治疗都是一天两次服用一周。Amsel标准(三个五个发现:释放一个胺可疑的气味;释放胺气味后,添加10%氢氧化钾;阴道的pH值大于4.5;阴道分泌物的线索细胞;乳白色的同质阴道分泌物)缺席在88%,38%,和15%的受试者接受了阴道内的乳酸杆菌、醋酸卫生棉条,和安慰剂,分别在30天。有一个显著的差异在益生菌之间的治愈率和对照组(),乳酸杆菌和乙酸组()。

Fredricsson et al。90年)进行了开放性试验比较61名妇女的治愈率与BV给定四阴道内的产品之一。病人被诊断为BV3 Amsel标准。四种治疗方法,病人被随机分配接受管理七天一天两次:5毫升的发酵牛奶含有之间和克隆形成单位/毫升l .嗜酸的NCDO 1748 (),5毫升醋果冻(),5毫升的雌性激素膏()或500毫克甲硝哒唑阴道片()。BV被认为已经治愈1 Amsel标准出席4和8周。4和8周后的起始治疗的治愈率灭滴灵,醋酸,益生菌,和雌激素组分别为93%,18%,7%,和6%,分别;没有统计分析报告。在这种情况下,所谓的益生菌并不是有效的。没有提供信息的应变。

BV的治愈率,57岁的女性平均年龄24研究与“益生菌”或安慰剂治疗后在双盲试验中(91年]。受试者被随机分配接受阴道栓剂包含菌落的l .嗜酸的()或安慰剂()。阴道栓剂是一天两次服用了6天。症状决议没有明确定义,被用来评估BV的治愈。在治疗开始后7 - 10天,BV症状缺席益生菌组中57%的女性和0%的女性在安慰剂组()。在20岁到40岁的起始治疗,益生菌组的痊愈率降至21%,保持在0%的安慰剂组()。这个构思拙劣研究很难解释和不足来验证产品的功效。

埃里克森et al。92年]研究了乳酸杆菌增强抗生素治愈BV通过双盲,安慰剂对照试验,包括187名女性,年龄中位数为32个两个月经周期。非盲治疗克林霉素100毫克/天是管理所有患者3天。受试者被随机分配到两个治疗组,需要至少5个卫生棉条在未来月经期。治疗组服用安慰剂卫生棉条()和卫生棉条浸渍酵母,l . gasseri,喂食在每个卫生棉条菌落()。治愈率BV的评估缺乏Amsel标准第二个月经期后的益生菌和安慰剂组,并发现56%和62%,分别为()。感染假丝酵母据报道14.3%的受试者在益生菌组和安慰剂组13.5%的患者。可行的每个卫生棉条的细菌数量减少通过研究结束的菌落。简而言之,这个产品是不成功的。管理的基本原理乳酸杆菌在月经期间可以质疑,因为它暴露用户的血液直接生物,和月经的冲洗效果可能nonconducive阴道乳酸杆菌重新繁衍。

比较阴道内的益生菌和甲硝唑凝胶治疗40名女性(年龄在18至50)与BV是由一个单盲研究Anukam et al。93年]。的存在3 Amsel标准,纽金特得分7,和积极的唾液酸酶测试导致了BV诊断。病人被随机分为两个治疗组为5天。他们要么插入阴道内的胶囊喂食GR-1和这种l .RC-14在菌落夜间((每天两次)或应用0.75%甲硝唑凝胶)。纽金特得分的3在30天表示BV的治愈。BV治愈率88%益生菌组和50%甲硝唑组被发现()。过早地停止了治疗患者甲硝哒唑和益生菌组为10%和15%,分别。这项研究中,尽管规模较小,表明益生菌治疗BV的潜力。

益生菌或安慰剂结合口服灭滴灵的疗效评估125年年龄在18岁到44岁的女性(94年]。口服灭滴灵在500毫克每日两次为7天,所有的病人,他们被随机分配接受每天口服胶囊包含安慰剂()或喂食GR-1和这种l .RC-14在克隆形成单位(),总治疗时间30天。30天,年底BV被认为是没有如果病人唾液酸酶测试和纽金特得分为负3所示。这是在40%的安慰剂和益生菌研究对象的88% ()。如果分数被认为是一个中间Nugent BV的“治疗”,甲硝唑和益生菌的治愈率是100%和70%甲硝哒唑和安慰剂。这项研究很重要,因为它意味着益生菌可以增强抗生素在治疗疾病的影响。进一步的研究证实了这种效果,但等待出版。

4所示。益生菌可能带来的负面影响

每年,超过十亿剂量的益生菌在世界范围内,管理以及管理泌尿生殖健康有良好的耐受性11,75年,93年- - - - - -96年]。此外,口腔、胃肠道和女性泌尿生殖道居住着乳酸菌(96年]。然而,心内膜炎,菌血症引起的乳酸杆菌是极其罕见的。大多数病例发生在慢性疾病或病症患者提供从肠漏直接进入血液中。只有1.7%的菌血症241例,心内膜炎,局部感染有关乳酸菌调查的大炮等人被认为有可能与大量消费乳制品(97年]。只有一种情况乳酸菌从益生菌菌株分离这是没有区别的。没有的物种之间的联系乳酸菌孤立和感染或死亡的类型。最近的一项研究,直接灌输six-strain产品严重,患者的肠道细菌可能致命的胰腺炎描绘益生菌是危险的(97年]。然而,产品从未被证明是益生菌,这是管理作为药物与益生菌的99.9%,随机化过程导致multiorgan衰竭患者接受大剂量的活细菌,和作者未能提供一个理由在一个适当的动物模型研究。这一切导致了不必要的负面宣传领域的益生菌(98年]。

然而,益生菌的安全性使用时必须不断监控和考虑做临床研究。抗生素耐药性转移的潜力是需要考虑的一个因素,尽管它还有待证明,益生菌以任何方式造成耐药性,或疾病。相反,过度使用抗生素,特别是在牲畜饲料和长期预防感染,仍然是一个越来越担心耐药性的根本原因。努力替代预防性抗生素,益生菌,特别是儿童复发性泌尿道感染(70年],或许有些病人准备接受手术99年),是值得追求的。

5。结论

分子的方法提供了一个更加清晰的认识是动态的微生物存在,短期和长期,阴道。宿主的防御,包括其中的一些执行的函数有机会病原体微生物引起的感染。使用益生菌乳酸杆菌预防感染有很好的理由,和一个卓越的安全记录,但到目前为止,只有几株临床已经证明是有效的,特别是防止BV。至关重要,菌株的特征以及临床试验使用选择的交付系统(口腔、阴道干燥粉,或暂停)。女性的优势是他们可以服用益生菌。需要更多的研究来优化阴道微生物群的防御属性,但潜力仍然是许多女性的健康可以通过益生菌改善干预。

承认

这个工作是由NSERC和AFMnet支持。

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