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Histoprotective效果的精油柑橘aurantifolia在Testosterone-Induced良性前列腺增生大鼠
文摘
背景。良性前列腺增生(BPH)是一种常见的泌尿疾病报道老龄人。客观的。柠檬精油的研究评估histoprotective效果(LEO)在大鼠模型testosterone-induced良性前列腺增生(BPH)和评估其睾丸扭转testosterone-mediated变化的能力,肾脏和肝脏。材料和方法。成年的雄性sd(中年龄在12周,240 - 390 g)雄性老鼠肌内注射睾酮enanthate (TE)(10毫克/公斤)橄榄油十天重新建立良性前列腺增生(血清PSA水平≥1.24 ng / ml)。经过确认的BPH(持续血清PSA水平≥1.24 ng / ml),老鼠在所有组(狮子座:30、100和300毫克/公斤,阿宝,n= 6;非那雄胺:15毫克/公斤,阿宝,n= 6)除了模型(BPH没有治疗)和虚假的(没有BPH和治疗)组治疗21天。在治疗结束时,老鼠anesthetised和血液通过心脏穿刺收集确定血清PSA和总抗氧化能力(TAC)的水平。前列腺、睾丸、肾和肝是收获,称重,组织学检查加工和染色)。结果。狮子座——和finasteride-treated组记录较小的意思是前列腺重量相对于模型组。基线是指血清PSA水平的狮子座,finasteride-treated组显著减少( )相对于模型组。血清TAC水平也在狮子座——finasteride-treated组相对于模型组。LEO-treated组减少了腺上皮变厚,小腺泡,更少的前列腺分泌物和更多的肌纤维基质相对于模型组。狮子座和非那雄胺治疗改善histomorphological特性产生的睾丸,肾脏,肝脏与模型组相比。结论。现在的结果,柑橘aurantifolia狮子座可能拥有活跃的代理,可以探索对良性前列腺增生转化医学。
1。介绍
良性前列腺增生(BPH)是一种常见的泌尿疾病报道老龄人(1]。障碍是一种良性控制前列腺实质细胞的增殖,导致前列腺增大(2]。男性的前列腺是一个重要的生殖器官,由支tubuloacinar腺上皮嵌入纤维肌性的基质。分泌腺的贡献五分之一到三分之一(20 - 33.3%)的体积,和有必要精子激活由于其分泌物的构成包括柠檬酸和酶如溶纤维蛋白酵素、透明质酸酶和磷酸酸(3]。良性前列腺增生的病理生理学是不清楚;然而,它的病因是由于炎症4)和/或氧化应激(5]。炎症是已知的与过度的细胞增殖和死亡代偿增生可能发生从慢性炎症细胞死亡后(6]。氧化应激也会产生不稳定的化学物种造成损害信使rna, DNA和蛋白质参与细胞死亡和扩散7]。因此,富含抗氧化剂和/或抗炎药尤其是天然产品的起源可能预防或延迟BPH的进展。有趣的是,精油柑橘aurantifolia已经证明了抗炎和抗氧化性能。
柠檬精油是来自水果的皮柑橘aurantifolia。柠檬精油已经调查了他们的药用价值8- - - - - -11]。尽管如此,它对不受控制的良性前列腺增生的影响还有待研究和探索。柠檬精油是当地用作甜味剂在食品行业,但最近被证明具有抗菌(12,13,抗炎13,抗癌8和抗氧化14由于其植物化学的成分]属性。因此,柠檬精油可以改善变量表明良性前列腺增生。这项研究调查了柠檬精油的防护潜力(LEO)在前列腺的雄性sd雄性白化病老鼠实验中诱导前列腺肥大。
良性前列腺增生也以高血清和血浆睾酮水平。Hypertestosteronemia据报道,引起肾脏损伤,睾丸,并可能,其他的身体器官(15,16]。研究还旨在调查如果柠檬精油能改善testosterone-induced组织学的变化选择器官包括前列腺、睾丸、肝脏和肾脏。
2。材料和方法
2.1。药物和化学物质
睾酮从添加制药(GH)有限公司购买,阿克拉,加纳。非那雄胺从海岸角教学医院药房购买,Abura海岸角,加纳。化学物质用于研究包括phosphomolybdenum,试剂由混合1:1:1比例,钼酸铵(4毫米)磷酸钠(28毫米),硫酸(0.6米)、抗坏血酸(20 - 200μ从生物化学部门g / mL),加纳海岸角大学。
2.2。准备的精油柑橘aurantifolia水果
从成熟水果的皮中提取石油柑橘aurantifolia由hydrodistillation使用修改后的Clevenger装置。的未熟的水果柑橘aurantifolia家庭的芸香料收集从Amissakrom Ekroful Mfantseman西部地区的中部地区,加纳。样本检验和验证生物科学学院的植物标本单位海岸角大学加纳,凭证标本(SBS / UCC / 102)沉积。
2.3。GC /质谱分析生狮子座的化学成分
狮子座是存储在一个冰箱在4°C之前,气相色谱质谱(gc - ms)分析使用惠普6890系列,配备了惠普Chemstation数据处理器,配有HP-Innowax键合相毛细管柱:30 m×320μm id.和0.50μm膜厚度(美国帕洛阿尔托惠普)。列温度是40°C(8分钟。)到180°C 3°C /分钟。,180 - 230°C在20°C /分钟。,230°C(20分钟);喷油器温度为250°C和检测器温度250°C。载气是H2(34个kPa)和分流比1:50,体积注射是1μL和在己烷稀释(1:10)hydrodistillation样本和1μL为超临界抽提样品整洁。
进行了GC / MS分析在6890 / MSD5973休利特与质量选择检测器气相色谱仪,配备惠普Chemstation软件和使用威利275光谱数据17与一些修改)。短暂,熔融石英毛细管柱HP-Innowax: 30 m×250μ0.25米,μm膜厚度(美国帕洛阿尔托惠普)使用。GC / MS的设定温度一样GC分析。界面温度和分流比280°C和1:分别为100。他(56 kPa),载气流量:1.0毫升/分钟。,ionization energy 70 eV, mass range 40–350, volume injected 0.5 μL,溶剂减少3.5分钟。被使用。单个组件的描述是基于比较的GC保留指数(RI)极地列和比较他们的GC / MS质谱的那些文学作品中描述。
2.4。诱导的大鼠前列腺肥大
三十六(36)健康成年男性的雄性sd大鼠中12岁,体重240 - 390克从野口的动物育种单位购买纪念医学研究所,加纳大学Legon,加纳,和运输的动物屋生物科学学院的海岸角大学加纳,实验进行。老鼠被允许开始之前两个星期来适应实验室条件下实验环境条件下的温度、相对湿度和12小时光/暗周期。他们提供了一个标准球饮食(种植者土豆泥,Essaar,加纳)和水随意。
BPH成立于30只成年雄性大鼠注射睾酮(IM) enanthate(10毫克/公斤)重组在橄榄油替代每个老鼠十天的大腿。剩下的六个老鼠注射用橄榄油(IM)(5毫升/公斤)交替大腿十天。11日th天,老鼠anesthetised石油醚,心脏穿刺是由一个训练有素的技术人员收集血液基线血清PSA水平的决心。所有的小鼠注射睾酮enanthate血清PSA≥1.24 ng / ml,被随机安排六分成五组。老鼠接受狮子座(30、100和300毫克/公斤,阿宝)和非那雄胺(15毫克/公斤,阿宝)每天21天,而模型组的老鼠没有任何治疗除了获得食物和水。老鼠接受只有橄榄油注入血清PSA≤0.0010 ng / ml,被用来作为虚假的组。组1:testosterone-enanthate +没有柠檬精油/非那雄胺(模型)(n= 6)。组2:testosterone-enanthate + 30毫克/公斤的柠檬精油(n= 6)。第三组:testosterone-enanthate柠檬精油+ 100毫克/公斤(n= 6)。第四组:testosterone-enanthate柠檬精油+ 300毫克/公斤(n= 6)。组5:testosterone-enanthate + 15毫克/公斤的非那雄胺(n= 6)。第六组:橄榄油+没有柠檬精油/非那雄胺(假的)(n= 6)。
2.5。麻醉诱导和孤立的器官
在21天的治疗,所有的老鼠都anesthetised使用氯仿吸入,开胸心脏穿刺后进行收集血液血清PSA水平和总抗氧化能力(TAC)的决心。老鼠都牺牲了,一些器官(前列腺、肝、肾和睾丸)仔细地收获了常规组织处理和染色。
2.6。血清PSA测量使用ELISA
商业定量酶联免疫吸附试验被用来确定在BPH诱导大鼠血清PSA水平。25毫升(25μL)血清样本或校准器(0,2.5,5.0,10、25、50 ng / ml矩阵的血清PSA)与100年被安置在microtitre井预镀μL antibody-enzyme共轭(HRP-labeled anti-mouse PSA),混合形成三明治复杂表面的井,并孵化30分钟在20 - 25°C。共轭和游离抗原过剩洗五次使用300年μL组成的解决方案1:19 Tris-Buffered稀释的盐水。一个100μL substrate-reagent混合物由1.2毫米3,3′,5、5′- tetramethylbenzidine(三甲)和≤6.0毫米过氧化氢被添加到每个好之后总混合是在20 - 25°C的环境在15分钟。反应在100年停止使用μL的0.5 M硫酸。混合物的吸光度测量使用Urit 680酶标分析仪波长450 nm。随后血清PSA浓度计算通过一条直线图形绘制吸光度(纵坐标)和各自的校准器(横坐标)浓度。
2.7。血浆总抗氧化能力(TAC)
等离子体的总抗氧化能力测定使用phosphomolybdenum方法所描述的普列托et al。18]。试剂溶液是由混合1:1:1的比例,钼酸铵(4毫米)磷酸钠(28毫米)和硫酸(0.6米)。五百毫升(500μL)的等离子体与3毫升的混合试剂溶液在不同的试管,和反应混合随后在95°C的环境为70分钟。混合物的吸光度为695 nm使用分光光度计对空白后冷却到室温。该方法重复使用各种浓度(20 - 200μg / mL)的标准,抗坏血酸。每个浓度制备的副本。包含0.5毫升甲醇的混合物和3毫升试剂溶液被用作空白。总抗氧化能力(TAC)的等离子体中表达抗坏血酸(AscAE)等价物。
2.8。统计分析
数据分析使用GraphPad Prism 7.00软件(美国GraphPad拉霍亚,CA)。数据被表示为意味着±均值的标准误差(SEM)每组。然后使用方差分析确定统计学意义(方差分析)。测试显示组间的显著差异被多重比较分析程序使用Bonferroni的多重比较测试。是水平的意义 。
2.9。伦理批准
实验动物是处理严格遵守实验室动物的保健和人道的使用指南(国家研究委员会,1996年)和美国动物科学(过程)法案,1986年,和相关的指导方针,欧盟指令2010/63 /欧盟动物实验。
3所示。结果
3.1。化学成分和狮子座的特征
狮子座的GC / MS分析鉴定了十(10)phyto-constituents(表1)。germacrene的两个主要的同分异构体,A和B,被确定(61.2%),其次是蒎烯(14%)和莰烷(11%),分别为。如表所示1,其余组件芳樟醇调光器(2.9%)、柠檬醛(2.9%)、茴香脑(1.5%)、苯甲醚(1.1%),2,6-dimethylheptan-2-ol (demitol)(0.6%),和黄樟油精(0.3%)。从GC谱和提取米/z数据(表18),组件标签米/z152年被确认为柠檬醛与一个典型的分裂模式描述女士光谱与文献中数据(19]。确认化合物,分裂的机制也计算与字典的天然产品在线数据库理论值(http://dnp.chemnetbase.com/)。根据女士分裂模式,几个萜烯衍生品被确定(表1)。因此,分子2、3和4(补充数据图S2和方案S2)被确定为同分异构体germacrene和芳樟醇的调光器,分别。表中给出1是分子1在保留时间(Rt) 5.05分钟。产生一个前体离子米/z136 (+H] (C10H16)。质谱仪的分裂分子(补充数据图S1和方案S1)产品离子生成的米/z121年,造成的损失甲基(−15 Da)后可能1,2甲基二甲基衍生物的重排蒎烯更稳定的导数β蒎烯(计划S1)。产品离子米/z93年对应的损失丙烯基组(43质量(−43 Da))和一个低音强度的峰值100%。分子被记录β蒎烯以来大量的离子米/z= 41是超过一半的基础的同时,达到顶峰α同分异构体总是小于四分之一(20.]。这个分子(米/z136)也有别于其他同分异构体,如柠檬烯基峰米/z68年(21]。基于单个分子的分裂模式,积极分子2 - 10是识别和特征同样提出了补充数据(图和方案S1- - - - - -S6)。其他成分如demitol (米/z145)、黄樟油精(米/z161)、茴香脑(米/z147)和苯甲醚(米/z110)也认同独特的分裂模式作为报道在表1。
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3.2。狮子座对前列腺的影响
的意思是前列腺重量实验(图组1):正常模式,低剂量、中剂量、高剂量,和非那雄胺是0.333±0.018克;0.853±0.091克;0.657±0.023克;0.785±0.026克;分别为0.600±0.003 g和0.356±0.008 g(补充表S1)。的意思是前列腺重量testosterone-injected组:模型、LD,医学博士,高清,非那雄胺是155.93% ( ),97.12% ( ),135.52% ( ),80.02% ( )和6.66% ( )分别比正常对照组(补充表S1)。的平均前列腺重量基本油老鼠较小的比模型组,但差异不显著( )。Finasteride-treated组显著降低意味着前列腺重量比所有必要的油组( )除了高剂量组( )(补充表S1)。
3.3。治疗对血清PSA水平的影响
平均血清PSA水平(ng / ml)(图2)实验组治疗前后是虚假的组(0.0010±0.0002,0.0010±0.0000),模型组(1.4720±0.0370,1.4890±0.0870)、LD(1.4570±0.1060, 0.1870±0.1080),医学博士(1.6350±0.2920,0.5020±0.1550),高清(1.3450±0.3960,0.0010±0.0000),和非那雄胺(1.2490±0.2130,0.0010±0.0001)。testosterone-injected组的平均血清PSA水平显著高于未接受注射睾丸激素的正常。经过21天的治疗,所有的精油和非那雄胺治疗组的血清PSA水平显著降低( )除了模型组。正常组则没有睾丸激素注射血清PSA水平无显著变化。
3.4。治疗对前列腺组织学的影响
经过10天的睾丸激素enanthate注入,Testosterone-injected组上皮更厚,更大的腺泡,和更多的前列腺分泌物。虚假的组薄上皮和更少的前列腺分泌物(图3)。21天的治疗后,testosterone-injected老鼠有更多的前列腺分泌物和薄层的纤维肌性的间质腺泡之间相比,正常的控制(图4)。老鼠是管理与低剂量(LD)、30毫克/公斤的柠檬精油histoarchitecture显示没有明显的修复的组织。有非常薄的纤维肌性的基质在每个腺泡之间,和更多的前列腺分泌活动观察模型组相比。老鼠mid-dose组(MD), 100毫克/公斤,似乎有一层厚厚的纤维肌性的间质腺泡之间,也有更多的前列腺分泌物,而低剂量组。治疗高剂量(HD), 300毫克/公斤,似乎有一层厚的纤维肌性的间质腺泡之间,与更多的前列腺腺泡的分泌物。
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3.5。治疗对总抗氧化能力的影响
平均血浆总抗氧化能力(TAC) (AscAEqμg / ml)的实验小组如下:模型(453.3±42.1),低剂量(685.5±35.61),中间剂量(783.2±73.14),高剂量(901.6±0.7782),非那雄胺(909.4±20.44)和虚假的(1015±168.2)。必要的油组记录的增加意味着等离子TAC存在剂量依赖的相关性。单向方差分析测试表明,意味着等离子TAC dose-treated高,finasteride-treated和虚假的组明显高于模型组( )(图5)。
3.6。治疗对睾丸组织学的影响
与虚假的集团相比,细精管模型组大鼠的萎缩与生殖上皮出现少紧凑或侵蚀,作为嗜酸性分泌物intertubular空间(图6)。精子细胞大多是没有中心的小管。小管与精子出现嗜酸性粒细胞的从中取髓。同时,大多数细胞形成的生殖上皮细精管和tubulointerstitium致密的细胞核。finasteride-treated组只有几个与侵蚀生殖上皮细精管。生发上皮细胞大多是紧凑。致密的生殖上皮的变化仅限于细胞层接近细精管的基膜。石灰基本油组减少了萎缩与紧凑的生殖上皮细精管剂量依赖性的方式。阻力指标空间也许可以生殖上皮的痕迹固缩,在场中、低剂量组,但几乎没有在高剂量组(图7)。
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3.7。治疗对肝脏组织学的影响
细胞质空泡形成的显示模型组肝细胞肿大,肿大细胞核和核仁或致密的细胞核。一些肝细胞出现小嗜酸性胞浆。正弦曲线分离肝细胞胆汁积累和枯氏细胞。Finasteride-treated组肝细胞与淡染色细胞质,略大核突出的核仁。低剂量LEO-treated组肝细胞胞质空泡形成和densely-stained核以及广泛的正弦曲线与温和胆汁积累。LEO-treated中间剂量组肝细胞中等数量的致密的细胞核和细胞质空泡形成。正弦曲线相对缩小,温和的胆汁积累。现在还在血管中核破裂核碎片。高剂量LEO-treated组肝细胞胞质空泡形成,核肿大与突出的核仁。致密的核和胆汁积累的正弦曲线几乎缺席。 Present also in the blood vessels were karyorrhexis nuclear fragments (Figure8)。
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3.8。治疗对肾脏组织学的影响
模型组的肾显微图显示小管萎缩和肾小体或弥漫性血管舒张和/或炎症细胞的浸润肾小球和tubulointerstitium,肾小管坏死;和髓射线小管扩张。finasteride-treated组轻度血管舒张和稀疏扩大肾小球和肾小体和髓射线小管无扩张。然而,肾小球和tubulointerstitium与炎症细胞渗透,和近曲小管有致密的细胞核。石灰主要油组显示剂量依赖性降低这些特性的严重程度。高剂量LEO-treated组肾脏功能与finasteride-treated组(图9)。
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4所示。讨论
柑橘aurantifolia柠檬精油是评估其改善的能力变量表明良性前列腺增生(BPH)在活的有机体内。柠檬精油的效果在睾丸激素诱导组织学的变化选择器官包括睾丸、肝脏和肾脏因此评估。因此,良性前列腺增生是评估使用血清前列腺特异抗原(PSA)水平,体重,和前列腺的组织学研究。
良性前列腺增生的特点是前列腺增大的高潮到前列腺的重量的增加(20.]。在这项研究中,testosterone-induced良性前列腺增生大鼠组相比有显著提高前列腺重量的骗局。前列腺肿大的类似的结果在睾丸激素政府一直在一项研究中报道了Mbaka et al。21),histomorphological变化与外源性睾酮和雌二醇诱发良性前列腺增生成年雄性老鼠。睾酮和/或其活性形式二氢睾酮最终激活生长因子调节细胞增殖和死亡在前列腺包括基质细胞和上皮细胞的前列腺22]。在良性前列腺增生,TGF -β促进前列腺细胞死亡是表达下调,尽管KGF的过度表达,EGF, IGF而促进上皮和间质增生(23- - - - - -28]。
相比,柠檬精油(LEO)和finasteride-treated组,模型组有显著提高前列腺重量。LEO-treated群,高剂量组比模型组显著较小的意思是前列腺重量,狮子座的象征c . aurantifolia是p潜在的预防或延缓前列腺肥大。
另一个重要的生物标志物对良性前列腺增生的诊断血清前列腺特异抗原(PSA)水平。PSA是一种丝氨酸蛋白酶糖蛋白自然产生的前列腺上皮细胞,并产生微量血清,但是看到在很大程度上提升良性前列腺增生和前列腺癌(29日]。因此,减少血清PSA水平表明试验药物的有效性或自然代理治疗良性前列腺增生。在这项研究中,前政府的柠檬精油和非那雄胺、血清PSA水平显著升高大鼠接受睾酮enanthate注入,与虚假的集团没有收到睾丸激素注射。治疗后,模型组的血清PSA水平明显高于治疗组。这个结果与评价上的一项研究的结果白wilfordii能力改善testosterone-induced良性前列腺增生(30.]。
中低剂量的平均血清PSA水平狮子座治疗组明显高于非那雄胺治疗组。另一方面,平均血清PSA水平高剂量利奥组没有显著不同于finasteride-treatment组,证明其有效性。睾酮和/或二氢睾酮的影响之一雄激素受体复杂元素的绑定到雄激素反应蛋白质的表达PSA (31日,32]。狮子座的植物化学物质识别可能积极降低血清PSA最小化或防止睾丸激素转换成二氢睾酮通过抑制酶5α睾酮还原酶或竞争性抑制绑定的雄激素受体或二氢睾酮。非那雄胺是更有效的比中低剂量的柠檬精油的降低血清PSA水平的能力。非那雄胺优先抑制II型5α还原酶,随后封锁外围转换DHT的睾酮。这些导致双氢睾酮的血清和组织水平低,最小的适度增加血清睾酮浓度以及大幅增加前列腺睾酮浓度(33]。非那雄胺是一个更为纯化化合物,与柠檬精油是植物化学物质混合变量通过GC分析。特定剂量的非那雄胺,因此,相对更高的剂量石灰至关重要,作为观察高剂量,需要产生类似的效果。这可能解释为什么低剂量的柠檬精油不能产生结果类似于非那雄胺。尽管这个柠檬精油都是现成,非那雄胺相比相对便宜。
此外,恢复前列腺histoarchitecture是一个重要的参数用于各种研究评估anti-BPH代理的效力。到目前为止,没有任何已知的研究评论前列腺分泌和BPH发展之间的关系。在这项研究中,BPH-untreated集团产生更多的前列腺分泌物,而所有BPH-treatment和虚假的组。,腺上皮增厚的腺体不管叶在模型组更明显比柠檬精油和finasteride-treated组。雄激素睾酮和双氢睾酮(DHT)是已知的与细胞增殖的规定,具体来说,androgen-dependent器官像前列腺和精囊31日]。外源性睾丸激素,管理通常被转化为二氢睾酮,绑定后雄激素受体增加androgen-dependent基因的转录来刺激蛋白质合成。整体机制导致细胞的增殖,通过刺激转录的生长因子促有丝分裂的前列腺上皮和间质细胞,因此,增厚的腺上皮17]。
良性前列腺增生是增加血清中自由基的存在;因此,研究植物提取物的能力减少自由基对良性前列腺增生的治疗至关重要。据报道,Hypotestosteronemia导致组织(氧化自由基物种的形成32)通过影响三个主要的抗氧化酶的活性,也就是说,过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶在人类睾丸(33),或表达下调prooxidant酶的活动(例如NADPH-oxidase)在前列腺34,35]。在这项研究中,血清总抗氧化能力(TAC)被用来量化剩余血清中的抗氧化剂。模型组的血清TAC而石灰基本油组血清中记录的增加存在剂量依赖的相关性TAC的水平。柠檬精油的抗氧化潜力已经得到证实在体外用鸡蛋清蛋白测定和血红细胞模型,因此,摄取的石油可能会增加血浆抗氧化剂从而导致石灰主要油组有更高的等离子TAC。氧自由基的积累组织或等离子体组织的组织学损伤(36,37]。
睾丸激素会影响多个器官包括肾脏(16,38- - - - - -41)、睾丸、肝脏(39,40]。因此hypotestosteronemia影响选择身体器官的组织学评估。模型组记录比石油和组织学损害finasteride-treated组。组织学变化研究中观察到的可能是由于睾丸激素产生氧化stress-mediated损伤。血清睾酮并不确定,但血清PSA水平与血清睾酮水平有正相关关系。finasteride-treated组血清PSA较小,因此,这群人可能会记录低血清睾酮,从而最小化testosterone-mediated组织学变化。石油,治疗组也记录的剂量依赖性降低组织学变化与高剂量油组比低,拥有更好的组织学结果mid-dose组。
5。结论
柠檬精油从生柑橘aurantifolia展示了强大的anti-benign前列腺增生的活动导致血清PSA水平显著降低,减少前列腺肿大并恢复实验老鼠testosterone-induced组织学变化。柠檬精油的柑橘aurantifolia可能被用作另一种药物管理良性前列腺增生,因此应该作进一步的调查获得其全部潜力作为药物。因此,个体植物化学物质需要研究建立特定的植物化学的施加特定的生物活性和作用机理和它们之间是否有协同作用。
数据可用性
使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者要求dacheampong@ucc.edu.gh。
伦理批准
伦理批准这项研究获得了海岸角大学的机构审查委员会(UCCIRB)。ID: UCCIRB /底盘/ 2016/13,海岸角大学海岸角,加纳。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
进行这项研究的合作作者。DOA,监管局、AB和JFO设计研究。DOA, EAA JFO,英航,CKA,联邦航空局,IKB进行实验。DOA, EAA, IKB, AB写了初稿的手稿。CKA进行gc - ms分析和解释数据。FAA, AB, RO、德国产业投资银行和监管管理研究的统计分析和文献搜索和编辑知识内容的最后的手稿。所有作者阅读和批准最终的手稿。
确认
作者感谢生物医学科学系的,海岸角大学加纳,允许他们使用实验室设备在这个研究。相应的作者资助了这项研究。
补充材料
未熟柠檬精油的化学成分GC / MS分析鉴定大约十(10)植物化学物质的主要成分。单一离子通过准确监测(SIM)色谱图生成米/z萜烯的代表在文献[1]是用来确认各自的光谱女士精油组件及其分子基础上计算公式也同位素适合比率(如果)被认为是尽可能接近于零(数字S1-S7)。计划S1-S7和数字S1-S7描绘破碎机械的模式和GC / MS谱石油详细解释的单个组件的主要文本。总之,两个同分异构体Germacrene同分异构体的主要组件(61.2%),其次是Pineen (14%)。其余化合物在微量列在表中1在主文本。山顶贴上2和3在GC光谱米/z207人同分异构体的germacrene MS谱中出现典型的分裂模式(图S2和方案S2)与文献数据[1,2]。所有化合物的分裂机制提出了进一步证实他们的存在(计划S2)。germacrene同分异构体,分裂的第一步反应似乎是打破一个单键通过从分子失去一个电子2。分子2保留时间(Rt)为6.10分钟。(图S2)产生一个前体离子米/z207 [M + H] (C15H26)由于完全崩溃π之,失去一个电子。这导致了一个异丙组的损失。这个分子的分裂(图S2,计划S2)给分子离子米/z136年,来自两个甲基的损失(−30 Da)组和异丙组(七十一质量(−71 Da)后可能1,2甲基二甲基衍生物的重排germacrene更稳定的导数cyclooctene-dimer(计划S2)。产品离子米/z93对应的开环cyclooctene-dimer和损失的米/z44中性碎片形成了基地与峰值100%。同样,分裂机制的所有其他组件(Pineen、苯甲醚、茴香脑、黄樟油精和Demitol)提出了进一步证实他们的存在(S1, S4-S7)。表S1:狮子座对前列腺的影响体重。(补充材料)
引用
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