水杨酸茎皮提取物Burkea africana减轻长春新碱引起的大鼠周围神经病变

摘要

语境．热带草原树的茎皮Burkea africana(科:豆科)在加纳的传统医学中用于治疗各种与疼痛有关的疾病。客观的．本研究旨在探讨水乙醇茎皮提取物可能的抗异变和抗痛觉过敏作用b .非洲"在长春新碱诱导的大鼠周围神经病变模型中。材料和方法．0.1毫克公斤⁻¹在Sprague-Dawley大鼠中，经腹腔注射长春新碱5天，然后休息2天，再持续5天，以建立周围神经病变。影响Burkea africana提取物（BAE）（50-1000 mg kg⁻¹，p、 o。）和praetabalin（10-100 mg kg⁻¹,i.p。)在触觉、中间、机械、冷和热超敏以及Randall-Sellito测试中进行评估。此外，检测坐骨神经组织匀浆中总蛋白、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的水平。结果．BAE (50-1000 mg kg⁻¹订单。)在所有行为测试中显示出与普瑞巴林相似的显著抗异动和抗痛觉过敏作用，方法是增加撤足潜伏期和撤足阈值。此外，该提取物降低了MDA(脂质过氧化产物)和MPO的水平，并导致内源性抗氧化剂(GSH)和抗氧化酶(SOD和CAT)在处理大鼠的组织匀浆中显著增加。结论．本研究结果表明，水乙醇提取的茎皮提取物b .非洲"在大鼠诱导的大鼠诱导的周围神经病变中表现出抗衰弱性和抗听力作用。

1.导言

神经性疼痛通常是由躯体感觉系统的损伤或病理改变引起的，包括中枢神经元和aβ,一个δ，外周C神经元纤维[1］.由于全球人口老龄化，以及大多数癌症患者在化疗后仍能存活，神经性疼痛的患病率预计将增加[2］.在神经性疼痛发病机制中涉及的机制包括兴奋性和抑制性体感觉信号之间的差异，离子通道的变化，以及中枢神经系统中疼痛信息调节方式的不一致[1，3.］.

由于神经性疼痛可能对主要止痛治疗部分或完全无反应[4]，神经性疼痛的药物治疗往往涉及主要指征不是镇痛的药物，如抗癫痫药、抗心律失常药和抗抑郁药[5，6］.长春新碱诱导的大鼠周围神经病变是疼痛研究中常见的模型，类似于人类周围神经病变[4]. 传统上，植物在历史上证明了其作为具有治疗潜力的铅补充剂来源的价值，并且目前是发现和开发新药的重要资源。制药和研究行业现在主要依靠民间植物产品库作为药物发现的资源库[7，8］.在非洲，尤其是加纳北部，包括茎皮在内的各种部分b .非洲"传统上被广泛用于治疗疼痛[9];然而，有很少的科学证明它的功效。因此，目前的研究寻求调查效果b .非洲"茎皮提取物对大鼠实验性周围神经病变神经性疼痛的治疗作用。

2.材料和方法

2.1。化学药品和试剂

硫酸长春新碱（印度马哈拉施特拉塞隆实验室私人有限公司）、普瑞巴林（美国纽约辉瑞公司）、肾上腺素（印度哈里亚纳Coax Bioremedies Private limited）、5,5′-二硫双歧（2-硝基苯甲酸）（DTNB）、二氨基联苯胺（美国科罗拉多州洛夫兰Hach公司）、叠氮化钠（英国曼彻斯特海德原子科学公司），硫代巴比妥酸和牛血清白蛋白（Sigma-Aldrich，圣路易斯）。美国密苏里州）。

2.2. 动物

本研究使用的Sprague Dawley大鼠(200±5 g)购自加纳东部地区Mampong-Akuapem植物药物研究中心。每组5只动物在34 × 47 × 18 cm不锈钢笼中驯化^3.）在药理学系维瓦里用低脂啮齿动物饲料喂养(购自Agricare有限公司，Tanoso, Kumasi)。所有动物被维持在12小时的昼夜循环中，并给予水自由。该研究中所采用的所有实验方案符合药理学伦理委员会和实验动物的护理和使用指南，第8版的标准。

2.3. 植物材料的收集和提取

熟茎皮Burkea africana(钩)取自玉米(9°59′29.6797″N;2°30 ' 51.5059″W)， 2017年4月加纳北部地区。它是由加纳库马西KNUST药剂和药学学院草药学系的George Henry Sam博士鉴定的。一份代金券标本(KNUST/HM1/2017/SB005)保存在学院的植物标本室。将新鲜植物材料进行分类，去除杂质，室温风干5天。干燥的树皮用锤子磨成粗粉(克里斯蒂和诺里斯，切姆斯福德，英国)。用70% v/v乙醇在索氏提取器中提取树皮粉约2 kg。提取的提取物使用旋转蒸发器(Rotavapor R-215, BÜCHI Labortechnik AG, Flawil, Switzerland)进行浓缩，并在35°C下进一步干燥成固体质量(收率= 10.85%) ）在电炉中(Leader Engineering, Widnes Cheshire, UK)。获得的干燥提取物保存在冰箱中直到需要时，并在整个研究过程中称其为BAE或提取物。

２.４.植物化学的筛选

采用Prashant Tiwari等人所描述的标准方法对提取物进行植物化学分析[10.］.

2．5．急性口服毒性试验

24只ICR雄性小鼠（20-25只） g） 实验分为四组(n = 6). 在调查之前，这些动物被剥夺了3年的食物 H第1组为对照组，小鼠仅接受溶媒；第2组、第3组和第4组的治疗剂量分别为50、500和5000 镁 公斤⁻¹．给药后，在24小时内每30分钟对动物进行连续监测，观察动物的形态和行为变化，以及神经和自主反应(如果有的话)，并观察在研究期间是否有死亡。所用的实验方案和程序符合经合组织关于测试化学品急性口服毒性的指导方针[11.］.

2.6。实验设计

在大鼠中诱导外周神经病变，0.1mg kg⁻¹如Woode等人所述，将硫酸长春新碱腹腔注射5天，然后休息2天，并持续5天[12.Flatters和Bennett [13.］.记录最后一剂长春新碱给药前后的伤害反应，以确定动物周围神经病变的建立。

然后老鼠被随机分成七组(n= 10)。I组为长春新碱对照组，给予生理盐水10ml kg⁻¹，i.p。)．II、III、IV组大鼠分别给予BAE 50、500、1000 mg kg⁻¹，p、 o。,分别。V、VI、VII组大鼠分别给予普瑞巴林10、30、100 mg kg⁻¹，i.p。,分别。三十分钟后i.p．注射和口服给药1小时后，在0.5、1、2、3、4和5小时评估大鼠对各种行为测试的反应。使用的行为测试包括von Frey丝(5,9,14 g)，冷水(4±0.5°C)，热水(55±0.5°C)和Randall-Sellito测试。

使用下列公式计算最大可能效应百分比(% MPE): 在哪里l₁=(用药前)停药时间或力度，l₂ = (after drug) withdrawal time or force, andl₀代表截止时间或力量。

在Von Frey丝锥试验中，记录了来自两个后爪的戒断反应，然后表示为百分比响应。因此，如果在10个von Frey灯丝应用中，注意到6个取款，那么该灯丝的百分比响应为60 [13.- - - - - -15.］.

2.7。行为评估

2.7.1. 触觉性痛觉超敏与中度和机械性痛觉过敏

在这项评估中，动物被限制，触觉异位性疼痛被使用von Frey丝评估(IITC生命科学公司。2888型，Woodland Hills, CA, USA)，弯曲力为5 g。正常大鼠对5g力刺激没有反应，因此实验大鼠从5g力下撤出足部表现为神经病变的触觉异位痛。弯曲力为9 g和14 g的Von Frey丝分别用于测定中度和机械性痛觉过敏。无神经元损伤的大鼠在15 g弯曲力作用下会有5-10%的时间后退，9 g弯曲力作用下的反应被认为是中度痛觉过敏。后脚足底中部贴敷6次，每次5 s。对丝状物的抽离反应被记录下来，并作为百分比反应进行估计[12.］.

2.7.2。冷触诱发痛

使用SałatSalat等人描述的方法评估冷刺激引起的尾回缩潜伏期[16.]. 这是通过将老鼠的尾巴浸入4℃的冷水中完成的 ± 0.5°C。用数字计时器测量尾回撤的潜伏期。截止时间为30分钟 为了避免尾部组织损伤，建立了s。对于每只动物，对尾部进行两次记录，并将戒断反应报告为两个值的平均值和计算的最大可能效应百分比（%MPE）。

2.7.3。热水vervaRingsia.

动物对热水的反应如Back之前所述[17.］.在55±0.5℃的热水中浸泡大鼠末梢约4±1.5 cm，记录退尾潜伏期。对每只动物进行两次记录，并记录撤退反应作为两个值的平均值，计算最大可能影响百分比(%MPE)。截止时间为30秒。

第2.7.4。Randall-Sellito测试

如Hosea等人先前所述，用镇痛计（MN-15776，Ugo Basile，Comerio，Vareese，Italy）测量长春新碱诱导的机械伤害性感觉[18.］.镇痛仪通过钝的有机玻璃锥体对左后爪的背侧区域施加压力，直到出现退缩反应。爪退阈值(PWTs)被记录为展示爪退所需的压力(克)。250克的临界值用于防止对肢体的任何组织损伤。痛觉过敏状态的变化以最大可能效应(MPE)的百分比计算。

2.8。生物化学分析

通过高剂量戊巴比妥的实验第15天人道上使用该研究的大鼠（0.1 Gkg⁻¹i.p。）。从后肢和一些相关组织的坐骨神经如其他地方所述分离[19.，置于−4℃下保存。用0.1 M三盐酸缓冲液(pH 7.4)均质坐骨神经组织。样品管中收集的匀浆保持在3和4°C, 2000 rpm离心。将上清液和沉淀收集到不同的管中。用上清液测定总蛋白含量、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平。将附着于坐骨神经组织的匀浆在4℃下以5000 rpm离心10分钟，用于评估髓过氧化物酶(MPO)含量。

2.8.1. 总蛋白质含量

所述方法[20.]被用于本实验。以牛血清白蛋白(BSA)为参比，在660 nm处进行光谱测定。实验pH保持在10到10.5之间。样品中的蛋白质含量由BSA定标图估算。

2.8.2。超氧化物歧化酶（SOD）水平

SOD活性的测定方法由McCord maccord和Fridovich [21.］.总数为500μL匀浆与150 μl冰冷的氯仿和750 μL乙醇(96% v/v)，旋流60 s, 2000 rpm离心20 min，分离沉淀上清。一毫升碳酸缓冲液(0.1 M;pH 10.2)和0.5 mL EDTA (0.6 mM)处理500μ上层清液的L。加入0.05 mL的肾上腺素溶液(1.3 mM)，启动肾上腺素色素形成。使用Synergy H1多模读取器(BioTek Technologies, Winooski, VT, USA)在480 nm处用分光光度法读取吸光度。抑制肾上腺素自氧化所需的SOD量表达如下:

SOD活性以每mg蛋白质为单位表示，其中1个单位是在使用下式计算的25℃下在25℃下显示超氧化物自由基所需的酶量：

2.8.3。过氧化氢酶(CAT)的水平

使用Sinha描述的方法评估CAT活动[22.和Antwi等人[23.］.量0.4 mL H₂O₂（1.18μm）和1ml磷酸盐缓冲液（0.01μm; pH7.0）加入到0.1ml匀浆中，并在25°OC下温育5分钟。然后，然后加入2mL二色素 - 乙酸试剂（含有3份冰醋酸和1部分5％w / v钾二甲酸钾）以终止反应。过氧化氢酶表现出的活性基于H的摩尔消光系数表示为每Mg蛋白质单位₂O₂和39.4 M⁻¹ cm⁻¹620 nm使用Synergy H1多模式阅读器（美国VT威努斯基BioTek Technologies）。一个单位是水解1所需的酶量 毫摩尔氢₂O₂/min, pH值为中性(25°C)，即

2.8.4。降低谷胱甘肽（GSH）水平

测试样本中谷胱甘肽的浓度是按别处所述的方法测定的[24.]. 一百微升（100 μL)的匀浆，加入2.4 mL 0.02 M EDTA，旋转1分钟。然后在4°C下冷却10分钟。2毫升H₂将O和0.5ml 50％w / v Tca加入混合物中并以3000rpm离心5分钟。之后，50 μL 10mm DTNB溶液和2ml Tris缓冲液(0.4 M;pH 8.9)，与1ml上清混合，25℃孵育5 min。对空白也重复反应混合物。使用synergy H1多模读取器(BioTek Technologies, Winooski, VT, USA)在412 nm分光光度法读取吸光度。GSH浓度表达在μMol / mg蛋白质，用曲线测定，

2.8.5。脂质过氧化产物(丙二醛)水平

丙二醛（MDA）形成量的测定如Ohkawa等人先前所述[25.］.1毫升匀浆与3毫升混合物(3毫升20% TCA含0.5% TBA)在试管中混合。95°C加热30分钟，立即冷却，然后以5000 rpm离心10分钟。吸光度最初在532 nm处读取，然后在600 nm处再次读取，使用Synergy H1多模读取器(BioTek Technologies, Winooski, VT, USA)校正非特异性吸光度。MDA-TBA外展的摩尔消光系数为155 mM⁻¹ cm⁻¹，用于从以下等式确定MDA的量：

2.8.6。髓过氧化物酶水平

酶的浓度由Klangprapan等人采用改进的3,3 ' -二氨基联苯胺(DAB)比色法分光光度测定[26.］.通过加入匀浆、0.5 mM DAB溶液和6mm H引发反应₂O₂．加入0.1 mM叠氮化钠终止反应，使用Synergy H1多模读卡器(BioTek Technologies, Winooski, VT, USA)在465 nm处读取吸光度，60 s循环600 s。MPO比活性以每mg蛋白单位表达，其中1个单位的吸光度每60秒增加0.001。

2.9. 统计

所有统计分析均采用GraphPad Prism v. 6.01 (GraphPad Software, San Diego, USA)进行。以处理(被试间)和时间(被试内)为因素，采用双向重复测量方差分析(RM ANOVA)对时间过程曲线进行分析，并采用Dunnett事后检验比较每个时间点的平均处理效果。随后，计算曲线下面积(AUCs)，以确定整体治疗效果和抗伤害感受总分。总镇痛感受得分的差异采用单因素方差分析(one-way ANOVA)，采用土耳其的事后检验(post - hoc test)，使用治疗数据作为数据正态分布的受试者之间的因素。差异被认为在统计学上显著值<0.05。

结果

3.1。植物化学的筛选

定性植物化学测试揭示了生物碱，黄酮类化合物，皂苷，单宁，还原糖，植物甾醇和三萜（表1)．

３．２．急性毒性

在整个24小时的研究期间，所有的动物都存活了下来，从观察来看，小鼠没有表现出任何行为、神经和自主毒性变化的迹象。口服LD_50.因此估计BAE高于5000毫克千克⁻¹．

３．３．水乙醇对黄芪茎皮提取物的影响b .非洲"在触觉异常

10天0.1 mg kg⁻¹长春新碱导致触觉异常痛的发展，如长春新碱对照组所示。与长春新碱对照组相比，BAE或普瑞巴林(PGABA)治疗对5 g von Frey纤维的反应显著下降。方差分析(治疗×时间)显示治疗对两组患者的触觉异位痛均有显著影响(F_{治疗（6,252）}= 22.31, ；F_{时间（3252）} = 27.64, ；F_{互动（18252）} = 1.685, ）(图1(a))及PGABA (F_{治疗（6,252）}= 27.58, ；F_{时间（3252）}= 22.56, ；F_{互动（18252）} = 2.456, ）(图1（b） ）。都是BAE(F₍₃₆₎ = 13.32_， ）(图1(c))及PGABA (F₍₃₆₎= 10.59_， ）(图1(d)治疗后的大鼠表现出明显的异动总分下降，其最高剂量的抑制率分别为69.26%和67.69%。

3.4。水乙醇对黄芪茎皮提取物的影响b .非洲"在中间痛觉过敏

用9 g弯曲力的von Frey纤维评价BAE和普瑞巴林(PGABA)对中度痛觉过敏的影响。与BAE和pgaba处理的动物相比，车辆控制的动物表现出爪子退缩潜伏期的减少。方差分析(治疗×时间)显示，治疗对两组患者的中度痛觉过敏均有显著效果(F_治疗(6245) = 26.76, ；F_时间(3245) = 39.74, ；F_{互动(18245)}= 4.081, ）(图2(a))及PGABA (F_{治疗（6,252）}= 15.32, ；F_{时间（3252）} = 32.43, ；F_{互动（18252）} = 2.456, ）(图2(b))。BAE和普瑞巴林有显著的抗痛觉过敏作用(F₍₃₆₎ = 14.99,(图2（c） ）及F₍₃₆₎ = 19.80,(图2（d） ）在所有试验剂量下，最大可能的抗痛觉过敏作用分别为90.26%和80.13%。

3.5。水乙醇对黄芪茎皮提取物的影响b .非洲"论机械性痛觉过敏

方差分析(治疗×时间)显示，治疗对两组BAE患者的机械性痛觉过敏均有显著效果(F_治疗(6229) = 36.43, ；F_时间(3229)= 45.06, ；F_{互动（18229）}= 4.485, ）(图3.(a))及PGABA (F_{治疗（6,210）} = 19.68, ；F_时间(210) = 31.90, ；F_{互动(18210)}= 3.047, ）(图3.(b))。BAE (50-1000 mg kg⁻¹)的治疗结果是显著的(F₍₃₃₎= 23.11, ）机械性痛觉过敏的剂量依赖性降低，最高剂量为1000 镁 公斤⁻¹生产完全逆转机械痛觉过敏症（图3.（c） ）。同样，普瑞巴林（10-100 镁 公斤⁻¹)也会引起剂量依赖性和显著性(F₍₃₃₎= 13.23,P < 0.0001) decrease in mechanical hyperalgesia with a maximum possible effect of 62.78% (Figure3.(d))。

3.6。水乙醇对黄芪茎皮提取物的影响b .非洲"在寒冷的异常性疼痛

在血管内处理结束时拍摄对冷水（4°C）的基线反应。Anova（治疗×时间）揭示了治疗对Bae的冷异步性的显着效果（F_治疗(6244)= 33.15, ；F_时间(3244) = 89.23, ；F_{互动(18244)} = 7.043, ）(图4(a))及PGABA (F_治疗(6244)= 21.50, ；F_时间(3244) = 49.11, ；F_{互动(18244)}= 3.854, ）(图4(b))。BAE (50-1000 mg kg⁻¹p、 o。)产生了重要的(F₍₃₆₎= 40.24, ）冷性痛觉超敏的剂量依赖性抑制（图4(c)所使用的三种剂量均使尾部对冷刺激退缩潜伏期增加。普雷加巴林(10-100 mg kg⁻¹）也增加了尾撤回的延迟（F₍₃₆₎ = 16.14, ）以剂量依赖的方式，最高剂量可产生182.7±33.23%的抗异变效应(图)4(d))。

3.7。水乙醇对黄芪茎皮提取物的影响b .非洲"在炎热的异常性疼痛

用BAE (50-1000 mg kg)处理⁻¹p、 o。）（F_治疗(6112)= 32.34, ；F_时间(3112)= 37.75, ；F_{互动(18112)} = 3.738, ）(图5（a） ）和普瑞巴林（10-100 镁 公斤⁻¹p、 o。）（F_治疗(6112)= 32.21, ；F_时间(3112) = 47.72, ；F_{互动(18112)}= 3.880, ）(图5(b)显示治疗热异常痛有显著效果。均为BAE (50-1000 mg kg⁻¹p、 o。）（F₍₃₆₎= 22.58, ）普加巴林(10-100 mg kg)⁻¹) (F₍₃₆₎ = 14.25, ）显著且剂量依赖性地抑制热异常(图)5（c）和5（d））分别最大百分比224.1±18.79％和332.1±59.39％。

非洲白刺茎皮水乙醇提取物对机械性痛觉过敏的影响(Randall-Sellito试验)。

方差分析(治疗×时间)显示，治疗对两组BAE患者的机械性痛觉过敏均有显著效果(F_治疗(6246) = 57.24, ；F_时间(3246) = 213.10, ；F_{互动(18246)}= 13.41, ）(图6(a))及PGABA (F_{治疗（6,237）}= 50.41, ；F_时间(3237)= 183.80, ；F_{互动(18237)} = 11.83, ）(图6(b))。BAE (50-1000 mg kg⁻¹p、 o。)剂量依赖性地减轻长春新碱引起的机械性痛觉过敏(F₍₃₆₎= 59.63, ）(图6(c)给予最高剂量的百分比，最大可能效果为142.1±5.76%。同样，普瑞巴林也显著(F₍₃₆₎= 52.18, ）剂量依赖性地抑制机械性痛觉过敏，最大机械性镇痛作用为157.9±8.58%(图)5(d))。

3.8。水乙醇对黄芪茎皮提取物的影响b .非洲"坐骨神经匀浆生物化学

3.8.1. 总蛋白质含量

与naïve和治疗大鼠相比，长春新碱对照组大鼠坐骨神经匀浆中总蛋白水平显著升高(见表1)2)．用BAE 500 mg kg处理⁻¹显著降低(F₍₁₂₎= 11.48, ）总蛋白质含量为3.13 ± 0.18 镁 G⁻¹与长春新碱对照组相比，总蛋白含量为4.37±0.20 mg g⁻¹的组织。同样，普瑞巴林治疗(10 mg kg⁻¹)也能显著减少(F₍₁₅₎ = 4.531, ）大鼠的总蛋白质含量（表1）2)．

3.8.2。超氧化物歧化酶(SOD)

经pei处理的大鼠SOD水平显著升高(F_（4,20） = 81.91, ）与长春新碱对照组比较。急性治疗1000例 镁 公斤⁻¹SOD水平可达0.43±0.0单位mg⁻¹蛋白质(表2)．同样，使用普雷加蛋白处理的动物也表现出显著的(F_（4,20） = 235.4, ）(0.42±0.0)SOD单位mg⁻¹与长春新碱对照组相比，蛋白质含量为0.074 ± 0.03超氧化物歧化酶单位mg⁻¹蛋白质(表2）））。

3.8.3。过氧化氢酶(CAT)的水平

施用长春酮导致过氧化氢酶水平的显着下降（ ）与天真组相比。长春脉对照组表达了0.77±0.18单位猫MG的猫水平降低⁻¹蛋白质与7.45±0.29单位猫mg进行比较⁻¹甘薯猫水平的幼稚群。用普瑞巴林和贝尤治疗后，有显着依赖性和剂量依赖性增加（F_（4,20）= 97.32, ，F₍₄₂₀₎ = 168.2, ，分别在猫水平（表2)．

3.8.4。降低谷胱甘肽（GSH）水平

幼稚组的谷胱甘肽水平为686.7 ± 89.93 μmol mg.⁻¹231.31±16.36μmol mg.⁻¹长春新碱对照组。BAE（1000 镁 公斤⁻¹)导致谷胱甘肽水平显著升高(F_(4、10) = 12.14,P= 0.0007)，其值为548.5±19.04μmol mg.⁻¹(表2)．10 mg kg处理组的谷胱甘肽水平没有显著增加⁻¹普雷加巴林和50毫克公斤⁻¹裴。100 镁 公斤⁻¹普雷加巴林显示显著(F_(4、10) = 13.77,P= 0.0004) GSH水平升高543.41±44.14μmol mg.⁻¹(表2)．

3.8.5. 髓过氧化物酶水平

naïve组的组织匀浆与长春新碱对照组的匀浆相比，显示出较高的MPO水平。BAE治疗能够剂量依赖，显著降低MPO水平(F_(4、10)= 44.21 )．类似地，用普瑞巴林处理的大鼠均质也显着显示出来（F_(4、10)= 35.17, ）MPO水平下降(表2)．

3.8.6. 丙二醛水平

长春新碱对照组MDA水平较naïve组明显升高。BAE治疗效果显著(F_(4、10) = 16.41, ）与长春新碱对照组相比，丙二醛水平呈剂量依赖性降低（表1）2)．同样地，普加巴林治疗组也显示出显著的(F₄₀= 12.60, ）与长春新碱对照组相比，MDA水平呈剂量依赖性下降(见表1)2)．

4.讨论

Burkea africana口服萃取物（BAE）在用长春新碱诱导的外周神经病理疼痛大鼠模型中引发剂量依赖性抗流学性和抗震性效果。血管腺是一种干扰的抗癌剂β-长春花结构域微管蛋白，通过抑制纺锤体微管的形成而改变细胞形态[27.］.癌性神经病变(CIN)的特征是谷氨酸兴奋毒性，由于钠和钙水平的上升和NMDA受体的激活。CIN还导致阿片受体下调;因此，吗啡等阿片类镇痛药对神经性疼痛不敏感[28.]. 然而，正如本研究所证明的，普瑞巴林在减轻化疗引起的伤害感受的实验和临床环境中都是有效的[11.，29.- - - - - -33.］.系统施用0.1毫克千克⁻¹硫酸盐硫酸盐从导致神经元炎症的神经节细胞激发合成和释放细胞因子。炎症刺激Janus激酶转录-3途径（JAK-STAT3途径），导致大鼠神经性疼痛[27.，33.- - - - - -36.］.更重要的是，长春新碱治疗改变了神经系统，并通过神经纤维(C-和A)产生了短暂的传导β-纤维)导致自发疼痛和不寻常的外周和中枢感觉[37.]. 神经病理性疼痛与各种形式的痛觉超敏有关，包括触觉、冷、热和机械性痛觉超敏，这被认为是通过激活小直径纤维（C-和A-纤维）介导的δ-纤维）和大直径纤维（Aβ- 纤维）[38.，39.］.因此，本研究中该提取物对触觉、冷、热以及机械性痛觉过敏的抑制作用可能是由于无髓鞘和有髓鞘的C-、a的动作电位传导发生了改变δ-，及β纤维。也有可能是BAE能够减少长春新碱注射后活跃升高的钙、钠离子的数量。因为BAE已经被证明有消炎作用[40，它还可能减少与长春新碱诱发的神经病变相关的神经元炎症，以及降低NMDA受体的激活。然而，BAE的确切作用机制尚需进一步研究。

在药物诱导的外周神经病变的大鼠模型中，氧化应激和DNA氧化的标志物在全身循环，坐骨神经和腰椎脊髓中增加[41.]. 氧化应激直接参与癌症引起的神经病理性疼痛的发病机制[42.］.许多研究已经证实，通过线粒体毒性、神经炎症和生化变化，氧化应激作为细胞凋亡的中心介质共存[42.，43.］.抗癌药物引起的丝裂毒性损害ATP的产生和细胞信号传导[44.］.这是由先天抗氧化防御与增强脂质过氧化易感性的联系所证明的[41.- - - - - -43.，45.- - - - - -48.]. 更重要的是，其他地方的研究表明，某些抗癌药物（如长春新碱）可以在化疗中引发氧化应激[42.］.氧化应激可以影响肌肉敏感性，报告表明，氧化应激和骨骼肌对疲劳和疼痛的骨骼易感性之间可能存在往复相互作用[49.］.此外，已知自由基通过降低痛觉感受器的阈值和导致痛觉过敏与慢性疼痛状态下的疼痛诱导有关[50.，51.］.长春新碱处理后，应激诱导的SOD、CAT和GSH活性显著下降[42.]. 从这项研究中，脂质过氧化产物、丙二醛和蛋白质羰基含量在应激长春新碱对照动物体内积累。从本研究中获得的坐骨神经匀浆（SNH）表明，BAE治疗可抑制氧化应激，这在保存坐骨神经组织抗氧化能力方面得到了证明。与长春新碱对照组相比，BAE治疗组动物SNH中的内源性抗氧化标记物（如GSH、SOD和CAT）显著升高。生理盐水处理的大鼠与BAE处理的大鼠相比，MDA水平显著升高，MDA是氧化应激的阳性指标。这表明BAE抑制了脂质过氧化和超氧阴离子介导的自由基生成等潜在的损伤过程。BAE的这种明显的抗氧化作用与之前报道的一些关于BAE提取物体外抗氧化活性的研究一致b .非洲"［52.- - - - - -54.］.因此，可以提出，增强内源性抗氧化防御可能在BAE在长春新碱诱导的大鼠神经病变的有效性中发挥作用。

综上所述，本研究证实了水乙醇茎皮提取物的口服作用b .非洲"通过调节坐骨神经组织中的氧化剂/抗氧化平衡和/或抑制炎症介质的产生，可能在大鼠中施加抗滑动性和抗震性效应。/或抑制炎症介质的产生。

数据可用性

用于支持本研究结果的数据可根据要求从相应作者处获得。

利益冲突

作者声明本文的发表不存在利益冲突。

致谢

研究团队感谢GNPC-Local和药剂学系技术人员提供的财务支持，药房和制药科学系，剑，Kumasi，加纳。

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