抗氧化作用在活的有机体内抗炎和抗伤害作用Myrciaria多花植物果皮:阿片类能系统的可能参与

抽象的

这项工作评估了抗氧化性能和体内果皮中获得的提取物的抗闭合性和抗炎作用Myrciaria多花植物(威尔德·韦斯特)o·伯格(桃金娘科)。这种植物在巴西被称为Cambuí.或camboim．将不同的提取物进行比较分析，以确定所选植物化学类(总酚、黄酮类和单体花青素水平)的含量体外抗氧化潜力。选择具有更高潜力的提取物体内评价其抗伤害和抗炎作用。最后，采用高效液相色谱(HPLC)对提取物进行化学表征。MfAE(以丙酮为溶剂得到的提取物)显示较高的酚含量(296 mg GAE/g)和花青素含量(35.65 mg Cy-3-glcE/g)与较高的抗氧化活性相关。MfAE也表现出体内具有抗炎、镇痛作用。这部分抑制炎症和神经源性疼痛阶段，而这种作用被纳洛酮逆转(提示阿片能系统的参与)。MfAE减轻醋酸引起的腹部扭曲。HPLC分析发现没食子酸(及其衍生物)和鞣花酸的存在。总之，这些数据支持使用m .多花植物水果果皮，用于开发功能性食品和营养素。

1.介绍

自由基（和相关的反应物种）通常来自正常代谢，对氧化还原信号通路和免疫防御至关重要[1-4.］．然而，这些分子可以与导致生理系统的损害的细胞结构相互作用[5.-7.］．从这个意义上说，氧化应激与多种疾病的病因有关，如炎症性疾病、慢性疼痛和退行性疾病[8.-10］．

炎症是由几种刺激（机械损伤，有毒化合物，组织缺血和传染性药物）引发的复杂条件，并通过组织改变标记，使免疫细胞的强烈迁移到炎症焦点[11-13］．通常，在消除刺激后降低了促炎物质（细胞因子，一氧化氮和其他反应性物质）的释放，导致分辨率阶段[13那14］．但是，在某些情况下，未实现炎症的分辨率，导致过多或不适当的炎症[11］．这种情况与几种疾病有关，例如癌症，糖尿病，类风湿性关节炎和牛皮癣[12那15］．在这种情况下，高水平的反应性物质会导致组织损伤和器官功能障碍[2那4.那5.］．

炎症介质的过度释放可导致炎症性疼痛的形成[16那17］．例如细胞因子TNF-α, il - 1β， IL-6(由巨噬细胞和其他免疫细胞产生)与伤害性神经元相互作用，调节中枢致敏、疼痛和痛觉过敏[18-20.］．此外，免疫细胞（例如组胺和前列腺素）产生的其他物质也在疼痛调节中起重要作用[17那21那22］．在这种情况下，疼痛和炎症有紧密的调节关系，因为伤害性神经元也调节炎症反应[17那21那23］．

尽管市场上有可用的抗炎和镇痛药物，但这些临床条件的治疗时间表是复杂的，对全球健康系统构成巨大挑战[24那25］．这种情况指出迫切需要开发有效的镇痛药和抗炎药[26-28］．

一些科学证据表明，水果是具有抗氧化特性的化合物的宝贵来源，食用水果可能有助于减少炎症性疾病和慢性疼痛的有害影响[29-32］．从这个意义上说，人们对了解食用水果(及其不同部位)的消炎和镇痛特性越来越感兴趣，以便为支持其作为功能食品和保健品的使用提供更多的见解[30.那33那34］．

Myrciaria多花植物(威尔德·韦斯特)O. Berg (myrtacae)是南美和中美洲的原生植物，分布在巴西的不同生物群落，如亚马逊、卡廷加、塞拉多和大西洋森林。它的果实(在巴西被称为Cambuí.或camboim)是可食用的，常以新鲜、果汁或酒精饮料的形式食用[35］．有些作品表明该植物不同部位的药理特性，如抗氧化剂，抗菌药物和抗癌效应[36那37］．然而，这些水果的药理作用并没有得到适当的解决[35］．特别是有益方面的产品，来源于果皮m .多花植物尚未证明。这项工作分析了植物化学组合物以及抗氧化剂，抗血症和抗炎潜在从水果皮中获得的抗氧化剂和抗炎潜力m .多花植物．

2。材料和方法

2.1。植物材料

的果实m .多花植物被收集的Serra dos Paus Dóias(Exu，伯南布哥，巴西)。该植物材料由Alexandre Gomes da Silva(巴西伯南布哥联邦大学抗生素系)鉴定。标本凭证(编号:92722)保存在伯南布哥农艺研究所植物标本馆。

2.2。植物提取物

这些水果用流水洗净，人工将它们分离成果肉、种子和果皮。果皮样品在40°C下干燥，并还原成细粉。用500 mL乙醚(1:10,w/v)在带盖的棕色玻璃瓶中提取果皮粉(50 g)，在室温(30℃)下剧烈摇动1小时。然后将提取液过滤，再用500ml重复提取两次。在此过程后，用其他溶剂(顺序为氯仿、丙酮和甲醇)提取残渣，所有提取步骤重复上述步骤。每一步提取液在40°C的旋转蒸发器中干燥，生成MfEeE(乙醚)、MfCE(氯仿)、MfAE(丙酮)和MfME(甲醇)。用10 g粉末和100 mL蒸馏水(1:10,w/v)进行水提取;然后对溶液进行过滤和冻干，生成提取物MfAqE。

2.3。植物化学的分析

使用薄层色谱法使用薄层色谱，在各种植物凝胶板上研究了几种植物化学物质（黄酮类化合物，苯丙烷，三萜，类固醇，皂苷，单萜，倍醌，生物碱，花香素，醌，生物碱，花香素，醌，生物碱，花香素，和水溶性单宁。F₂₅₄(ALUGRAM^R.818131, machery - nagel, Germany)，并对每个洗脱系统，使用特定的可视化试剂和标准来识别代谢产物，如表所示1[38-41］．

２.４.总酚含量，总黄酮和单体花青素

使用福林-丘卡图法估算总酚含量[42]，有一些修改。样品20 μ各提取物1 mg/mL加100μL含有folin-ciocalteu试剂。在室温下3分钟后，80次 μ加入碳酸氢钠溶液（0.7米）。将反应在室温下保持2小时。使用微孔板读取器（Biotek Uquant MQX200）在735nm处测量吸光度。甲醇和蒸馏水用作阴性对照。用作标准的Gallic acid，并基于无碱酸的校准曲线计算结果（10-100 μG / ml）并表达为每克提取物（GAE / G.提取物）的Galic酸的mg。

类黄酮含量按氯化铝比色法测定[43］．提取液在1 mg/mL浓度下检测，以槲皮素为标准品，得到标准曲线(10-100)μg / mL)。样品（100 μl）与100混合 μL的试剂[2%的氯化铝(AlCl_3.）在甲醇中];在深色室温环境下1小时后，在420nm处读取甲醇或更高蒸馏水的坯料的吸光度。所得结果表示为每克提取物（Mg QE / G提取物）的槲皮素的Mg当量。实验一式三份完成。

用差示pH法测定单体花青素含量[44］．氯化钾缓冲液(KCl;0.025米;pH值1)和乙酸钠缓冲液(CH_3.CO.₂na;0.4米;使用pH 4.5）。样品（200 μ将L以10mg / ml）混合至每次缓冲液的1.8ml。10分钟后，吸光度在520nm和700nm处读取。蒸馏水用作对照。根据以下等式计算花青素的浓度，结果表示为Cyanidin-3-葡糖苷当量（Cy-3-Glce）：

一种=(吸光度520 nm−吸光度700 nm) (pH 1)−(吸光度520 nm−吸光度700 nm) (pH 4.5);MW(分子量)= 449.2 g/mol Cy-3-glc;DF =稀释倍数(将0.2 mL的样品稀释至2 mL, DF = 10);1 =长度(厘米);ε = 26900, molar extinction coefficient, in L x mol^-1x cm.^-1，Cy-3-Glc;和10¼=转换从g到mg的因素。

2．5．抗氧化试验

2.5.1。DPPH测定法(自由基隔离)

用于评估螯合DPPH的能力（2,2-二苯基-1-Picryl-肼 - 肼）的能力，等分试样为40 μL不同浓度的每种提取物（8.0625至1000 μg/mL)μL在室温下为1mm DPPH溶液（在甲醇中）25分钟，免于光线[45］．未食子酸为阳性对照，甲醇为阴性对照。一个控制解决方案(40μ提取物的l和250 μL用于稀释样品的溶剂）用于排除提取物颜色的可能干扰。使用微孔板读取器（Biotek Uquant MQX200）在517nm下测量每种溶液的吸光度。

2.5.2。abt化验

ABTS(2,2-偶氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸))自由基由5ml ABTS原液(7 mM)与88混合得到μ.140mm过硫酸钾溶液。该混合物在使用前在黑暗和室温下保存16小时。用乙醇稀释ABTS自由基溶液，在734 nm处吸光度为0.7 nm(±0.02)。样品(10μl）将萃取物（1mg / ml）与1ml基团混合6分钟，然后在734nm处读出分光光度计[46］．用品用作标准抗氧化剂（100 μM - 2000μM)。结果以Trolox等效抗氧化能力(TEAC)表示μm te / g提取物。

2.5.3。总抗氧化能力(TAC)

样本(100μL）萃取液（1mg / ml）与1ml试剂溶液（0.6M硫酸，28mM磷酸钠和4mM钼酸铵）组合。将管在95℃下孵育90分钟，然后冷却至室温，并在695nm处读取每个反应的吸光度。控制反应组成为100 μL甲醇与1ml试剂溶液混合[47］．标准品为抗坏血酸(1mg /mL)。结果按以下公式计算，以总抗氧化能力(TAC)相对于抗坏血酸的比值表示。 在哪里S._ABS.为样品(萃取物)的吸光度，B._ABS.是对照的吸光度，和AA_ABS.是抗坏血酸的吸光度。

2.5.4。超氧基自由基螯合的测定

在该测定中，反应混合物由300组成 μl不同浓度的提取物（50-1000 μg / ml），100 μL的NBT（硝基三唑鎓蓝氯化物）（1mg / ml在DMSO溶液中）和1ml碱性DMSO（含有5mM氢氧化钠中的1ml DMSO在0.1mL水中），并在560nm下测量吸光度[48］．

2.6。HPLC分析

对于高效液相色谱(HPLC)分析，称取20 mg MfAE，用50% (v/v)甲醇稀释到2ml的容瓶中，通过0.45过滤μm PVDF膜(machery - nagel®)，用于进样。该系统是Ultimate 3000 (Thermo Fisher Scientific®，EUA)耦合到一个光电二极管阵列探测器(DAD;Thermo Fisher Scientific®)，配备双泵(HPG-3x00RS;Thermo Fisher Scientific®)、脱气器和自动采样器回路体积为20μL（ACC-3000; Thermo Fisher Scientific）。分析的波长设定为270nm。

使用柱Dionex®C在26℃下进行色谱分离₁₈（250 mm×4.6 mm d.i.，5 μm)配备柱前Phenomenex®(C₁₈;4毫米×3.9 μm)。流动相由溶剂A(纯化水，Purelab Classic UV, Elga®)和溶剂B(甲醇，HPLC级，Tedia®)组成，均用0.05%三氟乙酸(Vetec®)酸化，流速调整为0.9 mL/分钟。梯度程序如下:0-10分钟，溶剂B浓度为10-20%;10-13.5分钟，20-25%溶剂B;13.5-18分钟，溶剂B用量为25-40%;18-25分钟，40-80%溶剂B;25-30分钟，80%溶剂B;和30-35分钟，溶剂b的80-10%。MfAE中物质的含量由未食子酸(纯度96%)或鞣花酸(纯度95%)的校准曲线测定，两者均购自Sigma^®(美国)。

2.7。道德陈述

所有使用动物的程序均由巴西伯南布哥联邦大学动物使用伦理委员会批准(CEUA-UFPE;过程数量:0003/2018)。该提案在2018年4月23日举行的中国国际电联- ufpe会议上获得通过。

2.8。动物

实验采用免疫病理实验室(LIKA)提供的瑞士雄性小鼠(30-35 g, 10周)进行。随机喂食标准食物和水，光照/黑暗时间为12 h。在每个实验前(6-8小时)，动物被限制在只喝水的饮食，以避免食物对物质吸收的干扰。

2.9。急性毒性评价

根据经济合作与发展组织（2001年）的说明进行MFAE的急性毒性。分析了MFAE的急性毒性。第1阶段：动物分为三组（N=3.以10mg / kg，100mg / kg和1000mg / kg的剂量接受MFAE。将动物置于观察中24小时以监测其行为和生存。阶段2：MFAE以较高剂量（1600,2900和5000mg / kg;每剂量的一只小鼠施用），然后观察到行为和存活24小时[49］．LD50通过以下等式计算： D._0. = highest dose that did not induce mortality andD._{One hundred.}=导致小鼠死亡的最低剂量。

2.10。抗炎试验

这体内通过角叉菜胶诱导的爪水肿评估MFAE的抗炎作用。为此，将小鼠分配到四组（N=6.）接受以下治疗方法：（i）50 mg / kg的mfae（订单。)， (ii) MfAE含量为100毫克/公斤(订单。），（iii）车辆（0.9％盐水溶液）（订单。）或（iv）吲哚美辛，20mg / kg（订单。)．1小时后，通过注射2％角叉菜烯溶液诱导PAW水肿（15 μL/动物)进入右后爪足底下区域[50.］．对照组:生理盐水(0.9%;15μl）注入左后爪。使用数字游标卡尺测量爪子体积5小时[51.］．通过评估右爪子和左爪子之间的差异来计算对水肿的抑制。

2.11。Antinociceptive化验

2.11.1。醋酸引起的腹痛

小鼠分为四组（N=6.)，并按上述方法处理。腹腔注射醋酸引起痛觉(0.8%;100毫升/ 10 g)。从醋酸注射后5分钟开始，10分钟内按伸展运动次数记录腹部扭曲次数[52.］．

2.11.2。福尔马林测定

在这项实验中，动物被分为五组(N=6.(ii) MfAE浓度为50 mg/kg (订单。），（iii）mfae在100 mg / kg（订单。），（iv）吲哚美辛以20mg / kg（i.p。)及(v)吗啡10mg /kg (订单。)．1小时后，福尔马林溶液（0.9％盐水中2.5％; 20 μL / PAW）施用右后爪的母母植物区域[53.］．研究人员在一个三面装有镜子的房间里观察老鼠的爪子。舔和咬注射的爪子所花费的时间(以秒为单位)作为疼痛的指标。在注射福尔马林后15 - 30分钟内测量反应(第一阶段，神经性疼痛)和炎症性疼痛(第二阶段，炎性疼痛)。

为了评估阿片系统在MfAE镇痛作用中的可能参与，我们用纳洛酮(1 mg/kg，i.p。）在施用MFAE之前30分钟（100mg / kg，订单。）和吗啡（10 mg / kg，订单。)．

2.12。统计分析

这体外在至少两个独立的测定中在三份中以三份进行测定。结果表示为平均值（±标准误差）。使用单向或双向差异分析（ANOVA）进行统计学意义测试了手段之间的差异，然后进行了多种比较的Tukey的测试。IC._50.(抑制50%浓度)通过线性回归计算。在统计分析的结果中，值为被认为具有统计学意义。

3.结果与讨论

３.１.植物化学的分析

MfAqE、MfEeE、MfCE、MfAE和MfME各提取物的得率分别为8.50%、6.60%、2.05%、5.17%和49.27%。提取物的色谱图谱m .多花植物果皮显示有几种次级代谢物的存在(表2)．在MFEEE和MFCE中，发现了单口，Triterpenes，Sesquiterpenes和类固醇。MFAE由黄酮类化合物，苯丙醇，三萜和类固醇，皂苷和可水解的单宁组成。另一方面，MFME和MFAQE具有黄酮类化合物，聚合物原花青素和可水解的单宁的痕量。

果皮提取物中检测到的次级代谢物m .多花植物已为属于属myrciaria.，如类固醇，原花青素，黄酮类化合物和可水解的单宁[36那37那54.］．此外，可食用部分m .多花植物水果由类胡萝卜素（Zeaxanthin，β玉米黄质,13 -CIS.-β-胡萝卜素，α-胡萝卜素，β胡萝卜素,9 -CIS.-β-胡萝卜素)、黄酮类化合物(芦丁)和酚酸(没食子酸和鞣花酸)[35］．

３．２．总酚、黄酮类化合物和单体花青素浓度的比较分析

为了筛选出最有潜力的提取物，我们对酚类、黄酮类和单体花青素的含量进行了比较评价。总酚含量在7.54 mg GAE/g ~ 296.27 mg GAE/g之间变化3.)．MfAE中苯酚含量最高，为296.27 mg GAE/g3.)．

总黄酮含量的水平范围为0.74mg qe / g至16.62mg qe / g（表3.)．MfEeE浓度最高，为16.62 mg QE/g。单体花青素含量为4.34 mg Cy-3-glcE/g ~ 35.65 mg Cy-3-glcE/g3.）和MFAE显示出最高的含量（35.65 cy-3-glce / g）。总之，MFAE显示出酚类化合物和花青素的最高含量。这些类化合物与食物和药用植物的若干有益特性有关[55.-57.］．

3.3。抗氧化活性的比较评价

接下来，采用四种抗氧化方法筛选最具潜力的提取物(见表)4.)．在DPPH检测中，IC越低_50.MfAE的值为63.84μg/mL)，其次为MfME (343.12μg/mL)、MfAqE (350.41 v)和MfEeE (854.94μg / mL)。MfAE对ABTS自由基的抑制能力最高(1630.11)μ.M TEAC / g）和总抗氧化能力（123.91％）。最后，只有MFAE和MFME能够用IC一起隔离超氧化物_50.价值260.27 μg / ml和446.31 μ分别为g / ml（表4.)．

MFAE表现出的最高抗氧化作用可以通过其较高含量的花青素和酚类化合物来解释，因为这些植物化合物的水平显示出阳性相关性与所获得的结果体外抗氧化剂化验(表4.)．此外，MfAE还具有不同种类的次生代谢产物，如类黄酮、苯丙素、三萜类、皂苷和水解单宁。综合这些结果，我们认为MfAE是最有前途的提取物，导致我们选择它作为体内抗炎和抗伤害评估。

3.4。丙酮提取物的HPLC分析m .多花植物

来自果皮果皮（MFAE）的丙酮提取物的色谱谱如图所示1．分析显示没食子酸存在(峰1，保留时间为7.56分钟)和指示性鞣花酸存在(峰7，保留时间为25.52分钟)。其他峰(2到6)是没食子酸的衍生物。化合物的含量分别为:没食子酸0.29±0.0012 g%，没食子酸(衍生物，2 ~ 6个峰)0.33±0.0204 g%，鞣花酸0.54±0.0012 g%。通过对标准品的保留时间和紫外光谱的比较，确定了证据峰(没食子酸和鞣花酸)。此外，他们通过在样品中加入少量的标准溶液来确认。没食子酸和鞣花酸均已检测到m .多花植物[35］．

加仑酸和鞣花酸（及其衍生物）通常在水果和其他植物衍生产品中发现[55.那58.具有抗氧化活性，包括来自myrciaria.属(59.那60.］．此外，一些作品报道，这些化合物是有效的抗炎，镇痛和神经保护剂[60.-62.］．

3．5．急性毒性

口服致死剂量(LD_50.)大于2000 mg/kg (LD_50.= 2154.06 mg/kg)，因此，根据经济合作与发展组织(Organization for Economic Cooperation and Development，简称oecd)，可将其归类为低毒药剂[63.］．因此，选择50 mg/kg和100 mg/kg的剂量体内测定。

3.6。抗炎活性

这体内在Carrageenan诱导水肿的模型中评估MFAE的抗炎。用两种剂量的MFAE治疗的动物证明了爪子水肿的显着减少，与载体处理组（ ）（数字2)．浓度为100 mg/kg的MfAE处理2 h，抑制率最高(98.87%)。当剂量为50 mg/kg时，5 h后效果显著(93.75%)。对照药吲哚美辛(20 mg/kg)治疗3小时后抑制率最高(96.22%)。

角叉菜胶诱导的爪子水肿是一种实验模型，可用于评估作用于急性炎症的新药[64.-66.］．这个测试被认为是一个双相事件;在初始阶段(1 - 3小时)，炎症介质如组胺、血清素和缓激肽的释放，而在后期阶段(3 - 4小时)，环氧化酶2 (COX-2)亚型的合成，导致前列腺素和一氧化氮的释放[67.那68.］．MFAE在观察到的五小时内降低了水肿，表明它在急性炎症过程的两阶段起作用。此外，来自其他的提取物myrciaria.植物在该模型中也表现出抗炎作用[64.那65.］．

结果表明，MfAE对水肿形成的影响可能涉及多个点，如通过COX或不同特定的酶机制抑制炎症介质的合成和/或释放。MfAE中丰富的多酚(类黄酮、花青素)有助于抗炎活性[60.］．然而，基于这些炎症介质和COX抑制以及植物化学分离的补充性研究应该被探索。

3.7。抗闭合性活动

两种剂量的MfAE处理也显著抑制了扭曲的数量(分别为95.16%和95.59%)，与对照(生理盐水)( )．在不同浓度之间没有差异，与吲哚美辛对照也没有差异(图)3.)．在这个实验中，醋酸通过一种依赖于腹腔内的驻留细胞(巨噬细胞和肥大细胞)的机制诱导痛觉。这些细胞释放细胞因子(TNF-α，白细胞介素1β和涉及扭曲响应的白细胞介素8）[69.］．然而，该模型不能推断MFAE的抗血质作用是中环还是外围。

福尔马林测试结果如图所示4.结果表明，在试验的第一阶段(神经源性阶段)，只有100 mg/kg浓度的舔食行为显著降低(86.52%; )．吗啡(10 mg/kg)在此阶段可诱导83.98%的降低。然而，在第二阶段(炎症期)，两种MfAE浓度均显著减少舔食时间( )．50 mg/kg和100 mg/kg对MfAE的抑制率分别为69.47%和82.58%。阳性对照吲哚美辛(20 mg/kg)和吗啡(10 mg/kg)对舔食的抑制率分别为76.45%和94.91%。纳洛酮仅在神经源性阶段恢复MfAE的作用。

福尔马林试验是基于双相疼痛反应的伤害模型;它是一种有用的工具，可以调查新药的作用是否具有镇痛和抗炎作用[70］．发生在第一阶段(神经源性疼痛),5分钟后注射福尔马林的爪子,直接传入纤维和化学刺激痛觉受器激活导致物质p的释放炎症阶段(15到30分钟后注入),发生炎症介质的释放,触发外周炎症反应[53.那71.］．

中央作用镇痛药（如吗啡）能够抑制福尔马林试验的两阶段;相比之下，外周作用药物（例如吲哚美辛）只抑制第二阶段[72.］．我们的结果表明，100mg / kg剂量的MFAE可以减少伤害症的两阶段（ )．在第一阶段，由于纳洛酮反转MFAE的作用，MFAE（100mg / kg）的镇痛作用由阿片类受体的作用介导。该观察结果归因于在纳洛酮（选择性阿片受体拮抗剂）中被拮抗的甲虫机构。

4。结论

这项工作的结果表明，来自皮革的提取物m .多花植物水果是具有抗氧化活性化合物的来源。果皮可能是水果消费的残留物，果皮的使用代表了这些天然产品的可持续应用。此外，通过抗氧化剂和植物化学成分的对比分析，可以选择MfAE(富含酚类化合物和花青素的组分)作为一种具有较高药理潜力的药物。MfAE也表现出明显的抗炎和抗伤害性活动(涉及阿片能系统的作用)。考虑到目前的结果，水果的皮m .多花植物是高价值生物活性化合物的来源，可能有助于与这种水果消耗相关的若干有益效果。从这个意义上讲，水果皮可用于开发功能性食品和营养保健品。

数据可用性

支持本研究结果的数据可在合理的请求时从相应的作者获得。

利益冲突

作者声明本文的发表不存在利益冲突。

作者的贡献

IBSS、AGS、MTSC和MVS构思了研究并进行了研究设计。IBSS、JRSO、AGS、WKC和MVS采集植物材料，进行植物鉴定和提取物制备。IBSS, BSS, JRSO和WKC进行了体内和体外测定。MRAF，RMX和LALS进行了提取物的化学表征。IBSS，BSS，AZ，LCN，PMGP，VLML，MTSC，MV，MRAF，RMX和LALS解释并讨论了结果。IBSS，BSS，AZ，LCN和MVS起草并修订了稿件。所有作者均认批准了此手稿的最终版本。

致谢

作者承认自然产品实验室给出的技术支持，以及联邦Pernambuco大学（UFPE）的生物化学系的分子生物学实验室。这项工作得到了以下巴西机构的支持：Coordenaçãodeaperfeiçoventodedenível上级佩塞洛·deNívelvimento（Copes;财务代码001），Conselho Nacional desenvolvimentocientíficoetecnológico（CNPQ）（CNPQ）（Grants No.405297 / 2018-1和307110/201-1和307110/201-1和307110/2010-4），FundaçãodeAmparoàciênciae tecnologia do estado de pernambuco（APQ-0493-4.03 / 14），而FundaçãodeAmparoàpesquisaeeaodesenvolvimentocientíficoetecnológicodomaranhão（bepp-02241/18）。

参考

1. P. D. Ray, B. W. Huang, Y. Tsuji，“活性氧(ROS)稳态和细胞信号传导中的氧化还原调节”，手机信号，第24卷，第2期5，pp。981-990,2012。视图:出版商的网站|谷歌学术
2. M. Schieber和N. S. Chandel，“ROS在氧化还原信号和氧化应激中的作用”，目前的生物学，第24卷，第2期10, pp. R453-R462, 2014。视图:出版商的网站|谷歌学术
3. V.Papayannopoulos，“中性粒细胞细胞外陷阱免疫和疾病”自然评论免疫学第18卷第2期2, pp. 134-147, 2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
4. R. Radi，“氧气自由基，一氧化氮和过氧基酯：分子医学中的氧化还原途径”，“国家科学院的诉讼程序，卷。115，没有。23，pp。5839-5848,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
5. J. P. Kehrer和L. O. Klotz，“自由基和相关反应物种作为组织损伤和疾病的介质:对健康的影响”，《毒理学评论》，卷。45，不。9，pp。765-798,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术
6. L. C. Nascimento da Silva, C. M. Bezerra Filho, R. A. Paula等，“评估植物源产品抗氧化潜力的体外细胞分析”，自由基研究，卷。50，不。8，pp。801-812,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术
7. C. Pena-Bautista，M.Baquero，M.Vento和C.Chafer-Pericas，“阿尔茨海默病的自由基：脂质过氧化生物标志物”我们共同Chimica学报，第491卷，第85-90页，2019。视图:出版商的网站|谷歌学术
8. A. U. Ihsan, F. U. Khan, P. Khongorzul等，“氧化应激在慢性前列腺炎/慢性盆腔疼痛综合征和男性不育病理中的作用和抗氧化剂在改善氧化应激中的作用”，生物医学和药物治疗，卷。106，pp.714-723,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
9. 丁磊等，“植物化学物质与炎症性肠病的关系:综述，”《食品科学与营养评论》，第60卷，第2期8, pp. 1321-1345, 2020。视图:出版商的网站|谷歌学术
10. H. J. Forman，“氧化还原信号：从自由基到衰老的演变，”自由基生物学与医学，第97卷，第398-407页，2016。视图:出版商的网站|谷歌学术
11. 陈林，邓慧敏，崔慧敏等，“器官炎症反应与炎症相关疾病”，onCotarget.，第9卷，第5期。6, pp. 7204-7218, 2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
12. S. C.Gupta，A. B.Kunnumakkara，S.Aggarwal和B.B.Garwal，“炎症，癌症和其他与年龄相关疾病的双刃剑”，免疫学中的边疆，卷。9，p。2160年，2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术
13. L. A. Abdulkhaleq，M. A. Assi，R. Abdullah，M.Zamri-Saad，Y.H.Taufiq-Yap，炎症介质在炎症中的关键作用：审查，“动物世界，第11卷，第5期。5，第627-635页，2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
14. J.柳和X.Cao，“细胞和分子调节先天炎症反应”细胞与分子免疫学，第13卷，第2期6，第711-721页，2016。视图:出版商的网站|谷歌学术
15. V. Chiurchiu, A. Leuti, M. maccarone，《生物活性脂质与慢性炎症:控制体内的火》免疫学中的边疆， 2018年9月，第38页。视图:出版商的网站|谷歌学术
16. F.Sekiguchi，M. Tsubota和A. Kawabata，“炎症和炎症疼痛中的电压门控钙通道的参与”，生物和药物公报号，第41卷。8, pp. 1127-1134, 2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
17. R. R. Ji, A. Chamessian，和Y. Q. Zhang，“非神经元细胞对疼痛的调节与炎症”，科学第354期6312, pp. 572-577, 2016。视图:谷歌学术
18. Y. Q. Zhou，Zhou，Zhou，Z. H. Liu等，“白细胞介素-6：病理疼痛的新兴调节器”，中国神经炎杂志CHINESE，第13卷，第2期1，第141页，2016。视图:出版商的网站|谷歌学术
19. F. A. Pinho-Ribeiro，W.A.Verri Jr.和I. Chiu，“痛苦感觉神经元 - 免疫痛苦和炎症”，“免疫学趋势第38卷第2期1, pp. 5-19, 2017。视图:出版商的网站|谷歌学术
20. A. D. Cook，A. D. Christensen，D.Tewari，S. B. McMahon，以及J.A. Hamilton，“免疫细胞因子和炎症疼痛的受体”，“趋势Immunol，卷。39，没有。3，pp。240-255,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
21. S. K. Totsch和R. E. Sorge，“特定疼痛条件下的免疫系统参与”分子的痛苦，卷。2017年13日。视图:出版商的网站|谷歌学术
22. I. Obara，V.Telezhkin，I.Alrashdi和P. L. Chazot，“组胺，组胺受体和神经性疼痛缓解”英国药理学杂志第177期3, pp. 580-599, 2020。视图:出版商的网站|谷歌学术
23. M. Matsuda, Y. Huh, R. R. Ji，“炎症、神经源性炎症和疼痛中的神经炎症的作用”，杂志的麻醉第33卷第3期1，页131-139,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术
24. L.P.Sousa，A.L.Alessandri，V.Pinho和M.M.Teixeira，“急性炎症的药理学策略”，药理目前的意见，第13卷，第2期4，pp。625-631,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术
25. M. Perretti, X. Leroy, E. J. Bland，和T. Montero-Melendez，“解决药理学:炎症治疗创新的机会”，药理科学趋势第36卷第2期11, pp. 737-755, 2015。视图:出版商的网站|谷歌学术
26. H. Chahdoura, S. El Bok, T. Refifa et al.，“仙人掌水提取物的抗炎、镇痛和抗基因毒性活性。Pfeiff。”药学与药理学杂志CHINESE，卷。69，没有。8，pp。1056-1063,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术
27. O. G. Quinones，B. H. Hosey，T.A.Padua等，“Copaiba油在体外/体内皮肤渗透性和体内抗炎作用，”药学与药理学杂志CHINESE，第70卷，第2期7，第964-975页，2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
28. A. Kumar, S. Singh, A. Kumar et al， " Isodon melissoides (Benth.)的化学组成、杀菌动力学、作用机制和抗炎活性。H.哈拉精油天然产物的研究，第1-6页，2016。视图:出版商的网站|谷歌学术
29. D. W. LIM，J.G.Kim和Y.T.Kim，“印度鹅莓（Emblica Officinalis果实）术后术后和神经病疼痛的镇痛作用”营养素，第8卷，第2期12日,2016年。视图:谷歌学术
30. M. Serafini和I. Peluso，《健康的功能性食品:水果、蔬菜、草药、香料和可可在人体中的抗氧化和抗炎作用》，当前的药物设计，卷。22，没有。44，pp。6701-6715,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术
31. A. Basu，J. Schell和R. H. Scofield，“饮食水果和关节炎”食品与函数，第9卷，第5期。1，pp。70-77,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
32. M. Gasparrini, F. Giampieri, T. Y. Forbes-Hernandez等人，“草莓提取物有效地对抗由人真皮成纤维细胞内毒素脂多糖诱导的炎症应激，”食品和化学毒理学，第114卷，第128-140页，2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
33. I. Peluso, D. Villano Valencia, C. O. Chen，和M. Palmery，“营养药品和功能食品的抗氧化、抗炎和微生物调节活性”，氧化医学和细胞寿命，卷。2018年，2018年第3824509,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
34. N. R.F.Leal，M.V.Vigliano，F.A.Pinto等，通过抑制巨噬细胞迁移和细胞因子产生，“富含泊醇富集的分数的”抗炎作用“，”药学与药理学杂志CHINESE，第70卷，第2期6，第808-820页，2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
35. L. M. de Oliveira, A. Porte, R. L. de Oliveira Godoy et al.， "化学表征Myrciaria多花植物水果，”食品化学，卷。248，pp。247-252,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
36. M. M.L. de Azevedo，M.M. Cascaes，G.Guilhon等，“Lupane Triterpenoids，抗氧化潜力和抗微生物活性Myrciaria多花植物（H. West Ex Willd。）O. Berg，“天然产物的研究第33卷第3期4，第1-10页，2019。视图:出版商的网站|谷歌学术
37. L.A.C.Iitietbohl，A.P.Oliveira，R.S.Esteves等，“肿瘤细胞系中的抗增殖活性，抗氧化能力和总酚类，黄酮类化合物和单宁含量Myrciaria多花植物”,Anais da Academia Braasileira deCiências，卷。89，没有。2，pp。1111-1120，2017。视图:出版商的网站|谷歌学术
38. T. Brassuer和L. Angenot，“Le mélange diphénylborate d 'aminoéthanol-PEG 400: un intéressant réactif de révélation des flavonoïdes，”色谱学报A，卷。351，PP。351-355,1986。视图:出版商的网站|谷歌学术
39. P. M. Richardson，“植物化学方法:现代植物分析技术指南”，Brittonia，卷。42，不。2，p。115,1990。视图:谷歌学术
40. E. Roberts, R. Cartwright和M. Oldschool，《制茶中的酚类物质》。水溶性物质的分离和纸层析中国粮食与农业科学杂志，第8卷，第2期2，pp。72-80，1957。视图:出版商的网站|谷歌学术
41. H. Wagner和S. Bladt，“黄酮类药物，包括银杏和赤雀属植物，”植物药物分析:薄层色谱图谱，第195-245页，施普林格，柏林，德国，1996。视图:谷歌学术
42. V. L. Singleton和J. A. Rossi，“用磷钼磷钨酸试剂比色法测定总酚”，美国酿酒和葡萄栽培杂志，卷。16，不。3，pp。144-158,1965。视图:谷歌学术
43. R. G. Woisky和A. Salatino，《蜂胶分析:化学质量控制的一些参数和程序》，中国服装研究杂志，卷。37，不。2，pp。99-105，1998。视图:出版商的网站|谷歌学术
44. F. S. Hosseinian, W. Li, T. Beta，“紫色小麦花青素和其他化学物质的测定”，食品化学，卷。109，没有。4，pp。916-924,2008。视图:出版商的网站|谷歌学术
45. w·Brand-Williams M.-E。Cuvelier和C. Berset，“使用自由基方法来评估抗氧化活性，”lwt -食品科学与技术第28卷第2期1，页25-30,1995。视图:出版商的网站|谷歌学术
46. R.Re，N.Pellegrini，A.Proteggente，A.Pannala，M.杨和C.稻米，“抗氧化活性，应用改进的ABTS自由基阳离子脱色测定”，“自由基生物学与医学，卷。26，不。9-10，PP。1231-1237，1999。视图:谷歌学术
47. P. Prieto, M. Pineda，和M. Aguilar，“通过形成磷钼络合物的分光光度法测定抗氧化能力:对测定维生素E的特殊应用”，分析生物化学，卷。269，没有。2，pp。337-341，1999。视图:谷歌学术
48. E.Kunchandy和M. Rao，“氧气自由基清除活性的姜黄素”国际药剂学杂志，卷。58，不。3，pp。237-240,1990。视图:出版商的网站|谷歌学术
49. D. Lorke，“实用急性毒性测试的新方法”，档案的毒理学第54卷第5期4，第275-287页，1983。视图:谷歌学术
50. C. A. Winter, E. A. Risley，和G. W. Nuss，“卡拉胶蛋白诱导大鼠后爪水肿作为抗炎药物的试验，”实验生物学和医学协会的诉讼程序号，第111卷3，页544-547,1962。视图:出版商的网站|谷歌学术
51. G.-J.黄，C。 -Pan，F.-C.刘，T.S.吴，和c。 -吴，“脂多糖刺激Raw246中患有Antrodia Salmonea的乙醇提取物的抗炎作用。7巨噬细胞和λ-Carrageenan诱导的爪子水肿模型，“食品和化学毒理学，卷。50，不。5，pp。1485-1493,2012。视图:出版商的网站|谷歌学术
52. H. Collier，L. Dinneen，C. A. Johnson和C.Schneider，“腹部收缩反应和镇痛药中的镇痛药中的抑制”英国药理学与化疗杂志，卷。32，不。2，pp。295-310,1968。视图:出版商的网站|谷歌学术
53. S. Hunskaar和K. Hole，“小鼠的福尔马林试验:炎症性疼痛和非炎症性疼痛之间的分离，”疼痛，第30卷，第2期1，第103-114页，1987。视图:谷歌学术
54. M. Plaza，A.G.Batista，C.B.Cazarin等，“来自Myrciaria jaboticaba Peel的抗氧化多酚的表征及其对葡萄糖代谢和抗氧化状态的影响：试点临床研究，”食品化学， 2016年，第211卷，第185-197页。视图:出版商的网站|谷歌学术
55. S. C. M. Burri, A. Ekholm, A. Hakansson, E. Tornberg，和K. Rumpunen，“园艺植物材料的抗氧化能力和主要酚化合物不常使用，”功能食品杂志，卷。38，pp。119-127,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术
56. 林伯伟，龚长昌，宋慧芳，崔玉英，“花青素对癌症防治的作用”，英国药理学杂志，卷。174，不。11，pp。1226-1243,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术
57. “从三种富含酚类物质的豆科植物中提取的酚提取物和组分的抗氧化和血管紧张素- i转换酶抑制活性”，功能食品杂志，卷。42，pp。289-297,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术
58. F. Altieri, F. Cairone, F. Giamogante等，"石榴果实提取鞣花丹宁对二硫异构酶PDIA3活性的影响"营养素，第11卷，第5期。1，p。186年，2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术
59. D. Fracassetti, C. Costa, L. Moulay和F. A. Tomas-Barberan，“鞣花酸衍生物、鞣花单宁、原花青素和其他酚、维生素C和camu-camu水果的两种粉末产品的抗氧化能力(myrciaria dubia），“食品化学，第139卷，第139期1-4，第578-588页，2013。视图:出版商的网站|谷歌学术
60. D. K. Zhao, Y. N. Shi, V. Petrova et al.，“jaboticababa的多酚和相关多酚(myrciaria cauliflora.）具有慢性阻塞性肺病的抗炎活性，“农业和食品化学杂志，卷。67，没有。5，PP。1513-1520,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术
61. M. Daglia, A. Di Lorenzo, S. F. Nabavi, Z. S. Talas，和S. M. Nabavi，“多酚:远远超过抗氧化能力:没食子酸和相关化合物作为神经保护剂:你吃什么就是什么!”,当前医药生物技术，第15卷，第5期。4, pp. 362-372, 2015。视图:谷歌学术
62. L. A. BenSaad, K. H. Kim, C. C. Quah, W. R. Kim, M. Shahimi，“从石榴中分离出鞣花酸、没食子酸和石榴素A&B的抗炎潜力”，补充和替代医学，第十七卷，第二期1, p. 47, 2017。视图:出版商的网站|谷歌学术
63. OCDE，急性口腔毒性：上下手术经合组织化学品测试的指南，卷。425，Ocde，巴黎，法国，2008年。
64. M. A. Apel, M. E. Lima, M. Sobral et al.， " myciaria tenella and myciaria tenella的叶子精油的抗炎活性Calycorectes sellowianus”,生物制药，卷。48，不。4，第433-438,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术
65. K. Yazawa, K. Suga, A. Honma, M. shirasaki, T. Koyama，“热带水果camu-camu (myrciaria dubia），“营养科学与维生素学杂志(第57卷)1, pp. 104-107, 2011。视图:谷歌学术
66. S. K. Dev, P. K. Choudhury, R. Srivastava, M. Sharma，“多草药配方的抗菌、消炎和伤口愈合活性”，生物医学和药物治疗，第111卷，第555-567页，2019。视图:出版商的网站|谷歌学术
67. A. N. Daniel, S. M. sartorretto, G. Schmidt, S. M. Caparroz-Assef, C. A. Bersani-Amado, R. K. N. Cuman，“实验动物模型中丁香酚精油的抗炎和抗伤害性活动A”，Revista Braasileira de Farmacognosia第19卷第2期1, pp. 212-217, 2009。视图:出版商的网站|谷歌学术
68. L.C.Ferreira，A.Grabe-Guimarães，C.A.DePaula等，“露营和露营地活动的抗炎症和抗闭合性活动，”民族科医生学杂志第145卷第1期1，页100-108,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术
69. R. A.Ribeiro，M.L.Vale，S. M. Thomazzi等，“常规巨噬细胞和肥大细胞参与在小鼠中唑氏菌和醋酸诱导的伤害伤害反应”中，“欧洲药理学杂志，卷。387，没有。1，pp。111-118,2000。视图:谷歌学术
70. R. T. Basting, C. M. Nishijima, J. a . Lopes et al.，“从Eugenia punicifolia (Kunth) DC的叶子中提取的水酒精提取物的抗伤害性，消炎和胃保护作用。在啮齿动物。”民族科医生学杂志， vol. 157, pp. 257-267, 2014。视图:出版商的网站|谷歌学术
71. A.Tjølsen，o.-g。Berge，S. Hunskaar，J. H. Rosland和K. Hole，“福尔马林测试：对方法的评估”，疼痛，卷。51，没有。1，pp。5-17,1992。视图:谷歌学术
72. d. Z. Viscardi, J. da Silva Arrigo, C. d. A. C. Correia等人，“从金刚果中获得的种子和果皮精油抑制啮齿动物的炎症和疼痛参数，”《公共科学图书馆•综合》，卷。12，不。2，2017年物品ID e157107,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术

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