文摘

铜sulfate-induced过早衰老(CuSO₄口)持续mimetized复制衰老的分子机制,尤其是在内质网proteostasis级别。事实上,破坏蛋白质的体内平衡有关,与年龄相关的细胞/组织功能障碍和人类疾病的易感性。白藜芦醇是一种多酚化合物,证明在特定条件下防衰老。在此设置中,我们旨在评估白藜芦醇能够减弱诱导细胞衰老和解决相关的分子机制。使用CuSO₄口WI-38成纤维细胞,显示白藜芦醇减弱典型衰老细胞形态学改变,senescence-associated苷酶活性和细胞增殖。机制涉及这种antisenescence效应似乎是独立的基因和蛋白质senescence-associated监管,但依赖于细胞proteostasis改进。事实上,白藜芦醇补充恢复copper-induced蛋白质含量增加,减弱毕普水平,减少了羰基化作用和polyubiquitinated由自噬诱导蛋白质。我们的数据提供了令人信服的证据的有利影响减轻CuSO白藜芦醇₄口压力后果的调制的蛋白质质量控制系统。这些发现强调平衡细胞proteostasis的重要性和进一步增加知识分子机制调解白藜芦醇antisenescence效果。此外,他们有助于识别特定分子靶点的调制将预防与年龄有关的细胞功能障碍和改善人类的健寿。

1。介绍

正常体细胞分裂细胞已被证明是有价值的体外模型来研究细胞衰老和瓦解的分子机制和途径与人类的衰老过程。复制衰老的著名模型(RS)是实现当人类二倍体成纤维细胞(HDFs)自发停止分裂后最初的活跃阶段人口倍增,成为对促有丝分裂的刺激(1]。除了不可逆的细胞周期阻滞,RS成纤维细胞表现出其他典型的形态,和分子特性,如细胞体积增加,高senescence-associated苷(SA beta-gal)活动,并增加senescence-associated基因的表达和蛋白质(2,3]。类似的衰老表型,称为应激过早衰老(sip),可以达到HDFs subcytotoxic剂量的接触氧化应激诱导物,如过氧化氢(H₂O₂口)[4],叔丁基氢过氧化物,紫外线B辐射[3),或硫酸铜(CuSO₄口)[5]。最近,后者是RS模型相比,更好地模拟显示最常用的H₂O₂口模式6]。

白藜芦醇是一种天然多酚化合物被证明增加一些生物的最大寿命,等酿酒酵母(7),秀丽隐杆线虫(8),黑腹果蝇(9),短暂的鱼valenzano小鱼(10]。然而,白藜芦醇未能延长啮齿类动物的寿命,即使它提高了健寿,因此证明保护作用对老年性退化(11]。

在细胞水平上,白藜芦醇也已被证明能够减弱衰老特性在RS (12]或H₂O₂口(13,14细胞模型。这些抗衰老的影响长期以来一直与白藜芦醇激活1 sirtuin蛋白脱乙酰酶的能力,Sirt1[审查看到[15]]。实际上,这是证明了Sirt1过度变弱衰老和延长复制寿命的几个培养细胞类型(16- - - - - -18),而其抑制结果在增加细胞衰老16]。同时,Sirt1是下调了老化(19和在细胞衰老模型20.,21)进一步支持其预防衰老的作用特性。除了白藜芦醇能够调节信号转导通路的激活Sirt1 [14,22),其他几个生物事件被分配负责它的积极影响,包括增加抗压力的能力(12),导致端粒酶活性(23),降低senescence-associated炎性分泌物的蛋白质(24),抑制机械的雷帕霉素靶,mTOR [13]。白藜芦醇也发现调节蛋白质质量控制细胞反应,因为它是显示调节热休克的表达分子伴侣’(25),促进细胞蛋白质降解机制,即ubiquitin-proteasome系统(UPS) (26,27和溶酶体自噬28,29日]。此外,白藜芦醇能够增加秀丽隐杆线虫通过upregulation的寿命abu11(激活了展开蛋白质response-11)编码的蛋白质参与内质网(ER)展开的蛋白质反应(UPR)保护生物体免受损害的不正确折叠的蛋白质(8]。

在目前的研究中我们旨在评估白藜芦醇的能力减弱CuSO建立细胞衰老₄感应,瓦解的分子机制可能参与其中。发现白藜芦醇补充剂能够减少一些senescence-associated特性的外观的改善细胞proteostasis可能通过保护蛋白质免受氧化损伤,防止他们积累的感应蛋白降解机制。

2。材料和方法

2.1。细胞培养

WI-38人类胚胎肺成纤维细胞从欧洲购买的细胞培养(ECACC)和在完全培养基培养基础培养基组成的鹰(BME)补充10%胎牛血清,37°C的5%的股份有限公司₂湿润的气氛。WI-38细胞被认为是年轻30岁以下人口倍增(PDs)和进入衰老45 PDs或以上。的感应与硫酸铜(CuSO啜饮₄口),subconfluent年轻WI-38成纤维细胞暴露在350年μM CuSO₄(Na₂所以₄为24小时控制)。然后,细胞被洗一次磷酸缓冲盐(PBS),取而代之的是新鲜的完全培养基包含5或10μ白藜芦醇的M (R5010-Sigma-Aldrich®)额外72 h。控制细胞被提交给最后一个同期0.1% DMSO溶液的浓度。

2.2。细胞形态和SA Beta-Gal检测

细胞形态学评估了72 h除铜后使用倒置显微镜光学检验。评估衰老细胞的存在,SA beta-gal除铜后发现72 h已经描述(5]。SA beta-gal阳性细胞的比例在每个条件是由显微镜下计数400细胞/从至少三个独立的实验。

2.3。细胞增殖和总蛋白质含量

评估不同治疗方法对细胞增殖的影响和总蛋白质含量,细胞数量的决心和SRB试验(30.除铜后)进行长时间。简单地说,3000个细胞/被播种在96 -文化板块,治疗与CuSO 24小时₄(或钠₂所以₄控制),然后分析了在不同跨度为(0,24、48和72小时)恢复在白藜芦醇的存在与否。细胞数量的决心,细胞使胰蛋白酶化和台盼蓝染色,和可行的细胞在纽鲍尔显微镜下计数室。每口井的细胞总数为每个条件不同跨度为计算和绘制,假设,= 0,对于每一个条件,细胞数量= 1。总蛋白质含量测定,细胞治疗10%三氯乙酸(TCA), 1小时在4°C。TCA-precipitated蛋白固定在井的底部染30分钟了。0.057% (w / v) SRB 1%醋酸溶液中,然后用1%的醋酸洗四次。绑定染料与10毫米可溶性三羟甲基氨基甲烷基础液的解决方案和510海里的吸光度每个记录使用标(200年无限,TECAN)。

2.4。实时聚合酶链反应

创e表达实验72 h硫酸铜处理后实时定量PCR (qPCR)。总RNA提取(PureLink®RNA迷你工具,Ambion)从细胞来源于至少三个独立文化从每个条件由逆转录反应转化为互补。放大反应化验包含SYBR绿色Mastermix (SYBR®选择主结构,应用生物系统公司®),50 ng cDNA,引物(刺维达,Lda)在最佳浓度。引物序列p21, 5′-CTGGAGACTCTCAGGGTCGAA-3′, 5′-CCAGGACTGCAGGCTTCCT-3′;ApoJ 5′-GGATGAAGGACCAGTGTGACAAG-3′, 5′-CAGCGACCTGGAGGGATTC-3′;TGFβ1、5′-AGGGCTACCATGCCAACTTCT-3′, 5′-CCGGGTTATGCTGGTTGTACA-3′;和塔塔箱结合蛋白(真沸点),5′-TCAAACCCAGAATTGTTCTCCTTAT-3′, 5′-CCTGAATCCCTTTAGAATAGGGTAGA-3′。协议用于qPCR 95°C(3分钟);40的95°C(15秒);和60°C(1分钟)。qPCR StepOnePlus表演™热循环(应用生物系统™)。真沸点时选择的看家基因计算相对目标基因的转录水平。

2.5。免疫印迹

蛋白质含量是评估72 h硫酸铜暴露后免疫印迹分析。WI-38细胞提交不同的治疗用PBS和取消在冰上裂解缓冲(10毫米三羟甲基氨基甲烷、液pH值7.4,100毫米氯化钠,1毫米EDTA, 0.1% Triton x - 100)补充了蛋白酶抑制剂鸡尾酒(Sigma-Aldrich)。在布拉德福德化验,20μg(或10μg蛋白质羰基化作用的检测或poly-Ub)从每个细胞中提取的蛋白质通过sds - page来解决。蛋白质被涂抹成硝基膜,阻止后5%的脱脂奶粉稀释Tris-buffered盐水0.1%渐变20 (TBST),探讨了与特定的初级抗体(anti-HSP90 ab13495和anti-p62 ab109012, Abcam®;anti-LC3 nb100 - 2220,罗福斯生物制剂;anti-ubiquitin PW0930,恩佐®生命科学;anti-phospho-eIF2 anti-p21 # 2946, # 3398, anti-HSP70 # 4876, anti-BiP # 3177,细胞信号技术®)一夜之间在预定的最佳稀释。羰基化作用的具体检测蛋白质,蛋白质后立即转移,nitrocellulose-bound蛋白被视为描述其他地方(31日]。简单,膜平衡在TBS 20%甲醇,洗5分钟以10%三氟乙酸(组织),derivatized 2 5毫米,4-dinitrophenylhydrazine (DNPH Sigma-Aldrich)稀释10%组织10分钟(受光照),用10% DNPH组织去除多余的,最后用50%甲醇洗净。这个过程后,膜被封锁在TBST 5%牛血清白蛋白和孵化主要anti-DNP抗体(D9656 Sigma-Aldrich)。从这儿开始,这种免疫印迹过程类似于抗体:TBST洗涤后,免疫印迹适当peroxidase-conjugated二级抗体孵育1 h,发现使用ECL免疫印迹基质(皮尔斯™,热科学)和可视化ChemiDocTM XRS (BioRad实验室)。结果量化,使用图像实验室®软件测密度术。蛋白质加载规范化使用朱红色年代蛋白质染色,但类似的数据也获得了使用微管蛋白检测(数据未显示)。

2.6。统计分析

学生的以及用于比较的手段之间的两个不同的条件。一个值低于0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。在CuSO Sirtuin蛋白1表达减弱₄口

已经证明了Sirt1表达减少人口增加[倍增20.)和H₂O₂口细胞模型(21]。这里,Sirt1转录和蛋白质水平评估qPCR和免疫印迹,在CuSO分别₄全身衰老WI-38成纤维细胞。类似于其他RS和sip模型,CuSO₄口成纤维细胞也呈现减少的表达基因(图1(一)(图)和蛋白质1 (b))Sirt1。即,信使rna和蛋白质相对水平减少27%和23%,分别在copper-treated细胞相比,控制(和、职责)。白藜芦醇的作用(5或10μSirt1激活器,M)是评价72 h后24 h与CuSO孵化的细胞₄,这是通常的恢复时间,细胞需要适应和发展衰老表型(5]。增加10μM白藜芦醇减毒copper-induced Sirt1减少蛋白质含量(类似于年轻的控制细胞)值。孵化的non-CuSO₄提交的成纤维细胞5和10μ白藜芦醇对72 h Sirt1蛋白水平增加了1.6和1.3倍(和),分别相比,年轻的控制细胞(图1 (b))。

3.2。白藜芦醇变弱的一些典型Senescence-Associated变化

衰老细胞通常呈现典型的形态学改变,增加了SA beta-gal水平,不可逆抑制细胞增殖。因此,这三个特性进行评估,以评估在CuSO白藜芦醇的影响₄口成纤维细胞。短暂,细胞增殖是通过计算评估可行的细胞(0)24、48和72 h后铜移除。然后,在最后的时间点(72 h),细胞形态学观察和SA beta-gal阳性细胞的百分比是量化为每个条件。如图2(一个)在缺乏白藜芦醇CuSO₄口成纤维细胞呈现典型的衰老的形态,因为它们不再是小和梭状回,成为扩大和夷为平地。然而,copper-treated细胞复苏的白藜芦醇senescent-like表现出更少的明显改变,因为他们似乎更薄更细长,细胞相比,白藜芦醇的缺失。这是特别明显的最高浓度的白藜芦醇(10μ米)。值得注意的是,即使细胞不提交铜表现出稍微不同的方面在白藜芦醇的存在,他们似乎更小,细胞更有明确的限制。

类似于之前报道的结果(6),CuSO₄口细胞模型包含34%的细胞阳性SA beta-gal(图2 (b)),而对照组只有5%的衰老细胞。然而,添加5和10μM白藜芦醇copper-treated细胞导致显著减少SA beta-gal阳性细胞的数量(16和14%,职责)。硫酸铜抑制细胞增殖的能力曾被描述(6),在此再次证明(图2 (c)压力),3天后,copper-treated细胞减少了88%,相比他们的扩散控制。媒体补充5和10μM白藜芦醇在复苏期间导致细胞增殖抑制的衰减20和34%,分别。此外,在缺乏铜、选定的浓度的白藜芦醇无法控制相比显著影响细胞增殖细胞。总之,这些数据表明,白藜芦醇可以减弱衰老的感应硫酸铜WI-38成纤维细胞。

3.3。白藜芦醇不改变Copper-Induced Upregulation Senescence-Associated基因和蛋白质

有几个基因和蛋白质,如细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂1 (p21)、载脂蛋白J (ApoJ)和转化生长因子β1 (TGFβ1)的超表达是典型的衰老表型观察到RS和sip细胞模型。这里,我们评估了白藜芦醇的调整能力的p21水平,ApoJ, TGFβ1铜处理后,以证明其效果的衰减copper-induced衰老。因此,这些基因的mRNA转录相对水平被qPCR量化(图3(一个))。按照以前的出版物(5),p21, ApoJ, TGFβ发现1 mRNA水平调节,2.2 - 1.6,和1.6倍,分别在CuSO₄口成纤维细胞相比,控制细胞。然而,添加白藜芦醇(5或10μ米)硫酸铜后立即删除没有任何显著影响这些基因的转录水平。验证这些结果和排除的转译后的规定,p21的相对蛋白质含量和ApoJ通过免疫印迹(图进行评估3 (b))。在蛋白质水平,p21和ApoJ copper-treated细胞增加了3.2和1.8倍,控制相比,从而确认以前注意到趋势。此外,类似于转录水平结果,白藜芦醇补充剂并不影响copper-induced这些蛋白质的扩充。总的来说,白藜芦醇的影响衰减的copper-induced衰老不涉及p21的规定,ApoJ, TGFβ1 senescence-associated基因。

3.4。CuSO₄全身Proteostasis失衡被白藜芦醇减毒

proteostasis失衡的发生是老化的主要标志32),在细胞水平上,可以显示细胞内蛋白质含量增加(33]。测量细胞蛋白质积累对于每个实验条件,总蛋白质含量和细胞数量之间的比率,在这里定义为蛋白质负荷指数(PLI),估计0,CuSO后24、48和72 h₄删除(硫酸钠控制)。假设应力消除后立即PLI = 1时,表明它显著增加在CuSO 48和72 h跨度为1.7倍₄口细胞(图相比,相应的控制条件4)。CuSO₄对成纤维细胞被允许恢复的5μM白藜芦醇表现出显著减少0.5倍PLI在48 h,与细胞相比没有添加白藜芦醇。此外,添加10μM白藜芦醇除铜后完全恢复PLI的水平控制在缺乏铜在48 h和提出了一个统计上显著的减少0.5倍在72 h,相比copper-treated细胞在缺乏白藜芦醇在同一时间点。

补偿改变proteostasis CuSO₄口细胞呈现较高水平的磷酸化真核翻译起始因子2 (p-eIF2) [6),抑制普通蛋白的翻译,并允许细胞恢复体内平衡。减少PLI的可能的解释获得了铜细胞复苏的白藜芦醇可以抑制的增加整体蛋白质合成更高p-eIF2所致。当p-eIF2被免疫印迹(图量化5(一个)像预期的那样),这是在CuSO发现增加₄处理细胞,而控制。然而,白藜芦醇补充剂在铜移除并没有导致任何额外的变更p-eIF2蛋白质水平。接下来,细胞陪伴能力评估的量化分子陪伴免疫球蛋白结合蛋白(毕普),热休克蛋白(HSP) 90,和HSP70免疫印迹(图5 (b))。事实上,毕普的细胞内蛋白质含量,一半,和HSP70是1.4,1.9,和6.3 CuSO倍增加₄口成纤维细胞相比,控制细胞。白藜芦醇的存在除铜后一半寿命没有影响和HSP70蛋白水平比较没有白藜芦醇copper-treated细胞的水平。然而,毕普蛋白质含量减少(1.1倍)copper-treated细胞被允许恢复的10μ白藜芦醇,相对条件没有白藜芦醇,反映出较低需要缓冲有缺陷或损坏的蛋白质。

3.5。白藜芦醇变弱CuSO₄全身的积累改性蛋白质溶酶体自噬的诱导

改变proteostasis CuSO中观察到₄口成纤维细胞可能是一个累进氧化改性蛋白质积累的结果。蛋白质羰基化反应是一种不可逆的氧化是常用的作为永久增加的指标水平的氧化应激。实际上,细胞衰老模型(34和细胞氧化应激诱导物处理35)都显示展示水平的提高蛋白质羰基化作用。羰基,蛋白质含量是评价来推断对细胞氧化状态在不同的实验条件。CuSO₄口细胞呈现显著增加13% (在蛋白质羰基化作用的相对水平,相比控制细胞(图6(一))。增加10μM白藜芦醇在细胞复苏(但不是5μ米)能够减弱这种蛋白质氧化提高34%,变异是接近达到统计学意义()。这些数据表明,白藜芦醇可以阻止或减弱copper-induced氧化蛋白质的积累。这可能是实现通过其抗氧化特性的描述,可能防止蛋白质损伤或其调节蛋白质降解过程的能力。UPS活动是减少在衰老。蛋白质的积累polyubiquitinated (poly-Ub)通常是与UPS效率和减少有关,事实上,这增加了22%在CuSO poly-Ub蛋白质的水平₄口观察成纤维细胞(图6 (b))。此外,补充白藜芦醇(只在10μ米)后立即硫酸铜除显示有效恢复poly-Ub控制细胞的蛋白质含量,以显著的方式()。

取决于他们拥有的polyubiquitin链的构象,poly-Ub蛋白质可能会被溶酶体降解蛋白酶体或macroautophagy [36),认为自噬在这里为了简化。自噬的回收中扮演着关键角色失调受损细胞器和蛋白质总量,证明白藜芦醇,以防止氧化应激引起的细胞损伤(28,29日]。在目前的研究中,自噬的诱导是评估的转换LC3-I LC3-II,自噬体形成的基本步骤,通过计算的比值LC3-II / LC3-I使用免疫印迹蛋白质含量。此外,P62蛋白质的水平,一个ubiquitin-binding蛋白LC3作为联系,乌兰巴托基质在自噬体的形成也评估了免疫印迹技术(图6 (c))。CuSO₄口细胞呈现统计上显著的1.4倍LC3-II / LC3-I比率的增加,成纤维细胞相比,年轻的控制。此外,细胞治疗10μM白藜芦醇除铜后进一步提高这一比率(1.8倍,),相比copper-treated细胞被允许恢复没有白藜芦醇。因此,P62蛋白质含量在CuSO增加了1.5倍₄口,相比控制。此外,接触到10μM白藜芦醇后铜去除导致额外增加P62蛋白表达(1.9倍,)。

4所示。讨论

的CuSO₄口细胞模型已经被证明为研究有重大价值的分子事件负责的衰老过程5,6,37]。此外,它带来了额外的证据支持铜贡献与年龄相关的功能恶化和与年龄相关的疾病的进展。目前的研究表明,CuSO₄全身的细胞衰老导致减少Sirt1的表情。多酚化合物白藜芦醇,Sirt1激活的机制和衰减的衰老影响Sirt1解决。事实上,它是证明白藜芦醇补充剂减毒copper-induced衰老出现的一些典型的特征。此外,这种antisenescence白藜芦醇的影响背后的机制被证明涉及细胞的调制proteostasis蛋白质氧化损伤的保护或诱导的蛋白质降解过程。

白藜芦醇对细胞衰老的影响调查,但结果是矛盾的:虽然一些作者称白藜芦醇能够减弱细胞老化(12- - - - - -14),其他的显示,它诱导衰老的样子38- - - - - -41]。在这两种情况下,这些影响所涉及的分子机制并不完全清楚。我们相信,这种差异是由不同的实验条件利用这些研究:白藜芦醇诱导细胞衰老的能力常常被报道用肿瘤细胞系(38- - - - - -40)处理高浓度的化合物(25以上μ米),在某些情况下导致pro-apoptotic效应(41];反过来,nontumor细胞系中描述抗衰老的效果,较低剂量的白藜芦醇(孵化12]。符合这些证据,在此,5或10的管理μM白藜芦醇硫酸铜切除后立即能够减弱WI-38成纤维细胞衰老的感应,SA beta-gal阳性细胞的比例是下降,典型的形态学改变不明显,细胞周期的堵塞是缓解。然而,在这项研究中,白藜芦醇没能减弱copper-induced upregulation senescence-associated分子,如p21, ApoJ, TGFβ1。这表明白藜芦醇的积极antisenescence效应背后的机制不涉及这样的senescence-associated copper-induced表达的抑制基因。

最近报道,RS和CuSO₄口模型展览改变了几个ER的表达分子伴侣和激活酶和ER UPR途径[6]。在这里,CuSO₄口成纤维细胞表现出更强的总蛋白质含量,以增强PLI,毕普的表达增加,HSP70,一半寿命和分子伴侣’蛋白质羰基化作用的水平上升,和更高的polyubiquitinated蛋白质,增加了进一步的证据在衰老proteostasis中断的发生。然而,我们的假设,增加PLI反映proteostasis可以进一步受损后获得的实验证据支持例如抑制蛋白质降解机制如自噬或UPS。目前,实际的潜在分子条件触发PLI增加仍然未知,但参与的典型细胞扩大与衰老相关的表型,或其他机制除了proteostasis中断,不能排除在外。CuSO₄口成纤维细胞被允许恢复的白藜芦醇改善细胞proteostasis,总蛋白质含量是类似于控制,毕普伴侣表达减弱,poly-ubiquitinated蛋白质水平降低。总之,这些数据表明,白藜芦醇的存在,细胞能够规避copper-induced破坏细胞proteostasis,密切与典型的外观衰老表型有关。

白藜芦醇的抗氧化特性是可能的贡献者这个细胞proteostasis维修效果,因为它可以保护蛋白质免受氧化浓度和时间的方式。事实上,使用体外氧化强调红细胞,白藜芦醇防止蛋白质氧化能力达到最大保护作用多酚化合物添加后30至60分钟,然后稍微减少随时间(42]。在最近的研究中,白藜芦醇补充剂对72 h减毒的羰基化作用蛋白质copper-treated细胞变异,已接近达到统计学意义。沿着这些72 h时间进程评估蛋白质羰基化应该添加更多的信息的存在时间变化白藜芦醇保护蛋白质免受氧化效率。

细胞proteostasis调制的白藜芦醇的另一个重要贡献是能够调节蛋白质降解机制,如UPS (26,27)或溶酶体自噬28,29日]。两种机制都是作为补偿UPS抑制自噬激活密切相关(43]。总之,自噬是至关重要的功能失调的细胞器的降解,破坏蛋白质总量,包括自噬小体的形成与溶酶体的降解目标内在内容。自噬体的形成发生在连续阶段的协调一致的行动取决于几个蛋白(44]。胞质可溶性蛋白LC3-I尤为重要,在这个过程中,因为它是lipidated起源LC3-II,一体的自噬体膜。这种转换是必不可少的伸长和自噬小体的成熟,LC3-II / LC3-I比率通常是用来检测自噬激活。此外,由于P62蛋白质是至关重要的目标通过LC3绑定poly-Ub-substrates到自噬体(44),其检测进一步表明这样的激活。在这里,CuSO₄口细胞表现出增加在LC3-I LC3-II转换和P62蛋白质含量;当允许恢复的白藜芦醇,LC3-II / LC3-I比率和P62蛋白质含量更高,表明一个增强诱导自噬和定位poly-Ub-substrates自噬。这些结果与之前的协议在体外(45和体内28]研究表明氧化应激条件下促进LC3-II / LC3-I比率增加,进一步提高白藜芦醇的存在。此外,白藜芦醇最近被描述为能够促进蛋白质通过autophagosomal-lysosomal途径的通量,因此衰减的不良影响胞内积累的损坏或有缺陷的蛋白质(27]。这个促销是符合当前的研究的结果,有利于白藜芦醇antisenescence效应由于其改善细胞通过自噬proteostasis感应的能力。然而,目前的研究有一些局限性关于实际的白藜芦醇诱导自噬;进一步功能研究监测自噬小体数量和自噬流量(46]的白藜芦醇,阐明它对这些过程的影响。此外,鉴于证明之间的串扰自噬和蛋白酶体降解47),我们不能排除,此外,白藜芦醇调节能力所带来的有利影响ubiquitin-proteasome系统。

5。结论

这项研究表明白藜芦醇能够减弱CuSO造成细胞衰老的感应₄曝光。这种效应产生白藜芦醇可以促进细胞自适应机制,自噬upregulation,维持细胞proteostasis和赋予细胞抵抗压力。细胞proteostasis维护被发现对预防衰老表型的发展至关重要。这些数据还揭示分子靶点的调制可能预防与年龄有关的细胞和组织功能恶化和改善人类的健寿。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

确认

莉莉安娜Matos被支持的博士奖学金SFRH / BD / 61820/2009下Operacional Ciencia e Inovacao 2010,社会Europeu深处,Fundacao Ciencia e Tecnologia对位。