头部和颈部癌症化学预防姜黄素和其他多酚化合物

抽象的

尽管有明显的观察性研究结果将富含水果和蔬菜的饮食与癌症风险降低，但评估膳食微量营养素补充的大部分介入试验，大多是维生素，无法显示任何有益效果。今天，已经清楚地清楚，在超导剂量上给出单个微量营养素，不能匹配整个水果和蔬菜的癌症预防效果。在这方面，多酚进入焦点，不仅是因为它们的抗氧化潜力，而且因为它们的能力与细胞内的分子靶标相互作用。因为多酚发生在许多食物和饮料中，以高浓度和抗癌活性的证据最适合组织，它们可以直接接触，现场癌症预先通过多酚用于癌症化学预防的癌症化学普通的癌症化学植物的上皮上皮。在本文中，我们总结了癌症化学预防性尝试，重点是头部和颈部致癌作用，并讨论了一些方法论问题。我们呈现有关姜黄素和EpigallocateChin-3-3 - 在暴露于香烟烟雾缩合物的人口咽粘膜培养物中的抗微生物作用的数据。

1.介绍

大约三分之二的头部和颈部鳞状细胞癌（HNSCC）可归因于重烟草和饮酒。这些癌症主要在6岁的男性中发展[1]．吸烟几十年，烟草致癌物在上呼吸道粘膜的大范围内产生有害影响。因此，黏膜细胞逐渐积累遗传改变，驱使细胞向恶性肿瘤发展。Slaughter的现场癌化的概念最好地解释了头颈部癌的发生，HNSCC患者经常患有同步或不同步的癌症，并且有很高的局部复发或第二原发肿瘤的风险。根据这一概念，头颈部鳞状细胞癌起源于大面积的多灶性癌前病变谴责口腔、咽和喉粘膜[2]．很明显，化学致癌物以同样的方式伤害上皮细胞，预防剂可能会保护它。癌症化学预防最初是由斯波恩在1976年提出的。该术语描述了使用特定的天然、生物或合成药物来逆转、抑制或防止上皮性癌症的发展。斯波恩认为，上皮恶性肿瘤通常需要数年的时间才能达到最后的侵袭性阶段。因此，癌前病变的进展可以稳定、抑制或逆转[3.]．10年后，洪和他的同事在一项具有里程碑意义的研究中显示，在接受13顺式维甲酸治疗后，服用该药的患者口腔白斑(一种已知的口腔癌前病变)的大小减少了67%，而安慰剂组的这一数字仅为10%。此外，维生素A衍生物显著逆转了发育不良[4]．

2.（头部和颈部）癌症的化学预防

癌症在很大程度上是可以预防的疾病。30年前，多尔和皮托估计，美国大约35%的癌症死亡可能是由饮食因素造成的[5]在20世纪80年代和90年代，研究人员深入调查了饮食因素在上呼吸道癌症中的作用。多个病例对照研究表明，水果和蔬菜摄入与口腔和咽部癌症风险呈负相关[6- - - - - -9]Peto等人也在1981年假设β-胡萝卜素可能降低所有癌症的发病率，特别是肺癌[10.]．1994年，证据积累了这一点β-胡萝卜素和合成类维甲酸异维甲酸在上空气消化道和肺的多步场癌变中具有化学预防作用[11.]．

1988年启动了一项大型介入性试验，其中包括18名以上的患者 000名男性和女性有患肺癌的高风险。β-胡萝卜素和视黄醇功效试验（CARET）测试了30种药物的组合镁β-Carotene和25 000 IU维生素A /每天对安慰剂。令人惊讶的是，在完成之前，审判需要停止21个月，因为明确证据没有任何益处和潜在的有害影响的基本证据。肺癌有28％，积极干预组中的死亡人数有17％[12.]．

另一项大规模介入试验评估了α-Tocophherol（维生素E）和β-胡萝卜素对癌症发病率的影响ATBC试验包括29 133名男性吸烟者随机分配α生育酚,β胡萝卜素，两个或安慰剂的组合。平均随访6.1年。在里面β-Carotene组，没有看到癌症发病率的降低，而是在几个地点增加，包括肺和胃。维生素E群在前列腺和结直肠癌中具有较少的血小胺，但更多的胃癌[13.]．对上空气消化道的亚组分析显示，两种药物对口腔、咽部和喉部癌的总发病率或这些肿瘤的死亡率均无影响。研究结果表明，它有轻微的保护作用β-Carotene在早期的喉癌症发生率[13.]．欧洲研究研究了视黄糖棕榈酸酯（维生素A）和N-乙酰半胱氨酸对整体存活，无事先存活和头部和肺癌患者的第二原发性肿瘤的发生的积极作用。在2592名患者中，60％患有头部和颈部，肺癌40％，可以显示干预组的福利[14.]．

经过几十年的深入研究，科学界最终发现微量营养素的有益作用证据很少，但有害作用证据明确。1999年，拜尔斯讨论了观察性研究结果与干预性试验结果之间存在如此巨大差距的原因。他发现了几个需要改进的因素首先，观察性研究通常显示癌症与作为膳食补充的营养素之间的关系较弱，这很可能是因为服用剂量和使用模式的报告存在差异。其次，完成的随机对照试验遵循药理学的研究范式，测试mi超营养剂量的营养素。认为高剂量的单一营养素会复制在全食品中发现的营养素复杂混合物的效果的基本假设可能是错误的。但他强调，全食品或全饮食干预措施不能轻易地纳入这些试验中，当然不能以盲目的方式。第三，例如出于可行性原因，此类试验仅在短时间内评估癌症高危人群。由于随机对照试验旨在回答狭义定义的问题，因此仅研究高危人群可能是不明智的[15.]．

3.头颈癌化学预防的基本原理

头颈癌的化学预防非常有趣，因为许多癌症是由癌前病变发展而来的，临床和组织病理学检查往往容易获得。此外，由于现场癌变，HNSCC患者存在局部复发或第二原发肿瘤的高风险，这是临床试验的一个极好终点。由于生活方式因素和健康行为，HNSCC患者在治疗前往往表现出较差的饮食条件[16.]．除了吸烟，生存的最强预测因素，低水果摄入量，与生存呈负相关[17.]．

上部气雾剂粘膜是烟草烟雾的主要靶标，大约7000种化合物的复杂混合物，包括高浓度的氧化剂[18.]．一个香烟吞云吐雾包含10^14.–10^16.激进，主要是活性氧（ROS）[19.]．因此，细胞抗氧化防御的能力是很容易超过导致大分子如蛋白质，脂质和DNA的氧化损伤。虽然前者可在生理周转过程中进行更换，遗传物质需要修复[20.]．在致癌发生期间，化学品和氧化应激导致DNA改变并引起炎症反应，导致更氧化应激[21.]．此外，除了其内在的DNA损伤性质，除了在代谢活化期间消除烟草致癌性能，还导致氧化应激，而且还通过与其缀合的谷胱甘肽，细胞的主要非竞争抗氧化剂，而且还引起氧化应激。22.]．最常见的ROS诱导的DNA改变之一是8-氧代 - 鸟嘌呤，这导致相对的DNA链中腺嘌呤的频繁掺入。得到的g：c至a：t ressversion代表了广泛的上皮性恶性肿瘤中最主要的体细胞突变[23.]．因此，烟草烟雾引起的氧化应激是DNA损伤和致突变性的主要来源。因此，口服高剂量的有效抗氧化微量营养素，例如β-胡萝卜素，α-生育酚，或抗坏血酸来补偿氧化应激似乎是上呼吸道消化道癌症化学预防最有希望的策略，但如前所述，失败了。在分子水平上，对这种失败的一个可能的解释是，高剂量的抗氧化剂可能具有促进作用，正如哈利韦尔对维生素E的假设[24.]我们发现维生素C在高浓度氧化应激细胞中失去其DNA保护作用，并增加过氧化氢造成的DNA损伤[25.]．

4.多酚在预防癌症中的作用

1990年代后期，流行病学家变得意识到一种叫做的现象法国悖论．尽管吸烟、高血压、糖尿病和饮食脂肪等风险因素较高，但法国心血管疾病的死亡率相对较低。这种现象至少部分地可以从葡萄酒的高消费中得到解释。在法国西南部，高水平的红酒摄入似乎还能降低肺癌死亡率[26.]．这一结论的有效性后来受到质疑，因为在其他葡萄酒消费量与法国相似甚至更高的国家，并没有看到这种保护作用，但葡萄和葡萄酒的潜在健康益处引起了很多关注。酚醛酸及多酚类物质，每公升红酒共含1.2克，引起关注[27.]．

5.白藜芦醇和单宁

白藜芦醇是由几种植物产生的天然酚。在红葡萄的皮肤中以高浓度检测到植物脂蛋蛋白，并被认为保护它们免受环境压力和感染。在红葡萄酒中，其浓度约为2.0-40.0 μ米(28.]．关于HNSCC，到目前为止仅提供实验数据。El Attar和Virji于1999年报道，白藜芦醇有效抑制红葡萄酒中浓度的口腔癌细胞系的生长和增殖[29.]．其他研究证明其在啮齿动物中预防肠道和结肠癌的有效性。由于其全身性生物利用度差，人类介入试验难以进行，但目前一项研究正在持续有关来自结肠癌患者的结肠粘膜的可能影响[30.，31.]．白藜芦醇抗肿瘤作用的最有力证据存在于白藜芦醇可直接接触的组织中[32.]因此使其成为HNSCC化学预防的主要候选者。

单宁还发现在红葡萄酒中大量，并显示为实验动物中的抗启动和抗血液发育剂[33.]．在小鼠表皮JB6细胞中，单宁封闭表皮生长因子诱导的肿瘤促进[34.]．

6.槲皮素

槲皮素是另一种在水果，坚果，草药和蔬菜中发现的另一种多酚，以及葡萄酒。它通常以其糖基化的形式存在，但催化的糖苷的消化裂解β- 糖苷酶已经开始于口腔[35.]．它是一种有效的(氧)自由基清除剂和参与活性氧生成的金属离子螯合剂[36.]，并且它诱导的人-8-氧代鸟嘌呤DNA糖基化酶的表达，参与氧化的修复酶受损的DNA，在的Caco-2肿瘤细胞[37.]．但是，槲皮素是一把双刃剑，因为在浓度大于40 μM，它增加了中国仓鼠卵巢细胞的氧化应激[38.]．小鼠中的化学预防效应由de和同事显示。口服给药的槲皮素限制宫颈发育障碍病变的进展[39.]．在人类中，它具有与白藜芦醇相当的差的差的全身生物利用度[30.]．

7.表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）

茶是世界上最广泛消耗的饮料之一。黄黄酮，通常称为茶儿茶素，特别是EpicaTechin，EpicaTechin-3-gallate，EpigallocateChin和EpigallocateChin-3-gallate（egcg），占红茶的干重的3-10％和绿茶的30-42％，分别。口服给药，EGCG的生物利用度被发现大鼠约16％。似乎没有相当大的预节系统肝脏新陈代谢[40].尽管茶儿茶素的抗氧化性能已被证实体外［41.[化学预防试验的基本原理主要基于其分子机制。董及其同事鉴定了胰岛素样生长因子1受体和RAS-GTPA酶激活蛋白SH3结构域结合蛋白1作为EGCG的高亲和力结合靶标，所有这些都被证明涉及各种egcg介导的生长抑制癌细胞系[42.- - - - - -44.]．关于头部和颈部致癌物的特别令人兴趣，所示的EGCG对食管癌，表皮癌和结肠癌细胞系中检测到的表皮生长因子受体（EGFR）信号传导途径具有抑制作用[45.- - - - - -48.]．EGCG和行动的分子机制的进一步目标由杨和他的同事[综述49.]．尽管这些实验室发现，由Cochrane合作的META分析51项研究，包括超过160万人参与者无法找到饮酒（绿色）茶的癌症化学预防效果的充分证据[50.]．

8.姜黄素

姜黄素，姜黄中的黄色颜料广泛用作香料，具有各种性质，如抗氧化剂，免疫调节，抗血管生成和诱导细胞凋亡[32.]．显示有效抑制来自口腔癌前病变和鳞状细胞癌的正常人口上皮细胞和细胞系的生长[51.]．此外，姜黄素降低了大鼠化学诱导的口腔癌的发病率和体积[52.]．在患者在几种器官中发育上皮癌的高风险患者的前瞻性试验中，姜黄素的口服摄入量高达8克/天对人体没有毒性作用，并导致7例患者中的2例中口腔白细胞的组织学改善3例政府月份[53.]．在25例口服白斑患者用900毫克姜黄素治疗，每天80毫克去甲氧杂菌蛋白和20mg双甲氧氧基碳酸核菌蛋白，发现血清和唾液酸维生素C和E水平增加，而血清和唾液中的氧化应激标记减少了[54.]．在头颈部癌细胞系中，姜黄素可以靶向多种分子通路，包括caspase-3依赖的信号通路、Notch-1和NF-κ乙途径。这导致了细胞系的凋亡，一般生长抑制的诱导55.- - - - - -59.]．

9.方法论的注意事项

需要考虑有关化学预防研究的一些理论点。多酚在癌细胞系中的生长抑制或促凋亡作用不表示化学预防，而是化学治疗效果。使用癌症衍生的细胞系评估多酚对各种细胞信号传导途径和蛋白质表达的可能效果应该至少受到质疑。

在这方面，表皮生长因子受体（EGFR）生物学是一个很好的例子。约80-90％的HNSCC显示出高表达EGFR。由于在未发生的病变中检测到高EGFR水平，并且在恶性进展期间发现增加水平，因此受体是用于头部和颈部致癌作用的广泛接受的生物标志物[60.]这使得该受体成为一个有趣的化学预防靶点，因为它可以抑制恶性转化。

我们研究了EGFR生物学在苯并(a)芘(B(a)p)引起的化学致癌背景下的作用，发现在EGFR高表达的癌前口咽粘膜细胞中，刺激EGFR显著降低了B(a)p诱导的DNA片段。当受体被提前阻断时，这种效应就完全消失了[61.，62.]．因此，在头颈癌患者的癌前粘膜中，EGFR刺激保护细胞免受B(a)p的影响，这很可能是由于EGFR下游多药耐药外排泵的激活[63.]能够从细胞挤出致癌物[64.，65.]．此外，越来越多的证据表明EGFR水平与烟草消费相关，因此，可能代表了对其致癌影响的生理反应。

另一方面，在HNSCC中，EGFR是一个独立的预后标志物，与对非手术治疗的耐药性和较差的生存率相关[66.]．特别是，EGFR表达的增加与铂类化疗的不良反应有关。西妥昔单抗是一种EGFR单克隆抗体，在顺铂耐药癌症中显示有效[67.]与B（a）p挤出相关的外排泵也与顺铂等化疗药物的耐药性有关[68.]．根据它们在抗菌和抗癌化疗中的功能命名，现在已经变得清楚，这些泵更像是对外来生物的一般防御，并在所有生物体内高度保守[69.]．

因此，EGFR抑制，例如EGCG，肯定会导致细胞系实验中的生长抑制，并可能使癌细胞对细胞毒性药物更敏感。但它也可能削弱癌前粘膜中对致癌物的细胞防御。这说明细胞信号通路或蛋白的修饰在非/癌前细胞和癌细胞中，表达可能分别具有不同的影响。

出于上述原因，最合适体外尚未确定癌症化学预防试验的模型。当潜在的化学预防剂抑制或甚至逆转人工诱导的上皮细胞的恶性转化时，动物模型尽管它显然不是感兴趣的主要生物，但仍然存在甚至逆转人工诱导的上皮细胞的恶性转化。在我们实验室中，我们从多年以来使用新鲜活检人的上部气质疼痛粘膜的组织培养。首先由Steinsvåg和鼻咽腺样组织的同事描述[70]，我们将模型应用于鼻和口咽粘膜。下鼻甲、腭扁桃体和软腭手术中采集的样本在培养中保存数周，直到形成由结缔组织核心和完全覆盖纤毛或鳞状上皮的三维组织立方体。在评价外源性物质对上呼吸道粘膜的致癌影响时，大多采用分离的粘膜细胞。然而，与保存在其周围组织中的细胞相比，单个细胞可能只有有限的代谢能力，不仅对外源性化合物，也对内源性化合物。此外，由于细胞物质的大量损失，单细胞不适合重复试验。如上所述，头颈部致癌物以一种慢性的方式攻击它们的目标。鼻或口咽黏膜培养物可以很容易地暴露于多种外源性物质培养物中，而在生存能力方面没有相当大的细胞损伤，并且可以通过小心的抽吸在容器之间转移，而没有细胞损失。此外，在这些组织培养中，原代黏膜细胞可以存活数周。因此，我们的组织培养模型代表了吸入或摄入的外源性和致癌物的首要靶组织。它不仅允许化学致癌物的重复孵育，也允许化学预防化合物的重复孵育[71]．

10. DNA保护人粘膜组织培养中的多酚

致癌物质被定义为物理，化学或生物学剂或在生物体中产生癌症的药剂的组合。这国际癌症研究机构（IARC）最近分类为烟草烟雾为人类致癌物（第1组）[72]．这一分类也适用于苯并(a)芘(B(a)p)，它最近从2B (可能对人类致癌)第1组[73].大多数已知的化学致癌物也是诱变剂，因此，是产生导致可遗传基因改变的遗传事件的因素[74]．B（a）p及其活化的代谢物苯并（a）芘二醇环氧化物（bpde）是众所周知的诱变剂[75]．BPDE与DNA结合体外和体内和形式加合物，特别是在p53肿瘤抑制基因中[76]如上所述，氧化应激也会导致DNA改变。尽管过氧化氢广泛用于诱导氧化应激，但会导致DNA损伤体内和体内［77] IARC仅发现其在人类致癌性和实验动物中致癌性有限的证据，因此将其分类为第3组（不能归类为对人类的致癌性）[78]．

使用鼻和口咽粘膜组织培养，我们先前评估了表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）、单宁和槲皮素预防DNA损伤的能力。在DNA被香烟烟雾冷凝液（CSC）、BPDE或过氧化氢破坏之前，培养物和多酚一起培养。基因毒性通过彗星试验进行量化。为了检测EGCG，在BPDE引入DNA片段之前，将口咽粘膜培养物与EGCG一起孵育，之前的研究表明，BPDE可在人类细胞中诱导剂量依赖性DNA迁移[79]．EGCG的治疗以剂量依赖性方式显着降低了BPDE诱导的DNA损伤。在另一系列测试中，将组织培养物仅在1或4天内与EGCG一起温育30分钟。在18小时孵育期间，CSC诱导DNA损伤。这里，在4次孵育后1和47％后，DNA损伤减少了28％[80]．当在30分钟内30分钟内将培养物暴露于单宁时，可以看到类似的结果。由BPDE引起的DNA碎片下降超过40％[81]．

在产生的鼻粘膜槲皮素产生的培养物中，通过过氧化氢引起的DNA损伤，再次以剂量依赖性方式[82]．

对于这里介绍的研究，我们使用Oropharyngeal粘膜。将培养物与姜黄素，EGCG或两者一起温育。通过香烟烟雾冷凝物引入DNA损伤并使用彗星测定量化。

11.材料和方法

11.1。组织材料

这项试验得到了德国慕尼黑路德维希-马克西米利安大学伦理委员会的批准。在给予知情同意后，在慢性扁桃体炎和/或阻塞性睡眠呼吸暂停综合征手术治疗期间采集粘膜样本。组织样本在扁桃体切除和悬雍垂腭咽成形术中获得。切除后用0.9% NaCl溶液覆盖标本。

11.2。细胞培养过程

在立即运输到实验室后，将标本解剖到1毫米的粘膜立方体中^3.不包括深层。然后将标本转移到一个含有5 mL磷酸盐缓冲盐水(PBS, Gibco invitrogen, Eggenstein, Germany)的管中，在PBS中洗涤3次，并置于24孔板中，每个孔中一个片段。用30 mL 0.75%琼脂Noble (DIFCO, Detroit, USA)包被于30 mL Dulbecco 's modified eagle培养基(DMEM)， 6 mL 10%胎牛血清(Gibco)， 75μl非源氨基酸（Gibco），240 μL青霉素 - 链霉素（Sigma Aldrich，Steinheim，Germany）和120 μL两性霉素B（Gibco），从而防止粘附到表面。现在涵盖了250的文化 μl支气管上皮细胞生长培养基（BEGM，补充牛垂体提取物，胰岛素，氢化胞蔻体，肾上腺素，三碘罗酮，转移和视黄酸; Promocell; Heidelberg，德国）每孔。在37°C孵育约21天后，5％CO₂，相对湿度为100%时，粘膜培养物完全覆盖上皮细胞。生长培养基(250μ每隔一天更新一次;每7天更换一次多孔板。转移时，用移液管轻度吸入培养物，从而尽可能防止对细胞的损害。

11.3. 孵化

在第一个实验臂中，将20个粘膜培养物与1孵育 μ摩尔/升姜黄素，连续1或4天，持续60分钟。通过剂量反应实验确定浓度（数据未显示）。所有孵育后，两次更换BEGM。在最后一次培养后，直接将培养物暴露于香烟烟雾冷凝液（CSC，0.7 mg/mL；由万宝路香精混合物制成；分析生物技术公司Forschungslabor，慕尼黑，德国）18小时。所有试剂在二甲基亚砜（DMSO，默克，达姆施塔特，德国）中溶解，用作阴性对照。在第二组实验中，20种培养物暴露于1 μ摩尔/ L的姜黄素1小时和0.5 μMOL / L EGCG 30分钟以评估可能的协同效果。再次，将CSC孵育18小时。

11.4。彗星试验

为了量化所得到的DNA损伤，施加单细胞微胶体电泳（COMET测定）的碱性版本。该测定能够检测DNA双链和单链断裂以及碱性不稳定部位和瞬态修复位点[83]．

粘膜培养在覆盖50 mg蛋白酶(Biochrom，海德堡，德国)，10 mg透明质酸酶(罗氏，曼海姆，德国)和10 mg胶原酶P(罗氏)溶解于10 mL BEGM的溶液后进行酶消化1小时。然后，小心地去除结缔组织和细胞外基质成分。组织水解酶用胎牛血清(Gibco)中和，细胞悬液用冷PBS (Gibco)洗两次。采用台盼蓝排除试验监测细胞活力。

彗星测定根据标准方案进行[84]．DNA迁移使用图像分析软件Komet 3.1 (Kinetic Imaging, Liverpool, UK)进行测量，并通过尾部DNA的百分比(% tail DNA)进行量化[85]．每次载玻片的80个细胞核被随机选择，而不知道预处理。

11.5。统计分析

使用SPSS 18.0软件（SPSS GmbH，München，德国）使用Wilcoxon签名级别测试计算DNA损伤的显着差异。alpha级别设定为0.05以前的统计分析，并根据多种测试根据Bonferoni校正调整。重大α-水平以数字表示。

12.结果

使用台盼蓝染色试验验证的细胞活力持续> 90％，从而排除所测试物质的主要细胞毒性作用。

在第一个实验臂，DMSO用作1天或4天添加到所有其他化学品的溶剂，以及姜黄素，没有引起相当大的DNA损伤。CSC没有诱导DNA片段化平均％尾巴的DNA为19.1。先前暴露于姜黄素导致降低DNA损伤的31.4％至13.1％的DNA尾部60分钟内。（见图当培养物用姜黄素上培养4天，DNA片段化降低了47％至10.1％的DNA尾部，这反映CSC诱导的基因毒性的显著进一步降低1).

这些结果在第二组实验中得到了证实。同样，溶剂、姜黄素和EGCG不会导致DNA片段(数据未显示)。姜黄素使csc诱导的DNA片段率分别降低25.8%(1天)和47.1%(4天)。在第1或4天添加EGCG也能显著降低csc引起的遗传毒性。尾DNA百分比由24.0下降至18.8(21.7%)，分别下降至13.8 (42.5%;参见图2).

两种多酚一起添加没有显示出协同效应。当在1天内孵育时，两种物质的组合没有进一步增加姜黄素和EGCG的效果，但仍然显著降低CSC的遗传毒性。当添加到4天时，两种物质的组合不再显著降低CSC诱导的gen耳毒性α-Level根据Bonferoni校正设置为0.006（见图2).

13.结论

在我们的研究中，粘膜培养与姜黄素、表没食子儿茶素-3-没食子酸酯(EGCG)或两者一起孵育1天或连续4天。所有培养后，更换生长培养基两次。最后将培养物暴露于香烟烟雾冷凝物(CSC) 18小时。除姜黄素和EGCG联合孵育4天外，通过彗星试验评估，结果显示csc引起的遗传毒性显著降低。同时添加姜黄素和EGCG时，无添加效应。与我们实验室检测的其他多酚相比，姜黄素是预防烟草相关DNA损伤最有效的物质。所有化合物均以剂量依赖的方式减少B(a)p或CSC的基因毒性效应[80，81]．

我们的研究结果表明，姜黄素和EGCG具有很好的化学预防潜力，烟草烟雾对人类具有致癌性，并与绝大多数头颈部癌症有关。由于我们使用口咽粘膜培养物作为烟草烟雾的主要人体靶组织，实验设置代表了两者之间的良好妥协体内动物和人体细胞系实验研究。在一起，这项研究和我们实验室的先前结果表明，膳食多酚能够预防上部气体抗部粘膜中的烟草相关的遗传毒性。水果和蔬菜中的饮食仍然是多酚化合物的主要来源，并反复显示较低的HNSCC风险。不幸的是，许多沉重的吸烟者由于生活方式习惯而不利用这个来源。

尽管大量介入试验评价膳食补充微量元素，维生素大多，对癌症发病率的影响令人失望的结果，观察性研究的结果清晰依然有效。即使不能证明一个单药或者两种组合可以是一样有效，整个水果和蔬菜，它仍然是在这样的饮食，因此时间的问题，直到网络和参与微量营养素相互作用更好地理解．维生素E，例如，是包括4种生育酚16种的化学化合物的复杂混合物。在西方饮食中，最普遍的维生素E化合物γ-Tocophherol和高血清水平与心血管疾病相反。肠道吸收后γ生育酚保留不佳，α-Tocophherol，广泛用于膳食补充剂，降低了进一步的血清浓度γ-Tocophherol [86- - - - - -88]．此外，高过载剂量的几种维生素可能比保护性更有害。在这方面，Paracelus“Dosis Forecit Venenum”的旧句子似乎尤其如此。

很明显，微量营养素补充不能模仿富含水果和蔬菜的饮食。多酚最近成为人们关注的焦点，不仅因为其强大的抗氧化作用，还因为其与细胞信号通路相互作用的能力。在这方面，如上所述，我们需要仔细区分化学预防作用和化学治疗作用。然而，多酚显示出很有希望的抗癌和抗突变作用。事实上，饮料中存在高浓度的几种酚类化合物，这使它们成为头颈癌化学预防的良好候选。由于抗癌效果的证据最适用于它们可以直接接触的组织，因此作为现场癌变目标的上部空气消化粘膜似乎是最适合的组织之一。

缩写

HNSCC:	头颈鳞状细胞癌
ROS:	活性氧
EGCG:	Epigallocatechin-3-gallate
表皮生长因子受体：	表皮生长因子受体
B (a) p:	苯并(a)芘
BPDE：	苯并(a)芘二醇环氧化物
CSC：	香烟烟雾冷凝。

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氧化医学和细胞寿命

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抽象的