l -肉碱下调异环磷酰胺诱导范可尼综合征大鼠氧化和亚硝基凋亡信号的作用

摘要

有很好的记录，IFOSFamide（IFO）治疗与FANCONI综合征形式的皮肤病有关。虽然氧化应激已被报告为IFO诱导的FANCONI综合征中的主要参与者，但没有确定这种效果的机制。因此，本研究已开始对基因表达水平进行研究，IFO诱导肾毒性的机制以及肉碱补充凝结IFO的这种严重副作用的机制。为实现本研究的最终目标，将成年雄性大鼠分配到四个治疗组中的一种，即控制，L-肉碱，IFO和IFO加1-肉碱。IFO的给药5天显着增加肾组织中的血清肌酐，血尿尿素（BUN）和全硝酸盐/亚硝酸盐（NOx）产生。此外，IFO显着增加了诱导型一氧化氮合酶（InOS），caspase-9和Caspase-3的mRNA表达，并显着降低了肾组织中谷胱甘肽过氧化物（GPX），过氧化氢酶（猫）和Bcl2的表达。将L-肉碱施用于IFO处理的大鼠，导致IFO诱导的所有生化和基因表达的变化完全逆转，对照值。本研究的数据表明，L-肉碱通过在肾组织中的氧化和亚硝基凋亡信号传导的下调来阻止IFO诱导的肾毒性的发育。

1.介绍

Ifosfamide（IFO）是氧基奥代磷酰芥子烷基化剂，其用于大多数癌症化疗和免疫抑制方案[1-3.]．然而，高治疗剂量的IFO与FANCONI综合征的形式有关的IFO，尤其是儿童[4.那5.]．IFO被肝细胞色素P450氧化为IFO芥菜这是其抗肿瘤活性的原因[6.]．另一方面，50%以上的IFO剂量通过侧链脱烷基反应生成非活性代谢物2-和3-脱氯乙基脂酰胺以及等摩尔量的剧毒代谢物氯乙醛(CAA)和硫代二乙酸(TDGA) [7.那8.]．有充分的文献证明，人肾脏中CAA和TDGA的局部形成和积累是ifo诱导肾病的主要因素[7.那9.]．因此，尽管mesna与CAA反应性较低，但IFO治疗与范可尼综合征形式的严重近端肾小管功能障碍有关[10]．该综合征是近端小管的广义功能障碍，其特征在于葡萄糖，磷酸盐，碳酸氢盐，氨基酸的过度排泄，以及由该肾上段排出的其他溶质的溶质[10那11]．

一氧化氮（NO）是炎症反应的介质和调节剂，其过量生产触发许多疾病，作为恶性肿瘤，类风湿性关节炎和器官毒性[12-15]．NO的作用取决于生产部位、一氧化氮合酶(NOS)、作用时间和活性氧中间体的水平。在肾脏中，NO介导许多生理功能，在肾毒性发病机制中发挥重要作用[16]．NO由三种NOS亚型(神经元型、内皮型和诱导型)产生。在正常肾脏组织中，诱导性NOS (iNOS)由细胞因子诱导，其活性提高NO水平，导致细胞死亡[17那18]．肾毒性肾炎肾小球浸润巨噬细胞或系膜细胞中iNOS表达增加[19]．内皮NOS（ENOS）在肾和肾小球内皮细胞中表达，并通过直接放松传入的动脉孔来发挥内部血管基调的作用[20.]．致密斑中表达神经元NO (nNOS)，并在肾小管-肾小球反应调控中发挥作用[21那22]．

l -肉碱是一种内源性线粒体膜化合物，它有两个来源:肝脏和肾脏的内源性合成和外源性饮食来源，例如红肉和奶制品[23那24]．L-肉碱的主要生理功能促进了长链脂肪酸输送到线粒体进入β- 氧化周期和能量生产[25]．虽然最近的研究报告称左旋肉碱衰减环磷酰胺和IFO诱导的肾代谢损伤，但没有确定这种效果的机制。因此，目前的研究已开始对基因表达水平进行研究，IFO诱导的肾毒性的机制和肉碱补充凝结IFO的这种严重副作用的机制。

2.材料和方法

Holoxan小瓶(Baxter oncology GmbH, Germany)含有1克冻干粉状IFO。每个小瓶的内容物在注射前立即在无菌水中新鲜溶解。IFO的化学结构如图所示1．l -肉碱由Zaven Orfalian博士好心提供，Sigma-Tau制药，pomzia，罗马，意大利。注射前刚在生理盐水中溶解。本研究使用的引物均购自德国Metabion International AG。所用的其他化学品均为最高级的分析用化学品。

2．1.动物

成年雄性Wistar白化大鼠，体重180-200 g，从沙特阿拉伯沙特国王大学药学院动物护理中心获得，饲养在受控环境条件下(25°C和12小时的光/暗循环)，免费获得标准粉食品和自来水。本研究方案已获沙特国王大学药学院研究伦理委员会批准。

2.2。实验设计

将40只大鼠随机分为4组，每组10只。1组(对照组)腹腔注射生理盐水(2.5 mL/kg/d)，连续10天。第2组(肉碱补充组)给予左卡尼汀(200 mg/kg/d, i.p)，连续10天[26]．第3组(IFO组)给予生理盐水连续5天，然后给予IFO (50 mg/kg/d, i.p)连续5天[27]．第4组(IFO-肉碱补充大鼠)在IFO前5天及IFO同时5天给予与第2组相同剂量的l -肉碱(50 mg/kg/day, i.p。)[26]．在最后剂量的治疗后立即，在暴露于乙醚后，在保持在牢固的罩中的乙醚中，将动物处死。获得血液样品。分离血清以测量肌酐和血尿尿素氮（BUN）。两种肾脏都被迅速切除并保持在-80°C中，用于测量GPX，CAT，BCL2，Caspase-9，Caspase-3，InOS，eNOS和NNOS的一氧化氮产生和mRNA表达。

2.3。方法

2.3.1。实时聚合酶链反应定量mRNA表达

总RNA提取
通过如前所述从肾组织中从肾组织中提取总RNA [28]．简而言之，用TRIzol试剂(Invitrogen, life technology, USA)均质提取RNA。匀浆在室温下孵育5分钟。加入氯仿，旋转离心。分离水相，乙醇沉淀总RNA。总RNA经离心洗涤后，用焦碳酸二乙酯处理的H₂O.用紫外分光光度计(NanoDrop 8000, Thermo Scientific, USA)对量进行了表征。分离得到的RNA的a260 /280比值为1.9 ~ 2.1。

第一链cDNA
5μ根据制造商的说明，使用SuperScript第一链合成试剂盒(Invitrogen, life technology, USA)逆转录总RNA g。

实时聚合酶链反应
使用Kapa Fast QPCR套件主混合物（Kapa Biosysems，USA）进行实时PCR和方法。使用GAPDH基因作为内源性对照。通过改变PCR条件，例如cDNA的浓度，引物浓度，扩增循环数和退火温度，通过PCR测定进行优化。简而言之，标准25 μL反应混合液中含有终浓度为1× KAPA SYBER qPCR主混缓冲液，0.3μ对GPx、CAT、iNOS、nNOS、eNOS、caspase-9、caspase-3、Bcl2、GAPDH的正、反向引物进行比对1)， 100 ng的cDNA和RNase, DNase游离水。在加入cDNA模板之前，在冰上放置ABI 96孔光学反应板中进行反应。使用的标准热循环条件是初始50°C 2分钟和95°C 10分钟，然后在95°C 15秒和60°C 1分钟的40个循环。所有反应均使用ABI 7500系统(美国生命技术应用生物系统)进行。对所有数据点进行三次重复实验。每个qPCR反应均为无模板对照。

2.3.2。肾组织匀浆中硝酸盐/亚硝酸盐总浓度的测定

总硝酸盐/亚硝酸盐(NOx)是一氧化氮(NO)产生的一个指标，根据Miranda等人的方法作为稳定的最终产物亚硝酸盐进行测量[29]．本测定是基于三氯化钒还原硝酸盐结合酸性格里斯反应的检测。在酸性pH下磺胺酸与亚硝酸盐的重氮化反应并随后与N-(10萘基)-乙二胺产生强烈的着色产物，在540 nm分光光度法测量。氮氧化物水平以mmol/g湿组织表示。

2.3.3。血清尿素氮和肌酐的测定

采用分光光度法测定血尿素氮和血清肌酐浓度，参照Tabacco等[30.和Fabiny和Ertingshausen [31]， 分别。

２.４.统计分析

获得值之间的差异（平均值±SEM，采用单因素方差分析(ANOVA)，然后进行Tukey-Kramer多重比较检验。被视为统计上有差异的标准。

结果

数字2显示IFO、l -肉碱及其联用对血清肾毒性指标的影响。仅执行IFO一项就有显著的342% ()及216% ()，血清肌酐和BUN分别升高。有趣的是，l -肉碱联合IFO可使IFO诱导的血清肌酐和BUN升高完全逆转到对照值。另一方面，单独给药l -肉碱导致血清肌酐和BUN无显著变化。

数字3.显示IFO、l -肉碱及其联合作用对肾脏组织中NOx水平的影响。IFO导致肾脏组织中氮氧化物产量显著增加146% ()，而l -肉碱单独导致无显著变化。l -肉碱联合IFO可降低肾脏组织中IFO产生的NOx水平至控制值。

为了研究IFO对氧化应激基因的影响，我们采用RT-PCR法检测肾组织中GPx和CAT的表达水平4.．IFO单独显着降低了肾组织中GPX（a）和猫（b）mRNA的表达44％（)及63% ()，与对照组比较。然而，给ifo处理的大鼠服用l -肉碱后，抗氧化酶的下降完全恢复到控制值。

数字5.通过RT-PCR分析显示IFO、LC及其联合对肾组织NOS亚型(eNOS (a)、nNOS (b)、iNOS (c) mRNA表达的影响。与对照组相比，单独IFO导致肾组织中eNOS和nNOS mRNA的表达无显著变化。另一方面，与对照组相比，ifo处理的大鼠iNOS mRNA表达水平显著升高6倍。有趣的是，l -肉碱联合IFO可使IFO诱导的肾组织iNOS水平升高完全逆转至控制值。

数字6.显示IFO，LC和它们在肾组织中Caspase-9（a），caspase-3（b）和bcl2（c）的mRNA表达上的影响。IFO与对照组相比，Caspase-9和Caspase-3的表达显着增加了6至8倍，）.相比之下，与对照组相比，IFO显着降低了BCL2的表达水平0.35倍。然而，将L-丙氨酸施用于IFO处理的大鼠，完全归一化IFO诱导的Caspase-9和Caspase-3的增加，并降低了Bcl2表达以控制值。

4.讨论

据报道，5%经ifo治疗的范可尼综合征患者存在肾毒性[27那32-34]．该综合征的特征在于肾葡萄糖尿，电解质丧失，碳酸氢盐和乳酸，广义超亚氨基遗传症和低分子量蛋白尿[35]．据报道，IFO诱导的肾毒性的几种机制包括氧化应激，谷胱甘肽枯竭，抑制肾小管近端细胞中的内吞作用[36那37]．在目前的研究中，IFO肾毒性表现为血清肌酐和BUN升高。在类似的实验条件下，早期和近期的研究报道，连续5天给药IFO (50 mg/kg)与范可尼综合征形式的严重肾毒性有关[11那27那38]．

一氧化氮是l -精氨酸通过NOS亚型作用在肾脏中产生的，在维持血管张力方面起着关键作用。在肾毒性中，IFO给药后NOx产生的增加可能是诱导型一氧化氮合酶增加后的继发性事件[39那40]．我们的研究显示出类似的相关性，其中NOx产生的增加伴随着INOS在IFO给药后增加表达水平。这些结果表明，无生产有助于IFO诱导的肾毒性的发病机制。由组成酶，eNOS和NNO合成的低水平涉及正常生理条件，而Inos的高水平No含量主要是由细胞因子和氧化应激诱导的病理过程中的作用[41那42]．此外，NO通过抑制DNA修复蛋白来抑制细胞修复受损DNA的能力[43]．此外，iNOS过量产生NO在许多病理过程中发挥重要作用，如炎症和癌变[44]．在本研究中，ifo处理的大鼠eNOS和nNOS表达降低。eNOS和nNOS选择性下调可能在骨髓血流减少和继发性组织损伤中发挥作用。l -肉碱联合IFO归一化NOx和iNOS基因表达。类似的结果显示，l -肉碱给药使血清和肾脂质改变以及iNOS基因表达正常化[45]．

在氧化剂的细胞水平下损伤通过抗氧化酶如GPX和猫衰减[46]．过氧化氢酶和GPx催化超氧阴离子()转化成过氧化氢(H₂O.₂）哪个转换h₂O.₂以保护水免受活性氧的侵害[47]．这些酶的活性的还原可能是由于IFO代谢期间的自由基产生的增加引起的[48那49]．我们的研究显示ifo处理的大鼠肾脏组织中GPx和CAT基因表达水平下降。因此，IFO不仅增加了肾组织中自由基的形成，而且降低了其对活性氧的解毒能力。因此，服用ifo的大鼠肾脏更容易受到ROS损伤，因为抗氧化防御酶的缺乏。这项研究的数据显示，l -肉碱联合IFO显著增加了抗氧化酶。GSH水平的增加导致GPx活性的增加，前者作为后面的辅助因子[50]．我们的研究结果与先前的研究一致，报道左旋肉碱具有相似的非酶自由基清除和防哌己过氧化活性[51那52]．

Caspases是细胞死亡蛋白酶家族，在细胞凋亡的执行阶段起重要作用[53]．在肾上皮细胞的IFO处理之后早期激活半胱天冬酶3,8和9，抑制Caspase活性的抑制抑制了IFO诱导的细胞死亡[54]．我们的结果表明，IFO处理通过提高caspase-3和caspase-9的表达水平和降低Bcl2的表达水平来诱导肾细胞凋亡。线粒体凋亡途径有caspase依赖和caspase独立途径。Caspase-3和细胞色素c在caspase依赖途径中发挥重要作用。在这种情况下，IFO可以激活Bax和Bak，导致线粒体释放细胞色素c，进而激活caspase。目前的数据表明，caspase-3和-9在导致ifo诱导的细胞死亡的凋亡级联中起重要作用。同样，Schwartz和他的同事发现caspase-9在导致环磷酰胺诱导的细胞死亡的凋亡级联中发挥重要作用[55]．l -肉碱联合IFO导致Bcl2基因表达水平升高，Bcl2基因通过阻断细胞色素c的线粒体释放而抑制caspase-3和-9基因的表达[56]．

结论

来自本研究的数据表明，L-肉碱通过在肾组织中的氧化和亚硝基凋亡信号传导的下调来阻止IFO诱导的FANCONI综合征的发育。

利益冲突

所有作者都声明不存在利益冲突。

承认

作者感谢沙特国王大学科学研究主任通过研究小组项目no。以序列- vpp - 142。

参考

1. Y. alicia - evcimen和W. S. Breitbart，《异环磷酰胺在癌症患者中的神经精神毒性》，心理肿瘤学，第16卷，第5期。10，页956-960,2007。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
2. B. AMES，L. D. Lewis，S. Chaffee，J. Kim和R. Morse，“Ifosfamide诱发的脑病和运动障碍”儿科血液与癌症第54卷第5期4, pp. 624-626, 2010。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
3. K. L. Dechant, R. N. Brogden, T. Pilkington, and D. Faulds， "异环磷酰胺/梅斯纳。它的抗肿瘤活性、药代动力学特性和在癌症中的治疗效果综述药物，卷。42，不。3，第428-467,1991,991。查看在：谷歌学术搜索
4. R. Rossi, A. Godde, A. Kleinebrand等，“单侧肾切除术和顺铂是异环磷酰胺引起的肾毒性的危险因素:120例患者的分析，”临床肿瘤学杂志，第12卷，第2期1，页159-165,1994。查看在：谷歌学术搜索
5. R. Skinner，I. M. Sharkey，A. D. J. Pearson和A. W. Craft，“Ifosfamide，Mesna和儿童肾毒性”临床肿瘤学杂志，第11卷，第5期。1，第173-190页，1993。查看在：谷歌学术搜索
6. F. Yu, J. Megyesi, P. M. Price，“顺铂细胞毒性的细胞质启动，”美国生理学杂志第295卷第2期1，页F44-F52, 2008。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
7. T. M. Visarius, H. Bähler, A. Küpfer, T. Cerny，和B. H. Lauterburg，“硫代二乙酸是由接受异环烷酰胺的人排出的，并抑制老鼠的线粒体功能，”药物代谢与处置第26卷第2期3，第193-196页，1998。查看在：谷歌学术搜索
8. G. Sangster, S. B. Kaye, K. C. Calman, J. F. Dalton，“2-巯基乙烷磺酸钠(mesna)对异环磷酰胺肾毒性的保护失效”，欧洲癌症和临床肿瘤学杂志，卷。20，没有。3，第435-436,1984。查看在：谷歌学术搜索
9. I. Nissim, O. Horyn, Y. Daikhin等，“异环磷酰胺诱导的肾毒性:机制和预防”，癌症研究第66期15、2006年。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
10. M. P. Goren, R. K. Wright, M. E. Horowitz和C. B. Pratt，“异环磷酰胺诱导亚临床肾小管毒性，尽管mesna，”癌症治疗的报道，第71卷，第71期2，页127-130,1987。查看在：谷歌学术搜索
11. I. Nissim和J. M. Weinberg，“甘氨酸可以减轻由马来酸或异环磷酰胺引起的范可尼综合征，”肾中国际，第49卷，第49期。3，第684-695页，1996。查看在：谷歌学术搜索
12. R. Korhonen, A. Lahti, H. Kankaanranta，和E. Moilanen，“炎症中的一氧化氮的产生和信号传导”，目前的药物靶点，第4卷，第4期。4，页471-479,2005。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
13. R. M. J. Palmer, D. D. Rees, D. S. Ashton, and S. Moncada，“l -精氨酸是内皮依赖性松弛中一氧化氮形成的生理前体，”生物化学和生物物理研究通信，卷。153，不。3，pp。1251-1256，1988。查看在：谷歌学术搜索
14. C. Nathan和Q. w Xie，《一氧化氮合酶:作用、toll和控制》，细胞第78期6、1994年。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
15. R. K. Kanwar, N. Singh, S. Gurudevan，和J. R. Kanwar，“靶向乙型肝炎病毒和人类乳头瘤病毒诱导的癌变:新型专利疗法”，最近的抗感染药物发现专利，卷。6，不。2，pp。158-174,2011。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
16. D. Ogawa, K. Shikata, M. Matsuda等，“一种新型选择性诱导型一氧化氮合酶抑制剂对WKY大鼠实验性新月体性肾小球肾炎的保护作用”，肾病透析移植，第十七卷，第二期12，pp。2117-2121,2002。查看在：谷歌学术搜索
17. H. Mühl, K. Sandau, B. Brüne, V. A. Briner，和J. Pfeilschifter，“一氧化氮供体诱导肾小球系膜细胞、上皮细胞和内皮细胞凋亡，”欧洲药理学杂志，卷。317，没有。1，pp。137-149,1996。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
18. M. K. Mohaupt, J. L. Elzie, K. Y. Ahn, W. L. Clapp, C. S. Wilcox，和B. C. Kone，“在大鼠肾脏中编码两种诱导型一氧化氮合酶的mrna的差异表达和诱导”，肾中国际第46卷，第46期3，第653-665页，1994。查看在：谷歌学术搜索
19. V. catell, T. Cook, S. Moncada，“实验性肾毒性肾炎中肾小球合成亚硝酸盐”，肾中国际第38卷第2期6，第1056-1060页，1990。查看在：谷歌学术搜索
20. C. Teupe, S. Richter, B. Fisslthaler等人，“利用超声增强破坏载质粒微泡的方法对拟磷内皮型一氧化氮合酶(S1177D)进行血管基因转移，提高血管反应活性。”循环第105卷第1期9，页1104-1109,2002。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
21. E. Brunelli，I. Perrotta，E. Talarico和S. Tripepi，“两种一氧化氮合成酶同种型，eNOS和InOS的定位在皮肤中三尾鮰(两栖纲，尾鱼纲)在开发期间,“比较生物化学与生理学，第142卷，第2期。2，页249-255,2005。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
22. Y. Chiba, T. Arimoto, T. Yoshikawa, M. Misawa，“在大鼠中一氧化氮合酶活性升高与抗原诱导的气道高反应性，”实验肺部研究第26卷第2期7，页535-549,2000。查看在：谷歌学术搜索
23. E. Arrigoni-Martelli和V.CASO，“肉毒碱保护线粒体，从Xenobiotics中除去有毒酰基，”实验和临床研究下的药物第27卷第2期1，页27-49,2001。查看在：谷歌学术搜索
24. W. Lysiak, K. Lilly, F. DiLisa, P. P. Toth，和L. L. Bieber，“定量l-肉碱对大鼠心脏和肝脏线粒体中酸溶性短链酰基辅酶a和CoASH水平的影响”，生物化学杂志，第263卷，第2期3，页1151-1156,1988。查看在：谷歌学术搜索
25. C. J. B. Rebouche和H.Seim，肉氨酸新陈代谢及其在微生物和哺乳动物中的调节，“营养年度审查， 1998年第18卷，第39-61页。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
26. M. M. Sayed-Ahmed，“l -肉碱减轻异环磷酰胺诱导的肉碱缺乏和减少大鼠肾组织线粒体内辅酶a - sh，”肾病学杂志，第24卷，第2期4, pp. 490-498, 2011。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
27. M. M. Sayed-Ahmed, A. Q. Darweesh, A. J. Fatani，“在异环烷酰胺诱导的范可尼综合征大鼠模型中，肉碱缺乏和氧化应激引起心脏毒性，”氧化医学与细胞寿命，卷。3，不。4，pp。266-274,2010。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
28. P. Chomczynski，“从细胞和组织样本中单步同时分离RNA、DNA和蛋白质的试剂”，生物技术，第15卷，第5期。3，第532-537页，1993。查看在：谷歌学术搜索
29. K. M.Miranda，M.G.Espey和D. A. Wink，“一种快速，简单的分光光度法，同时检测硝酸盐和亚硝酸盐”，“一氧化氮，第5卷，第5期。1，页62-71,2001。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
30. A. Tabacco，F.Meiattini，E. Moda和P. tarli，“简化的酶/比色血清尿素氮测定”，临床化学，第25卷，第2期2，第336-337页，1979。查看在：谷歌学术搜索
31. D. L. Fabiny和G.Ertingshausen，“与Centrifichem测定血清肌酐的自动反应速率方法”，临床化学，第十七卷，第二期8，第696-700页，1971年。查看在：谷歌学术搜索
32. C. B.普拉特，W.H. Meyer，J. J. Jenkins等，“Ifosfamide，Fanconi的综合征和佝偻病”临床肿瘤学杂志，卷。9，没有。8，PP。1495-1499,1991。查看在：谷歌学术搜索
33. J. De Schepper, G. Stevens, M. Verboven, C. Baeta, and J. Otten，“异环磷酰胺致2岁儿童范可尼综合征伴生长失败”，美国儿科血液学/肿瘤学杂志，第13卷，第2期1，第39-41页，1991。查看在：谷歌学术搜索
34. A. Suarez, H. McDowell, P. Niaudet, E. Comoy，和F. Flamant，“异环磷酰胺对恶性间质肿瘤治疗儿童肾脏毒性的长期随访:国际儿童肿瘤学会报告，”临床肿瘤学杂志，卷。9，没有。12，pp。2177-2182,1991。查看在：谷歌学术搜索
35. J. Drube, E. Schiffer, H. Mischak等，“肾脏范可尼综合征患儿的尿蛋白组模式”，肾病透析移植，第24卷，第2期7，pp。2161-2169，2009。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
36. O.A.Angary，“胸腺喹诺酮在大鼠中衰减了Ifosfamide诱导的FANCONI综合征，并增强了小鼠的抗肿瘤活性，”民族药物学杂志，第67卷，第5期2，页135-142,1999。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
37. Z. Yaseen，C.Michoudet，G. Baverel和L. Dubourg，“Ifosfamide诱导的大鼠近端肾小管中内吞作用抑制的机制”档案的毒理学，第82卷，第2期9, pp. 607-614, 2008。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
38. O. Sehirli，A. Sakarcan，A.Velioglu-Ogunc等，“白藜芦醇改善了大鼠的Ifosfamide诱导的FANCONI综合征”毒理学和应用药理学，卷。222，没有。1，pp。33-41,2007。查看在：谷歌学术搜索
39. K. K. Son和K.J.Hall，“一氧化氮介导的肿瘤细胞杀死顺铂的干扰素 -γ小鼠卵巢癌的基因治疗癌症基因治疗，卷。7，不。10，pp。1324-1328,2000。查看在：谷歌学术搜索
40. K. Son和Y. M. Kim，“体内顺铂暴露的巨噬细胞增加免疫刺激剂诱导的一氧化氮合成以杀死肿瘤细胞”，癌症研究，卷。55，不。23，pp。5524-5527，1995。查看在：谷歌学术搜索
41. G. julu - schaeffer, G. A. Gray, I. Fleming, C. Schott, J. R. Parratt, and J. C. Stoclet，“内毒素诱导的血管反应性丧失涉及l -精氨酸途径”，美国生理学杂志号，第259卷。4, pp. H1038-H1043, 1990。查看在：谷歌学术搜索
42. E. D. Franke, C. M. Lucas, E. San Roman，《人类对间日疟原虫环孢子体蛋白的抗体反应》感染和免疫，卷。59，没有。8，PP。2836-2838,1991。查看在：谷歌学术搜索
43. D. A. Wink, J. A. Cook, D. Christodoulou等人，“一氧化氮和一些一氧化氮供体化合物增强顺铂的细胞毒性，”一氧化氮，卷。1，不。1，pp。88-94,1997。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
44. H. Ohshima和H. Bartsch，“慢性感染和炎症过程作为癌症危险因素:一氧化氮在致癌中的可能作用”，突变研究，卷。305，没有。2，pp。253-264,1994。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
45. M. H.Mahfouz和E.K. Mohamed，“L-肉碱对诱导型一氧化氮合酶，胰岛素等胰岛素抗性大鼠肾脏组织中胰岛素受体基因表达和胰岛素受体基质-1的影响”。埃及生物化学与分子生物学杂志，卷。29，不。2011年2日。查看在：谷歌学术搜索
46. A. Koc, M. Duru, H. Ciralik, R. Akcan, and S. Sogut，“erdosteine对顺铂诱导的大鼠肝氧化损伤的保护剂，”分子与细胞生物化学第278期1-2，页79-84,2005。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
47. M. M. Sayed-Ahmed，A.M.Aleisa，S.Al-Rejaie等，“胸腺喹诺酮通过抗氧化信号传导衰减肝癌的二乙基亚胺诱导，”氧化医学与细胞寿命，卷。3，不。4，pp。254-261,2010。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
48. E. D. Brookins Danz, J. Skramsted, N. Henry, J. A. Bennett, R. S. Keller，“白藜芦醇通过线粒体稳定和Sirt1通路防止阿霉素的心脏毒性，”自由基生物学和药物第46卷，第46期12，PP。1589-1597,2009。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
49. K.Fisher-Wellman，H.K. Bell和R. J. Bloomer，“氧化应激和抗氧化剂防御机制与心肺和代谢紊乱期间的锻炼有关，”氧化医学与细胞寿命，第2卷，第2期1，第43-51页，2009。查看在：谷歌学术搜索
50. L. P. James，P.R. Mayeux，以及J.A.Hinson，“对乙酰氨基酚诱发的肝毒性”，药物代谢与处置，卷。31，不。12，pp。1499-1506,2003。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
51. A. Arduini:“肉碱及其酰基酯作为二级抗氧化剂?[9],”美国心脏病杂志号，第123卷6，第1726-1727页，1992。查看在：谷歌学术搜索
52. M. M. Sayed-Ahmed，M.M.Khattab，M.Z.Gad和N·Mostafa，“L-肉毒碱可防止高胆固醇症兔中动脉粥样硬化病变的进展”药理研究，卷。44，不。3，pp。235-242,2001。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
53. 索恩伯里(n.a. Thornberry)和拉泽布尼克(Y. Lazebnik)，《Caspases:内心的敌人》科学，卷。281，不。5381，PP。1312-1316，1998。查看在：谷歌学术搜索
54. R. Becker，A. Ritter，U.Eichhorn等，“缩细胞药物交联过敏V79细胞中的DNA诱导和凋亡β-D-glucosyl-ifosfamide芥末。”英国癌症杂志，卷。86，没有。1，pp。130-135,2002。查看在：出版商的网站|谷歌学术搜索
55. P. S. Schwartz和D. J. Waxman，“环磷酰胺诱导9L肿瘤细胞中caspase 9依赖的凋亡”，分子药理学，卷。60，否。6，pp。1268-1279，2001。查看在：谷歌学术搜索
56. J. M. Adams和S. Cory，“Bcl-2蛋白质：细胞存活的仲裁员”科学，卷。281，不。5381，pp。1322-1326,1998。查看在：谷歌学术搜索

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