文摘

镰刀菌素是一个著名的属包括一个称为无数种植物内生真菌次生代谢产物的生产来源不同的生物活性。真菌次生代谢产物被定义为真菌产生的化合物并不是必不可少的。常见的次生代谢物镰刀菌素sp。(如酚类、类黄酮、生物碱、皂苷、和萜烯)有广泛的生物学性质包括抗氧化、抗糖尿病的,抗菌,抗真菌和细胞毒性活动。通过这种方式,本研究进行评估的酚类化合物和黄酮类化合物尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌定性、定量通过高效液相色谱法(HPLC)。此外,脂类的标准尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌提取物显示了气相色谱分析-质谱法(gc - ms)及其脂肪酸已经确定定义最多产的物种的生物和宝贵的脂肪酸。在酚类和黄酮类化合物之间的歧视尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌自然生物成分分析的高效液相色谱法,methanolic提取的镰刀菌素物种显示,酚类水平升高病圃比它的水平f .以上类黄酮水平先进病圃相比f .以上。此外,一些酚类化合物的高效液相色谱仪显示重要的检测病圃提取是消失在f .以上提取和一些黄酮类化合物被检测到病圃提取都消失了f .以上提取。另一方面,定量的脂质分析镰刀菌素物种氯仿提取物表现出显著提升病圃脂质量相比f .以上,并用gc - ms定性脂质分析表明,饱和脂肪酸的浓度在消退病圃比它的浓度(29.18%)f .以上(40.11%)和氧化的比例为3.73%f . oxysoporum而在f .以上是4.23%。这些数据有力地说明,显示尖孢镰刀菌有一个广泛的药用效果,抗氧化,抗癌,抗炎,和心血管的行动从宝贵的酚类化合物由于其丰富的内容,类黄酮,和脂肪酸相比f .以上,因为它可能当选作为替代天然药物制药应用。

1。介绍

微生物分类作为一种可再生能源和生产各种天然产物来源包括初级代谢物(PMs)和次生代谢物(SMs)。所需的主要代谢产物是在微生物的生长和繁殖生产次生代谢产物通过合成酶过程初级代谢产物和真菌的微生物之一视为富含大量的次生代谢物(超过100000种化合物)1,2]。真菌次生代谢产物(FSMs)显示巨大的有利影响青霉素(第一个抗生素在人类历史),阿托品(心动过缓)的生物碱作为一种药物,酚类和黄酮类(抗氧化),类固醇和萜类化合物(抗菌和抗真菌的活动),蒽醌类(抗菌活性)和花药真菌次生代谢产物显示抗癌,治疗糖尿病药、抗炎、抗病毒效果(报道3,4]。确定真菌次生代谢产物包括大量的化合物如酚类、黄酮类、单宁、皂苷、生物碱、多酮类化合物,nonribosomal肽,萜类化合物,混合5,6]。镰刀菌素sp。调查一个伟大的效果作为抗菌剂对人为细菌(c . perfringens,b . megaterium,大肠杆菌,和枯草芽孢杆菌)由于其内容的次生代谢物,高效液相色谱表显示一些次级代谢产物的抗菌活动引起的镰刀菌素sp。fusaravenin生物碱,zwitter-ionic生物碱,cyclonerotriol B, naphthoisoxazole酰胺,depsipeptide, sesquiterpenoid, 1, 4-naphthoquinone所提到的(7]。作者在8)的植物化学的成分进行了定性分析镰刀菌素sp。结果表明积极的指标的酚类、类黄酮、氨基酸、碳水化合物、皂甙、萜烯。此外,总酚含量的定量分析镰刀菌素sp。分别为4.46±0.15毫克的GAE / g的提取物的抗氧化潜力镰刀菌素sp。由三个化验:DPPH自由基清除活性(抑制率40%),过氧化氢清除活动(抑制率35%)和还原能力活动(抑制率35%)。比较实验感染之间进行Orobanche sp。根与尖孢镰刀菌和健康Orobanche sp。根定义的影响尖孢镰刀菌在酚类化合物浓度、液相色谱和质谱分析(质)分析显示显著提升p-coumaric酸,咖啡酸,syringic酸,儿茶素尖孢镰刀菌感染根虽然有点没食子酸下降相比,控制数据(健康Orobanche sp。)[9]。作者在10)发现橄榄品种接种的酚类和黄酮类配置文件腐皮镰孢霉菌通过高效液相色谱和注意到海拔在酚类和黄酮类化合物的浓度;酚醛概要文件是包括焦棓酸、没食子酸,catechein,绿原,儿茶酚,咖啡酸、香草酸、咖啡因、ferullic,肉桂,reversetrol,香豆素,苯甲酸,和salyclic酸,而黄酮类概要文件包括kampferol, narengin, hespiridin,芦丁,rosmarinic酸,apegnin,槲皮素,鼠李亭和acacetin。液相色谱-光谱分析(质)感染berangan香蕉植物尖孢镰刀菌显示一个观察增加酚类化合物,发现酚类是奎尼酸,p-coumaric酸、阿魏酸、syringic酸,咖啡酸,caffeoyl葡萄糖,和芥子酸;在另一个方面,发现黄酮类化合物槲皮素、儿茶素、芦丁、kaempferol-rhamnosehexose,和异鼠李亭3点rutinoside如上所述,11]。

尖孢镰刀菌包含了大量的不同类型的脂肪酸(饱和与不饱和脂肪酸),并用gc - ms检测;饱和脂肪酸是棕榈酸(16:0)和硬脂酸(18:0),而不饱和脂肪酸有油酸(18:1 (n9)),亚油酸(18:2 (n6)],亚麻酸[18:3 (n3)],伽玛亚麻酸[18:3 (n6)],[16:1(9 -十六碳烯酸n6)]的研究[12)显示。腐皮镰孢霉菌脂肪酸成分进行气相色谱-光谱法(气相)和变量发现真理的脂肪酸包括饱和和不饱和脂肪酸;肉豆蔻酸,pentadecaenoic酸、棕榈酸、十七酸,硬脂酸,和花生酸饱和脂肪酸,而9 -十六碳烯酸,独联体——10-heptadecenoic酸、油酸、亚油酸,linolelaidic酸,α亚麻酸,独联体-11年,14-eicosadienoic,独联体-11年,14日17-eicostarienoic代表披露的不饱和脂肪酸(13]。

真菌酚类和黄酮类化合物显示许多生物活性和生物效应,和一些酚类物质(香荚兰酸、芦丁、槲皮素、没食子酸和咖啡酸)发挥了致病作用对有害微生物(bio-resistance) [14];真菌类黄酮保护生物系统免受任何伤害通过氧化过程产生的大分子(15),因为它有对心脏疾病的治疗效果,视网膜病变、神经病变由于其抑制醛糖还原酶酶的能力(16),它构成重要的影响作为抗菌因子(17,18]。真菌酚醛树脂和黄酮类化合物显示出巨大的药品属性例如,治疗糖尿病药(19,抗炎20.,抗肿瘤21,抗溃疡的22),降低血液胆固醇水平(23,抗痉挛药(24]。

脂肪酸从真菌被认为是获得许多方面评价真菌的生物价值通过其丰富的内容和总脂质和不饱和脂肪酸,脂肪酸初期发挥了重要作用的识别、区分和描述物种,菌株,属真菌通过分析细胞脂肪酸(CFA)所提到的25]。

2。材料和方法

2.1。镰刀菌素sp。真菌

病圃收集从番茄根f .以上收集从土豆、孤立的物种是由一个光学显微镜检查了明治模态2100毫升。病圃以其明亮的白色颜色和无可匹敌的形状的细胞,f .以上以其白色红色棉的颜色和形态特色殖民地,和两个物种分化的孢子在显微镜下。

2.2。的培养镰刀菌素sp

孤立的物种对媒体Czapek-Dox肉汤培养(CZDB)(包括20克葡萄糖,2 g硝酸钠,1 g磷酸二氢钾,0.5 g氯化钾,和0.5 g硫酸镁溶解在1升蒸馏水][2610日],媒体被划分锥形烧瓶(500毫升),和每个瓶包含100毫升媒体。五个锥形烧瓶接种病圃和其他五个锥形烧瓶接种f .以上和孵化在28°C±2°C十天。收集每个真菌分离的伴侣在烧杯蒸馏水洗多一次然后干它在烤箱在40°C到他们准备提取步骤,这些步骤都是在控制条件下完成的。

2.3。脂质含量的提取和检测

粮食收集到的伴侣在玻璃砂浆紧密破坏真菌的细胞壁方便提取脂质含量。粒度的配偶和添加氯仿浸泡一天然后滤液用绘画纸1号滤纸和重复这些步骤,直到过滤氯仿变成无色。蒸发压力下干燥的氯仿40°C,旋转蒸发器和收集粗提取液(脂质含量)为每个应变在一个干净的玻璃小瓶,总脂质在−加权和存储10°C至生化分析根据(27]。

计算如下:

2.4。酚类化合物的提取和检测

添加甲醇绝对粒度的伴侣,然后让他们整夜滤液通过绘画纸滤纸1号。这个过程重复两次,methanolic提取物被旋转蒸发器浓缩在40°C到干燥所提到的(8]。

2.4.1。总酚含量

methanolic提取物的总酚含量是评估使用Folin-Ciocalteu colorimetrically试剂测定根据(28]。反应混合物是由混合0.5毫升镰刀菌素物种methanolic提取物、5毫升的10% Folin-Ciocalteu试剂溶解在水中,和4毫升的碳酸钠(1.0米)。样本孵化温度调到30°C,持续15分钟。吸光度是spectrophotometrically记录在765海里。标准系列浓度2 - Caffic酸制备的范围μg / ml,视为样品执行标准曲线和方程在图1。

2.4.2。总类黄酮含量

总类黄酮病圃和f .以上提取测量的氯化铝比色测定报道(29日]。约0.2毫升methanolic节选或标准溶液(槲皮素,20 - 120 mg / L)与3毫升的水混合,0.2毫升的乙酸钾(1.0米),AlCl和0.2毫升的10%₃。混合培养30分钟,对准备试剂空白吸光度测量在415海里通过使用分光光度计;黄颜色的形成表明可能存在的类黄酮。类黄酮浓度的测定标准和结果表示Quercertin等价物(q)如图2。

2.5。采用气相色谱分离和鉴定脂肪酸

脂肪酸甲酯(名声)尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌分析了GC模型7890 b从安捷伦科技装备火焰离子化检测器在中央实验室网络,国家研究中心,埃及开罗。分离是通过使用一个DB-Wax列(60 m×0.25毫米内直径和0.25μ米膜厚度)。分析进行了使用氦(纯度99.9999%)作为载气的流量2.1毫升/分钟离模式,注入体积的1μl,以下温度程序:50°C 1分钟;上升25°C /分钟到175°C;上升在4°C /分钟到235°C和20分钟。注入器和检测器都举行260°C和280°C,分别。定性识别不同的成分是由比较的相对保留时间和质谱与真实的参考化合物(名声> 99%,Sigma-Aldrich有限公司或Supelco有限公司Bellefonte, PA,美国)或通过比较保留指数和质谱与NIST谱女士所示。脂肪酸的相对比例的单个组件被表示为百分比%的峰面积(RA %)相对于总峰面积(100%)所描述的(30.,31日]。

2.6。酚类和黄酮类化合物的分离和鉴定使用高效液相色谱法

酚类化合物的病圃和f以上之后的高效液相色谱测定方法的32]。安捷伦在高效液相色谱中的应用注入样品(1260系列)配备一个auto-sampling喷射器,溶剂脱气器、季度惠普泵(1260系列)和紫外线(UV)探测器为酚类化合物在280 nm和330 nm的类黄酮。分离进行了使用Eclipse C18柱(4.6毫米×250毫米身份证。,5μ米)。水的流动相包括(A)和0.05%三氟乙酸乙腈(B)在0.9毫升/分钟的流量。流动相是连续在一个线性梯度编程如下:0分(82%);0 - 5分钟(80%);5 - 8分钟(60%);8 - 12分钟(60%);12 - 15分钟(82%);15 - 16分(82%);16 - 20分钟(82%)。列温度维持在40°C,注入体积是5μl为每个示例解决方案。保留时间和峰面积被用来计算安捷伦的酚类化合物浓度的数据分析软件。

2.7。统计分析

数据分析进行了使用软件SPSS(16.0版本),结果表示为三个复制的平均值±标准偏差。之间的差异提取测定使用单向方差分析(方差分析),和最低级别的意义被确认 (33]。

3所示。结果与讨论

3.1。定量分析脂类和酚类化合物的含量尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌

3.1.1。总脂质含量尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌

显示数据表1说明的总脂质病圃和f .以上,因为它描述的尖孢镰刀菌有大量的脂质含量(双的f .以上脂质浓度),达到2.21%腐皮镰孢霉菌的脂质含量达到1.13%。

3.1.2。酚类化合物在尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌

如表所示2和图3methanolic提取的尖孢镰刀菌是含有大量的酚类和黄酮类化合物(分别为0.29%和0.2%)相比腐皮镰孢霉菌甲醇提取物(分别为0.11%和0.09%)。统计分析显示,酚类和黄酮类内容之间的显著差异methanolic提取的尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌。

3.2。脂类和酚类化合物含量的定性分析尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌

3.2.1之上。脂肪酸的尖孢镰刀菌Chlororformic提取,并用gc - ms检测

图4和表3显示尖孢镰刀菌内容(饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸)用气相色谱-质谱分析检测。

的尖孢镰刀菌包含两个饱和脂肪酸称为棕榈酸和硬脂酸与保留时间为27.589和33.287分钟,分别。最丰富的饱和脂肪酸是棕榈酸的浓度18.29%硬脂酸的浓度为10.89%。

不饱和脂肪酸被分为单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸的组成尖孢镰刀菌9 -十六碳烯酸,油酸,独联体11-eicosenoate, nervonate又名独联体15-tetracosanoate为28.741,34.136,38.292,和48.607分钟保留时间,分别,而多不饱和脂肪酸亚油酸,γ亚油酸,独联体5、8、11、14-eicosatetraenoate即花生四烯酸独联体5、8、11、14、17-eicosapentaenoate为35.756,37.723,44.563和47.858分钟保留时间。

最丰富的不饱和脂肪酸是油酸的浓度37.32%其次是亚油酸的浓度为20.85%和9 -十六碳烯酸浓度的10.24%。

获得的数据表3代表的脂质标准病圃脂质提取得到氯仿。不饱和脂肪酸(之间的单不饱和脂肪酸和多不饱和)代表的大部分内容病圃脂质提取代表70.84%,相反的行为在29.18%的饱和脂肪酸脂质提取。之间的比例不饱和脂肪酸的饱和脂肪酸2.43%,而未饱和的程度是0.97%,氧化的比例是3.73%。

协议的数据(34,35他提到脂肪酸病圃并用gc - ms检测:油酸,亚油酸,棕榈酸,硬脂酸,9 -十六碳烯酸,eicosaenoic酸、γ亚油酸,9-eicosaenoic酸、花生四烯酸,11-docosenoic酸。

3.2.2。脂肪酸的腐皮镰孢霉菌氯甲酸提取,并用gc - ms检测

图中所示的数据5和表4代表的自由脂肪酸腐皮镰孢霉菌分析了气相色谱-光谱法(gc - ms)检测到饱和和不饱和脂肪酸。饱和的游离脂肪酸腐皮镰孢霉菌棕榈酸和硬脂酸被发现在保留时间为27.464和33.102分钟,分别。棕榈酸检测浓度为20.4%其次是硬脂酸的浓度为19.71%。

的不饱和脂肪酸腐皮镰孢霉菌被分为2组(单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸);单不饱和脂肪酸是9 -十六碳烯酸,油酸,独联体11-eicosenoate保留时间为28.596、33.931和38.283分钟,分别。油酸是最丰富的单不饱和脂肪酸游离脂肪酸中发现腐皮镰孢霉菌其次是浓度的30.01%独联体11-eicosenoate浓度为0.74%,然后9 -十六碳烯酸浓度的0.19%。的多不饱和脂肪酸腐皮镰孢霉菌亚油酸,γ亚油酸,独联体17-eicosatrienoate -11年,14日,独联体5、8、11、14-eicosatetraenoate即花生四烯酸独联体5、8、11、14,17-eicosapentaenoate保留时间35.631,37.696,43.218,44.571,和47.862分钟。最发现的多不饱和脂肪酸腐皮镰孢霉菌是亚油酸的浓度26.78%其次是γ亚油酸的浓度0.86%,独联体5、8、11、14-eicosatetraenoate aka花生四烯酸的浓度0.58%。

结果在表4显示的脂质标准f .以上提取得到的氯仿。之间的比例不饱和脂肪酸的饱和脂肪酸1.49%,而未饱和的程度是0.913%,氧化的比例是4.23%。

类似的观测所示(13]谁发现肉豆蔻酸(碳:0),pentadecaenoic酸(C15: 0)、棕榈酸(C16: 0),十七酸(C17: 0)、硬脂酸(C18: 0)和花生酸(甜:0)f .以上饱和脂肪酸而9 -十六碳烯酸(C16: 1n7),独联体10-heptadecenoic酸(C17: 1n8)、油酸(C18: 1n9),亚油酸(C18: 2n6),linolelaidic酸(C18: 2反式),α亚麻酸(C18: 3n3),独联体-11年,14-Eicosadienoic(甜:2),独联体-11年,14日17-Eicostarienoic(甜:3n3)f .以上不饱和脂肪酸,用气。(36]表明,脂肪酸甲基酯的生产f .以上用气相色谱-质谱是分析了亚油酸、棕榈酸、油酸和硬脂酸。

3.2.3。酚醛树脂的尖孢镰刀菌通过高效液相色谱Methanolic提取检测

形状如图6代表的高效液相色谱法简介尖孢镰刀菌methanolic提取和显示也存在其酚和黄酮类化合物的保留时间的百分比。

酚类和黄酮类化合物methanolic提取的尖孢镰刀菌由高效液相色谱检测,结果列在表吗5;高效液相色谱法(HPLC)检测到七个酚类化合物称为没食子酸,绿原酸、儿茶素、没食子酸盐、香豆酸、香兰素、阿魏酸和保留时间3.515,4.323,4.890,5.678,9.310,9.771,和10.350分钟。最丰富的酚绿原酸浓度为153.59μ儿茶素(16.62 g / g之后μ没食子酸(14.94 g / g)μg / g),酸酯(7.30μg / g),香豆酸(7.74μg / g),阿魏酸(5μg / g),最后是香兰素浓度2.14μg / g。

在延续上述理论,发现黄酮类化合物尖孢镰刀菌methanolic提取芦丁,柚苷配基、大豆苷和山柰酚为8.021,10.566,11.883,和15.031分钟保留时间,分别和最高浓度是柚苷配基浓度33.37μ大豆苷(5.38 g / g紧随其后μ3.22 g / g)、山柰酚(μ1.30 g / g),和芦丁浓度μg / g。

说明数据的获得的数据(11]分析酚类和黄酮类的受感染的植物尖孢镰刀菌通过液相色谱-光谱(质);质透露一个观察到的结果在酚类和类黄酮含量受感染样本相对于控制,从这些酚类和黄酮类化合物例如升高,奎尼酸,p-coumaric酸、阿魏酸、syringic酸,咖啡酸,caffeoyl葡萄糖、芥子酸、槲皮素、儿茶素、芦丁、kaempferol-rhamnosehexose,和异鼠李亭3点rutinoside质色谱图中显示。

3.2.4。酚类化合物的腐皮镰孢霉菌通过高效液相色谱Methanolic提取检测

高效液相色谱法(HPLC)分析了methanolic提取的酚类化合物腐皮镰孢霉菌。获得的数据在图7和表6代表了定性和定量的内容中酚类和黄酮类腐皮镰孢霉菌提取不同的保留时间。

腐皮镰孢霉菌分析显示六个酚类化合物包括没食子酸、绿原酸、没食子酸盐,鞣花酸,香兰素,和阿魏酸为3.42,4.32,5.66,8.80,9.80,和10.34分钟保留时间,分别。最可用的苯酚是鞣花酸浓度154.14μ其次是绿原酸(43.76 g / gμg / g),阿魏酸(5.53μ没食子酸(5.26 g / g)μg / g),酸酯(3.76μg / g),那么香兰素浓度为1.76μg / g。

另一方面,高效液相色谱色谱图显示两个methanolic提取的黄酮类化合物腐皮镰孢霉菌包括柚苷配基大豆苷保留时间为10.57和12.03分钟,分别。发现了柚苷配基浓度为14.32μ大豆苷浓度的2.75 g / g而μg / g。

这些数据都与达成协议(10]分析酚类和黄酮类的内容有些植物主持腐皮镰孢霉菌作为植物内生真菌通过高效液相色谱法(HPLC)。色谱表显示积累检测对许多酚类和黄酮类化合物包括焦棓酸、没食子酸、儿茶素、绿原,儿茶酚,咖啡酸、香草酸、咖啡因、阿魏,肉桂,白藜芦醇,香豆素,苯甲酸、水杨酸、山柰酚、柚皮苷、橘皮苷、芦丁,rosmarinic酸,芹黄素,槲皮素,鼠李亭和acacetin各种浓度不同的保留时间。

主要脂肪酸的浓度尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌choloroformic提取物见图8油酸是最丰富的,常见的脂肪酸两株高f . oxysporium比在f .以上。第二个最常见的和丰富的脂肪酸亚油酸,是有点低f . oxysporium比在f .以上。棕榈酸和硬脂酸是两种常见的饱和脂肪酸的香料及其浓度都显著降低病圃相比f .以上。的浓度独联体5、8、11、14 17-eicosapentaenoate(多不饱和脂肪酸)增加病圃比它的浓度f .以上。重要的海拔在9 -十六碳烯酸病圃(10.24%)相比,f .以上(0.19%)。

形状如图9的脂质标准的百分比显示尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌。一般来说,单不饱和脂肪酸显著增加病圃相比f .以上。此外,饱和脂肪酸(棕榈酸和硬脂酸)在两株都升高f .以上相比,病圃。观察显著增加总不饱和脂肪酸的提取病圃(70.84%)相比,提取的f .以上(59.89%)。未饱和的程度有显著提高病圃提取比f .以上提取相关的重大倒退的氧化速度病圃相比f以上。

图的说明图10显示一个简单的比较methanolic提取物中酚类和黄酮类成分尖孢镰刀菌和腐皮镰孢霉菌高效液相色谱法(HPLC)检测到的。结果表明,酚醛概要文件尖孢镰刀菌含有高浓度的酚类(绿原酸、没食子酸、没食子酸盐和香兰素)相比腐皮镰孢霉菌酚醛概要;此外,一些酚类化合物被检测到尖孢镰刀菌(香豆酸和儿茶素)都消失了腐皮镰孢霉菌发现,除了一个酚(鞣花酸)腐皮镰孢霉菌,消失在尖孢镰刀菌。

此外,类黄酮含量尖孢镰刀菌相比,表现出显著的进步腐皮镰孢霉菌的类黄酮,而类黄酮(大豆苷和柚苷配基)的浓度更高尖孢镰刀菌比在腐皮镰孢霉菌高效液相色谱法检测两类黄酮尖孢镰刀菌(山柰酚和芦丁)都消失了腐皮镰孢霉菌。

4所示。结论

目前的工作证明尖孢镰刀菌丰富的内生真菌与脂肪酸、酚类、类黄酮相比呢腐皮镰孢霉菌的内容和可能提高的能力尖孢镰刀菌散布在许多制药应用。gc - ms分析显示丰富的内容总脂质、单不饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸总量尖孢镰刀菌氯甲酸提取多腐皮镰孢霉菌,这可能支持的选举尖孢镰刀菌作为一个经济上可再生来源生物活性和有价值的生物柴油生产脂肪酸或进入。另一方面,高效液相色谱结果表明检测酚类和黄酮类化合物尤其是尖孢镰刀菌虽然消失在腐皮镰孢霉菌可能导致的候选人尖孢镰刀菌作为替代天然药物。本研究的主要目标可以概括尖孢镰刀菌multi-beneficial因素,可以作为抗氧化,抗癌,抗炎剂由于其丰富内容的一些具有生物活性的化合物,所以可能是一个候选人在某些药用应用作为主要成分。

数据可用性

用来支持研究的数据都包含在本文。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

这项研究是由研究精密营养和健康的食物,河南省科学技术部门(CXJD2021006)。