文摘gydF4y2Ba

二氧化氯(克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba)用于保持新鲜农产品的质量和安全。然而,克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba新鲜农产品的作用机理尚不清楚。在这项研究中,首先,我们评估ClO的功效gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗质量、冷害和花萼成型的西红柿存储在两个不同的温度。然后,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba影响细胞壁,ripening-related基因的表达和抗氧化酶的活性研究。西红柿是气态ClO对待gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba15分钟之前将他们转移到13°C 12天或4°C 14天,紧随其后的是5天20°C(保质期条件)。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗轻微减少呼吸的速度,但是并不影响乙烯生产13°C和4°C存储或保质期的条件。当存储在13°C,治疗与克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba坚定的损失降低,随之而来的镇压gydF4y2Ba果胶酯酶1gydF4y2Ba,一个细胞wall-related基因。此外,在13°C的储存条件,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗保持质量番茄可溶性固形物、可滴定酸度,和颜色的差别,并与对这些ripening-relatedgydF4y2Ba乙烯反应因子BgydF4y2Ba3 /gydF4y2BaC1gydF4y2Ba/gydF4y2BaEgydF4y2Ba1和抗氧化基因编码的感应gydF4y2Ba过氧化氢酶gydF4y2Ba和gydF4y2Ba抗坏血酸盐过氧化物酶gydF4y2Ba。在4°C存储条件,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba15 ppm的浓度不仅保持着坚定和西红柿也抑制斑在质量保质期与过氧化氢酶活动的相应增加。此外,治疗15 ppm克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba显著降低通常的花萼成型中观察到的水果储存在13°C和保质期的条件下。因此,我们的结果表明,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗有效地保持番茄品质和抑制盏造型通过部分调节ripening-related基因和抗氧化系统,从而提高番茄采后的可存储性。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

西红柿的保质期很短因为他们fast-ripening自然。在存储和分布、成熟的发展,颜色从绿色变成红色以及软化和成分与风味和香气相关化学物质的变化,如有机酸、糖类、和其他挥发物。冷库是一种常见的做法,延长新鲜农产品的保质期。然而,西红柿很容易发展令人心寒的伤害(CIs)在长时间冷藏条件下,如点蚀、凹地区的发展水果,和更易腐烂,腐烂gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。CI症状通常变得明显在架子市场条件下冷藏后,从而降低消费者的愿望(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。存储10°C以上建议避免CI在西红柿;然而,高的存储温度加速软化,促进微生物增长尤其在花萼,导致质量恶化[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba3gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。花萼被认为是一个指标的新鲜度和质量番茄果实。此外,消费者高度提供的绿叶香气吸引这些绿色部分。然而,花萼易受微生物腐败在运输和贮藏(附生植物的细菌和霉菌)和通常的第一部分番茄显示真菌生长。模具在花萼的存在影响番茄的市场性和保质期,即使水果本身不是感染(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。因此,微生物安全的维护和西红柿在存储和分布质量要求调查。gydF4y2Ba

二氧化氯(克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba)是一种强氧化气体用于消毒新鲜农产品由于其抗菌功效对细菌,真菌和病毒(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。因为它是水溶性,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba可用于水和气体形式。然而,气态的克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba更有效的病原体失活(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。比较不同的化学和物理消毒液的消毒效果显示气体克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba更有效地比其他消毒液(微生物失活gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。ClO的抗菌效果gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba天然气已经评估了范围广泛的生产,如菠菜、土豆、绿豆豆芽、生菜、洋葱、卷心菜、哈密瓜、草莓(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。ClO的作用机制gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba对微生物包括细胞膜的不稳定,膜透性改变,干扰蛋白质合成的gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。此外,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba与含氧化合物和蛋白质反应,导致细胞代谢的干扰gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

几项研究已经强调ClO的功效gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba应用程序保持新鲜农产品的质量。例如,ClO的控释gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba气体调节浆果中存储的坚定gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba积极影响挥发性化合物的组成和自由氨基酸在柑橘类水果,导致保留他们的独特的味道gydF4y2Ba11gydF4y2Ba]。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba暴露保留可滴定酸度(TA)、可溶性固体含量(SSC),番茄和维生素C含量和桑gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。在另一项研究中,李子的感官属性保存在克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]。然而,克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba应用程序可能影响一些新鲜农产品的质量。例如,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗结果快速颜色变化菠菜叶子和褐变的柚子、卷心菜、生菜、桃子和苹果gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。很明显,不同的新鲜农产品可能对ClO的反应不同gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba应用程序;因此,治疗的优化条件为每一个产生的利益是必要的。ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba呼吸速率和乙烯生物合成在ClO起着关键的作用gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba派生的新鲜农产品的质量维护(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。然而,克洛的分子机制gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba保持新鲜农产品的质量仍然是完全理解。gydF4y2Ba

在这项研究中,我们优化克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗条件和评价ClO的功效gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba应用程序质量、花萼成型和CI的西红柿存储在两个不同的温度。了解ClO的作用机制gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba,我们评估ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗ripening-related和抗氧化剂的基因表达谱基因和抗氧化酶的活性。gydF4y2Ba

2。材料和方法gydF4y2Ba

2.1。植物材料和治疗gydF4y2Ba

“业”的西红柿(gydF4y2Ba茄属植物lycopersicumgydF4y2Ba机)生长在Jungyeum,韩国,酒色呈时收获的阶段,运到实验室。在我们的初步实验,西红柿是处理5、10和15 ppm克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba15分钟和30分钟。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在5 ppm对CI和花萼没有任何影响成型(图gydF4y2BaS1gydF4y2Ba)。此外,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba影响CI和花萼成型时没有显著不同治疗时间从15分钟延长到30分钟在我们的实验条件(数据没有显示)。因此,水果是10或15 ppm气态ClO对待gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba使用克罗(与周围的空气混合)gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba发电机(CA300、韩国)或不及时治疗(控制)在一个商业纸箱15分钟在一个封闭的腔。20盒包含20个水果被用于每个治疗。ClOgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba浓度封闭室验证了使用一个内置的克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba米。治疗后,fruit-containing盒子里满是塑料薄膜和转移到13°C 12 d或4°C(冷藏)14 d紧随其后五天在20°C (14 + 5 d;保质期条件)。在存储过程中,相对湿度保持在90±5%。gydF4y2Ba

2.2。气相色谱分析gydF4y2Ba

的呼吸速率和乙烯生产分析了使用气相色谱法(450 - gc力量;美国力量,Billerica的)。一毫升的气体采样使用注射器从2 l容器有四个水果从每个治疗已经封闭了2 h。注射和列温度为110°C和70°C,分别。热导检测器和火焰离子化检测器用于克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba和乙烯测量被设定在150°C和250°C,分别。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba和乙烯测量得到每天从每治疗三个独立的复制。gydF4y2Ba

2.3。水果质量评价gydF4y2Ba

在评估,每治疗15水果被随机抽样评估果实品质。进步的皮肤颜色的变化监测在每处理一组固定的水果使用色差仪(美能达cr - 400;柯尼卡美能达、日本大阪)和报告基于猎人的规模。坚定了使用纹理分析器(TA +劳埃德仪器有限公司、Fareham汉普郡,英国)2毫米/秒的速度与柱塞直径5毫米。总SSC的样品进行了分析使用数字折射计(PAL-1, ATAGO有限公司、东京、日本)和助教,用克表示每100克样品的柠檬酸汁,由滴定5毫升的果汁和0.1 N氢氧化钠直到pH值为8.2。执行本程序使用一个汽车酸碱滴定仪(TitroLine简单;SCHOTT仪器GmbH是一家,美因茨,德国)。水果将表示为水果的百分比,将展出。最后报告点蚀率获得三个独立复制每天每次治疗。gydF4y2Ba

2.4。花萼成型gydF4y2Ba

发展成型的花萼被记录后4、8、12 d水果储存在13°C;7和14 d后水果储存在4°C, 3和5 d后20°C。对于每一个治疗组,报告数据来自三个独立复制(三盒20水果)每天每次治疗。gydF4y2Ba

2.5。RNA隔离和互补脱氧核糖核酸的合成gydF4y2Ba

西红柿储存在13°C采样在天0,4日和12日,而那些储存在4°C采样在天0,7和14。随后,五个水果从每个样本汇集,果皮组织RNA用于隔离使用溴化cetyltrimethylammonium协议(gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。反应合成第一链cDNA ReverTraAce工具包(Toyobo、日本)。gydF4y2Ba

2.6。实时定量PCR(存在)gydF4y2Ba

执行中存在如前所述,公园等。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba)使用CFX96触摸™实时PCR检测系统(Bio-Rad、大力神、钙、美国)。放大了使用智商™SYBR绿色Supermix (Bio-Rad)与特定的引物(表gydF4y2BaS1gydF4y2Ba)。在执行中存在下列条件:95°C 30年代,紧随其后的是40 95°C的周期10年代和55°C或58 40°C。使用2相对基因表达进行了计算gydF4y2Ba^{−ΔΔCtgydF4y2Ba}方法和规范化的看家基因的表达水平gydF4y2Ba肌动蛋白gydF4y2Ba和gydF4y2Ba延长因子gydF4y2Ba1 (gydF4y2BaEF1gydF4y2Ba)。执行中存在基因表达分析使用三个生物复制。gydF4y2Ba

2.7。酶提取gydF4y2Ba

酶提取过程都是在4°C。冻干水果粉组织(0.1 g) 3毫升的均质提取缓冲(100毫米磷酸钾缓冲(pH值7.5),polyvinylpolypyrrolidone 1%, 2毫米EDTA-Na PMSF和1毫米)。泥浆是离心机(15000转4°C, 30分钟)在一个冷冻离心机(LaboGene 2236 r, Gyrozen有限公司,大田,韩国)和过滤。然后,过氧化氢酶(CAT)的活动,抗坏血酸盐过氧化物酶(APX型)和超氧化物歧化酶(SOD)的酶立即清楚浮在表面的测量,如下所述。gydF4y2Ba

2.8。猫的活动gydF4y2Ba

猫活动测量方法使用先前描述的啤酒和筛选器gydF4y2Ba18gydF4y2Ba)做了一些调整。上层清液(50gydF4y2BaµgydF4y2BaL)和1毫升的钠磷酸盐缓冲剂(pH值7.0)和500年gydF4y2BaµgydF4y2BaL HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaOgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba(100毫米)。吸光度是记录每30年代为5分钟。猫一个单位的活动被定义为吸光度的变化的一个因素0.01每分钟240海里。猫活动表示为单位每分钟每克干重(U·分钟gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}ggydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})。gydF4y2Ba

2.9。APX型活动gydF4y2Ba

根据陈和浅田和另外(APX型活性测定gydF4y2Ba19gydF4y2Ba与修改)。上层清液(100gydF4y2BaµgydF4y2BaL)与1毫升的混合反应混合物(0.1毫米100毫米磷酸钾缓冲,HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaOgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba和0.5毫米抗坏血酸盐)。混合物的吸光度测定的290海里每10年代1分钟使用分光光度计(时代2;BioTek产业高地公园,美国)。APX型活动的一个单位被定义为吸光度下降的一个因素在试验条件下每分钟1。APX型活动表示为单位每分钟每克干重(U·分钟gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}ggydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})。gydF4y2Ba

2.10。SOD活性gydF4y2Ba

SOD活性化验通过测量其抑制能力的光化学还原硝基蓝四唑(电视台),正如前面所描述的Rao et al ., (gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba)做了一些调整。上层清液(20gydF4y2BaµgydF4y2BaL)是100年混合gydF4y2BaµgydF4y2BaL(100毫米磷酸钾缓冲(pH值7.5)和100年gydF4y2BaµgydF4y2Ba反应混合物的L(13毫米蛋氨酸,10gydF4y2BaµgydF4y2BaM EDTA-Na2, 2gydF4y2BaµgydF4y2BaM核黄素,120gydF4y2BaµgydF4y2Ba米电视台)。混合物的吸光度为560 nm使用分光光度计(时代1;BioTek产业高地公园,美国)。一个单位的SOD活性被定义为酶的数量减少生产half-maximal抑制电视台。SOD活性表达为单位每分钟每克干重(U mingydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}ggydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})。gydF4y2Ba

2.11。统计分析gydF4y2Ba

值是平均值±标准误差。组之间的差异进行评估通过方差分析,和手段与邓肯的多个范围测试比较;统计学意义是gydF4y2Ba 。gydF4y2Ba数据分析使用SAS 9.2版本软件(SAS研究所卡里、数控、美国)。对于基因表达数据,统计分析进行使用gydF4y2BatgydF4y2Ba以及使用Microsoft Excel v。2010(西雅图,华盛顿)。gydF4y2Ba - - - - - -gydF4y2Ba值< 0.05被认为是具有统计学意义。gydF4y2Ba

3所示。结果gydF4y2Ba

3.1。ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗呼吸速率和乙烯生产gydF4y2Ba

呼吸是一个主要因素,有助于在果实采后品质的损失。治疗克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba略微降低了番茄的呼吸率在贮藏温度(13°C和4°C)。13°C, ClO的效果gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在呼吸率仅限于1 d在存储期间,也没有观察治疗之后(图之间的区别gydF4y2Ba1(一)gydF4y2Ba)。然而,克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba把水果记录呼吸率较低在存放的过程中,在4°C和随后的保质期条件(图gydF4y2Ba1 (b)gydF4y2Ba)。呼吸率的差异不显著ClO之间的观察gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗浓度10和15 ppm(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。此外,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba10和15 ppm浓度并不影响乙烯生产或者储存条件下(数字gydF4y2Ba1 (c)gydF4y2Ba和gydF4y2Ba1 (d)gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

不管克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba处理和存储温度、坚定存储期间观察随时间稳步下降。然而,克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗显著延迟的损失坚定水果储存在13°C,始终坚定ClO高就是明证gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗比控制水果水果(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。相比之下,坚定维护在价值观类似于控制甚至在克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗期间冷藏在4°C。进一步坚定的差异不显著,观察治疗组之间在保质期的条件下(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba熏蒸并不影响番茄的SSC和TA储存温度(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba和gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。此外,水果的表面颜色没有改变在克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba持续治疗,就是明证类似的色调值在不同的治疗组(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba和gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

值在一个列有不同的字母是明显不同的gydF4y2Ba ,gydF4y2Ba由邓肯的多个测试范围。gydF4y2Ba

值在一个列有不同的字母是明显不同的gydF4y2Ba ,gydF4y2Ba由邓肯的多个测试范围。gydF4y2Ba

3.2。ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗花萼成型gydF4y2Ba

没有一盏造型在西红柿4天后观察13°C(数据未显示),而35%的控制水果花萼成型后8天13°C;这只是限于∼15 ppm ClO的14%gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗组(图gydF4y2Ba2 (b)gydF4y2Ba)。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba花萼10 ppm显示一个中间影响成型13°C(数字gydF4y2Ba2(一个)gydF4y2Ba和gydF4y2Ba2 (b)gydF4y2Ba)。没有观察到可见的成型的花萼西红柿在冷藏库(数据未显示)。然而,在将它们转移到保质期条件,成型快速出现在所有治疗组。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在15 ppm是有效控制花萼成型在保质期的条件下(数字gydF4y2Ba2(一个)gydF4y2Ba和gydF4y2Ba2 (c)gydF4y2Ba)。在第三天20°C, 15 ppm克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba花萼成型处理水果展示近50%低于控制水果(图gydF4y2Ba2 (c)gydF4y2Ba)。然而,10 ppm克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗没有显著影响花萼保质期条件下成型。此外,ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗花萼成型减少的最后一天在温度(数据存储gydF4y2Ba2 (b)gydF4y2Ba和gydF4y2Ba2 (c)gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

3.3。ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在CIgydF4y2Ba

长时间暴露于低温会导致点蚀,CI的经典症状,西红柿。没有点蚀在冷藏在我们的实验中观察到。然而,无论治疗,观察转移后的番茄冷藏保质期条件。西红柿15 ppm ClO对待gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba不容易让在保质期的条件下比控制水果(图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。的保质期,超过70%的控制水果显示点蚀,而只有40%的15 ppm克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba把水果(图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在10 ppm没有任何重要的(gydF4y2Ba )gydF4y2Ba西红柿(图中对点蚀的影响gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

3.4。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba全身的基因表达谱gydF4y2Ba

阐明ClO的作用机制gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba我们研究了细胞的表达谱wall-related (gydF4y2Ba果胶酯酶1 (PE1),果胶裂解酶(PL),gydF4y2Ba和gydF4y2Ba葡聚糖酶gydF4y2Ba),ripening-relatedgydF4y2Ba(乙烯反应因子;ERF.B3 / C1 / E1gydF4y2Ba)和抗氧化基因(gydF4y2BaAPX型,猫,gydF4y2Ba和gydF4y2Ba过氧化物酶42gydF4y2Ba)在水果储存在13°C。除了更高的坚定ClO中观察到gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba对水果的成绩单gydF4y2BaPE1gydF4y2Ba基因被减少到15 ppm ClO的反应gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba0天治疗;然而,治疗组之间没有差异表达谱观察之后(图gydF4y2Ba4(一)gydF4y2Ba)。值得注意的是,的表达谱gydF4y2Ba葡聚糖酶gydF4y2Ba和gydF4y2BaPLgydF4y2Ba没有改变的克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗(图gydF4y2Ba4(一)gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

然后,我们评估与成熟过程相关的基因(gydF4y2BaERF.B3 / C1 / E1gydF4y2Ba),发现gydF4y2BaERF.B3gydF4y2Ba是对ClO表达下调gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗,直到第四天13°C的储存条件。此外,gydF4y2BaERF.CgydF4y2Ba1成绩单也抑制对ClO的回应gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba显著治疗0天13°C。gydF4y2BaERF.E1gydF4y2BaClO水平相对较低gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗但没有统计上的不同(图gydF4y2Ba4 (b)gydF4y2Ba)。的差别这对这些gydF4y2BaERF.B3gydF4y2Ba和gydF4y2BaERF.CgydF4y2Ba3水平可能会影响ripening-associated西红柿的变化。抗氧化基因的表达水平gydF4y2BaAPX型、猫gydF4y2Ba,gydF4y2Ba过氧化物酶42gydF4y2Ba被诱导在克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba把水果当存储在13°C。虽然这些基因的诱导一直持续到第四天13°C, APX型仅限于天0。贮藏期的结束,没有区别在这些基因的表达水平在治疗组(图之间gydF4y2Ba4 (c)gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

冷却温度破坏之间的平衡活性氧的形成和抗氧化防御机制,导致氧化诱导CI (gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。在我们的实验中,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗导致显著降低表面麻点(图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。因此,我们研究了克罗的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗抗氧化酶APX型的活动,CA, SOD在冷藏和保质期的条件。在4°C存储、APX型的活动并没有改变(图gydF4y2Ba5(一个)gydF4y2Ba在15 ppm ClO),而SOD活性gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba对待水果保持稳定甚至略有下降,表明H的来源gydF4y2Ba_2gydF4y2BaOgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba不可能存在与SOD活性(图gydF4y2Ba5 (c)gydF4y2Ba)。在克罗猫活动引起的gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗期间存储在4°C(14天除外)和保质期条件,建议的潜在参与这抗氧化酶在克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba全身的CI抑制(图gydF4y2Ba5 (c)gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

4所示。讨论gydF4y2Ba

呼吸和乙烯生物合成的主要决定因素是西红柿的保质期。因此,番茄采后的处理方法主要集中在控制呼吸代谢和调节更年期乙烯的崛起。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗是影响呼吸速率和乙烯生产的新鲜农产品gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。例如,气体克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba应用程序减少了新鲜的呼吸率“哈密甜瓜和青椒gydF4y2Ba21gydF4y2Ba,gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。呼吸活动、成熟和衰老的桃子被ClO控制gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗(gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。我们的结果证实了这些发现与ClO治疗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba降低了番茄的呼吸率在存储温度(13和4°C);然而,效果更加明显在4°C(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。存储在低温下产生抑制呼吸。因此,持续降低呼吸利率观察在克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba对待水果货架寿命条件下显示ClO的协同作用gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba和冷藏(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)。郭et al。gydF4y2Ba24gydF4y2Ba)报道,气态的克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba减少乙烯生物合成在成熟的绿色西红柿。然而,在目前的研究中,乙烯生产没有受到影响。一个可能的原因是更年期的崛起,在这个实验中使用的pink-stage番茄乙烯ClO之前已经达到gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗。gydF4y2Ba

较高的存储温度有利于成熟过程,导致损失的坚定和果实品质的变化。我们发现,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗的水果比整个存储控制水果坚实的13°C(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba),表明ClO的积极影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗的规定要求坚定。坚定也维持在4°C存储(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。这些结果与之前的报道相一致:伊斯兰教等。gydF4y2Ba13gydF4y2Ba)报道,12 h的气态克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗可以产生番茄更坚定。同样,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba延迟的软化葡萄西红柿(gydF4y2Ba25gydF4y2Ba),和克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba自动释放表是有效地维护樱桃番茄的坚定gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗也已被证明能够保持坚定在其他生产,如草莓,蓝莓,和荔枝gydF4y2Ba10gydF4y2Ba,gydF4y2Ba27gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。有趣的是,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba没有影响坚定在20°C,我们观察到坚定ClO之间没有区别gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗和控制组织在保质期的条件下(表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba)。这表明ClO temperature-specificitygydF4y2Ba_2gydF4y2Ba行动。事实上,在之前的研究中,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba更有效的在蓝莓坚定维持在10°C 20°C (gydF4y2Ba10gydF4y2Ba]。此外,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba效果没有明显的坚定草莓在20°C (gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

失去坚定水果和生化改变细胞壁相关组件和/或细胞膨压的丧失由于失水。gydF4y2Ba体育gydF4y2Ba1,gydF4y2BaPL,gydF4y2Ba和gydF4y2Ba葡聚糖酶gydF4y2Ba已知基因参与细胞wall-associated生化变化在水果成熟(gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]。gydF4y2BaPE1gydF4y2Ba在草莓(在成熟过程中特异表达gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba]。沉默的gydF4y2BaPE1gydF4y2Ba在西红柿导致增加水平的可溶性固体和细胞壁中可溶性聚糖醛酸的含量减少,而增强水果刚度(gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。瞬态的遗传操作gydF4y2BaPE1gydF4y2Ba草莓的超表达和沉默显著影响果实坚定(gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]。在这项研究中,gydF4y2BaPE1gydF4y2Ba成绩单是减少15 ppm ClO的反应gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗0天,来显示他们的参与调节坚定(图gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba请gydF4y2Bapectin-modifying分裂糖苷键的酶通过吗gydF4y2BaβgydF4y2Ba消除机制galacturonosyl残留物(gydF4y2Ba34gydF4y2Ba,gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]。gydF4y2BaPLgydF4y2Ba在水果成熟为主导,RNA干扰的gydF4y2BaSlPLgydF4y2Ba结果加强水果坚定和果皮细胞的变化gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。进一步抑制gydF4y2BaPLgydF4y2Ba基因在番茄提高水果坚定和扩展了保质期不影响果实品质(gydF4y2Ba36gydF4y2Ba,gydF4y2Ba37gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba葡聚糖酶gydF4y2Ba是关键酶参与的水解乳沟,3βd glucosidic联系在beta 1, 3葡聚糖。gydF4y2Ba葡聚糖酶gydF4y2Bas是表示在成熟和成熟的西红柿gydF4y2Ba38gydF4y2Ba]。此前,ripening-associated表达式gydF4y2Ba葡聚糖酶gydF4y2Ba已被证明是cultivar-specific三个香蕉品种(gydF4y2Ba39gydF4y2Ba]。然而,的表达gydF4y2Ba葡聚糖酶gydF4y2Ba和gydF4y2BaPLgydF4y2Ba没有受到ClO吗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在我们的实验条件下治疗,建议gydF4y2Ba葡聚糖酶gydF4y2Ba和gydF4y2BaPLgydF4y2Ba不得参与监管的水果ClO坚定gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗(图gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗是保持新鲜农产品(颜色和质量gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。活性包装ClO的草莓gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba保持模型袋SSC,助教和颜色在4°C (gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。此外,据报道,颜色,助教,SSC在芒果ClO处理没有显著影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba(gydF4y2Ba40gydF4y2Ba]。同样的,我们没有发现任何ClO的重要影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗SSC和TA的西红柿。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba此前下调乙烯生物合成途径的基因,包括gydF4y2BaACS2gydF4y2Ba,ACO1gydF4y2Ba,gydF4y2BaACO3gydF4y2Ba在成熟的绿色西红柿和西瓜gydF4y2Ba22gydF4y2Ba,gydF4y2Ba24gydF4y2Ba]。在我们的实验中,的表达gydF4y2BaACS2gydF4y2Ba和gydF4y2BaACS4gydF4y2Ba减少在克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba对成熟的绿色和breaker-stage西红柿(图S2)但不是pink-stage西红柿(数据gydF4y2Ba1 (c)gydF4y2Ba和gydF4y2Ba1 (d)gydF4y2Ba)。因此,我们检查了乙烯反应基因的表达。gydF4y2Ba小块土地gydF4y2Ba是乙烯的下游组件表明调解ethylene-dependent基因转录和最大的植物转录因子家族。gydF4y2BaERF.B3gydF4y2Ba,ERF.C1gydF4y2Ba,gydF4y2BaERF.E1gydF4y2Ba期间诱导番茄成熟(gydF4y2Ba41gydF4y2Ba]。抑制gydF4y2BaERF.B3gydF4y2Ba已被证明在番茄延缓成熟的发生(gydF4y2Ba42gydF4y2Ba]。在我们的研究中,gydF4y2BaERF.B3gydF4y2Ba,ERF.C1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba小块土地E1gydF4y2Ba水平对ClO表达下调gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗开始时存储(图gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。因此,抑制gydF4y2Ba小块土地gydF4y2Ba可能导致ClO成熟进程放缓gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗的水果。gydF4y2Ba

活性氧的积累与果实成熟,导致在成熟(gydF4y2Ba43gydF4y2Ba,gydF4y2Ba44gydF4y2Ba]。采后抗氧化化合物的应用可以有效地延长保质期的番茄和其他作物通过减少活性氧(gydF4y2Ba45gydF4y2Ba,gydF4y2Ba46gydF4y2Ba]。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗改变了氧化还原状态和增强的龙眼果实的抗氧化能力,防止果皮褐变(gydF4y2Ba47gydF4y2Ba]。Chumyam et al。gydF4y2Ba48gydF4y2Ba)报道称,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba可以还原氧化还原平衡,导致减少和延缓果实衰老。在我们的实验中,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba调节抗氧化基因治疗gydF4y2BaAPX型,猫,gydF4y2Ba和gydF4y2Baperoxidase42gydF4y2Ba(图13°C存储条件gydF4y2Ba4gydF4y2Ba)。氧化还原状态的改变ClO后番茄gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗可能引起这些抗氧化基因的表达。ClO的稳定的氧化还原平衡gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba处理番茄可能导致延迟水果成熟。我们的研究结果表明,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗可能通过抑制有可能减缓水果成熟的表达gydF4y2BaPE1gydF4y2Ba和gydF4y2BaERF.B3gydF4y2Ba/ C1gydF4y2Ba和感应gydF4y2BaAPX型,猫,gydF4y2Ba和gydF4y2Ba过氧化物酶42gydF4y2Ba记录。然而,进一步的研究是需要充分发现ClO的角色gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗ripening-associated基因在番茄。gydF4y2Ba

我们验证ClO的功效gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗花萼成型,考虑到降低存储温度抑制微生物的生长。在这项研究中,没有观察到可见的模具在花萼的西红柿储存在4°C,而高温存储13°C和20°C(保质期)促进了花萼成型(图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。然而,克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在15 ppm有效控制成型花萼在存储温度。据报道,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba采后贮藏期间可以灭活微生物感染(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。巴贾et al。gydF4y2Ba49gydF4y2Ba)表明,治疗与0.5 ppm ClO西红柿gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba气体12分钟延迟自然微生物群落的生长,延长其保质期7天当存储在22°C。此外,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗显著延迟白色模具的发展和黑色的斑点在罗马西红柿gydF4y2Ba50gydF4y2Ba]。同样,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗减少总需氧细菌、酵母和霉菌数量大约1对数尺度在6周后,葡萄柚存储10°C (gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba在微生物活动随着时间减少了存储(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。例如,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba模型垫有效减少为8天酵母和霉菌的生长,但没有影响被观察到在2°C[12天的贮藏期gydF4y2Ba40gydF4y2Ba]。同样,ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗花萼成型年底减少存储在两个温度(图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

冷却温度引发活性氧的积累,进而引发脂质过氧化,导致氧化损伤细胞膜,最终组织恶化(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。表面点蚀是一个视觉症状CI的西红柿。众所周知,CI可能出现在暴露于低温,但症状通常出现在生产nonchilling温度条件的转移(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。我们观察到,在番茄表面点蚀保质期后冷藏15 ppm ClO显著地抑制了gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗(图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)。工厂已经开发出抗氧化防御机制来减少有害活性氧对细胞的影响。这些机制包括抗氧化酶SOD、APX型,猫,氧化酵素,几个非酶的抗氧化剂。冷应激诱发APX型的活动,猫和SOD在冷藏和保质期。有趣的是,我们的研究结果表明更高的猫在15 ppm ClO活动gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗成果,表明ClO后更高的抗氧化活性gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗可能有助于抑制(图斑的西红柿gydF4y2Ba5gydF4y2Ba)。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba被证明能增加生产的总抗氧化能力(gydF4y2Ba51gydF4y2Ba]。王等人报道,克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba应用程序产生过氧化物酶和猫活动大麦根在种子萌发和航空部件。克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba显著增强SOD的活动、猫和APX型的龙眼果皮(gydF4y2Ba47gydF4y2Ba]。茄发病率减少CI和微生物可以保留更大的果实品质和提高可存储性。gydF4y2Ba

5。结论gydF4y2Ba

总之,15 ppm气态ClO的应用gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba15分钟被发现有效地控制损失的坚定和维护质量的西红柿储存在13°C和4°C通过控制自己的呼吸代谢和微生物发病率。Ripening-relatedgydF4y2Ba小块土地gydF4y2Ba抑制了克罗gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba。此外,抗氧化基因和酶的表达和活性对ClO调制gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗。这些发现将有助于进一步理解ClO的分子作用机制gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba质量维护。综上所述,短期15 ppm克洛gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗是一种有效的方法来提高番茄(可存储性gydF4y2Ba53gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

缩写gydF4y2Ba

APX型:gydF4y2Ba	抗坏血酸盐过氧化物酶gydF4y2Ba
猫:gydF4y2Ba	过氧化氢酶gydF4y2Ba
置信区间:gydF4y2Ba	冷害gydF4y2Ba
克罗gydF4y2Ba2gydF4y2Ba:gydF4y2Ba	二氧化氯gydF4y2Ba
小块土地:gydF4y2Ba	乙烯反应的因素gydF4y2Ba
电视台:gydF4y2Ba	硝基蓝四唑gydF4y2Ba
PE1gydF4y2Ba:gydF4y2Ba	果胶酯酶1gydF4y2Ba
PLgydF4y2Ba:gydF4y2Ba	果胶裂解酶gydF4y2Ba
SOD:gydF4y2Ba	超氧化物歧化酶gydF4y2Ba
SSC:gydF4y2Ba	可溶性固体含量gydF4y2Ba
助教:gydF4y2Ba	可滴定酸度。gydF4y2Ba

数据可用性gydF4y2Ba

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。gydF4y2Ba

的利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

这项研究是由农业合作研究项目,科学和技术(项目没有。PJ01502903)在韩国的农村发展管理。gydF4y2Ba

补充材料gydF4y2Ba

表S1。为定量rt - pcr扩增引物序列。图S1。ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗花萼成型和冷害番茄。图S2。ClO的影响gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba治疗在乙烯生物合成途径基因的表达。gydF4y2Ba(gydF4y2Ba补充材料gydF4y2Ba)gydF4y2Ba