文摘

阿月浑子酱是非常受欢迎的早餐或晚餐由于其理想的味道,味道和质地。的危害之一是直接关系到农业实践,处理,存储,和运输的开心果和副产品黄曲霉毒素,可引起不可逆的对消费者的影响。益生菌是最有效和安全的方法,以减少黄曲霉毒素。变量在研究温度和时间下,黄曲霉素浓度和益生菌的内容。总共30治疗通过旋转中心合成设计确定。这是第一个和最全面的研究来优化生产益生菌开心果粘贴和调查使用黄曲霉毒素B1的解毒作用双歧杆菌lactis有六个治疗和阿月浑子三个复制粘贴矩阵。简而言之,可以删除一个更高比例的毒素通过增加微生物的数量,减少毒素水平。最高的观察减少黄曲霉毒素B1开心果粘贴与黄曲霉毒素B1 (19.7039 ng / g)的污染,这是飙升双歧杆菌lactis(10⁹CFU / g),然后储存在25°C 26.1853天(黄曲霉毒素B1: 8.00007 ng / g =减少59.4%),这是符合伊朗国家标准组织的容许极限和欧盟委员会监管。结果显示显著减少黄曲霉毒素B1级开心果粘贴。益生菌减少黄曲霉毒素B1污染到允许的水平。这是一个重要的、安全、有效的解决方案,并与其它方法不同,它增加了产品的营养价值。

1。介绍

可食用坚果食品篮子(《人民日报》的重要组成部分1]。与此同时,阿月浑子(黄连木维拉l .)的家庭Anacardiaceae优于许多食品由于其高磷、钙、铁、钾、镁、和能量水平(约626千卡/ 100 g(开心果内核)(2]。阿月浑子酱含有100%的开心果是用于食品,如蛋糕、冰淇淋、糖果。考虑其营养价值和高价格,这是非常重要的,以确保其健康为国内和国际市场。开心果经过后收获的过程包括运输、加工、分级、包装、存储、最后,运输供应中心。这些过程最终阿月浑子的影响质量和健康产品(3]。危害之一,直接关系到农业实践,处理,存储,和运输开心果及其副产品的黄曲霉毒素,导致急性慢性副作用进入人类和动物的尸体后主要通过口腔(4]。到目前为止,超过18种黄曲霉毒素已确定,其中黄曲霉毒素B1 (AFB1)是最有毒的和强有力的肝脏致癌物质5]。为了防止食品中黄曲霉毒素的浓度,良好农业规范(GAP),处理,存储,和适当的运输建议6]。然而,它不可能有100%的控制这些过程。农产品污染的风险和减少食品中黄曲霉毒素含量的不同的方法研究了(7,8]。许多物理化学方法去除真菌毒素的使用受污染的食物是有限的由于安全问题,可能失去产品的营养品质,低效率,高成本(9]。另一方面,在生物解毒方法,益生菌被认为是最有效、最安全的方法(10]。除了治疗效果,如改善胃肠道微生物菌群的平衡v (11),它可以结合抗氧化活性或降低食品中黄曲霉毒素。去除黄曲霉毒素的能力可能是由于毒素细菌细胞壁的物理绑定或细胞壁组件(12]。看来,益生菌,考虑到他们从开心果去除黄曲霉毒素的能力,除了丰富的产品,可以提高安全性和营养价值(13]。

作者最好的知识,研究有限antiaflatoxin活动益生菌的开心果。这是第一个和最全面的研究来优化生产益生菌开心果粘贴和调查AFB1的解毒效果双歧杆菌lactis有六个治疗在阿月浑子三个复制粘贴矩阵。

2。材料和方法

2.1。阿月浑子样本集合

成熟和干燥Ahmad达阿月浑子(10公斤)品种与封闭的壳采购2020年11月在伊朗当地果园。

2.2。制备阿月浑子酱

打破壳之后,阿月浑子内核变成开心果粘贴使用搅机(BP30 Bekrdaneh有限公司、伊斯法罕、伊朗),并立即用于治疗和分析做准备。

2.3。理化测试开心果粘贴

2.3.1。水分测量

阿月浑子粘贴水分测量根据国际标准化组织(ISO) 712号和伊朗国家标准组织(INSO)没有。2705年题为“谷物及其byproducts-moisture测量方法引用方法”(14,15]。

2.3.2。脂肪测量(索氏法)

开心果粘贴脂肪测量根据ISO 659号题为“石油Oilseeds-Determination内容(参考方法)”(16]。

2.3.3。蛋白质测量

开心果粘贴蛋白质含量测定根据ISO 20483号和19052号INSO题为“谷物籽粒粗蛋白及其副产品”(17,18]。

2.3.4。测量开心果粘贴纤维

阿月浑子粘贴纤维测量根据ISO 5498号和3105号INSO题为“测量谷物籽粒粗蛋白及其副产品”(19,20.]。

2.3.5。测量开心果粘贴灰

开心果粘贴灰测量根据ISO 2171号和2706号INSO题为“谷物、豆类和byproducts-measurement灰炉”(21,22]。

2.3.6。阿月浑子粘贴酸度测定

阿月浑子酱酸度测定根据ISO 7305号和3380号INSO [23,24]。

2.3.7。开心果粘贴过氧化值的测量

食用油和油脂过氧化氢含量测定根据ISO 4179号(25,26]。

2.4。黄曲霉毒素B1标准的准备

标准AFB1的解决方案(Sigma-Aldrich、德国)的浓度为500毫克/准备μl在甲醇和存储−20°C。工作解决方案的浓度50、100和200μg / ml被稀释的甲醇和储存在−20°C。

2.5。的制备和活化双歧杆菌lactis

一个冻干的文化双歧杆菌lactis(波斯类型文化集合(PTCC)没有:1736)采购从伊朗科学技术研究组织(IROST)。24小时细菌培养的夫人肉汤培养基制备在厌氧条件下通过孵化在37°C。

2.6。黄曲霉毒素B1解毒评估开心果粘贴使用双歧杆菌lactis

开心果粘贴AFB1污染在5、15、25 ng / g浓度和上升10⁷,10⁸,10⁹CFU /毫升双歧杆菌lactis。治疗孵化在4,25岁和46°C和黄曲霉毒素含量是决定天0,15日和30 4,25岁和46°C(表1)[27]。

2.7。化学试剂

AFB1标准是从Sigma-Aldrich购买的。AFB1 immunoaffinity列从帕洛阿尔托,加州,美国。高效液相色谱级溶剂从默克公司购买(达姆施塔特,德国)。

2.8。黄曲霉毒素的分析内容

AFB1的方法用于分析方法报道Rastegar等人与未成年人修改。后准备与开心果粘贴(50克),样本分析的AFB1含量的高效液相色谱法(HPLC)(惠普安捷伦1100年,帕洛阿尔托,CA,美国)。为此,AFB1提取了300毫升甲醇-水(80:20)和正己烷(100毫升)应用于immunoaffinity列条件10毫升的磷酸缓冲盐之前使用。流动相是水:甲醇、乙腈(54:29日:17,v / v / v) 1毫升/分钟的流量(28]。

2.8.1发布。校准标准

AFB1股票(10的标准解决方案μg / ml)准备的准备和上升校准标准是2.5,5,10,100,200,300,500μl的混合标准储备溶液,分别为1 g的空白开心果粘贴样本在每种情况下。

2.8.2。恢复的研究

在这方面,阿月浑子糊样品浓度级别的15日,25日,75,150,250,500,750μg / g准备一式三份,然后治疗根据样品制备中描述的过程。使用上升的复苏计算校准曲线。

2.9。感官测试

感官评价益生菌开心果粘贴样本(根据表中列出的AFB1-free治疗1)是由20名训练有素的个人(10个男性和10岁的女性年龄在21岁到32岁之间)的学生和食品工业部门的员工。开心果粘贴样本评估基于接受外观、颜色、香气、质地,味道,和整体验收在九分享乐规模和九分得分范围从1(非常讨厌)9(非常喜欢)29日]。房间里的感官进行感官评价有以下属性:(我)评估室温度:室温。(2)光的评估室:白色的日光灯。(3)评估时间:上午十点左右,大约4 h早餐后。(iv)随机过程的服务:在杯。

2.10。统计分析

两个阶段的执行统计分析。在第一阶段,实验设计和收集到的数据进行了分析。在第二阶段,制定优化操作。

2.10.1。实验设计和统计分析

为了生产益生菌开心果粘贴也调查的影响双歧杆菌lactis益生菌在黄曲霉毒素,响应面方法(RSM)和RCCD被用于设计专家版本。11.1.1.0 [30.]。这种方法允许优化益生菌开心果膏配方的最低黄曲霉素水平和最大的感官评价的整体验收。此外,黄曲霉毒素浓度四个因素,益生菌水平,温度和时间考虑在内。每个因素在三个级别的评估+ 1,0,−1(表2)。执行实验测试后,基于实验数据进行回归分析,和一个二次多项式模型安装在每一个响应使用以下方程: 在哪里Y估计响应和吗β₀,β_我,β_二世,β_ij方程常数(拦截),线性影响系数,二次效应系数,和相互作用系数,分别;和x_我和x_j是自变量的水平。最后,重要的表达式(< 0.05)确定每个响应使用方差分析(方差分析)31日]。测试设计和使用设计专家软件进行统计数据分析。

2.10.2。配方的优化

制定优化后进行统计数据分析。为了优化配方的益生菌开心果粘贴最小黄曲霉素水平和最大整体验收,数值优化技术和愿望功能使用(32]。为此,最大的消费者接受响应和最低黄曲霉毒素水平考虑在内。

3所示。结果

3.1。理化测试开心果粘贴

阿月浑子的物理化学性质粘贴表中列出3。

3.2。统计模型

3.2.1之上。总结统计模型

提出了一种模型根据R²并按指数。低标准差(0.0043),高R²(0.9982),和较低的媒体(0.0014)表明二次模型是最好的模型。

3.2.2。连续的平方和

软件还建议用平方和二次模型:0.0036,df:4、均方:0.0009,F值:48.83,价值:< 0.0001)。对于每个模型,概率值(概率>F)研究的意义(> 0.05)覆盖更大的一部分数据。

3.2.3。缺乏合适的测试

在该测试中,模型研究的重要性,因为该模型有较低的意义,提出了一种二次模型(平方和:0.0003 df:10、均方:0.0000,F值:26.08,值:0.0011)。

3.2.4。方差分析测试

重要的方差分析的结果是价值模型是很有意义的。测试评估值> 0.05和数据价值是进入方程。Adeq精度值表示模型的预测响应值之间的差异,平均预测误差值。如果该比率大于4,它表明一个适当的模型的歧视。因此,89.9929比证明了二次模型。

3.2.5。系数估计

影响因素和影响反应的类型基于系数估计指数的测定。积极的指数意味着直接和负折射率意味着反向影响和价值越高,影响越大。结果表明,益生菌的因素,即温度和时间、反向影响响应,即这些因素的价值越高,反应越低。此外,黄曲霉素因素有直接影响。

3.2.6。最终响应公式基于(编码和真正的)因素

在方程部分,- 1和+ 1之间的反应是编码方面的因素和最终方程所示的真正因素。

3.3。三维图

三维(3 d)图是用来强调这两个参数对响应的影响。因此,根据显示的响应变化所需的两个参数在三维图中。三维图显示的交互因素AB, AC,广告,公元前BD, CD对黄曲霉毒素残留。在哪里。益生菌含量(CFU / g), B:时间(天),C:温度(°C), D:主要AF(飙升房颤:ng / gr)(数据1- - - - - -6)。此外,的影响因子A, B, C对整体验收(图所示7- - - - - -9)。

3.4。质量保证

平均回收率为107.2%。(97.8 - -111.8%)。检测极限(LOD)和限制AFB1的量化(定量限)分别为0.1和0.3纳克/克,分别。

3.5。优化

3.5.1。优化减少和解毒的黄曲霉毒素B1开心果粘贴双歧杆菌lactis

优化结果优化使用的数值优化技术设计专家,结果相关的优化研究指标如图10。考虑到最低黄曲霉毒素残留,愿望的价值指数约等于0.903。

根据优化结果的过程中,最大限度的减少AFB1可以在阿月浑子粘贴AFB1污染(19.7039 ng / g),上升双歧杆菌lactis(10⁹CFU / g),然后储存在25°C 26.1853天(AFB1残留:8.00007 ng / g =减少59.4%)。

此外,黄曲霉毒素减少研究治疗零日治疗范围从0%到73%在治疗22日是开心果粘贴相关的初始AFB1污染5 ng / g,飙升双歧杆菌lactis(10⁹CFU / g),存储在46°C 30天(AFB1残渣:1.35 ng / g =减少73%)(表1)。

根据INSO题为“人类食品和动物Feed-Maximum霉菌毒素容忍”5925号(2020)(332010.165)和欧盟委员会(European Commission)监管不。(2010年2月26日)题为“最大水平的食品中黄曲霉毒素”(34),开心果和阿月浑子容许黄曲霉毒素水平的内核是8 ng / g。治疗被认为是最佳的不到INSO和欧盟委员会(European Commission)的要求:(我)初始AFB1污染:19.7039 ng / g。(2)接种与双歧杆菌lactis:10⁹CFU / g。(3)储存:温度25°C 26.1853天。(iv)AFB1所在:8.00007 ng / g。(v)减少的百分比:59.4%。

3.5.2。优化的感官评价益生菌开心果粘贴

分析了优化过程的结果在设计专家(图中使用数值优化技术11)。结果显示,考虑到最大总体感官评价验收,愿望索引值约等于1.000。感官分析是一个重要的因素在评估开心果粘贴可接受性。根据优化过程的结果,感官评价最高的整体验收可观测到的阿月浑子粘贴飙升双歧杆菌lactis(10⁹CFU / g),然后储存在25°C 15天(总体验收:8.25455 =验收得分总数的91.72%)。

一般而言,感官评价的研究治疗质地,颜色,味道,气味,和整体验收从3.9 - -8.3,7.1 - -8.9,3.8 - -8.7,3 - 8.6,-8.6和4.5,分别。此外,整体验收评分的百分比总数的感官评价得分(9)介于50 - 95.6%(表4)。

4所示。讨论

许多研究已经进行减少黄曲霉毒素水平开心果。这些研究调查的多数不同的射线对黄曲霉素水平的影响,指出高百分比的黄曲霉素的减少由于照射在开心果。然而,他们缺乏良好的愿望在感官评价和整体被消费者接受。

Hashemi等人表明,黄曲霉素水平下降了38.84,48.79,53.50,77.17%,开心果治疗剂量的1、3、5和7 kGy的电子辐照在不同的存储的日子里,分别是(35]。贾利利等人也报道了黄曲霉素和赭曲霉素水平开心果微波辐照下下降了72.5±2.6% (36]。Makari等人显示γ辐照剂量的4和6 kGy的导致开心果、73.26和83.36 AFB1退化(分别37]。Mehdizadeh Amini发现,阿月浑子AFB1天然铀锅炉从134.85下降到72.28 ng / g (38]。Mazaheri发现紫外线照射可以降低AFB1浓度开心果。这种效应在高AFB1浓度大于AFB1低浓度(39)是一致的,几乎在同一直线与目前的研究相比,减少了73%。

在荟萃分析的研究中,得出结论,紫外线,ozone-ultraviolet和柠檬酸方法是最有效的方法减少黄曲霉毒素在奶酪40)、谷物和坚果,分别41]。

阿月浑子的影响黄曲霉毒素残留检测上的烘焙过程。更好的结果无论是减少黄曲霉毒素和总体验收的情况下焙烧过程包括添加调味料。

贾利利等人报道,烘焙过程导致85.78±2.5%减少黄曲霉素和赭曲霉素的开心果36]。Rastegar等人还得出结论,柠檬汁和柠檬酸的烘焙过程可以作为一个有用的和安全的降解方法开心果(28]。Yazdanpanah等人也在类似的研究,烘焙开心果在150°C 120分钟摧毁AFB1的95%以上;然而,由此产生的产品是不能吃42]。烘焙开心果的影响研究的结果对AFB1减少显示生物方法的优越性在目前的研究中,除了减少很大一部分AFB1开心果粘贴(73%),导致整体录取率8.25455 (91.72%)。

使用口腔酸研究设法减少黄曲霉毒素。例如,Esmailzadeh等人研究了脱氢乙酸的影响(DHA)和ozonated水(噢)开心果AFB1和报告AFB1含量最低的开心果脱氢乙酸处理(0.21 - -1.5μ克/公斤)和DHA +噢(0.21 - -1.59μ克/公斤)(43]。在这方面,回顾研究,Babaei等人报道,酸比其他更有效的解毒方法,如臭氧、UV-C等等。的降解黄曲霉毒素在开心果44]。

生态系统中的微生物种群共存,形成一个复杂的微生物群落(45]。其中,土壤的自然栖息地黄曲霉具有高度的复杂性和异构性,很难分析次生代谢物的生态功能,如黄曲霉毒素在土壤46]。因此,研究已成为一个重要的工具来控制或减少特定污染物谷物、饲料和环境(47]。毒素持续很长一段时间后,这很重要,因为种植在土壤污染污染土地转让的毒素从土壤中种植种子,然后种植饲料。作为一个新的见解,如果有益微生物可以将受污染的土壤,毒素水平大大降低。除了等机制抑制黄曲霉素微生物生产和吸收,另一个机制是黄曲霉毒素降解微生物产生特定的物质。它改变了真菌毒素的基本结构,完全把他们转化成低毒甚至无毒的物质(48]。

各种微生物技术在近几十年来出现了消除或减少霉菌毒素。微生物对黄曲霉毒素(起到解毒作用49]。研究表明微生物的生物活性的影响基因突变或激活沉默基因簇,从而,减少黄曲霉毒素的生产(50]。特别是,微生物毒素的浓度降低到无法检测到的水平通过打断的黄曲霉素生物合成途径黄曲霉在早期阶段,以前norsolorinic酸的合成51]。

微生物作为生物方法的使用,除了减少和降解黄曲霉毒素的开心果粘贴可以带来这些生物体的健康属性对消费者的身体,这是一个与其他方法相比的优势和优势。

本研究的结果显示,阿月浑子AFB1的最高减少粘贴在19.7039 ng / g与初始AFB1污染上升了10⁹CFU /克双歧杆菌lactis,然后,储存在25°C 26.1853天。AFB1残留在上面的阿月浑子酱,最后,下降了59.4%,至8.00007 ng / g,这是在标准范围内推荐INSO和ISO。结果表明,高水平的益生菌双歧杆菌lactis(10⁹CFU / g)在减少黄曲霉毒素水平发挥重要作用。上述治疗是最佳的治疗,它可以操作它在业界考虑存储的可能性开心果粘贴在室温(25°C)为26.0181天。

减少黄曲霉毒素的研究零日疗法治疗范围从0%到73%治疗22日,最初AFB1污染5 ng / g,掺入了10⁹CFU /克双歧杆菌lactis,储存在46°C 30天。因此,除了高水平的益生菌双歧杆菌lactis(10⁹CFU / g)、高温(46°C)和长期存储(30天)扮演更重要的角色在减少黄曲霉毒素在阿月浑子酱(73%)。然而,随着工业的实际应用结果,不可能储存开心果粘贴在46岁°C 30天对消费者由于其低的愿望(总整体验收评分的50%)。较低的愿望可能是由于微生物和化学产品的损坏。

在的影响的研究酿酒酵母AFB1的开心果,Rahaei等人表示,除AFB1与毒素的浓度和酵母生存在AFB1删除(没有发挥重要作用52]。Abdolshahi等人指出,甘露聚糖从细胞壁中提取的酿酒酵母可以绑定到黄曲霉毒素和黄曲霉素的比例最高绑定观察到更高的甘露聚糖浓度和降低开心果黄曲霉毒素(53),与本研究结果一致表明高水平的益生菌双歧杆菌lactis对黄曲霉毒素的去除有很大影响。

Farzaneh等人的结论枯草芽孢杆菌可以显著去除AFB1从文化媒体和开心果了85.66和95%,分别为(54]。未能完全消除AFB1似乎是一个可逆过程(55]。Pizzolitto等人指出,这可能是由于微生物之间的饱和键和AFB156]。在一个简单的词,可以删除一个更高比例的毒素通过增加微生物的数量,减少毒素的水平,高水平的益生菌双歧杆菌lactis导致黄曲霉毒素去除在当下研究的比例最高(73%)。

一些研究人员认为,黄曲霉毒素抑制是由于乳酸的存在或其他乳酸菌产生的代谢物(57]。另一方面,其他研究人员发现无显著关系这些细菌产生的代谢物的数量和减少黄曲霉毒素水平(58),它更有可能的是,葡萄糖氧化酶产生葡萄糖作为催化剂在氧化过程的影响(59]。在这方面,既然等人调查AFB1的生物解毒地衣芽孢杆菌CFR1和得出结论,减少94.7%以上的AFB1在液体培养基和上层清液能够更有效地降低AFB1比游离细胞(60]。冈萨雷斯等人孤立和aflatoxin-degrading识别芽孢杆菌菌株。他们表示,10株和八个浮在表面的游离能够显著降低AFB1。测试菌株可以通过细胞外和细胞内酶降解AFB1。如果安全,他们可以用来解毒黄曲霉毒素污染食品或饲料(61年]。这强调的作用在减少黄曲霉毒素微生物产生的代谢物。

Rahaei等人报道,两株酿酒酵母和乳杆菌结合大量的黄曲霉毒素。研究结果表明,绑定过程没有明显的影响阿月浑子的颜色,质地,和过氧化值,这是非常重要的在坚果的愿望62年]。在目前的研究中,感官评价的整体验收评分在4°C(冰箱温度)和25°C(室温),实际的和合适的存储温度开心果粘贴,范围从84.4%到95.6%和76.7%到95.6%,分别为(表4)。

安萨里等人报告说在70°C酸乳酒谷物预处理导致AFB1含量显著减少阿月浑子样本(27]。Siahmoshteh等人发现芽孢杆菌物种可以被视为一个潜在的生物防除代理来抵消有毒真菌的生长和随后的黄曲霉毒素污染的开心果和农产品(63年]。

总体看来,生物方法的使用以及微生物的解毒和减少黄曲霉毒素不仅导致显著减少黄曲霉毒素含量的食物矩阵,但也增加了消费者的认可。它也有利于消费者由于微生物的有价值的好处,特别是益生菌。

5。结论

益生菌可以绑定致癌物和诱变剂及其使用作为一个有效的,环保的,便宜,而且安全策略来消除食品和饲料中化学污染物已被广泛研究。结果表明,益生菌有特殊的潜在去除黄曲霉毒素或降低其浓度开心果粘贴到一个安全的水平。五个独立变量包括黄曲霉毒素浓度的影响,益生菌双歧杆菌lactis、存储时间和温度对AFB1的减少了使用一个由RCCD优化策略。改善食品和饲料安全,有必要使用这些微生物和删除从受污染的食品和饲料霉菌毒素。然而,似乎有必要进行进一步的研究探讨通过益生菌毒素去除过程的机制,揭示了相关机制,剂量,解毒和时机。获得最优解毒条件在当前研究中可以提出了常见的开心果和实用的解毒膏AFB1食品行业。然而,由于黄曲霉毒素的生产是一个生物过程,未来需要体内的研究来证实益生菌污染的开心果粘贴的有效性。

数据可用性

所有数据用于支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。