文摘

埃塞俄比亚传统发酵乳制品含有实验室显示各种食品变质和病原菌的抗菌活性对已经使用了发酵乳制品的保存了很长一段时间。然而,没有全面的科学报告的抗菌活性实验室隔绝各种发酵乳制品Pawe斯吉尔特区。这项研究的目的是评估实验室的抗菌活性与埃塞俄比亚传统发酵乳制品反对腐败和致病菌。35的样本收集发酵乳制品Pawe斯吉尔特区的三个肉牛养殖领域。97实验室分离和筛选主要使用垂直平板划线分离方法对3革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌菌株。97株,10人活跃的至少两个测试细菌,其中7株被选为二次筛选广谱抗菌活性。七个体外抗菌活性的提取范围从5到16毫米直径在二级筛查。在这项研究中,Z2, Z4和N2菌株表现出最高的与广谱抑菌圈活动对所有测试细菌。麦克风和MBC值的范围从0.10到0.30µg /µL和0.20到0.50µ克/µ分别L。后形态、生理、生化和分子特征、七的菌株被确定为嗜酸乳杆菌,乳酸菌paracasei,乳杆菌,乳杆菌,明串珠菌属mesenteroides,链球菌引起的酸奶,和Lactococcus lactis。根据本研究的发现,埃塞俄比亚发酵乳制品是最有效的生物活性化合物的来源与对食品变质和致病菌株的潜在影响。

1。介绍

致病性和腐败微生物必须控制在各种食品,确保食品的质量和安全。Biopreservation最近成为一个受欢迎的主题(1]。应用原生微生物区系及其抗菌产品是另一种技术为防止化学添加剂和香料感官和营养食品的性质的变化(2]。实验室被认为是有益的和一直用作自然菌群发酵食品。实验室也节省了严重的公共卫生问题和经济损失通过产生抗菌药物如细菌素、双乙酰,有机酸、二氧化碳,和过氧化氢3]。

现代食品加工目前面临着一个挑战,因为它试图延长食品的货架寿命和保护通过化学手段,而客户喜欢最小加工食品,化学防腐剂都是免费的。这引发了很多所谓的“绿色技术”,如感兴趣的新方法来处理和利用微生物代谢物biopreservation以最小的处理(4]。实验室通常被认为是健康发挥重要作用在食品和饲料的发酵和保存,作为原生微生物群落或发酵剂添加受控条件下。实验室防腐作用主要是由于处理有机酸如乳酸、乙酸乙,丙,丁酸的pH值降低,发酵产品;因此,许多有害细菌的生长和存活是抑制5]。此外,通过产生细菌素,一些菌株可以帮助保护通过促进微生物和微生物安全的食品和营养稳定的最后发酵食品(6]。

实验室研究了广泛的市场潜力,食品安全,健康7]。他们是重要的工业微生物,主要用于乳制品行业发酵奶制品和奶酪。实验室的能力迅速发酵糖成各种代谢物,并提供一种有效的方法来存储发酵食品给他们工业意义。此外,泰格等。8)证实了细菌素的广泛认为是安全的实验室也吸引了很多感兴趣的小说方式打击腐败和食品中致病菌。

抗菌化合物中发现的微生物被发现通过筛选过程,其中包括检测和隔离一个新的微生物产品。它包含两个主要(定性)和二级(定量和更多的探索)筛查9]。初级筛查(presence-absence测试)允许检测和隔离微生物,具有潜在的有趣的工业应用。拥挤和cross-streak板方法往往主要用于筛选抗菌活性。而承诺从初级筛选菌株测试更专业媒体和条件,这就是所谓的二次筛选。在这个筛选,临床应用的新微生物产品可能涉及的详细描述和识别压力,净化、抗菌产品的特性,产品的分子结构测定可能的化学改性,和毒理学评价(6,8]。

实验室产生的抗菌化合物对多种有害细菌活跃,尽管在很大程度上不同的化学结构和作用方式(1,5]。例如,细菌素是一类蛋白质的化合物,形成一个异质群体对生产菌株,分子大小、抗菌谱、稳定,理化性质和作用方式3,6]。Lactostrepcin、乳酸链球菌肽lacticin,细菌素、dricin lactococcin, diplococcin, diacetin, mesenterocin, leucocin, thermophilin, lactacin, acidophilin, acidophilicin, acidocin,嗜酸乳菌素,gassericin, reutericyclin, reutericin, caseicin, plantaricin, bulgarican,乳酸杆菌,enteroccin, enteroccin bifidocin, pediocin一些著名的抗菌化合物(细菌素)由不同属的实验室等Lactococcus,明串珠菌属,链球菌,乳酸菌,肠球菌,双歧杆菌属,片球菌属属(5,6,8,9]。这些抑制性物质的使用延长保质期的牛奶和奶制品通过抑制和杀死食品变质和致病性菌株提供了全世界成功的结果。我们所知,没有明显的信息产生抗菌物质的典型发酵微生物区系存在于Pawe斯吉尔特区。这项工作的目的是寻找抗菌活性在实验室中发现的埃塞俄比亚传统发酵乳制品。

2。材料和方法

2.1。研究区域的描述

研究Pawe斯吉尔特区,Metekel区Benishangul Gumuz区域状态,埃塞俄比亚西北部,位于400公里区域城镇Assosa和575公里远离亚的斯亚贝巴,埃塞俄比亚的首都。其地理坐标位置的纬度/经度11°19 ' N和36°24′E与海拔范围的海拔980 - 1250米。年度最低和最高温度19.5和37.7°C,分别,它接收一个年降雨量900 - 1587毫米不等。斯吉尔特区占地总面积63450公顷。斯吉尔特区分为20个自治街坊联合会和已经与50220居民12267户,其中25153名男性和25067女性。斯吉尔特区农业系统的特点是一个混合农畜农业系统产生不同的发酵(因此,Ayib Metata Ayib,和其他)从牛奶乳制品10]。

2.2。收集的样本

共35份发酵埃塞俄比亚乳制品(“因此,”“Metata Ayib,”和“Ayib”)收集随机从三个肉牛养殖领域(Pawe镇、村130年,村4)Pawe斯吉尔特区的家庭。35总埃塞俄比亚发酵乳制品、20、10、5样本”因此,““Metata Ayib,”和“Ayib,”。所有样品都是在无菌收集聚乙烯袋,已标示,并转移到微生物实验室Pawe农业研究中心的帮助下一个冰箱。样品到达后被立即处理。

2.3。分离、纯化和分离株的生长条件

10克(“因此”、“Metata Ayib,”和“Ayib”)埃塞俄比亚发酵乳制品样品和90毫升well-homogenized无菌生理盐溶液(0.85%氯化钠w / v) 30秒的帮助下三角胸衣lab-blender(三角胸衣®400循环器,英国);然后,生成的匀浆连续稀释10⁻⁸正常使用无菌生理盐水(0.85%氯化钠w / v)。从10⁻⁵到10⁻⁸被稀释,0.1毫升和传播准备德曼Rogosa和夏普(夫人)琼脂培养基(默克公司、德国)的帮助下一个弯玻璃机(11]。所有的盘子都孵化一式三份30°C为48 - 72 h在厌氧罐(BD气体Pak™150系统,美国)。代表纯粹的殖民地亚文化在倾斜夫人和保持在4°C进行进一步分析和表征测试。

2.4。食品变质和致病菌株的集合

金黄色葡萄球菌(写明ATCC^®29213年),蜡样芽胞杆菌(写明ATCC^®11778年),肠炎沙门氏菌(写明ATCC^®13076年),单核细胞增多性李斯特氏菌(写明ATCC^®7644年),铜绿假单胞菌(写明ATCC^®27853年),大肠杆菌(写明ATCC^®8739)被用作测试生物体是最常见的食品变质和致病细菌。

2.5。标准化和培养液为抗菌活性试验做准备

0.50毫升1.175% (w / v)脱水氯化钡(BaCl₂•2 h₂O)的解决方案是混合99.50毫升(1% v / v)硫酸(H₂所以₄)0.5麦克法兰标准的解决方案。培养液悬架是由整除浊度标准溶液在相同的试管。准备0.5麦克法兰标准溶液的吸光度也证实spectrophotometrically 0.08到0.12在625海里。标准溶液管紧密密封,室温保存,避免蒸发和照明。浊度标准管是一个旋涡混合器结合实现统一的浑浊的外观比细菌悬液(之前12]。

从纯琼脂培养24小时,4 - 5个形态相同的细菌菌落是悬浮在5毫升无菌营养肉汤(HiMedia、印度)和0.5麦克法兰标准的解决方案相比,相当于1.5×10⁸CFU /毫升。调整后的浊度、无菌棉签蘸了悬架和条纹的整个表面准备Muller-Hinton琼脂(尼古拉斯)介质(HiMedia、印度)旋转板60^o角度确保接种体均匀分布(12]。

2.6。主要检查

实验室隔绝的抗菌活性发酵埃塞俄比亚乳制品样品主要是反对腐败和致病性菌株筛选使用垂直平板划线分离方法。隔离是筛选抗生素生产水平条纹在尼古拉斯介质的直径和孵化30°C为24 - 48 h (6,13]。孵化后,0.5麦克法兰标准菌株进行调整,即金黄色葡萄球菌(写明ATCC^®29213年),b的仙人掌(写明ATCC^®11778年),美国肠炎(写明ATCC^®13076年),l . monocytogenes(写明ATCC^®7644年),铜绿假单胞菌(写明ATCC^®27853年),大肠杆菌(写明ATCC^®8739年),在90°角垂直条纹非常接近筛选一个从左到右,分别。盘子被进一步孵化24小时37°C,和区域之间的抑制是表明抗生素的分离和测试生物体视为积极的抗生素生产。选择积极的隔离然后基于广泛的活动对菌株进行测试。隔离是维护在偏夫人和保持在4°C进行进一步的抗菌化合物提取、二次筛选和鉴定测试。

2.7。从实验室中提取的抗菌化合物

活跃和广谱实验室菌株受到淹没状态发酵方法生产原油提取。新鲜文化的抗菌compound-producing隔离分别接种在含有100毫升250毫升锥形烧瓶汤夫人在厌氧条件下30°C 72 h。孵化后,每个样本离心机在4°C 6000 rpm 15分钟获得文化游离上层清液(CFS)。解决方案获得游离的和硫酸铵饱和度(70%)。混合物受到摇晃旋转瓶在250 rpm在4°C 2 h。最后,有机相分离的水相用分液漏斗和集中在真空下干燥使用旋转蒸发器的温度50°C (14,15]。

2.8。二次筛选

实验室菌株的抗菌活性进行了评估与腐败和致病性菌株使用纸片扩散法Kirby-Bauer所描述的一些修改(16]。调整后的浊度为1.5×10⁸CFU / mL,菌株,即金黄色葡萄球菌(写明ATCC^®29213年),b的仙人掌(写明ATCC^®11778年),美国肠炎(写明ATCC^®13076年),l . monocytogenes(写明ATCC^®7644年),铜绿假单胞菌(写明ATCC^®27853年),大肠杆菌(写明ATCC^®8739),在无菌尼古拉斯擦洗均匀介质使用无菌棉拭子。无菌6毫米直径纸光盘浸满10µL提取。接种板块和浸渍光盘了5 - 10分钟吸收水分和干燥的阀瓣。介绍了浸渍光盘的上层播种琼脂板和孵化24小时37°C。CFS的抗菌活性与已知的抗生素庆大霉素(10µg /盘)是一个积极的控制和蒸馏水(10µl /盘)作为一个消极的控制。抑菌圈的直径(毫米)表面的板来确定抗菌活性测定,结果被记录为均值±SD后三个重复的实验17]。

2.9。菌株及其抗菌化合物的表征

净化文化遵循标准的形态特征、生理、生化和分子测试。革兰氏染色、芽孢染色法,过氧化氢酶试验、氧化酶试验,活性测试,在不同碳源生长,温度、pH值、氯化钠浓度进行描述实验室菌株(18]。纯隔离存放在−80^∘在使用前C夫人肉汤和甘油。实验室被确定使用16 s rRNA基因的引物27 f (5^ʹ-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3^ʹ)和1492 r (5^ʹ-TACGGYTACCTTGTTACGACTT-3^ʹ)[9,19]。测序与sequence-matching EzTaxon-e数据库执行程序。

不同的酶如蛋白酶K,胃蛋白酶,α淀粉酶和溶菌酶(生物基本加拿大公司)被添加到所选菌株的CFS (Z1, Z2, Z3 Z4, M1, F2,和N2)来评估它们对抑制物质的影响。CFS获得所选菌株与过氧化氢酶治疗水浴25°C 1小时,过滤,储存在4°C进行进一步分析。氯化钙缓冲区添加1毫克/毫升酶,蛋白酶K,木瓜蛋白酶,α淀粉酶和溶菌酶。那么,解决方案是过滤消毒和设置在37°C 3 h,混合物是煮3分钟灭活酶。抑菌和杀菌效果使用纸片扩散法进行了分析。最后,剩余的活动是由观察抑菌圈的存在(9,19,20.]。

抗菌活性的物质也在各种条件下评估治疗后。温度的影响抗菌活性的CFS估计通过加热45,65,85,100°C为30分钟。pH值对CFS抗菌活性的影响是由调整CFS的pH值为2,4,6,8,10,使用盐酸1 N, 1 N氢氧化钠,酸度计。CFS被暴露在30°C 1 h,和样本调整pH值6.0和活动的决心。观察有机溶剂对CFS的生物活性的影响,甲醇和乙醇溶剂被添加到CFS在1:9(卷/卷),放置30分钟30°C。1% (w /t)添加了柠檬酸钠和钾氯和混合成CFS观察抗菌活性添加剂的影响。所有的治疗方案的抗菌实验孵化24 h在37°C使用纸片扩散法。剩余的抑制活动决心通过观察他们的抑制区。无菌水和治疗CFS被用作正面和负面的控制,分别是(19,20.]。

2.10。麦克风和MBC的决心

的最低抑制浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)是由汤双重的连续稀释法(21]。十二个螺旋帽试管了,卷1µL(营养肉汤被分发到试管1和2µL到试管11(负控制)。1µL的无细胞提取物加入试管1,混合,并转移到试管2,这个过程是由混合继续连续试管10和改变微量吸液管技巧在每个稀释,和2µL加入试管12(积极的控制)。1µL的标准化(1.5×10⁸CFU /毫升)培养液加入试管1 - 10和孵化24小时37°C。孵化后,MIC值取决于观察试管里的细菌的生长。从上面的试管没有浊度,1µL是尼古拉斯板表面传播。在37°C孵化后24 h,殖民地被观察和MBC决心。

2.11。统计分析

三个独立的实验进行。所有的数据进行了分析通过单向方差分析使用社会科学统计软件包(SPSS)版本,23岁。差异意味着检测意义( )通过邓肯的多个测试范围。

3所示。结果

3.1。在埃塞俄比亚的隔离和表征实验室发酵乳制品

九十七实验室分离的特点,分为6个属水平形态后,生理,生化特征如表所示1。33(34.0%)的六个属乳酸菌,20 (20.6%)Lactococcus,17例(17.5%)明串珠菌属12 (12.4%)片球菌属10 (10.3%)链球菌5 (5.2%)肠球菌spp。乳酸菌33(34.0%)是最主要的肠球菌至少5(5.2%)发生的物种。这些实验室从35埃塞俄比亚分离发酵乳制品样品收集Pawe斯吉尔特区的居民。从这些隔离,从Pawe镇48例(49.5%),从130年村32例(33.0%),和17(17.5%)从村4被发现。97实验室分离,57例(58.8%),30(30.9%)和10(10.3%)获得“因此,”“Metata Ayib,”和“Ayib,”。所有隔离在厌氧条件下生长。革兰氏阳性、过氧化氢酶、氧化酶和孢子负面和不动的特征在所有隔离观察。在显微观察,绝大多数(66%)是球菌,其余(34%)杆状实验室。除了链球菌和片球菌属spp。,所有隔离从葡萄糖代谢产生二氧化碳。所有隔离发酵乳糖作为唯一的碳源而变化是在发酵过程中观察到的其他(葡萄糖、蔗糖、木糖、蜜二糖、棉子糖、山梨糖醇)碳源。所有隔离种植15至30^oC在波动中观察到隔离从10到45°C宽容。准备所有隔离生长良好介质的pH值2,4,5。大多数的隔离是生长在一个中等补充2和4%氯化钠。然而,几乎所有的隔离没有增长在6.5%盐介质。

16 s rRNA序列的基因产物的七个菌株对抗菌活性结果观察从100年到200年,英国石油公司的阶梯序列并与EzTaxon-e数据库,给100%的相似性嗜酸乳杆菌,乳杆菌,乳杆菌,Lactococcus lactis而99%的同源性观察乳酸菌paracasei,明串珠菌属mesenteroides,链球菌嗜热菌(补充数据1和表2)。

CFS是处理不同的酶(蛋白酶K,木瓜蛋白酶,α淀粉酶和溶菌酶),其抗菌效果进行24 h后的孵化37°C。不同实验室的CFS菌株的抗菌效果降低了治疗后蛋白酶K和木瓜蛋白酶,而溶菌酶和α淀粉酶酶没有影响的敌对活动的CFS实验室菌株(表3)。

中低温度没有影响CFS的抗菌活性。然而,高温(100°C)有一些效果。一个酸性环境(pH值范围2 - 6)对CFS的抑制效果最好。乙醇是一个很好的溶剂,增强CFS的抗菌效果比甲醇。七个实验室菌株CFS处理添加剂,如柠檬酸钠和钾氯、验证食品添加剂和其他化学物质的影响抗菌物质的实验室。柠檬酸钠是一种有效的添加剂实验室CFS氯化钾相比(表压力4)。

3.2。体外中小学实验室菌株的筛选

97实验室分离株进行初级筛选,10个菌株表现出不同程度的抑制效应对六个测试生物如表所示5。隔离的实验室,7株有强大的抗菌活性对革兰氏阳性和革兰氏阴性食物溢出和致病菌,而3菌株只活跃在革兰氏阳性菌株,以及许多强有力的菌株是孤立的“因此”和“Metata Ayib”样本。主要检查期间,最高抑制区与广谱活动记录从三个(Z2, Z4和N2)实验室菌株。

无细胞提取的七个强有力的和以前实验室菌株(Z1, Z2, Z3 Z4, M1, F2,和N2)受到二次筛选使用纸片扩散法如表所示6和辅助数据2。体外抗菌活性范围从5到16毫米直径。在二次筛选,其余菌株相比,这项研究的结果显示,Z2, Z4,和N2显示最高的广谱活性的抑制区所有测试食品变质和致病性菌株,如补充数据2所示。抗菌检测,所有的七个实验室对革兰氏阳性菌株活跃(年代。葡萄球菌和B。昙花,)菌株,而变化观察对革兰氏阴性食品变质和致病性(年代。肠炎,l。monocytogenes,P。绿脓杆菌,E。杆菌)生物指标如表所示6。

3.3。麦克风和MBC实验室菌株

麦克风和MBC的七个广谱抗菌化合物生产实验室菌株进行反对六(3革兰氏阳性和革兰氏阴性)食品变质和致病性菌株指标。MIC值范围从0.10到0.30µg /µL MBC值范围从0.20到0.50µ克/µlP。绿脓杆菌(写明ATCC^®27853)和l。monocytogenes(写明ATCC^®7644)要求高µ克/µL无细胞提取物抑制和杀死比其他食品变质和致病性生物指标如表所示7。与革兰氏阴性细菌的好药相比,革兰氏阳性食品变质和致病性菌株需要更少的毫克每毫升抑制或杀死抗菌颗粒提取物的生产实验室。Z2的提取、Z4和N2实验室菌株表现出良好的抑制和杀菌活性测试生物体对革兰氏阳性和革兰氏阴性。

4所示。讨论

人类食源性病原体重现和新兴作为主要关注和不断增长的全球公共卫生挑战,特别是在发展中国家如埃塞俄比亚。食源性疾病是导致大量的成人疾病和死亡;更关键的是,他们会杀死大量的孩子每天的急性腹泻疾病[来源22]。寻找新的抗菌药物治疗等微生物病原体的实验室是一个基本和重要的问题。在实验室发酵乳制品,可以产生多种代谢产物抗菌,抗真菌,抗癌,益生菌的特性。结果,假定的antimicrobial-producing实验室可以从各种孤立的发酵牛奶产品在不同环境(23]。此外,病原体利用的类型,以及物理和化学参数使用在各种环境条件下,可能会影响抗菌活性的抗生素的微生物产生的代谢物(24]。

在最近的研究中,乳酸菌,Lactococcus,明串珠菌属,片球菌属,链球菌,肠球菌种虫害是孤立和确定从埃塞俄比亚传统发酵乳制品。这些属的存在是一致的结果Mathara et al。11]。据报道,传统发酵牛奶等支持实验室的发展乳酸菌,Lactococcus,明串珠菌属,片球菌属,链球菌spp。25]。穆罕默德et al。26)也报告说,乳酸菌,肠球菌,Lactococcus种虫害主要物种在埃及乳制品。这种差异可能符合研究网站的变化,牛奶类型、生产季节,气候。在这项研究中,所有的分离和鉴定实验室菌株经常被发现在各种传统发酵乳制品的埃塞俄比亚或世界其他地区(11,27]。

在这项研究中,慢性疲劳综合症的七株抗菌效果处理后部分灭活α淀粉酶和溶菌酶的酶,而效果略灭活和留存在某些菌株处理后蛋白酶K和木瓜蛋白酶。Cocolin et al。3和任等。19)也证明了细菌素的抑制作用产生的孤立和实验室从山羊牛奶在印度和自制的发酵食品在中国是不稳定的胃蛋白酶后,胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和蛋白酶K酶是管理。这些报告同意这一发现的结果。这可能是由于一些菌株的抗菌物质可能含有有机化合物的碳水化合物,在一定程度上促进抑制。

在目前的研究中,治疗CFS在不同的温度下,其抗菌效果是有效和CFS的抗菌活性菌株(Z1、F2和Z3)降低温度时增加。任等。19)也证明了CFS的抗菌活动对不同温度区间。这可能是由于他们的低分子量和化学性质不同的二级结构,导致大多数抗菌化合物的抗高温。这表明实验室产生的抗菌化合物可以用作高温治疗生物防腐剂的食物。

关于pH值,CFS的抗菌活性是活跃的和稳定的酸性环境中(2 - 6)。此外,一些实验室菌株(Z2, Z4和N2)活跃在pH值8但抗菌效果降低。这表明不同运输监管和乳糖的代谢系统的实验室和酸生产能力不同的菌株。CFS的拮抗效果是完全失去了pH值10(碱性条件),这个发现是不符合平托et al。14和任等。19)独立的实验室和失去抗菌活性的pH值12和14,分别。这意味着大多数菌株的主要抗菌效果依赖于酸。因此,Z2, Z4和N2的CFS是最有效的,可以作为发酵和biopreservative代理之间的牛奶和奶制品2和6的pH值范围。

大多数实验室菌株CFS是溶于甲醇和乙醇等有机溶剂。Avaiyarasi et al。13和任等。19还显示,细菌素的物质溶于有机溶剂。相比,乙醇,甲醇治疗慢性疲劳综合症的某些菌株的抗菌效果降低。这是不符合的结果任et al。19]。这可能是由于抗菌物质的化学结构(CFS)由实验室菌株分泌无法忍受的甲醇溶剂。实验室菌株CFS显示稳定后对试验菌株的抗菌作用处理添加剂(氯化钾和柠檬酸钠)。任等。19)报道,抗菌活性乳酸菌种虫害孤立从自制的发酵食品在中国是有效的氯化钾和柠檬酸钠添加剂被添加。

在目前的研究中,从97隔离,只有7个菌株表现出广谱抗菌活性,对革兰氏阳性和革兰氏阴性病原细菌菌株。CFS的实验室分离抑菌圈试验生物范围从5到16毫米直径。据报道Savadogo et al。25),Esayas et al。23任,et al。19),CFS的抑制带实验室对标准的人类病原体分离范围从8到10毫米,9 - 11毫米,7 - 9毫米,分别。因此,目前的结果是一个很好的抑制带(5-16毫米)相比,上述调查结果,而当前的研究结果与Rozila et al。28]和萨利赫[29日),从羊奶孤立的实验室和埃及传统发酵乳制品和记录抑制区8-25毫米和60毫米,分别针对测试生物体。这种差异可能是由于产生抗菌物质的浓度和类型。

DUndar [30.]孤立明串珠菌属种虫害活动强烈的杀戮与一些致病细菌,包括单核细胞增多性李斯特氏菌,蜡样芽胞杆菌,铜绿假单胞菌。此外,家门口et al。31日)发现的慢性疲劳综合症乳酸菌种虫害抑制的增长短芽孢杆菌,杆菌、,枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,铜绿假单胞菌,金黄色葡萄球菌,鳗弧菌,不动杆菌sp。节细菌属sp。此外,法等。32)表示,乳酸菌压力会抑制增长沙门氏菌sp。Bendali et al。33还演示了CFS的抗菌活性乳酸菌种虫害对革兰氏阴性(铜绿假单胞菌,肺炎克雷伯菌)和革兰氏阳性(蜡样芽胞杆菌,粪肠球菌,和金黄色葡萄球菌)细菌病原体。这一发现也证实,CFS的实验室从埃塞俄比亚分离发酵乳制品具有广谱抗菌活性对食品变质和致病菌株。

4.1。研究的局限性

因为COVID-19流行和缺乏SEM机,高效液相色谱法分析和净化的抗菌物质,以及慢性疲劳综合症的影响病原体细胞形态学和细胞内的组织,没有执行。

5。结论

目前的研究表明,七(嗜酸乳杆菌,乳酸菌paracasei,乳杆菌,乳杆菌,明串珠菌属mesenteroides,链球菌引起的酸奶,和Lactococcus lactis)实验室菌株体外有广谱抗菌活性对食品变质和致病菌株的抑菌圈从5到16毫米。麦克风和MBC值的范围从0.10到0.30µg /µL和0.20到0.50µg /µL,分别。治疗后的七个实验室代谢物与蛋白酶K,木瓜蛋白酶,α淀粉酶,溶菌酶,对测试生物观察他们的抗菌作用。大多数实验室菌株CFS抗菌活性高度耐热(45°C - 100°C),酸性pH值(2 - 8),有机溶剂(甲醇、乙醇)和添加剂(氯化钾,柠檬酸钠)。因此,这项调查表明实验室的结果从埃塞俄比亚传统发酵乳制品是分离的有力来源抗菌代谢物与防腐剂的潜力。因此,实验室发酵的牛奶产品的隔离和表征不同地理区域的新奇的发现可能是一个有用的来源和化学多样性的化合物具有广泛的生物活性。

缩写

方差分析:	方差分析
慢性疲劳综合症:	浮在表面的游离
实验室:	乳酸菌
MBC:	最低杀菌浓度
尼古拉斯:	Muller-Hinton琼脂
麦克风:	最低抑制浓度
夫人:	德曼、Rogosa和夏普。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果中包括纸和补充数据。

信息披露

资助机构没有参与这项研究的设计,数据收集和分析,解释数据,或者写手稿。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

作者设计的项目;AG)和AA进行实验,分析数据,起草和编辑了手稿。作者已阅读并认可最后的手稿。

确认

作者感谢Pawe农业研究中心微生物实验室提供实验室设备。他们也承认阿姆哈拉公共卫生研究所提供测试菌株。也要感谢所有参与这项研究。

补充材料

补充数据1:琼脂糖凝胶电泳的PCR产物7 (Z1-N2行)菌株。补充数据2:F2的抗菌活性,Z2, Z4, N2, M1的实验室菌株和庆大霉素(CN 10µg /盘)对食品变质和致病菌(A)金黄色葡萄球菌(写明ATCC^®29213年),(B)b的仙人掌(写明ATCC^®11778年),(C)美国肠炎(写明ATCC^®13076年),(D)l . monocytogenes(写明ATCC^®7644年),(E)铜绿假单胞菌(写明ATCC^®27853年),(F)大肠杆菌(写明ATCC^®8739)。(补充材料)