文摘
牛奶中类固醇激素的存在是不可避免的,他们可以为消费者被认为是潜在的致癌剂。本研究的目的是评估水平的17岁β雌二醇、孕酮和羟孕酮六十九年牛牛奶样本,收集从4月到2020年9月,在哈马丹,伊朗。分析了牛奶样品使用酶联免疫吸附试验(ELISA)。在这项研究中,平均17的内容β雌二醇、孕酮和羟孕酮在牛奶样本确定为330.5±190.2 pg / ml, 3.57±2.47 ng / ml,分别和1.54±0.41 ng / ml。然而,这些牛奶样品中类固醇激素的内容在儿童和成人可以认为是安全的,如果牛奶消费被认为是在报道范围内(175 - 240毫升/每天)。由于类固醇激素的影响,尤其是17β雌二醇,各种癌症的病因,建议定期监测这些激素的牛奶和奶制品在伊朗。
1。介绍
牛奶是最重要的一个来源的钙和蛋白质的人类在全球食物金字塔(中扮演主要的角色1,2]。2017年报告的基础上,联合国粮食及农业组织(FAO)、世界上人均牛奶消费量约为100公斤/年,这可能是非常变量在不同地区3]。与此同时,伊朗人均牛奶消费量低于世界上消费,每年估计为66.12公斤。根据粮农组织的报告,伊朗的牛奶产量平均增加了明显从2014年的400万吨增加到1998年的880万吨(4]。
这食物来源是倾向于多种环境污染物如真菌毒素(5)、农药(6),重金属(7),三聚氰胺(8),抗生素、和不同激素(9,10]。在这其中,牛奶和乳制品中类固醇激素的存在是不可避免的,可以视为一个威胁因素在消费者10,11]。牛奶的腺体激素自然源自内部,随后,血液流动,并分泌牛奶中通过扩散(12]。此外,使用类固醇激素增加牛奶产量和提高畜牧业的繁殖性能13]。因此,预计牛奶被认为是丰富的内生和外生类固醇激素,其内容在牛奶往往超过母体血浆。这些亲脂性的化合物的水平取决于牛奶的脂肪水平(14]。食品加工,如生产和/或加热,似乎并不影响类固醇激素的数量(15]。
牛奶中类固醇激素的存在可以最有效的因素之一在荷尔蒙失调的发生及其后果16]。例如,Maruyama et al。17]表明,男性消费至少600毫升/ m2身体表面积的类固醇激素的牛奶有更高的内容包括雌二醇、雌素酮,在尿液和血清孕酮。这些人拒绝了血清水平的睾酮和垂体促性腺激素对小时后饮用牛奶(17]。在国际比较中,日常消费的牛奶和奶制品与各种癌症率密切相关,尤其是前列腺癌和卵巢癌(18,19]。此外,牛奶和乳制品的消费总量与子宫内膜癌的发生,主要是那些不接受激素治疗的绝经后妇女,发现可能与乳制品的甾类激素含量(20.]。
哈马丹(纬度33°33′35′48′N和经度47°45 49 36 E′′′),在Iranthat西部地区,由于其地理位置和气候状况,提供了一个相当大的一部分牛奶为不同地区的伊朗。据估计由动物饲养,大约80%的牛奶生产来自怀孕牛,这自然有重大的类固醇激素水平(17]。也有非官方报告使用类固醇类药物在伊朗畜牧业增加牛奶产量。鉴于60 - 80%的类固醇激素进入人体通过牛奶和乳制品的消费14),它是非常重要的决定这些产品的消费适量防止致癌和破坏这些激素的影响。因此,为了评估这些激素的风险通过牛奶消费者的消费水平的三个哈马丹牛奶样品中类固醇激素测定的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,其结果是粮农组织/世卫组织食品标准。
2。材料和方法
2.1。抽样
如图1六十九牛牛奶样品(从四个不同的区域)被随机从哈马丹收集市场2020年4月至9月期间。所有样品都保持在−20°C和尽快分析。
2.2。样品制备和激素的分析
根据样品制备了杨的方法等。21)做了一些调整。简单,1毫升的样品转移到超小型电子管。然后,200年μL(醋酸缓冲(0.2 M, pH值5.2)添加和使用均质机均质1分钟。类固醇激素的早期解离,20µL葡萄糖醛酸酶/ arylsulfatase添加和孵化一夜之间在37°C。然后,0.5毫升的样品转移到增加了超小型电子管和0.5毫升的甲醇沉淀牛奶蛋白质。3分钟后涡颤抖,样本离心机(25°C 10分钟/ 3500 g)和他们的上层清液分离和清洁利用固相萃取(SPE)。类固醇激素的定量分析是使用竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(DiaMetra, Spello佩鲁贾,意大利)根据制造商的指示。
2.3。质量保证
建立了校准曲线为每个甾类激素使用外部标准,由去离子水稀释股票的解决方案。然后,量化确定的极限(SD / S)×10、SD / S是标准差的比值/校准曲线的斜率(22]。质量控制样品准备的牛奶样品中添加不同浓度的17岁β雌二醇(25、50和500 pg / ml),孕酮(5、10和20 ng / ml),和羟孕酮(1.5、3和6 ng / ml)标准。涡摇动1分钟后,样本均质在30分钟的超声波水浴。最后,ELISA技术验证,确保数据质量使用测量的复苏和牛奶飙升的平均变异系数与不同浓度的激素。
2.4。健康风险评估
如方程所示(1),估计每日摄取的类固醇激素(EDI)计算的平均体重儿童和成人消费者(Wbw),牛奶消费的数量(F米),牛奶(的类固醇激素水平C上海)。
据阿贝迪的工作等。4),牛奶消费的平均水平(4到10岁)儿童和成年人(18-50)在伊朗被认为是大约240和175毫升/天,分别。此外,儿童和成人的体重消费者等于70和26公斤,分别基于体重的研究环境保护署(4,23]。此外,风险系数(总部)指数计算是基于以下方程:
3所示。结果与讨论
哺乳期竞赛选择和提高畜牧业的畜牧学的局势正在进行,因此,牛奶产量每头牛的水平高得多(14]。增加可能的结果改变内分泌系统系统的母牛会影响牛奶中类固醇激素的形象作为一个癌症风险因素(24]。因此,牛奶和乳制品的消费增长近年来已成为一个严重的健康挑战[25]。
在当前的研究中,内容的甾类激素牛奶样本来自不同地区的哈马丹测量后ELISA的验证过程。如表所示1,r2索引表示一个可接受的标准曲线的定义范围。此外,复苏实验的结果和他们的相对标准偏差(RSD)值是在可接受的范围,显示良好的精密度和准确度的分析方法(表2)。
牛奶中类固醇激素的识别有潜力生殖功能障碍有担忧10]。17β雌二醇是主要由绝经前卵巢雌激素分泌。从睾酮合成主要是在卵巢颗粒细胞和胎盘,但小水平可以产生肾上腺(26]。在奶牛,怀孕与牛奶产量下降越快(27]。17β雌二醇可以刺激肿瘤的生长,与乳腺癌的发生有关28]。在这项研究中,17岁β雌二醇在所有的牛奶样品检测范围75.6 - -922.3 ng / L和确定的平均污染水平为330.5±190.2 ng / L(表3)。几项研究已经报道17β牛奶样品的雌二醇水平。例如,Malkinejadet艾尔。14]报道17β雌二醇水平加工过的牛奶和鲜奶的范围5.6 - 51 ng / L。陈等人。29日17)发现的水平β雌二醇在商业牛奶样品的范围从0到70.12 ng / L。生产牛奶的一个重要组成部分获得怀孕母牛;因此,牛奶类固醇的内容取决于怀孕的不同阶段。怀孕期间,类固醇激素,如雌激素和孕激素的分泌增加(27]。基于先前的报道,累积浓度的雌激素在怀孕后期是27倍的牛奶的奶牛怀孕头三个月(14]。在这方面,日本的调查人员已经显示牛奶样本一头牛在怀孕的后期阶段包含33倍雌激素酮硫酸比从妊娠奶牛奶30.]。他们的发现可能至少部分解释我们的数据的高标准差。
产生的孕激素是一种类固醇激素在排卵期间,可以化验在牛奶样品(31日]。这种激素起落在牛的生殖周期的不同阶段32]。在最近的研究中,孕激素决定在所有的牛奶样品在0.69到12.1 ng / ml的范围和检测到的平均污染水平3.57±2.47 ng / ml(表4)。此前,金瑟尔et al。33)表现出牛奶孕酮含量的范围在15.1和26.2之间μ怀孕期间g / L (33]。此外,君威et al。34)显示,孕激素的平均含量分别为0.824和0.082μg / L的原料奶孕妇和妊娠牛,分别为(34]。此外,在吴等人的研究。35),孕激素水平被报道的平均值0.5 ng / ml, 4.48 ng / ml的牛奶样品没有怀孕和怀孕的母牛,分别为(35]。看来怀孕或发情周期阶段可以有一个主导的角色在牛奶孕酮水平(36]。在这方面,有一个明显的牛奶产量和双排卵之间的关系,和现在证实,这种现象可能与卵泡选择的循环时间附近的孕酮水平(37]。
羟孕酮是一种生物黄体酮后生成的类固醇激素合成和提高在怀孕早期(38]。在这项研究中,羟孕酮测量所有的牛奶样品在0.80到2.61 ng / ml的范围和检测到的平均污染水平为1.54±0.41 ng / ml(表5)。没有证据表明羟孕酮在牛奶的危险,但由于这种激素的作用在增加孕激素受体的表达,应该考虑允许的限度。
在这项研究中,17β雌二醇和孕酮的日常摄入量在两个年龄组的儿童和成人人口估计在伊朗。粮农组织/世卫组织食品添加剂专家委员会报告了17岁的阿迪β雌二醇和孕酮= 50 ng / kgbw 30μ分别为g / kgbw [39),而估计接触计算通过分裂这些激素的日常摄入量的安全限制。如表所示6,本研究的结果表明,17岁β雌二醇和孕酮含量牛奶样品在儿童和成人可以认为是安全的,如果牛奶消费被认为是在定义的范围内(175 - 240毫升/每天)。
如果类固醇激素的最大内容被认为是在暴露评估估计,消费超过1.5升/天的牛奶可以把高危的17岁的孩子β雌二醇。虽然消耗这么多的牛奶每天似乎不太可能,因为在伊朗大量食用奶制品,有可能暴露在大量的17岁β雌二醇。
4所示。结论
总的来说,由于很多乳制品是由牛奶和雌二醇具有高稳定性,17的风险β雌二醇暴露通过牛奶和乳制品的消费对消费者可能会令人担忧。相比之下,孕激素暴露通过牛奶消费的风险似乎很小,甚至不可能。然而,应注意定期监测类固醇激素的牛奶和乳制品,由于消费这些产品在伊朗人口的上升趋势。
数据可用性
的数据支持本研究的发现可以从相应的作者在合理的请求。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
这项研究是M。Sc论文的第二作者为研究和技术支持的副校长,哈马丹医科大学哈马丹,伊朗(批准号9806124511)。