失踪的LNK:进化从细胞增多症患者中慢性Myelomonocytic白血病多发性硬化和生殖系SH2B3突变

文摘

慢性myelomonocytic白血病(CMML)是一种罕见的但与重叠的特性不同的血液肿瘤骨髓增生异常综合征(MDS)和骨髓增殖性肿瘤(或然数)。CMML患者有持续的单核细胞增多症和骨髓dyspoiesis与各种宪法症状如发烧、无意减肥或盗汗。建立,有一个强大的协会CMML前或共存的自身免疫性疾病和系统性炎症症状影响患者的20%左右。各种分子异常如TET2、SRSF2 ASXL1,和拉CMML发病机理的报道,但没有描述这样的突变来解释强有力的协会的自身免疫性疾病和严重CMML炎性表型。生殖系突变SH2B适配器蛋白3 (SH2B3)已报告在影响一个家庭与自身免疫性疾病和急性淋巴细胞白血病。在这个报告中,我们描述了第一例女性主题与多年前多发性硬化症CMML诊断前的历史。我们列出的证据支持的致病作用SH2B3 p.E395K生殖系突变,连接这些点自身免疫性疾病之间的联系和CMML创世纪。

1。介绍

基因影响表观遗传学、细胞信号、拼接机械、和造血细胞的转录因子通常变异在慢性myelomonocytic白血病(CMML) [1]。Janus-activated激酶/信号传感器和激活转录(JAK / STAT)通路中发挥着关键作用在正常造血干细胞生长和分化和激活异常在不同骨髓增殖性肿瘤(或然数),包括CMML。在正常情况下,各种生长因子(红细胞生成素、促血小板生成素granulocyte-macrophage集落刺激因子)和细胞因子(如IL-3和IL-7)激活这个途径,这个途径的负调控像SOCS1/3 LNK适配器蛋白质在限制细胞增殖至关重要。LNK(由基因编码SH2B3)包含一个重要的src同源性2 (SH2)适应磷酸化JAK2域,从而消极调节JAK2-activated通路(2]。在种系突变LNK/ SH2B适配器蛋白3 (SH2B3)基因在急性淋巴细胞白血病已报告和或然数除了CMML [3,4),和各种单核苷酸多态性与自身免疫性疾病相关,脂肪组织炎症、糖尿病和心血管疾病(5- - - - - -7]。而体细胞突变CMML发病机理的描述,症状如RASopathies以外的种系突变是不很透彻了。我们报告的第一例CMMLSH2B3p。E395K生殖系突变。

2。案例展示

一个37岁的白人女人被诊断为多发性硬化症(MS)后出现头痛、视神经病变、周边视力丧失。一个完整的血细胞计数在诊断时显示白血球和血小板增多女士(补充材料(见在这里))。骨髓活检诊断的MS进行了20个月显示hypercellular骨髓(80%)与有序trilineage造血成熟和温和的红细胞dyspoiesis(数字1(一)-1(c))。流式细胞仪未发现异常。细胞遗传学研究显示正常二倍体核型,没有发现异常的骨髓增生异常综合征(MDS) /或然数荧光原位杂交(FISH)面板。JAK2p。V617F突变分析下一代测序(上天)和BCR / ABL1定性筛查通过逆转录酶聚合酶链反应(rt - pcr)稀松平常的。40-gene骨髓突变面板中,体细胞突变分析验证使用的是从汤姆斯挥动(离子洪流,ThermoFisher科学™,沃尔瑟姆,马萨诸塞州),进行基因组DNA提取外周血标本。这种试验确定了变异SH2B3(加入NCBI NM_005475.2)外显子6 (p.E395K;c.1183G >;序列相比hg19参考序列)和52%的变异等位基因频率(VAF)。归类为可能的致病因其存在守恒的src同源性2 (SH2)领域,协会SH2B3与或然数变异,最近的数据表明家族的变体在生殖系致病设置红细胞增多(8]。其他建立驱动突变基因与各种或然数有关,包括JAK2(外显子12 - 15),传真照片受体(MPL)和calreticulin (CALR)没有检测到。总的来说,骨髓形态学和immunophenotypic评价不足以建立一个诊断或然数。

图1

(一)红细胞核dyskinesis(骨髓送气音,600 x放大Wright-Giemsa染色)。(b)巨核细胞的核叶(骨髓涂片抽吸,500 x放大;Wright-Giemsa染色)。(c)与焦Hypercellular骨髓巨核细胞集群(核心活检,500 x放大;苏木精和伊红染色)。(d) Hypersegmented嗜中性粒细胞(外周血600 x放大;苏木精和伊红染色)。(e) Hypercellular骨髓micro-megakaryocyte(核心活检、1000 x放大、苏木精和伊红染色)。(f) SH2B3 p.E395K;c 1183 g > A突变被上天所示整合基因组学查看器(进口)(Broad研究所、剑桥MA)。 The blue and red bars represent reverse and forward reads, respectively, and the bars with green As are mutated reads. This image demonstrates the mutation from DNA extracted from the follow-up bone marrow specimen. (g) TheSH2B3c。1183G > A (p.E395K) heterozygous missense variant detected in the targeted sequencing study (RefSeq NM_005475.2) by direct sequence analysis utilizing automated fluorescence dideoxy sequencing. The red arrow and box demonstrate the missense variant region observed in the genomic DNA extracted from the cultured skin fibroblasts.

因为VAF的SH2B3在这个病人的52%,因为有一个人口与这种SH2B3变异频率gnomAD浏览器(Broad研究所、剑桥、MA)的0.015%,认为这可能是一个生殖系变体。因此,同意后,建立了纤维母细胞文化从皮肤活检和DNA提取。目标双脱氧法进行测序分析,检测是一样的SH2B3杂合的错义变异,表明生殖系的起源(图1(g))归类为临床意义不明的变体使用生殖系分类指南。乳腺癌外,没有明显的家族史血液疾病的时候表示和基因分型的家庭成员不能被执行。使用DNA提取患者的皮肤成纤维细胞,一个定制的83 -基因总会在小组进行调查遗传性癌症综合征显示杂合变异体的不确定的意义(基于NCBI ClinVar数据库)外显子22日PDGFRA (c。2989 g > A (p.E997K): NM_006206.4 cDNA参考序列)基因外显子1,VHL (c。25 g > (p.D9N): NM_000551.3 cDNA参考序列)基因。Fanconi贫血筛查染色体破损使用丝裂霉素C或diepoxybutane不起眼的。

病人随后开发增加白细胞增多和频繁的盗汗。重复骨髓活检进行2年以来,显示与dysgranulopoiesis hypercellular骨髓(90%),dysmegakaryopoiesis,和持久的单核细胞增多,符合CMML没有过剩的爆炸(CMML-0;数据1(d)和1(e))。流式细胞术是不起眼的。通过核型分析和细胞遗传学研究鱼面板MDS /或然数包括证明显示正常的结果JAK2,PDGFRA,PDGFRB,FGFR1基因重组。骨髓突变面板进行DNA提取重复骨髓,这证明了SH2B3p。E395K变体VAF 51%(图1(f))。两年过去了,这种变体随后被归类为致病性NCBI数据库ClinVar提交者之一,也在计算机建模PolyPhen和筛选项目可能破坏和有害的。因为这些更新,由于病人的临床进展,“可能致病”的分类维护从原来的突变分析、评估的体细胞突变。确定没有其他体细胞突变的后续分析骨髓。

3所示。讨论

CMML是一种MDS /或然数重叠肿瘤临床、实验室和形态学特征暗示MDS和或然数。各种体细胞突变已报告的频率在CMMLTET2(∼50 - 60%),SRSF2(∼50%),ASXL1(∼40%),SETBP1(∼15%),和RAS途径(∼30%涉及喀斯特,国家管制当局方面,PTPN11,CBL,NF1)是最常见的9]。体细胞突变SH2B3在骨髓肿瘤是罕见的,只有少数情况下的生殖系SH2B3突变迄今已报告在MDS患者/或然数,不同的临床表型基于体细胞共存的司机突变(表1)[10- - - - - -13]。除了或然数,SH2B3突变也相继被发现患有原发性红细胞增多没有明确病因和低于正常的红细胞生成素。

的SH2B3基因编码一个适配器蛋白质、LNK的负调节细胞因子信号通过互动SH2域和磷酸化JAK2、衰减JAK2 / STAT信号。这个负面反馈循环是重要的免疫平衡和调节在生理和病理条件下JAK / STAT通路的激活,如或然数。的SH2B3基因第8外显子,位于染色体12抓起。中有三个功能域LNK包括苯丙氨酸拉链(二聚作用域),Pleckstrin同源性(PH)和Src同源性2监管(SH2)域4]。各种体细胞突变影响了其中任何一个领域迄今为止或然数患者均有描述。到目前为止,遗传突变报告包括p。E208Q和p。分别E400K影响PH值和SH2域。我们病人的突变导致替换的赖氨酸谷氨酸在395位置,替代一个正电氨基酸(赖氨酸,K)带负电荷的氨基酸(Glu, E)。这种变化可能影响SH2域功能。杂合变异体在PDGFRA发现的重要性和VHL基因是不确定的,因为她没有任何个人或家族病史的胃肠道间质瘤PDGFRA遗传突变,肾细胞癌、嗜铬细胞瘤或其他肿瘤中看到冯Hipple-Lindau (VHL病生殖系突变(图)2)。

图2

家庭的谱系图。

CMML患者增加的可能性前慢性炎症和/或自身免疫性疾病史(14]。背后的机械联系还不清楚。突变SH2B3与炎症和自身免疫综合征密切相关,轨迹12抓起被假定与1型糖尿病(15]。之前我们的病人有多发性硬化症的诊断CMML,暗示SH2B3突变可能是与这两个条件。她继续接受治疗和ocrelizumab女士目前在阿司匹林没有任何cytoreductive CMML疗法。

4所示。结论

这种情况下唯一显示异常造血作用的进化历史的多发性硬化症患者和生殖系LNK / SH2B3p。E395K突变,发达进步骨髓形态学变化与CMML细胞增多症的进化。有趣的是,没有其他常见驱动突变被确定在这个病人,至少在40个基因评估捷面板,其中包括所有基因突变在CMML高频。LNK的这份报告还表明,失调/ SH2B3背后可能的原因之一的发病机制观察自身免疫性疾病和CMML联系密切,这需要进一步探索。最后,这种情况表明,罕见变异的分类是困难的,尤其是当体细胞与生殖系变异的性质尚不清楚。如果有任何怀疑的一个变种,通过体细胞突变分析,可能是生殖系突变,进一步讨论关于纤维母细胞文化分析和遗传咨询可以适当设置的血液疾病。

数据可用性

数据分析在当前工作可从相应的作者以合理的要求。

的利益冲突

克里希纳Gundabolu报告收到蓝图咨询费的药品,诺华制药、百时美施贵宝公司,BioMarin制药、爵士乐制药、拜耳、辉瑞制药、研究经费(机构)萨姆丝疗法试验和在杰龙拥有股票。Vijaya R从武田Bhatt说收到咨询费,例如,贴水,Abbvie,伙伴疗法,参宿七,Incyte和卫生伙伴关系的分析研究,LLC(由爵士乐),和研究经费(机构)从爵士,Abbvie,辉瑞公司Incyte Tolero制药有限公司和国家骨髓捐赠计划。药物对审判由Oncoceutics提供支持。Al-Kadhimi扎在Intellia拥有股票,现代化,蓝鸟,太平洋,基诺瓦瓦克斯公司,Regeneron。Rana K撒报告从Genentech咨询费,拜耳,Celgene公司/ BMS,生原体,赛诺菲,诺华和行业资助的研究基因泰克和诺华,并为MedDay制药是一个审判委员会成员。没有其他作者的利益冲突。

作者的贡献

k·G。,A. M. C. V., B. J. D., C. J. A. wrote the manuscript. B. J. D. and A. M. C. V. performed the genetic analysis. V. R. B., L. J. M., Z. S. A., R. K. Z., and J. J. C. revised the manuscript.

补充材料

连续完整的血细胞计数的值提供了有关白细胞微分项,显示随时间的变化,自从她最初的诊断多发性硬化症直到CMML的诊断。(补充材料)

引用

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