文摘
脂肪来自成熟的种子Diploknema butyracea被广泛用作植物油在尼泊尔的农村地区。理化评价本研究目的(酸值、碘值、皂化值、过氧化值、酯值,pH值,和液化点)Diploknema butyracea种子提取物(chyuri脂肪)和2%的配方w / w酮康唑软膏使用它作为一个基地。所有的物理化学参数定量测定使用的方法印度的药典(IP),第一册。融合方法、三种不同配方一F-B, fc和准备,不同比例的chyuri脂肪,聚乙二醇6000 (PEG 600), 80年渐变,丙二醇被用作一个药膏基地。铺展性等各种质量参数,可挤压性、粘度、平滑度、pH值、平均填充重量,测定,含量均匀度,加速稳定性和药物释放资料确定。采用高效液相色谱法测定酮康唑含量的药膏配方。物理化学评估chyuri脂肪确保工业用途的适用性。活性成分释放的配方一(87.71%)、F-B(88.89%),和fc(91.09%) 5小时后在可接受的范围以及其他参数。试验配方的一、F-B和fc据报道是103.01,107.9和102.45%,分别。制定层评价,总体而言,准备利用chyrui脂肪,给了令人满意的结果,大部分的参数统计相似( )F-B和fc配方中加入一定比例的合成基础。因此,可以得出结论,chyuri脂肪可以最好的选择来代替昂贵的合成基础。
1。介绍
Diploknema butyraceaRoxb(家庭:山榄科)是一种中型阔叶树有高约20米的(1,2]。植物原产于喜马拉雅地区广泛分布,尼泊尔、印度和不丹海拔300 - 1500米。它是受欢迎的名字“Chyuri”在尼泊尔,在英语“Indian-butter螺母”,“Chiura”或“Phulwara”在印度1,3]。不同地区的这种植物已经被少数民族使用的尼泊尔和印度主要用于食品和药用目的(4]。汁是准备干树皮治疗消化系统并发症,蠕虫病、哮喘、溃疡、麻风病、和风湿性关节炎(5]。花冠表示要吃新鲜或煮的甜汁获得糖浆(6]。最适用的部分植物的可食用的种子。Chyuri种子含有约55%的脂肪(Chyuri黄油),它用作植物油为风湿病以及按摩油,头痛,痤疮,沸腾7]。chyuri脂肪是一种非常有用的天然润肤剂了脚和手在冬季5,7]。同样,chyuri脂肪已被利用作为油灯的黄油,头发油,和香皂的原料。此外,许多商业组织所做的实验准备许多商业产品,如chyuri糖浆,chyuri南瓜、chyuri果酱,和chyuri奶油8]。
如今,兴趣的研究植物的脂肪和油增加极大的利用他们作为一个媒介,不同药物外用制剂(5,9]。交付的药物通过局部的路线一直被证明是一种很有前途的方法由于皮肤表面积大,易于访问,广泛接触循环系统和淋巴系统,和在自然的治疗9]。在不同局部准备,药膏是半固体的同质配方准备皮肤或粘膜的外部应用程序。药膏通常用作润肤剂或管理活动为预防性药物在皮肤上,治疗,或防护目的和闭塞的某些身体部位是必需的。各种抗真菌药物是商业上可用的形式不同的局部配方如软膏、奶油、粉(10]。
酮康唑是一种有效的广谱抗真菌药物,属于合成咪唑组。它在本质上是亲脂性的,几乎不溶于水11,12]。它的特点是生物药剂学分类系统(BCS) IIb类药物13]。这种药物有显著的治疗效果与系统性和肤浅的霉菌病假丝酵母、细胞和皮肤真菌(10,14]。它能抑制真菌麦角固醇的合成,真菌细胞膜的主要成分,导致细胞死亡。除此之外,它还会干扰真菌磷脂的生物合成,甘油三酯,酶和氧化,增加细胞毒性过氧化氢的浓度。治疗白色念珠菌感染,它可以防止侵入性菌丝的形成胚孔(15]。
尽管局部药物输送系统的需求增加(软膏、奶油、凝胶等),仍然存在许多问题,如化学不稳定性的基础,很多辅料,确保稳定的必要性,高成本的生产合成基础,过敏性皮肤反应的基地。这种可怕的条件要求我们探索自然源越成功。Chyuri脂肪历史悠久的经济和ethnomedicinal重视不同民族在尼泊尔,它一直作为许多商业制剂的主要组件之一化妆品、医药、和肥皂行业(8]。因此,本研究旨在评估物理化学参数和w / w制定2%酮康唑软膏用chyuri脂肪作为药膏基地分析软膏的质量和稳定性。
2。材料和方法
2.1。化学物质
酮康唑粉(干燥失重99.18%纯0.11%)获得了作为礼物的Biogain补救措施,Pvt Ltd .) Rupandehi、尼泊尔。我们也使用四丁铵硫酸盐(SD Fine-Chem有限,孟买),三氯化碘和硫代硫酸钠(费舍尔科学Pvt有限公司、印度),透明膜(义乌Eco-Tondo工艺品有限公司,中国),碘化钾和溴酸钾(默克有限、印度),80年渐变,丙二醇,聚乙二醇600 (PEG 6000),和碘和碘化汞(Qualigens精细化工、印度)。
2.2。工厂收集
健康和成熟的水果Diploknema butyracea收集从Tansen Palpa地区、尼泊尔从海平面(1350米以上),在2019年7月。识别和身份验证的植物进行调查官的帮助下(女士Pratikshya Chalise)国家植物标本和植物实验室Godawari, Lalitpur、尼泊尔(引用不。075/076363)。凭证标本妥善标记,保存在生药学实验室,药房,深红色的技术学院(样品数量:有条件现金转移支付/ HRB / 2019 - 212)。
2.3。提取d . butyracea种子
的果实d . butyracea第一次被分为皮和果肉。种子被手动从纸浆。所有的种子都是手工去皮(图1),延伸在干净的滤纸,保存在通风良好的实验室房间25°C 2周。过滤器的报纸每天都改变了保护可能真菌污染。完全干燥后,种子被磨成粉末的尺寸尽可能小的帮助下一个磨床。粘性粗细粉质量然后用冰冷的三重浸渍法提取200克的干粉末沉浸与1000毫升己烷锥形烧瓶频繁震动1天。溶媒紧张;马克被按下,然后进行过滤。这个过程持续了3倍,所有的滤液收集在一起。滤液干用旋转真空蒸发器在40°C获得厚,粘性脂肪(图2),再次使用真空干燥器干燥。最后,干提取保存在4°C到使用。
2.4。物理化学评估Chyuri脂肪
理化分析采用描述的方法进行印度2018年药典(IP)(16]。
2.4.1。酸值
大约10 g的样本在圆底烧瓶,溶解在50毫升的前面中和95%乙醇和乙醚的混合物(1:1 v / v)。之后,一个回流冷凝器连接与频繁的震动,慢慢加热溶解样品。然后,样品溶液和标准0.1氢氧化钾滴定和端点检测。酚酞溶液作为指标。最后,酸值计算从以下方程: 在哪里n是0.1米的体积氢氧化钾(毫升)和消费吗样品的重量(克)。
2.4.2。碘值
碘值由使用Hanus方法决定。首先,290.4 g的样本放在一个干碘300毫升瓶和氯仿溶解在15毫升。然后,25毫升一溴化碘的解决方案是添加慢慢地从滴定管。样品被保存在一个黑暗的地方和频繁的震动30分钟。之后,10毫升的30% w / v的碘化钾溶液和100毫升的水被添加之后,与标准化0.1硫代硫酸钠滴定用淀粉溶液作为滴定结束期间指标。0.1硫代硫酸盐的体积(mL)消耗被表示为(a)。重复相同的操作是不使用样本,和体积消耗(毫升)和(b)指出。碘值计算通过使用以下方程:
2.4.3。皂化值
大约2 g的样本保存成一个250毫升圆底烧瓶和装有回流冷凝器。之后,25毫升乙醇0.5氢氧化钾及其浮石粉在水浴倒和煮30分钟。样品被允许冷却几分钟。最后,样品溶液对0.5盐酸滴定(HCl)用酚酞作为指示剂。空白滴定样品还没有添加。皂化值是计算从以下方程: 在哪里样品的重量在吗和b和一个在毫升盐酸的体积,分别被空白溶液和样品溶液。
2.4.4。过氧化值
约5克的测试样品转移到一个锥形瓶250毫升玻璃塞,和冰醋酸混合3卷和2体积的氯仿添加逐渐连续震动和0.5毫升的饱和碘化钾溶液添加。同质样品溶液被允许代表1分钟频繁震动。之后,20毫升蒸馏水的投入,对标准化0.01硫代硫酸钠滴定,直到黄色消失了。
此外,0.5毫升的淀粉溶液在水中5% (w / v)添加drop-wise和滴定又持续剧烈的摇晃,直到蓝色就消失了(mL)。空白的决心也没有样本(b mL)。最后,过氧化值计算由以下方程: 在哪里样品的重量在吗 。
2.4.5。酯值
酯值的计算通过使用以下方程:
2.4.6。液化点
样品被装载在一个细毛细管和液化点是由使用数字熔点仪。
2.5。制定的2% w / w酮康唑软膏
三种不同配方(一、F-B和fc)的酮康唑软膏是由融合方法(17]。如表所示1的成分配方来自文献[17),轻微的修改。在这种技术中,所有的组件都融化在一起,减少订单的熔点。首先,种子黄油加热到70°,然后600年挂钩,丙二醇,二层80逐渐被添加。这是冷却后40°C和酮康唑溶解连续声波降解法辅助搅拌30分钟。最后,制定了在铝管每个包含10 g的药膏,封顶。软膏管都是正确地存储在气密袋和袋是存储在一个真空干燥器在黑暗和阴凉的地方,直到使用。
2.6。评估软膏制剂
2.6.1。视觉检查
颜色、气味和其他物理特性被发现的产品外观检查(18]。
2.6.2。铺展性
多余的样品在两玻璃幻灯片(1010厘米)放置和一定的负载(2公斤体重)被放置在板的中心。所需的时间在第二分开两张幻灯片测量确定覆盖性。如果两个幻灯片单独在更短的时间内它表明良好的铺展性的药膏。铺展性计算由以下方程: 在哪里年代铺展性,米是重量放置到上面的幻灯片,l的长度是载玻片,T是时候采取单独的幻灯片(18,19]。
2.6.3。可挤压性
它给的信息所需的力量挤压管药物材料。药物挤压量越高,配方的可挤压性和质量越好。在这项研究中,药物样本填写一个干净的可折叠的铝管有5毫米孔喷嘴。压力是应用于管通过使用一个手指。最后,药膏挤压通过小费的比例是由使用下列方程(19]:
2.6.4。平均填充重量
制定的净重填满容器决心确保产品包含统一和适量的样品标签。对于这个分析,共有10满管,重。之后,每个管的内容都是完全移除,空管的重量。最后,药物在每个样品管的净重计算,平均重量确定(18]。
2.6.5。可洗性
药物的样本分布在皮肤然后从容观察用水洗涤。为此,1 g的药膏擦在人类三个健康的手部肌肤。30分钟后,应用区域与正常的自来水洗(17]。
2.6.6。Nonirritancy测试
在人类皮肤软膏制剂应用观察不良刺激效应(18]。
2.6.7。pH值的确定
药膏的pH值的解决方案是使用数字式pH计测量。大约1 g的药膏是悬浮在100毫升蒸馏水和保存2 h。每个配方的pH值测量三次。
2.6.8。粘度的药膏
每个配方的粘度粘度计测量了DV-III超布氏粘度计。约20克的测试样本放置在干燥和清洁250毫升烧杯。测量是通过主轴没有完成的。64年。厘泊表达的数据单元(cps)。样品是旋转10 rpm 1分钟。温度保持25°C (20.]。
2.6.9。确定活性成分的配方
(1)高效液相色谱条件的优化。活性成分的定量测定每个配方是由使用反相高效液相色谱系统prominence-i lc - 2030(日本岛津公司、日本)。采用分析的色谱条件为酮康唑原料的方法分析2018年(USP) (21]。
(2)方法验证。的有效性的方法用于定量分析证实了酮康唑软膏制剂分析不同参数,即线性、检测极限和量化(钟表和定量限),精密(盘中和interday变异和可重复性),和准确性(复苏)根据我的指导22和之前的研究23- - - - - -25]。
(3)测定酮康唑软膏。分析,内容十随机管子被移除和混合在一起,然后用于高效液相色谱分析。每个配方的分析计算了(21]
sp样,性病是标准,Wsp是样本的重量软膏(2.5 g), Wstd的重量标准药物(50毫克),和LOD干燥失重为标准。
(4)含量均匀度。随机10软膏管被从每个配方和试验的管是由注入高效液相色谱法,以确保均匀混合的样本在每个管,这样每一个药膏管含有酮康唑药物标签数量的活跃。
首款。体外释放活性成分
探讨体外活性成分释放模式新制定的酮康唑软膏,透析方法采用(9,20.]。在这种方法中,每个配方3克放下在玻璃纸(半透膜)。捐献者舱满载着一个药膏样本安全地停在玻璃管的开口端低的内部直径2.5厘米。橡皮筋被用于制造防水。ointment-loaded管是淹没在烧杯装满100毫升的醋酸缓冲的pH值5.5(1%钠十二烷基硫酸促进水槽条件),作为活性成分释放介质或受体隔间。整个系统是电磁搅拌器,定期和活性成分释放介质搅拌用磁珠在50岁rpm保持37±0.5°C的温度恒温水浴。在不同的时间间隔(0.5、1、2、3、4、5个小时),1毫升的解决方案被撤回,并立即替换同样体积的新鲜缓冲区使用微量吸液管。活性组分的数量释放不同的配方是由高效液相色谱方法。
2.6.11。加速稳定性研究
稳定新制定的药膏是我指导的加速条件下进行的。为此,3配方都是存储在一个稳定腔为3个月。稳定腔的条件是40°C±2°C / 75% RH±5% RH (26]。酮康唑试验样品进行了评估,pH值变化,平滑度和颜色改变的第一和第三个月。
2.7。统计分析
所有的实验和数据分析了三次被当作平均数±标准差。统计学意义上的差异是由双向方差分析计算(双向方差分析)和单向方差分析(ANOVA),与图基事后测试使用GraphPad Prism 6.0软件。一个值< 0.05被认为是重要的。
3所示。结果
3.1。理化分析d . butyracea种子提取物(Chyuri脂肪)
chyuri脂肪的不同物理化学性质测定(表”来形容其现状和质量2)。从我们的数据结果与大多数的理化参数相比最常用的植物油(橄榄油)27]。酸值越高表明大量的游离脂肪酸存在于样本和低碘值意味着饱和脂肪酸的比例很高。同样,更高的皂化值,降低过氧化值,和更高的酯值在这个示例指示平均分子量的存在,更少的可降解,可皂化的甘油三酯和更高的数字。
3.2。评估2% w / w酮康唑软膏制剂
3种不同配方的准备之后,他们的品质进行了不同的参数(表3),发现了。所有的公式都是白人和粘性平滑同质一致性。从数据的表3很明显,所有的配方表现出良好的铺展性和可挤压性。同样,所有配方的pH值是人类皮肤的pH值在正常范围内(5.5 7)。方差分析(方差分析)表示,制定C大大较少的铺展性和可挤压性相比,配方B ( )。制定C被发现明显大多数粘性配方中( )。
3.3。确定活性成分在2% w / w酮康唑软膏制剂
3.3.1。色谱条件的优化
2018所描述的色谱条件USP酮康唑活性成分的分析测试为新制定的酮康唑软膏。分析的方法验证了在保证系统适用性和有效性。所有的山峰都检测到225海里。数据3和4分别代表空白的色谱和安慰剂。同样,标准和测试样品的色谱图中描述5。
(一)
(b)
3.3.2。方法验证
色谱系统检查以线性精度、特异性、选择性和准确性确认,最后确定方法的重现性和准确性。回归系数(R2)的标准是1;因此,线性是证实。校准曲线的完整信息,钟表,定量限是总结表4。
确认精度的确定方法,盘中和interday变化一起sextuplates重复性的检查。相对标准偏差(RSD) interday和盘中调查被发现在0.58 - -0.98%和0.11 - -1.68%的范围,分别(表5)。
酮康唑的重复性测试,标准溶液被注入了六次。据报道,RSD为1.41%(表6)。
经济复苏的百分比范围从95.33到104.73%,RSD为-3.48% - 0.34(表的价值7)。
在系统适用性检查,平均国家结核控制规划,平均跟踪演员,并为该地区被发现,91656年,1.072和0.33,分别,这是符合USP标准2018。
3.3.3。酮康唑软膏的测定
在初始和加速稳定性研究中,所有三个配方的活性成分内容被发现在指定的限制(95 - 110%)美国药典2018。活性成分的微小变异被发现在三个不同的配方。如表所示8所有批次,减少活性成分含量显著(一个月后( ),而3个月后,活性成分含量明显下降(没有被观察到 )。此外,活性成分加速稳定后的内容内的所有配方是药典限度。
3.3.4。含量均匀度不同的配方
为了确保活性成分的均匀混合,酮康唑10个人管内容为每个公式计算。如表所示9、酮康唑的内容在每个管被报道在药典限度。
3.3.5。体外释放活性成分
体外活性成分释放评价结果通过透析方法中描述表10。统计分析的活性成分释放百分比(%),我们使用双向方差分析比较配方中活性成分释放模式在不同的时间间隔,所以两个变量因素三种不同配方和不同的时间间隔从0.5 h 5 h。活性成分释放的程度与时间成比例增加。配方的释放模式几乎是类似于F-B和fc。这意味着制定的药膏使用chyuri脂肪只能确保所需的活性成分配方的释放。
4所示。讨论
脂肪的酸值给出了信息的免费短链脂肪酸存在于它。在大多数情况下,它是评价程度的甘油三酯分解的脂肪酶酶活性,光,热(28,29日]。它给一个想法的可食性脂肪。脂肪或油物质的酸值高于4毫克/克被认为是不适合食用过程(30.]。chyuri脂肪的高酸值(61.86毫克KOH / g)表明,它的消费不是对人类健康有益。碘值给未饱和的平均程度的信息。它是用来量化双键的数量的脂肪易受氧化降解[31日]。chyuri脂肪的低碘值(36.26克我2/ 100 g)表示,它包含一个更高比例的饱和脂肪酸。主要脂肪酸存在于chyuri脂肪甲酯形成饱和棕榈酸(66%)、硬脂酸(2.4%)、饱和不饱和亚油酸(26%)、和多不饱和油酸(2.6%),显示稳定的脂肪对脂质过氧化反应(8,32]。脂肪或油样品的碘值低于100克我2/ 100 g适合工业用途33像面包店生产,生产人造黄油,化妆品行业,医药行业34]。任何脂肪或油的低碘值可以确保它的稳定性对氧化和酸败的产品准备(33,34]。
稳定的脂肪可能酸败也验证了过氧化值越低(3.14毫克当量KOH / g),在这项研究中获得的。过氧化值是可能的自氧化的迹象;因此低价值确保它能抵抗过氧化反应在存储的过程中(31日]。同样,皂化值(225.05毫克KOH / g)和酯值(163.19毫克KOH / g) chyuri脂肪的高。皂化和酯值越高表明脂肪包含大部分的短链低分子量可皂化的甘油三酸酯,分别。这种类型的脂肪是适合化妆品和工业用途28,33]。此外,液化点(68°C)的脂肪也保证了其适用性药膏基地(35]。
确认后其化学稳定性使用作为一个药膏基地,2% w / w酮康唑软膏是由融合方法制定和质量评估。身体上,所有的软膏制剂都光滑粘性准备没有任何坚韧不拔和白色。没有观察到皮肤过敏后应用程序和所有的公式都易清洗。同时,小灵通的配方都是在正常人体皮肤的pH值条件(7)5.517]。从单向方差分析(方差分析),很明显,粘度配方C是相当高的( )。同时,配方的粘度高于b公司6000年和80年渐变挂钩的配方C可能最高粘度的因素(17,20.]。配方的高粘度公式B相比,也许是因为chyuri更高比例的脂肪配方A B配方被发现更多extrudible和容易被涂开的比其他配方,这些配方的参数B和C的差异具有统计学意义( )。
体外释放活性成分的研究是一个重要的分析步骤评估活动释放的程度从药用产品矩阵控制的实验室条件在药物开发和质量控制的过程分析(36]。的活性成分释放调查3配方,采用透析法(表进行10),揭示了令人满意的结果。双向方差分析测试用于评估发布的统计显著性模式。发现有增加活性成分释放在每一个小时,是重要的 。5 h后,活性成分释放资料编制C是更重要的比A和b,这可能是由于添加渐变80年和6000年挂钩。配方是由酮康唑(2%)和自然chyuri脂肪(98%)。在制定B,丙二醇(16.66%)作为增溶剂(17)添加除了活性药物(2%)和chyuri脂肪(81.33%)。在配方中C,二层80(16.66%)作为表面活性剂19盯住)和6000(16.66%)作为水的增溶的基地37)也将随着酮康唑(2%)、chyuri基地(48%)和丙二醇(16.66%)。酮康唑释放百分比配方的A、B和C几乎是整个研究相似。虽然比较A和B配方,活性组分的百分比非常B配方略高,这可能是由于合并丙二醇。然而,这些配方(之间没有显著差异 )除了1和2小时( )。尽管配方C的高粘度,活性成分释放状况略好于A和b,这可能是由于添加渐变80年和6000年挂钩。这是因为二层80提高了药物的均匀溶解在车辆(19)和挂钩6000提高渗透的水促进快速释放有效成分(37]。由于其高极性、挂钩发挥重要作用在增加亲水性,从而提高水溶性。因此,它被广泛用于软膏对增溶和渗透37]。层的活性成分释放模式几乎类似于F-B和fc,这意味着药膏用的配方chyuri脂肪只能确保所需的释放活性组分。
确认所有配方中活性成分的均匀混合,随机选择10管从每个配方和酮康唑内容确定。中酮康唑的含量配方A、B和C范围从101.72 - -103.89%,-104.80% - 102.55,分别为-104.92%和102.77。所有的公式都是在法定范围内。制定软膏是追究加速稳定性研究根据我指南长达三个月。加速稳定性研究的结果显示,没有制定遭受明显的物理和化学变化(颜色、相分离、平滑度、pH值)。活性组分的含量,减少配方B /三个月稳定显示显著变化(107.9 - -97.05%)相比,配方(103.01 - -98.55%)和配方C (102.45 -97.7%)。然而,所有配方的试验是在法定限额内(90 - 110%)21加速研究的)3个月后。进一步推进稳定调查,在这项研究的范围之外,必须确定这些配方的保质期。
5。结论
总之,目前的研究工作评估物理化学参数(酸值、碘值、皂化值、过氧化值、酯值,pH值,和液化点)chyuri脂肪和它认为脂肪是强烈推荐的工业、化妆品和医药用途。高酸值建议其不适合食用。此外,药膏配方是由只使用chyrui脂肪层,第一次,给了令人满意的结果相关的物理和化学稳定性。铺展性等各种评价参数,可挤压性、粘度、平均填充重量,有效成分含量,含量均匀度,加速稳定性和活性成分释放概要文件是在可接受的范围之内,几乎类似于F-B和fc合成基地成立。因此,进一步广泛的研究建议,以便chyuri脂肪可以建立一个更好的选择对于其他合成基础及其商业化可能改善当地居民的社会经济地位。
数据可用性
所有的数据用于支持本研究的结果可在r .班达里和j . Pandey要求。
信息披露
这个研究项目的一部分执行部分实现深红色的大学学位,尼泊尔。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
r•班达里和j·Pandey构思和设计实验和分析数据。j . Pandey b·卡纳尔a Pandey, r . j .班达里Bashyal进行实验。j . Pandey写的手稿。p . Aryal j . Pandey掠夺班达里,AA。Mikrani促成了论文修改。j . Pandey和r .班达里同样导致了这项工作。
确认
作者非常感谢深红色技术学院附属博卡拉大学,尼泊尔,所有的技术支持。作者还想记得安穆立特Poudel博士,博士哈里普拉萨德Devkota,达卡Ram班达里博士和Biogain补救措施私人有限,尼泊尔,指导和技术支持。