文摘

这项研究的目的是探讨医疗安全和质量的克罗地亚刺槐蜂蜜,选中的元素在土壤中,多元方法是否可以提供鉴定蜂蜜的起源。这项研究包括200名刺槐蜂蜜样品和100份土壤样本从东,西北克罗地亚伊斯特里亚。金合欢在蜂蜜的比例是由花粉进行分析。水,自由酸、电导率、还原糖、蔗糖、淀粉糖化酵素,羟甲基糠醛测定。没有发现显著差异利用克鲁斯卡尔-沃利斯检验有关物理化学参数( ),蜂蜜的矿物含量( )或土壤的矿物成分( )。没有发现显著相关性分析的元素之间的蜂蜜和土壤。多元方法表明,东克罗地亚蜂蜜样品有更高浓度的水,羟甲基糠醛,和更高浓度的测量元素,除了阿尔。蜂蜜样品从西北克罗地亚的特点是低浓度的元素和更高浓度的蔗糖。伊斯特里亚样本在还原糖富裕,自由酸淀粉糖化酵素,电导率高,较高含量的金合欢花粉粒,低浓度的大多数金属。蜂蜜从西北克罗地亚和伊斯特里亚股Al高浓度的蜂蜜。

1。介绍

蜂蜜已经使用了几个世纪作为天然食品(1]。蜂蜜的成分取决于植物物种、气候条件、环境条件、养蜂实践。主要是由碳水化合物、水、蛋白质、游离氨基酸、酶、维生素、矿物质,还有200左右的化合物(2]。

生蜜植物物种的生物多样性从不同的气候和地理区域的克罗地亚为蜂蜜生产提供了巨大的潜力,洋槐蜂蜜是最常见的一种。因此,确定蜂蜜的地理起源和成分分析技术和参数与统计方法结合使用。物理化学参数蜂蜜可以发酵、糖添加、加热、蜂蜜掺假的尝试,不适当的存储,等等(3,4]。蜂蜜的含水量范围从15%到23% (5- - - - - -7]。蜂蜜放在市场必须没有含水量高于20% (3,4]。允许自由酸值蜂蜜是< 50毫克当量的酸/ 1000克蜂蜜(3]。他们的存在告诉我们是否蜂蜜是老8]。电导率(女士/厘米)是一种物理性质,很大程度上取决于蜂蜜中矿物质的含量和酸(9]。花和蜂蜜混合的导电性需要低于0.8 mS /厘米(3,4]。葡萄糖和果糖的总和或还原糖(g / 100克)在蜂蜜必须至少60克/ 100克(3]。蜂蜜的主要成分是碳水化合物和它们的比例是73% - -83%7,10]。测定蔗糖的含量(≤10 g / 100 g)是重要的确认可能掺假的蜂蜜,喂养蜜蜂糖(蔗糖),或直接在蜂蜜加糖(11]。淀粉酶活性(DN)代表的一个主要参数确定加热蜂蜜的强度在其处理和存储(12,13]。然而,羟甲基糠醛的新鲜渗蜂蜜的比例一般不超过10毫克/公斤(14,15]。

宏观和微观元素,表示为一个百分比的灰,可以在花蜂蜜量高达0.2%。蜂蜜通常包含以下矿物质:钾、钙、钠、镁、氯、磷、铁、锰、等(7]。矿物含量主要取决于植物起源和气候条件,但通常也在蜂蜜植物生长的土壤类型(16]。

通过根系从土壤中矿物运输到蜂蜜,继续花蜜,和从那里蜂蜜;因此,宏观元素的比例,特别是钙、镁、锰、钠,是影响土壤的组成,地球化学和地质条件确定17]。

这项研究的目标和目的是提供医疗安全和质量的审查,花粉的差异分析,物理化学参数和刺槐蜂蜜成分和浓度的十二个元素从三个区域在克罗地亚(东部、西北和伊斯特里亚)。同时,概述差异对相同元素的组成和浓度从土壤中相同的位置。此外,作者试图确定在多大程度上多元统计methods-especially集群和PCA分析可以有预测意义的组成和地理起源蜂蜜。

2。材料和方法

2.1。材料

这项研究包括200个样本的刺槐蜂蜜从养蜂人在2009年和2010年收集的。样品来自克罗地亚三个区域:西北克罗地亚,由样本Varaždin, Krapina-Zagorje Bjelovar-Bilogora县,共有120个样本;样本所代表的东方克罗地亚,Požega-Slavonia, Virovitica-Podravina, Osijek-Baranja, Vukovar-Srijem县,共有40个样品;和伊斯特里亚地区的相同的名称,共有40个样本。此外,100个土壤样本(图1)在同一取样位置(根据GPS点的养蜂场位置),其中有60个样本和20个在克罗地亚东部和西北部伊斯特里亚,分别。

2.2。方法
2.2.1。花粉粒

花粉粒被识别和量化应用显微镜(400 x放大)准备从蜂蜜样品。每种类型的花粉的比例计算花粉总量的百分比。收集参考花粉制剂被用于测定花粉粒的样品根据比较的原则。符合欧盟指令的规定在蜂蜜的质量4出版物[],标准的专家18),和当前的立法在克罗地亚共和国17),标志着植物来源的蜂蜜的需求是普遍的存在花粉。“unifloral蜂蜜”一词是用来形容那些类型的蜂蜜是主要从一个占主导地位的植物物种。Unifloral蜂蜜可以标记基于特定植物类型如果它包含至少45%的花粉粒相同的植物物种,除了一些例外;因此,对于刺槐蜂蜜量是20%(洋槐pseudoacacia l .)(18,19]。

2.2.2。物理化学参数

在物理化学参数,在蜂蜜含水量(%)是由一个方法基于屈光计检查。自由酸样本滴定测定,以便蜂蜜使用0.1米的氢氧化钠溶液pH值8.30。电导率在蜂蜜是定义为20%的水溶液的电导率蜂蜜20°C,其中20%是指蜂蜜的干重。结果表示在女士/厘米。还原糖的测定方法和蔗糖蜜是基于减少费林的解决方案与糖溶液滴定的蜂蜜和以亚甲蓝为指标。蔗糖的比例得到的不同结果反演(之前和之后20.]。在确定蜂蜜淀粉酶活性,使用的方法是基于1%的水解淀粉溶液从1 g的蜂蜜在一小时内的温度40°C。在确定羟甲基糠醛(羟甲基糠醛)蜂蜜使用温克勒方法,羟甲基糠醛的过程是基于反应与巴比妥酸和p-toluidine导致粉红、强度测量的波长550 nm (21,22]。

2.2.3。测定矿物物质蜂蜜

蜂蜜的均质化后,湿化学分解有机质经历在微波炉中使用浓硝酸和过氧化氢装置(Anton洼地,多波3000)。质谱检测蜂蜜中金属的方法是基于电感耦合等离子体(icp)导致电离。离子质谱计是用来探测和识别基于质量/电荷比率(23,24]。

2.2.4。测定土壤中矿物质

土壤采样被定义为一个特定的程序。每个样本来自一个特定的点之前定义的(根据Gauss-Kruger坐标)。样本提取土壤剖面深度0.5米,然后存储在PVC容器。在实验室里,在筛选之前,样本在环境温度和均质干玛瑙机然后渗到2毫米分数。

测定土壤中矿物是由使用样品准备的提取浓缩酸的混合物。样品制备聚四氟乙烯容器中执行了10毫升的浓酸的混合物组成的一个解决方案(HNO HF-hydrofluoric酸,HCl-hydrochloric酸3氮酸和HClO4高氯的酸)。解决方案是蒸发干燥在200°C。然后,残渣与4毫升的50%盐酸溶解,和示例在微波炉加热。冷却后,解决方案注入聚丙烯瓶和填满达到10毫升5%盐酸的体积。制备样品的王水提取:3毫升蒸馏水,7.5毫升盐酸6米和2.5毫升HNO 14米3添加1 g的土样在20°C,反应过夜。之后,样品加热到沸腾了两个小时,和解决方法是冷却和过滤。测定金属含量也进行了使用电感耦合等离子质谱(icp) (23,25]。

2.2.5。统计分析

为了处理和描述数据描述性统计,克鲁斯卡尔-沃利斯检验和多元技术(聚类分析和主成分分析)。数据分析使用统计软件进行了Statistica,版本12。

聚类分析。使用聚类或聚类分析对数据对象进行分类,特点是一组变量的值,进组。两个代表的欧几里得距离的对象可以作为指标相似/不同的研究变量。对象之间的欧几里得距离的方程 在哪里 是变量的数量。

一个凝结的单键法,这项研究的结果发表在系统树图的一种形式。

主成分分析(PCA)。主成分分析可以减少一组包含大量的测量变量数据集包含较少的新变量。这些新变量(主成分,pc)是原始的线性组合。这些线性组合选择代表比例最大可能的变化包含在原始数据中。中给出的结果通常是一种biplots;biplots允许我们调查这一趋势在一个数据表,显示对象和变量之间的关系或对比,最后变量和对象之间的关系。通过减少变量和视觉显示,PCA允许我们观察分析数据矩阵变化的来源。

一般来说, 在哪里 (电脑)和th主要组件 是观察到的变量的加载 (26- - - - - -28]。

3所示。结果与讨论

花粉分析表明,200份分析样本的刺槐蜂蜜,其中199(99.5%)至少有20%比例的金合欢花粉粒;因此,根据立法,它可以被称为unifloral蜂蜜19]。金合欢花粉粒的比例从39.11%在克罗地亚东部,西北部的克罗地亚,42.88%以上在伊斯特里亚和55.20%,平均43.55%,范围从11%(一个样本)到70%(表1)。

确定物理化学参数的结果如表所示2。结果表明,所有的蜂蜜样品根据物理化学参数是安全的,高质量的3]。克鲁斯卡尔-沃利斯检验显示无显著差异的地区关于蜂蜜的物理化学参数( )。

水的内容在我们的研究范围在16.78%和17.01%之间,这是按照立法,允许多达20%。游离酸值允许的蜂蜜是< 50毫克当量的酸/ 1000克蜂蜜。这意味着,在这项研究中,获得的平均值从10.45 - -11.02毫克当量的酸/ 1000 g,范围内。样本平均值的导电性的研究范围从0.15到0.18 mS /厘米,最大的满足一般要求0.8 mS /厘米。在蜂蜜中,葡萄糖和果糖的比例之和或还原糖必须至少60克/ 100克。我们估计的平均值69.33克/ 100克范围68.46 - -70.62克/ 100克。所有测试样品均已符合要求蔗糖(10 g / 100 g的样本),范围从0.49到0.62克/ 100克。一般要求淀粉糖化酵素活动8 DN的价值,而我们的价值观从10.38到13.75不等DN。羟甲基糠醛的比例很低(平均3.56至5.92毫克/公斤),小于10毫克/公斤,一流的蜂蜜的上限(3]。

共有十二个微观和宏观元素刺槐蜂蜜(钾、钙、钠、镁、锌、铝、铁、铜、锰、镍、铅、和Cd)在三个克罗地亚地区检查通过每个宏观和微观元素的百分比(%),以及通过范围和每个宏观和微观元素的平均值毫克/公斤(表中表示3)。蜂蜜中的所有元素的总比例平均为565.55毫克/公斤(从424.04毫克/公斤西北部克罗地亚伊斯特里亚765.55毫克/公斤),这使得平均不到0.06%(表示为一个百分比的灰)和在正常比例的元素在植物的蜂蜜0.2%3]。宏元素(钾、钙、钠、和毫克),因此,占554.64毫克/公斤的平均或所有元素的比例的98.07%。潜在的污染物(Pb和Cd)占微不足道的总平均≤0.06毫克/公斤或≤0.02%的内容。

K的比例从51.23%到70.29%不等 。确定浓度的范围在258.69毫克/公斤360.80毫克/公斤( 毫克/公斤)。Ca测试样本的蜂蜜的比例从14.81%到21.04%不等比其他矿物质。表达的最低浓度的Ca毫克/公斤是74.37毫克/公斤,最高184.39毫克/公斤( 毫克/公斤)。Na的比例在本研究样本测试表示为一个百分比从10.21%降至21.66%。最高的Na平均值为168.86毫克/公斤在克罗地亚,东部和51.62毫克/公斤的最小值被记录在克罗地亚(西北 毫克/公斤)。毫克的样本比例的平均值刺槐蜂蜜在这项研究中从3.67%到4.13%不等 ,而平均浓度范围从16.82毫克/公斤30.68毫克/公斤( 毫克/公斤)。在微量元素中,只有锌平均比例超过1% ( ; 毫克/公斤)和Al ( ; 毫克/公斤)和铁( ; 毫克/公斤)大于0.2%。所有的其他元素的比例介于0.06%测试(铜)和(Cd)≤0.01%。克鲁斯卡尔-沃利斯检验差异不显著区域对12个元素的浓度以蜂蜜样品( )。

共有十二个元素在土壤(钾、钙、钠、镁、锌、铝、铁、铜、锰、镍、铅、和Cd)三个克罗地亚地区进行个体的比例宏观或微观元素,以及元素的范围和平均值毫克/公斤(表中表示4)。土壤中元素的总比例平均为51306 .88点毫克/公斤(范围41205 .11毫克/公斤西北部克罗地亚伊斯特里亚64371 .18毫克/公斤)。克鲁斯卡尔-沃利斯检验差异不显著区域关于十二个金属浓度测量土壤样品( )。

菲最高土壤平均浓度( 毫克/公斤,21355 .23 30842 .30毫克/公斤)和最高的平均比例 相比其他元素。这是紧随其后的是艾尔,浓度范围的10275毫克/公斤至23350 .70毫克/公斤( 毫克/公斤)和28.29% - -36.28%的比例 。Ca的第三位平均浓度4406 .21毫克/公斤,平均比例为8.58%。这是紧随其后的是毫克,平均比例为6.59%,平均3378 .96点毫克/公斤的浓度。还有K,平均浓度为1331 .39点毫克/公斤,平均比例为2.60%,其次是平均约1.18%的锰的比例和平均浓度为606.01毫克/公斤,平均Na的浓度为585.92毫克/公斤,占1.14%。所有其他元素的比例,包括潜在的污染物(Cd和Pb),在0.15%的范围(锌)≤0.01% (Cd)。

5显示的值之间的相关系数矿物质的浓度(钾、钙、钠、镁、锌、铝、铁、铜、锰、镍、铅、和Cd)刺槐蜂蜜和土壤中三个区域的克罗地亚共和国。虽然有很强的正相关关系系数得到12个元素的浓度在某些类型的蜂蜜(例如, Istrian蜂蜜和蜂蜜的西北克罗地亚或 东克罗地亚Istrian蜂蜜和蜂蜜, 之间)以及强烈的正相关性十二个元素的浓度土壤,之间没有显著的相关性被发现蜂蜜中的12个元素的浓度和土壤。

聚类分析化学成分的蜂蜜从克罗地亚共和国的三个区域显示差异的存在东克罗地亚和其他两个区域(图2)。

下一步是主成分分析(PCA)(图3),“证实”的构成的多样性蜂蜜从东克罗地亚相比其他两个地区,主要在更高浓度的所有测试元素除了基地,和更高的价值的水和羟甲基糠醛,花粉比例和较低的值,导电性,自由酸、还原糖、蔗糖、淀粉糖化酵素活动,和艾尔。相比之下,刺槐蜂蜜从西北克罗地亚以更高浓度的蔗糖和低浓度的几乎所有的其他剩余的参数,而蜂蜜从伊斯特里亚被更高的花粉比例值的特点,自由酸,导电性,降低糖和淀粉糖化酵素活动,较低浓度的水、蔗糖、羟甲基糠醛,大多数研究金属。之间的“链接”蜂蜜从西北克罗地亚和伊斯特里亚铝的浓度就越高。

洋槐蜂蜜的研究包括了200个样本三个克罗地亚区域和100个土壤样本相同的位置。我们研究的比例金合欢花粉、物理化学参数和宏观和微观元素蜂蜜和相同的土壤中选定元素以及它们之间的关系给食品安全和质量的概述的洋槐蜂蜜在克罗地亚。此外,通过应用多元统计方法,我们试图做出贡献的组合最优指标的研究状态和质量的蜂蜜和测试,可以对预测影响确定成分和蜂蜜的植物和地理起源。

通过使用花粉分析,发现绝大多数的样本从克罗地亚刺槐蜂蜜的比例(99.5%)至少有20%金合欢的花粉粒(洋槐pseudoacacia l .);因此,根据立法,它可以被称为unifloral蜂蜜3,10]。描述的蜂蜜花粉的比例是已知的欧洲国家,如西班牙、意大利和波兰(29日- - - - - -31日),即使在世界其他地区,如印度(32)、沙特阿拉伯(33],和摩洛哥[34]。有相对较少的研究刺槐蜂蜜在克罗地亚境内(35- - - - - -37),而我们的研究导致了现有知识和数据描述克罗地亚刺槐蜂蜜。

物理化学参数确定的标准的克罗地亚立法和符合欧盟的指示和建议3,4]。中的所有物理化学参数确定允许的值,因此说话的高质量和良好的选择的洋槐蜂蜜克罗地亚市场研究和,当然,良好的养蜂实践。

因此,所有的样品的含水量在20%,和我们的研究结果与其他研究者的结果一致的样品从克罗地亚刺槐蜂蜜(15.40% - -16.30%),罗马尼亚(17.90%)和意大利(17.10%)(36- - - - - -39]。

文献显示不同的自由酸值的样本刺槐蜂蜜。在这项研究中获得的平均值(10.45 - 11.02毫克当量/ 1000 g)低于在斯洛文尼亚(24毫克当量/ 1000 g),类似于克罗地亚的一项研究(10.1 - -10.7毫克当量/ 1000 g)和一项由意大利作家(11.2毫克当量/ 1000克),并适度高于其他克罗地亚研究的结果和一个在罗马尼亚(6.5 - -8.4毫克当量/ 1000克)36,38- - - - - -40]。

导电性的平均价值在本研究的样本,从0.15到0.18 mS / cm符合结果513欧洲刺槐蜂蜜样品(0.16 mS /厘米)和罗马尼亚和克罗地亚研究者的结果(0.11 mS /厘米- 0.22 mS /厘米)(36,37,39,41),但低于平均值的斯洛文尼亚刺槐蜂蜜(0.26 mS /厘米)(40]。

我们发现葡萄糖和果糖的平均金额(还原糖)是69.33克/ 100克,在68.46 - -70.62克/ 100克。在454年进行的欧洲研究水平的样本刺槐蜂蜜,获得的平均值是69.2克/ 100克35]。其他文献来源来自克罗地亚和罗马尼亚也显示匹配这个研究结果(67.4 - -71.5克/ 100克)37,39,42]。

所有测试样品均已符合要求对蔗糖水平从0.49到0.62克/ 100克,这是适度低于从罗马尼亚刺槐蜂蜜样品(1.55克/ 100克)、克罗地亚(从2.4到4.9克/ 100克),和意大利(2.1克/ 100克)37- - - - - -39,41]。

获得的平均值的淀粉糖化酵素活动在我们的研究范围从10.38到13.75 DN和符合欧洲刺槐蜂蜜和前克罗地亚结果(37,38]。

羟甲基糠醛的比例很低(平均3.56 - -5.92毫克/公斤),小于10毫克/公斤。然而,它可以表示,根据这一类别,蜂蜜研究中使用的头等舱。相比之下,Šarićet al .,还研究了样品的克罗地亚刺槐蜂蜜,获得价值更大范围(4.7 - -36.5毫克/公斤)37]。羟甲基糠醛在摩洛哥蜂蜜的比例范围从3.2到52.6毫克/公斤(43]。

共有十二个微观和宏观元素刺槐蜂蜜(钾、钙、钠、镁、锌、铝、铁、铜、锰、镍、铅、和Cd)从三个克罗地亚地区通过检查每个宏观和微观元素的百分比(%),以及通过范围和每个宏观和微观元素的平均值表示在毫克/公斤。蜂蜜中的所有元素的总比例平均为565.55毫克/公斤,这使得平均不到0.06%(表示为灰比例)和在正常比例的元素在植物的蜂蜜0.2%3]。宏元素(钾、钙、钠、和毫克),因此,占554.64毫克/公斤的平均或98.07%的所有元素。潜在的污染物(Pb和Cd)占微不足道的总平均≤0.06毫克/公斤或≤0.02%。正如预期的那样,K的最大比例及其比例从51.23%到70.29%不等 。确定浓度的范围在258.69毫克/公斤360.80毫克/公斤( 毫克/公斤)。随后Ca平均比例为19.67%,然后通过钠16.95%,以3.89%毫克。我们的结果与矿物组成研究的结果相一致的斯洛文尼亚,罗马尼亚的蜂蜜39,40]。克鲁斯卡尔-沃利斯检验差异不显著区域对12个元素的浓度测量的蜂蜜样品( )。

虽然蜂蜜的矿物质不代表对量(平均0.1花蜂蜜-0.2%或更少),蜂蜜含有大量的矿物质的一些非常重要的人体的正常运转。最常见的是K,通常使总数的25% - -50%比例的矿物质。更多的时候,是很常见的Na, Ca, P (10.58)。因此,在克罗地亚和欧洲的法规值prescribed-they允许的最大比例灰花蜂蜜为0.6% (43]。这些值规定因为灰比例的增加可以用糖糖浆蜂蜜掺假的标志(44]。只需要指出,《条例》关于最高水平的某些食品中污染物在克罗地亚开出最高水平可能存在某些污染物在某些食物,包括重金属和非金属矿物;然而,Pb和Cd或其他污染物的最大允许含量的蜂蜜不规定的3,4]。

除了蜂蜜,相同的十二个元素测定土壤中(钾、钙、钠、镁、锌、铝、铁、铜、锰、镍、铅、和Cd),从养蜂场采样地点的蜂蜜样品被研究。的总比例的所有元素在土壤平均51306 .88点毫克/公斤(范围41205 .11毫克/公斤西北部克罗地亚伊斯特里亚64371 .18毫克/公斤)。克鲁斯卡尔-沃利斯检验差异不显著区域关于十二个金属的浓度测量土壤样品( )。

的顺序如下:铁土壤中的平均比例最高 ;随后阿尔平均比例为30.92%;Ca是第三位的8.58%;然后按照以下元素:Mg的平均比例为6.59%;然后K,平均比例的2.60%;然后Mn约1.18%;和Na近似比例的1.14%。所有其他元素的比例,包括潜在的污染物(Cd和Pb),介于0.15%(锌)和≤0.01% (Cd)。这些结果,有些异常,或多或少符合地质调查所进行的研究的结果,当创建克罗地亚的地质图集,显然地球化学和地质指定45]。一般来说,可以说,准备和分析土壤样品的矿物成分的贡献明显正确的程序进行抽样。此外,结果显示一个良好的环境条件(在这种情况下它的组成,土壤)在地方蜜蜂饲养在克罗地亚共和国。

认为,正如已经指出的那样,在蜂蜜的矿物质比例很大程度上取决于其植物来源,但也在气候条件,土壤蜂蜜的植物成分的增长(16]。此外,它也是相信的土壤特征组成一个特定区域中可以看到蜂蜜植物或矿物组成的矿物成分的花蜜和花粉(46]。然而,在我们的研究中我们还没有证实上述自无显著相关性蜂蜜中的12个元素的浓度和土壤被发现。缺乏相关当然应该指出,蜂蜜中的元素浓度并不依赖于它们的浓度土壤中,这可能揭示理论关于土壤中矿物质的浓度之间的联系和蜂蜜,应该在未来研究。

多变量分析(集群和PCA)化学成分的洋槐蜂蜜从三个克罗地亚地区惊人的显示良好的分离特征的蜂蜜在个人克罗地亚地区。首先,集群分析显示分离蜂蜜在克罗地亚东部的特点与其他两个地区。之后,PCA分析证实了蜂蜜的成分的多样性从东克罗地亚大多数元素含量更高的(除了Al),更高的水和羟甲基糠醛,值和较低的值的比例花粉、导电性,自由酸、还原糖、蔗糖、淀粉糖化酵素活动,和艾尔。相反,刺槐蜂蜜从西北克罗地亚一直以较高的蔗糖浓度和低浓度的几乎所有的其他剩余的参数,而蜂蜜从伊斯特里亚的特点是高值的比例花粉,自由酸,导电性,降低糖和淀粉糖化酵素活动,和低浓度的水、蔗糖、羟甲基糠醛,和大多数金属检查。之间的“链接”从西北克罗地亚和蜂蜜,从伊斯特里亚铝的浓度就越高。

4所示。结论

总之,我们可以说,通过分析花粉、理化参数,和矿物成分的洋槐蜂蜜从三个克罗地亚地区和土壤的矿物成分来自同一个地方,我们提出高质量的蜂蜜和蜂蜜的矿物成分之间缺乏相关性和土壤。利用多元统计方法,我们可能已经做了一个贡献努力的优化分析和统计方法可以预测意义的植物和地理成分蜂蜜。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。