遗传不稳定性之间的关联幽门螺杆菌感染胃上皮不典型增生

摘要

背景。在胃癌发生，DNA的甲基化的变化似乎是早期分子事件，和全基因组的甲基化状态与长散布核苷酸元件-1（LINE-1）甲基化水平密切相关。在这项研究中，我们根据遗传不稳定性测量LINE-1的甲基化水平和评估的效果幽门螺杆菌胃上皮异型增生的遗传不稳定性感染。方法。共分析100例胃上皮异常增生组织标本。7个与肿瘤抑制基因相关的基因座被用来鉴定显著的结构性染色体畸变。对两个不同微卫星标记位点(BAT25和BAT26)的微卫星状态进行了研究。同时，我们用联合亚硫酸氢盐限制性分析(COBRA-LINE-1)方法测定了LINE-1甲基化水平。结果。染色体/微卫星不稳定性和LINE-1甲基化水平无显著差异幽门螺旋杆菌州。在不典型增生病变幽门螺旋杆菌感染，LINE-1 MSI病变的甲基化水平比微稳定的被显著降低（MSS）病变（与％，)。结论。在胃上皮发育不良幽门螺旋杆菌感染，MSI与减少LINE-1的甲基化水平相关。共存幽门螺旋杆菌感染和MSI可能是胃癌发生的一个动力。

1.介绍

在过去的十年流行病学研究之间建立了很强的因果关系幽门螺杆菌（幽门螺旋杆菌）感染与胃癌，而这种细菌已被列为由世界卫生组织（WHO）[I组致癌物1-3]。此前，科雷亚建议胃癌的人体模型，他推测，胃癌的发展从慢性胃炎胃萎缩，肠上皮化生，不典型增生，最后浸润癌[开始4]。幽门螺旋杆菌在胃上皮和诱导细胞凋亡感染刺激细胞增殖。它导致细胞凋亡与增殖之间的不平衡并产生基因的改变或突变[五，6]。最终，它会增加患胃癌的风险。从这一点上看，根治之术幽门螺旋杆菌将是一个有吸引力的治疗方法，但它不能阻止胃癌的发展，所有的患者[7，8]。研究人员还需要进一步阐明如何幽门螺旋杆菌感染增加胃癌的风险。

在癌细胞，异常的DNA甲基的特征在于双向变化区域的CpG岛甲基化与基因组广义低甲基化。这两种变化，同时观察到，但是这两个变化都没有倒数。他们可能是独立的事件[9]。一些研究表明，全基因组的低甲基化通常发生得较早，而高甲基化发生在启动子中，通常发生得较晚。因此，全球DNA低甲基化被认为是癌症的标志，因为容易发生异常高甲基化的基因通常与低甲基化靶向的基因重叠[10-12]。在胃癌，全球DNA低甲基化经常在癌发生的非常早的阶段观察到13，14]。LINE（长散布核苷酸元件）-1，高度重复的穿插人类反转录转座子，是普遍存在的，并且构成了人类基因组的大约17％。LINE-1甲基化水平反映了全基因组的甲基化水平，并且降低的水平是负责DNA甲基化的整体损失。此外，它意味着特定基因的甲基化区域。在胃癌发生，LINE-1的甲基化降低从慢性胃炎胃癌阶段，不管的状态的电平幽门螺旋杆菌感染(15-18]。

在这项研究中，我们根据染色体/微卫星不稳定性测量LINE-1甲基化水平和幽门螺旋杆菌胃癌癌前病变状态。我们的目标是阐明机制如何幽门螺旋杆菌感染触发了胃前恶性病变向真胃癌的发展。

2。材料和方法

所有的组织通过治疗镜下黏膜切除术切除。组织样品的诊断是通过根据修正后的维也纳分类两种不同的组织病理学家确认;当他们不同意，组织样品被排除在研究之外。All normal tissues had grossly intact mucosa and were at least 1 cm from the mucosal lesion; they were obtained by gastric biopsy just after an endoscopic mucosal resection. The幽门螺旋杆菌根据组织学结果（银染或CLO试验）状态进行评价。在本研究中，两个活检4周内窥镜切除术用于评估后从胃窦和语料库采取两幽门螺旋杆菌感染。

2.1。杂合性缺失(LOH)的DNA提取和评估

从发育不良/癌症和正常组织四微米厚的组织切片置于载玻片上并用苏木精和曙红染色。组织样品的诊断是由两个不同的组织病理学家确认。之前DNA提取，所有的肿瘤位点检查肿瘤细胞内容≥70使用立体显微镜一个×40放大倍率下％。为了deparaffinize，我们利用在二甲苯和醇的标准系列洗涤。使用30号针头和一个尖外科刀片，病理学家同时期待通过显微镜进行显微解剖。组织碎片沉积到所述收集管。

如先前所描述的LOH进行了分析[19，20.]。通过标准方法提取DNA后，七基因座与肿瘤抑制基因来鉴定显著结构性染色体畸变。的DNA，通过PCR在基因座链接到腺瘤性结肠息肉病（APC）位点在5q21（D5S505），可能的肿瘤抑制/衰老基因座扩增在10p15（D10S501和D10S602），在17p13（TP53）的p53的基因座中，BRCA1在17q21上（D17S855）位点，和在18q21的DCC基因座（D18S58和D18S61）。

In brief, 4 mL 30% acrylamide (29 : 1) solution, 2.4 mL 5 × TBE solution, 5.6 mL ddH2O, 200 μ微升10％过硫酸铵，和10 μ大号TEMED得到充分混合，倾入凝胶中，然后浇注混凝土在室温下1小时。十 μPCR产物和2 L的 μL of loading buffer (95% formamide, 10 mM NaOH, 0.1% bromophenol blue, 0.1% xylene cyanol) were mixed. The mixture was centrifuged for 15 seconds, denatured at 93°C for 3 minutes, bathed in ice for 10 minutes, placed onto a 10% nondenaturation polyacrylamide gel, and separated with 0.5 × TBE buffer for 2 hours at RT and 100 V.

电泳后，使用Bio-Rad银染色试剂盒(Bio-Rad, Philadelphia, PA, USA)对凝胶进行染色。凝胶用40%甲醇固定30分钟，氧化5分钟，冲洗5分钟3次，银染20分钟，冲洗30秒，显影1分钟3次，5%醋酸停止15分钟。用凝胶DocXR (Bio-Rad)分析染色结果。当肿瘤等位基因显示相对强度至少增加或减少50%时，进行杂合性(LOH)损失评估(图)1)。

2.2。微卫星不稳定性的评估（MSI）

DNA样品用两种不同的寡核苷酸对特异于推荐的微卫星基因座和BAT25 BAT26扩增。引物序列（集成DNA技术，爱荷华州，USA）分别为：BAT25（前进59 TCGCCTCCAAGAATGTAA GT-39和反向59 TCTGCATTTTAACTATGGCTC-39），和BAT26（前进59 TGACTACTTTTGACTTCAGCC-39和反向59 ACCATTCAACATTTTTAACCC-39）。如先前所述进行PCR反应。PCR products were run on 8% denaturing polyacrylamide gels at 180 V for 18 hours, and visualized by silver staining (Figure1)。

2.3。LINE-1甲基化状态的评估

使用经修饰的长散布核苷酸元件-组合亚硫酸氢盐限制性分析（COBRA LINE-1）的方法来分析的癌症的LINE-1的甲基化状态〔17，21，22]。该方法基于的原理是，在胞嘧啶的DNA被转化为尿嘧啶当DNA与亚硫酸氢钠处理，而甲基化胞嘧啶从转换保护。因此，甲基化和非甲基化胞嘧啶可以通过消化用识别含CpG序列的限制酶区分开来。所提取的DNA用亚硫酸氢钠处理，使用EZ DNA甲基化试剂盒（ZYMO RESEARCH，橙，CA，USA）分离。亚硫酸氢盐处理的DNA进行PCR 40个循环的扩增两个引物，第3行（5V-GYGTAAGGGGTTAGGGAGTTTTT）和LINE 4（5V-AACRTAAAACCCTCCRAACCAAATATAAA），在50℃的退火温度。将PCR产物用限制性内的TaqI酶，其在65℃下识别TCGA，消化1小时，然后通过电泳在2％的分离的琼脂糖凝胶。消化和未消化的条带的密度通过扫描用Gel Doc凝胶XR（Bio-Rad公司，费城，USA）和得分与获得量的一种软件(美国费城Bio-Rad)。来自甲基化DNA的已消化片段(80 bp)除以来自未甲基化DNA的已消化片段和未消化片段(160 bp)之和，表示TaqI线位点的部分甲基化(以百分比表示)(图)2)。

2.4。统计分析

对于定量变量的平均值和标准偏差计算。用于定性变量，百分比和其95％置信区间（95％CI）进行了计算。我们使用χ²测试分析两者之间的联系幽门螺旋杆菌状态和其它基线特征。对于年龄比较和LINE-1甲基化水平，我们采用独立样本Ť测试。我们使用SPSS统计软件包（12.0.1版本）的所有分析。

3.结果

总计100个组织样本（61人，平均年龄年份;39名女性，平均年龄岁）进行了研究和分析。当胃上皮发育不良（GED）根据修正后的维也纳分类划分，50个组织呈低档（3类）和50是高度不典型增生或内癌（4类）。GED总数54个组织样本已关联幽门螺旋杆菌感染。

3.1。LOH在胃上皮不典型增生

LOH的发生率在GED 83％（83/100），和LOH的频率分别为34％对APC（D5S505），上10便士（D10S501）40％，10便士上（D10S602）48％，对p53的14％（TP 53），在BRCA1 40％（D17S855），在DCC（D18S58 51％），并在DCC（D18S61 45％），分别。根据染色体缺失的先前所描述的分类，GED分为负（LOH阴性），低电平（LOH-L; 3点或更少的损失）和高级别（LOH-H; 4点或更多的损失）。LOH-L的发生率为47％（47/100），而LOH-H为36％（100分之36）。LOH的与频率幽门螺旋杆菌loh阴性、LOH-L和LOH-H病变的感染率分别为76.5%(13/17)、48.9%(23/47)和50.0%(18/36)。两者之间无显著差异幽门螺旋杆菌感染及缺氧情况()。病变LOH阴性的LINE-1甲基化水平不从LOH阳性的显著不同。此外，LINE-1病变LOH-L的甲基化程度不会从LOH-H的显著不同（表1)。在与病变幽门螺旋杆菌感染，LINE-1 LOH-L的甲基化程度不会从LOH-H的不同（图2)。

3.2。MSI在胃上皮不典型增生

微卫星不稳定性（MSI）的频率为36％（100分之36），以及用于和BAT25不稳定BAT26率分别为19％和29％。的BAT25与频率（+）幽门螺旋杆菌感染为11％，和BAT26（+）与幽门螺旋杆菌感染为22％。

MSI的LINE-1的甲基化水平是不从微稳定（MSS）病变（表显著不同1)。MSI与频率幽门螺旋杆菌感染61.1%(22/36)，与MSS病变50.0%(32/64)无显著差异()。在与GED幽门螺旋杆菌感染，LINE-1 MSI病变的甲基化水平比微稳定的被显著降低（MSS）病变（，，）（图3)。

3.3。胃黏膜不典型增生Subgrouped通过经修订的维也纳分类

低度异型增生（3类）和高度异型增生/内癌（第4类）：根据修正后的维也纳分类的组织样品分为两组。26例有3类GED和28例患者的4类GED已关联幽门螺旋杆菌感染()。第4类病灶的LINE-1甲基化水平低于第3类病灶(与％， 分别，)。对于类别3和4，在LOH-H的频率差异不显著（30.0％，相对于15/50 42.0％，21/50;)。MSI阳性的频率分别在类别30％和42.0％（51分之22）3和4（表2)。第3类的病变，LINE-1 MSI的甲基化水平比MSS的显著降低（与％， 分别，）（图4)。

4.讨论

人们普遍认为胃癌是通过影响癌基因和抑癌基因的遗传或表观改变的积累而发生的。这些改变涉及控制遗传不稳定性的机制。遗传不稳定分为两类，染色体不稳定(CIN)和微卫星不稳定(MSI)，以及不稳定是否在病变的染色体或核苷酸水平[23，24]。CIN被认为是散发性胃癌最常见的特征，高达84%的胃肠道肿瘤中有CIN表型的报道[25，这与我们的结果是一致的。CIN的结果是染色体数目的不平衡和杂合性(LOH)损失率的增加。LOH速率的增加是CIN的一个重要特性，因为它加速了肿瘤抑制基因的失活[26]。在结肠癌模型中，CIN是在肿瘤起始和进展中的重要事件，和LOH和MSI负相关[27]。然而，在胃癌，这些都不是相互的。在本研究中，CIN和MSI正好在胃黏膜不典型增生的24％，而在缺少4％，在选择CIN和MSI的证据。在后一种情况下，它可以与由外遗传改变的基因的转录沉默相关联。

假定持续感染幽门螺旋杆菌发起慢性炎症，其诱导增加组织周转，增加的诱变的速率，和遗传不稳定性。然而，一些研究人员建议，幽门螺旋杆菌对诱发结构性染色体畸变和诱发胃癌没有直接作用[28，29]。在本研究中，没有LINE-1的甲基化水平差异，不论幽门螺旋杆菌感染和染色体不稳定程度(loh -阴性，LOH-L，和LOH-H)。似乎不太可能幽门螺旋杆菌担任染色体不稳定的直接诱导剂。但是，我们不能排除某些情况下均为阴性的可能性幽门螺旋杆菌在胃粘膜异型增生的诊断的时间，但遭受了幽门螺旋杆菌感染之前。的效果的低估幽门螺旋杆菌对染色体不稳定性在这项研究可能存在。

MSI是一种具有后分裂DNA错配修复系统缺陷的人类癌症的分子表型。幽门螺旋杆菌可能通过影响DNA错配修复系统而导致MSI表型，至少部分促进了胃癌的发展[30.，31]。已知的是，MSI在胃癌的频率为25％和50％之间。25]。MSI阳性胃癌已经报道位于远端胃和肠型组织学和有利的临床特征相关[32]。尽管联想与幽门螺旋杆菌和MSI，出现了根据微状态或无LINE-1的甲基化水平的差异幽门螺旋杆菌在我们的结果感染状态。然而，在胃上皮发育不良幽门螺旋杆菌感染，MSI有LINE-1的甲基化水平降低的倾向。它建议幽门螺旋杆菌可能作为胃癌发生的辅助因子。

为了识别MSI，提出了五个合适的标记，包括BAT25、BAT26、D2S123、D17S250和D5S346 [33]。然而，我们在本研究中只使用了两个单形单核苷酸(BAT25和BAT26)。虽然msi阳性的频率与之前的研究相当相似[25]，潜在的陷阱定义MSI存在，因为在人类基因组中一个庞大的数字和微区的多样性。然而，以往的研究表明，和BAT25是BAT26微卫星不稳定性检测更灵敏，更标记比他们的同行二核苷酸[34，35]。这些标记被认为是在检测肿瘤的MSI敏感，并且可以甚至在不存在正常组织是可测试的。

胃低度不典型增生可发展成侵袭性形式，但它的所有情况下不转换为晚期癌症。据报道，约15％-30的低度不典型增生进展到高度不典型增生或腺癌[％36-38]。迄今为止，这是毫无疑问的是幽门螺旋杆菌感染是胃癌发生的主要危险因素。奇怪的问题是，哪个因素决定了胃上皮病变的进展。是否幽门螺旋杆菌感染可以向低度异型增生的进展是有争议的，以及是否根除幽门螺旋杆菌感染会降低胃癌的危险性也有争议。在这个角度来看，我们的结果是非常有希望的。它支持真胃癌胃黏膜不典型增生的进展后可以被阻止幽门螺旋杆菌根除在选定的情况下- msi阳性状态。

总之，MSI阳性胃上皮发育不良幽门螺旋杆菌感染与减少LINE-1的甲基化水平相关。共存幽门螺旋杆菌感染和MSI可能是胃癌发生的一个动力。为了澄清这些结果，研究者将进行前瞻性，随机，和以人群为基础的研究，以确定是否幽门螺旋杆菌根除可降低胃癌的发生率。

参考

1. N.植村，S.冈本，S. Yamamoto等人。，“幽门螺杆菌感染与胃癌的发展"《新英格兰医学杂志卷。345，没有。11，第784-789，2001。查看在：谷歌学术
2. Jr. R. M. Peek和J. E. Crabtree，”幽门螺杆菌和胃瘤”该病理学杂志卷。208，没有。2，第233-248，2006年。查看在：谷歌学术
3. H.穆勒，E.赫塞尔廷和H. Vainio，“关于血吸虫，肝吸虫和工作组报告幽门螺杆菌”国际癌症杂志第60卷，no。1995, 587-589页。查看在：出版商的网站|谷歌学术
4. P.科雷亚和J.霍顿，“癌变幽门螺杆菌”消化内科第133卷，no。2007年，第659-672页。查看在：出版商的网站|谷歌学术
5. J. F. R.克尔，C. M. Winterford，和B. V.哈蒙，“细胞凋亡：其在癌症和癌症治疗意义，”癌症卷。73，没有。8，第二〇一三年至2026年，1994。查看在：谷歌学术
6. P.霍夫曼，B. Waidner，V.霍夫曼，S. Bereswill，P.布雷斯特，和M. KIST，“发病机制幽门螺杆菌感染，”幽门螺杆菌，第9卷，补编1，第2期。1, 2004年第15-22页。查看在：出版商的网站|谷歌学术
7. 黄斌昌、林南光、黄文明等，"幽门螺杆菌消灭，以防止中国的高风险地区胃癌的随机对照试验，”美国医学协会杂志，第291卷，no。2，第187-194页，2004。查看在：谷歌学术
8. K.马贝，M.高桥，H.大泉等人，“不幽门螺杆菌消化性溃疡根除治疗预防胃癌？”世界胃肠病学杂志卷。15，没有。34，第4290-4297，2009。查看在：出版商的网站|谷歌学术
9. 与癌症相关的DNA低甲基化及其与高甲基化的关系，目前在微生物学和免疫学主题卷。310，第251-254，2006年。查看在：谷歌学术
10. N.吉尔伯特，A. J.杜塞，和A. Bucheton，“不稳定与人类LINE-1逆转录转座相关联，”《兴业生物学杂志》，第198卷，第2期。2004年第419-424页。查看在：谷歌学术
11. Cho n.y.， B. H. Kim, M. Choi等，“前列腺癌中CpG岛基因的高甲基化和LINE-1和Alu重复的低甲基化及其与临床病理特征的关系”，病理学杂志卷。211，没有。3，第269-277，2007。查看在：出版商的网站|谷歌学术
12. A. P. Feinberg, R. Ohlsson, S. Henikoff，《人类癌症的表观祖起源》，自然遗传学评论第7卷，no。1，第21-33，2006年。查看在：出版商的网站|谷歌学术
13. J. Y. Fang和S. D.萧，“在胃肠致癌DNA甲基化的改变，”胃肠病学和肝病杂志第16卷，no。9，第960-968，2001。查看在：出版商的网站|谷歌学术
14. G. H.康，Y. H.垫片，H. Y.荣格，W. H.金，J. Y. ro和M. G. Rhyu“在胃癌的癌前阶段CpG岛甲基化，”癌症研究卷。61，没有。7，第2847-2851，2001。查看在：谷歌学术
15. A. C. Ferrasi，N. A.皮涅罗，S. H. B. Rabenhorst酒店等人，“幽门螺杆菌和胃癌中的EBV:甲基化状态和微卫星不稳定性，"世界胃肠病学杂志第16卷，no。3，第312-319页，2010年。查看在：出版商的网站|谷歌学术
16. E.山本，M.丰田，H. Suzuki等人，“LINE-1低甲基化与增加的CpG岛甲基化相关联的幽门螺杆菌相关enlarged-fold胃炎”,癌症流行病学生物标记和预防卷。17，没有。10，第2555至2564年，2008年。查看在：出版商的网站|谷歌学术
17. 王志伟，“正常组织中LINE-1甲基化水平的特殊模式及其与癌变的关系”。癌基因卷。23，没有。54，第8841-8846，2004年。查看在：出版商的网站|谷歌学术
18. “CpG岛高甲基化与重复DNA低甲基化在胃癌癌前期的比较”幽门螺杆菌感染，”病理学杂志第219卷，no。4，第410-416页，2009。查看在：出版商的网站|谷歌学术
19. T.桧山，S.田中，M. Yoshihara等人，“染色体和散发性胃癌微卫星不稳定性，”胃肠病学和肝病杂志卷。19，没有。7，第756-760，2004。查看在：出版商的网站|谷歌学术
20. S.山冈，H.山本，K. Nosho等人，“基因，并用JC病毒T-抗原胃癌的后生特性，”世界胃肠病学杂志卷。15，没有。44，第5579-5585，2009。查看在：出版商的网站|谷歌学术
21. 熊z, P. W. Laird，“COBRA:一种敏感和定量的DNA甲基化试验”，核酸的研究第25卷，no。12, 2532-2534页，1997年。查看在：出版商的网站|谷歌学术
22. A. S. Yang, M. R. Estecio, K. Doshi, Y. Kondo, E. H. Tajara，和J. P. Issa，“使用重复DNA元素的亚硫酸氢盐PCR估计全球DNA甲基化的简单方法，”核酸的研究卷。32，没有。3，P。E38，2004年。查看在：谷歌学术
23. E.田原，“胃癌发生的分子机制”，癌症研究和临床肿瘤学卷。119，没有。5，第265-272，1993。查看在：出版商的网站|谷歌学术
24. L. A.勒布，“微卫星不稳定性：在癌症的突变表型的标志，”癌症研究第54卷，no。19，第5059-5063页，1994。查看在：谷歌学术
25. L. Ottini，M.法尔凯蒂，R.鹿皮等人，“在胃癌基因组不稳定性的模式：临床意义和观点，”。肿瘤学年报卷。17，补充7，第vii97-vii102，2006年。查看在：出版商的网站|谷歌学术
26. T.菅，W. Habano，Y. F.焦，铃木M.，A. Takagane和S. I.中村“与DNA二倍体，非整倍体和胃癌中多倍相关联的遗传改变的分析，”肿瘤学卷。68，没有。4-6，第548-557，2005。查看在：出版商的网站|谷歌学术
27. C. Lengauer，K. W. Kinzler和B.沃格尔斯坦，“在大肠癌遗传不稳定性，”自然卷。386，没有。6625，第623-627，1997。查看在：出版商的网站|谷歌学术
28. E.田原，“两型胃癌的遗传途径，”国际癌症研究机构科学出版物没有。157，第327-349，2004。查看在：谷歌学术
29. “胃黏膜结构染色体畸变的差异分析”幽门螺旋杆菌阳性和阴性胃癌患者：参与幽门螺旋杆菌在胃癌和在胃癌发生机制的研究开始之后幽门螺旋杆菌根除”肿瘤报告第16卷，no。6，第1333至1342年，2006年。查看在：谷歌学术
30. J. Jiricny，“多方面的不匹配修复系统”，《自然》评论分子细胞生物学第7卷，no。5，第335-346页，2006。查看在：出版商的网站|谷歌学术
31. J. J.金，H.涛E. Carloni，W. K.梁，D. Y.格雷厄姆和A. R.塞普尔韦达，“幽门螺杆菌破坏胃上皮细胞DNA错配修复。消化内科卷。123，没有。2，第542-553，2002。查看在：出版商的网站|谷歌学术
32. H.金，J. Y.一种，S. H. NOH，S. K.信，Y. C. Lee和H.金，“高微卫星不稳定性预测在肠型胃癌预后良好，”胃肠病学和肝病杂志第26卷，no。3，第585-592页，2011。查看在：出版商的网站|谷歌学术
33. C. R.博兰，S. N.锡伯杜，S. R. Hamilton等人，“关于用于癌症检测和家族倾向微卫星不稳定性甲国家癌症研究所车间：用于在结肠直肠癌微卫星不稳定性的判定标准国际发展”。癌症研究卷。58，没有。22，第5248-5257，1998。查看在：谷歌学术
34. T.渡边，T. Kobunai，E. Toda等人，“用微卫星不稳定性（MSI）远端结肠直肠癌显示从近端MSI癌症不同的独特的基因表达谱，”癌症研究第66卷，no。20, 9804-9808页，2006。查看在：出版商的网站|谷歌学术
35. R. M. Xicola, X. Llor, E. Pons等人，“不同微卫星标记板检测错配修复缺陷结直肠肿瘤的性能”，国家癌症研究所卷。99，没有。3，第244-252，2007。查看在：出版商的网站|谷歌学术
36. G. Y. Lauwers和R. H.里德尔，“胃上皮异常增生”肠道卷。45，没有。5，第784-790，1999。查看在：谷歌学术
37. “与胃腺瘤相关的差异基因表达谱”，中华民国医学研究所硕士论文。英国癌症杂志第90卷第1期1, 2004年第216-223页。查看在：出版商的网站|谷歌学术
38. Park s.y.， Jeon s.w.， M. K. Jung等，“胃上皮内肿瘤的长期随访研究:从低级别异常增生到浸润性癌的进展”，欧洲胃肠病学和肝病学杂志卷。20，没有。10，第966-970，2008。查看在：出版商的网站|谷歌学术

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