踝骨基数通过高机动有助于抑制肝纤维化组框1-Mediated炎性信号通路

文摘

踝骨基数(AR)的干燥根踝骨基数membranaceus(费)。知母。或踝骨基数membranaceus(费)。知母。var. mongholicus萧(知母),是一种常用的中药治疗肝脏疾病。本研究旨在全面评估药理作用的潜在机制,探索基于“增大化现实”技术在肝纤维化。老鼠注射四氯化碳为8周,紧随其后的是口服治疗AR了六个星期。证实了有效性测量肝功能和肝纤维化水平。底层机制探讨了通过检测相关蛋白的表达。AR水平显著降低血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胶原IV (COL-IV)、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)和precollagen类型III (PCIII)。此外,基于“增大化现实”技术抑制胶原的沉积和肝星状细胞的激活。这些数据CCl强烈表明,AR减轻肝纤维化₄。为了说明潜在的炎症,mRNA水平的il - 6、TNF -α,il - 1β被检测到。随后,免疫组织化学分析,进一步验证I型胶原蛋白的表达。最后,炎症信号通路中的关键蛋白的表达检测。AR的表达显著降低高机动组框1 (HMGB1), TLR4、Myd88,愤怒,和NF -κB p65基因和蛋白质。此外,免疫印迹显示AR愤怒的蛋白表达减少,p-MEK1/2 p-ERK1/2, p-c-Jun。综上所述,我们的数据表明,基于“增大化现实”技术的明显抑制肝纤维化的干预HMGB1-mediated炎症信号通路和分泌信号通路。本研究将为深入研究和开发提供有价值的参考踝骨基数对肝纤维化。

1。介绍

肝纤维化是一个复杂的病理过程,中间各种肝脏疾病包括肝硬化和肝癌之间的联系(1,2]。和预防恶性肝脏疾病通过抑制肝纤维化的发生和发展举世瞩目(3]。大量研究显示肝纤维化的发病机制,如炎症反应,激活肝星状细胞和细胞外基质过度沉积,但它尚未转化为一个有效的和强大的治疗(4,5]。仍然有缺乏安全有效的治疗肝纤维化的方法(6,7]。

有必要开发新药物治疗肝纤维化(7]。中医在治疗慢性疾病的潜在优势,所以我们试图找到有效的药物治疗肝纤维化。踝骨基数(AR)的干燥根踝骨基数membranaceus(费)。知母。或踝骨基数membranaceus(费)。知母。var. mongholicus萧(知母),是一种常用的中药治疗肝脏疾病(8]。已经证明,基于“增大化现实”技术拥有王亚南和消炎物质,已被证明能展览immunomodulating和抗氧化活性,其中[9]。在中国传统公式,基于“增大化现实”技术通常用于治疗肝纤维化(10]。虽然基于“增大化现实”技术在肝损伤的保护作用及相关机制已报告(9,11),研究基于“增大化现实”技术在肝纤维化的效果和机制仍缺乏。更重要的是,毒理学研究证实了基于“增大化现实”技术的高安全。没有明显的毒性或副作用观察当老鼠的剂量是设置为39.9克/公斤(12]。

实验和临床研究发现,高机动组盒1 (HMGB1),最近发现有关分子模式(抑制),大大丰富了肝纤维化患者(13,14]。HMGB1晚期炎症介质,起着重要的作用在许多慢性炎症的发病机制,这是肝纤维化的主要原因(15]。有证据表明,HMGB1可以直接刺激肝星状细胞(hsc)激活加速肝纤维化的发展(16]。更重要的是,toll样受体4 (TLR4)和晚期糖化终产物中的受体(愤怒)HMGB1的主要受体(15]。据报道,细胞外的绑定HMGB1 TLR4可能激活NF -κB信号诱导炎症和加重肝纤维化。研究表明,细胞外HMGB1绑定愤怒可以使磷酸化c-Jun导致I型胶原分泌显著增加(16,17),直接加速肝纤维化的发展(c-Jun是一个组件的heterodimeric AP1和是一个强有力的transactivating因素collagen1a1和collagen1a2基因(17,18])。

基于之前的研究,本研究旨在提供以下问题的答案:是基于“增大化现实”技术对CCl四氯化碳(有治疗效果₄-)诱导大鼠肝纤维化?底层机制是什么?HMGB1的差别相关机制对这些吗?

2。材料和方法

2.1。试剂

在这项研究中,秋水仙碱是购买从西双版纳班纳制药有限公司(云南、中国)。创新领导力₄是由天津Guangfu化学研究所(天津)。丙氨酸氨基转移酶(ALT,猫。不。:20.180627), aspartate amino transferase (AST, Cat. No.: 20180607), collagen IV (COL-IV, Cat. No.: 201809), hyaluronic acid (HA, Cat. No.: 201808), laminin (LN, Cat. No.: 201809), and precollagen type III (PC III, Cat. No.: 201809) detection kits were provided by Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (Nanjing, China). The antibodies of phospho-c-Jun, phospho-MEK1/2, HMGB1,αsma、phospho-ERK1/2 ERK1/2买了从细胞信号技术(美国)。MEK1/2抗体和COL-I买来Abcam(美国)和抗体的愤怒和GAPDH都是从ABclonal买(中国)。

2.2。植物材料

基于“增大化现实”技术(干的根源基于“增大化现实”技术membranaceus(费)。商洽。)是由北京制药有限公司(中国,北京)。十倍的水被用于第一的基于“增大化现实”技术提取2 h。然后,八倍的水被用来提取1.5小时。的提取黄芪被冷冻真空干燥炉干燥成粉末。最终的收益率是40.08%。Q-TOF LC / MS分析表明,基于“增大化现实”技术提取的主要组件包括3、4-dihydroxybenzyl醛(6.17%)、calycosin-7-glucoside (0.69%)、armillaripin (10.31%)、rhodomollein III(7.05%)、邻苯二甲酸酐(1.76%)、clavatine (6.46%)、pterosin B (7.46%)、D-cathinone(2.65%)、芒柄花黄素(15.4%)、Andrographolide(2.57%),和anemarrhenasaponin-I (4.55%) (19]。

2.3。动物和管理

共有36个男性的雄性sd大鼠中权重从中国获得180 - 200克食品药品认证研究所(不许可。SCXK (Jing) 2014 - 0013)。这些老鼠被安置在中央第五动物实验室医学中心的中国人民解放军总医院。动物们保持受控条件下的温度25°C±2°C,湿度55%±5%,光明与黑暗周期。

所有的动物被随机分为6组,每组六个老鼠。橄榄油CCl稀释₄比例为1:1。模型组,基于“增大化现实”技术(2.7,5.4,10.8 g / kg / d)组和秋水仙碱(作为阳性对照组)CCl组都参加了₄稀释剂(2毫升/公斤)为8周(每周两次19]。与此同时,对照组腹腔注射相同剂量的橄榄油。八周后,AR(2.7, 5.4,和10.8 g / kg / d)组和秋水仙碱组(0.2毫克/公斤/天)有相应的药物浓度(20.]。对照组和模型组被给予相同体积的蒸馏水。所有的老鼠都被胃内的政府为6周一天一次。所有老鼠都剥夺食物前24小时持续治疗但允许免费使用水。这些动物牺牲2 h后治疗和他们的肝脏和血清收获的进一步的研究。血液样本离心机在3500 rpm,持续15分钟。肝脏组织分为三块,放置在样品瓶。血清和肝组织存储在−80°C。所有动物实验伦理委员会批准的第五次中国人民解放军总医院医学中心在中国。

2.4。生化试验

血清ALT、AST、COL-IV HA、LN、PCⅲ测量。总之,根据制造商的协议、样品,2,4-dinitrophenylhydrazine溶液和氢氧化钠溶液依次添加。最终颜色在510 nm,血清ALT和AST水平根据OD值测定。同样,根据制造商的指示,加入试剂的工具包反过来,阅读最终颜色在450海里,并获得COL-IV的血清HA、LN、PCⅲ根据OD值。

2.5。组织学检查

肝组织中性缓冲福尔马林固定在10%超过48小时。所有的肝脏与梯度乙醇溶液和筛选了固定和嵌入石蜡。组织部分约4 - 5μ厚度减少,沾染了苏木精伊红())和马森。肝组织的病理变化是尼康显微镜下观察(尼康仪器公司、日本)。

2.6。定量逆转录聚合酶链反应(rt - pcr)分析

使用定量rt - pcr检测的mRNA表达il - 6、TNF -α,il - 1βHMGB1, TLR4、Myd88和愤怒在肝组织中。总RNA提取试剂盒试剂从90毫克冻肝组织(美国生命科技,CA)。提取的mRNA的吸光度检测到分光光度计在260 nm和280 nm,分别。的信使rna纯度1.8和2.2之间(A260 / A280)被选为合格产品的后续研究。RNA (2μg)被转录成cDNA PrimerScript RT摄政工具包(美国马热费希尔科学)。互补脱氧核糖核酸随后进行PCR扩增的ABI 7500实时PCR仪(美国应用生物系统公司公司,卡尔斯巴德,CA)。数据分析是由2^−△△CT方法。表列出了引物1。

2.7。西方墨点法

冰冷的无线电免疫沉淀反应试验(里帕)的混合裂解缓冲,phenylmethylsulfonyl氟化物(PMSF)和蛋白质磷酸酶抑制剂用于蛋白质提取。肝组织(80毫克)的均质和细胞溶解混合,然后在12000×g离心10分钟4°C。上层清液的收集和BCA蛋白质分析工具包(北京Solarbio科技有限公司北京有限公司,中国)是用于检测总蛋白浓度。所有的蛋白质样品被夷平相同的浓度。然后,减少Laemmli SDS样本缓冲区添加和混合,并在沸水中煮5分钟。准备样本西方涂抹10%钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳(sds - page)和污点被转移到聚偏二氟乙烯(PVDF)膜。PVDF膜密封在5%脱脂牛奶在室温下2小时,然后放置在一个混合5%的脱脂牛奶,Tris-buffered盐水(TBS),和0.05%渐变20主要与相应的抗体,和孵化一夜之间在4°C。抗体,包括兔子Anti-NF -κB p65(细胞信号技术,稀释:1:1000),愤怒(ABclonal技术、稀释:1:1000),phospho-MEK1/2(细胞信号技术,稀释:1:2000),MEK1/2 (Abcam稀释:1:10000),phospho-ERK1/2(细胞信号技术,稀释:1:1000),ERK1/2(细胞信号技术,稀释:1:10000),phospho-c-Jun (Abcam稀释:1:500),和GAPDH (ABclonal技术、稀释:1:10000),在这一步骤中使用。GAPDH是用作控制总蛋白提取。与适当的二次抗体孵化后2小时在室温下,细胞膜被三次TBS渐变20 5分钟为0.05%。最后,化学发光系统是用来测量免疫反应性的蛋白质。所有的西方墨点法是重复3次。

2.8。免疫组织化学分析

对AR的表达的影响αsma, HMGB1,胶原蛋白在肝纤维化大鼠肝组织,免疫组织化学分析如前所述[21]。石蜡的部分肝脏组织在二甲苯和梯度乙醇deparaffinization和脱水,然后是部分被放入柠檬酸抗原为抗原检索检索解决方案。用3%过氧化氢溶液的部分阻断内源性过氧化物酶。被阻塞的部分有1% BSA在室温下30分钟。随后,部分被孵化αsma(细胞信号技术,稀释:1:100),兔子Anti-HMGB1(细胞信号技术,稀释:1:200),和胶原蛋白I型(Abcam稀释:1:200)在一夜之间在PBS溶液在4°C。孵化后的部分用适当的二次抗体室温1小时,他们沾民建联和苏木精染色的解决方案,最后幻灯片是脱水和安装。尼康显微镜(尼康仪器公司、日本)和NIS-Elements (F 4.0版本,日本)软件被用来观察的部分。最后,Image-Pro +(6.0版本,媒体Cybemetics, INC .,罗克维尔市,医学博士,美国)软件用于计算和分析综合平均光密度(IOD)免疫组织化学反应的积极的区域形象。

2.9。统计分析

结果表示为平均值±标准偏差(SD)。单向方差分析进行评估的数据,邓肯与SPSS电脑程序的多量程测试(20.0版本,SPSS Inc .)、芝加哥,美国)。 被认为是显著和 被认为是非常重要的。

3所示。结果

3.1。基于“增大化现实”技术对三地有治疗效果₄全身的肝损伤

如数据所示1(一)和1 (b),ALT和AST水平的老鼠模型组显著增加( )与对照组相比。血清ALT和AST浓度显著降低口服后AR 5.4克/公斤和10.8克/公斤( )。随后,COL-IV的血清HA、LN、PCⅲ可以反映肝纤维化程度的检查(22]。如数据所示1 (c)- - - - - -1 (f)COL-IV的血清水平,模型中HA、LN、PCⅲ组明显高于对照组( )。基于“增大化现实”技术的抑制作用的水平COL-IV, HA、LN、PCⅲ是剂量依赖性。特别是COL-IV的血清HA、LN、PCⅲ明显减少10.8克/公斤AR组( )。

3.2。基于“增大化现实”技术的作用在肝脏组织病理学改变和肝纤维化

然后,hematoxylin-eosin马森(他)染色和染色是用来观察肝组织的病理变化21,23]。他的结果显示,对照组正常的肝组织结构没有形态变化。CCl的长期₄治疗大鼠显示,他们的肝脏局部坏死,伴有严重脂肪变性和炎症细胞浸润肝小叶中央静脉周围。相比之下,肝损伤的程度,基于“增大化现实”技术治疗组脂肪变性、炎症浸润减少剂量依赖性的方式(图的不同程度2(一个))。马森肝段染色,蓝色区域代表了胶原蛋白沉积。结果表明,大量的胶原蛋白沉积在肝窦的模型组。基于“增大化现实”技术可以有效地减少胶原蛋白沉积,改善肝纤维化(图2 (b))。上述结果证实,三地₄全身的大鼠肝纤维化模型是成功的,并基于“增大化现实”技术能有效地改善在大鼠肝纤维化。

3.3。CCl老鼠引起的炎症反应₄

临床数据表明,炎症是一个关键因素在肝纤维化的进展24]。il - 6,作为一个经典的促炎细胞因子生物标志物,用于临床诊断慢性肝纤维化(25]。肿瘤坏死因子-α能促进活化肝星状细胞的生存,促进肝纤维化的发展(26]。据报道,血清il - 1β血吸虫病引起的肝纤维化患者显著增加(24]。因此,我们检测到的表达il - 6、TNF -α,il - 1β老鼠的定量rt - pcr。mRNA水平的il - 6、TNF -α,il - 1βCCl显著增加吗₄全身组与对照组( ,图3)。与基于“增大化现实”技术治疗后,相关基因的表达减少剂量依赖性的方式( , )。结果表明,基于“增大化现实”技术对创新领导力的治疗效果₄全身的老鼠的肝脏炎症。

3.4。基于“增大化现实”技术会使创新领导力₄全身的肝脏炎症

文献研究发现,HMGB1肝纤维化患者细胞因子丰富充实,TLR4 / / NF -介导的κB信号通路是肝脏无菌性炎症的重要途径之一。因此,我们测试了HMGB1的表达水平,TLR4 Myd88和NF -κB p65,关键信号通路在肝纤维化大鼠的目标。定量rt - pcr和免疫组织化学(包含IHC)方法被用来检测HMGB1的表达和亚细胞定位。如数据所示4(一)- - - - - -4 (e)在对照组,HMGB1主要是位于肝细胞的细胞核,很少在细胞质或正弦曲线。模型组,HMGB1免疫反应性门静脉周的观察,桥在肝脏纤维化区域。此外,计算机辅助半定量的分析表明,基于“增大化现实”技术治疗缓解HMGB1的表达较模型组(图4 (f), , )。

此外,HMGB1的mRNA表达也用rt - pcr方法量化。结果表明,高剂量的基于“增大化现实”技术可以显著降低HMGB1的mRNA的表达,这与IHC方法的结果是一致的。这些结果证明,基于“增大化现实”技术可以减少HMGB1的表达(图4 (g))。随后,定量rt - pcr用于检测TLR4 Myd88,和愤怒的mRNA水平模型组明显高于对照组(数字4 (h)- - - - - -4 (j), )。与基于“增大化现实”技术治疗后,相关基因的表达减少剂量依赖性的方式( , )。西方墨点法用于检测NF的表达水平κB p65与肝纤维化大鼠的肝脏。如数据所示4 (k)- - - - - -4(左)的免疫印迹乐队NF -κB p65模型组比对照组明显厚,和统计结果显示显著差异( )。基于“增大化现实”技术治疗后,NF -的表达κB p65减少剂量依赖性的方式,特别是在5.4克/公斤AR组和10.8克/公斤AR组( )。这些结果表明,基于“增大化现实”技术可以改善肝脏炎症的表达下调HMGB1 / TLR4 / / NF -κB信号通路。

3.5。基于“增大化现实”技术抑制肝星状细胞的激活

肝星状细胞是肝纤维化的核心细胞。据报道,HMGB1可以直接激活肝星状细胞(16]。因此,我们推测,基于“增大化现实”技术可以发挥保护作用,肝纤维化,减少肝星状细胞的激活。α光滑的肌肉肌动蛋白(αsma)是一种特殊的标志激活肝星状细胞(27]。在这里,激活肝星状细胞的比率是衡量使用包含IHC方法通过检测αsma在肝脏组织(图5)。在对照组中,只有少量的α门户地区-SMA-positive细胞被发现,这可能是肝动脉。更多的αCCl -SMA-positive细胞中观察到₄全身组与对照组相比,和α基于“增大化现实”技术治疗后-SMA-positive细胞显著减少。通过计算机辅助半定量的分析,平均集成光密度(IOD)α-SMA-positive区域的基于“增大化现实”技术治疗组被证实是剂量依赖性的方式比模型组显著降低(图5, )。这些结果显示,基于“增大化现实”技术能减少肝星状细胞的活化,肝纤维化的关键细胞。

3.6。基于“增大化现实”技术有一个对1型胶原分泌信号通路的影响,HMGB1介导的

接下来,包含IHC方法被用来检测数据中的i型胶原的表达6(一)- - - - - -6 (e)、I型胶原蛋白沉积在肝小叶门静脉老鼠CCl处理₄就显著增加。与基于“增大化现实”技术治疗后,I型胶原蛋白的表达和沉积在肝脏明显抑制,尤其是在组剂量为10.8克/公斤。I型胶原immunopositive地区的半定量的分析进一步证实了上述结果(图6 (f))。均值IOD I型胶原蛋白的基于“增大化现实”技术管理组显著降低剂量依赖性的方式相比,模型组( )。之前报道,HMGB1与愤怒的受体调节I型胶原蛋白的表达(17]。因此,我们探讨AR的表达的影响下游HMGB1的目标,如愤怒、p-MEK1/2, p-ERK1/2, p-cJun, I型胶原蛋白。免疫印迹法检测的表达愤怒,p-MEK1/2, p-ERK1/2, p-cJun蛋白质经过政府的基于“增大化现实”技术(数字6 (g)- - - - - -6 (k))。愤怒的蛋白质、p-MEK1/2 p-ERK1/2, p-cJun CCl只在明显增加₄全身组与对照组( , )。与模型组相比,高剂量管理组AR的表达明显减少愤怒,p-MEK1/2 p-ERK1/2, p-cJun(数字6 (h)- - - - - -6 (k), , )。

4所示。讨论

在这项研究中,使用基于“增大化现实”技术的水提物,这是符合中医的临床使用。和研究结果更有价值。确定基于“增大化现实”技术对肝纤维化有保护作用,创新领导力₄全身在大鼠肝纤维化模型。与临床观察一致,基于“增大化现实”技术可以改善肝脏功能在一定程度上减轻肝损伤(28,29日]。在这项研究中,研究结果表明,基于“增大化现实”技术可以降低血清肝纤维化标志物,包括COL-IV、HA、LN、PC-III。考试的血清和肝组织病理学表现出基于“增大化现实”技术显示明显anti-liver纤维化效应和AR的anti-liver纤维化效应的剂量的10.8 g / kg与秋水仙碱。为了应用AR更科学,基于“增大化现实”技术的潜在机制减轻肝纤维化进一步探索。

先前的报道,这项研究的结果证实,基于“增大化现实”技术有明确的王亚南效果,可以有效改善肝纤维化(19,30.,31日]。然而,如何发挥治疗效果尚不清楚。先前的研究已经报道,基于“增大化现实”技术具有较强的抗炎活性,能够有效降低炎症因子的表达如伊诺,cyclooxygenase-2 (cox - 2)、il - 6、TNF -α,il - 1β(32,33]。长期的炎症反应是肝纤维化的发生的关键(34]。因此,我们发现基于“增大化现实”技术的影响在肝纤维化大鼠炎症因子的表达。结果表明,基于“增大化现实”技术可以显著下调il - 1的表达β肿瘤坏死因子-α,il - 6。它表明,AR可能改善肝纤维化通过抑制大鼠的炎症反应。

无菌炎症性肝脏疾病被认为是“无菌”[35]。有研究报道,潮湿是无菌性炎症的关键在肝损伤之后,和HMGB1的关键点36]。细胞外HMGB1是一种多功能细胞因子,导致炎症的绑定与特定的细胞表面受体TLR4 [37]。因此,我们发现HMGB1的表达在大鼠探索基于“增大化现实”技术是否影响调节HMGB1表达通过改善炎症反应。结果表明,HMGB1的表达降低的基于“增大化现实”技术治疗组与模型组相比。TLR4信号通路研究最多的途径。模式识别受体TLR4,新兵Myd88内生活化剂HMGB1的作用下,导致NF -的激活κB炎症通路,促进炎性细胞因子il - 1的转录β肿瘤坏死因子-α,il - 6 (38,39]。因此,我们发现TLR4的表达,Myd88, NF -κB p65。结果表明,TLR4的表达水平,Myd88, NF -κB p65基于“增大化现实”技术治疗组明显低于模型组。上述结果表明,AR CCl可能会减少₄全身的肝脏炎症通过下调HMGB1 / TLR4的表达/ NF -κB信号通路。

在实验和人类肝脏损伤,激活肝星状细胞(myofibroblasts)被认为是肝纤维化的驱动因素40]。据报道,肝星状细胞激活炎症因素myofibroblasts在肝脏的主要来源(34]。和HMGB1可能直接刺激肝星状细胞的激活16]。药效学结果表明,基于“增大化现实”技术可以有效地提高在CCl引起的大鼠肝纤维化₄。研究还发现,基于“增大化现实”技术不仅可以表达下调HMGB1的表达,但也减少炎性细胞因子il - 1的转录β肿瘤坏死因子-α,并通过调节HMGB1 il - 6 / TLR4 / NF -xB信号通路。因此,我们推测,基于“增大化现实”技术可以抑制大鼠肝星状细胞的激活。的检测αsma,肝星状细胞激活的标志蛋白,进一步证实了我们的假设:基于“增大化现实”技术可以显著抑制CCl引起的大鼠肝星状细胞的激活₄(图7)。

肝纤维化或瘢痕沉积引起的慢性损伤是相似的在所有形式的肝脏疾病(41]。在皮下肝细胞和内皮细胞之间的空间,纤维或I型胶原蛋白总量来取代低密度基底膜状般的矩阵包含IV型胶原蛋白。转换fibril-rich皮下基质的胶原蛋白是一个关键事件,介导的差异化功能进行性肝病的特征(42]。Myofibroblasts是积累在I型胶原蛋白的主要来源组织纤维化(43]。发现肝星状细胞的活化是减少AR-treated集团,我们推测,I型胶原蛋白的表达在老鼠的肝脏也会相应减少。此外,最新的研究报告,HMGB1激活旁分泌系统和移植1型胶原蛋白的分泌绑定愤怒成纤维细胞表面受体,从而触发和/或维护疤痕形成17]。因此,我们发现I型胶原蛋白的表达在大鼠肝脏,以及愤怒的表达,p-MEK1/2 p-ERK1/2, p-c-Jun肝组织。结果表明,基于“增大化现实”技术可以显著降低大鼠1型胶原蛋白的表达,这可能与肝星状细胞激活的差别,对这些基因的减少胶原蛋白分泌由HMGB1-RAGE-c-Jun。

5。结论

总之,生化和组织学评估测试被用来揭示基于“增大化现实”技术的功能。研究还表明,AR是强有力的表达下调HMGB1的表达愤怒/ cJun通路和HMGB1 / TLR4 / NF -κCCl B通路,从而防止老鼠₄全身的肝纤维化。因此,本研究将提供科学依据和理论基础,基于“增大化现实”技术的发展为肝纤维化潜在的候选药物。

缩写

基于“增大化现实”技术:	踝骨基数
ALT:	丙氨酸转氨酶
AST:	天冬氨酸转氨酶
创新领导力4:	四氯化碳
COL-IV:	胶原蛋白4
抑制:	有关分子模式
ECM:	细胞外基质
哈:	透明质酸
HMGB1:	高机动组框1
肝星状细胞:	肝星状细胞
):	Hematoxylin-eosin
包含IHC:	免疫组织化学
碘:	集成光学密度
LN:	层粘连蛋白
聚合酶链反应:	聚合酶链反应
第三个人电脑:	Precollagen III型
愤怒:	晚期糖化终产物中的受体
SD:	标准偏差
αsma:	α光滑的肌肉肌动蛋白。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者在合理的请求。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

Jianxia温家宝和丹王同样贡献了这项研究。Jianxia温家宝和丹王进行了实验和写的手稿。王Ruilin和魏Shizhang分析数据。陵王赵和剑设计研究和指导实验。

确认

这项工作是支持的项目资本的健康改善和研究基金(没有。2018-2-5032)。

引用

1. g .张、刘y和p . Liu”活性成分从沙棘(沙棘l .)调节肝星状细胞激活和肝纤维发生,”农业与食品化学杂志》上,卷66,不。46岁,12257 - 12264年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. y, y Bi, c . Mo et al .,“桦木酸变弱肝纤维化通过增殖诱导自噬蛋白激酶/细胞外signal-regulated激酶途径,”《天然药物,卷73,不。1,第189 - 179页,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. f .圣保罗、p . Pelegrin和a·费尔德斯坦“Inflammasomes在肝纤维化,”研讨会在肝脏疾病,37卷,不。2、119 - 127年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. d . Schuppan m . Ashfaq-Khan a·t·杨和y . o .金,“肝纤维化:直接antifibrotic代理和靶向治疗,”矩阵生物学卷,68 - 69,435 - 451年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. y y尹,李,美国弗里德曼“Antifibrotic疗法:我们现在在哪里?”研讨会在肝脏疾病,36卷,不。1,第098 - 087页,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. f . Tacke和c . Trautwein肝纤维化机制解决。”肝脏病学杂志,卷63,不。4、1038 - 1039年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. l·坎帕纳和j . Iredale肝纤维化的回归”,研讨会在肝脏疾病,37卷,不。1、1 - 10,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. 王锣,r .段h . et al .,“踝骨的药品属性和价值评估基数,“药物,5卷,不。2,p。2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. l . j .傅z . Wang黄et al .,“审查的植物学特征、植物化学和药理的黄芪(黄芪),“植物疗法的研究,28卷,不。9日,第1283 - 1275页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 他,y, x刘et al .,“复合黄芪和丹参提取物能抑制细胞增殖,入侵在瘢痕疙瘩成纤维细胞和胶原蛋白合成中介转化生长因子-β/ smad途径。”英国皮肤病学杂志》,卷166,不。3、564 - 574年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. w . l . Li黄,s王et al .,“第四套变弱acetaminophen-induced肝损伤小鼠通过激活Nrf2信号通路,”分子,23卷,不。8,2032年,页2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. S.-Y。Yu H.-T。欧阳,J.-Y。杨et al .,“Subchronic毒性研究黄芪提取物的大鼠和狗,”民族药物学杂志,卷110,不。2、352 - 355年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. j . Li F.-P。王,W.-M。她et al .,“增强的高机动组框1 (HMGB1)调节调节性T细胞(Treg) / T辅助17 (Th17)平衡通过toll样受体(TLR) 4-interleukin 6 (IL)通路在慢性乙型肝炎患者,”《病毒性肝炎,21卷,不。2、129 - 140年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. c . j . Li曾庆红,b .郑et al .,“HMGB1-induced自噬促进肝星状细胞激活:一个新的通路在肝纤维化,”临床科学,卷132,不。15日,第1667 - 1645页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. j . p .秋l . Wang倪,y,“HMGB1基因多态性和易感性和临床结果之间的联系在中国汉族脓毒症患者中,“基因卷。687年,23-29,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. h·盖斯凯尔、x通用电气和n,“高机动性组箱量1和肝脏疾病,”肝脏病学通信,卷2,不。9日,第1020 - 1005页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. x通用电气、e . Arriazu f·玛格达勒诺et al .,“高机动组盒1驱动纤维化进展信号通过先进的糖化结束产品受体的老鼠,”肝脏病学,卷68,不。6,2380 - 2404年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. s . Leppa r . Saffrich, w . Ansorge“微分调节c-Jun ERK和物在PC12细胞分化过程中,“在EMBO杂志,17卷,不。15日,第4413 - 4404页,1998年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. d . Wang r·李和美国,“代谢组学结合网络药理学探索揭示踝骨的调节特性基数提取治疗肝纤维化,”中药,14卷,p。2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 林问:姚明,y,李x, x沈,j . Wang和c .你“姜黄素改善肝内血管生成和正弦曲线的斜阳能力碳tetrachloride-induced鼠肝纤维化,”毒物学字母,卷222,不。1,第82 - 72页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. 杨y,张平,y . Wang”王亚南san-cao颗粒的con a-induced小鼠肝损伤和行动机制探索,“在药理学领域,9卷,p。624年,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. x, g . j .钟d·j·杨l . Chen和美国Du,王亚南”Herpetospermum caudigerum墙。对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化,应承担的”细胞和分子医学杂志》上,22卷,不。7,3691 - 3697年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. e . Ramos-Tovar e . Hernandez-Aquino s Casas-Grajales et al .,“甜菊糖甙预防急性和慢性四氯化碳引起的肝损伤通过阻断氧化应激通过Nrf2 upregulation,”氧化医学和细胞寿命卷,2018篇文章ID 3823426, 12页,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. 周宏儒。Zhangdi S.-B。苏,王f . et al .,“相声网络在多个炎症介质在肝纤维化,”世界胃肠病学杂志》上,25卷,不。33岁,4835 - 4849年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. m .雅库特h . Ozkan m . f . Karakaya和h . Erdal”诊断和预后的作用血清白细胞介素- 6在肝硬化恶性转变,”湾《Hepato-Gastroenterology,8卷,不。1,23-30,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. j。Pradere j .柯鲁威s . De Minicis et al .,“肝巨噬细胞而不是树突细胞导致肝纤维化通过促进活化肝星状细胞在小鼠的生存,”肝脏病学,卷。58岁的没有。4、1461 - 1473年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. j .太阳,y, c . et al。”从蓝莓花青素孤立调制改善亚兰诱导肝纤维化的氧化应激,炎症和肝星状细胞激活在老鼠身上,“食品和化学毒物学卷,120年,第499 - 491页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. r . Simeonova v . m . Bratkov m . Kondeva-Burdina诉Vitcheva诉Manov和i Krasteva实验性肝保护ofn-butanolic提取ofAstragalus monspessulanusL。四氯化碳中毒性模型鼠。”氧化还原的报告,20卷,不。4、145 - 153年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. 周y、x通美国任et al .,“协同anti-liver纤维化的行为通过TGF -黄芪总皂苷和甘草酸β1 / smads信号通路调节。”民族药物学杂志卷,190年,第90 - 83页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. y y, c . Wang Jin et al .,“黄琦圣提高了葡萄糖和脂类代谢,产生保护作用对肝脂肪变性高脂肪饮食的老鼠,”生物医学和药物治疗文章ID 109734卷,126年,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. m·郝z关,y高et al .,“黄琦圣改善高脂血症和肥胖老鼠通过激活棕色脂肪细胞,将白色脂肪细胞转化为则脂肪细胞,”植物学期刊文章ID 153292卷,78年,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. m . Ryu e·h·金·m·春et al .,“踝骨通过激活MKP-1基数抒发抗炎,伴随p38和Erk衰减,”民族药物学杂志,卷115,不。2、184 - 193年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. o . k . y . s . Lee汉,c . w .公园et al .,“促炎细胞因子基因表达和一氧化氮的监管水提取的踝骨基数在原始264.7巨噬细胞细胞,”民族药物学杂志,卷100,不。3、289 - 294年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. y小山和d·a·布伦纳,“肝脏炎症和纤维化,”临床研究杂志,卷127,不。1,55 - 64、2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. 美国米姆,“危险分子模式(抑制):分子触发器无菌炎症在肝脏,”国际分子科学杂志》上,19卷,不。10,3104年,页2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. p . Huebener j。Pradere c·埃尔南德斯等人,“HMGB1 /愤怒轴触发neutrophil-mediated伤害放大坏死后,“临床研究杂志,卷125,不。2、539 - 550年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. a . Vicentino诉Carneiro, d . Allonso“新兴HMGB1在血吸虫病肝纤维化的发病机制中的作用,“免疫学前沿,9卷,不。1979年,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. t . Trotta、c·普罗和r . Calvello”生物的toll样receptor-4大脑的作用,”神经免疫学杂志,卷268,不。1 - 2、1 - 12,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. z张问:刘,刘m . et al .,“Upregulation HMGB1-TLR4炎症通路在焦皮质发育不良II型,”《神经炎症,15卷,不。1,p。27日,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. t . Tsuchida s l·弗里德曼,“肝星状细胞的激活机制。”自然评论胃肠病学和肝脏病学,14卷,不。7,397 - 411年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. s . l .弗里德曼“肝纤维化的分子调控,一个集成的组织损伤细胞反应,”生物化学杂志,卷275,不。4、2247 - 2250年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. e . Olaso k . Ikeda f·j·英格et al .,“DDR2受体促进MMP-2-mediated肝星状细胞增殖和入侵,”临床研究杂志,卷108,不。9日,第1378 - 1369页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. t·d·阿诺德·n·c·亨德森,y Katamura et al .,”的目标αv整合素识别核心分子通路调节在多个器官纤维化,”自然医学,19卷,不。12日,第1624 - 1617页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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