1例慢性髓系白血病中涉及染色体9、12和22的费城易位复杂变异

摘要

慢性髓性白血病（CML）是肌酚肿瘤的更广泛诊断类别中包括的造血干细胞障碍，与染色体22Q111111中的BCR基因与染色体9 Q34的ABL1基因相关联的血清诊断类别相关联，其形成费城（pH）染色体。在2-10％的CML病例中，融合基因与变体易位有关，涉及染色体9,22和一种或多种不同的染色体;因此，可以在复杂的染色体重排中掩盖pH染色体。在具有变体pH易位的情况下，可以比在古典一体的情况下更频繁地观察到DAR（9）上的删除。在此，我们描述了一种具有复杂变体pH易位的CML的新案例，涉及染色体9,12和22.我们在伊马替尼处理后呈现血液学反应和细胞遗传学反应。我们还推测了发起染色体重排的机制。

1.介绍

慢性髓系白血病(CML)是一种造血干细胞疾病，属于骨髓增生性肿瘤的更广泛诊断类别[1以肿瘤过度产生主要是粒细胞为特征。CML始终与断点簇区基因的染色体易位的融合相关(BCR)与Abelson基因(ABL1)染色体9q34。这种融合基因BCR/ABL1编码一种癌蛋白(P210，更罕见的是P190或P230)，具有强烈的构成激活酪氨酸激酶活性，诱导若干下游信号，导致造血干细胞的转化[2］．t(9;22)易位可以通过常规核型检测到，如Philadelphia (Ph)染色体，但2-10%的病例中，融合基因来自变异易位[3.］．人们已经认识到两个变异亚群:在9号染色体以外的染色体上有22q片段易位的简单变异群和包括染色体9,22和一个或更多额外染色体/秒的复杂变异群。因此，Ph值染色体可能被掩盖在一个复杂的染色体重排。虽然所有的染色体都可能参与这些变异易位，但有一个明显的聚集到特定的染色体带，表明特定的区域特别容易断裂。此外，在变异病例中der(9)上的缺失可能比经典Ph易位的病例更频繁(40%对14%)[4］．在有限数量的CML病例中尝试了不同复杂变异的预后评估，得出了有争议和不确定的结果[5］．在这里，我们描述了一个新的CML病例与复杂的变异Ph易位涉及染色体9,12和22。我们评估了对伊马替尼治疗的反应，并推测了这种染色体重排背后的分子事件。

2.案例报告

患者为72岁女性，有免疫介导的血小板减少症的临床病史。在常规实验室分析中，发现白血球计数(WBC)意外增加，并怀疑有CML。实验室检测白细胞计数39.2 × 10^3./mcL, 60%的中性粒细胞，21%的淋巴细胞，10%的单核细胞，2%的嗜酸性粒细胞，2%的嗜碱性粒细胞，4%的髓细胞，1%的亚髓细胞。血红蛋白13.5 g/dL在正常范围内，血小板计数较低(101 × 10)^3./制程)。进行骨髓细胞遗传学分析和外周血RT-PCR检测。常规的细胞遗传学分析在未刺激的24小时和48小时的骨髓培养中进行。细胞经标准方法培养和处理[6]，染色体经qfq显带染色。根据意大利和欧洲获得性细胞遗传学和ESMO(欧洲医学肿瘤学会)临床实践指南进行分析[7- - - - - -9］．FISH分析使用BCR/ABL1 t(9;22)三色双融合探针和亚端粒9qter探针(Kreatech Diagnostics Vlierweg 20, 1032 LG Amsterdam, Netherlands)，按照制造商的程序完成。核型结果根据ISCN 2013描述[10］．采用基于TaqMan技术的Philadelphia p210 Q-PCR Alert kit (Nanogen Inc.， San Diego, CA, USA)对外周血中嵌合BCR-ABL1转录本进行逆转录定量聚合酶链反应(RT-PCR)。RNA提取和RT-PCR按照插入试剂盒说明书进行(Nanogen Inc.， San Diego, CA, USA)。P210的cDNA测量归一化为ABL1基因的cDNA。传统的骨髓细胞遗传学分析显示，在22个中期有一个涉及12和22的长臂染色体t(12;22)的相互易位，而不涉及9号染色体(图)1(一))．RT-PCR检测到BCR/ABL1融合转录本的存在，然后用间期FISH分析骨髓。外周血BCR/ABL1的定量RT-PCR检测显示主要的嵌合转录本，BCR-ABL1(P210)/ABL1比值为14.95%(国际标准)。采用BCR/ABL1 t(9;22)三色双融合探针FISH分析t(12;22)易位特征，检测融合基因的定位。探针组是红色标记的ASS-ABL1探针和BCR探针的混合物，近端BCR区域标记为蓝色，远端BCR区域标记为绿色。鱼在200年中期和核显示如下:(i)一个紫色(蓝/红)融合信号代表融合基因(BCR / ABL1) der(22),(2)一个绿色的信号3 ' BCR序列参与易位染色体12 t(12、22),(3)一个绿色/蓝色信号正常染色体22日(iv)和一个红色信号正常染色体9(数字1 (b)和1 (c))．未检测到ABL1/BCR信号的互融合。利用亚端粒9qter探针对200个细胞核和中期进行FISH分析，以进一步研究9号染色体参与复杂重排:它显示正常的信号模式。综上所述，FISH在der(9)上发现了包括ASS基因在内的5 ' ABL1序列的缺失，并绘制出了BCR基因远端序列内t(12;22)的断点。BCR探针分别在der(22)和der(12)上发出分裂信号。ISCN核型为46,XX,der(9)del(9)(q34q34)ins(22;9)(q11.2;q34q34)，der(12)t(12;22)(q13;q11.2)，der(22)ins(22;9)t(12;22)[22]。所有这些结果与CML诊断一致，患者开始使用甲磺酸伊马替尼(Glivec)治疗。治疗3个月后，白细胞计数为5.1 × 10^3./mcL，中性粒细胞占49.7%，淋巴细胞占37.8%，单核细胞占7.6%，嗜酸性粒细胞占4.3%，嗜碱性粒细胞占0.6%，血红蛋白浓度为12.4 g/dL，血小板计数211 × 10^3./制程。在治疗4和6个月后，用间期FISH对200个细胞核进行分子细胞遗传学随访，显示正常的信号模式，而6个月时的染色体分析显示，在8和9三体(48,XX，+8，+9)的样本中，5% (FISH分析的5个中期有2个，200个间期核有10个)中发现了一个新的异常克隆。

(一)

(b)

(c)

3.讨论

我们描述了一名CML患者与一种新的隐性复杂变异t(9;22)相关，除9和22号染色体外，还包括12号染色体，通过RT-PCR和FISH分析发现了其特征。与ESMO临床实践指南一致，本病例报告证明了这些分子方法在检测某些类型的Ph和der(9)染色体隐藏的变异易位中的隐融合基因的作用。如前所述，复杂变异t(9;22)的断点位置是非随机的，在特定的染色体带上有明显的聚类，表明某些区域更容易发生断裂。这一发现可以用一个特定的基因组结构来解释。确实，高CG含量区域、Alu重复、LINE、基因和miRNA的显著聚类解释了重组热点的存在[11，12］．在我们的病例中涉及的12q13染色体区域由Costa等人描述[13[与复杂的费城易位和在某些情况下的三向易位有关t(9;22) [11］．此外，该区域涉及其他染色体易位，源于梅西尔曼等人报道的白血病不同亚型的嵌合基因。[14]和癌症数据库中的染色体的地图集[15[脆弱的位点，FRA12A，这是由DIP2B基因的5- PRIME未翻译区域中的膨胀CGG重复引起的（OMIM611379) [16］．结合所有这些数据我们可以推测，在12Q13中的特定基因组基序如CGG重复，可能导致在我们患者中观察到的变体T（9; 22）。据我们所知，这是CML患者在CML患者中这种类型变体易位的情况。

我们还可以假设，这种染色体重排是由至少4个同时断裂和关节的一步机制产生的，因为(i)在诊断时，我们没有检测到额外的克隆异常，(ii)在(22)只发生了一个断点，它位于BCR基因内，同时起源于融合基因和t(12;22)。相反，其他病例显示同一患者同时存在标准易位和复杂易位，提示两个或两个以上连续易位导致复杂变异型易位的形成[4］．

关于含有复合成分易位的癌症的预后数据是矛盾的，并且该组一些患者的差的预后结果是通过增加持续缺失的频率（9）而不是染色体重新排列的类型[5］．我们的患者已经接受伊马替尼治疗，在3个月的治疗中，尽管在der(9)上存在缺失，但她获得了血液和细胞遗传学应答，而在6个月的治疗中，她开发了一个具有8和9三体的克隆。这些三体在慢性粒细胞白血病中没有明显的预后意义。详细三倍体8干扰素和/或伊马替尼治疗后可能出现未知的意义和三倍体9被认为代表一个功能机制对p24 9日JAK2基因编码的JAK2激酶没有预后影响的后续研究有限样本大小(17］．

到目前为止，我们的患者对伊马替尼治疗表现出良好的反应，但需要进一步的研究来证实这一发现。

利益冲突

作者声明本文的发表不存在利益冲突。

参考

J. W. Vardiman, J. Thiele, D. A. Arber等人，“2008年世界卫生组织(WHO)髓系肿瘤和急性白血病分类修订:基本原理和重要变化，”血，第114卷，第2期。5，第937-951页，2009。查看：出版商的网站|谷歌学者
A. Quintás-Cardama, H. Kantarjian和J. Cortes，《慢性粒细胞白血病的酪氨酸激酶抑制剂》，新英格兰医学杂志第357期15, pp. 1557-1558, 2007。查看：谷歌学者
B. Johansson, T. Fioretos，和F. Mitelman，“慢性髓系白血病的细胞遗传学和分子遗传进化”，Acta Haematologica，第107卷，第2期2，页76-94,2002。查看：出版商的网站|谷歌学者
A. G. Reid, B. J. P. Huntly, C. Grace, A. R. Green, E. P. Nacheva，“变异费城阳性慢性髓系白血病的分子异质性对生存的影响”，英国血液学杂志号，第121卷。3，页419-427,2003。查看：出版商的网站|谷歌学者
M. M. T. El-Zimaity, H. Kantarjian, M. Talpaz et al.，“甲酸伊马替尼治疗带有变异费城染色体的慢性骨髓性白血病的结果”，英国血液学杂志，卷。125，没有。2，pp。187-195,2004。查看：出版商的网站|谷歌学者
A. Babu和R. S. Verma，人类染色体原理与技术，麦格劳山，德克萨斯州，Tex，美国，1995年第2版。
"肿瘤相关基因研究"http://www.sigu.net/．查看：谷歌学者
R. Hastings, R. Howell, D. Betts等人，获得性细胞遗传学指南和质量保证，e.c.a.欧洲细胞遗工学家协会2013年3月31日，http://e-c-a.eu/files/downloads/NL31_Acquired_Guidelines.pdf．
M. Baccarani, S. Pileri, j - l。Steegmann, M. Muller, S. Soverini, M. Dreyling，“慢性髓系白血病:ESMO诊断、治疗和随访临床实践指南，”肿瘤学史，卷。23，不。7，物品ID MDS228，PP。VII72-VII77，2012。查看：出版商的网站|谷歌学者
L. G. Shaffer, J. McGowan-Jordan和M. Schmid，人体细胞遗传学术语国际制度，karger，巴塞尔，瑞士，2013。
F. Albano，L. Anelli，A. Zagaria等，“慢性骨髓白血病患者的断裂区域中的基因组特征的非随机分布，具有变异T（9; 22）或额外的染色体重排，”分子癌症， 2010年第9卷第120条。查看：出版商的网站|谷歌学者
A. M. Fisher, P. Strike, C. Scott, and A. V. Moorman，“突变9的断点;慢性髓系白血病中的22个易位优先定位于基因组中最富含gg的区域。”基因染色体和癌症号，第43卷。4, 2005。查看：出版商的网站|谷歌学者
D. Costa, A. Carrió， I. Madrigal等，“慢性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病患者复杂Ph值易位的研究”，癌症遗传学和细胞遗传学，卷。166，没有。1，pp。89-93,2006。查看：出版商的网站|谷歌学者
F. Mitelman, B. Johansson和F. Mertens，癌症中染色体畸变的Mitelman数据库，http://www.cgap.nci.nih.gov/chromosomes/mitelman.．
癌症染色体的图谱，http://atlasgeneticsoncology.org/index.html．
人类,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim/?term=OMIM．
U. Bacher, T. Haferlach, W. Hiddemann, S. Schnittger, W. Kern，和C. Schoch，“费城阳性ALL和CML的额外克隆异常在诊断时显示了不同的细胞遗传学模式，在进展时遵循不同的途径，”癌症遗传学和细胞遗传学，第157卷，第1期1，页53-61,2005。查看：出版商的网站|谷歌学者

遗传学病例报告

摘要

1.介绍

2.案例报告

3.讨论

利益冲突

参考

版权

更多相关文章

相关文章