慢性粒细胞白血病(CML)是一种造血干细胞疾病纳入更广泛的骨髓增殖性肿瘤诊断类别( 1),特点是肿瘤主要粒细胞的生产过剩。CML始终与融合的染色体易位断点集群区域基因( BCR)在染色体22 q11 Abelson基因( ABL1)在染色体9 q34。这种融合基因BCR / ABL1编码的癌蛋白(P210,更很少P190或P230)与一个强大的本构激活酪氨酸激酶活性诱导一些下游信号导致造血干细胞的变换( 2]。易位t(9、22)可以检测到常规核型为费城染色体(Ph),虽然在2 - 10%的情况下,融合基因起源于一个变种易位( 3]。两个子组变体已经认识到:简单的变体集团22问段以外的9号染色体易位和复杂的变体涉及染色体易位,22岁,和一个或多个附加染色体/ s。因此,Ph值染色体可以掩盖在一个复杂的染色体重排。尽管所有这些变体易位染色体可以参与,有一个显著的集群特定染色体乐队表明特定区域尤其容易破损。此外,在不同情况下删除der(9)可能比在更频繁的情况下与古典Ph易位(40%比14%)( 4]。预后评估不同的复杂变异是试图在有限数量的CML情况下给有争议的和不确定的结果 5]。这里我们描述小说CML情况复杂的变体Ph值涉及染色体易位9日,12日和22。我们评估了对伊马替尼治疗和潜在的这条染色体重排推测分子事件。

病人,一位72岁的女人,有一个临床免疫介导的血小板减少症的历史。在常规实验室分析,一个意想不到的增加白细胞计数(WBC)被发现和CML被怀疑。实验室数据显示39.2×10的白细胞计数³/制程,60%的中性粒细胞,21%的淋巴细胞,单核细胞的10%,2%的嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞的2%,中幼粒细胞的4%,和1%的晚幼粒细胞。血红蛋白浓度的13.5 g / dL是在正常范围内,而血小板很低(101×10³/制程)。细胞遗传学分析骨髓和外周血进行rt - pcr。进行常规细胞遗传学分析如果24 - 48小时骨髓的文化。细胞培养和处理标准方法( 6)和染色体被QFQ-banding染色。分析了根据意大利和欧洲获得细胞遗传学和ESMO(欧洲医学肿瘤学会)临床实践指南( 7- - - - - - 9]。鱼分析使用BCR / ABL1 t (9; 22) Triple-Color Dual-Fusion探针和Sub-Telomere 9 qt探针(Kreatech诊断Vlierweg 1032 LG阿姆斯特丹,荷兰)完成后,生产过程。核型结果是根据描述ISCN 2013 10]。定量逆转录聚合酶链反应(rt - pcr)对外周血进行嵌合bcr - abl1成绩单与费城p210 Q-PCR警报工具包(Nanogen Inc .)、圣地亚哥、钙、美国),基于TaqMan技术。RNA提取和rt - pcr进行后插入设备指令(Nanogen Inc .)、圣地亚哥、钙、美国)。的测量的cDNA P210规范化ABL1基因的互补。常规细胞遗传学分析骨髓显示中期22日相互易位染色体的长臂12和22日t(12、22),不参与染色体9(图 1(一))。神秘的BCR / ABL1融合转录被rt - pcr检测,随后通过相间鱼分析骨髓。定量rt - pcr分析对外周血BCR / ABL1显示主要的嵌合成绩单,BCR - ABL1 (P210) / ABL1比率的14.95%(国际规模)。鱼分析BCR / ABL1 t (9; 22) Triple-Color Dual-Fusion探针进行的t(12、22)易位检测融合基因的定位。探针集的混合ASS-ABL1 BCR探针的探针标记红色和近端BCR地区在蓝色和远端一个绿色标签。鱼在200年中期和核显示如下:(i)一个紫色(蓝/红)融合信号代表融合基因(BCR / ABL1) der(22),(2)一个绿色3′BCR信号序列参与易位染色体12 t(12、22),(3)一个绿色/蓝色信号正常染色体22日(iv)和一个红色信号正常染色体9(数字 1 (b)和 1 (c))。相互融合ABL1 / BCR信号没有检测到。鱼200核和中期分析使用subtelomeric 9 qt探针进行进一步调查参与复杂的9号染色体重排:它显示正常信号模式。总之,鱼披露的删除5′ABL1序列,包括基因,der(9),允许地图t的断点(12、22)远端BCR基因序列。der BCR调查给了一个分裂的信号(22)和der(12),分别。的ISCN核型是46,XX, der(9)德尔(9)(q34q34) ins (22; 9) (q11.2; q34q34),火线(12)t(12、22)(问题;q11.2),火线(22)ins (22; 9) t (12、22) [22]。所有这些结果都符合CML诊断和患者开始治疗甲磺酸伊马替尼(Glivec)。三个月的治疗后,白细胞数为5.1×10³/制程,49.7%的中性粒细胞,37.8%的淋巴细胞,单核细胞的7.6%,4.3%的嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞的0.6%,血红蛋白浓度为12.4 g / dL,血小板计数是211×10³/制程。分子细胞遗传学跟踪通过相间鱼BCR / ABL1探测器在200原子核,4和6个月的治疗后,显示正常信号模式,而染色体分析六个月显示新的异常克隆检测到5%(2中的5个中期和10 200间期核分析了鱼与8和9染色体着丝粒探针)样本的预断8和9 (48,XX, + 8 + 9)。

我们描述一个病人与CML与新奇神秘复杂的变体t(9; 22),包括染色体12除了染色体9日和22日,这是揭露和rt - pcr和鱼分析的特征。同意ESMO临床实践指南,这个病例报告证明了这些分子的方法在检测神秘的角色融合基因在某些类型的变异染色体易位蒙面Ph值和der (9)。之前报道,复杂的断点位置变异t(9; 22)与标记聚类到特定的染色体非随机乐队表明一些地区更容易破损。这一发现可以解释的存在一个特定的基因组结构协调重组。的确一个重要聚类描述了CG含量高的地区,铝合金重复,线,基因,microrna的解释存在重组热点[ 11, 12]。涉及的12个问题的染色体区域,在我们的案例中,被哥et al。 13费城与复杂易位和在某些情况下三方易位t (9、22) 11]。此外,涉及到这一地区在其它染色体易位,原始嵌合基因不同亚型的白血病相关报道在Mitelman et al。 14)和阿特拉斯的染色体在癌症数据库( 15),在脆弱的网站,FRA12A,它是由一个扩大CGG重复DIP2B基因的5 '端非翻译区(人类 611379年)[ 16]。结合所有这些数据我们可以推测特定基因的存在主题在12个问题,比如CGG重复,可能导致变异t(9; 22)观察到在我们的病人。我们所知,这是第一种情况,这种类型的变体在CML病人易位。

我们也可以假设出现了染色体重排一步机制至少有四个同时减免和关节因为(i)在诊断我们没有发现额外的克隆异常和(2)在der(22)只有一个断点发生,这是位于BCR基因,是融合基因和t (12、22)。相反的其他情况下显示标准和复杂易位的共处在同一个病人表明两个或两个以上的连续易位引起复杂易位(变体的形成 4]。

预后的数据对伊马替尼在费城例复杂易位是矛盾的和穷人一些病人的预后结果解释了这一组频率增加的同时删除der(9)而不是类型的染色体重排( 5]。我们的病人与伊马替尼治疗,在治疗3个月,她实现了血液和细胞遗传学反应尽管存在删除der(9),在6个月的治疗,她开发了一种克隆预断8和9。这些预断显然没有在CML预后意义。详细三倍体8干扰素和/或伊马替尼治疗后可能出现未知的意义和三倍体9被认为代表一个功能机制对p24 9日JAK2基因编码的JAK2激酶没有预后影响的后续研究有限样本大小( 17]。

到目前为止我们的病人表现出良好的应对伊马替尼治疗,但还需要进一步的研究来证实这一发现。