临床前评价(¹⁸F] LCATD作为PET示踪剂研究药物之间的相互作用引起的抑制肝脏转运蛋白

文摘

胆汁酸的模拟(¹⁸F] LCATD(石胆酸苯三唑衍生物)运输等肝吸收转运蛋白在体外OATP1B1 NTCP和射流运输车BSEP。在这体内“的证据原则”的研究中,我们测试了(¹⁸F] LCATD可用于评价药物之间的相互作用(ddi)引起的抑制肝脏转运蛋白。肝的间隙(¹⁸F] LCATD在大鼠明显修改共同服用利福霉素的SV或钠fusidate,来抑制临床相关的吸收转运蛋白(OATP1B1 NTCP)和微管的肝脏转运蛋白(BSEP)在人类身上。利福霉素治疗SV(总剂量62.5 mg·Kg⁻¹)的最大辐射减少(¹⁸F] LCATD记录在肝脏从14.2±0.8%至10.2±0.9%和延迟t_{_max}相对于控制老鼠的90秒。AUC_{肝脏0 - 5分钟},AUC_{胆汁清廉敏}和肝摄取间隙CL_{吸收,体内}利福霉素的SV治疗大鼠显著降低,而AUC_{肝脏0 30分钟}高于控制老鼠。管理fusidate钠(30毫克公斤⁻¹)抑制肝脏吸收(¹⁸F] LCATD虽然在较小程度上,减少肝脏中最大的放射性11.5±0.3%。这些初步的研究结果表明(¹⁸F] LCATD也许是个不错的候选人未来的应用作为一个临床实验的示踪评价改变肝胆的排泄的药物抑制肝脏转运蛋白。

1。介绍

肝细胞执行大部分的肝脏功能和负责解毒的外源性物质,包括药物通过代谢和/或消除胆汁排泄过程。药物不能被动地交叉肝细胞的脂质核心膜可以积极运送到肝细胞吸收的蛋白质。在肝细胞内,药物可能会进行代谢及其代谢物可能由射流运输车运输,要么回血液由基底射流转运蛋白或分泌到胆汁微管的转运蛋白。药物和/或药物代谢物可以竞争性抑制肝脏转运蛋白,导致与coadministered药物药代动力学的相互作用(或drug-drug-interactions, ddi),可能导致严重的不良反应由于药物清除或减少细胞内积累的这些药物或其代谢物在肝细胞(1,2]。

目的是检测ddi在药物开发的早期阶段,增加了解肝胆的运输及其扰动通过临床使用的药物在体内的作用,相当大的努力一直致力于开发研究PET示踪剂肝转运蛋白(3- - - - - -5]。在这种背景下,我们先前描述的石胆酸衍生物,(¹⁸F] LCATD(图1),这是一种很有前途的PET示踪研究潜在的临床药物用于肝transporter-mediated ddi和肝毒性6]。体外研究证实(¹⁸F] LCATD似乎是一个衬底膜吸收转运蛋白OATP1B1和NTCP(虽然是一个低亲和基质OATP1B3),通过射流输送BSEP汇聚成胆汁。(¹⁸F] LCATD特点是被动的渗透率低,证明了初步成像实验老鼠,它迅速积累到肝脏然后专门分泌到胆汁(6]。

在这里,我们目前的临床PET成像研究的结果进行评估的潜力(¹⁸F] LCATD体内成像的影响利福霉素SV和钠fusidate在肝摄取和胆汁排泄coadministered通过喷丸。体外研究证实了之前(¹⁸F] LCATD内源性胆汁酸运输作为探针,可用于临床前评价药物干扰的肝脏胆汁酸转运蛋白的功能。虽然在体外实验中人类OATP1B1细胞中进行表达,我们选择大鼠模型对我们调查的人类和老鼠直接同源OATP1B1展览运输特点非常相似。此外,老鼠都被广泛用于动物模型为研究肝脏转运蛋白(3,4,7评估和转运蛋白针对宠物追踪器,如(¹¹C] dehydropravastatin [8]、[¹¹C]伐7]、[¹¹C -)替米沙坦(9]、[¹¹C]N乙酰白三烯E4 (10),0,(15R)- - - 16 -米- - - - - - (¹¹C] tolyl-17, 18日,19日,20-tetranorisocarbacyclin甲酯(11]。

2。材料和方法

2.1。化学物质和放射性示踪剂

宠物临床前研究(¹⁸F] LCATD是合成报道之前(6进一步的细节(见补充材料),制定在PBS的10%的乙醇。放射化学纯度> 99%,具体活动> 20 GBq·µ摩尔⁻¹。利福霉素SV购买从西格玛奥德里奇(英国)和溶解在乙醇10%生理盐水(20 mg·毫升⁻¹)。钠fusidate购买从Sigma-Aldrich(英国),并制定在生理盐水(20 mg·毫升⁻¹)。

2.2。动物

女性Sprague-Dawley (SD)大鼠(200 - 250 g)买来哈伦(英国)。标准提供的动物是食物和水在环境温度和光控随意。所有动物实验根据阿伯丁大学的行为守则的使用动物研究以及动物的法律要求(科学程序)法案1986年,家庭办公室守则的指导。结束时的成像实验,动物被宰杀通过心脏穿刺(第一级技术,放血),而在麻醉下,然后一个终端血液样本,肝脏,肾脏,心脏被收集。

2.3。PET / CT成像

PET扫描进行了临床PET / CT SEDECAL ARGUS扫描仪(SEDECAL、西班牙)安置在一个温控套件。扫描仪有两个11.8厘米直径环位敏光电倍增管的光电开关探测器耦合,给出轴向4.8厘米和7.5厘米transaxial视野(FOV)。所有动物插管(Venisystem蝴蝶,雅培爱尔兰)示踪的尾静脉注射全身麻醉下与异氟烷(w / w IsoFlo 100%,雅培公司)2.5% (2 L·分钟⁻¹氧气流)。动物被分为三组:对照组(管理(¹⁸F] LCATD只有3动物)、利福霉素SV-treated组动物(3)和fusidate-treated组动物(3)。所有的动物都在仰卧位扫描。开始的时候扫描,(¹⁸F] LCATD(5 - 15兆贝可/机构)作为单个丸注入尾静脉。管理放射性测量的净计数注射器注射前后电离室(Capintec CRC-15PET;拉姆齐,新泽西州)。质量的(¹⁸F] LCATD管理/动物nmol估计为0.2到1。为抑制实验,利福霉素SV扫描开始前45分钟,于50毫克的剂量·公斤⁻¹时(腹腔)和示踪剂注入剂量为12.5毫克公斤⁻¹(静脉注射)。体内评估的抑制作用钠fusidate肝胆的运输的示踪剂,该药物的剂量管理20 mg·公斤⁻¹(腹腔)30分钟前扫描和10毫克的剂量·公斤⁻¹(静脉注射)15分钟后的示踪剂注入。发射扫描3 d列表模式获得了30分钟(FOV包括胸腔和肠的一部分),后跟一个5分钟的CT扫描。宠物收购获得的能量窗口设置为250 - 700 keV空载和修正,活动衰减,衰减,随机,散射计数(使用制造商的应用软件)。动态排序列表模式获得的图像数据转换成以下时间段:6×10年代,8×30年代,10×60年代,和3×300年代,和图像重建前/ 2 d-osem重建算法(生产商提供的)。抽样在较短的时间间隔在早期跨度为使我们检测快速增量的示踪剂摄取肝脏和小肠。长时间帧在以后从注射时间跨度为降低噪声图像和显示PET示踪剂吸收特性的具体数量。5分钟注射部位的PET扫描的CT是确保获得成功的静脉注射。交叉校准电离室和PET扫描仪是由用有机玻璃制成的圆柱形幻影内部直径43毫米和37毫米的长度。10到20分钟的PET扫描幻影充满了平均4.20兆贝可(¹⁸F] LCATD在60 g的水(平均空载值4%)收购。

注册PET和CT图像从扫描器转移到处理工作站,和随后的分析使用Pmod (Pmod技术,CH) 3.2版。感兴趣的区域(roi)对应于腹主动脉,肝脏和胃肠道定义通过手动和阈值相结合的方法(补充图1和电影)使用PMOD软件(PMOD技术)。胃是包含在胃肠道ROI包括胆汁的数量可能从十二指肠回流到胃。

2.4。后期Biodistribution示踪剂

样本肝脏、心脏和肾脏收集的磁共振扫描(安乐死)和单一化与甲醇(80%水,5毫升每克生物样品)通过一个均质器。样本存储在preweighed塑胶瓶。终端收集的血液通过心脏穿刺前安乐死。匀浆和血样测定的活动通过precalibratedγ计数器后尽快宠物实验。

2.5。死后的代谢产物分析

分析血液中的代谢产物、肝脏和胆(从肠道中提取)是通过radio-HPLC执行。血液样本,收集的心脏穿刺的磁共振扫描,采用同等体积的乙腈,离心机1分钟在1000 rpm,上层清液注入radio-HPLC(日本岛津公司突出高效液相色谱系统配备PDA紫外检测器和赫姆LB500活动检测器和Phenomenex Luna C18柱,5μ100 m, 250×4.6毫米,注入20卷µL, PBS / CH₃CN 60: 40、权力平等主义的洗脱流:1毫升·分钟⁻¹)。肝脏样本收集和十二指肠末端的磁共振扫描(安乐死)匀浆与甲醇(80%水,5毫升每克生物样品)通过一个均质器和离心机1分钟1000 rpm和上层清液在radio-HPLC注入。

2.6。数据分析

吸收肝间隙CL_{吸收,体内}被集成块计算应用Patlak方法获得Pmod (Pmod技术,CH) 3.2版本,限制了线性适合吸收阶段(0 - 3分钟)3,12]。

内在胆道放射性示踪剂CL的间隙_int、胆汁被确定为高岛等人提出的。11)的量化放射性示踪剂在肝脏和小肠(如放射性示踪剂汇聚成胆汁量)。

方差分析单因素分析(Microsoft Excel 2013)是用来检查是否有统计上显著的差异AUC的血液、肝脏和胆汁的三组(控制、利福霉素和fusidate治疗大鼠)。对于AUC_肝,有一个团体之间统计上的显著差异, ;对于AUC_血,组之间没有显著差异, ;对于AUC_胆汁,有一个团体之间统计上的显著差异, 。

双尾学生的t以及与平等的方差(Microsoft Excel 2013)是用来确定重要性水平之间的各种PK参数控制和药物治疗动物在不同的时间段。

3所示。结果

3.1。浓度的(¹⁸F] LCATD动脉血液中

宠物动脉血液中示踪剂的浓度是通过观察来自宠物图像清晰可见的活动部分腹主动脉(图S4、补充材料)。image-derived动脉PET示踪剂的浓度可能会受到错误由于小尺寸的血管相比,扫描仪的空间分辨率。事实上,污染由于溢出从其他附近的器官和部分体积效应预计将分别增加和减少(未知)动脉血液的实际活动。然而,大多数的这些影响应该类似在不同动物中,允许治疗和治疗组之间的比较。

血时间曲线(TAC)获得控制,利福霉素SV-treated图和fusidate-treated动物2(一个)。示踪剂在利福霉素的血药浓度高于SV-treated动物PET示踪剂浓度测量控制老鼠,但相对TAC曲线之间的差异不显著(为清晰起见标准差酒吧不是如图2(一个))。示踪fusidate-treated动物的血药浓度不低于PET示踪剂浓度测量控制血液中的老鼠,但是相对tac之间的差异并不显著。

3.2。肝脏吸收和胆汁流出(¹⁸F] LCATD

冠代表宠物的肝脏图像控制,利福霉素SV-treated,图和fusidate-treated老鼠3。减少暴露在放射性肝的利福霉素SV-treated老鼠以及延迟胆汁排泄的示踪剂可以明显观察到,而控制和fusidate-treated之间没有明显的差异可以注意到老鼠。

TAC肝脏的控制、rifamycin-treated和fusidate-treated老鼠如图2 (b)。控制老鼠,最大值为14.2±0.8%的注射剂量被发现在肝脏150秒接受。快速观察冲刷,30分钟后,剩余活动以肝脏为1.04±0.17%的注射剂量。在利福霉素SV-treated老鼠,最大活动记录在肝脏为10.2±0.9%的注射剂量225秒接受。冲刷阶段明显推迟,30分钟后,活动在肝脏为1.87±0.13%的注射剂量。fusidate钠治疗降低了最大活动注册在肝脏11.5±0.3%的注射剂量示踪剂注射后135秒。TAC概要文件是类似于一个获得控制老鼠,快速冲刷,减少了活动在肝脏1.02±0.02%的注射剂量30分钟后(表1)。定量宠物分析表明,活动中发现肝脏示踪剂注入控制后2分钟,利福霉素SV-treated,和fusidate-treated老鼠(图2 (d))是明显不同的组()。在这个时间点,14.2±0.8%的注射活动被发现在控制老鼠的肝脏,而对利福霉素SV-treated和钠fusidate-treated老鼠,肝脏活动减少到8.0±0.6%和11.4±0.4%。

曲线下的面积(AUC肝脏从0到5分钟_{肝脏0 - 5分钟})利福霉素SV-treated老鼠明显低于控制老鼠,和相同的观测AUC的可以_{肝脏0 - 5分钟}fusidate-treated老鼠,而肝脏AUC之间没有发现统计上的显著差异_{肝脏0 30分钟}三个动物组(表1)。

为了计算肝脏吸收间隙CL_{吸收,体内}、集成块得到应用Pmod Patlak方法,限制了线性适合吸收阶段(3]。在这项研究中,来自血液time-concentration输入函数(¹⁸F] LCATD腹主动脉的活动;因此,CL_{吸收,体内}计算值,所以不能与那些获得不同示踪剂从文学相比,其血药浓度测定通过测量血液样本的活动(3]。的CL_{吸收,体内}利福霉素的SV-treated和fusidate-treated老鼠明显低于氯_{吸收,体内}控制老鼠(表1)。

胆汁的tac报道在图所示2 (c)放射性示踪剂的胆汁排泄延迟在利福霉素SV-treated fusidate-treated老鼠,而对于控制大鼠,观察直线0和200秒和高原之间观察到的药物治疗老鼠。曲线下的面积(AUC胆汁从0到10分钟_{胆汁清廉敏})的利福霉素SV-treated老鼠明显低于一个获得控制老鼠,而没有发现差异之间的控制和fusidate-treated老鼠。不同的内在胆道放射性示踪剂CL的间隙_int、胆汁(3)被发现不是统计学意义之间的控制和利福霉素SV-treated老鼠,而钠fusidate治疗显著增加这个值(表1)。

3.3。后期Biodistribution示踪剂

发现在肝脏的控制活动,利福霉素SV-treated,和fusidate-treated动物接受非常低(图50分钟4),如预期的快速清除以前观察到的示踪剂,并无统计上显著差异被发现在三个实验小组。利福霉素SV和钠fusidate biodistribution显著影响的示踪剂在肾脏50分钟接受,这是在所有动物组极低。事实上,肾清除率(¹⁸F] LCATD似乎可以忽略不计,如果与胆道间隙相比,肾脏是不可见的PET扫描图像,尽管领域的观点。利福霉素SV和钠fusidate显著增加了终端血液样本的活动,和更高水平的放射性物质被发现在对待动物。这是符合减少肝脏吸收和排泄,这都将增加宠物示踪的血药浓度。

4所示。讨论

PET示踪剂(¹⁸F] LCATD胆汁酸模拟,石胆酸密切相关,可以作为调查评估肝脏转运蛋白的抑制。体外细胞摄取和膜泡流出化验使用[³H] LCATD证明这两亲性分子很难穿透细胞膜通过被动扩散,而它正迅速被细胞表达OATP1B1, NTCP运输车,射流通过BSEP [6]。参与其他的吸收转运蛋白(如OATP2B1, OATP1A2, OAT2 OAT7)和顶端转运蛋白(BCRP如MATE1 MRP2, MDR1/3)不能被排除在外。初步体内宠物研究表明,静脉注射后,(¹⁸F] LCATD选择性地积累在肝脏6),唯一的器官转运蛋白的小鼠同源染色体的显著表达。

被(¹⁸F] LCATD的底物药物相关肝运输车OATP1B1,以及正常的转运蛋白参与胆汁酸的吸收和间隙(如NTCP和BSEP),如果biodistribution的共同服用药物的影响(¹⁸F] LCATD还有机会高,药物可能导致ddi或药物诱导hepatoxicity。临床前的概念,本研究关注的影响共同服用两种药物的抑制肝脏转运蛋白,例如,利福霉素SV和钠fusidate,肝胆管的分布(¹⁸F] LCATD。利福霉素SV已广泛应用在体外药物相关转运蛋白抑制剂(13- - - - - -16],我们之前已经证明它可以抑制吸收tritium-labelled LCATD OATP1B1的细胞试验(6]。因此,我们预期,利福霉素SV可以代表一个基准抑制剂成像研究。另一方面,fusidate被选为钠转运蛋白抑制剂在这项研究中,因为它参与临床相关的ddi。Fusidate-induced肝脏转运蛋白抑制肌病的确实被建议作为一个可能的原因包括横纹肌溶解在共同服用他汀类药物(17,18]。

迄今为止,少量的胆汁酸衍生品标签与γ和正电子放射性同位素已经开发,目的是研究肝胆的和肠道运输通过SPECT和PET成像。(^75年Se) 25-homotaurocholic酸(SeHCAT) (19)是第一个gamma-emitting胆汁酸导数,于1979年研制成功。(¹¹C] Cholylsarcosine,胆汁酸的模拟cholylglycine首先报道2012年(20.),已被证明是经由胆汁酸转运蛋白在猪21),被证明是一个有用的宠物在健康人体内示踪研究胆汁分泌和胆汁淤积患者(22]。我们的第一份报告后不久(¹⁸F] LCATD作为第一个(¹⁸F] fluorine-labelled胆汁酸(6),另一个胆酸衍生物,3β- - - - - - (¹⁸F] fluorocholic酸([¹⁸F] FCA)报道了De Lombaerde et al。23)是一种很有前途的探针监测改变hepatobilary运输期间体内药物开发。比其他宠物追踪器开发研究肝脏转运蛋白的运输很有选择地OATPs和MRP2 BCRP [3,4胆汁酸碱度等示踪剂(¹⁸F] LCATD,(¹⁸流转成本会计和[F]¹¹C] Cholylsarcosine通常是由相同的转运蛋白参与吸收和流出的内生胆汁酸(BSEP NTCP, OATP1B1, OATP1B3, MRP2) (24- - - - - -26),使它们的最佳候选人学习生理学和病理生理学肝脏胆汁酸运输体内(22,23,27]。

作为其他观察胆汁抗酸(¹⁸F] fluorine-labelled PET示踪剂[¹⁸F] FCA [23),(¹⁸F] LCATD达到一个峰值浓度在肝脏在很短的时间内(t_{_max}= 135秒)在未经处理的动物。

利福霉素治疗SV减少最大的活动记录在肝脏从14.2±0.8%至10.2±1.0%和延迟t_{_max}90秒,指示一个抑制作用的药物转运蛋白参与的吸收(¹⁸F] LCATD。在利福霉素SV-treated AUC老鼠_{肝脏0 - 5分钟}和肝摄取间隙CL_{吸收,体内}也大大降低了结果的影响药物吸收转运蛋白(表吗1)。如果与TAC获得控制老鼠相比,利福霉素SV-treated小鼠表现出平缓指数衰减阶段期间代表肝细胞示踪的排泄。因此,AUC_{肝脏0 30分钟}利福霉素的SV-treated老鼠是高于前者_{肝脏0 30分钟}控制老鼠,AUC_{胆汁清廉敏}利福霉素的SV-treated老鼠比AUC显著降低_{胆汁清廉敏}控制老鼠,暗示流出转运蛋白的抑制作用。值得一提的是,尽管AUC_{肝脏0 - 5分钟}(描述了探针在肝脏)的积累和CL_{吸收,体内}(一个动力学参数描述探针底物的运输)是密切相关的,很难与他们根据可用的信息。自吸收转运蛋白是由利福霉素抑制SV,预计这将增加等离子体/ PET示踪的血药浓度,减少积累在肝脏AUC的反映在减少_肝。这是确认的K_p肝(组织/等离子体比)三组计算。综上所述,这些数据是按照利福霉素抑制活动SV以前观察到的吸收和微管的转运蛋白。事实上,利福霉素抑制OATP1B1 SV已被证明,OATP1B3, NTCP [16,28),ATP-dependent胆汁盐泵出口(BSEP) [29日,30.]。抑制OATP1B1和BSEP预计将发生在利福霉素SV的血清浓度高于其集成电路₅₀这些转运蛋白。报告的集成电路₅₀OATP1B1和BSEP的利福霉素SV值分别为0.2 - -0.4µ米(6,16)和6.3µ米(31日),而K_我值> 63µM NTCP一直报道(13]。服用剂量的利福霉素SV 62.5 mg·公斤⁻¹,考虑到集成电路₅₀上述值,有可能是利福霉素SV等离子体浓度足以抑制OATP1B1 BSEP、而抑制NTCP可能只是部分的。这些观察结果将与PET成像实验的结果一致。管理路线的利福霉素SV和剂量用于我们的协议是基于一项研究结构相关抑制剂的使用利福平在小鼠肝脏转运蛋白抑制剂(32]。抑制肝运输是37.5毫克的剂量·公斤⁻¹腹腔内和9.37 mg·公斤⁻¹静脉注射(32]。这是与观察到的抑制(¹⁸F] LCATD交通在我们工作中使用的剂量(50毫克公斤⁻¹ip和12.5毫克公斤⁻¹(四)。

后期分析的剩余活动接受(50分钟)肝脏,肾脏,心脏,血液也与体内成像结果一致。事实上,示踪剂浓度很低的残余肝脏中发现符合快速胆道间隙由PET成像观察。非常低的活动中发现肾脏(< 0.1%的注射剂量,与其他血液灌注器官如心脏)和显著差异()被发现血液中示踪剂浓度之间的控制和rifamycin-treated老鼠,由于药物引起的肝受损。

虽然我们无法检测(¹⁸F] LCATD或任何radiometabolite在血液和肝脏提取物,radio-HPLC分析肠提取的两只动物对照组显示双峰值匹配(¹⁸F] LCATD,占超过90%的活动(见图S1示踪、补充材料),这表明新陈代谢稳定50分钟接受至少90%。

共同的钠fusidate·(30毫克公斤⁻¹)降低肝脏吸收(¹⁸F] LCATD利福霉素相比,虽然一定程度上SV:肝脏中发现的最大的活动从14.2±0.8%减少到11.4±0.3%t_{_max}在这种情况下没有延迟。较低的AUC_{肝脏0 - 5分钟}和AUC_{肝脏0 30分钟}fusidate-treated老鼠相对于控制大鼠(尽管后者不显著)表明,肝细胞被暴露于低数量的PET示踪剂,吸收抑制的可能结果。有趣的是,AUC_{胆汁清廉敏}fusidate-treated老鼠高于AUC_{胆汁清廉敏}控制老鼠,即使没有统计学意义的差异。的CL_int、胆汁也高于控制老鼠。最后,示踪剂的浓度之间的显著差异被发现终端控制和fusidate-treated老鼠的血液样本。管理所有这些结果表明,剂量,fusidate钠抑制肝脏摄取的示踪剂而不是微管的流出,相反似乎刺激了毒品的存在。这可能是由于考虑到,在以前的研究33-300年,梭链孢酸(0.3µ米)被证明刺激MRP2运输车(微管流出体外,所表示的LTC4流出的增加(leucotriene C4)使用MRP2转染膜囊泡。许多胆汁酸盐,经由MRP2 [34),,(¹⁸F] LCATD胆汁酸的模拟,它是可能的,其MRP2-mediated排泄可能是由梭链孢酸刺激管理。然而,对于本研究的范围,我们没有评估的参与MRP2在微管的流出(¹⁸F] LCATD,我们认识到,未来的工作应该更详细地探索这方面。

fusidate钠的影响对胆道运输之前研究在老鼠体内,和全面降低胆道的间隙³H] -cholyltaurine后观察mg·54公斤⁻¹剂量(35]。然而,作者无法澄清效果是由于减少肝脏吸收cholyltaurine或减少引起的微管的流出(从而增加肝细胞暴露于药物),或两者兼而有之。在最近的一项研究中,钠fusidate显示抑制伐的肝脏吸收,通过抑制OATP1B1 OATP1B3,口头管理在老鼠的剂量250毫克公斤⁻¹(17]。

在我们的研究中,服用剂量的钠fusidate 30毫克公斤⁻¹与以前所使用的剂量的mg·波德(54公斤⁻¹ip) (35]研究fusidate cholyltaurine交通的影响大鼠肝脏。虽然无法测量实际的血浆浓度,接种剂量的fusidate足以抑制OATP1B1 BSEP、NTCP。对于这些转运蛋白,IC₅₀值的钠fusidate已报告在微摩尔的范围:1.6 - 35µM OATP1B1 [17,18,33),3.8 - -11.5μM BSEP [31日,33,44μM NTCP [33]。高氯_int、胆汁观察fusidate-treated老鼠的净效应可以解释为梭链孢酸BSEP抑制和MRP2刺激。AUC显著差异观察fusidate-treated老鼠_{肝脏0 - 5分钟}在2分钟,在放射性肝接受和CL_int、胆汁证实的假设(¹⁸F] LCATD,可以用作示踪剂来识别扰动的肝摄取和外排转运蛋白在体内。然而,在梭链孢酸的情况下,进一步研究运输机淘汰赛啮齿动物模型可能需要明确划定的净吸收和射流抑制刺激属性。而且,这种淘汰赛啮齿动物模型有助于理解MATE1等射流转运蛋白的作用,BCRP, MRP2, PgP除了BSEP微管的流出(¹⁸F] LCATD。

我们可以推测,如果实验的目的是为了确定药物是否有潜力DDI,连续血液灌注的试验性药物剂量和/或升级可能会提供更多的信息。然而,由于局限性改变示踪剂引起的代谢和转运蛋白表达试验药物的管理,以及降低血液流动由于麻醉过程可能需要考虑。

5。结论

总之,我们已经表明,肝PET示踪的间隙(¹⁸F] LCATD(之前体外特征)(6)]明显修改体内,在临床前模型(老鼠),共同服用利福霉素的SV和钠fusidate,这是导致临床相关的吸收的抑制和微管的肝脏转运蛋白。

自(¹⁸F] LCATD可以很容易地在一个标准的完全自动化的辐射合成模块(6在任何宠物放射化学实验室(甚至在non-PET-specialised工业环境中)从商用水¹⁸F]氟化的解决方案,我们预计,这种示踪剂可以方便地用于临床实验药物的安全性评价在药物开发的早期阶段。此外,胆汁等酸类似物的使用(¹⁸F] LCATD,经由胆汁酸转运蛋白NTCP BSEP、可以测试诊断代理,选择非常短暂的¹¹C] cholylsarcosine成像患者病理生理肝条件。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

Pradeep沙玛和查尔斯·s·爱尔摩员工阿斯利康有限公司,英国。

确认

补充材料

支持信息包括radio-HPLC胆汁提取物(图S1)的分析;的experimentalprotocol辐射合成的(¹⁸F] LCATD模块配置(。doc文件)(图S2);高效液相色谱coinjectionwith LCATD S3(图);和可视化的roi(图S4)。旋转roi Video_ROIs.wmv呈现在电影文件。(补充材料)

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