Dax1KO-ESCs 2我文化的建立。(一)示意图Cas9 / sgRNA目标站点的鼠标Dax1基因位点。sgRNA-targeting序列强调,PAM序列是用红色标注的。(b)的慢病毒为基础的双重U6-sgRNA表达式盒式结构示意图EFS-zeocin的磁带。(c) Dax1和肌动蛋白的表达受到免疫印迹检测。(d) Dax1 cDNA克隆到表达载体携带一个CAG启动子和转录单位内IRES与嘌呤霉素抗性基因。(e) Dax1-null殖民地生活/血清和2我条件下筛选。