使用人类脐带间充质干细胞治疗大鼠模型的Autoimmune-Induced卵巢功能早衰

文摘

卵巢功能早衰(POF)是女性不孕的主要原因之一,虽然它的原因是复杂多样的,自身免疫缺陷可能参与其中。人类脐带间充质干细胞(UCMSCs)可以用于组织再生和修复。因此,本研究旨在确定的角色UCMSCs免疫因素POF的老鼠。在这项研究中,不同浓度的UCMSCs注入诱导POF老鼠。卵巢功能检查评估发情周期卵泡形态、荷尔蒙分泌,和颗粒细胞的增殖和凋亡。我们的研究结果表明,老鼠恢复正常的发情周期和卵泡发展是UCMSCs移植后显著提高。此外,血清浓度17-estradiol (E2)、孕酮(P4),和她们血液中的抗苗勒氏管激素(抗苗勒氏管激素)治疗有了明显的提高。移植UCMSCs也减少了颗粒细胞的凋亡,促进了颗粒细胞的增殖。所有的这些改进是剂量依赖性。此外,相关的基因表达的结果表明,移植人类UCMSCs调节bcl - 2的表达,抗苗勒氏管激素,FSHR POF卵巢的老鼠和表达下调caspase-3的表达。 These results further validated the potential mechanisms of promoting the release of cell growth factors and enhancing tissue regeneration and provide a theoretical basis for the clinical application of stem cells in the treatment of premature ovarian failure.

1。介绍

之前报道,许多女性患有卵巢功能早衰(POF)在四十岁之前,伴随的闭经、卵巢萎缩,低雌激素水平,高水平的促性腺激素(1- - - - - -4]。POF是由多种因素造成的,包括传统缺陷、自身免疫和环境毒性(5,6]。先前的研究表明,大约有10%到30%的POF障碍是由于自身免疫机制(7]。自身免疫性卵巢疾病的病理特征(AOD)包括炎症、萎缩,血清自身抗体卵巢抗原(8]。因此,POF模型建立了使用自身免疫性卵巢抗原注射到大鼠卵巢炎症。POF的发病率有增加的趋势,近年来,年轻的女人受苦。最近,妇女健康倡议(WHI)已经表明,传统的用激素替代疗法(HRT)治疗可能增加乳腺癌的发病率,子宫内膜癌,心血管疾病和中风9]。因此,它是至关重要的,找到一个安全的治疗POF。

干细胞有可能分化成多种功能细胞(10),已经使用在许多临床治疗各种疾病,包括心肌梗死(11)、神经系统疾病(12),和糖尿病(13]。从不同tissues-including骨髓干细胞,羊水,脂肪软组织长期不孕和卵巢损伤起到治疗作用[14- - - - - -16]。脐cord-derived间充质干细胞(UCMSCs)的所有特点常见的间充质干细胞(17),容易获得和文化体外,增殖能力强和低免疫原性(18]。UCMSCs优于骨髓和血液间充质干细胞的材料来源和运输保护(19,20.]。研究已经表明,他们能够成功到达卵巢和玩一些功能重要的角色。此外,使用它们可以抑制基质分泌生长因子(细胞凋亡的21- - - - - -23]。然而,确切的保护角色UCMSCs受损组织尚不清楚。

在目前的研究中,我们建立了POF的老鼠模型通过将卵巢抗原注入大鼠皮下注射,通过尾静脉移植UCMSCs,我们证实了他们的使用作为一种细胞疗法治疗POF工具,我们证明了治疗效果是符合UCMSC浓度增加。在这项研究中,我们初步探讨可能的机制(s) UCSSCs改善卵巢功能,和我们的研究结果提供了理论依据的干细胞临床应用POF的治疗。

2。材料和方法

2.1。动物

一百二十名女性specific-pathogen-free——(SPF)年级Sprague-Dawley (SD)大鼠8周的年龄被用于这项研究从Qinglongshan动物饲养农场购买后(中国南京)。所有动物处理程序进行了动物福利委员会批准的协议下南京农业大学。

2.2。隔离和UCMSCs文化

UCMSCs准备(aStem-M-POF™)和亚洲提供的相关材料和样本干细胞再生药业有限公司,有限公司在液氮存储后,我们解冻UCMSCs 37°C水浴和快速离心机在1000转/分钟五分钟,然后转移到细胞培养皿中。的αmem基础培养基含10%胎牛血清所取代,这些细胞被培养12 h和更换,以及独立的细胞被移除。鉴定间充质干细胞,流式细胞术,CD14 CD19、CD34、CD45、CD73, CD90、CD105。体外诱导分化的间充质干细胞成骨分化,包括脂肪形成的差异化,chondrogenic分化。识别后,我们改变了液体每两天,观察细胞的形态和生长在倒置显微镜下。细胞融合程度80% - -90%时,质量是消化与TrypLE 37°C 5分钟,并在显微镜下观察细胞的形态。当细胞圆形,准备离开这个瓶子墙,我们立即终止消化与等量的媒介,和管道被轻轻反复吹,这样细胞被完全分离;单个细胞悬液然后准备和统计。我们在1000转/分钟离心细胞5分钟,取出上层清液,添加新的PBS调整细胞所需的浓度。

2.3。卵巢抗原

老鼠的卵巢组织收集、重,与生理盐水冲洗,粉碎和研磨成匀浆Tris-HCl缓冲区。为了释放卵巢蛋白从卵巢组织,我们进行超声波粉碎的振幅14微米低温5分钟(冰)然后离心机匀浆低温(4000转/分钟,15分钟;10000转/分钟,5分钟)。上层清液被删除,调整浓度,使卵巢组织包含20毫克每0.1毫升的液体。我们整个卵巢蛋白作为抗原用于将来使用和混合弗氏佐剂在使用它(24]。

2.4。POF老鼠模型

建立autoimmune-induced POF在老鼠模型,120名健康女性大鼠8周的年龄被随机分为对照组( )和模型组( )。模型组的老鼠被皮下注射免疫0.35毫升的卵巢抗原3次,每隔10天。在第一免疫,等量的弗氏完全佐剂是离心机的添加到上层的卵巢组织,和等量的弗氏不完全佐剂是添加到上层清液离心机卵巢组织的第二个和第三个免疫(25,26]。

2.5。干细胞移植

卵巢抗原注射两周后,大鼠表现出正常的发情周期和稳定的激素水平被选为空白对照组没有处理。然后我们随机将60大鼠模型组分成4组(组A, B, C和D)尾静脉注射,每组15个老鼠。A组是对照组(POF + NS),接收尾静脉注射1毫升的PBS。组B (POF +低剂量),C (POF +中等剂量)、D (POF +高剂量)注射UCMSCs在细胞的浓度 , ,或 尾静脉,分别27]。

2.6。考试的发情周期

大鼠的正常发情周期包括以下4个阶段:发情前期,发情,metestrus,间情期。我们确定阶段基于白细胞的存在与否,cornified上皮细胞和有核上皮细胞。阴道细胞用生理盐水洗净,转移到载玻片,空气干燥,沾染了染色染料溶液。与UCMSCs第三免疫和治疗后,我们观察到大鼠阴道涂片每日2周,包括至少2个正常的发情周期(28]。

2.7。卵泡数和形态学分析

两周后造型,确认我们的POF造型是否成功,我们观察到卵泡的形态特征。5大鼠对照组和模型组是随机挑选的,和在乙醚麻醉动物安乐死。卵巢我们收集在4%多聚甲醛固定24小时,由一系列分离乙醇脱水,二甲苯玻化,嵌入在石蜡和嵌入在石蜡。石蜡块连续切割的厚度是5μ米,每片和部分被苏木精和伊红染色())。经过3周的治疗,动物安乐死在麻醉下,卵巢被收集和准备组织学检查,我们在荧光显微镜下观察到的部分。根据我们之前的研究和引用,我们分类作为原始卵泡,小学,中学,早期窦的,排卵期前的(29日- - - - - -31日]。

2.8。激素测定

评估血清E2水平、P4和抗苗勒氏管激素,老鼠在麻醉下眼睑穿刺,造型和UCMSC移植后血液收集,血样离心机 10分钟。血清是储存在−20°C的生化指标测量。血清E2水平、P4和抗苗勒氏管激素测定与ELISA试剂盒(上海新帆生物科技有限公司)根据制造商提供的说明。的敏感性分析是3 ng / L, 1μg / L, E2 6 pg / mL, P4,分别和抗苗勒氏管激素。intra-assay和interassay变异系数小于10%和15%,分别对E2, P4和抗苗勒氏管激素。

2.9。细胞核抗原的免疫组织化学染色

我们发现卵巢组织细胞的增殖的细胞增殖细胞核抗原免疫组织化学与免疫组织化学南非广播公司测试方法。石蜡部分由坚持组织显微镜载玻片,脱蜡、水化后,我们与PBS洗部分3次5分钟。抗原热修复10%柠檬酸三钠的。冷却到室温后,部分与PBS 5分钟洗3次。我们处理的新鲜3% H₂O₂PBS和动摇了部分30分钟去除内源性过氧化氢酶。在PBS摇晃后,正常山羊血清阻断的解决方案是添加一滴一滴地在室温1小时。我们删除了多余的液体和添加1抗体和孵化部分一夜之间在4°C。在PBS摇晃后,添加生物素化的二次抗体是一滴一滴地,部分被孵化在室温下2小时。在PBS摇晃之后,我们添加试剂南非广播公司和孵化1小时在室温下的部分。在PBS摇晃之后,我们允许开发使用涂颜色开发工具包。最后,我们用苏木精复染色2分钟,然后用盐酸酒精分化。我们最终观察到荧光显微镜的部分。

2.10。细胞凋亡检测

我们发现组织化学地支离破碎DNA通过使用TUNEL原位细胞死亡化验设备。Fluorescein-labeled核苷酸原位合并到3凋亡细胞的DNA链断裂。根据指令,石蜡部分在二甲苯脱蜡(两次,每次5分钟),我们逐渐水化部分与乙醇(100%,90%,80%,和75%连续)。幻灯片与PBS 5分钟洗3次,我们用蛋白酶K孵化20分钟37°C。五十μL (TdT)酶反应混合物添加到样本,和整个凝块在黑暗中孕育了30分钟37°C在湿润的气氛中。我们在PBS 5分钟洗凝结物,streptavidin-fluorescein试剂添加到部分,培养他们在黑暗中为1小时37°C在湿润的气氛中。与PBS洗涤3次之后,原子核与DAPI染色5分钟,凋亡细胞在卵巢染色绿色(32]。我们用荧光显微镜观察到的部分。

2.11。中存在

在卵巢组织总RNA提取使用试剂盒互补脱氧核糖核酸合成试剂根据抗苗勒氏管激素,bcl - 2, caspase-3, FSHR基因序列在基因库。我们设计引物和探针(表1)使用总理5.0软件,引物被TSINGKE合成生物技术有限公司有限公司中存在放大进行了使用AceQ®qPCR SYBR®绿色主人混合设备和ABI 7500实时PCR系统使用常见的抗苗勒氏管激素,bcl - 2, caspase-3, FSHR cDNA作为模板。我们使用了GAPDH基因作为内部参考和2^{- - - - - -ΔΔct}方法分析基因的相对表达。

2.12。统计分析

数据使用SPSS 23.0进行分析。卵泡数表示为 (SD)和分析学生的 - - - - - -测试和单向方差分析。多组对比分析了使用1路的方差分析。两组独立的数据进行了分析 - - - - - -测试和数据具有统计上的显著差异 。

3所示。结果

3.1。人类UCMSCs的表征

UCMSCs是小圆细胞逐渐成为文化成为大梭状回,多边形,纺锤形。当培养,直到第三天,大多数细胞的形态成为梭状(图1 (b))。表面的分子表达UCMSCs使用流式细胞仪检测,结果表明高表达CD73 / CD90 CD105(> 95%)和低表达水平的CD14 / CD19 / CD34、CD45 / HLA-DR(< 2%)(图1(一))。我们还证明了UCMSCs仍然保留了间充质干细胞的表面标志特征。UCMSCs的多向分化能力鉴定是由体外诱导,这些结果表明,UCMSCs可以分化为成骨细胞、脂肪细胞、软骨细胞(数字1 (c)- - - - - -1 (e))。这表明UCMSCs多向分化的潜能。

3.2。卵巢抗原注射导致老鼠的发情周期紊乱

卵巢抗原注射后,每组大鼠的动情周期检查每日2周,及其模式如图2(一个)。循环异常的程度(I-IV)分类如下:I-normal;II-regular与缩短发情周期;III-irregular周期,持续发情或长期发情;和IV-no周期性。在对照组,83.3%的老鼠正常发情周期,而87.5%的大鼠模型组有经验的发情周期紊乱,其中63.3%没有正常发情周期性(图2 (b))。这些结果表明,卵巢抗原注射导致老鼠发情周期的紊乱。

3.3。卵巢抗原注射后血清激素水平的变化

卵巢抗原注射,两周后我们获得血液样本对照组和模型组大鼠的三分之一。血清E2水平( ),P4 ( ),和抗苗勒氏管激素( )在模型组相对于对照组显著降低(数据吗3(一个)- - - - - -3 (c)分别)。这些结果表明,我们成功建立了POF动物模型。

3.4。卵巢抗原对卵泡发育的影响

对照组的卵巢结构完整,发育良好。我们观察各级卵泡和黄体。集群的原始卵泡中可以观察到大脑皮层的表面层;有大量的毛囊深层的皮层,透明带和放射冠围绕卵母细胞包围,逐渐出现卵泡腔,积云和卵泡膜,可以观察到大型成熟卵泡卵巢的表面(图附近4(a))。观察卵巢组织形态学显示POF集团降低了卵泡的数量在每个发展阶段;尽管集群原始卵泡也可以观察到,生长和成熟卵泡的数量显著降低,颗粒细胞减少,毛囊nonfull圆的形状,显示萎缩卵巢(图4(b))。

3.5。移植UCMSCs提高POF老鼠的发情周期

UCMSCs移植后,我们检查了每组大鼠的动情周期在2周内,我们指出,93.3%的空白控制老鼠显示正常的发情周期。相比之下,只有20.0%的车辆控制组的老鼠显示,移植后常规周期的UCMSCs(图2 (c))。低剂量组中,33.3%的老鼠显示,移植后常规循环的UCMSCs(图2 (c)),而在中等剂量组,66.6%的老鼠显示移植后常规循环(图2 (c))。只有86.6%的老鼠服用高剂量显示移植后常规周期(图2 (c))。与汽车相比对照组,正常周期大鼠的数量中等剂量和高剂量组显著增加( )。正常雌性大鼠正常发情周期,持续4到5天,包括发情前期、发情,metestrus,间情期(31日]。第二周发情周期检测,发现发情周期的法律越来越明显;也就是说,法律移植后发情周期的逐渐恢复。结果表明,发情周期的不规则UCMSC移植后明显改善。

3.6。UCMSC移植后卵巢组织进行病理组织学检查

我们对所有子组进行组织学检查评估卵巢组织效果(数字4(c) -4(g))。健康观察卵巢含有大量的健康毛囊在所有阶段,包括原始卵泡和初级卵泡(图4(a - 1)),次级卵泡(图4(a)),窦的毛囊(图4(a - 3))和黄体如图4。相比之下,车辆的卵巢对照组显示卵巢萎缩,并在每个发展阶段的健康毛囊的数量减少而不通的卵泡增加(图4(d))。相比之下,与UCMSCs移植后大鼠的卵巢结构有所改善。低剂量组有更少的毛囊,部分闭锁,黄体,和更少的成熟卵泡(图4(e))。我们观察到相对完整的中、高剂量组卵巢结构发达,可见各级卵泡,有更多黄体和成熟大卵泡(数字4(f)和4(g))。相比,当我们使用相同的卵泡卵泡计数的统计分类方法,结果表明,原始卵泡的数量,初级毛囊,成熟的卵泡和黄体车辆对照组显著低于健康控制大鼠( ),进一步验证了我们的模型的成功。原始卵泡和初级卵泡的数量在低剂量组显著降低( ),并与对照组,原始卵泡的数量,初级毛囊,成熟的卵泡和黄体高剂量组显著增加( )。然而,没有观察到显著差异群体之间的次级卵泡的数量(表2)。

3.7。移植POF UCMSCs改善激素分泌的老鼠

UCMSCs经过2周的移植,我们获得各组大鼠的血液样本,分析了UCMSC移植对激素分泌的影响(E2、P4和抗苗勒氏管激素)(数据5(一个)- - - - - -5 (c))。与汽车相比对照组,血清E2水平,P4,抗苗勒氏管激素在中、高剂量组显著增加UCMSC移植后( )。低剂量组的激素水平没有显著高于对照组。与健康的空白控制老鼠相比,有显著差异在激素含量低剂量组( )。与高剂量组相比,有显著差异E2内容( ),但没有差别在P4和抗苗勒氏管激素的含量。有显著差异在P4和抗苗勒氏管激素内容之间的空白对照组和中等剂量组( )。我们的研究结果表明,UCMSCs提升提高E2的移植,P4,抗苗勒氏管激素和剂量依赖效应。

3.8。移植POF UCMSCs促进卵巢癌细胞增殖的老鼠

在卵巢组织细胞增殖细胞核抗原免疫组织化学检测到。卵巢抗原注射后,几个增殖细胞中观察到的卵巢组织车辆对照组(图6 (b)),而UCMSCs移植后,卵巢的健康对照组显示细胞增殖(图6(一))。低剂量组的细胞增殖也少(图6 (c));相比之下,卵巢中的细胞增殖显著中等剂量和高剂量组(数据的部分6 (d)和6 (e))。

3.9。UCMSC POF大鼠移植卵巢细胞凋亡减少

我们观察到细胞凋亡在卵巢组织通过TUNEL检测。卵巢抗原注射后,大量的凋亡细胞中观察到的卵巢组织车辆对照组、卵巢的健康对照组显示最健康的毛囊,细胞凋亡并没有显著增加。根据我们的结果,经过2周的UCMSC移植,凋亡细胞的数量(FITC-positive细胞)在卵巢的POF +中等剂量组和POF +高剂量组降低车辆的价格相比对照组(图7)。

3.10。UCMSCs影响卵泡发展基因表达

rt - pcr结果表明抗苗勒氏管激素的表达水平有显著差异,bcl - 2, caspase-3, FSHR mRNA车辆对照组和空白对照组。与车辆对照组相比,bcl - 2 mRNA的表达在所有UCMSC移植组显著增加( )。与POF + NS组相比,抗苗勒氏管激素mRNA的表达在POF +中等剂量组和POF +大剂量组明显增加,而caspase-3 mRNA的表达明显减少( ),和FSHR mRNA表达显著增加在高剂量组( )(图8)。

4所示。讨论

干细胞修复受损组织潜力巨大。在再生医学和组织工程的应用多能细胞,人类胚胎干细胞(HuESCs)已成为一个重要工具人类退化性疾病的治疗。然而,HuESCs极其有限的道德,在临床应用安全。人类间充质干细胞(HuMSCs)也被报道在不可逆转的遗传疾病的治疗是有用的(33]。到目前为止,HuMSCs遗传性疾病的治疗有明显影响在特定的组织和器官,包括糖尿病、脊髓损伤和心脏衰竭(11- - - - - -13]。HuMSCs可以避免其他模式固有的伦理问题和减少免疫被拒绝的可能性大细胞疗法领域的前景。

治疗POF,许多类型的干细胞已被证明对复苏效果,如脂肪干细胞(ADSCs) [34)和人类子宫内膜干细胞(EnSCs) [19]。在目前的研究中,人类脐带间充质干细胞(HuCMSCs)获得和单个细胞悬液制备的尾静脉注入大鼠。HuCMSCs已广泛应用于神经系统疾病和组织再生。此外,没有报告关于UCMSCs治疗后肿瘤形成。然而,干细胞通常用于治疗化疗所致POF。干细胞的治疗效果在自身免疫性创伤性POF,然而,目前尚不清楚。因此,我们的目的是澄清隔绝人类脐带干细胞能否恢复自身免疫性创伤性卵巢功能障碍,探索可能的调节机制(s)的干细胞。

首先,我们使用一个卵巢抗原的皮下注射对大鼠卵巢造成破坏,因此建立一个POF模型。卵巢抗原后的动物模型治疗证明,卵巢功能明显受损,我们决定发情周期和E2,抗苗勒氏管激素,P4激素水平和卵巢组织的病理检查。我们的研究表明,P4的水平,抗苗勒氏管激素,和模型组的血清E2明显低于对照组,而大鼠抗原注射后显示不规则的发情周期。这些结果与POF症状一致。此外,据报道,卵泡发育是内分泌系统的影响31日,35]。这些内分泌失调可能影响卵泡储备和卵泡发育,导致卵巢POF等病态。模型组的卵巢组织显示明显的萎缩,随着正弦信号减少毛囊,闭锁卵泡的数量的增加。卵巢萎缩主要是纤维间质细胞组成的矩阵,减少了卵泡的数量在每一个发展阶段,滤泡黄体化,减少颗粒细胞,nonfull圆的形状。总的来说,卵巢抗原注射对卵巢功能有负面影响,我们证明了POF模型被使用这种方法成功建立。

UCMSC移植后2周,提高POF老鼠的卵巢功能,包括发情周期倾向于变得越来越普通。抗苗勒氏管激素等激素水平E2, P4血液中明显升高。这些数据表明,改善卵巢内分泌功能可能是受到UCMSC移植的影响。然而,我们的数据表明,中等剂量组表现出最高的E2水平而不是从大剂量组明显不同。此外,观察卵巢组织病理学显示健康卵泡数量的增加和减少GC正弦卵泡细胞凋亡在卵巢组织。据报道,卵巢GCs卵母细胞生产中起着关键的作用[36),我们的GC细胞凋亡结果表明UCMSC移植减少GC在大型中等和窦的毛囊细胞凋亡。的抑制效应移植的细胞凋亡UCMSCs GCs在POF老鼠可能促进毛囊的复苏。此外,我们发现UCMSCs对POF老鼠剂量依赖性的影响。我们UCMSC剂量增加,POF老鼠变得更加正常的发情周期特点,和血清雌激素内容也回到了空白对照组水平。病理观察卵巢明显表明卵泡发展中等剂量组和高剂量组优于低剂量组,我们观察到黄体和成熟大滤泡形成。总之,UCMSC移植显示存在剂量依赖的相关性对改善POF大鼠卵巢卵泡发育的影响。

先前的许多研究表明,干细胞可以分化成特定的组织或器官细胞,干细胞可以移植到一个特定的微环境刺激通过公布的生态和细胞生长因子促进周围组织再生(37,38]。以前的研究已经表明HuMenSC可以诱导分化成POF的利基刺激下小鼠卵巢组织如细胞(14]。激素和卵巢细胞因子、生长因子和胞内蛋白都可以调节卵泡增长(39]。所有这些因素可能导致卵巢功能的恢复由UCMSC移植在我们的实验中,但这需要进一步的研究。在我们目前的研究中,我们发现卵泡发展UCMSC移植后得到了改进。细胞增殖也有所改善,特别是在发展中卵泡。的分化UCMSC可能不是直接影响改善卵巢功能。然而,它可能通过改善卵巢的内部环境(40,41]。bcl - 2和caspase-3 2调节细胞凋亡的关键因素。bcl - 2是一个重要的apoptosis-inhibiting基因和通过其编码的蛋白质发挥监管作用。当为bcl - 2蛋白结合时,它可以抑制细胞凋亡引起的各种刺激和损害(42]。半胱天冬酶家族也在介导细胞凋亡中起着重要的作用43]。半胱天冬酶增加Ca的活动^{2 +}/毫克^{2 +}端依赖核酸内切酶,这是受到PARP的负调节的影响,和劈开核小体之间的DNA,引起细胞凋亡(44]。伯灵顿和caspase-3卵泡发育和闭锁[所需30.]。我们的结果显示,移植后的UCMSCs, bcl - 2与caspase-3负相关。我们的数据表明,移植的UCMSCs调节卵巢bcl - 2表达下调和caspase-3 mRNA的表达。我们还发现,原始卵泡数量的增加和初级毛囊可能受到相关生长因子的影响。据报道,促卵泡激素受体减少或功能障碍对FSH刺激卵泡细胞膜不敏感,导致卵泡停止增长和POF [45]。调节卵泡发展取决于当地卵巢生殖内分泌轴和监管因素。抗苗勒氏管激素,调节细胞因子在卵巢,在毛囊的生长起着非常重要的作用,可以抑制毛囊的最初的招聘,并减少FSH毛囊的敏感性通过抑制芳香化酶的活性。在目前的研究中,抗苗勒氏管激素的mRNA表达和FSHR卵巢抗原注射后明显下降。抗苗勒氏管激素的表达被UCMSCs显著调节,FSHR调节只有高剂量组。总的来说,移植的人类UCMSCs调节bcl - 2的表达,抗苗勒氏管激素,FSHR POF卵巢的老鼠和表达下调caspase-3的表达。这些结果进一步验证底层机制,促进细胞生长因子的释放,从而促进组织再生。然而,复苏的说明UCMSCs移植后卵巢功能和监管相关的细胞和细胞因子的确切机制仍然需要进一步的未来的研究。

5。结论

总之,移植的人类UCMSCs提高POF老鼠的卵巢功能障碍引起的自身免疫。UCMSC移植监管POF老鼠的发情周期和改善他们的内分泌功能。它也抑制卵巢细胞的凋亡,促进卵泡发育,调节相关基因的表达。具体机制的影响人类UCMSC POF的治疗仍有待阐明。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者没有利益冲突的披露。

作者的贡献

哲王和魏Quanwei同样这项工作。

确认

作者要感谢莱因霍尔德名誉教授j .晚间生物学系的博士,大学密尔沃基分校,编辑和有用的建议。同时,由于亚洲干细胞再生药业有限公司,有限公司,提供人类脐带间充质干细胞(aStem-M-POF™)。这项研究是由亚洲干细胞再生药业有限公司有限公司和东莞的主要社会科学和技术开发项目,中国(2019507150102149)。

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