口腔颌面部骨组织再生:综述干细胞的应用和新的策略来改善血管化

文摘

骨组织工程技术是一种很有前途的替代使用自体骨移植重建口腔颌面骨缺陷区域。然而,对于成功的骨再生,足够的血管化是一个先决条件。本文提出并讨论了干细胞的应用和新的策略来改善血管化,这可能会导致可行的临床应用。多个来源的干细胞已经调查了骨组织工程。间质血管分数(SVF)人类脂肪组织被认为是一种很有前途的单一来源的异构人口的基本细胞,在别人,成骨和血管生成潜力。增强血管化组织工程移植物可以通过不同的机制:血管长在肉内直接从周围宿主组织植入移植物,亦然,或与此同时。可以增强血管的生成到植入移植物(i)优化支架的材料性质和(2)他们的bioactivation将生长因子或细胞播种。从植入移植物血管长在肉内直接对宿主组织可以通过合并移植物(我)的微血管网络或(ii)微血管片段(MF)。后者可能会刺激血管的生成和结果上的动作,因为他们包含像SVF血管生成的干细胞,以及血管矩阵碎片。两种脂肪tissue-derived SVF和MF细胞来源的临床可行性由于他们可以收获大量应用于一步手术。 During the past years, important advancements of stem cell application and vascularization in bone tissue regeneration have been made. The development of engineered在体外3 d模型模仿骨缺损环境会促进骨组织工程的新策略。未来成功的临床应用需要创新调查增强血管化。

1。介绍

恢复批评-大小的骨缺损患者,手术需要重建。批评-大小的缺陷不会自发愈合或再生超过10%的病人的一生期间失去的骨头(1]。这些骨缺陷可能造成系统性或地方的原因。系统性的条件包括先天性异常(2),一般疾病(3),和药物(4),而当地条件包括炎症(5[]或创伤性损伤,如事故6]或牙科和手术治疗。牙齿治疗,如拔牙(7),和手术治疗方法,如手术切除的良性或恶性肿瘤8),可能会导致巨大的颌骨缺损。

骨移植过程进行重建骨缺陷(9]。在这些外科手术,自体仍被认为是“黄金标准”由于成骨的的基本组合,论述,综合分析属性。然而,自体有一些缺点,例如,施主能级发病率和移植组织的有限。在某些情况下,骨替代品,如移植、异种移植、alloplasts,被用作替代自体骨移植,但这些骨替代品缺乏成骨的,有和血管生成潜力(10]。

不幸的是,理想的骨再生技术和材料还没有被开发出来。然而,最近的事态发展在组织工程导致了新的更好的治疗方案称为“骨组织工程细胞。”在这种方法中,支架与间充质干细胞(msc)和/或osteoprogenitor外部来源的细胞植入骨头缺陷。的体外种子细胞在支架中发挥关键作用,编排在目标站点骨形成的机理。多种技术进行了调查,应用各种干细胞细胞来源和加工协议(11]。此外,不同的支架类型用于携带细胞(12]。

背后的基本原理的应用msc和/或osteoprogenitor细胞在骨形成是他们的关键作用。自然骨形成的预处理和产后发展口腔颌面面积是膜内的执行通过招募骨髓间充质细胞。这些细胞进行成骨细胞的分化和启动新骨形成的缺陷。换句话说,这种方法的目的是通过模仿生物诱导骨再生过程发生在胚胎发生(13,14]。

msc促进骨再生的机制可以由移植细胞的移植到新再生组织,分化为成骨细胞,最终将分泌类骨质和启动矿化(15- - - - - -17]。此外,msc可以提高骨再生间接通过旁分泌的影响,即。分泌的细胞因子和生长因子,如改变坏死因子-α(肿瘤坏死因子-α),血小板源生长因子(PDGF), (il - 1)及il - 6的分泌。这些因素可能招募居民msc分泌再生网站(18,19]。

在骨组织工程细胞,应用msc使用两种不同的方法。第一个方法是直接移植msc和/或osteoprogenitor细胞结合脚手架(外部脚手架)到bone-defected网站,这是一种原位组织工程(20.,21]。使用自体微粒松质骨和骨髓osteoprogenitor细胞的来源和msc。在这种方法中,支架的功能作为一个框架(22]。第二种方法是移植msc孤立(通常从病人),扩大体外播种,足够的三维(3 d)支架(内部支架)和扩散和/或predifferentiated控制培养条件(23]。这样一个脚手架作为载体的细胞和临时矩阵而细胞产生细胞外基质(ECM),骨形成需要(24]。

一个重大的挑战在骨组织工程植入移植的血管化。移植物的生存需要快速和足够的血管化。因为氧气的数量是有限的扩散距离只有~ 150 - 200μ从供应血管、细胞躺除此之外生理边境遭受缺氧(25]。在这种情况下,msc无法生存,因为他们不能适应他们的葡萄糖消耗和不具备必要的糖酵解储备来维持新陈代谢超过三天(26]。新见解强调的重要性与能源相关的细胞代谢所需的氧气和营养,最后细胞生存。再生组织超过200μm超过的能力从组织和营养供应和废物清除,因此,需要一个亲密的血管供应网络(25]。新血管形成以及有效的血液供应是一个先决条件。

本文的目的是展示和讨论干细胞应用的发展,形成血管,和骨再生在口腔颌面地区,强调人的下巴。此外,我们提出新的策略来改善当前的技术,这可能会导致可行的临床应用。

2。干细胞的来源

成体干细胞,间充质干细胞(msc),主要应用于骨组织工程孤立于各种组织。干细胞的临床应用来源口腔颌面地区源自骨髓,脂肪组织(27),和牙科组织(28,29日]。在体外和在活的有机体内动物研究报道了胚胎干细胞的应用(ESCs) [30.- - - - - -32)和诱导多能干细胞(万能)33在骨组织工程中)。然而,这些ESCs和万能提高几个严肃的道德及安全隐患,如畸胎瘤的形成,它继续阻碍临床实现(34]。在图1,干细胞的不同来源和不同阶段的应用进行了说明:未分化,分化初期,或分化。干细胞的不同阶段分类如下:(我)未分化:多功能成人msc、多能的ESCs或万能(2)早期的分化:msc分化对特定的谱系,如成骨的血统(3)分化:专门的细胞,如成骨细胞

临床适用于涉及干细胞的组织工程重点是使用patient-derived(成年人)未分化的干细胞,鉴于终末分化细胞难以扩大体外相对于高增殖干细胞/祖细胞。干细胞的使用也是旨在实现一个完整的生理修复过程,不仅包括MSC-mediated激活骨形成,而且新血管形成。不过,它是关键的重要的禁止不必要的副作用,如畸胎瘤的形成可能发生的ESCs和万能。

在以下,目前的概况在活的有机体内应用干细胞来源。此外,表1概述了最近的临床试验,发表在2015年,1月1日和11月1日,2019年,来自人体干细胞的成功应用。“一个成功应用”被认为是一种重要的测量结果的补充msc。大多数的这些研究调查骨形成作为一个基于摄影测量结果,(锥体束)计算机断层扫描(CT) (CB)、microcomputed断层扫描(CT机),或histomorphometric和/或组织学测量。作为一个未来的方向,这将是有趣的探讨形成血管在这些情况下,自增强血管化预计将与增强成骨效果观察到由于msc的补充。所有的完整概述临床研究应用msc(早些时候被描述35]。

骨髓是第一个源报道含有msc (36]。直到今天,成人骨骨髓来源干细胞(bmsc)是最常见的类型的msc在骨组织工程调查。几个bmsc的成功应用体内在口腔颌面地区已报告(表吗1)。bmsc的应用程序中有两种不同的干预措施:(1)使用骨髓抽出物(集中),整个组织包含bmsc的分数,和(2)的使用在体外培养bmsc(扩大有或没有分化因素)(表1)。集中骨髓相比,吸入noconcentrated送气音似乎有更高的成骨的潜力在活的有机体内(37]。成功的临床试验进行的概述这个细胞来源如表所示1。

几项研究显示,有前景的结果应用bmsc在口腔颌面外科手术区域。上颌窦底高程的一些研究提出histomorphometrical数据显示增加新骨形成3到4个月后比单独使用骨替代传统方法(38,39]。Kaigler等人显示加速骨再生在提取牙齿套接字应用bmsc或明胶海绵相比控制(saline-soaked明胶海绵)40]。巴巴等人进行了一项I / II期临床试验,涉及十牙周炎患者,他们需要外科手术过去不少缺陷,应用骨骨髓来源干细胞与生物可降解3 d-poly-lactic-acid-based脚手架和富含血小板血浆。12个月后,骨缺损临床和放射学相比,显著改善传统牙周手术没有干细胞的应用。这些结果表明成功的临床应用再生牙周组织,包括骨组织(41]。在牙槽裂手术,几个临床试验,主要是案例报告,与bmsc的应用建议可喜的成果,但完整的重建(骨填充)广泛的裂缺陷没有被证明(42,43]。相比之下,Hermund et al。44)显示,骨质密度和高度之间没有区别对照组(贪污的混合物组成的牛骨替代和自体骨颗粒)和测试组(相同的支架,补充检索的bmsc的结节和培养在体外上颌窦底高程后)。

不幸的是,综合应用具有局限性:骨髓愿望是捐献者的入侵而痛苦的过程,和细胞检索是稀缺的,因为人类骨髓BMSC的频率相当低(0.001% - -0.01%)45]。因此,新鲜骨髓吸入可能导致过低的数量和浓度bmsc施加实质性的成骨的影响(37]。因此,在体外文化扩张需要获得足够数量的细胞,临床应用(46]。这个细胞扩张,然而,需要做一个艰难的,昂贵的,耗时的良好生产规范(GMP)实验室。其他限制包含在细胞增殖和分化能力扩张的损失(47,48)和病原体污染的风险增加和遗传转化49,50]。最后但并非最不重要,,增殖,分化潜力的bmsc随年龄增加而下降(51]。

脂肪tissue-derived间充质干细胞(对asc)在成人干细胞疗法开了有吸引力的新的可能性。对asc显示很多相似之处bmsc对表面标记资料,multilineage,和增长潜力的属性(52]。然而,与其他来源(骨髓、牙科和胚),脂肪组织具有以下优点:(a)它有一个高茎cell-to-volume比率[53,54),(b)干细胞频率老化(更敏感55),(c)收获可以很容易地根据需要,高档和(d),它可以处理在短时间内获得高纯度ASC准备(居住在间质血管分数(SVF))。此外,SVF附加内的多功能细胞支架材料非常快,繁殖迅速,可以分化向在其他成骨的血统(56,57]。

举行了和他的同事们制定的概念对asc一步手术(OSP)应用骨再生的组织(58]。收获后脂肪组织的外科医生,对asc SVF-containing可以播种在支架材料没有文化扩张。然后ASC脚手架构造可以植入,所有在同一手术。这一步手术的明显的优势不仅是其patient-friendliness也降低成本,因为第二次外科手术和昂贵的在体外培养措施是可以避免的。

多个在体外的研究取得了重要进步对asc在骨组织工程中的应用(32]。最近,在临床试验中获得的结果也成功(表1)。第一个临床试验的结果对asc评估的应用表明,它是一个可行的,安全,有效的治疗选项在颚骨再生59]。王子等人在split-mouth设计表明,患者上颌窦底高程对asc牙科植体放置应用程序受益的。骨和骨样的百分比较高研究活检(SVF补充不同的陶瓷骨替代品)比在控制活检(陶瓷只侧一侧)(54)。SVF补充的累加效应是独立的骨替代品β磷酸三钙或双相磷酸钙(羟基磷灰石/磷酸三钙)59]。Khojasteh et al。60对asc)使用来自颊脂肪垫,在体外耕地,播种软化牛骨矿物质(DBBM)和自体骨(AB),在牙槽裂重建。锥beam-computed断层摄影术治疗后6个月显示更多的骨形成测试组对asc的补充。Castillo-Cardiel et al。61年)治疗下颌骨髁突骨折与腹部对asc的检索在体外培养和注射骨折部位。12周后手术治疗,补充的测试组对asc骨化率高了37%相比传统治疗(对照组)。SVF收获到目前为止的一个缺点是它是在全身麻醉下进行,需要住院治疗(短)。同时,术后护理和投诉都被认为。但是,使用局部麻醉临床研究正在进行,这可能会扩大这种术中方法的适用性。

牙科组织提供一些干细胞的数量,包括纸浆的清新,和成人牙齿牙周韧带,牙科卵泡(62年]。牙科tissue-derived干细胞(DSCs)通用的间充质干细胞的特性,如自我更新和multilineage分化成chondrogenic,成骨、脂肪形成的细胞谱系。此外,DSCs也显示神经源性和血管生成潜力(62年]。已经证明DSCs不仅有能力生成的牙齿组织如牙本质/ pulp-like复合物还骨组织[63年,64年]。干细胞human-exfoliated乳牙展览相比,可以更容易获得较高的扩散率和bmsc [65年]。

然而,发表临床研究稀缺(表与成功的结果1)。D '阿基诺等。66年)整体组织分数从骨膜组织使用机械disaggration,紧随其后的是浸泡的胶原蛋白海绵在生成的分类组织。钙化在牙套保护增强测试组和DSCs补充胶原蛋白海绵,相比对照组与卸载胶原蛋白海绵。蒙蒂et al。67年)使用从牙髓组织分数,紧随其后的是浸泡的胶原蛋白海绵类似的临床模型。移植后60天,测试站点(DSCs)补充显示更强的防辐射相比,控制站点(胶原蛋白海绵)。组织学分析显示与哈弗斯系统分化良好型的骨形成在测试网站更多的骨形成。Baena et al。68年)使用整个组织分数从骨膜组织播种在保利(lactic-co-glycolic酸)(PLGA)支架在上颌窦底高程与羟基磷灰石(HA)手术。他们表现出增加的比例至关重要的矿化组织两个periosteum-derived干细胞治疗组和PGLA /公顷,对对照组PGLA /公顷或软化牛骨矿物质,经组织学分析和影像学评估在6个月后治疗。Ferrarotti et al。69年]显示临床成功应用后牙髓干细胞在胶原海绵过去牙周再生治疗后一年。

问题仍然开放,尽管是否低数量的细胞,自体SCs的DSCs可能成为一个有吸引力的来源骨再生。正在调查这个来源至少有十多个新试验进行中(http://www.clinicaltrials.gov)。

3所示。在骨组织再生血管化

成功的骨组织再生需要的快速灌注和集成植入移植物与受体血管。新血管形成是通过血管生成和血管生成。血管生成是最初被描述为新创血管形成angioblastic祖细胞的分化和装配在胚胎发生(70年]。然而,最近,产后血管生成变得明显,成人新血管形成的主要因素。这种类型的产后血管生成被定义为的循环内皮祖细胞(epc)微血管微血管内皮的新发展(71年,72年]。

内皮祖细胞主要位于骨髓的干细胞小生境,以及一些人群外周血中循环。当发生伤害或组织损伤时,内皮祖细胞被认为动员从骨髓进入血液循环和组织修复家园网站的指导下信号如缺氧、生长因子、化学引诱物的信号,和趋化因子。内皮祖细胞入侵和在同一网站迁移和分化为成熟内皮细胞(ECs)和/或通过旁分泌调节既存的ECs juxtacrine信号(73年]。

血管生成是指新血管从先前存在的血管。这个过程的第一步是激活宿主微脉管系统的植入网站通过血管生成生长因子,如血管内皮生长因子(VEGF)或碱性纤维母细胞生长因子(74年]。这些因素可能来自不同的来源。他们可能是由宿主细胞组织本身由于植入过程组织损伤或炎症反应的结果植入贪污。

血管的内皮细胞衬里,允许新血管的形成,现有的小血管的萌芽75年,76年]。血管生成激活后,他们开始产生基质金属蛋白酶,导致基底膜的降解(77年]。这是先决条件的后续迁移到周围间质,形态反映的血管芽和芽的形成。芽逐步成长为植入组织构造和彼此互连开发新blood-perfused微血管网络(78年]。墙上的这些网络终于稳定生产的细胞外基质化合物和平滑肌细胞或周的招聘79年]。

因此,成功的植入移植通过血管生成和血管生成的血管化是依赖于各种体液和细胞机制的协调序列,特别是主机之间的密切互动组织和植入移植物。这个过程允许通过扩展和重构组织生长和修复的血管网络(73年,80年]。

4所示。骨组织工程中血管化策略

几种方法改善血管化,通过增强血管生成和血管生成,植入移植目前的调查。经典的血管化策略专注于刺激血管的生成到周围宿主组织植入移植(i)优化支架的材料性质和(2)bioactivation运载系统的生长因子或细胞播种。然而,新血管内皮细胞迁移和生理生长已经证明不超过~ 5μm / h (81年]。因此,这些方法面临的问题足够形成血管移植物植入需要一个长时间的与主要组织损失由于缺氧条件。

为了克服这个问题,从植入移植物血管长在肉内直接对宿主组织提出了补充从宿主组织血管生成的植入移植物。这可以通过将移植物与(i)的微血管网络可以直接与血液灌注通过开发互联(融合)主机微脉管系统或(ii)微血管碎片后,迅速发展成微血管网络传输到主机组织(图2)。在下面,概述当前和未来的可能性的角度对上述策略来增强血管化在骨组织工程。

4.1。支架的材料属性

支架材料的特性移植的血管生成中发挥重要作用。许多不同的骨组织工程支架材料进行了研究在活的有机体内和在体外,如聚合物、生物活性陶瓷和混合动力车(复合材料)12]。

支架材料的化学成分被证明影响着床部位的血管生成过程。例如,保利(lactic-co-glycolic酸)(PLGA),羟磷灰石(HA),和牙本质支架植入后轻微的炎症反应,诱导血管生成反应和良好的血管化的移植后14天78年,82年]。相比之下,collagen-chitosan-hydroxyapatite水凝胶支架相同的体系结构诱发严重的炎症,导致周围组织中的凋亡细胞死亡和一个完全缺乏灶新成立的微血管78年]。聚氨酯支架,它表现出一个优秀的在活的有机体内为特征的生物相容性,已被证明是一个贫穷的血管化(83年]。这些发现表明,支架材料略促炎的属性可能会刺激血管生成宿主组织应对支架植入材料。

生物材料研究了改善支架的组合属性。复合材料由两个或两个以上的材料的组合与不同的属性,每个显示特定的只有一些优点和缺点。Polymer-ceramic复合材料已成功地骨再生,超过单独使用这些材料时,获得的结果显示改进机械和生物的结果(84年]。的组合PLGA(聚丙交酯和polyglycolide)和HA或βtcp允许克服问题由于PLGA的酸性降解产物,可能引起组织坏死和负面影响neoangiogenesis,自哈βtcp中和酸性降解产物的PLGA (85年]。

不仅化学成分而且支架的结构是足够的血管化的一个重要决定因素(86年]。它应该包含分布式的、相互关联的毛孔和显示高孔隙度,以确保细胞渗透,消除血管的生成、营养扩散,和废物产品(87年]。另一个关键组件,允许适当的细胞殖民(细胞支架内绑定到配体)是平均孔隙大小88年]。最低推荐支架孔隙大小是100μ米(89年)基于赫伯特等人的早期作品。90年),但随后的研究表明更好的骨植入物 (91年,92年]。相对较大的孔隙有利于直接骨生成,因为它们允许血管化和高氧化,而小毛孔导致软骨内骨化,虽然骨头长在肉内的类型取决于生物材料和几何的毛孔。然而,在孔隙度和孔隙大小设置一个上限约束与力学性能(86年,93年]。

4.2。Bioactivation将生长因子或细胞支架的播种

一个常见的策略来改善支架血管化是血管生成宿主组织的刺激反应植入部位血管生成生长因子的结合。为此,VEGF (94年,95年),基本成纤维细胞生长因子(96年),血小板源生长因子(97年),血管生成素(98年)是最常用的因素。然而,有持续的担忧多种细胞因子和交付成本,潜在的毒性,和次优内皮迁移在大型组织移植。

另一个需要考虑的重要方面是,许多血管生成生长因子,细胞自发发布的与压力相关的条件下,包括缺氧。由于缺氧,bone-derived osteoblast-like细胞以及骨髓间充质干细胞(bmsc)已知解放等生长因子VEGF。基于这种细胞机制,加速血管化支架也通过播种与分化组织细胞支架(99年,One hundred.[]或多功能干细胞101年,102年]。尽管bmsc已知有可能分化成血管细胞的定义,它已经表明,血管化在14天的观察到的加速度在活的有机体内更强烈地依赖于解放VEGF的种子细胞分化潜能的bmsc [99年]。尽管有明显的加速形成血管细胞播种后,Tavassol et al。One hundred.)表明,大多数种子osteoblast-like细胞死后14天的观察期间内在活的有机体内植入的PGLA支架与osteoblast-like细胞播种。这表明这个方法本身并不足以加速血管化,确保种子细胞的生存。瞿et al。103年)表明,转基因细胞可以有一个长期的血管生成生长因子的表达,独立于他们的缺氧状态。他们用碱性纤维母细胞生长因子转染bmsc播种在复合支架模型大鼠颅盖的批评-大小的缺陷。它加速形成血管和骨再生在4和8周与控制。然而,它也表明,血管生成生长因子VEGF的过度表达可能导致全球减少骨骼数量、组成的薄骨小梁不成熟的矩阵(104年]。

4.3。预成型的微血管网络

不同的方法prevascularize贪污在体外播种的vessel-forming细胞支架正在接受调查。播种到支架后,这些细胞快速组装成不成熟的微血管。与上述方法专注于刺激血管的生成到植入移植物,prevascularization旨在生成预成型的微血管网络在移植前注入。植入后,这些网络可以被结合与血液灌注迅速与周围宿主微脉管系统(80年]。

Proangiogenic细胞,如内皮细胞,内皮祖细胞,和壁画细胞和平滑肌细胞周围的周,被广泛用作细胞来源。等细胞来源包括成体干细胞,多能间充质干细胞从骨髓105年,106年)或脂肪组织(106年- - - - - -108年),诱导多能干细胞(109年]也认为是适合这个目的的来源。

最初,内皮细胞和内皮祖细胞用于血管的形成,但这导致血管与次优的寿命(110年]。由于数量有限的移植血管细胞存活很长时间,neovasculature未能招募义务血管周的细胞包括壁画细胞,因此不像本地人,多层微血管成熟(111年]。为了克服这个问题,改善生存和增殖的基因转染血管细胞被建议使用(110年,112年]。然而,这种基因操纵熊一个致癌风险(113年]。

一个更好的选择被调查似乎与壁画细胞内皮细胞的共培养。这些细胞是至关重要的稳定,成熟,和新成立的微血管的长期生存。小池百合子等。114年]证明了稳定的微血管网络存活一年在活的有机体内通过共培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)壁画前体细胞。这与微血管和HUVECs工程,后迅速退化60天(110年]。然而,细胞prevascularization方法的局限性,这些方法通常需要复杂而耗时的细胞分离和培养过程。除此之外,他们的安全质量和成功是高度敏感的细胞分离,应用播种策略和种子细胞的数量。多项研究报道了一个关键的最佳比值血管细胞和组织细胞内的构造(115年,116年]。因此,很难想象他们的临床应用。

4.4。微血管片段(MF)

Prevascularization方法通过细胞播种使用细胞隔离可能会导致不确定的结果。此外,使用正确的细胞比例难以确定。这导致了一个新颖的概念利用微血管片段(MF)的使用从脂肪组织中分离出来了短(5 - 10分钟)消化(117年- - - - - -119年]。MF是小动脉的的混合物、毛细血管和小静脉的血管段(120年]。几项研究成功孤立MF从老鼠117年,118年和人类119年在动物身上),移植脂肪tissue-derived MF。这些研究进一步证明了这些碎片迅速发展稳定,blood-perfused微血管网络植入后进入宿主组织。在文化、MF释放proangiogenic因素已经被证明血管内皮生长因子(VEGF)和碱性纤维母细胞生长因子(bFGF) [121年,122年]。此外,微血管片段含有干细胞抗原(Sca) 1 / VEGFR-2-positive内皮祖细胞和间充质干细胞表达共同的标记,如CD44、CD73, CD90、CD117 [123年]。推测,微血管碎片的血管化潜力高(部分)造成这些干细胞数量。相比上面的描述细胞播种策略来生成在体外预成型的微血管网络,隔离微血管片段的酶消化期要短得多(5 - 10分钟)比单一来源的细胞,不需要复杂和耗时在体外潜伏期。此外,曼氏金融也可以获得患者用一步手术抽脂技术在局部麻醉的情况下(124年]。

然而,曼氏金融采购并不避免使用的监管负担干细胞制剂通过酶消化,这被认为是“超过最低限度操纵”FDA和欧洲的教育津贴。因此,最近,很多工作是机械破坏组织的发展创造microfragmented脂肪组织/ nanofat (MFAT / NFAT)(综述Trivisonno等的研究(125年])。

microfragmentation引人注目的是,发现的脂肪组织,使得微体系结构(细胞外基质与嵌入的间充质干细胞和微血管片段)的脂肪完好但扰乱了大多数成熟的脂肪细胞,表现出显著的血液浓缩vessel-stabilizing周和释放更多的生长因子和细胞因子参与组织修复和再生,通过血管增生明显,相比具有获得SVF [126年]。此外,microfragmented脂肪组织保持强有力的血管生成和抗炎作用127年]。自体移植的机械处理脂肪组织已经成功地用于多种迹象,跨越同化妆品(128年,129年],骨科[130年,131年),直肠病学(132年]。

5。未来的发展方向

未来调查在骨组织工程细胞应用程序应该专注于增强血管化,因为适当的血管化是一个成功的临床骨再生的先决条件。此外,由于现有的人类MSC收获方式的差异和他们是否直接应用没有培养和分离和培养体外除了donor-dependent变异性有关骨形成能力,还需要进一步的调查来规范生产和质量的干细胞治疗应用。

细胞组织工程的一个有前途的未来方向颌骨重建与可行的临床应用是使用基质血管分数(SVF)人类脂肪组织。SVF被认为是一个“单一来源细胞组织工程由于其异构人口的基本细胞,即。,multipotent stem cells and progenitor cells, including endothelial cells, stroma cells, pericytes, preadipocytes, and hematopoietic cells. SVF also contains macrophages, which secrete a multitude of vascular growth factors and cytokines [133年]。

脂肪干细胞(对asc)在SVF附加,增殖,osteogenically区分磷酸钙支架(134年和分泌多种生长因子57]。对asc不仅被证明有成骨的潜力在活的有机体内(59),但还演示了血管生成可能在小鼠骨组织工程应用的关键(135年]。这是支持的在体外观察,对asc SVF分泌多种血管生成和凋亡生长因子(136年],SVF高纯度与CD34 + CD45−细胞。CD34 +细胞能够刺激血管生成和参与新血管形成过程,促进缺血组织的愈合在小鼠模型137年]。此外,它已经表明,如果培养在3 d支架,内皮细胞和基质细胞来源于SVF组装成血管结构,因此积极促进血管化组织工程骨移植和刺激他们的移植在活的有机体内(124年]。

第一个临床试验证实,SVF对asc /增强骨骼和血管形成能力(59,138年]。研究小组(骨替代(磷酸钙)结合SVF /对asc)显示更高的骨量,积极与血管形成与对照组(只有骨替代)上颌窦底高程模型(138年]。CD34免疫组织化学分析,一个标记的内皮细胞和干细胞如内皮祖细胞和造血干细胞,显示更多的CD34 +血管SVF-supplemented组(SVF +)比骨头substitute-only集团(SVF)(图3),表明proangiogenic SVF的效果。此外,vasculogenic SVF一直显示的效果在体外(139年]。

进一步的调查也应该解决的可能性提高成骨的能力对asc治疗时间内的“一步手术。”在体外结果对asc短(分钟)孵化与低剂量的骨形成protein-2 (BMP-2)在播种前支架上的细胞(βtcp和BCP)展示出了有前景的结果;即。,proliferation and osteogenic differentiation were enhanced by BMP-2 pretreatment, with concomitant downregulation of adipogenic gene expression. Stimulated gene expression of the osteogenic markers core binding factor alpha 1, collagen-1, osteonectin, and osteocalcin in the seeded ASCs was observed [134年]。

最近,一些研究表明,脂肪tissue-derived微血管片段(MF)显示血管化潜力高于SVF [118年,126年]。然而,进一步在体外和在活的有机体内研究需要确认这些发现。MF和MFAT / NFAT变异的脂肪组织可能刺激未来发展特别是同源应用以来,监管负担可以避免和血管生成,抗炎和再生生长因子分泌属性出现至少平等但可能甚至高于collagenase-digested SVF [126年,127年]。

应用的主要临床效益脂肪tissue-derived SVF, MF或MFAT / NFAT相比其他单细胞来源是本地的基本细胞的混合物可以收获大量一步手术。这使得临床应用脂肪tissue-derived SVF或MF可行,由于其较低的发病率和缩短治疗时间与传统治疗方法相比,如自体骨收获,骨骨髓来源干细胞、内皮细胞。

适当的在体外3 d模型骨缺陷调查细胞骨组织工程技术,特别是血管化,缺乏。这样的模型将增强与宿主细胞之间的相互作用的理解环境骨生成和血管生成。此外,它将促进新血管化策略的可能性。目前利用2维模型在活的有机体内动物模型有一些限制,包括可控性、再现性和灵活性的设计。最近,小说在三维模型的策略是模拟人体生理学研究在体外,包括骨niche-on-a-chip和骨生物反应器(140年]。

6。结论

重要进步了关于干细胞的应用和开发新的策略来改善骨组织工程的血管化。然而,适当的移植血管化,这是一个成功的骨再生的前提,仍被视为一个重大的挑战。人类脂肪组织的使用SVF似乎是一个有前途的来源为骨组织工程由于其异构人口基本细胞骨生成和血管生成。此外,脂肪tissue-derived MF建议作为有前途的细胞来源,由于其正确的原生细胞比率,血管化策略。SVF、MF和MFAT / NFAT与临床治疗方案可行性由于他们可以收获大量一步手术和应用。适当的在体外模型来研究骨组织工程缺乏。工程在体外3 d模型模仿骨缺损环境是至关重要的促进新骨再生策略。成功的骨重建口腔颌面地区,利用骨组织工程技术,需要创新的未来调查关注血管化的增强。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突,关于这篇文章的出版。

作者的贡献

Jenneke Klein-Nulend和恩格尔伯特·A.J.M.舒尔腾同样最后作者。

引用

1. j.p.施密茨”,关键尺寸缺陷作为实验模型craniomandibulofacial骨折不愈合,”临床骨科和相关研究卷,205年,第308 - 299页,1986年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. d·j·g·巴克斯特和m . m .鉴定“发展颌面异常,”研讨会在超声、CT和MRI,32卷,不。6,555 - 568年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. b·l·福斯特,m . s . Ramnitz r . i Gafni et al .,“罕见的骨骼疾病和他们的牙齿、口腔和颅面表现,”牙科研究杂志》卷。93年,7 s-19s, 2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. s . Kuroshima m .佐佐木,t . Sawase”与颚骨坏死:一个文献综述,”口腔生物科学杂志》,卷61,不。2、99 - 104年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. 答:遗体和h分别Takayanagi”,骨细胞在免疫调节中的作用过程中感染,”在免疫病理研讨会第41卷。。5,619 - 626年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. 美国Chukwulebe和c . Hogrefe”面部骨折的诊断和管理。”急诊医学诊所北美,37卷,不。1,第151 - 137页,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. m·g . Araujo和j . Lindhe”维脊拔牙后改变。狗的实验研究”,临床牙周病学杂志,32卷,不。2、212 - 218年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. d . Rolski j . Kostrzewa-Janicka·泽瓦茨基k . Zycińska和e . Mierzwińska-Nastalska”的管理病人颌面部肿瘤手术治疗后,“生物医学研究的国际卷,2016篇文章ID 4045329, 7页,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. j·s·Vorrasi和a . Kolokythas”争议在传统口腔颌面重建。”口腔颌面外科诊所北美卷,29号4、401 - 413年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. g·费尔南德斯•级l·凯勒y Idoux-Gillet et al .,“骨替代品:回顾他们的特点、临床使用、大骨缺陷管理和观点,“组织工程杂志卷。9日,18页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. h·e·Jazayeri的话,m . Tahriri m .哈et al .,“目前材料和策略用于潜在的概述在颌面组织再生,”材料科学与工程,第70卷,第1部分,913 - 929年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. l . Roseti诉Parisi m . Petretta et al .,“为骨组织工程支架:艺术和新的视角,”材料科学与工程卷,78年,第1262 - 1246页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. j·r·佩雷斯·d·Kouroupis d·j·李·t·m .最好,l·卡普兰和d·科雷亚”组织工程和细胞治疗骨折和骨缺陷,”在生物工程和生物技术前沿》第六卷,1,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. m . t . Langhans s . Yu, r . s .老爷”骨骼干细胞组织工程:技术和模式,“目前干细胞研究和治疗,11卷,不。6,453 - 474年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. y木下光男和h Maeda,“最近的发展功能craniomaxillofacial骨组织工程支架的应用程序,“科学世界日报ID 863157条,卷。2013年,21页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. 特区切割器,漫画家关谷神奇,d . j . Prockop”标识的分组人口迅速自我更新和multipotential成体干细胞在人类骨髓基质细胞的殖民地,“美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷98,不。14日,第7845 - 7841页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. j·a·安德拉德j . a . Santamaria m . e . Nimni和j .一步”选择和放大的骨髓细胞群及其感应chondro-osteogenic rhOP-1血统:体外和体内研究中,“国际发育生物学杂志》上,45卷,不。4、689 - 693年,2001页。视图:谷歌学术搜索
18. l . c . Gerstenfeld d . m . Cullinane g·l·巴恩斯d·t·格雷夫斯和t·a·艾因霍恩”骨折愈合作为产后发育过程:分子、空间、和时间方面的规定,“细胞生物化学杂志》上,卷88,不。5,873 - 884年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 郎t .今敏,t·曹t Aizawa et al .,“osteoprotegerin,受体激活剂NF -κB配体(osteoprotegerin配体)和相关的促炎细胞因子在骨折愈合中,“骨和矿物质研究杂志》上,16卷,不。6,1004 - 1014年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. s·m·梅洛尼,s a约万诺维奇,即城市,l . Canullo m·皮萨诺和m . Tallarico”水平脊增加使用GBR原生胶原膜和1:1的比例微粒异种移植和自体骨:一年前瞻性临床研究,“临床牙科植入物和相关研究,19卷,不。1,38-45,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. 中情局城市h . Nagursky j·l·洛和k·伊,“横岭增强胶原蛋白膜和颗粒的结合自体骨和无机的牛bone-derived矿物:前瞻性病例分析25例,“国际牙周病学杂志和恢复牙医,33卷,不。3、299 - 307年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. k . Yagihara冈,j . Ishii et al .,“下颌重建使用保利(l-lactide)网格结合自体微粒松质骨和骨髓:前瞻性临床研究,“国际口腔颌面外科杂志》上,42卷,不。8,962 - 969年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. h . Ohgushi y Dohi, t . Yoshikawa et al .,“培养骨髓基质干细胞的成骨分化表面生物活性玻璃陶瓷、”生物医学材料研究杂志》上,32卷,不。3、341 - 348年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. p . Janicki和g . Schmidmaier”应该是理想的骨移植替代的特点?支架结合生长因子和/或干细胞”受伤,42卷,S77-S81, 2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. c·科尔顿“植入式生物合成人造器官”,细胞移植,4卷,不。4、415 - 436年,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. a·莫亚j . Paquet m . Deschepper et al .,“人类间充质干细胞未能适应葡萄糖短缺和通过糖酵解解释了可怜的迅速利用细胞内的能量储备细胞移植后生存,”干细胞,36卷,不。3、363 - 376年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. a . m .罗德里格斯c . Elabd e . z .阿姆里g . Ailhaud和c·丹尼,“人类脂肪组织是一个多功能干细胞的来源,”Biochimie,卷87,不。1,第128 - 125页,2005。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. s . Gronthos m . Mankani j .卜拉欣·g·罗比和美国史,“产后人类牙髓干细胞(DPSCs)在体外和体内,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷97,不。25日,第13630 - 13625页,2000年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. m .三浦s Gronthos m .赵et al .,“流:从人类脱落乳牙干细胞,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷100,不。10日,5807 - 5812年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. m . w . x, p . Wang Chen d .堰c .包和h·h·k·许,“人类胚胎干细胞和大孔磷酸钙构建骨再生在大鼠颅骨缺损,”Acta Biomaterialia,10卷,不。10日,4484 - 4493年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. l . d . k .黄油伯恩,j . d . Xynos et al .,“分化成骨细胞,只有VitroBone从小鼠胚胎干细胞形成,”组织工程,7卷,不。1,第99 - 89页,2001。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. k·拉特里奇,问:程,m . Pryzhkova g·m·哈里斯和e . Jabbarzadeh”增强的人类胚胎干细胞的分化细胞外matrix-containing osteomimetic骨组织工程支架,”组织工程- C方法的一部分,20卷,不。11日,第874 - 865页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. a . Ardeshirylajimi”应用诱导多能干细胞与生物材料在骨组织工程中,“细胞生物化学杂志》上,卷118,不。10日,3034 - 3042年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. 诉Volarevic b·s·马尔科维奇m . Gazdic et al .,“伦理和干细胞治疗的安全问题,”国际医学科学杂志》上,15卷,不。1,36-45,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. s . Shanbhag s Suliman n . Pandis a . Stavropoulos m . Sanz和k·穆斯塔法,“orofacial骨再生的细胞疗法:系统回顾和荟萃分析,“临床牙周病学杂志,46卷,第182 - 162页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. a . j . Friedenstein i . i Piatetzky-Shapiro, k . v . Petrakova“骨移植的骨髓细胞,”胚胎学和实验形态学》杂志上,16卷,不。3、381 - 390年,1966页。视图:谷歌学术搜索
37. f p . Hernigou a . Poignard Beaujean h . Rouard“经皮自体骨髓移植不愈合:祖细胞的数量和浓度的影响,“《骨与关节手术,卷87,不。7,1430 - 1437年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. d . Rickert s Sauerbier h . Nagursky d·梅恩a . Vissink和通用Raghoebar”上颌窦底高程和牛骨矿物质结合自体骨或自体干细胞:一个前瞻性随机临床试验,”临床口腔植入研究,22卷,不。3、251 - 258年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. d . Kaigler g . Avila-Ortiz s Travan et al .,“骨头上颌窦骨缺陷工程使用丰富CD90 +干细胞疗法:一项随机临床试验,”骨和矿物质研究杂志》上,30卷,不。7,1206 - 1216年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. d . Kaigler g . Pagni c . h .公园et al .,“干细胞治疗颅面骨再生:一项随机、对照可行性试验,”细胞移植,22卷,不。5,767 - 777年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. 小室美国爸爸,y山田,a . et al ., " I / II期临床试验的自体骨髓干细胞移植与牙周炎的三维织物脚手架,”干细胞国际卷,2016篇文章ID 6205910, 7页,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. m . n . Bajestan a . Rajan s p·爱德华兹et al .,“干细胞治疗牙槽裂和创伤重建缺陷在成人:一个随机对照临床试验,”临床牙科植入物和相关研究,19卷,不。5,793 - 801年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. h . Behnia a . Khojasteh m . Soleimani a . Tehranchi和a . Atashi”修复牙槽裂缺陷的间充质干细胞和血小板衍生生长因子:初步报告,“Cranio-Maxillofacial外科杂志》,40卷,不。1,2 - 7日,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
44. n美国Hermund, a . Stavropoulos o . Donatsky et al .,“再植术的人类骨细胞培养后上颌窦底增加。组织学结果随机对照临床试验。”临床口腔植入研究,23卷,不。9日,第1037 - 1031页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. m . f . Pittenger a . m .麦凯s c·贝克et al .,“Multilineage成年人类间充质干细胞的潜力。”科学,卷284,不。5411年,第147 - 143页,1999年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. m·e·贝尔纳多·l·m·球,a . m . Cometa et al .,“Co-infusion vivo-expanded交货,父母的msc可以防止危及生命的急性移植物抗宿主病,但是不减少移植失败的风险在儿科患者接受同种异体脐带血移植,”骨髓移植,46卷,不。2、200 - 207年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. d . r . j . Lienau h . Schell Epari et al .,“CYR61 (CCN1)蛋白表达在一个绵羊的胫骨骨折愈合模型及其机械固定稳定的关系,“骨科研究期刊》的研究,24卷,不。2、254 - 262年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. s p Bruder:贾斯瓦尔,s e . Haynesworth”生长动力学、自我更新和净化人类间充质干细胞的成骨的潜力在广泛subcultivation和低温贮藏后,“细胞生物化学杂志》上,卷64,不。2、278 - 294年,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. d·卢比奥s加西亚·m·f·巴斯et al .,“自发的间充质干细胞的分子特征转变,”《公共科学图书馆•综合》,3卷,不。1,p . e1398 2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
50. r . Izadpanah d . Kaushal c Kriedt et al .,“长期体外扩张改变成人的间充质干细胞的生物学,”癌症研究,卷68,不。11日,第4238 - 4229页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. g . f . Muschler h .日本日东,c . a . Boehm和k·a·伊斯利,“年龄和性别有关的细胞结构的变化人类骨髓和成骨细胞的祖细胞的流行,“骨科研究期刊》的研究,19卷,不。1,第125 - 117页,2001。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. w·j·f·m .更加与众不同,m . j . Oedayrajsingh-Varma m . n .举行et al .,“tissue-harvesting网站对产量的影响干细胞来源于脂肪组织:对细胞疗法,”细胞和组织的研究,卷332,不。3、415 - 426年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. a·j·卡茨,a . Tholpady s . s . Tholpady h .商和r . c .媚眼,“细胞表面和转录表征人类脂肪细胞附着基质(哈达)细胞,”干细胞,23卷,不。3、412 - 423年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
54. Maeda h . Nakagami r . Morishita k . y .菊池,t .注资和金田y,“脂肪tissue-derived基质细胞作为小说选择再生细胞疗法”《动脉粥样硬化和血栓形成,13卷,不。2、77 - 81年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. d . Dufrane”时代对人类的影响脂肪干细胞在骨组织工程”细胞移植,26卷,不。9日,第1504 - 1496页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
56. w·j·更加与众不同,r . j . Kroeze r . a银行,m·j·p·f·Ritt和m . n .举行“脂肪基质细胞的快速附件resorbable聚合物支架促进软骨和骨组织工程一步手术目的,“骨科研究期刊》的研究卷,29号6,853 - 860年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
57. j . r .工头m . n .持有c . m .十Bruggenkate e·a·j·m·舒尔腾j . Klein-Nulend公元,他“生长因子基因表达谱的骨形成protein-2-treated人类脂肪干细胞播种磷酸钙支架在体外”,Biochimie,卷95,不。12日,第2313 - 2304页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
58. m . n .举行m . Knippenberg j . Klein-Nulend和p i . j . m . Wuisman“干细胞再生医学从脂肪组织允许具有挑战性的新概念,“组织工程,13卷,不。8,1799 - 1808年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
59. 周宏儒。普林斯·e·a·j·m·舒尔腾c . m .十Bruggenkate j . Klein-Nulend和m . n .举行“骨再生使用新鲜孤立自体脂肪组织间质血管部分结合磷酸钙陶瓷、”干细胞转化医学,5卷,不。10日,1362 - 1374年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
60. a . Khojasteh l . Kheiri h . Behnia et al .,“侧支皮质骨板在牙槽裂骨成形术同时使用派生细胞和自体骨颊脂肪垫:第一阶段临床试验,”生物医学研究的国际卷,2017篇文章ID 6560234, 12页,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
61. g . Castillo-Cardiel a·c·Lopez-Echaury j . a . Saucedo-Ortiz et al .,“在下颌骨折骨再生的应用自体间充质干细胞,一个随机临床试验,”牙创伤学,33卷,不。1,38-44,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
62. m·f·h·尤索夫w . Zahari s . n . m . Hashim et al .,“血管生成和成骨的潜力的牙齿干细胞在骨组织工程中,“口腔生物学和颅面研究杂志》上,8卷,不。1,48-53,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
63. x, p . m . Van Der Kraan z扁,m .风扇x f . Walboomers和j·a·詹森”BMP2-transfected髓干细胞形成矿化组织,”牙科研究杂志》,卷88,不。11日,第1025 - 1020页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
64. m . y Yamada建筑师、h . Hibi和巴巴,“一种新颖的方式牙周组织再生与间充质干细胞和富含血小板血浆利用组织工程技术:一个临床病例报告,“牙周病学&恢复性牙科的国际期刊,26卷,不。4、363 - 369年,2006页。视图:谷歌学术搜索
65. w . s .中村y Yamada片瞳,t . Sugito k .伊藤和m .建筑师“干细胞增殖通路比较人类脱落乳牙及牙髓干细胞的基因表达谱有前途的牙髓,”牙髓学杂志》,35卷,不。11日,第1542 - 1536页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
66. r·达l .它起码a Graziano et al .,“Periosteum-derived micro-grafts人类组织再生的上颌骨骨,“转化科学杂志》,卷2,不。2、125 - 129年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
67. m·蒙蒂a . Graziano s Rizzo et al .,“祖干细胞的体外和体内分化获得人类牙髓的机械消化后,“细胞生理学杂志,卷232,不。3、548 - 555年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
68. r·罗德里格斯y Baena r·达a Graziano et al .,“自体periosteum-derived micrografts和PLGA / HA增强骨形成窦升力增加,”细胞和发育生物学的前沿5卷,1 - 7,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
69. f . Ferrarotti f . Romano m . n .大阪钢巴et al .,“人类过去与micrografts包含牙髓干细胞再生:随机对照临床试验,”临床牙周病学杂志,45卷,不。7,841 - 850年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
70. w . Risau和印花纱织物,血管生成,细胞和发育生物学的年度审查,11卷,不。1,第91 - 73页,1995。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
71. t . Asahara h .此外,t .高桥et al .,“骨髓来源的内皮祖细胞负责产后在生理和病理血管生成新血管形成,”循环研究,卷85,不。3、221 - 228年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
72. h . m . Eguchi此外,t . Asahara“产后血管发生内皮祖细胞,”临床与实验肾脏学,11卷,不。1、年龄在18岁至25岁之间,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
73. 巴拉吉,a .国王,t . m . Crombleholme和s . g . Keswani“产后血管发生内皮祖细胞的作用:对治疗新血管形成和伤口愈合的影响,“伤口护理的发展,卷2,不。6,283 - 295年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
74. p . Carmeliet和r·k . Jain“血管生成的分子机制和临床应用,”自然,卷473,不。7347年,第307 - 298页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
75. e·A·洛格斯登s·d·芬利,A . s . Popel f . MacGabhann,“系统生物学的血管生长和改建计划,”细胞和分子医学杂志》上,18卷,不。8,1491 - 1508年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
76. d . Ribatti和大肠Crivellato发芽血管再生,重新评价”,发育生物学,卷372,不。2、157 - 165年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
77. p . Carmeliet“血管生成机制和arteriogenesis。”自然医学》第六卷,没有。4、389 - 395年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
78. m·洛克m . w . Laschke d破车et al .,“血管生成和炎症反应的生物可降解支架背皮肤褶的老鼠,”生物材料,27卷,不。29日,第5038 - 5027页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
79. c·r·安德森,a . m .男妓,r . j .价格”的免疫组织化学鉴定细胞外基质支架,microguides毛细管体内,”组织化学与细胞化学杂志》上,52卷,不。8,1063 - 1072年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
80. m . w . Laschke和m·d·门格尔”,在组织工程血管化:血管生成与融合,“欧洲外科研究,48卷,不。2、85 - 92年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
81. h·a·Zarem“microcirculatory事件在全层皮肤移植(同种移植)的老鼠,”手术,卷66,不。2、392 - 397年,1969页。视图:谷歌学术搜索
82. m·洛克m . w . Laschke d破车et al .,“形成血管支架的生物相容性和组成不同的磷酸氢钙化合物,”《生物医学材料研究——的一部分,卷86,不。4、1002 - 1011年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
83. 朔伊尔m . w . Laschke a . Strohe c . et al .,“体内生物相容性和生物可降解多孔聚氨酯支架的血管化组织工程、“Acta Biomaterialia,5卷,不。6,1991 - 2001年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
84. s . p .维克多和j . Muthu聚合物陶瓷复合材料对骨科applications-relevance和需要机械匹配和骨再生,”《机电一体化,卷2,不。1、1 - 10,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
85. 张,张平,z . Wang z律,和h . Wu”组织工程保利(lactide-co-glycolide)和羟磷灰石纳米粒子的复合支架植入自体间充质干细胞对骨再生,”浙江大学学报:自然科学B,18卷,不。11日,第976 - 963页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
86. 诉Karageorgiou d·卡普兰,“3 d生物材料支架的孔隙率和骨”,生物材料,26卷,不。27日,5474 - 5491年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
87. 小林y久,h .一举d . et al .,“BMP-induced骨生成羟磷灰石表面几何可行和nonfeasible结构:骨生成的拓扑,”生物医学材料研究杂志》上,39卷,不。2、190 - 199年,1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
88. Bružauskaitė,d . Bironaitė、大肠Bagdonas和e . Bernotienė”支架和细胞组织再生:不同支架孔隙sizes-different细胞效应,”Cytotechnology,卷68,不。3、355 - 369年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
89. a·c·琼斯,c . h .攻击,a·p·谢泼德d . w . Hutmacher b . k . Milthorpe和m . a . Knackstedt”评估骨到多孔生物材料使用ct机,”生物材料,28卷,不。15日,第2504 - 2491页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
90. s·f·赫伯特,f . a .年轻,r·s·马修斯j . j . Klawitter c, d . Talbert和p.h. stel”潜在的陶瓷材料作为永久植入骨骼假肢,”生物医学材料研究杂志》上,4卷,不。3、433 - 456年,1970页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
91. y久,问:金和h .一举“运营商控制表型表达的几何BMP-induced骨和软骨形成,”《骨与关节Surgery-American体积卷。83年,s1 - 115年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
92. 大肠Tsuruga冬夜h .一举h .伊藤y Wakisaka,和y .久,“孔隙大小的多孔羟基磷灰石cell-substratum控制BMP-induced骨生成,“生物化学杂志,卷121,不。2、317 - 324年,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
93. d . Druecke兰格,大肠Lamme et al .,“新血管形成的聚(醚酯)嵌段共聚物支架体内:长期使用荧光显微镜活体的调查,“《生物医学材料研究——的一部分,卷68,不。1,10 - 18,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
94. d . Kaigler z . Wang k . Horger d·j·穆尼和p h . Krebsbach”VEGF支架在辐照骨性缺陷,增强血管新生和骨再生”骨和矿物质研究杂志》上,21卷,不。5,735 - 744年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
95. z l . Chen, b . Chen等人“加载VEGF的肝素交联软化骨骼矩阵提高支架的血管化,“材料科学杂志:材料在医学,21卷,不。1,第317 - 309页,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
96. x李郭,y, t .元,y的粉丝,和张x”影响蒸汽灭菌的磷酸钙多孔生物陶瓷的性质,“材料科学杂志,27卷,不。1、p。5、2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
97. b . Li j·m·戴维森和s . a . Guelcher“本地交付的影响血小板源生长因子的活性双组分聚氨酯支架在治疗大鼠皮肤切除伤口,“生物材料,30卷,不。20日,第3494 - 3486页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
98. h·施c .汉毛z, l . Ma和c高,“增强血管生成在多孔collagen-chitosan支架含有血管生成素、”组织工程——部分,14卷,不。11日,第1785 - 1775页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
99. p .舒曼f . Tavassol d Lindhorst et al .,“后果组织工程种子细胞在血管化的结构体内,”微血管的研究,卷78,不。2、180 - 190年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
100. f . Tavassol·舒曼d Lindhorst et al .,“加速血管生成宿主组织应对保利(L-lactide-co-glycolide)支架通过赋予生命osteoblast-like细胞,”组织工程——部分,16卷,不。7,2265 - 2279年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
101. e . k . Moioli p·a·克拉克,m . Chen等人“协同行动的造血和间充质干细胞/祖细胞在血管形成的生物工程组织,”《公共科学图书馆•综合》,3卷,不。12篇文章e3992 2008。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
102. h . s . Liu, x Zhang et al .,“协同血管生成促进细胞外基质支架的影响和脂肪干细胞在创伤修复,”组织工程——部分,17卷,不。5 - 6,725 - 739年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
103. 瞿d, j·李,李y . et al .,“血管新生和骨生成增强bFGF体外基因治疗骨组织工程重建颅顶的缺陷,“《生物医学材料研究——的一部分卷,96年。3、543 - 551年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
104. 美国Helmrich: di Maggio s Guven et al .,“成骨的移植血管化和骨吸收VEGF-expressing人类间叶细胞祖细胞,”生物材料,34卷,不。21日,第5035 - 5025页,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
105. b . c . j . Liu Liu太阳et al .,”兔子骨骼间充质干细胞的分化成内皮细胞在体外和体内促进有缺陷的骨再生,”细胞生物化学和生物物理学,卷68,不。3、479 - 487年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
106. k .药丸,s·霍夫曼,h . Redl和w·Holnthoner”形成血管由间充质干细胞从骨髓和脂肪组织:一个比较,”细胞再生,4卷,不。1,p。4:8, 2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
107. a . s . Klar) s Guven t·比德尔曼et al .,“与脂肪组织工程dermo-epidermal植皮prevascularized——派生细胞,”生物材料,35卷,不。19日,5065 - 5078年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
108. a . Miranville c . Heeschen c . Sengenes c . a . Curat r .会和a . Bouloumie“改善人类脂肪tissue-derived干细胞,产后新血管形成的“循环,卷110,不。3、349 - 355年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
109. z . e·克莱顿、美国Sadeghipour和s . Patel”产生诱导多能干细胞衍生的内皮细胞和诱导内皮细胞对心血管疾病治疗性血管生成模型”国际心脏病学杂志卷,197年,第122 - 116页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
110. l . j . s . Schechner a . k . Nath郑et al .,“体内形成微血管的复杂排列由人类内皮细胞在免疫缺陷小鼠,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷97,不。16,9191 - 9196年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
111. g m·斯维尼和褶皱,“需要两个:endothelial-perivascular细胞在血管发育和疾病的相声,”心血管医学前沿5卷,页1 - 14,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
112. j·杨,Nagavarapu, k Relloma et al .,“Telomerized人类微脉管系统功能体内,”自然生物技术,19卷,不。3、219 - 224年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
113. f·克莱门特,e . Grockowiak f . Zylbersztejn g . Fossard s Gobert诉Maguer-Satta,“操纵干细胞、基因治疗和癌症干细胞出现的风险,”干细胞研究,4卷,不。7,67年,页2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
114. 小池百合子,d . Fukumura o . Gralla p . Au j . s . Schechner r . k . Jain,“组织工程:创造持久的血管,”自然,卷428,不。6979年,第139 - 138页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
115. k . j .沉重的e·r·Zielins d . a . Atashroo et al .,”研究脂肪移植:一部分诉cell-assisted lipotransfer增强脂肪移植保留是剂量依赖,”整形外科,卷136,不。1,第75 - 67页,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
116. f . Verseijden s . j . p . v . Sluijs e·法雷尔et al .,“Prevascular结构促进血管化在人类脂肪组织工程构建植入后,“细胞移植,19卷,不。8,1007 - 1020年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
117. f·s . Frueh t接二连三,c·朔伊尔·m·d·门格尔和m . w . Laschke”隔离小鼠脂肪tissue-derived微血管片段作为组织工程血管化单元,“《可视化实验卷,122年,页1 - 7,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
118. t .口角,f·s . Frueh r·m·尼克尔斯·m·d·门格尔和m . w . Laschke”Prevascularization collagen-glycosaminoglycan支架:间质血管分数与脂肪tissue-derived微血管片段,”生物工程学报,12卷,不。1,1-13,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
119. b . r .牧羊人h . y . s . Chen c·m·史密斯,g . Gruionu s . k . Williams和j·b·霍伊”迅速在微血管灌注和网络改造建设植入后,“动脉硬化、血栓和血管生物学,24卷,不。5,898 - 904年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
120. j·b·霍伊c·a·鲍斯威尔和s·k·威廉姆斯,“血管生成微脉管碎片成立于三维胶原凝胶的潜力,”体外细胞和发育生物学,动物,32卷,不。7,409 - 419年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
121. 朔伊尔m . w . Laschke克利,c . et al .,“Vascularisation整合提高多孔支架的脂肪tissue-derived微血管片段,”欧洲细胞和材料,24卷,第277 - 266页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
122. t . m . Pilia j·s·麦克丹尼尔开瑞et al .,”移植和微血管灌注的碎片在啮齿动物模型体积的肌肉损伤,损失”欧洲细胞和材料,28卷,不。210年,11-24,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
123. j·s·麦克丹尼尔,m . Pilia c·l·沃德b . e . Pollot和c r . Rathbone”特征和multilineage潜力的细胞来源于孤立微血管片段,”外科手术研究期刊》的研究,卷192,不。1,第222 - 214页,2014。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
124. 美国诉Koduru, a . n . Leberfinger d Pasic et al .,“基础策略微血管细胞工程”干细胞的评论和报道,15卷,不。2、218 - 240年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
125. a . Trivisonno r·w·亚历山大·s . Baldari et al .,“术中最小的操纵策略自体脂肪组织细胞和组织的治疗:简洁的评论,“干细胞转化医学,8卷,不。12日,第1271 - 1265页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
126. b . Vezzani肖,h . Lesme et al .,“高周皮细胞和分泌活动内容microfragmented人类脂肪组织相比具有派生间质血管分数,”干细胞转化医学,7卷,不。12日,第886 - 876页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
127. 诉Ceserani费里,a Berenzi et al .,“micro-fragmented脂肪组织的血管生成和抗炎特性及其派生间充质基质细胞,”血管细胞,8卷,不。1、1 - 12,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
128. j·a·凡·通根于惠普史蒂文斯,m . Parvizi b·范德Lei和m . c . Harmsen“脂肪组织的分馏过程获得再生的目的,间质血管分数”伤口修复和再生,24卷,不。6,994 - 1003年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
129. p .异教徒,a . Bielli m·g·肖利a . Orlandi诉Cervelli,“比较不同nanofat手术疤痕:间质血管分数的作用及其临床意义,”再生医学,12卷,不。8,939 - 952年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
130. g . Desando Bartolotti, l .马提尼et al .,“再生功能的脂肪组织在一只兔子模型:骨关节炎治疗酶消化和机械破坏,”国际分子科学杂志》上,20卷,不。11日,第2636条,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
131. g .均答:德卡罗,那不勒斯,d . Chiapale p . Trada自称和a .相机,“Micro-fragmented脂肪组织注入与有症状的膝关节骨关节炎患者关节镜手术,”BMC肌肉骨骼疾病,19卷,不。1,第177 - 176页,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
132. g . Naldini a . Sturiale b . Fabiani Giani,和c . Menconi”Micro-fragmented脂肪组织注射治疗复杂肛瘘:访问安全性和可行性的初步研究中,“技术在该领域,22卷,不。2、107 - 113年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
133. 学术界。曹,y小君Koh, j·汉et al .,“血管生成LYVE-1-positive巨噬细胞在脂肪组织中的作用”,循环研究,卷100,不。4,pp. e47-e57, 2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
134. j . r .工头e . Farre-Guasch m . n .持有c . m .十Bruggenkate e·a·j·m·斯考尔滕和j . Klein-Nulend”短(15分钟)骨形成protein-2治疗刺激成骨分化的人类脂肪干细胞播种磷酸钙ScaffoldsIn体外,”组织工程——部分,19卷,不。3 - 4、571 - 581年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
135. h·r·d·h·a . Kim Kim歌et al .,“兔尺骨的修复节段性骨缺损使用新鲜分离脂肪基质血管分数,”Cytotherapy,14卷,不。3、296 - 305年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
136. k . Rubina n . Kalinina a叶菲缅科的说法,“脂肪基质细胞刺激通过促进血管祖细胞分化,分泌的血管生成因子,和增强血管成熟,”组织工程——部分,15卷,不。8,2039 - 2050年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
137. r .麦当娜和r . De Caterina”体外neovasculogenic居民脂肪组织前兆的潜力,”美国Physiology-Cell生理学杂志》上,卷295,不。5,C1271-C1280, 2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
138. e . Farre-Guasch n . Bravenboer m .举行e .舒尔腾c .十Bruggenkate和j . Klein-Nulend“血管形成和骨再生潜力的间质血管分数播种磷酸钙支架上人类上颌窦底高程模型”材料,11卷,不。1,p。161年,2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
139. j . s . Zakhari j . Zabonick b . Gettler和s·k·威廉姆斯,“Vasculogenic脂肪间质血管和血管生成潜力分数体外细胞群,”体外细胞和发育生物学,动物,54卷,不。1、第213条32-40,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
140. j . Scheinpflug m . Pfeiffenberger a Damerau et al .,“旅程为骨骼模型:一个评论,”基因,9卷,不。5,247年,页2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
141. r . Bertolai c . Catelani男婴,罗西,d . Giannini d·巴尼,“骨移植物和mesenchimal干细胞:临床观察和组织学分析,“矿物质和骨代谢的临床病例,12卷,不。2、183 - 187年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
142. p . j . Pasquali m . l .特谢拉t . a。奥利维拉,l·g·s·德·马赛a·c·Aloise和a . a . Pelegrine”上颌窦增大bio-oss结合骨髓抽出物集中:histomorphometric研究对于人类来说,“国际期刊的生物材料ID 121286条,卷。2015年,7页,2015。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
143. h . h . al-Ahmady a . f . Abd Elazeem n . e . m . Bellah Ahmed et al .,“结合自体骨髓单核细胞的胶原蛋白海绵与纳米羟磷灰石,富含血小板和纤维蛋白:报告一本小说牙槽裂骨再生,战略”Cranio-Maxillofacial外科杂志》,46卷,不。9日,第1600 - 1593页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
144. m·e·哈利法和n e·戈马牙弓扩张后牙槽裂修复使用派生自体骨髓间充质干细胞和自体植骨的下巴,“牙科治疗和口腔护理杂志》上,卷2,不。1、1 - 10,2017页。视图:谷歌学术搜索
145. w·m·Talaat m . m . Ghoneim o .沙拉和o·a·阿德里“自体骨髓集中和集中生长因子促进骨再生下颌病理病变摘出术之后,“颅面外科杂志》卷,29号4、992 - 997年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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