文摘

的目标是。Cavernosal内皮功能障碍的一个因素在发展中糖尿病性勃起功能障碍(d),但提一个有关海绵体内皮功能障碍的机制还不清楚。本研究的目的是确定的贡献提一个有关海绵体d大鼠内皮功能障碍和自噬在解释urine-derived干细胞的治疗效果(usc)。方法。提一个有关海绵体血管内皮细胞后老鼠语料库(CCECs)分离和培养在体外,CCECs治疗晚期糖化终端产品(年龄)来模拟糖尿病情况。自噬流量、增殖和凋亡的CCECs mRFP-GFP-LC3测定腺病毒感染与荧光观察和免疫印迹分析相结合。南加州大学的尿液中分离的六个健康男性捐赠者,南加州大学和coculture系统和CCECs开发为CCECs评估南加州大学的保护作用在体外。自噬在细胞损伤的贡献CCECs评估了自噬抑制剂,3-methyladenine (3-MA)。然后,d大鼠被链脲霉素诱导(50毫克/公斤)和筛选阿朴吗啡测试(100μ克/公斤)。在d大鼠,南加州大学或PBS汽车被intracavernous注入(管理 每组),另一个15正常大鼠作为正常对照组。注射后4周,勃起功能是通过测量评估例压力(ICP)和平均动脉压(MAP)。Cavernosal内皮功能和自噬活动被免疫印迹检测,免疫荧光和透射电子显微镜。结果。在体外少,AGE-treated CCECs显示LC3 puncta形成和表达LC3-II较少,Beclin1和PCNA,但表示p62和cleaved-caspase3控件( )。Coculture CCECs表明,南加州大学的南加州大学能够防止CCECs AGE-induced自噬功能障碍和细胞损伤,这可能是废除3-MA ( )。d大鼠表现出较低的比率ICP /地图,减少内皮标志物的表达,和更少的提一个有关海绵体内皮细胞的自噬空泡与正常大鼠相比 )。Intracavernous注入南加州大学提一个有关海绵体血管内皮功能的改善勃起功能和d大鼠( )。最重要的是,我们的数据表明,提一个有关海绵体血管内皮修复勃起功能和功能是恢复的结果提一个有关海绵体内皮细胞的自噬活动在d大鼠( )。结论。提一个有关海绵体血管内皮受损的自噬的功能障碍和d大鼠勃起功能障碍。Intracavernous注入南加州大学上调自噬提一个有关海绵体内皮的活动,提一个有关海绵体内皮功能障碍,最终导致改善改善勃起功能障碍引起的糖尿病。

1。介绍

勃起功能障碍(ED)是一种常见的糖尿病并发症,影响35%至90%的男性患者(1]。糖尿病性ED (d)早期发作更严重,及其与疾病的发病率增加持续时间(1- - - - - -3]。提一个有关海绵体平滑肌松弛的核心病机d是障碍和下士纤维化,导致静脉阻塞功能障碍[下士4- - - - - -7]。Cavernosal内皮功能障碍目前建议作为一个发展中d启动因子,它的上游平滑肌松弛障碍和下士纤维化(8- - - - - -10]。Cavernosal内皮功能障碍可以由高血糖诱导形成先进的糖化终端产品(年龄)或增加氧化应激(9,11]。但提一个有关海绵体内皮功能障碍的机制还有待阐明。

自噬是一种进化保守的细胞分解代谢的过程中,细胞质材料包裹在细胞内的囊泡,然后运送到溶酶体降解[12,13]。在大多数细胞自噬的基准面不断发生,是至关重要的维持细胞内稳态通过消除受损的细胞器,蛋白质总量,入侵的病原体(14]。大量研究表明,自噬起到关键和复杂的角色在糖尿病及其并发症15- - - - - -17]。自噬缺陷引起mTORC1 upregulation被发现在足细胞与糖尿病肾病动物模型和人类的18]。据报道,组蛋白HIST1H1C调节自噬在糖尿病性视网膜病变的发展19]。然而,有限的研究解决了自噬和d之间的关系。

由于复杂的发病机理,d不反应良好5型磷酸二酯酶抑制剂目前一线治疗ED (20.- - - - - -22]。必然地,迫在眉睫的是开发新疗法针对d。最近,干细胞疗法已成为小说选择ED治疗(23]。几种类型的干细胞,如骨骨髓来源间充质干细胞和脂肪干细胞tissue-derived,已经被证明是有效的治疗d [24- - - - - -26]。Urine-derived干细胞(usc)是一个新的分组人口干细胞分离出人类的尿液。我们之前的研究和未发表的数据显示,南加州大学源自壁的上皮细胞肾胶囊(27]。他们可以很容易地孤立和扩大的无创性方法在体外,拥有multipotential分化能力,分享相似的间充质干细胞(msc)的特点28- - - - - -30.]。我们先前已经表明,南加州大学和南加州大学转基因bFGF提一个有关海绵体血管内皮结构可以改善勃起功能和修复d大鼠模型(31日]。南加州大学的确切机制提一个有关海绵体内皮功能障碍的修复效果和南加州大学是否生效通过调节自噬活动尚不清楚。

基于上述证据,在这项研究中,我们主要集中在d的内皮功能障碍,从而提一个有关海绵体内皮细胞自噬的变化在糖尿病状态在体外和在活的有机体内提一个有关海绵体血管内皮,南加州大学是否恢复勃起功能,通过调节自噬功能。

2。材料和方法

2.1。隔离、文化和南加州大学的识别

总共18无菌废弃的尿液样本(300 - 400毫升)6(28岁)的健康男性志愿者收集。协议使用人类的尿液样本符合赫尔辛基宣言的道德准则,机构审查委员会批准的中山大学第一附属医院。书面知情同意了尿液从每个捐赠者。分离、培养的南加州大学报道之前(28]。短暂,新鲜中期和last-stream尿液样本离心机在500×g在室温下10分钟,和细胞颗粒轻轻被停职混合介质组成的角化细胞无血清培养基和祖细胞介质1:1的比例。细胞悬液镀在24-well盘子和孵化在37°C在湿润的气氛中有5%的公司₂。培养基是每隔一天刷新一次。殖民地,来自单个细胞标记和通过使用0.25%胰蛋白酶当他们到达大约80%汇合。南加州大学在通道3 - 4被用于以下研究。

确定了南加州大学根据我们先前所描述的方法(31日]。南加州大学的分化成骨、脂肪形成的评估了茜素红S(圣克鲁斯生物技术、圣克鲁斯、钙、美国)或油红O染色(Abcam,剑桥,英国),分别。细胞表面标记的南加州大学测量与流式细胞术分析(S3e™细胞分选仪,Bio-Rad实验室、美国)通过使用fluorochrome-conjugated抗体包括CD24-FITC (20μl /测试;美国560992年,BD生物科学)、CD31-FITC (20μl /测试;560984年,BD生物科学)、CD34-FITC (20μl /测试;560942年,BD生物科学)、CD44-PE (20μl /测试;561858年,BD生物科学)、CD45-PE (20μl /测试;561866年,BD生物科学)、CD73-PE (20μl /测试;561014年,BD生物科学)、CD90-APC (5μl /测试;561971年,BD生物科学)和CD105-PE (5μl /测试;560839年,BD生物科学)。

2.2。文化以及CCECs的表征

主提一个有关海绵体血管内皮细胞培养的鼠语料库(CCECs)从Procell购买生命科技有限公司(武汉,中国)。CCECs培养内皮细胞生长媒体(EGM-2;瑞士Lonza)在37°C在湿润的气氛中含5%股份有限公司₂。细胞通过用0.25%胰蛋白酶当他们到达大约80%汇合。通道2被用于本研究。immunofluorescent发现的CCECs被染色的细胞表面束缚CD31、如前所述[32]。

2.3。治疗CCECs

CCECs通道2被随机分为五组:(1)控制(homoculture CCECs只);(2)牛血清白蛋白(BSA);美国Abcam);(3)AGE-BSA(年龄;Abcam);(4)年龄+南加州大学;(5)年龄+南加州大学+ 3-methyladenine (3-MA;美国Selleckchem)。

中的执行coculture Transwell单元(美国康宁公司3413年配角)。细胞悬浊液CCECs或南加州大学准备在内皮细胞生长媒体,分别的浓度 细胞/毫升。CCECs (600μl)在下议院培养,和南加州大学(100μl)在参议院分别培养。孵化后一夜之间,CCECs感染了mRFP-GFP-LC3腺病毒(HanBio技术,中国上海)根据指令。2 h后,CCECs改变完全培养基,加入一定量和BSA /年龄培养基根据72 h的分组。组(4)和(5),上部腔体与南加州大学被放置在降低CCEC室。组(5),加入一定量3-MA低钱伯斯24 h。所有实验进行了一式三份。(200岁的浓度μg / ml)和3-MA(2毫米)本研究中使用的是指以前的研究(33- - - - - -35]。

2.4。免疫印迹分析自噬、增殖和凋亡的CCECs后治疗在体外

扩散,自噬和凋亡CCECs治疗后被免疫印迹分析如前所述[36]。简单地说,从每个众议院所有CCECs收获,和蛋白质提取使用里帕裂解缓冲(Cwbiotech,中国)含有蛋白酶抑制剂鸡尾酒(Cwbiotech)和磷酸酶抑制剂(Cwbiotech)。主要包括抗体anti-PCNA (1: 1000;200947 - 2 e1, ZenBio,中国),anti-cleaved-caspase3 (1: 1000;9661年,细胞信号技术,美国),anti-LC3 A / B (1: 1000;4108年,细胞信号技术)、anti-p62 (1: 1000;ab56416 Abcam) anti-Beclin1 (1: 2000;ab207612 Abcam)和anti-GAPDH (1: 2000;美国亲和力生物科学)抗体。PCNA是细胞增殖的指标,cleaved-caspase3是细胞凋亡的一个指标。 LC3, p62, and Beclin1 are autophagic markers. GAPDH was used as loading control.

2.5。自噬后通量测定CCECs治疗在体外通过共焦显微镜

绿色荧光蛋白的荧光信号可以熄灭在酸性条件下,但mRFP荧光信号没有明显的变化。中性自噬小体显示为黄色puncta (RFP + GFP +)和酸性自吞噬泡显示为红色puncta (RFP + GFP -)37]。mRFP-GFP-LC3腺病毒可以监测自噬流量的进展。

用共焦显微镜检查的LC3 puncta (TSC-SP8、徕卡、德国)。为每个组,十个独立的图像被随机选中数的数量LC3 puncta。

2.6。建立d大鼠模型和南加州大学植入在活的有机体内

六十五名男性Sprague-Dawley老鼠(8 - 10周大)被用于这项研究。动物程序批准的中山大学动物保健和使用委员会制度。糖尿病是由腹腔内(ip)诱导注射链脲霉素(STZ;50毫克/公斤;美国Sigma-Aldrich)溶解在pH值4.5柠檬酸缓冲。糖尿病被定义为一个随机血糖水平高于300 mg / dl 72小时的注射STZ后连续三天。八周注射STZ后,阿朴吗啡(Sigma-Aldrich)测试(100μ克/公斤)进行确认根据希顿的方法[d大鼠38]。

与戊巴比妥钠麻醉后(50毫克/公斤,ip), d老鼠收到双边intracavernous注入的 南加州大学在200年μl磷酸盐(USC-treated集团)或仅为200μl PBS (d组)( 每组),正如我们之前研究描述24]。另外15个正常大鼠作为对照组。

2.7。勃起功能评价

通过例勃起功能评估压力(ICP)和ICP的比率平均动脉压(MAP)在四个星期intracavernous注射后,如前所述[39]。简单地说,老鼠与戊巴比妥钠麻醉(50毫克/公斤,ip)。左侧颈动脉与PE-50导管插管充满肝素化盐水(250国际单位/毫升)监控地图。满25针肝素(250国际单位/毫升)插入阴茎小腿和连接到另一个压力传感器。提一个有关海绵体神经被孤立和连接的双极电极3 - 4毫米远的主要盆腔神经节。单相矩形脉冲(刺激参数设置2女士宽度、5 V电压,25 Hz频率,持续时间和60年代)交付的刺激器(bl - 420 f, Taimeng,中国)。三个电刺激复制每隔10分钟。地图和ICP与提单记录和分析新世纪2.1软件(Taimeng)。勃起功能被评估为ICP /地图的比例正常化的系统性血压的变化。阴茎是组织学和免疫印迹分析然后收获。

2.8。免疫印迹分析内皮功能和自噬在阴茎海绵体组织中

阴茎海绵体组织细胞溶解,免疫印迹分析如前所述[36]。主要包括抗体anti-CD31 (1: 2000;ab222783 Abcam) anti-eNOS (1: 500;ab76198 Abcam) anti-phosphor-eNOS (S1177) (1: 1000;9571年,细胞信号技术)、anti-VEGFRA (1: 200;ab1316 Abcam) anti-VEGFR2 (1: 1000;9698年,细胞信号技术),anti-LC3 A / B (1: 1000;4108年,细胞信号技术)、anti-p62 (1: 1000;ab56416 Abcam) anti-Beclin1 (1: 2000;ab207612 Abcam)和anti-GAPDH (1: 2000; Affinity Biosciences, USA) antibodies. CD31, eNOS, phosphor-eNOS (S1177), VEGFRA, and VEGFR2 are indicators of endothelial function.

2.9。Immunofluorescent染色分析内皮标记在阴茎海绵体组织中

阴茎海绵体组织在4%多聚甲醛固定过夜。石蜡包埋组织标本常规准备,切割5点μ米厚度。组织的形象化的表达内皮标记,一个anti-CD31抗体(1:100;ab222783 Abcam)被用于immunofluorescent染色,如前所述[36]。用共焦显微镜图像捕获(TSC-SP8,徕卡)。

2.10。通过透射电子显微镜观察自噬小体

阴茎海绵体的标本被固定在一个固定的TEM (Servicebio,中国)在4°C 2 - 4 h,然后后缀四氧化锇和嵌入在嵌入812(美国SPI)。标本被切成0.1μ米部分,沾染了醋酸双氧铀/柠檬酸铅,认为用透射电子显微镜(TEM);HT7700、日立、日本)。组织从每组三只老鼠被检查。对于每一个标本,提一个有关海绵体内皮细胞十是随机选择的,自噬空泡的平均数量(包括自噬体和自吞噬泡)从每组收集的样本之间的比较。

2.11。统计分析

被表示为连续值 。单向方差分析后跟Student-Newman-Keuls事后测试多个比较是在适当的时候使用。小动物——一张长有 被认为是具有统计学意义。统计分析了使用IBM SPSS 23.0统计(美国IBM)。

3所示。结果

3.1。南加州大学的特征

南加州大学表现出典型的米粒状的外观(图1(一))。成骨的——adipogenic-induced南加州大学(染色茜素红S或油红O,分别)证实了南加州大学的multipotential分化能力(数据1 (b)和1 (c))。流式细胞仪分析表明,南加州大学强烈msc阳性标记(CD73 CD24, CD44, CD90), CD105弱阳性,阴性造血干细胞标记(CD31、CD34、CD45)(图1 (d))。

3.2。表征CCECs

CCECs表现出典型的cobblestone-like外观(图2(一个)),其形态和生长特性类似于先前的报道(40,41]。Immunofluorescent染色进行分析的表达内皮标记(CD31),和90%以上的CCECs CD31染色阳性(图2 (b))。

3.3。年龄在CCECs诱导自噬功能障碍和细胞损伤在体外

免疫印迹分析评估自噬标记的蛋白质水平。与空白对照相比,年龄治疗显著降低的比率LC3-II / LC3-I和CCECs Beclin1的表达,同时增加了水平的自噬衬底(p62) ( )(数据3(一个)- - - - - -3 (d))。进一步确认年龄对自噬的影响变化,我们检查了mRFP-GFP-LC3 puncta形成共焦荧光显微镜。一致,CCECs对待年龄显示显著降低数量的自噬体(黄色puncta)和自溶酶体(红色puncta) ( )(数据3 (e)- - - - - -3 (g))。

细胞生存和凋亡CCECs通过免疫印迹分析测定。如数据所示4(一)- - - - - -4 (c)、年龄显著降低扩散的蛋白质的表达PCNA的表达增加apoptosis-related蛋白质cleaved-caspase3 ( ),这表明,年龄在CCECs诱导细胞损伤。

与对照组相比,观察以上变化后BSA治疗( ),表明BSA没有细胞毒性CCECs(数字3(一个)- - - - - -3 (g)和4(一)- - - - - -4 (c))。

3.4。南加州大学防止CCECs AGE-Induced自噬功能障碍和细胞损伤在体外

与AGE-treated组相比,LC3-II / LC3-I的比率更高,Beclin1的表达增加,蛋白质含量的p62减少在南加州大学coculture集团证明了免疫印迹分析( )(数据3(一个)- - - - - -3 (d))。此外,自噬通过mRFP-GFP-LC3通量检测腺病毒显示,南加州大学的自噬小体数量显著增加AGE-treated CCECs ( )。有趣的是,自吞噬泡显示越来越倾向,但它不是统计学意义( )(数据3 (e)- - - - - -3 (g))。

重要的是,当cocultured与南加州大学、PCNA的表达显著降低,cleaved-caspase3的表达增加AGE-treated CCECs ( )(数据4(一)- - - - - -4 (c))。这些数据表明,南加州大学可以防止CCECs AGE-induced自噬功能障碍和细胞损伤。

为了进一步证实了南加州大学的保护作用,特定的自噬抑制剂(3-MA)添加到CCECs媒介。我们的数据表明,抑制自噬通过3-MA可以废除南加州大学(数据的保护作用3(一个)- - - - - -3 (g)和4(一)- - - - - -4 (c))。

3.5。提一个有关海绵体的d大鼠内皮自噬活动减少

重要的是,大大降低的比例LC3-II / LC3-I Beclin1和表达和更高水平的p62阴茎海绵体组织中发现了比正常对照组d组的免疫印迹分析( )(数据5(一个)和5 (b))。进一步调查具体的提一个有关海绵体内皮细胞自噬活动,自噬空泡是通过透射电镜直接观察。的自噬空泡数d提一个有关海绵体内皮细胞是老鼠的显著低于正常对照组( )(数据5 (c)和5 (d))。

3.6。南加州大学提一个有关海绵体血管内皮功能改善勃起功能和d大鼠

如数据所示6(一)- - - - - -6 (c)南加州大学intracavernous注射后4周,ICP和ICP /地图USC-treated集团的比率达到 和 ,分别明显高于的d组( 和 )( ),代表了一种改进的勃起功能。但价值仍低于正常对照组( 和 )( )。

一系列的内皮标记被免疫印迹分析(数据评估6 (d)和6 (e))。结果显示一个大CD31减少,以挪士,phospho-eNOS, VEGFRA, VEGFR2表达式在d大鼠与正常对照组相比( )。Intracavernous注入南加州大学部分恢复内皮内容在d大鼠阴茎组织( )。同样,的表达CD31在d大鼠阴茎组织降低,增加在南加州大学治疗证实了immunofluorescent染色分析(图6 (f))。

3.7。南加州大学恢复提一个有关海绵体在d大鼠内皮细胞的自噬活动

USC-treated组与d组相比,表现出更高的比率LC3-II / LC3-I,更高水平的Beclin1海绵组织,和低水平的p62 ( )(数据5(一个)和5 (b))。相应地,通过TEM观察自噬空泡在维提一个有关海绵体内皮老鼠的南加州大学注射后比d组( )(数据5 (c)和5 (d))。综上所述,这些观察结果表明,南加州大学能提一个有关海绵体的d大鼠内皮恢复自噬活动。

4所示。讨论

目前的研究表明,年龄可以抑制自噬流量CCECs因此导致细胞损伤在体外。与南加州大学cocultured后,自噬活性CCECs恢复,细胞损伤减轻。在进一步的实验中,我们发现,抑制自噬活动参与d模型中提一个有关海绵体内皮细胞的功能障碍。Intracavernous注入南加州大学导致提一个有关海绵体内皮细胞自噬活动显著增加,同时提一个有关海绵体血管内皮功能的改善和勃起功能。

年龄是一组异构化合物不断形成高血糖的条件下(42]。水平的提高年龄已发现在糖尿病人类和啮齿动物(34,43]。有证据表明,年龄与糖尿病相关并发症的积累(11提一个有关海绵体内皮功能障碍),负责在d [9,11]。年龄已经采取了一些以往的研究(32- - - - - -34慢性高血糖)探讨细胞的影响,作为一个更合适的治疗因素在体外实验不仅仅是高葡萄糖水平。我们的数据表明,与年龄、治疗后CCECs显示减少数量的自噬体和自吞噬泡,自噬positive-related蛋白表达降低(LC3和Beclin1),和自噬negative-related蛋白的表达增加(p62),表明自噬流量阻塞。同时,细胞生存能力下降,细胞凋亡增加,揭示了AGE-induced自噬功能障碍相关的细胞损伤。类似的结果报道在AGE-treated足细胞和软骨细胞从先前的研究33,34]。

然而,在其他的研究中,年龄诱导细胞自噬,这是与我们的结果(32,44]。可能有几个原因可以解释这一矛盾。一方面,不同类型的细胞自噬对年龄有不同的情感和不同。另一方面,年龄和曝光时间的浓度决定了治疗效果。短期暴露年龄导致细胞在急性应激状态,是一种常见的引发自噬的激活细胞自我保护程序(12]。但高浓度的年龄和长时间曝光往往会引起细胞代谢失调,当自噬功能障碍和细胞损伤。这些浓度和时间效应已经在先前的研究[33,34]。

然后,我们建立了一个d大鼠模型,进一步证实了上述现象在活的有机体内。除了比率越低的ICP /地图和降低一系列的表达在d大鼠内皮function-related蛋白质,水平的自噬蛋白标记(LC3、p62 Beclin1)在d大鼠阴茎海绵体组织表明自噬活动下降,这是按照其他研究[45]。但是这些结果仅代表了整个阴茎海绵体,自噬变化和内皮阴茎组织的只占一小部分。检测自噬活动完全内皮,我们使用TEM观察内皮细胞的自噬空泡。我们发现的自噬空泡数d提一个有关海绵体内皮细胞是老鼠的显著低于正常对照组。把所有的数据在体外和在活的有机体内实验考虑,我们有足够的理由推测长期糖尿病诱发自噬提一个有关海绵体内皮细胞功能障碍,最终导致内皮功能障碍,在d大鼠勃起功能障碍。此外,它可能是提一个有关海绵体平滑肌中的自噬也扮演着重要的角色在d的条件,和需要更多的研究来考察其相对影响相对于内皮。

正如我们已经揭示了自噬提一个有关海绵体d大鼠内皮,紊乱的调节自噬可能是一个新的治疗目标为扭转d。据报道,雷帕霉素可以改善勃起功能通过诱导自噬在d大鼠(46]。然而,自噬具有器官特异性,组织特异性,甚至细胞特异性,即不同的部位有不同的自噬的变化同样的疾病。此外,过度激活自噬会导致负面影响(47]。因此,系统性管理autophagy-regulated代理是不合适的。近年来,干细胞疗法在治疗慢性疾病(成为一个有前途的战略48,49]。干细胞可以帮助修复受损组织或结构向正常状态,和许多研究已经证明,干细胞生效通过恢复自我吞噬体内平衡(50,51]。几种类型的msc,如骨骨髓来源间充质干细胞和脂肪干细胞tissue-derived,已经用于治疗d通过intracavernous注入和显示积极作用[24,25]。然而,这些干细胞必须通过侵入性方法,从而限制其在临床实践中使用。南加州大学细胞可能是一个更好的候选人,因为它们可以通过一个安全、简单、低成本、和非侵入性的程序。

在这项研究中,我们利用一个coculture系统调查CCECs南加州大学的影响。我们发现,南加州大学可以部分纠正自噬障碍AGE-treated CCECs和减少细胞损伤在体外,这些保护作用可以通过自噬抑制剂被废除。此外,我们发现intracavernous注入恢复提一个有关海绵体的d大鼠内皮细胞自噬活动,提一个有关海绵体血管内皮功能以及和勃起功能。这些结果有助于更好地理解南加州大学在d的治疗机制。我们之前的结果表明,罕见的标记南加州大学可以跟踪在阴茎组织细胞移植后7天以来,这是类似于大多数研究,利用其他msc治疗ED鼠模型(31日]。因此,我们推测,南加州大学的旁分泌作用,调节自噬平衡由于南加州大学能够分泌大量的旁分泌因子(30.,还需要进一步的研究来验证这一假设。据报道,VEGF表达的msc可以参加自噬通过触发PI3K / AKT / mTOR信号通路,从而改善d大鼠(45]。也许南加州大学通过相同的信号通路调节自噬,正如我们已经表明,VEGF是南加州大学分泌的生长因子(31日]。

由于人体细胞被注入免疫活性的老鼠中,免疫耐受的问题是非常重要的。作为一个类型的msc、南加州大学拥有相同的免疫调节和免疫抑制特性,它允许甚至同种异体或异种的移植到免疫活性的收件人没有免疫抑制剂(52]。我们先前的研究已经证明,免疫反应和炎症反应发生后注射的老鼠的阴茎组织内注入南加州大学(31日,36]。南加州大学的限制,他们的治疗效果可能受尿液的生化成分变化的影响。因此,对于患者泌尿疾病,如泌尿系感染和肾或其他泌尿道的肿瘤,似乎他们的南加州大学不适合细胞自体移植。

在我们研究不可避免地存在一些局限性。首先,准确的自噬通路的异常d和南加州大学恢复提一个有关海绵体内皮细胞的自噬活动进一步的研究需要阐明。第二,没有尝试做是为了评估提一个有关海绵体平滑肌功能的变化,成纤维细胞,或周围神经内皮功能障碍后缓解。第三,南加州大学的影响是复杂的,目前还不清楚南加州大学持续多长时间,旁分泌作用发生时,影响持续多久。

5。结论

我们的研究表明,自噬受损提一个有关海绵体内皮功能障碍是参与和d大鼠勃起功能障碍。Intracavernous注入南加州大学上调自噬提一个有关海绵体内皮的活动,提一个有关海绵体内皮功能障碍,最终导致改善改善勃起功能障碍引起的糖尿病。这些发现提供了一个基础为未来使用d南加州大学作为一个新的生物治疗方法。

数据可用性

可用的数据联系相应的作者。

的利益冲突

作者声明没有二元性与此相关的手稿。

作者的贡献

太极张Daosheng罗,和李婷婷了同样的工作。

确认

这项工作得到了国家自然科学基金(格兰特数字81671449,81671834,81671834,81871110);的前沿和关键技术创新特殊基础广东省中国(批准号2016 b030230001);中国广东省自然科学基金(2015 a030313013格兰特数字,2016 a030313229, 2018 a030310286);医疗合作创新基金重大项目的广州市,广东省,中国(批准号201604020189);和中山大学的青年教师培训项目(批准号ykpy68 17和18 ykpy09)。