人类脐带间充质干细胞治疗效果在不同的段落在大鼠急性肝衰竭

文摘

最近的研究描述了有益的间充质干细胞(msc)的注入来自沃顿商学院的果冻组织,治疗急性肝功能衰竭(ALF)。然而,数据缺乏culture-expanded msc的治疗潜力。我们检查了通道的治疗潜力5 (P5)和10 (P10)人类脐带——(hUC)通过移植msc Sprague-Dawley (SD)老鼠D-galactosamine (D-GalN)和LPS-induced急性肝功能衰竭(ALF)。SD大鼠,随机分为三组:对照组,P5 hUC-MSCs组和P10 hUC-MSCs组。移植后,P5 hUC-MSCs提供了一个重要的生存受益。分析天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(治疗组)与P5 hUC-MSCs水平表明,移植与P10 hUC-MSCs比治疗更有效。P5 hUC-MSCs还成功表达下调肝活动指数(HAI)分数。P10 hUC-MSCs相比在活的有机体内,P5 hUC-MSCs显著增强肝细胞的再生和抑制细胞凋亡。CM-Dil-labeled hUC-MSCs收件人肝内被发现灌输,而细胞归巢受体肝脏的P10 hUC-MSCs组相比P5 hUC-MSCs组也不那么有效。之前的研究表明,肝细胞生长因子(HGF)的浓度在受伤的肝脏显著增加。HGF通常被称为c-Met的配体。c-Met水平hUC-MSCs由免疫印迹检测表明,在更高的通道数,c-Met下降。这些数据表明,直接移植P5 hUC-MSCs可以更有效地受伤的肝脏。随后,五常hUC-MSCs可以拯救阿尔夫,在大鼠的肝脏肝再生刺激内源性补偿肝功能,抑制肝细胞凋亡,这是依赖于更高层次的比P10 hUC-MSCs c-Met。

1。介绍

肝功能衰竭是一种临床综合症,其特征是黄疸、腹水、肝性脑病、出血倾向由于肝功能受损。综合症可能是由于各种各样的因素如病毒性肝炎、自身免疫性肝炎、药物引起的肝损伤、代谢疾病,和循环障碍(1]。

到目前为止,唯一的肝衰竭的治疗选择是原位肝移植。接受移植失败原因包括缺乏可用的器官,高费用,要求终身免疫抑制药物。短的其他治疗策略包括生物人工肝脏肝细胞和医疗管理2]。因此,人们迫切需要新的治疗选择。桑德斯等人认为,肝衰竭肝的灾难性后果损失的结果和残余肝细胞的再生未能及时修复,导致更高的死亡率(3]。细胞再生医学治疗显示了相当大的承诺。间充质干细胞(msc)有许多优势,包括他们的自我更新、增殖和分化特性。msc最初骨髓中找到,也可以从脐带分离,脂肪组织,牙髓,羊水4,5]。msc,很容易获得的,没有任何道德论点,是缺损的首选,尤其是细胞从骨髓(BM)。自体的温和疗效BM-MSCs被认为是由于老化和缺乏活力6]。

最近,一些研究报道,人类脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)是另一种有前途的来源,它们是免费的从衰老和无限的供应。他们也具有低免疫原性力量,较高的增殖活性,multipotency [7]。Gholamrezanezhad et al。8]表明没有明显改善肝功能在月时间的后续因为BM-MSCs的归巢能力到肝脏发生在只有数量有限的注入细胞。彭等人也报告说,MSC的归巢能力是自体MSC移植的主要原因没有实现可接受的长期影响病人的预后(9]。有关细胞疗法的挥之不去的问题是是否交付细胞受伤的网站和如何提高导航能力。

肝细胞生长因子(HGF)是最有效的肝细胞有丝分裂原,通过受体功能称为细胞间质上皮转变因素(c-Met) [10]。HGF-c-Met轴已被广泛研究,因为它是MSC归航的关键在肝损伤(11]。我们的主要实验发现,肝脏的HGF水平显著增加,在24小时和48小时达到高峰,分别post-D-GalN /有限合伙人注入。同时,过表达c-Met BM-MSCs改进了寻的功效,受伤的肝脏和改善肝功能(12]。此外,新鲜分离msc失去配体或受体,在扩张应对迁徙信号(13]。

在这项研究中,我们旨在调查的影响CM-Dil-labeled hUC-MSCs肝功能衰竭和hUC-MSCs自导各段落之间的潜在机制。

2。材料和方法

2.1。动物

男性Sprague-Dawley老鼠重220 - 250克是购自南京医科大学动物实验中心(中国南京)。所有程序都执行严格按照指南中推荐的保健和南京医科大学实验动物的使用。所有实验协议是通过南京医科大学动物伦理和福利委员会(中国南京)。

2.2。hUC-MSCs

P2 hUC-MSCs是从Cyagen购买的。在扩大培养基培养细胞颗粒是由人类脐带间充质干细胞基础培养基(Cyagen huxuc——01001年,中国),补充人类脐带间充质干细胞cell-qualified 10%胎牛血清,1%谷氨酰胺和1% penicillin-streptomycin (Cyagen),在37°C,在充分湿润环境中二氧化碳的5%。

本机hUC-MSCs (P5)停牌1×10的浓度⁶细胞/毫升,洗两次磷酸盐(PBS),然后孵化30分钟在黑暗中在4°C以下反抗体分子共轭与异硫氰酸荧光素(FITC)或藻红蛋白(PE): anti-CD31-PE (303105), anti-CD45-PE (368509), anti-CD34-PE (343605), anti-CD44-FITC (338803), anti-CD90-FITC(328107),和anti-CD105-FITC (328107;所有从BioLegend)。30分钟后,细胞被洗和resuspended在300毫升细胞修复(BD)。PE-conjugated IgG1和FITC-conjugated IgG1被用作同形像控制(研发系统公司和圣克鲁斯生物技术公司)。Immunophenotyping hUC-MSCs由流式细胞术。

2.3。动物模型和细胞移植

之前的研究中使用的动物模型是描述(14]。D-galactosamine (D-GalN 1000毫克/公斤体重,σ)和脂多糖(LPS、10μ克/公斤体重;σ)溶解在PBS和同时管理动物腹腔内。细胞被移植在注射10%水合氯醛麻醉,24小时后D-GalN /有限合伙人的管理。SD大鼠,随机分为三组:A组,老鼠收到1毫升生理盐水通过尾静脉作为控制( );B组,老鼠收到1毫升的P5 hUC-MSCs (1×10⁷通过尾静脉(细胞/公斤) );和C组大鼠接受P10 hUC-MSCs (1×10⁷通过尾静脉(细胞/公斤) )。收集血液样本在24 h, 48 h,和72 h后注入D-GalN /有限合伙人,最后,整个肝脏收集、固定,然后准备进一步分析。

2.4。血清转氨酶水平

血清样本存储在−80°C,直到时间的分析。血清天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(治疗组)和丙氨酸转氨酶(ALT)水平测量大鼠血液中根据制造商的指示设备从南京建成生物工程研究所(中国南京)。

2.5。肝脏组织学

Formalin-fixed,肝脏样本石蜡包埋切片厚度为4μm和苏木精和伊红染色())。使用肝组织学评估执行活动指数(HAI)后,分级指南之前描述(15]。

2.6。细胞标记

标签之前,P5和P10 hUC-MSCs盘子使胰蛋白酶化细胞计数。CM-Dil(美国表达载体)然后直接添加到培养基(2标签细胞工作的解决方案μg / mL) 5分钟37°C,然后额外的15分钟4°C。标签后,介质被丢弃,细胞与PBS清洗三次,消除残余fluorescent-conjugated抗体。在注射后24小时D-GalN /有限合伙人,贴上P5和P10 hUC-MSCs (1×10⁶1毫升生理盐水)细胞被移植到老鼠,老鼠和控制收到1毫升生理盐水。额外的24小时后,老鼠被杀的肝脏可能被删除。冻结部分被Image-Pro +荧光显微镜检查和分析。

2.7。免疫组织化学

formalin-fixed组织的部分留给deparaffinized前1小时60°C,水化,封锁在过氧化氢3%乙醇为15分钟。增殖细胞核抗原(PCNA)免疫组织化学,部分被封锁1.5%牛血清白蛋白(BSA) 30分钟和孵化与增殖细胞核抗原(谷歌生物学、武汉)anti-mouse一夜之间在4°C。部分清洗和孵化了一只兔子反人类免疫球蛋白二次抗体(K5007、DAKO、丹麦)在室温下50分钟。部分被添加到新准备民建联工具包(DAKO、丹麦)。积极的原子核与棕色和黄色的颜色表示。部分与苏木精复染色3分钟和1%的盐酸几秒钟。最后,部分尼康光学显微镜下观察后脱水。为终端原位缺口末端标记(TUNEL)染色,我们使用了原位检测细胞死亡工具包(瑞士罗氏公司)根据供应商的指令。

2.8。免疫印迹分析c-Met蛋白质

检测水平c-Met,总蛋白质样品相同数量的P3, P5, P8, P10 hUC-MSCs提取。蛋白质被确定基于BCA试剂盒提供的指令(美国热科学),然后由钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳(sds - page)和转移到硝化纤维膜。膜与鼠单克隆抗体anti-c-Met孵化(圣克鲁斯生物技术、圣克鲁斯,美国)在1:500稀释一夜之间在4°C,然后用一只羊孵化anti-mouse免疫球蛋白G二级抗体(美国通用电气医疗集团生物科学)在室温下为60分钟。结果发现使用一个增强化学发光(ECL)工具包(美国通用电气医疗集团生物科学)和可视化成像系统。

2.9。统计数据

数据表示为平均值±标准偏差(SD)使用SPSS 16.0版(美国芝加哥,IL)。统计学意义决定通过一个单向方差分析(方差分析)和生存分析的生存率较三组。一个值< 0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。识别培养hUC-MSCs

后复苏和培养5 - 7天,细胞开始呈表型。14天后,细胞的数量增加,成长在一个平行排列。串行通道后,他们迅速扩散在体外,没有明显的形态学变化。流式细胞仪显示这些细胞为阴性的表达造血标记如CD45、CD34和CD31。然而,他们积极CD105, CD90, CD44,通常被认为是msc的标记。这表明,这些细胞被hUC-MSCs(图1)。

3.2。提高存活率和肝功能的阿尔夫老鼠接受移植hUC-MSCs

之间的所有大鼠对照组死亡48 h和96 h后盐水注入。P10 hUC-MSCs组存活率为37.5%,三个老鼠幸存的一个星期后。老鼠接受P5 hUC-MSCs存活率为62.5%在7天,而且只有三只老鼠死了。的观察生存率明显高于P5 hUC-MSCs组(图2(一个))。

如数据所示2 (b)- - - - - -2 (d)血清ALT, AST, P5 hUC-MSCs组和治疗组水平减少移植后24小时(165.50±22.73 U / L, 254.69±22.89 U / L和27.03±2.92μ分别为mol / L),而肝功能P10 hUC-MSCs集团仍然增加(312.13±14.98 U / L, 382.70±23.48 U / L和35.98±2.10μ分别为mol / L)。移植后48 h, P10 hUC-MSCs组的血清水平也显著下降(ALT: 269.50±24.16 U / L, AST: 325.07±33.38 U / L,治疗组:35.98±2.10μmol / L),肝损伤指标仍低于的老鼠接受P5 hUC-MSCs (ALT: 118.56±23.05 U / L, AST: 114.47±23.06 U / L,治疗组:18.67±2.33μmol / L)。此外,血清ALT水平的显著差异,AST,治疗组之间的P5 hUC-MSCs集团和P10 hUC-MSCs组观察到48 h和72 h post-D-GalN /有限合伙人注入( )。没有观察到显著差异D-GalN / LPS coinjection后24小时。

3.3。hUC-MSCs疗法改善总值和微观肝脏组织病理学,减少炎症细胞浸润

评估是否用P5 hUC-MSCs再生治疗受伤的肝脏在更大程度上比P10 hUC-MSCs,我们进一步评估肝脏组织学)染色。H&E-stained部分显示大量的坏死和肝小叶损伤对照组72 h,但肝细胞坏死是抑制P5 hUC-MSC和P10 hUC-MSC组(图3(一个))。而微观评价H&E-stained肝脏部分揭示了重要的细胞质液泡化和严重的炎性细胞浸润在48小时post-P10 hUC-MSC移植,老鼠的部分收到P5 hUC-MSC移植了温和的门静脉周的炎性细胞浸润,肝细胞水肿P5 hUC-MSC移植(图48 h后3(一个))。此外,海分数随机评估专家病理学家之间明显不同坏死和炎性细胞浸润( ;图3 (b)少),表明有坏死和温和的炎症反应在P5 hUC-MSC组相比P10 hUC-MSC组。

3.4。hUC-MSCs抑制体内肝细胞凋亡

确定不同段落的hUC-MSCs影响肝细胞凋亡,TUNEL-reactive数量的肝细胞在肝细胞核部分决定。四个400 x字段被随机选择从三组,并积累了凋亡细胞的数量计算使用Image-Pro +软件。许多凋亡的肝细胞中观察到的控制样品(NS: 24.0±4.8),而显著减少在场hUC-MSC治疗(P10: 14.0±3.4;P5: 7.4±1.8;图4(一))。量化TUNEL透露,P5 hUC-MSC治疗有效减少肝细胞死亡后coinjection D-GalN和有限合伙人与P10 hUC-MSCs相比(图4 (b))。

3.5。hUC-MSCs增强肝再生

评估是否hUC-MSCs促进肝脏再生,PCNA-positive肝细胞的数量是量化并与控制saline-treated动物。几个PCNA-positive肝细胞中观察到的控制,许多人看到后hUC-MSC政府(图5(一个))。P5 hUC-MSC组显著增加增殖细胞的数量(IOD: 24604.99±1132.43)被发现,相比控制(IOD: 13929.3±813.7)。此外,P10 hUC-MSC PCNA-positive细胞群的数量也略有增加(IOD: 188550.99±1654.58)。这些结果提供的证据表明,与msc注入肝脏的再生程序在阿尔夫(图5 (b))。

3.6。CM-Dil-Labeled hUC-MSCs体内

管理的P5 hUC-MSCs与受伤的老鼠肝脏比P10 hUC-MSCs更有效。重要的是,主msc失去配体或受体,应对在迁徙的信号在体外扩张(16]。因此,我们评估的归航疗效P5和P10 hUC-MSCs关于受伤的肝脏。探讨归航功效,CM-Dil-labeled P5和P10 hUC-MSCs (1×10⁶细胞)通过尾静脉注射后24小时的道与D-GalN /有限合伙人。如图6(一)中央静脉周围,道细胞主要分布在正弦曲线。P5 hUC-MSC政府后,细胞的数量与荧光(120±14)高于P10 hUC-MSC政府(77±12)在肝脏(图6 (b))。这些数据表明,P5 hUC-MSCs更有效地迁移到受伤的肝脏。

3.7。c-Met表达hUC-MSCs

我们的主要实验发现,肝脏的HGF水平显著增加,在24小时和48小时达到高峰,分别post-D-GalN /有限合伙人注入。此外,过表达c-Met BM-MSCs改进了寻的功效,受伤的肝脏和改善肝功能。此外,新鲜分离msc失去迁徙配体和受体响应信号在扩张(13,16]。P3的hUC-MSCs c-Met蛋白质水平,P5, P8, P10代通过免疫印迹分析。随着细胞通道的数量增加,c-Met hUC-MSCs表达水平逐渐下降。有显著差异的表达c-Met P5和P8 hUC-MSCs之间,虽然c-Met表达P10 hUC-MSCs几乎不能被测量(图7)。这些结果似乎表明更好的归航P5 hUC-MSCs的功效,和增强归航P5 hUC-MSC移植的疗效明显改善肝功能。

4所示。讨论

自我更新能力和多能——msc被越来越多地用于组织工程和再生医学(17]。BM-MSCs已经彻底的特点(18,19]。然而,他们的收购是有害的,和分化能力随年龄(20.]。

在先前的研究中,UC-MSCs被成功分离并培养(21]。由于方便的可访问性,低免疫原性,和更高的分化能力,hUC-MSCs一直是一种理想的临床调查的msc来源细胞疗法(21,22]。本研究进行了验证hUC-MSCs的特点。细胞形成了形态均匀的纤维母细胞,在体外培养。流式细胞术表明,细胞阳性CD105, CD90, CD44,但消极CD34、CD31、CD45。结果表明这些细胞间充质来源,这与先前的报道是一致的(23,24]。P5 hUC-MSC移植过程中,大鼠的死亡率与阿尔夫是有效地减少了62.5%,而控制。此外,血清AST、ALT、P5 hUC-MSCs治疗后,治疗组明显降低,这是优于P10 hUC-MSC移植。肝组织病理学和病理评分进行评估来评估hUC-MSC移植的有效性。后肝组织细胞的组织学评估管理提供初步洞察细胞这种疗法的目标。结果表明,hUC-MSCs可能重建肝组织。

阿尔夫通常与进步,大量的肝细胞坏死(25]。尽管UC-MSCs可以分化成肝细胞在活的有机体内肝细胞的比例来自hUC-MSCs <肝细胞总数的1%。数据表明,分化肝细胞不能弥补肝功能的恢复(26]。刺激内源性再生代表MSC-based疗效的另一个潜在的机制,先前描述的心肌梗死模型(27]。我们的研究结果表明,交付hUC-MSCs可以增加增殖肝细胞的数量。五常hUC-MSC治疗增加PCNA近两个方面与对照组相比,虽然P10 hUC-MSCs更为温和增长。此外,抑制细胞死亡是一个治疗的基础MSC治疗已经观察到心肌梗死和中风的模型(28,29日]。在这项研究中,我们也提供了证据,交付hUC-MSCs有潜力减少肝细胞凋亡。这与观察之前的研究涉及CCL4-induced肝脏损伤,hUC-MSC治疗抑制肝细胞凋亡,刺激肝脏再生在活的有机体内(30.]。通常知道msc分泌营养因子和细胞因子,在旁分泌作用作为一个调停者角色,涉及凋亡因子(HGF和胰岛素样生长因子- 1 (igf - 1)), angiogenetic因素(血管内皮生长因子(VEGF)和有丝分裂因素(表皮生长因子(EGF)和HGF) (31日]。最近,它已经认识到msc释放大量细胞外囊泡(EVs)参与组织再生通过将信息转移到受损的细胞或组织,发挥生物活性与msc(类似31日]。棕褐色等人表明MSC-EVs增加了移植的肝细胞再生与增殖相关的蛋白质如PCNA基因和细胞周期蛋白D1 antiapoptosis Bcl-xL [32]。此外,田村等人评估,MSC-EVs抑制促炎细胞因子的分泌也增加了抗炎细胞因子的释放和调节性T细胞的水平(33]。此外,MSC-EVs调节炎症反应和激活凋亡通路通过特定的rna (34]。

大多数报告描述细胞移植MSC治疗的主要模式,但MSC的治疗效果取决于自导功效受伤的网站。胶质瘤是最有效的促分裂原在组织损伤的肝细胞再生,及其生物效应依赖于酪氨酸激酶受体和c-Met。HGF-c-Met轴发挥了关键作用的归航msc在肝损伤(11]。

我们的主要实验证明的最高浓度观察HGF在肝脏在24 h post-DGalN / LPS coinjection。同时,过表达c-Met BM-MSCs改善了导航功效受伤的肝脏(12]。

此外,在扩张,主要msc失去迁徙配体和受体响应信号(13,16]。我们的研究结果表明,P5 hUC-MSCs更有效地迁移到受伤的肝脏,P10 hUC-MSCs相比。此外,我们的结果表明,c-Met表达式是依赖于细胞通道数。c-Met水平较高可能与更好的归航功效P5 hUC-MSCs P10 hUC-MSCs相比。尽管P3 hUC-MSCs c-Met高表达,数量有限的P3 hUC-MSCs收集不能达到所需的交付数量。即使治疗所需数量的msc可以实现,经济成本也需要考虑在内。因此,P5 hUC-MSCs可能是理想的替代细胞疗法。此外,g . Wang和p . Wang表明缺氧中发挥着重要作用的增加c-Met表达式和人类前列腺癌的侵袭性。入侵DU 145个细胞(人类前列腺细胞)在缺氧条件下的表达水平与c-Met [35]。P5 hUC-MSCs缺氧促进c-Met表达式是否需要进一步的验证。

受伤的组织内迁移受多种因素的影响。管理msc通过门静脉或肝动脉显示归航功效小于5%和20 - 30%,分别为(36,37]。此外,缺氧引起瘦素的表达,增强骨髓间充质肝的招聘(38]。与此同时,超过60个不同的小分子核糖核酸的msc最近被描述,其中一些参与迁移,包括let7 microRNA-10b, microRNA-27b,微rna - 335和微- 886 - 3 b (39]。此外,SH3的丧失、ICAM integrin-1报道生产的细胞外分子伴随着人类文化的首要msc (40]。

5。结论

最近的研究详细的潜在好处hUC-MSC输液治疗阿尔夫。政府表明,系统性hUC-MSC疗法对肝细胞凋亡有着深刻的抑制作用,刺激肝脏再生补偿肝功能也提高了老鼠的存活率与D-GalN / LPS-induced阿尔夫。此外,我们的研究结果表明,P5 hUC-MSCs更有效地迁移到受伤的肝脏,而P10 hUC-MSCs。导航的主要机制似乎是调节分子msc在孵化在体外趋化因子受体或粘附分子等,也已被证明能够影响肝星状细胞(的归航41,42]。然而,我们只能推测MSC归航的迅速降低效率在活的有机体内依赖于c-Met水平。

因此,hUC-MSCs可能是一个潜在的替代来源的细胞疗法阿尔夫,可能另外减轻肝细胞的短缺。

缩写

msc:	间充质干细胞
hUC-MSCs:	人脐带间充质干细胞
阿尔夫:	急性肝衰竭
D-GalN:	D-galactosamine
HGF:	肝细胞生长因子
C-Met:	细胞间质上皮转变的因素
AST:	天冬氨酸转氨酶
治疗组:	总胆红素
ALT:	丙氨酸转氨酶
电动汽车:	细胞外囊泡
PCNA:	增殖细胞核抗原
TUNEL:	终端原位缺口末端标记
igf - 1:	胰岛素样生长因子- 1
VEGF:	血管内皮生长因子
表皮生长因子:	表皮生长因子。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

作者的贡献

YZ、YL杰,CZ构思和设计实验。YZ、YL西城,JC, LJ, RX进行实验。我和楼主的进行了统计分析。YZ、CZ起草了手稿。所有作者阅读和批准最终的手稿。Yongting张先生和李宇文同样对本文亦有贡献。

确认

这项工作得到了国家自然科学基金(81770591,81800778),在肝脏Disease-Asia基科学研究学者项目,江苏省重点医药卫生人才基金(ZDRCA2016007) Medjaden学院和青年科学家研究基金会(MJR20160021),江苏省医学创新团队项目(CXTDA2017023)和中国国家十三5年科技项目(2017 zx10202201)。

引用

1. 蔡y、z .邹l .刘et al .,“骨骨髓来源间充质干细胞抑制急性肝损伤后肝细胞凋亡,”国际临床与实验病理学杂志》上,8卷,不。1,第116 - 107页,2015。视图:谷歌学术搜索
2. s Basto c . a . Villela Nogueira应承担的发信息给鲍思高堂另b . r . et al .,“长期死亡率的危险因素在一个大群候选患者肝移植在巴西,“肝移植,17卷,不。9日,第1020 - 1013页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. 美国j·桑德斯,r·麦克唐纳r·海克曼和j . Terblanche”治疗急性肝衰竭,肝脏疾病的进展4卷,第344 - 333页,1972年。视图:谷歌学术搜索
4. p·比安科、p·g·罗比和p . j . Simmons“间充质干细胞:回顾历史、概念和化验,”细胞干细胞,卷2,不。4、313 - 319年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. c . k . Rebelatto a . m .•阿吉亚尔·m·p·Moretao et al .,“不同的从骨髓间充质干细胞的分化,脐带血液、脂肪组织,”实验生物学和医学,卷233,不。7,901 - 913年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. t·舒伯特d . Xhema s纪实et al .,“异体骨的增强性能使用成骨分化脂肪间充质干细胞,”生物材料,32卷,不。34岁,8880 - 8891年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. d . Baksh, r .姚明,r . s .老爷”比较人类间充质干细胞的增殖和multilineage分化潜力来自脐带和骨髓,“干细胞,25卷,不。6,1384 - 1392年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. a . Gholamrezanezhad s Mirpour m .阿訇et al .,“体内跟踪111 in-oxine标记间充质干细胞在晚期肝硬化患者输液之后,“核医学和生物学,38卷,不。7,961 - 967年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. 林l .彭d . y .谢B . l . et al .,“自体骨髓间充质干细胞移植肝衰竭患者的乙型肝炎引起的:短期和长期的结果,“肝脏病学,54卷,不。3、820 - 828年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. l . Trusolino a Bertotti, p . m . Comoglio”遇到了信号:原则和功能在开发中,器官再生和癌症,”自然评论。分子细胞生物学,11卷,不。12日,第848 - 834页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. g . j . Liu, t梁,p .黄”HGF / c-Met信号介导的间充质干细胞cell-induced肝脏恢复在肠缺血再灌注模型中,“国际医学科学杂志》上,11卷,不。6,626 - 633年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. 朱y . k . Wang, t . et al .,“过度的c-Met骨髓间充质干细胞改善它们的有效性在急性肝衰竭自导和修复,”干细胞研究与治疗,8卷,不。1,p。162年,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. k . s . s . Fatimah g . c . Tan蔡,m . m . n .什么a . e . Tan和a . r .协议”具备干细胞和血管生成基因表达变化serial-passage人类羊膜间充质细胞,”微血管的研究,卷86,不。3、21、2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. 郑,j .杨y唐et al .,“骨髓间充质干细胞移植对血清和肝脏HMGB1表达与急性肝衰竭大鼠,”国际临床与实验病理学杂志》上,8卷,不。12日,第15992 - 15985页,2015年。视图:谷歌学术搜索
15. n . d . Theise“肝活检评估在慢性病毒性肝炎:个人,实用的方法,”现代病理学,20卷,S3-S14, 2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. w . j . c . Rombouts和r . e . Ploemacher”主要鼠骨髓MSC展示高效归航但丧失自导能力文化后,“白血病,17卷,不。1,第170 - 160页,2003。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. a . Mobasheri c . Csaki a . l . Clutterbuck m . Rahmanzadeh和m . Shakibaei“间充质干细胞在结缔组织工程和再生医学:应用软骨修复和骨关节炎治疗,”组织学和组织病理学,24卷,不。3、347 - 366年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. p . Charbord“骨髓间充质干细胞:历史和概念,概述”人类基因治疗,21卷,不。9日,第1056 - 1045页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 好李,t . k .郭w·m·陈k·d·李,s . l .谢长廷和t·h·陈,“孤立的多功能从脐带血间充质干细胞,”血,卷103,不。5,1669 - 1675年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. k . Stenderup j . Justesen c·克劳森,m .卡塞姆“老龄化与降低最大寿命和加速衰老的骨髓基质细胞,”骨,33卷,不。6,919 - 926年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. x, j·巴姨,x, y .宣,r . Li和y王,“综合表征四个不同人群的人类间充质干细胞免疫属性,增殖,分化,“国际分子医学杂志》上,34卷,不。3、695 - 704年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. s . c . h . s . Wang挂,s t .彭et al .,“间充质干细胞在人类脐带沃顿的果冻,“干细胞,22卷,不。7,1330 - 1337年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. h·张,张,y道et al .,“隔离和表征整个人类脐带间充质干细胞的应用单一酶方法,”细胞生物化学和功能,30卷,不。8,643 - 649年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. a . k . Batsali M.-C。Kastrinaki、h·a·Papadaki和c . Pontikoglou“间充质干细胞来自沃顿商学院的果冻脐带:生物属性和新兴临床应用”目前干细胞研究和治疗,8卷,不。2、144 - 155年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. w·伯纳尔g . Auzinger Dhawan a, j . Wendon“急性肝衰竭,《柳叶刀》,卷376,不。9736年,第201 - 190页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. 刘张,l . Chen t . et al .,“人类脐带基质干细胞有效抢救急性肝衰竭肝分化,通过旁分泌作用而不是“组织工程部分,18卷,不。13 - 14日,第1364 - 1352页,2012年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. k . e . Hatzistergos h .农业部长,b . n . Oskouei et al .,“骨髓间充质干细胞刺激心脏干细胞增殖和分化,“循环研究,卷107,不。7,913 - 922年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. m . Gnecchi h .他梁o . d . et al .,“旁分泌作用占显著保护缺血性心Akt-modified间充质干细胞,”自然医学,11卷,不。4、367 - 368年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. x y,陈、g . Chen等人“人类在大鼠骨髓基质细胞治疗中风:神经营养因子和功能恢复,”神经学卷,59号4、514 - 523年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. y, w•徐黔h . et al .,“从人类脐带间充质干细胞改善小鼠肝脏损伤体内,”肝脏国际卷,29号3、356 - 365年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. 人工智能卡普兰和j·e·丹尼斯,“间充质干细胞作为营养介质,”细胞生物化学杂志》上,卷98,不。5,1076 - 1084年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. c . y . Tan r·c·赖w . Wong y y丹,研究。Lim, h . k . Ho”间充质干细胞液促进药物引起的肝损伤的肝再生模型,”干细胞研究与治疗,5卷,不。3,p。76年,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. r (s . Uemoto, y Tabata“间充质干细胞的免疫抑制效应上液伴刀豆球蛋白A-induced肝损伤模型中,“炎症和再生,36卷,不。1,p。26日,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. h·哈加严k, k .高桥松田,t·帕特尔,“细胞外囊泡从骨骨髓来源间充质干细胞改善生存致命的肝衰竭的老鼠,”干细胞转化医学》第六卷,没有。4、1262 - 1272年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. g . Wang和p . Wang”缺氧的影响在c-met的表达和vasiveness DU145前列腺癌的细胞,”中国癌症预防和治疗》杂志上,18卷,不。6,416 - 419年,2011页。视图:谷歌学术搜索
36. j . Puppi s . c .斯特罗姆·r·d·休斯et al .,“改善人类肝细胞移植技术:报告一个共识在伦敦的会议上,“细胞移植,21卷,不。1、1 - 10,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. 答:a .汗m . v . Shaik: Parveen et al .,“人类胎儿liver-derived干细胞移植作为支持在终末期肝硬化失代偿性的管理形态,”细胞移植,19卷,不。4、409 - 418年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. 江z . x, r . Wu et al .,“瘦素信号需要扩增间充质干细胞的治疗特性赋予缺氧预处理,”干细胞,32卷,不。10日,2702 - 2713年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. e·a·克拉克,s . Kalomoiris j . a . Nolta和f . a . Fierro”简洁点评:microRNA在多功能间充质基质细胞功能,“干细胞,32卷,不。5,1074 - 1082年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. p . a . Conget和j·j·Minguell表型和功能属性的人类骨髓间叶细胞祖细胞,”细胞生理学杂志,卷181,不。1,第73 - 67页,1999。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. 诉m·贝里奥·g·j·内尔,g . Nowakowski et al .,“细胞因子诱导的分子基础缺陷自导和造血干细胞移植,”实验血液学卷,29号11日,第1335 - 1326页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. m·拉米雷斯j·c·塞戈维亚,驱魔师et al .,“脐带血的体外扩张(UCB) CD34(+)细胞改变的表达和功能α4β1和α5β1整合蛋白,”英国血液学杂志》,卷115,不。1,第221 - 213页,2001。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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