FGF2变弱后神经细胞死亡通过抑制自噬鼠轻度创伤性脑损伤

文摘

创伤性脑损伤(TBI)会导致身体和认知障碍,造成二次损伤过程。有效的几种药物对创伤性脑损伤病人仍然缺乏。纤维母细胞生长因子2 (FGF2)是一种重要的神经营养因子可以刺激神经新生血管生成和已被证明有神经保护作用后大脑的侮辱。先前的研究表明,FGF2的神经保护作用可能与其调节自噬的功能相关。本研究调查了FGF2的有利影响老鼠轻度创伤性脑损伤的早期阶段和底层机制。一百四十四只老鼠被用于创建控制皮质影响(CCI)模型来模拟创伤性脑损伤后的病理损害。我们的研究结果表明,预处理FGF2发挥了神经保护作用的老鼠轻度创伤性脑损伤的早期阶段通过减轻脑水肿、减少神经赤字,防止组织损失,增加存活的神经元的数量在受伤的皮质和海马体侧。FGF2还能保护细胞免受各种形式的死亡通过抑制自噬细胞凋亡或坏死等。最后,自噬激活雷帕霉素可以废除FGF2的保护作用。本研究扩展我们对FGF2的神经保护作用的理解和揭示了创伤性脑损伤后的药物治疗。

1。介绍

创伤性脑损伤(TBI),如今死亡和残疾的主要原因,是全世界的一个主要卫生问题1,2]。甚至轻度创伤性脑损伤可能导致延迟物理和认知障碍(3]。尽管大量的随机对照试验(相关的)是近年来完成的,没有干预是有益的(4- - - - - -6]。因此,必须进一步阐明复杂的创伤性脑损伤的病理生理机制和开发有效的药理干预的目标。人们普遍承认,创伤性脑损伤有两个受伤phases-primary伤害和二次伤害。主要的损伤是直接由创伤本身引起的,而二次损伤与一系列更复杂的病理反应,包括血脑屏障破坏、氧化应激、神经炎症,自噬,细胞凋亡和坏死的细胞死亡。这些过程在二级损伤与长期的神经赤字直接相关,还为我们提供多个在创伤性脑损伤的治疗目标管理。

自噬溶酶体降解途径,保护生物体免受各种病态(7]。在大多数情况下,自噬可以通过维持细胞内稳态促进细胞存活,但有大量研究表明,自噬也可能触发细胞死亡在某些病理情况下(8- - - - - -10]。研究人员已经观察到自噬的存在在创伤性脑损伤模型中几年前,和调制的过程可能会导致神经系统的改进(11- - - - - -13]。然而,直到最近几年,是否诱导或抑制自噬可能导致神经保护仍然是有争议的14- - - - - -16]。自噬的关系和其他形式的创伤性脑损伤后细胞凋亡等细胞死亡是值得研究的。

成纤维细胞的生长因子(fgf)是小的多肽生长因子在形态发生中发挥关键性的作用[17]。纤维母细胞生长因子2 (FGF2),也称为碱性纤维母细胞生长因子(bFGF),是这个家庭的重要成员。FGF2高度表达在中枢神经系统和展品早期衰退老化过程中(18]。先前的研究显示,它有丰富的神经保护效应,包括支持神经干细胞和祖细胞增殖在体外和体内19,20.),维护血管完整性和血管生成21,22),并帮助认知恢复(20.]。研究已经证明了FGF2在各种病理条件下的神经保护作用在中枢神经系统,如创伤性脑损伤、脊髓损伤(SCI)、缺血性脑损伤,蛛网膜下腔出血(SAH)和神经退行性疾病21,23- - - - - -26]。大多数以前的研究集中于FGF2神经发生的影响,但最近的一些研究发现FGF2的小说效应作为一个自噬抑制剂,其中mTOR / PI3K / Akt信号通路的激活可能需要(一个重要组成部分27,28]。FGF2在治疗创伤性脑损伤的分子机制尚未完全了解,我们假设FGF2也可以抑制自噬和减弱在治疗创伤性脑损伤的细胞死亡。

在目前的研究中,我们发现FGF2可以作为老鼠轻度创伤性脑损伤后的神经,减轻脑水肿,减少脑损伤体积,促进功能恢复。同时,FGF2也抑制自噬和减少神经细胞凋亡和坏死的细胞死亡。此外,自噬激活雷帕霉素可以废除FGF2的保护作用。这些结果为我们提供一个新的视角关于FGF2创伤性脑损伤后的神经保护作用。

2。材料和方法

2.1。动物和研究设计

成年男性Sprague-Dawley老鼠(250 - 300 g)获得线性实验动物有限公司(上海,中国)被用于这项研究。动物们保持在控制的温度和湿度条件下在12小时光/暗周期。所有程序涉及动物被严格遵守指导实验室动物保健和使用的美国国立卫生研究院和机构的动物保健和使用委员会批准温州医科大学。

2.2。CCI模型

用于创建CCI模型的过程细节是前面描述的29日]。简单地说,老鼠与戊巴比妥麻醉后通过腹腔内注射(40毫克/公斤),他们的头是固定在一个立体框架。大约5×5毫米颅骨切开术进行中途前囱和λ之间的右边frontoparietal皮层后中线切口。骨瓣仔细然后删除没有令人不安的底层硬脑膜。然后执行CCI使用精确™精密皮质撞击器(美国NC卡里)垂直于大脑表面(12°垂直)。影响尖端直径4毫米,3 m / s的速度产生影响,120 ms的持续时间,以及变形深度2毫米低于硬脑膜,模仿一个温和的焦点在大鼠创伤性脑损伤。骨皮瓣立即放回,密封,缝合伤口。老鼠在假针灸组相同的手术只是没有CCI。在手术期间,体温监测和维护为37.0±0.5°C,直肠探头耦合加热垫。动脉pH值,阿宝₂,pCO₂,血糖水平监测导尿过程前的右股动脉。老鼠回到家中笼子从麻醉完全恢复后在加热室。

2.3。实验设计

2.3.1。实验1

探索FGF2在大鼠创伤性脑损伤模型的影响,九十只老鼠被随机分为三组:虚假的组( ),创伤性脑损伤+汽车集团( ),创伤性脑损伤+ FGF2集团( )。一剂250μ克/公斤重组人类FGF2 (PeproTech Inc .,落基山,新泽西,美国)是管理经1 h在创伤性脑损伤诱导创伤性脑损伤+ FGF2组。鼻内政府可以提供FGF2直接到大脑通过鼻腔上皮(30.,31日]。的剂量和时间点FGF2预处理是基于一项研究[22]。虚假的组和创伤性脑损伤+车辆组同样体积的无菌生理盐水鼻内同时在创伤性脑损伤的感应点。实验6 h的端点(PI染色)和创伤性脑损伤后48 h(其他实验)归纳法,根据一项研究[32]。每组六大鼠用于脑含水量评估、体积损伤评估、免疫印迹、免疫荧光染色,和π染色。

2.3.2。实验2

探讨自噬是否介导FGF2效果,54个老鼠被随机分为三组:创伤性脑损伤+汽车集团( ),创伤性脑损伤+ FGF2集团( ),创伤性脑损伤+ FGF2 +说唱集团( )。FGF2预处理的剂量和时间点是在实验1一样。剂量的2毫克/公斤雷帕霉素(Selleck化学品,休斯顿,德克萨斯州,溶解在2% DMSO)于腹腔内30分钟后创伤性脑损伤诱导的创伤性脑损伤+ FGF2 +说唱团体基于之前的研究(33]。创伤性脑损伤+车辆组同样体积的无菌生理盐水经1 h在创伤性脑损伤的归纳。创伤性脑损伤+汽车集团和创伤性脑损伤+ FGF2组同样体积的2% DMSO腹腔内30分钟后创伤性脑损伤的归纳。6每组大鼠用于免疫印迹、免疫荧光染色,π染色。端点的实验在实验1一样。

2.4。评估神经赤字

检查FGF2在动物的神经赤字的影响创伤性脑损伤后,修改后的神经严重程度评分(mns)。每组动物的神经系统评分进行评估由一个独立的观察者在创伤性脑损伤后48 h感应使用电动机,感官,反射,平衡测试。计算总得分从0到18增加分数,和更高的分数表明糟糕的神经功能34]。大多数老鼠的mns低于6,这表明轻度创伤性脑损伤后受伤。实验2中脚故障测试是检查评估认知功能赤字由一个独立的观察者在创伤性脑损伤后48 h归纳。老鼠放在一个高架网格和允许自由移动5分钟或直到50步骤左前肢。步骤和下降时间的总数左前肢的清点,并左前肢足的百分比计算错误。

2.5。脑水含量测量

老鼠牺牲深麻醉下48 h后创伤性脑损伤。大脑被移除,右脑立即收集。称重后的湿重,样本然后干在105°C 24 h得到干重。大脑含水量计算使用以下公式:

2.6。苏木精和伊红染色(他)和体积损伤评估

在创伤性脑损伤后48 h,老鼠被牺牲和灌注intracardially 0.1更易与PBS (pH值7.4)和4%多聚甲醛(pH值,7.4)。大脑被删除并沉浸在同样的灌流液在4°C 72 h。日冕部分从1毫米前病变保证金,后部病变区,得到然后石蜡包埋。损伤量的计算是通过整合10节(3μ与300年米厚)μ米的间隔。苏木精HE-staining后与标准方法(0.5%,25°C,曙红5分钟和0.5%,25°C, 1分钟),大脑部分是使用立体显微镜成像(奥林巴斯BX51,奥林巴斯、东京、日本)在亮场照明和测量使用Image-Pro + 6.0(美国马里兰州银泉的媒体控制论)。病灶体积计算如下: ,在那里一个心室面积和吗d部分之间的距离,根据先前发表的工作(35]。

2.7。免疫印迹

西方墨点法进行如前所述[36]。大脑皮层区域,收集和均质。样本离心机,享年1000岁10分钟在4°C。上层清液进一步离心机,蛋白质含量测定用detergent-compatible蛋白质分析工具包(Bio-Rad、大力神、钙、美国)。相等数量的蛋白质(40μ从每个样本resuspended g)加载缓冲区,在95°C 5分钟变性,加载到十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳的墙壁。电泳后,蛋白质转移到聚偏二氟乙烯膜。膜被封锁的脱脂奶粉缓冲2 h和随后孵化一夜之间在4°C以下主要抗体:LC3(1: 1000年,细胞信号技术中科# 4108),Beclin-1(1: 1000年,Abcam ab62557), p62(1: 1000年,Abcam ab56416),和β肌动蛋白(1:2000年,圣克鲁斯sc - 47778)。膜处理是使用适当的二次抗体(1:5000)在室温下1 h。蛋白质乐队使用x射线胶片密度检测,和密度测量信号量化使用ImageJ软件(NIH,贝塞斯达,医学博士,美国)。

2.8。TUNEL和免疫荧光染色

老鼠在创伤性脑损伤后48 h感应牺牲深度麻醉和灌注intracardially 0.1更易与PBS (pH值7.4)和4%多聚甲醛(pH值,7.4)。大脑被删除并沉浸在同样的灌流液在4°C 72 h,然后用30%蔗糖溶液脱水,直到他们沉入底部(约2天)。冠状部分(7μ米)右半球的收集。大脑部分与10%正常山羊血清和0.3%孵化Triton x - 100,以防止非特异性结合在室温下1 h。一夜之间,那么部分被在4°C的环境中与主抗体:NeuN(1: 250,微孔MAB377)或LC3(1: 200年,细胞信号技术中科# 4108)。与0.01更易与PBS几次,洗后的部分是二次抗体孵育2 h在黑暗中在4°C。TUNEL染色工具包(原位细胞死亡检测装备,荧光素,罗氏,瑞士)是用于分析凋亡细胞死亡。大脑部分与TUNEL孵化反应混合物(90分钟)37°C。与PBS,洗后的部分被安装到幻灯片Fluoroshield™与DAPI (Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)。使用荧光显微镜观察疣状(奥林巴斯、东京、日本)。NeuN-positive总数、LC3-positive或TUNEL-positive细胞在三种不同片数/动物周围的病变区域或同侧海马的CA1和CA3区域在由一个独立的观察者。

2.9。Propidium碘(π)标签

在创伤性脑损伤诱导后5 h,π(10毫克/毫升;Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)在生理盐水稀释,注入大鼠腹腔内的剂量30毫克/公斤。1小时后,老鼠被牺牲和灌注intracardially 0.1更易与PBS (pH值7.4)和4%多聚甲醛(pH值,7.4)。然后大脑被移除,沉浸在4%多聚甲醛72 h。与30%蔗糖溶液脱水后,冠状部分(7μ米)收集右半球和PI-positive细胞病变周围的量化区域或在CA1区200 x每大鼠皮质字段在大脑三个部分。计算任务也由一个独立的观察者。

2.10。统计分析

为了便于对比三组,免疫印迹结果表示为乐队相比的相对密度β肌动蛋白,然后归一化到虚假的组的平均值。数据被表示为平均数±标准差。SPSS统计(22.0版)是用于统计分析。的所有数据进行使用单向方差分析(方差分析)其次是图基的多重比较检验。推断统计学意义 。

3所示。结果

3.1。生理评价

所有的生理参数监测在创伤性脑损伤的过程。体温,动脉的pH值(7.35 - -7.45),阿宝₂(85 - 95毫米汞柱),pCO₂(35 - 45毫米汞柱),血糖水平(95 - 125 mg / dL)监控和分析不同群体之间并无显著差异存在组间(数据没有显示)。没有记录在实验中死亡。

3.2。FGF2减轻神经赤字和脑水肿

代表大脑在每组样本的图片呈现在图1(一)。重大创伤性脑损伤后神经功能赤字观察48 h感应( ,图1 (b))。mns的创伤性脑损伤+ FGF2组显著低于在创伤性脑损伤+汽车集团( ,图1 (b))。受伤的大脑半球的脑含水量在48 h post-TBI也显著增加,与FGF2减弱这可能增加预处理( ,图1 (c))。

3.3。FGF2防止大脑组织的损失,促进创伤性脑损伤后神经元生存

脑损伤体积和神经元生存在48 h post-TBI评估。每组代表日冕部分如图所示2(一个)。创伤性脑损伤的损伤卷+ FGF2组明显小于创伤性脑损伤+ 48 h(汽车集团 ,图2 (b))。NeuN-positive侧皮层细胞的数量和同侧海马的CA1和CA3区域明显减少创伤性脑损伤后48 h,这个过程可以显著逆转当使用FGF2 ( ,数据2 (c)和2 (d))。

3.4。FGF2预防创伤性脑损伤后LC3-Positive细胞数量的增加

自噬在脑损伤后创伤性脑损伤的一个重要组成部分,但FGF2在创伤性脑损伤后调节自噬的作用还没有被研究过。作为自噬激活LC3是理想的生物标志物,我们选择LC3的自噬细胞。免疫荧光染色显示LC3-positive细胞几乎不可能观察到对照组的皮质,但显著提高了创伤性脑损伤后48 h感应( ,数据3(一个)和3 (b))。创伤性脑损伤+ FGF2组LC3-positive细胞的数量还不到,在创伤性脑损伤+汽车组,有统计学意义( ,数据3(一个)和3 (b))。

3.5。FGF2调节Autophagy-Related蛋白水平

证实自噬post-TBI FGF2的抑制效应,我们进一步测量Beclin-1的蛋白质含量和p62 LC3II /我在每组的比例。如图4Beclin-1显著调节的蛋白质含量在受伤的大脑皮层48 h后创伤性脑损伤( ,数据4(一)和4 (b)),FGF2 pretreatmet显著降低Beclin-1水平与创伤性脑损伤+汽车集团( ,数据4(一)和4 (b))。创伤性脑损伤的蛋白质水平显著降低p62 48小时( ,数据4(一)和4 (c)),而FGF2明显能阻止这个过程( ,数据4(一)和4 (c))。FGF2预处理的比例也显著调节LC3II /我与创伤性脑损伤+汽车集团( ,数据4(一)和4 (d))。这些结果表明,FGF2预处理可以抑制自噬的水平在创伤性脑损伤后48 h。

3.6。FGF2阻止细胞凋亡

TUNEL染色法用于检测凋亡细胞死亡受伤的皮层和侧海马的CA1区。虚假的组,TUNEL-positive细胞(图几乎不存在5(一个))。创伤性脑损伤显著增加凋亡指数与虚假的集团相比,虽然FGF2的预处理能显著防止凋亡指数与创伤性脑损伤的增加+汽车集团( ,数据5(一个)和5 (b))。

3.7。创伤性脑损伤后FGF2坏死细胞的数量减少

评估FGF2在保护细胞免受损伤的影响,π是用来确定质膜破坏细胞。质膜破坏是坏死细胞死亡的主要特征之一,PI-positive细胞可能代表坏死细胞死亡。PI-positive细胞的数量明显增加受伤的皮层和创伤性脑损伤侧海马的CA1区域+汽车集团6 h后创伤性脑损伤( ,数据6(一)和6 (b))。预处理与FGF2能显著防止PI-positive的百分比的增加细胞( ,数据6(一)和6 (b))。

3.8。雷帕霉素废除FGF2的神经保护作用

探讨自噬是否介导FGF2效果,雷帕霉素用于抵消FGF2引起的自噬抑制。mns和脚误在创伤性脑损伤+ FGF2组明显低于那些在创伤性脑损伤+汽车集团( ,数据7(一)和7 (b))。神经功能的增加与FGF2管理明显抑制由雷帕霉素( ,数据7(一)和7 (b))。Beclin-1明显下调的蛋白质含量在创伤性脑损伤的受伤的皮质+ FGF2集团( ,数据7 (c)和7 (d)),和雷帕霉素管理显著增加Beclin-1水平与创伤性脑损伤+ FGF2集团( ,数据7 (c)和7 (d))。FGF2的蛋白质水平显著提高p62 48小时( ,数据7 (c)和7 (e)),而雷帕霉素能显著防止这种过程( ,数据7 (c)和7 (e))。雷帕霉素的比例也显著调节LC3II /我与创伤性脑损伤+ FGF2集团( ,数据7 (c)和7 (f))。雷帕霉素也可以显著减少NeuN-positive细胞受伤的皮层和CA1区,与创伤性脑损伤+ FGF2集团( ,数据8(一个),8 (d),8 (g))。受伤的大脑皮层的细胞凋亡指数和坏死指数也增加了雷帕霉素后管理( ,数据8 (b),8 (c),8 (e),8 (f))。在创伤性脑损伤同侧CA1区坏死指数+ FGF2 +说唱组也显著高于在创伤性脑损伤+ FGF2集团( ,数据8 (c)和8(我))。这些结果表明,雷帕霉素引起的自噬水平差别可能扭转对这些FGF2废除FGF2的神经保护效应,也证明了自噬调节FGF2-induced受益鼠轻度创伤性脑损伤后的效果。

4所示。讨论

在目前的研究中,我们探索FGF2在老鼠轻度创伤性脑损伤的神经保护作用模型,研究了潜在的机制。我们发现预处理与FGF2在老鼠轻度创伤性脑损伤的神经保护作用减轻神经赤字,降低脑含水量和减少损伤体积。FGF2也有能力存活神经元数目增加的伤害。此外,我们发现自噬的作用FGF2鼠第一次轻度创伤性脑损伤后管理。FGF2可以显著减少凋亡细胞死亡,通过抑制自噬后创伤性脑损伤坏死细胞死亡。作为一个自噬激活,雷帕霉素可以扭转FGF2的神经保护作用。

如前所述,创伤性脑损伤的长期后果是由二次伤害,所以成功治疗的关键必须关注如何减轻创伤性脑损伤后继发损坏(37]。脑水肿和颅内压增加在创伤性脑损伤的早期死亡率的主要原因,即使是一个小小的大脑含水量的增加会导致显著增加颅内压和穷人的结果(38]。因此,减轻脑水肿是一种很有前途的药物治疗在创伤性脑损伤的管理方向。

FGF2的浓度显著增加间隙空间在创伤性脑损伤后的第一个星期39]。FGF2结合的纤维母细胞生长因子受体1 (FGFR1)位于神经元的细胞膜40)和刺激神经干细胞/祖细胞增殖和分化20.]。然而,事实是,对于创伤性脑损伤患者,自发改善神经功能是有限的,几乎所有的人会保持病情稳定后12个月。外生FGF2被用作药理干预方法在实验创伤性脑损伤自多年前(41]。然而,以往的研究主要集中在其刺激神经发生的延迟效应(20.,21,据我们所知,只有一个研究FGF2在创伤性脑损伤的早期阶段的影响,重点是减轻血脑屏障破坏的影响通过Rac1 / PI3K / Akt通路的激活(22]。尽管破坏血脑屏障通透性是vasogenic水肿的主要原因37),没有直接证据FGF2在降低脑含水量的影响创伤性脑损伤后可以在文献中找到。因此,在这项研究中,我们测试了FGF2第一48 h后创伤性脑损伤的神经保护作用,发现它可以显著缓解大脑受伤的脑含水量,促进mns的受伤的老鼠。这些结果可能是由于减轻血脑屏障破坏,与先前的研究一致FGF2的脑出血后的神经保护作用和缺血性脑损伤24,42]。我们还发现,FGF2可以防止组织损失和增加存活的神经元的数量在受伤的皮层,侧海马的CA1和CA3区域创伤性脑损伤的早期阶段。这些数据表明,FGF2可以帮助防止创伤性脑损伤后神经细胞死亡。

几年前,研究人员已经发现fgf可以调节自噬在心脏干细胞分化和小鼠胚胎成纤维细胞43,44]。最近,王等人发现FGF2可以调节自噬和ubiquitinated蛋白质积累在心肌缺血小鼠和脊髓损伤大鼠27,28]。在这项研究中,我们进一步探讨了自噬和FGF2的神经保护功能之间的关系在创伤性脑损伤的早期阶段。免疫反应性的免疫荧光研究表明LC3被FGF2表达下调,表明FGF2预处理可以抑制自噬细胞死亡。LC3 I和II LC3 LC3的两种形式,LC3 II LC3比我通常是用作生物标记的自噬45]。免疫印迹显示FGF2预处理能够阻止这个比例增加。Beclin-1,发挥了重要作用在自噬细胞死亡,也由FGF2表达下调。p62链接ubiquitinated蛋白LC3和调节自噬蛋白退化,及其与自噬活动积累成反比(46]。在这项研究中,p62水平被发现显著减少创伤性脑损伤后,尽管FGF2可能扭转这种改变。这些结果表明FGF2可以充当一种自噬抑制剂在创伤性脑损伤的管理。

自噬是一个重要组成部分在许多神经疾病,包括创伤性脑损伤后的二次伤害。适当的自噬可以消除异常细胞组件和蛋白质总量,以维持细胞内稳态(14]。在某些情况下,如蛛网膜下腔出血,自噬可以发挥神经保护作用和激活自噬可能保护皮层细胞免受细胞凋亡的47]。然而,在创伤性脑损伤,诱导或抑制自噬是否会导致神经保护仍然是有争议的。一方面,自噬激活雷帕霉素或褪黑素可以保护大脑免受TBI-induced损伤(13,48),但另一方面,自噬抑制剂3-MA或resatorvid可能也有类似的神经保护作用15,16]。在目前的研究中,FGF2可以抑制自噬的同时促进神经功能、减轻脑水肿、减少病灶体积,促进神经元存活。这一结果与先前的研究统计自噬抑制剂3-MA创伤性脑损伤后的神经保护作用[15]。尽管自噬激活雷帕霉素可能产生创伤性脑损伤的神经保护作用后,我们实验的结果表明,共同服用FGF2的和雷帕霉素不能发挥协同效应。相反,雷帕霉素可以扭转FGF2的利益影响。这个结果可能与雷帕霉素的剂量,相关,值得进一步研究。

细胞凋亡和坏死是细胞死亡的两个主要方面在创伤性脑损伤后,他们两人与自噬,prosurvival或prodeath作用[49]。自噬和凋亡是细胞程序性死亡的两种主要类型,还有关闭自噬与凋亡之间的关系。Beclin-1,自噬检测的基本中介在这项研究中,也可以通过凋亡抑制蛋白bcl - 2或Bcl-xl [50,51]。此外,autophagy-related基因5 (Atg5)可能会增加凋亡刺激的敏感性52],caspase-mediated乳沟Atg5和Beclin-1开关自噬在细胞凋亡的49]。在我们的研究中,预处理FGF2可以减少凋亡细胞的数量和等离子membrane-disrupted细胞皮层受伤。这些结果表明,FGF2可以缓解自噬,细胞凋亡,坏死从而保护细胞免受各种形式的死亡,至少在老鼠轻度创伤性脑损伤模型。还需要进一步的研究来探索之间的串扰自噬,创伤性脑损伤后细胞凋亡和坏死。

在这项研究中,我们探索的神经保护效应FGF2鼠轻度创伤性脑损伤的早期阶段,讨论了潜在的机制。然而,有几个局限性。首先,FGF2不是一个特定的自噬抑制剂,实际上它可能发挥神经保护作用通过减轻血脑屏障破坏等各种方式,如前所述。然而,至少,抑制自噬可能参与FGF2的凋亡和antinecrotic效果。第二,FGF2管理1 h在创伤性脑损伤之前,这限制了平移的相关性。FGF2是否能起到相同的作用,当了创伤性脑损伤后需要进一步研究。最后,我们只研究FGF2在自噬的作用在创伤性脑损伤后48 h, FGF2抑制自噬的影响是否与它的主要功能刺激神经干细胞/祖细胞增殖和分化仍然需要进一步的研究。

总之,这项研究的结果表明,FGF2起神经保护作用前48小时老鼠通过减轻脑水肿和神经赤字轻度创伤性脑损伤。预处理与FGF2还能保护细胞免受各种形式的死亡通过抑制自噬细胞凋亡或坏死等。本研究扩展我们理解FGF2创伤性脑损伤后的神经保护作用。FGF2既能减弱细胞死亡在创伤性脑损伤后的早期阶段,刺激神经再生和功能恢复后,它可能是一种很有前途的药物对创伤性脑损伤的干预管理。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

本研究由宁波城市的自然科学基金(2015 a610192)和慈溪市科技计划项目(CN2015022)。

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