在人类间充质干细胞分化潜力的比较从沃顿商学院的果冻,骨髓,胰腺组织

文摘

背景。1型糖尿病自身免疫破坏的结果β肽。胰岛素生产细胞分化(ipc)在人体组织间充质干细胞(msc)降低血糖,改善糖尿病大鼠的生存。我们比较鉴别能力和ipc的疗效三种类型的人体组织确定的理想来源细胞治疗糖尿病。方法。我们从沃顿商学院的果冻诱导msc (WJ),骨髓(BM),手术切除胰腺组织分化成ipc。的在体外微分函数相比,这些IPCs insulin-to-DNA比率和葡萄糖后c -肽水平的挑战。在活的有机体内ipc移植到糖尿病大鼠的疗效被每周监测血糖测量。结果。WJ-MSCs显示比胰腺msc增殖和分化潜能和BM-MSCs。在活的有机体内,WJ-IPCs显著降低血糖水平在移植后第一个星期和维护显著下降到第八周。BM-IPCs降低血糖水平在星期3以来第一个星期但逐渐增加。在切除pancreas-IPCs集团,血糖水平显著降低,直到两周后移植4周以来,逐步增加。结论。WJ-MSCs是最有前途的干细胞来源β在糖尿病治疗细胞再生。

1。介绍

糖尿病(DM)是死亡的主要原因之一,越来越多的人遭受这种普遍的疾病(1,2]。已经认识到,1型糖尿病,称为幼年发病糖尿病发展由于β细胞被袭击并摧毁了由个人自己的免疫系统。2型DM,成人糖尿病,特点是胰岛素抵抗,导致胰岛素的无效(3]。这两种类型的糖尿病导致血糖水平上升,这与许多并发症如视网膜病变、肾病、神经病变,其中包括(4]。皮下注射胰岛素通常用于管理1型DM以及后期的2型DM。然而,频繁的胰岛素注射的要求和麻烦的血糖监测已经被批评,以及缺乏治愈糖尿病(5]。

胰脏移植的尸体1966年开始蓬勃发展,让糖尿病患者没有胰岛素注射(6]。作为移植的成功率提高,成为广受欢迎的。然而,缺点是指出,包括供体胰腺短缺,一定程度的手术风险,高风险患者接受终身免疫抑制后的并发症。因此,胰岛移植成为糖尿病的另一个可能的解决方案。目前,最有效的协议是埃德蒙顿的协议,其中包括一次性注射在活的有机体内扩大了胰岛细胞通过门静脉至少两个捐助者。虽然过程降低了手术风险,它的治疗效果只能持续大约10年的胰岛素独立率不超过15%。同时,对供体胰岛仍然超过其可用性的需求。与此同时,长期使用免疫抑制剂仍是必要的伴随着不可避免的副作用(7]。

近年来,研究者们努力发展再生疗法,干细胞或内分泌前体细胞的分化成刺激胰岛素生产细胞(IPCs)取代摧毁β细胞。再生治疗进展迅速,因为它减少了潜在的限制相比,上述两种治疗策略(8]。

一般来说,理想的组织来源再生治疗糖尿病必须满足一定标准,如丰富的可用性,容易复制,相当于函数的主β细胞。不仅胚胎干细胞,成体干细胞,成人胰腺前体细胞,extrapancreatic内分泌祖细胞作为代理已报告β肽在文献[8,9]。尽管取得了很大的进步在生成β肽,并没有任何共识什么样的细胞源治疗糖尿病最好的满足需求。

我们实验室已经证明了,胰腺内分泌细胞前体(PEP)可以生成从沃顿商学院的果冻间充质干细胞(WJ-MSCs) [10,11),骨髓间充质干细胞(BM-MSCs) [12,手术切除成人胰腺组织(13]。PEP细胞可以诱导成ipc和能够扭转STZ-induced移植后高血糖糖尿病大鼠。本研究的目的是比较在体外鉴别能力和在活的有机体内疗效IPCs来自不同的来源,包括沃顿的果冻,BM,和胰腺组织,确定理想的细胞疗法治疗糖尿病的来源。

2。方法

2.1。隔离和分化的ipc人类胰腺组织切除

机构审查委员会批准(台北荣民总医院)获得了所有程序。的书面知情同意的父母,健康胰腺实质组织切除的正常部分用于吻合。为了防止退化,新鲜的胰腺组织最初保存在解决D (0.137 M氯化钠,氯化钾5.38毫米,0.19毫米Na₂HPO₄,0.205毫米K₂HPO₄蔗糖,葡萄糖5.49毫米,0.058米,青霉素和链霉素1%,0.12%二性霉素b)。组织然后切碎的消化2毫克/毫升V型胶原酶(Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州)为30分钟37°C。消化样品洗了三次冷杜尔贝科的修改鹰中/ F12 (DMEM / F12,表达载体,卡尔斯巴德,CA)。在1200 g离心20分钟后在4°C Histopaque(1.077毫克/毫升)和DMEM / F12梯度,胰管细胞,胰岛,内分泌前体细胞(epc)是孤立的。的epc Histopaque / DMEM接口与DMEM / F12然后吸气,洗CMRL 1066培养基培养(5.5毫米葡萄糖,英杰公司公司)包含10%的边后卫,1%,青霉素和链霉素100 ng / mL神经生长因子(研发系统、明尼阿波利斯、MN), 10毫米烟酰胺(σ),和25 ng / mL表皮生长因子(EGF表达载体)。扩张后7 - 10天,内皮祖细胞达到融合。内皮祖细胞是使胰蛋白酶化0.05%胰蛋白酶/ EDTA(表达载体),用无血清DMEM / F12 (17.5 l更易与葡萄糖),和播种6-well培养皿中涂层与基底膜基质(美国BD生物科学、贝德福德,MA)进行进一步的文化和分化。内皮祖细胞的数量在每个1×10⁶细胞。胰岛素,转铁蛋白,亚硒酸钠+亚油酸(+ l,σ),2 g / l BSA和10 ng / mL基本成纤维细胞的生长因子(bFGF、表达载体)培养基中添加。5 - 7天后在基底膜基质,细胞聚合层集群和分化成ipc。凝胶层被破坏,细胞刮刀。IPC集群和基底膜基质部分被转移到大量prewarmed介质和单个细胞集群是精选fire-polished玻璃吸管。IPC集群被保存在悬挂5天在无血清DMEM / F12补充其+ l (13]。

2.2。隔离和分化从BM-MSCs ipc

机构审查委员会批准的所有研究过程(台北荣民总医院)。骨髓组织聚集来自20个健康的捐赠者与他们的知情同意。洗后的骨髓样本两次磷酸缓冲盐(PBS, PH = 7.2),密度梯度离心法(NycoPrep 1.077, Axis-Shield,奥斯陆,挪威)拥有和BM-MSCs孤立。冲洗两次BM-MSCs低葡萄糖DMEM (LG-DMEM, 5.5毫米葡萄糖,表达载体,卡尔斯巴德,CA)和文化在37°C和5%湿润二氧化碳膨胀介质组成的L-DMEM补充10%胎牛血清(的边后卫;英杰公司)和1%青霉素、链霉素、两性霉素(以色列海法生物产业)。培养基是每三天更换一次,不依从细胞被删除。当附着BM-MSCs汇合的90 - 95%(10 - 15天),他们被Trypsin-Versene亚文化(表达载体)。当第三通道BM-MSC融合达到了80%,这是提供给分化成IPCs采用无血清培养高葡萄糖DMEM (HG-DMEM, 25毫米葡萄糖)补充1%二甲亚砜(DMSO,σ,圣路易斯,密苏里州)。3天后,培养基是取代HG-DMEM补充10%的边后卫14天(12]。

2.3。隔离和分化从WJ-MSCs ipc

机构审查委员会批准的所有研究过程(台北荣民总医院)。与父母的书面知情同意、新鲜人类脐带得到出生后并存储在汉克的平衡盐溶液(生物产业、以色列)之前,组织处理获得msc。清除血管后,间质组织刮掉了沃顿商学院的果冻,在250 g离心5分钟。离心后,小球在15毫升resuspended血清杜尔贝科的修改鹰的介质(DMEM;Gibco大岛,纽约)含0.2克/毫升的胶原酶和孵化16 h在37°C。接下来,这些细胞被洗,包含2.5%胰蛋白酶在DMEM resuspended,孵化与搅拌30分钟37°C。最后,再次清洗、培养细胞在DMEM补充10%胎牛血清(的边后卫;σ圣路易斯,密苏里州,美国)和葡萄糖(4.5 g / L) 5%的股份有限公司₂37°C孵化器。第四到第六段,达到70%的融合后,msc被诱导分化成胰岛细胞聚合三个阶段。未分化的msc被HyQTase分离,与SFM-A稀释,离心机。首次播种密度和细胞计数1×10⁶细胞/厘米²resuspended SFM-A和播种在超低附件组织培养板(康宁,费舍尔科学国际,汉普顿,在北半球,http://www.fisherscientific.com/)。SFM-A包含DMEM / F12 (1: 1) (Gibco大岛,纽约)与17.5毫米葡萄糖,1% BSA科恩分数V,自由脂肪酸(Sigma-Aldrich)、青霉素、链霉素、两性1% B (PSA;生物产业、以色列),insulin-transferrin-selenium-X(它的x;5 mg / L胰岛素,5 mg / L转铁蛋白,5 mg / L硒),4纳米激活素A, 1毫米丁酸钠和50μM 2-mercaptoethanol。这个媒介的细胞培养2天。第三天,改为SFM-B培养基,含有DMEM / F12与17.5毫米(1:1)葡萄糖,1% BSA、PSA 1%,它的x,和0.3毫米牛磺酸。在第五天,细胞培养被SFM-C取代,含有DMEM / F12与17.5毫米(1:1)葡萄糖,1.5% BSA,它的x, PSA 1%, 3毫米牛磺酸、100 nM glucagon-like肽(GLP) 1(酰胺片段7-36;西格玛奥德里奇),1毫米的烟酰胺,不必要的氨基酸(NEAAs)。在接下来的5天,交换的培养基是用新鲜SFM-C每2天(11]。

2.4。反向Transcriptase-Polymerase连锁反应(rt - PCR)和实时PCR分析来确定基因分化细胞中表达

确定三种细胞来源已经分化成ipc,与胰腺癌相关基因的表达β细胞发育和胰岛素生产被rt - PCR和实时PCR检测。所有三种类型的分化细胞的RNA提取与试剂盒进行试剂(英杰公司)根据制造商的指示。4毫克的互补脱氧核糖核酸制备使用上标TM三世第一链RNA合成系统(表达载体)。PCR进行200 ng RNA等价物使用特定引物的存在SYBR绿色我(LightCycler TM-FastStart主人SYBR绿色我DNA;罗氏公司、瑞士巴塞尔)。引物是Pdx1 GGAGCCGGAGGAGAACAAG,反向CTCGGTCAAGTTCAACATGACAG;Pax4 GGGTCTGGTTTTCCAACAGAAG,反向CAGCGCTGCTGGACTT;Glut2 GCCTAGTTATGCATGCAG,反向GGTTTGTAACTTATGCCTAAG;胰岛素ACCAGCATCTGCTCCCTCTA,反向GGTTCAAGGGCTTTATTCCA;GAPDH CACCATCTTCCAGGAGCGAG,反向TCACGCCACAGTTTCCCGGA(任务生物科技、台湾)。 A LightCycler 480 (Roche, Indianapolis, IN) was used for real-time PCR with the following cycling program: 50°C for 2 min, 95°C for 10 min, and 35 cycles at 95°C for 15 s and 60°C for 1 min. Melting curves were obtained at 60°C. The number of PCR cycles was titrated in order to remain in the linear range of amplification. The resultant amplification products (10 mL) were separated using 2% agarose gel electrophoresis and were visualized with ethidium bromide that validate the specificity of the real-time PCRs [11- - - - - -13]。

2.5。测量Insulin-to-DNA比率

这三种类型的分化细胞与PBS洗两次,在300毫升冷水蒸馏resuspended,均质通过声波降解法冰。分析了匀浆的整除fluorometrically DNA内容一式两份,一夜之间,另一个整除与酸性乙醇提取和测量胰岛素内容使用酶联免疫试剂盒(Mercodia,乌普萨拉,瑞典)。

2.6。葡萄糖挑战试验后测量c -肽水平

这三种类型的分化细胞被孵化的1 h DMEM-LG葡萄糖(5.5毫米)和中收集和储存在−20°C。这些细胞被洗PBS和孵化1 h DMEM-HG(25毫米的葡萄糖)(纽约Gibco)和中收集和储存在−20°C。c -肽的浓度是由c -肽酶联免疫试剂盒(Mercodia,乌普萨拉,瑞典)。

2.7。的比较在活的有机体内疗效STZ-Induced糖尿病大鼠肝内IPCs注入

24雄性SD大鼠高血糖诱导在封闭的殖民地(体重300 - 350克)通过腹腔内注射30毫克/公斤的链脲霉素(STZ)连续3天。血糖测定使用罗氏ACCU-CHEK血糖仪(美国罗氏诊断,印第安纳波利斯。)通过尾静脉血液。稳定的高血糖(血糖水平介于16.7和33.3更易/ L)开发的24老鼠一周后。18糖尿病大鼠6的三个学习小组,与戊巴比妥麻醉(40毫克/公斤,i.p)。中线剖腹手术后门静脉被确认和0.5毫升肝素化盐水和5×10⁶差异化的胰岛素生产细胞(三种类型的分化细胞)悬浮在0.1毫升的生理盐水注入WJ-MSCs的导管,BM-MSCs,胰腺msc学习小组,后跟一个体积的生理盐水的体积相当于Port-A-Cath导管(0.35毫升)将移植到门静脉。6大鼠STZ组做过同样的步骤,但是只有注射生理盐水(STZ组)。体重和血糖水平记录之前和之后的细胞移植。从尾静脉血液收集和血糖水平与血糖仪测定(罗氏、巴塞尔、瑞士)[11- - - - - -13]。

2.8。免疫荧光分析

老鼠牺牲移植后8周和灌注4%甲醛(Ferak,柏林,德国)。胰腺组织切除,切成0.5 - -1.0厘米³碎片。样本脱水和嵌入在10月(樱花Finetek USA Inc .)托兰斯、钙、美国)在液态氮。cryosections (5μ米/块)洗两次与PBS和孵化一夜之间在4°C兔子反C -肽抗体(1:100;美国圣克鲁斯,圣克鲁斯,CA)。在PBS 3洗后,幻灯片是在室温下培养1 h Cy3-labeled山羊anti-rabbit免疫球蛋白g(1: 200年,杰克逊ImmunoResearch西树林,PA,美国)。核复染色使用DAPI(1: 5000,分子探针,Inc .,尤金,或者,美国)。部分是安装后安装介质(向量实验室,伯林盖姆、钙、美国),使用共焦显微镜显微镜进行配备不同干涉对比光路(LSM 510年蔡司,哥廷根,德国)。

2.9。统计分析

每一系列的实验进行了一式三份。从一个典型的实验获得的结果表示为±标准差(SD)的手段。使用SPSS 14.0软件进行统计分析程序(社会科学统计软件包SPSS Inc .芝加哥,美国)。使用非参数统计分析Mann-WhitneyU(2)独立样本进行测试。一个值小于或等于0.05成立,统计学意义。

3所示。结果

3.1。分离、培养和分化的人类胰腺组织切除,人类BM-MSCs, WJ-MSCs(见图5)

确定三种细胞来源已经分化成ipc,胰腺癌相关基因的表达β细胞发育和胰岛素生产被反向transcriptase-PCR和实时PCR检测。如图1、胰β细胞发育相关基因,包括Pdx1 Pax4, Glut2,和胰岛素显著表达分化IPCs大于未分化细胞三种细胞来源。这是一个保证他们是真实的ipc后分化过程。此外,如以前发表的文章所述,外科胰腺msc c -肽呈阳性后23天分化培养基培养的成功率为35%,整体文化分化潜力的唯一通道(13]。BM-MSCs染色阳性c -肽在14 - 18天的区别,更表现在14和分化潜力的4 - 6天的段落(12]。WJ-MSCs沾反c -肽抗体表明c -肽表达分化5和10天,10天更大的表达式和分化潜力的8 - 10通道(11]。

3.2。检测胰岛素/ DNA比分化细胞来源于人类胰腺组织切除,人类BM-MSCs, WJ-MSCs

胰岛素/ DNA的表达比在人类最大的切除pancreas-IPCs相比人类WJ ipc和BM-IPCs。胰岛素/ DNA的表达比在比BM-IPCs WJ-IPCs更大。然而,在上面没有发现显著差异比较(图2)。

3.3。比较c -肽分泌的分化细胞对葡萄糖刺激的反应

测试三种ipc是否胰腺β细胞的功能特点,我们决定c -肽的分泌各种IPCs低葡萄糖浓度(5.5毫米)和高葡萄糖浓度(25毫米)。低葡萄糖浓度,WJ-MCSs IPCs显示最高版本的c -肽相比IPCs BM-MCSs和切除胰腺内皮祖细胞。在高葡萄糖浓度,WJ-MCSs IPCs显示c -肽的类似版本从BM-MCSs ipc,均高于IPCs从切除胰腺内皮祖细胞。另一方面,所有的三种ipc能显著提高c -肽分泌高葡萄糖刺激的反应。ipc的切除胰腺内皮祖细胞至少有10倍的增加刺激c -肽分泌在应对高葡萄糖。从BM-MSCs IPCs透露至少4倍增加刺激c -肽分泌在应对高葡萄糖。IPCs从WJ-MSCs产生大约两倍的c -肽分泌在高葡萄糖浓度(图3)。

3.4。在移植后大鼠血糖的变化IPCs来源于胰腺切除,BM-MSCs, WJ-MSCs

在我们的实验中,空腹血糖水平在糖尿病老鼠STZ-induced > 350 mg / dL一周然后增加到> 400 mg / dL。STZ诱导后的空腹血糖水平在4组是不一样的,虽然他们没有显著不同。为了进一步规范化post-STZ血糖水平,我们报道空腹血糖水平的变化之间的特定的时间点和STZ诱导后的第二天,而不是确切的空腹血糖水平在特定的时间点。血糖水平的趋势的三个学习小组IPCs移植后均显著地不同于对照组,与我们之前的研究结果一致。WJ-IPCs组血糖水平显著降低移植后第一周以来,达到最大减少在星期2,和维护显著下降到本研究的终点,移植后8周。BM-IPCs组血糖水平也显著降低移植后第一周以来,在第2周达到最大减少,但3周以来逐渐增加。切除pancreas-IPCs组血糖水平显著降低,直到两个星期后移植,达到最大减少在周3,周4(图以来逐渐增加4)。

3.5。在大鼠胰腺移植的免疫荧光分析IPCs源自人类胰腺组织切除,BM-MSCs, WJ-MSCs

组的细胞表达绿色荧光蛋白(GFP)和人类发现了c -肽STZ大鼠的胰腺移植后8周。我们成功地发现WJ-IPCs归航胰腺的能力。然而,我们找不到任何IPCs STZ大鼠接受移植的胰腺BM-IPCs和切除pancreas-IPCs。

4所示。讨论

因为器官捐赠者的短缺阻碍了进步的胰腺移植和胰岛移植替代胰岛素生产细胞的来源是强制性的来克服这个障碍。干细胞再生已成为一个潜在的胰岛素替代疗法。从胰腺干细胞13- - - - - -16),骨髓(12,17],脐带血[18),和胚胎19)已被用于研究DM的再生疗法。

胰岛内分泌细胞前体(epc)的细胞来源再生药物治疗被认为存在在胰管细胞或小岛本身(20.,21]。胰腺的内分泌和外分泌隔间22]。内分泌室组成α,β,δ、胰多肽细胞,由小岛组成,而包含腺泡和导管细胞外分泌隔间。几项研究已经披露了一个有趣的见解导管细胞生成的潜在能力胰岛内分泌细胞前体,发展为胰岛细胞(23- - - - - -28]。胰岛内分泌细胞前体的来源被认为是一个新的胰岛细胞在成年期(29日]。

msc、另一种有前途的干细胞,首次分离出BM [30.),被发现有可能分化成不同的细胞谱系,不仅胰腺β细胞(10,31日),而且肌肉细胞,脂肪细胞,骨细胞、软骨细胞(32,33),心肌细胞(23- - - - - -26]。他们可以被纳入各种组织,包括骨(27,28],肌肉[34)、肺(34),上皮细胞(35)后系统注入。研究表明,从BM-MSCs IPCs可以开发36),脂肪tissue-derived msc (37),和人类脐带血液单核细胞(18),这表明他们的潜在的用于自体移植。最近,研究人员专注于分离和培养的胰岛内分泌细胞前体在胎儿和成人胰腺组织(38,39]。

McElreavey et al。40纤维母细胞)报道的隔离从人类脐带沃顿的果冻,类似于BM-MSCs [41]。研究人员努力获取、描述和评估WJ-MSCs两种在体外和在活的有机体内。间充质基质细胞的WJ-MSCs举行了许多独特的特性,如著名的表面表型,塑料坚持,multipotency [42- - - - - -45]。实际上,在合适的在体外刺激,它们可以分化成脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、肝细胞、心脏和神经细胞。他们被认为是准备一个新的治疗材料来源(10]。

在我们先前的研究的研究小组,胰岛素生产细胞生成从沃顿商学院的果冻,骨髓,和人类胰腺组织。我们培养和分化协议称为前辈在文献和期刊的编辑,我们提交报告。由于不同的细胞来源,不同的培养和分化的协议。尽管如此,我们认为,胰岛素生产细胞产生的三个不同来源的最适条件我们的特定的分化方法。接下来,我们试图探讨细胞的在体外分泌胰岛素的能力在活的有机体内移植细胞在糖尿病大鼠的疗效。

人类胰腺干细胞在体外似乎胰岛素/ DNA比率最高,最受高葡萄糖刺激的影响。然而,这些细胞似乎成功率较低的培养基和困难的增长。在目前的研究中,手术切除胰腺组织的成功文化率是35%,分化可能只有一个通道。意料之中的是,类似的报告在文献[46- - - - - -48]。被怀疑在胚胎发育,产生胰岛素的β细胞工程从内分泌胰腺组织中存在的前体细胞,包括外分泌部分导管细胞,和内分泌,胰岛细胞(49,50]。当前学者们的共识是,仍有某些障碍,以确定潜在的可塑性的胰腺组织可以作为的新来源β细胞(51,52]。我们的数据也支持这个观点。

关于msc BM和沃顿商学院的果冻,前者表示积极的c -肽染色14天,后者有更大的染色在10天。此外,4 - 6通道的BM-MSCs已经分化潜力而WJ-MSCs 8 - 10通道的分化潜能。此外,当葡萄糖浓度较低时,人类WJ-MSCs c -肽水平高于BM-MSCs和胰腺mcs。我们的数据显示类似文献的证据(53,54),比BM-MSCs WJ-MSCs有一定程度的优势。

在在活的有机体内考试,三种胰岛素生产细胞移植的肝脏STZ-induced糖尿病雄性sd大鼠中,移植的疗效评估。STZ-induced糖尿病大鼠的高血糖的血糖结果超过350 mg / dL一周,这增加了超过400 mg / dL。沃顿商学院的果冻msc治疗组,血糖水平恢复到接近正常水平后一周移植(< 6周200 mg / dL)。BM - msc,血糖水平也显示明显降低移植后一周(< 250 mg / dL 5周)。胰腺ipc组血糖水平开始减少移植后三周,只有维持4周约为300 mg / dL。基于这些结果,WJ-MSCs似乎拥有更大的治疗潜力比其他两个细胞来源。

与血糖水平和移植的ipc的潜在作用,移植后组织学分析应该执行。在先前的研究中,我们使用了免疫组织化学分析检测IPCs我们通过门静脉移植到STZ大鼠。我们发现人类c -肽的外观和人类核标记BM-MSCs STZ大鼠的肝移植治疗8周后(12]。人类C-peptide-positive细胞被发现STZ大鼠肝组织内WJ-MSCs移植后6周(11]。c -肽表达切除胰腺内皮祖细胞移植是位于STZ大鼠肝移植后9周(13]。上述研究结果表明,三种ipc可以在改善高血糖功能,能够通过门静脉肝移植后的存活率。在这项研究中我们努力试图寻找IPCs是否会嫁接其他地方。自组织的细胞表达GFP和人类c -肽都是只发现STZ大鼠胰腺的接受WJ-IPCs移植,我们成功地体现,WJ-IPCs归航胰腺的能力。因此,我们建议WJ-IPCs比其他两个细胞的来源,因为他们高人一等的潜力归航的受损的胰腺组织和提供再生影响周围的利基。

沃顿商学院的果冻被调查人员在先前的研究相对于胰腺干细胞干细胞,因为它包含了许多倍胰管(8]。此外,WJ-MSCs可以很容易地孤立和扩大在文化和更高频率的克隆形成成纤维细胞群体倍增时间短(40]。生成大量的功能性胰岛是重要的一步成功的再生治疗糖尿病患者。总结我们的结果在体外实验中,可以得出合理的结论,WJ-MSCs是优越的增殖和分化潜能BM-MSCs和胰腺msc。此外,沃顿商学院的果冻干细胞是比胚胎干细胞,这被认为有良好的潜在分化为胰岛素分泌细胞因为使用它们避免形成畸胎瘤的风险以及使用胚胎干细胞所固有的伦理问题。

总之,我们的结果表明,WJ-MSCs可以分化成胰腺细胞谱系在体外和函数作为胰岛素生产细胞在体外和在活的有机体内。这些结果表明,WJ-MSCs是一种很有前途的再生治疗糖尿病的细胞来源。进一步的研究需要检查WJ-MSCs的疗效在较大的糖尿病动物模型和临床应用于人类。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

这项研究受到了研究经费从台北VGH (v102a - 014)和台北VGH PJ蔡(v99a - 009),台北VGH (v99e1 - 004)和国家科学委员会(nsc - 102 - 2314 - b - 010 - 041 - my3)陈TH,和国防医学中心(mab - 102 - 56)和陆海空三军种总医院(tsgh - c102 - 124)摩根富林明害羞的。来说

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