研究文章
善意滋养细胞干细胞的转录特征及其胚胎持久性分析资源
图3
检测和操作核心TSC维护因素的实验方法加工和Cdx2,其次是基因表达谱分析。选择三种互补的实验方法对(a, b) TSCs和(c)可诱导表达的mES细胞进行表达谱分析加工或Cdx2.(a)善意TSCs的表达谱和早期分化,TSCs为富流式细胞术细胞和强迫分化的撤出干细胞维持条件3d。(b)查明加工-调控的靶基因,TSCs携带加工有条件的等位基因()与它莫西芬诱导的克氏雌激素受体等位基因()用于条件失活在体外.细胞经三苯氧胺处理24小时,(b’)cre介导的切除通过基因分型PCR监测,(b’)EOMES蛋白通过Western blot分析。(c)从转录的角度分析加工- - -Cdx2-诱导的靶基因在ES细胞向TSC转化过程中,经强力霉素调控表达的mES细胞诱导48 h。(c’)Western blot检测v5标记的EOMES或CDX2蛋白的表达。MEF,小鼠胚胎成纤维细胞;TSC:滋养层干细胞;星号()显示基因阵列表达谱的不同时间点。