mir - 142 - 3 - p的表达是由DNA甲基化。(一)左面板显示荧光素酶结构的示意图表示。荧光素酶分析使用含有表示长度的片段的质粒的5′上游地区mir - 142 - 3 - p -荧光素酶。质粒转染到3 t3细胞,6小时后,样本处理DMSO溶液或5-aza-dC (10μ米)和培养额外的3天。然后细胞收获,检测荧光素酶的活动。值的平均3次独立实验标准差。价值,∗∗0.05 < 0.01和n。>,被学生的计算以及。(b-g) CpG甲基化的5′上游地区mir - 142 - 3 - p亚硫酸氢转换了。基因组dna提取3 t3, MEF 5-aza-dC的存在与否,iPS,亚硫酸氢或EB准备从iPS受到序列。5-Aza-dC出现在3 t3的培养基或MEF收获细胞基因组DNA提取前72小时(e, f)。(h) 3 t3细胞表达质粒的转染Oct4、Sox2, Klf4或Myc 540−卢克。为控制样本,空质粒表达和−540 Luc被转染。细胞收获3天后文化和荧光素酶进行了分析。(我)3 t3细胞与表示表达质粒,转染,3天后,细胞被收获,总RNA提取。表达水平的内生mir - 142 - 3 - p被RT-qPCR检查。(h i)值是相对于控制向量转染样品和4个独立样本SD的平均水平。