干细胞是在体外帕金森病模型

文摘

进步在理解神经退行性细胞生物学在帕金森病(PD)一直受限于缺乏预测性和相关细胞模型。此外,缺乏一个足够了在体外人工神经元细胞模型一直是一个障碍治疗帕金森病新药的发现。生成诱导多能干细胞的能力(万能)PD患者和提炼能力来区分这些万能DA神经元,相关疾病的细胞类型,承诺一个新的范式在药物开发职位人类疾病病理生理学的核心临床前药物发现。疾病模型来源于iPSC清单细胞疾病表型已经建立了几个单基因疾病,但iPSC同样可以用于phenotype-based药物屏幕在复杂疾病的潜在的遗传机制是未知的。在这里,我们强调最新进展以及局限性iPSC造型技术的使用PD“菜”,对人类疾病表型测试化合物在体外。我们将讨论如何利用万能照亮疾病病理生理学,确定新的药物靶点,提高新药的临床成功的概率。

1。介绍

帕金森病(PD)是第二个最常见的神经退行性疾病,特点是大量的汽车和nonmotor特性会影响函数在一个变量的程度。

帕金森病的主要病理特点是中脑多巴胺(DA)神经元的损失在黑质致密部(SNpc)投射到纹状体和细胞质内含物丰富异常α-核蛋白,路易小体,沉积在大脑的神经元存活[1- - - - - -3]。

没有有效的测试PD的诊断;障碍必须根据临床诊断标准。主要临床特征是静止震颤(单边,突出在远端肢体的一部分),刚度(增加抵抗移动),运动不能或动作迟缓(移动缓慢),姿势不稳定,和其他运动异常。其他症状包括二级运动肌张力障碍、吞咽困难等症状和nonmotor症状包括认知异常,睡眠障碍,和痛苦3]。

尽管这一领域的研究成果,新的和有趣的发现不断报道,目前,PD仍是一种无法治愈的疾病,但是治疗可以提高生活质量和功能的能力。迄今为止,左旋多巴结合外围多巴脱羧酶抑制剂(benserazide或卡比多巴)作为初始治疗最有效的治疗选择。然而,并非所有的症状反应同样药物;尽管地震可能略微降低,动作迟缓和刚度响应更好。不幸的是,治疗成功的减少了随着时间的推移,和副作用增加,使病人无助(2]。脑深部刺激丘脑底核对PD病人额外的治疗选择,但需要手术干预。

尽管所有这些治疗方法提供症状缓解,没有人能够阻止或逆转疾病的进展(1,4];为此需要新颖的治疗方法。另外一个策略是替代疗法;事实上,临床试验与intrastriatal移植人类胚胎中脑的组织表明,接枝reinnervate纹状体DA神经元,恢复纹状体多巴胺释放,在一些患者中,诱导一个主要临床受益5- - - - - -7]。

2。帕金森病的分子和细胞机制

PD的病因尚不清楚,但是大多数人遭受这种疾病有特发性帕金森病(约90%)。病例的一小部分(约10%),然而,可以归因于遗传因素导致PD复杂的发病机理。

我们理解的发生和发展机制的PD始于突变基因的识别编码α-核蛋白(SNCA)和示范α-核蛋白是路易小体的主要组成部分,存在于这种疾病。从那时起,至少16位点(设计PARK1来PARK16)和11个基因与遗传相关形式的帕金森症,包括,例如,PARK1 PARK4 / SNCA,PARK2 /帕金,PARK5 /泛素COOH-terminal水解酶L1(UCHL1),PARK6 / PTEN-induced激酶1 (PINK1),公园/ DJ-1,和体内基因LRRK2 PARK8 /富亮氨酸重复激酶2 ()。

SNCA是一种常染色体显性基因编码的蛋白质α-核蛋白,表示在突触前神经元的终端(8]。一些证据支持的生理功能α-核蛋白在突触前膜泡动力学的规定(9]。突变SNCA自组装和fibrillization增加蛋白质,可能导致致病性包涵体的形成(9]。另一个常染色体显性遗传基因与PD疾病是富亮氨酸重复激酶2 (LRRK2)[8,10]。LRRK2编码一个大型蛋白质与多个领域,包括Ras-like三磷酸鸟苷结合域和丝氨酸,苏氨酸激酶结构域(10]。这两个功能域内突变与PD(有关8,10]。在正常情况下,体内基因LRRK2的功能激酶已涉及细胞骨架结构的规定(10]。相比之下,帕金是一种常染色体隐性基因参与PD (11]。Parkin这个基因编码蛋白与一个ubiquitin-like序列E3,充当目标蛋白绑定的基质降解的泛素蛋白酶体系统(UPS) (11]。失活的帕金导致减少UPS-mediated降解目标蛋白质的11),可能导致蛋白质积累。此外,一些数据显示可能帕金在线粒体的功能,蛋白质的本地化和促进基因转录8,11]。PINK1是另一个常染色体隐性基因,其突变可能导致PD (11]。PINK1编码一种蛋白质定位在线粒体膜和其功能与细胞应激保护线粒体功能障碍(8,11]。有趣的是,突变体的黑腹果蝇缺乏PINK1显示与表型相似帕金突变体;此外被迫表达Parkin1能够救援的缺失引起的线粒体功能障碍PINK1,这表明他们的交互9,11]。同样,DJ-1线粒体膜是一种蛋白质本地化,这个基因的突变可能导致常染色体隐性早发性帕金森病(8,11]。其功能是抵抗氧化应激的相关11]。

这些蛋白质显示的知识获得途径的神经退化可能继承和零星的PD之间共享。一组数据在不同的模型系统强烈表明,线粒体功能障碍中起着重要的作用在临床上相似,早发性常染色体隐性PD形式造成的帕金和PINK1并有可能DJ-1基因突变(12,13]。分子和细胞机制的进一步理解,这些蛋白质之间的相互作用导致PD与他人是必不可少的识别和潜在目标改善治疗至关重要。

3所示。的重要性在体外PD模型

大多数当前知识的神经系统疾病,包括帕金森病、收集后期研究由于生活的局限性脑组织。这限制了对疾病进展和发展的理解,因为后期样品只代表疾病的终末期。此外,病理方面的表现出在这些样本可能继发而不是忠实地反映具体的疾病表型细胞水平。此外,种间差异很难准确模拟人类神经系统疾病动物模型。因此,疾病模型概括疾病表型在体外在定义细胞群是一个重要的进步,让人们可以理解神经退行性疾病的细胞和分子机制(14,15]。认为调查的一种多因素疾病,如帕金森病,比单基因疾病更具挑战性由于其复杂的遗传背景,因为他们通常受环境因素的影响15]。

黑质DA神经元丧失严重帕金森病的主要病理特点。了解神经细胞死亡的机制参与帕金森病可能在发展中神经保护治疗的价值。然而研究人类大脑的神经细胞死亡是极其困难的由几个原因(方法、实用)。的发展在体外DA神经元的模型可以强大,他们将允许研究神经退化以及新颖的治疗策略(16]。然而,可用性的人类DA神经元来自胎儿的材料是非常有限的,而且很难检查直接毒性和/或多种因素在这些神经元的保护作用。

在这种背景下,干细胞,尤其是多能干细胞和神经干/祖细胞,细胞的极好来源,因为他们的可用性、无限增殖,分化成其他细胞和可塑性。此外,干细胞是一个很好的选择体外主文化或建立永生化细胞系,有助于我们理解神经神经退化过程和我们的能力来分析细胞毒性或神经保护作用的化学物质,药物等等(图1)。

4所示。干细胞类型和属性

干细胞的特点是更新自己的能力通过有丝分裂细胞分裂和分化成各种各样的专门的细胞类型。它们可以分化成专门的细胞分类根据他们的潜力。第一个类型是全能干细胞能增加整个可行的生物,包括胎盘细胞。受精卵和细胞在受精后的早期阶段(即。有阶段)被认为是全能的。

第二种类型是多能干细胞,它有能力发展成专业三个生殖细胞层(外胚层、中胚层和内胚层)除了胚胎外的组织,如胎盘。第一个也是最好的描述是胚胎干细胞(ESCs),源自囊胚的内细胞团17]。从理论上讲,因为他们的属性,这些细胞可能构成最优源DA神经元的秘诀在于其细胞代谢疗法和药物筛选实验;然而,为了实现这一目标,必须有一个有效的协议分化为功能性中脑DA神经元。事实上,文化丰富人类DA神经元生成从ESC使用各种方法,比如使用coculture与基质细胞的生长因子,分泌因子,转录因子,和形态因子,一些有利影响已经证明这些细胞移植后在PD动物模型(18- - - - - -21]。

干细胞生物学的最新进展已经导致技术重组从成人体细胞多能性状态(22- - - - - -24]。第一个报道行“重编程”的细胞,称为诱导多能干细胞(万能),最初是由引入四个转录因子:Oct3/4,Sox2,Klf4,和原癌基因(或Nanog,Lin28)成人成纤维细胞。这些细胞类似于hESC形态、基因表达谱,分化潜能。诱导iPSC技术为生物医学研究和临床应用提供了新的可能性,这些细胞可以作为一个在体外帕金森病细胞模型,为自体移植(从理论上讲,不需要免疫抑制治疗)。出于这个原因,必须获得一个有效的和严格的hiPSC到中脑DA-like神经元分化的协议。此外,hiPSC不引起道德问题,因为他们是来自体细胞,后常规组织捐赠程序。

第三类型的干细胞是多能的干细胞,只有生成特定谱系的细胞,如神经干细胞(nsc)来源于神经组织。这些细胞自我更新和分化成lineage-specific神经前体或祖细胞(npc)可以产生所有类型的细胞(神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞)的神经系统25]。然而,尽管有时不明显的文学,hNSCs-particularly那些来自腹侧中脑(vm)在文化关系变得不佳,它们的属性随时间变化(段落),生成神经元失去能力,尤其是DA神经元,从而使他们很难在大规模使用方法25,26]。

5。多能干细胞的定向分化成DA神经元

必要的PD建模是生产的第一步,在足够的数量,疾病的神经细胞表型,也就是说,DA神经元,从人类多能干细胞分化在体外。当前的在体外分化的ESC或者iPSC包括协议基于身体形成胚状体或使用基质馈线coculture [18- - - - - -20.,27- - - - - -34]。高效DA神经元的生成需要等因素的联合行动的大脑,FGF8,声波刺猬,视黄酸,Wnt1, BNDF, GNDF,抗坏血酸、环腺苷酸、Wnt5 [18,20.,27,29日),类似于分泌因素出现在开发过程中(35]。在体外,早期接触‘诺金’(20.,27),对手的BMP信号或抑制剂的左撇子/苯丙酸诺龙/ TGFβ路径允许高效feeder-free神经感应触文化和允许多巴胺能和motoneuronal潜力(18,20.]。相反,神经感应可以在没有获得因素与基质馈线coculturing ES细胞系(28]。随后,多巴胺模式建立的联合行动FGF8, FGF2,嘘18,20.],GNDF [28),脑源性神经营养因子、抗坏血酸。最后,终端分化完成后退出嘘和FGF8,由抗坏血酸的存在,GDNF, TGFb-1,环腺苷酸,Wnt5 [29日]。

另外,DA神经元可以通过强制转录因子的表达至关重要的腹侧中脑身份(36- - - - - -40]。因此,过度Lmx1a从小鼠ESC诱发DA神经元36,37],hESC, hiPSC [41];此外,神经元前体细胞来源于hESC overexpressingLmx1a能够生存和区分当移植到成年老鼠的大脑(41]。

尽管iPSC和ESC的起源不同,分化的细胞类型为DA神经元似乎使用类似的线索和信号。对转录组的分析表明没有水平的差异在多巴胺能分化相关基因的表达等EN1,Nurr1,TH,AADC,Girk2;此外分析印记基因的细胞周期调控,重组并没有发现显著差异(34]。

6。诱导多能干细胞在体外PD模型

推导的多能干细胞体细胞组织为研究人员提供了一种特定的干细胞。此外,iPSC技术呈现一个好的模型在体外疾病和药物治疗的论文42]。

到目前为止,一些组织已经开发出协议增加DA神经元产生的收益率从人类或iPSC老鼠(22,30.- - - - - -32,42,43]。在小鼠模型中,协议为胚胎干细胞开发后,神经前体细胞和DA神经元获得健康iPSC [33]。此外,派生细胞移植到发育中的大脑能够集成、迁移、分化,显示电生理功能显示自发动作电位电流在宿主的大脑。细胞衍生品包括glutamatergic、gaba ergic和DA神经元。重要的是,移植来自iPSC能够恢复运动功能在PD动物模型(33]表明多巴胺神经元来自iPSC是功能在活的有机体内。

在人类中,DA神经元来自iPSC可以获得健康的捐赠者34)或特发性引起的PD患者条件(32,42)或突变(30.,31日]。例如,DA神经元由万能干细胞可以生成携带突变LRRK2基因(p.G2019S),最常见的透析相关突变(8,10]。重组后,文化差异化协议使用喂,iPSC-p。G2019S生成大量的DA神经元分化的55天;此外,成熟的神经元,这些神经元显示属性包括synaptotagmin-1的表达,突触囊泡蛋白本地化,火的能力动作电位去极化电流注入和产生自发的突触活动。而且这些DA神经元能够合成和释放多巴胺刺激高钾(30.]。详细的表型特征与PD 35天显示iPSC-p。G2019S表达高水平的基因参与氧化应激通路控制;事实上试验测试peroxide-induced细胞死亡证明G2019S-iPSC-derived DA神经元可能更容易受到氧化应激和显示明显比对照组更多的细胞死亡。由于在iPSC-p表型。PD表型G2019S相似之处,它提供了一个良好的模型在体外疾病,该系统已被用于测试一些潜在的药物治疗PD (30.]。

相比之下,其他的PD模型基于的三倍α-核蛋白轨迹已经生成的(31日]。这种突变导致一个完全渗透和咄咄逼人的PD形式痴呆症患者(8- - - - - -10]相对于纯合子G2019S突变LRRK2不完全外显率,即使纯合子的条件(44]。有效使用feeder-free单层分化方法,iPSC分化成中脑DA神经元后20时31天α可以检测并分泌蛋白质-核蛋白媒体(31日]。除了这个模型中,成纤维细胞来自患者携带A53T (G209A)α-核蛋白基因突变被重组成iPSC并成功地分化成DA神经元(43),它可以作为一个很好的模型在体外分析;然而,进一步的细胞表型特征与PD仍有待研究。

其他模型包括DA神经元来自iPSC和从特发性患者获得条件(32,42]。重组后病人iPSC,细胞分化成DA神经元使用基质细胞分化,但协议。在42天,这些细胞,包括DA和non-DA神经元移植到纹状体健康的动物。8周后植入DA神经元标明nigral Girk-2标志被发现到可行的移植。此外,移植的实验把DA神经元来自iPSC PD动物模型显示功能影响,虽然只有少数人发送他们的轴突向DA-depleted主机纹状体。分析行为在PD动物模型表现出显著改善运动功能障碍(32,34]。总之,一些证据表明DA神经元多能干细胞的功能在两种在体外和在活的有机体内条件。因此,DA神经元的一些来自PD患者表现出一些疾病的表型特征研究可以提供一个有价值的细胞来源在体外PD。例如,来源于PD患者的细胞则拿着一个无稽之谈(c.1366C > T;p。问456 x)或错义(c.509T > G;p.V170G)突变PINK1基因已经被用来研究内源性PINK1多巴胺能神经元的作用[45]。PINK1编码一个激酶外线粒体膜和本地化是涉及线粒体退化的规定(11];突变PINK1已经与PD (8,11]。相比之下,帕金局部函数作为E3泛素连接酶和蛋白质的胞质(11]。此外,帕金可以转移到线粒体受损PINK1-dependent的方式(44]。因此,实验DA神经元从PD患者表现出损伤的易位帕金突变PINK1iPSC细胞衍生DA神经元控制相比。此外,救援overexpressing野生型PINK1实验PINK1突变体神经元恢复的易位帕金线粒体(45]。总之,DA神经元在体外PD患者是一个合适的模型来研究在细胞水平(图PD的发病机制1;表1)。

然而,一些挑战成功实施之前必须克服iPSC-based药物筛选和发现途径可以实现(图1)。最关键的问题是是否可以复制PD表型在体外,如果是这样的话,是否能准确预测疾病的行为在活的有机体内。PD模型很难,因为它发生在晚年,是由复杂的环境和遗传因素引起的。事实上,在一项研究中,生成DA神经元iPSC源自零星的PD患者,没有明显的异常可能被检测到42),这表明可能需要额外的压力,揭示了疾病表型。然而,罕见的家庭形式的研究相关的疾病与特定的基因突变可以在一般疾病的机制提供有价值的信息。这将是有趣的学习iPSC来自家族PD患者能否表现出疾病基因型和表型体外。

其他额外的限制有关的低效率和高可变性重组过程和成熟阶段的异质性和细胞表型分化后获得iPSC成DA神经元。虽然已经取得了很大的进步,我们的理解的因素控制的感应和规范DA神经元命运远的完整。该领域的进一步发展将促进临床相关的生成至少DA神经元在体外。

7所示。体细胞DA神经元的直接转换

最近的报告表明,人类体细胞可以直接转化为功能性神经元,名叫诱导神经元(iNs)通过使用组合表达式定义的因素(Ascl1、Brn2 Myt1l)[39];同一作者表明,这些神经元可以指向多巴胺超表达的表型Lmx1a和FoxaA2(两个基因参与DA神经元生成在开发期间)。不同的鸡尾酒的因素,只有三个转录因子(Mash1 Nurr1,和Lmx1a),另一组用于直接代功能性DA神经元(iDA,诱导多巴胺神经元)从成人从健康的捐赠者和PD患者成纤维细胞38]。重新编程细胞类似于大脑DA神经元基因表达和多巴胺的释放。但是可能生成的iDA的PD表型从PD患者仍有待证明。

这种策略打开新的可能性PD的再生治疗和疾病模型。细胞通过直接生成转换不通过多能祖状态,可能是肿瘤发生的,并可能作为一个有趣的替代细胞则产生疾病患者和/或研究神经元。但是,临床相关,整个细胞转换过程需要高效为了获得足够数量的细胞用于研究疾病或移植研究。iPSC和艾达细胞绕过与胚胎干细胞相关的伦理问题推导和潜在的替代疗法研究同种异体的排斥问题。

8。未来前景

许多问题定义的底层创世纪神经元死亡疾病如帕金森病仍悬而未决,证据表明线粒体功能障碍的关键作用。从这个意义上说,干细胞,一般来说,主要是多能干细胞可以提供无限的人类DA神经元来源在体外神经毒性的研究和神经过程可能与帕金森病有关。

iPSC技术已被证明是特定兴趣的单基因疾病,提供创新的理解疾病病理模型。造型晚发性和多因素疾病,如帕金森病,可能会更加困难,可能需要额外的进步。然而,PD的研究或罕见的形式,与特定的基因突变有关,可以在一般疾病的机制提供有价值的信息。重要的是,病人可以转基因细胞捐赠者以正确的突变。这一修改允许代的健康和突变DA神经元来自同一个捐赠者,改善同基因的条件下两种细胞类型之间的比较分析。事实上,基因维修在iPSC也可以提供一个好的工具进步向iPSC-based替代疗法。

尽管大量的研究现状iPSC技术仍处于起步阶段,需要解决一些局限性在不久的将来,例如,为了获得标准化与医学有关的细胞,避免接触动物产品,为了提高效率和改善重组方法和均匀性,避免肿瘤发生的iPSC的属性。

这些限制可以规避与另一个创新的方法,“直接重编程”病人的体细胞特定神经元(在)。快速和高效的一代的特定的DA神经元通过直接重编程可能产生许多优势在制药化合物的筛选以及蜂窝材料的分子途径分析疾病和移植研究。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢他们的实验室研究工作的成员和富有成果的讨论。作者的研究实验室由MICINN-ISCIII (PI-10/00291和MPY1412/09)。p . l . Matinez-Morales Posdoctoral奖学金支持Consejo Nacional de Ciencia y Tecnologia (CONACYT),墨西哥。

引用

1. 大肠竞技场”,对干细胞替代治疗帕金森病,”生物化学和生物物理研究通信,卷396,不。1,第156 - 152页,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. a·j·李,j·哈迪,t . Revesz“帕金森病,”《柳叶刀》,卷373,不。9680年,第2066 - 2055页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. j .扬科维奇,“帕金森氏症:临床特点和诊断”,《神经学、神经外科、精神病学,卷79,不。4、368 - 376年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. o .·林德沃和z . Kokaia前景的干细胞疗法取代帕金森病的多巴胺神经元,”药理科学趋势,30卷,不。5,260 - 267年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. o .·林德沃和a·比约克隆德,“细胞治疗帕金森症,”神经病治疗,8卷,不。4、539 - 548年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. 门德斯,a . Vinuela a Astradsson et al .,“多巴胺神经元植入没有病理学帕金森病患者生存14年来,“自然医学,14卷,不。5,507 - 509年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. p . Piccini d·j·布鲁克斯,a·比约克隆德et al .,“多巴胺释放nigral移植可视化在帕金森病人体内,”自然神经科学,卷2,不。12日,第1140 - 1137页,1999年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. a . Wood-Kaczmar s甘地,n . w .木头,“了解帕金森病的分子病因。”分子医学的趋势,12卷,不。11日,第528 - 521页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. k . Vekrellis m . Xilouri e . Emmanouilidou h·j·赖德奥特和l .蒂芬妮”病态的角色α在神经系统疾病-核蛋白,”《柳叶刀神经病学,10卷,不。11日,第1025 - 1015页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. r . e . Drolet j·m·桑德斯和j·t·克恩,”富亮氨酸重复激酶2体内基因LRRK2()细胞生物学:回顾最近的进步确定生理基质和细胞功能”神经遗传学杂志,25卷,不。4、140 - 151年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. m·w·道森和m .郭”帕金,Pink1 DJ-1帕金森病和线粒体功能障碍,”目前在神经生物学的观点,17卷,不。3、331 - 337年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. o .螺旋器、美国勒和a·布赖斯“遗传学告诉我们关于帕金森病的原因和机制,“生理上的评论,卷91,不。4、1161 - 1218年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. j .哈代“帕金森病遗传分析的途径,”神经元,卷68,不。2、201 - 206年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. s . Durnaoglu s Genc, k . Genc“特定的多能干细胞在神经系统疾病,”干细胞国际ID 212487条,卷。2011年,17页,2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. m . c . n . Marchetto b .赢家,p.h.计“多能干细胞在神经变性和神经发育疾病。”人类分子遗传学,19卷,不。1篇文章ID ddq159 R71-R76, 2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. x x曾庆红,陈、邓et al .,“人类多巴胺神经元的体外模型来源于胚胎干细胞:MPP⁺毒性和GDNF神经保护。”神经精神药理学没有,卷。31日。12日,第2715 - 2708页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. j·a·汤姆森j . Itskovitz-Eldor s s·夏皮罗et al .,”来自人类囊胚的胚胎干细胞系。”科学,卷282,不。5391年,第1147 - 1145页,1998年。视图:谷歌学术搜索
18. s . Kriks j - w。垫片,j .朴et al .,“多巴胺神经元来自人类胚胎干细胞有效嫁接在帕金森病动物模型,”自然,卷480,不。7378年,第551 - 547页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. s . Malmersjo Liste, o . Dyachok a . Tengholm e .竞技场和p . Uhlen Ca^{2 +}和营地在人类胚胎干细胞多巴胺神经元的信号,”干细胞与发展,19卷,不。9日,第1364 - 1355页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. s·m·钱伯斯,c·a·法e . p . Papapetrou m . Tomishima m . Sadelain和l .、“高效神经转换人类ES和“诱导多能性”细胞的双重抑制SMAD信号”自然生物技术,27卷,不。3、275 - 280年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. a . l .毕雷矿泉水诉塔巴,t . Barberi et al .,“推导来自人类胚胎干细胞的中脑多巴胺神经元,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷101,不。34岁,12543 - 12548年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. i . h .公园,n . Arora h·霍et al .,“针对疾病的诱导多能干细胞”,细胞,卷134,不。5,877 - 886年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. k .高桥k .田边m . Ohnuki et al .,“诱导多能干细胞从成人人类成纤维细胞因素,定义”细胞,卷131,不。5,861 - 872年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. m·a·j . Yu Vodyanik, k Smuga-Otto et al .,“诱导多功能干细胞来源于人类体细胞,”科学,卷318,不。5858年,第1920 - 1917页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. a . Martnez-Serrano和i Liste最新进展和挑战在神经元干细胞衍生品的使用替代治疗帕金森氏病的疾病,”未来的神经学,5卷,不。2、161 - 165年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. 答:别墅,Liste, e·t·科特伊斯et al .,“一代和属性的新的人类腹侧中脑的神经干细胞系,“实验细胞研究,卷315,不。11日,第1874 - 1860页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. k . c . Sonntag j . Pruszak t吉崎康宏认为,j . van Arensbergen r . Sanchez-Pernaute o . Isacson,“增强神经上皮的前体产量和midbrain-like多巴胺神经元使用的从人类胚胎干细胞成骨蛋白拮抗剂‘诺金’,”干细胞,25卷,不。2、411 - 418年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. o . Cooper, g . Hargus m . Deleidi et al .,“人类ES和帕金森病“诱导多能性”细胞的分化成腹侧中脑多巴胺神经元需要很高的活动形式的嘘,FGF8a由视黄酸和特定的区域化,”分子和细胞神经科学,45卷,不。3、258 - 266年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. r . Sanchez-Pernaute h . Lee m . Patterson et al .,“孤雌生殖的多巴胺神经元从灵长类动物胚胎干细胞实验帕金森病恢复功能,“大脑,卷131,不。8,2127 - 2139年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. h . n .阮b·拜尔斯b线et al .,“突变LRRK2 iPSC-derived da神经元演示易氧化应激增加,”细胞干细胞,8卷,不。3、267 - 280年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. m·j·迪瓦恩m . Ryten p Vodicka et al .,“帕金森病诱导多能干细胞的三倍α-核蛋白轨迹。”自然通讯,卷2,不。1,第440条,2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. m·g . Hargus o·库珀Deleidi et al .,“分化帕金森patient-derived诱导多能干细胞生长在成年啮齿动物的大脑,减少电动机不对称在帕金森大鼠,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷107,不。36岁,15921 - 15926年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. 沃尼格·m·j·p·赵,j . Pruszak et al .,“神经元来自重组成纤维细胞功能集成到胎儿的大脑和改善与帕金森病的症状的老鼠,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷105,不。15日,第5861 - 5856页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. a . Swistowski j .彭问:刘et al .,“有效的生成功能多巴胺神经元从人类诱导多能干细胞在定义的条件下,“干细胞,28卷,不。10日,1893 - 1904年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. n .普拉卡什和w .香肠”,哺乳动物的大脑多巴胺神经元的发展。”细胞组织的研究卷,63年,第206 - 187页,2004年。视图:谷歌学术搜索
36. e·安德森,Tryggvason,问:邓et al .,“识别中脑多巴胺神经元的内在决定因素。”细胞,卷124,不。2、393 - 405年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. s . Friling e·安德森·l·h·汤普森et al .,“有效生产Lmxla中脑多巴胺神经元的表达在胚胎干细胞中,“美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷106,不。18日,第7618 - 7613页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. m . Caiazzo m·t·戴尔'Anno大肠Dvoretskova et al .,“直接代多巴胺神经元功能的老鼠和人类成纤维细胞,”自然,卷476,不。7359年,第227 - 224页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. 费,农场叫Kirkeby, a . o .到达et al .,“人类成纤维细胞多巴胺神经元的直接转换,“美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷108,不。25日,第10348 - 10343页,2011年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. a·l·m·费里w·林·Mavromatakis et al .,“Foxa1和Foxa2调节多个阶段的中脑多巴胺能神经元是剂量依赖性的方式发展,“发展,卷134,不。15日,第2769 - 2761页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. a . Sanchez-Danes a . Consiglio y Richaud et al .,“有效的代的A9中脑多巴胺神经元通过慢病毒交付LMX1A人类胚胎干细胞和诱导多能干细胞,”人类基因治疗,23卷,不。1,56 - 69,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. f . Soldner d . Hockemeyer c .胡子et al .,“帕金森病Patient-Derived病毒重组因子的诱导多能干细胞的自由,”细胞,卷136,不。5,964 - 977年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. f . Soldner j . Laganiere a . w . Cheng et al .,“代同基因的多能干细胞不同只在两个早发性帕金森点突变,”细胞,卷146,不。2、318 - 331年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
44. d·p·纳和r . j . Youle”针对线粒体功能障碍:角色PINK1帕金线粒体质量控制,”抗氧化剂和氧化还原信号,14卷,不。10日,1929 - 1938年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. p .由j . Graziotto h .宋f·希穆洛维奇,c·克莱因和d . Krainc“线粒体帕金招聘受损神经元来自PINK1基因突变诱导多能干细胞,”神经科学杂志》上没有,卷。31日。16,5970 - 5976年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2012帕特里夏·l·Martinez-Morales和伊莎贝尔Liste。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。