22 大肠杆菌 大肠杆菌 Sox2-TAT重组融合蛋白的纯化和重编程设置。(一)重组cell-permeant Sox2融合蛋白()由长篇Sox2蛋白和一个carboxy-terminally融合序列标签组成的核本地化序列(NLS), cell-penetrating肽答,histidine-tag(代替单步净化。(b)表达和纯化过程的示意图表示,在这项研究中使用的编程设置。在表达,Sox2-TAT-containing细胞溶解产物受到亲和柱层析法采用Ni-NTA树脂。纯化重组Sox2-TAT蛋白质筛选了列及其重组能力评估结合逆转录病毒编码Oct4、Klf-4,原癌基因。(c, d)生化分析Sox2-TAT净化。下面的分数受到SDS - page分析:原油溶解产物(CL)、标记(M),颗粒(P),上层清液(SN),主要材料(英尺),清洗缓冲(W),和洗脱馏分(E), SDS凝胶染色使用Coomassie (c)或用于制备免疫印迹使用anti-Sox2-specific抗体(d)。