研究文章

cMyc蛋白对小鼠成纤维细胞重新编程的时间要求

图2

在体外 μ + 的建设和转导pTAT-mcMyc MEF重组蛋白。(一)pTAT-mcMyc构造的示意图表示。(b)减少,变性pTAT-mcMyc重组蛋白是解决在12 - 15% SDS-polyacrylamide凝胶和转移到PVDF膜电泳(90 V 2小时4°C)。湿膜在奥德赛阻断缓冲区阻塞1小时(1:1 Tris-HCl缓冲区)和探测鼠标anti-6xHistidine或鼠标anti-mouse cMyc基本抗体检测前与山羊anti-mouse Alexa萤石- 680二级抗体。重组pTAT-mcMyc检测在预测分子量(年度kDa;箭头所指)。(c) mef镀前盖玻片100海里pTAT-mcMyc重组蛋白应用于平衡文化媒体。一小时孵化后,mef洗,固定的,阻塞,对抗体识别6 xhistidine(下半部分)。细胞核与赫斯特发现染料(中间面板)。酒吧规模:200m .红色箭头显示检测到细胞核之外pTAT-mcMyc蛋白质的检测。(d) mef逆转录病毒感染窝藏商船或感染。OSK-expressing mef服用100海里pTAT-mcMyc蛋白质(红场)或pTAT-control(绿色三角形)每天12天。未感染mef剩下控制,或接受100海里pTAT-mcMyc蛋白(棕色钻石)每天12天。天5、7、9、12感染后,Oct4-GFP菌落数在重复的井。均值±扫描电镜的独立实验显示;。
541014. fig.002a
(一)
541014. fig.002b
(b)
541014. fig.002c
(c)
541014. fig.002d
(d)