代的诱导多能干细胞(iPS)细胞的核重编程

文摘

在胚胎发育期间多能性是逐渐失去了不可逆的细胞分裂,分化、迁移和器官的形成。终末分化细胞不能分化成其他类型的细胞。多能干细胞是一个伟大的来源的不同类型的细胞用于组织再生或修复受损组织。多能干细胞可以来源于胚细胞内细胞团,但由于道德问题的应用是有限的。最近发现的iPS定义重组因子已经发起了一系列干细胞在各实验室工作。多能细胞可以来自各种分化成熟细胞以及成体干细胞通过核重编程体细胞核移植等。在这篇文献回顾中,核重编程的不同方面进行了讨论。

1。介绍

成年人类无法再生器官再生已经沉默在进化过程中防止肿瘤发生。然而,在人类的一部分肝脏可以再生。在低等动物中,再生器官或部分器官是非常普遍的。控制唱的歌鸟的大脑组织的鸟类死亡后每个繁殖季节,又输了神经元取代在下一个繁殖季节的到来1]。爬行动物蜥蜴失去尾巴欺骗捕食者和失去的尾巴重新生成。终端分化细胞如成纤维细胞被认为是无法转换为其他类型的细胞。然而,在两栖动物,后来在哺乳动物克隆实验证明确实有可能重组并生成其他细胞类型2,3]。

成人神经、心脏组织从来没想过再生,但在90年代末发现偶尔情况下成人神经元分化(4]。

现在确定终端分化的细胞是一个可逆过程,产生了大量的兴趣降级iPS细胞分化和重组。干细胞可分为无限,能增加自己的和不同类型的成熟细胞。它承诺治疗一些神经和其他疾病如帕金森衰弱,老年痴呆症,缺血性心力衰竭、糖尿病、亨廷顿病,和镰状细胞性贫血5]。

2。多能干细胞的来源

多能细胞的几种方法推导存在。(一)胚胎干细胞(ES)细胞可以收获直接从内细胞团(ICM)的胚胎植入前的胚泡。(b)体细胞核转移(SCNT)是一种治疗技术在成年体细胞核microinjected无核的鸡蛋。鸡蛋,现在包含一个体细胞的细胞核,刺激与冲击和体细胞核重新编程由主机卵细胞和胚泡。(c)细胞杂交,多能通过体细胞杂交细胞形成与ES细胞融合。(d)诱导多能干细胞(iPS)细胞发达from-patient-specific体细胞重编程的ES细胞样的状态。为了实用的目的,他细胞面临困难因为伦理问题,immuno-incompatibility潜力,增加了MHC分子表达在分化(6]。SCNT对于人类来说都很难实现,深陷与鸡蛋有关的伦理问题的破坏。同样,利用胚胎干细胞由于道德原因有难度。作为替代,建立“诱导多能性”细胞创建了更有趣的潜力,因为他们从成人细胞(7]。在他开创性的iPS,山中等人使用4重组因子(他们也转录因子)如Oct3/4 Sox2, Nanog,原癌基因重组老鼠体细胞。后,重组因子(RFs)交付通过逆转录病毒、慢病毒载体和其他病毒的交付系统(表1)。minicircle (MC)交付系统旨在提供TFs游离,避免病毒在临床中使用的意想不到的后果(8]。然而最近,信使rna 4重编程因子直接添加到细胞表现出高效的成人皮肤细胞重编程(9]。重编程效率也提高了使用各种化学物质和生长因子(如Wnt和TGF -β信号通路)除了4重组因子(图1)。

3所示。ES和iPS细胞

ES和iPS细胞能够产生几乎任何类型的成熟细胞。然而,使用胚胎干细胞临床目的是有争议的。此外,细胞来源于胚胎干细胞可以被宿主的免疫系统自发的派生。为了克服伦理和免疫排斥问题,开发“诱导多能性”细胞成熟分化细胞的重组因子。iPS,形态,典型的接近,可以分化为各种类型的组织和补充宿主组织损失神经退行性和其他疾病。直接重新编程的细胞iPS比一代更方便、可靠的多能细胞从囊胚ICM (10]。然而,不同的研究表明,“诱导多能性”细胞不像胚胎干细胞优越。

在开始任何重组,我们需要了解在分子水平上遗传和表观遗传变化导致重组从分化细胞多能性。之间有一个海湾实验室成功iPS和这种技术的临床应用仍表征。之前的安全问题需要解决临床考虑。瓶颈的iPS细胞数量不足,免疫排斥反应、肿瘤(畸胎瘤)的形成。所有的多能细胞(hESC iPS, NTSC)是潜在的肿瘤发生的。还需要更多的研究来解决这个问题(11]。

4所示。重新编程的细胞类型

在开始任何重组之前,信息的起始细胞的可塑性是有用的细胞重新编程是一个可塑性之间的相互作用和环境因素如表观遗传修饰。成体干细胞和终末分化细胞可以重新编程但是效率、重组的时期,和程度不同起始细胞之一。的派生功能神经元,心肌细胞,胰岛细胞,肝细胞,和视网膜细胞证明有可能得出细胞,还可以从许多别的来源的组织重组,从而促进各种治疗。起始细胞不应该一定的器官,需要修理。作为一个例子,可以做生产胰岛素的细胞再生主要来源(在本例中胰腺癌细胞),胰岛素生产细胞也可以来自其他来源,成人干细胞,间叶细胞和造血干细胞。这也通过各种方式如核重编程和分化转移。骨髓组织成人间充质干细胞的来源,但收集的更多的入侵和痛苦的手术。脂肪干细胞(ADSC)是最丰富的,可以很容易地从患者标本中分离出局部麻醉。有趣的是脂肪组织包含大约100倍成体干细胞比骨髓成为一个有吸引力的成体干细胞来源。人类ADSCs异构群多能祖细胞,它具有一定的优势;他们可以在大量收集自(100毫升人类脂肪组织的收益率以最小的发病率(细胞)12]。此外,ADSCs表达3 - 4次内生Klf4相比,人类胚胎干细胞和1.3倍原癌基因的表达都是重组代理。重组ADSCs iPS和随后的神经分化是一个有吸引力的替代他。ADSCs可以诱导分化成成骨的(13],chondrogenic [14,脂肪形成的15),肝15,心原性的16),神经源性(17),胰岛胰岛素分泌细胞(18,生血的(老鼠)血统19]。

5。重组向量

5.1。重组逆转录病毒载体的

仍然是游离基因的重组基因传递系统(如腺病毒、mRNA和minicircle)有很大优势基因的整合到宿主染色体(汉坦病毒、逆转录病毒)。重组因子表达瞬变,然后退化或消失了。这个质数和驱动器宿主细胞的编排下游反应(通路尚不清楚),最终将细胞多能性。基于DNA的重组病毒载体,4触发重组蛋白质但DNA改变由于病毒整合到染色体。然而,逆转录病毒重组的效率是非常低的频率(少于0.1%)。在最初的重组逆转录病毒(MMLV)使用方法;RNA病毒宿主细胞内的转基因和reverse-transcribed。这个DNA整合到宿主染色体和一个常数的转基因蛋白质来源。逆转录病毒启动子的灭活可能是组蛋白修饰(甲基化)20.]。成年细胞的重组病毒的重组因子4 (Oct4、Sox2 Nanog,和原癌基因)已经成功地用于“诱导多能性”的一代。高桥等人首次开发鼠标iPS和一年后建立人类“诱导多能性”(7,21]。这些“诱导多能性”细胞应该是等价或与ES细胞在形态、基因表达和表观遗传状态能增加3-germ层。有一些缺点的逆转录病毒载体。它集成了随机在宿主染色体漏水的表达和细胞转换成肿瘤。此外,随机整合也使细胞异构和iPS细胞应该筛选各种克隆(药效和安全性)。使用代理的原癌基因的重组因子使细胞更多的致瘤的myc的作用与肿瘤有关的记录。Myc立即早期基因和原癌基因的激活了transgene-derived肿瘤形成嵌合体小鼠(22]。嵌合小鼠生产c-myc-free iPS没有任何肿瘤控制老鼠相比,直到6个月观察期。除了原癌基因,各种肿瘤也表达OCT3/4 SOX2, KLF4另3重组因子。超表达这三个因数iPS导致肿瘤的形成。希望有一些改进上述程序。一些实验室已经最小化整合到宿主基因组的数量将所有重组因子在一个向量。这实际上是技术/通过把IRES序列之间的重组基因或自我分裂2肽序列。这种方式产生“诱导多能性”细胞基因组中只有单一的插入(23]。

5.2。重组的病毒载体

直到现在,已经有几个病毒载体用于TFs交付。其中部分列表如表所示2。Minicircle (MC)向量是由斯坦福大学的Joseph Wu博士的研究小组(8]。Minicircles (MC)圆形病毒性DNA元素生成的分子内(cis)从一个家长的质粒重组(PP) pLGNSO (Lin28, GFP, Nanog、Sox2 Oct3/4)介导的ϕC31整合酶。因此交付只有minicircles细胞延长转基因的表达比传统的瞬时转染质粒。分裂细胞,表达minicircles持续14天。:细胞,表达minicircles 1星期后略有下降,但可以继续转基因的表达好几个月了。minicircle的美妙之处在于,MC具有更高的异位表达和少失活细胞的机械。质粒包含一盒4重组因子和GFP的编码序列是联系在一起的“2 a”肽序列(24]。minicircle当用于使转染成人细胞,随着时间的推移逐渐变成了ES型形态不改变全球基因表达。细胞内,MC不是基因组中整合,而是长转录作为一个整体单一基因mRNA包含所有5 (4 RFs & GFP)。这就是个人翻译为一个单一的蛋白质蛋白质处理self-cleavage肽2 a。在合成RNA-based重组RNA翻译成蛋白质在细胞质中,宿主DNA依然没有改变。合成RNA-based重组是干净,安全,迅速,“诱导多能性”细胞来源细胞的基因是相同的。的重编程过程需要2周多4%的细胞被重新编程。这是关于100倍更有效比重组通过基因转移技术9]。他们把它命名为RNA-induced多能干细胞(撕裂)细胞。然而,很难长信使rna化学合成和研究人员一直没能使大型mRNA。不用说信使RNA是容易退化和需要非常严格的质量控制实验室,细胞有一个防御系统对RNA病毒感染。这是一个古老的防御机制存在于植物和动物。宿主细胞感知外国RNA病毒入侵和降解RNA小片段的RISC机器可用的细胞内。这种细胞介导的RNA降解被称为RNA干扰(RNAi) [25]。为了规避这个问题,罗西博士的团队化学信使RNA合成一些修改基地(核苷酸)间隔是不被认为是一个局外人RNA和防止退化。阿里身上等人也证实重组4 TFs的信使rna。然而,他们没有使用合成RNA相反,他们使用信使RNA由体外转录合成(溶)从4基因的dna。连续表达,他们共转染的五倍,建立了iPS碱性磷酸酶阳性,表示几个多能标记(26]。

5.3。模型重新编程的细胞:hADSCs

人类ADSCs异构群多能祖细胞可以在大量收集自(27]。ADSCS比骨髓更丰富100倍。Nucleofector (Amaxa、德国)用于nucleofection 4重组因子。Nucleofection是一个很难解释的方法直接传递到细胞核DNA材料。所有细胞用于重组是在早期的通道。转染hADSC细胞然后播种在丝裂霉素C治疗mef支线层或Matrigel-coated组织培养菜(ES合格,BD生物科学)。支线层为细胞提供营养被重新编程。丝裂霉素C或辐射治疗细胞还活着但他们不分裂的细胞周期是逮捕了DNA损伤反应通路。在4和6天,hADSCs转染再次与minicircles使用lipofectamine类型转染试剂是不如nucleofection细胞毒性。细胞转向人类ES细胞培养基准备使用DMEM-F12 + 10%分离血清和100 ng / mL的bFGF (FGF-2)。 Colonies with morphologies similar to human ES cell colonies are expected to be visible in 3-4 weeks after transfection. Gradual loss of GFP expression due to dilution of minicircles followed by activation of endogenous Oct4 expression will be observed on successive cell proliferative cycles. During this reprogramming, cells divide and form round/circular compact colony of cells with a clear margin. In mouse cell reprogramming, leukemia inhibitory factor (LIF) is also used in the media to keep them in a pluripotent state while avoiding any differentiation.

“诱导多能性”细胞的多能性是由免疫荧光等西文标记Oct4、Sox2, Nanog等等。对于临床应用,南部的屁股做检查任何重组基因的基因组整合。孤立的殖民地看起来形态类似于他。应用多能标记和碱性磷酸酶将是积极的。“诱导多能性”细胞通常表达SSEA4 TRA-1-60, Nanog但不是SSEA1。

5.4。一些不太使用重组方法

各种革兰氏阴性细菌有III型分泌系统(T3SS)注入毒性蛋白(由一个变量分泌信号序列)在真核细胞的细胞质中。Bichsel等人使用铜绿假单胞菌外毒素挂式可能促使Cre重组酶含有一个Cre-NLS信号(28]。细菌感染后,交付Cre-NLS接受LoxP染色体DNA重组介导的。这导致了iPS和建立使用T3SS TFs的细胞重新编程。逆转录病毒组装聚合物的Gag蛋白proteolytically裂解在进入细胞通过受体结合。这个属性的逆转录病毒被用来提供重组蛋白进入细胞。将蛋白与核本地化信号(NLS)和标记/附着在逆转录病毒蛋白质。进入细胞后,蛋白质是由逆转录病毒蛋白酶裂解和活跃的TFs蛋白质转移内部重组细胞的细胞核。这个表达式是瞬态的蛋白质会退化后的目的(29日]。在常规iPS代细胞传输和存活下来的“诱导多能性”细胞是由四倍体互补。它已经表明,添加Tbx3改善“诱导多能性”细胞的质量。“诱导多能性”细胞衍生Tbx3和10月4日SOX2 KLF4更成功在生殖细胞的贡献30.]。

真皮乳头状瘤(DP)细胞重新编程更有效地比皮肤和胚胎成纤维细胞。DP本质上表达高水平的SOX2和原癌基因,所以这些DPs可以很容易地重新编程只有Oct4和KLF4 [31日]。4重组因子中,Oct4 iPS代是一个非常重要的特遣部队。Oct4特遣部队SOX2,而不能取代其他KLF4和原癌基因可以更换。然而,Ng表明孤儿(受体配体是未知的)核受体Nr5a2可用于小鼠体细胞重编程效率大于Oct4。全基因组表达分析表明,Nr5a2分享了很多目标基因与SOX2 KLF4指示他们协同合作32]。核受体超家族有48个基因。这个核受体超家族维护的各个方面具备干细胞干细胞的调节,终末分化细胞的重编程(33]。一个Oct-4推销商记者系统已经在老鼠和猪和开发是一个有用的工具来监控猪细胞的分化状态都在体内和体外34]。最近工作效率通过Sugii等人已经改善了iPS有或没有支线层(35]。他们也表明脂肪干细胞(ASC)可以种植在ASC支线层而不是MEF支线层。他们减少了iPS编程1.5和2.5周的老鼠和人类iPS,分别。终末分化成熟的B淋巴细胞被重新编程基本重组因子+添加C / EBPalpha [36]。一般4重组因子添加比例相等iPS的一代。然而,增加的浓度OCT3/4提高编程效率,增加SOX2的浓度,KLF4,原癌基因减少重组效率(37]。重组所需的时间也会有所不同的细胞类型开始,来源,等等。小鼠成纤维细胞可以在3周而人类成纤维细胞重新编程的重组因子需要4周才能重新编程。有趣的是,4-factor重组抑制心脏分化OCT4和Fgf4由于长时间的表达式。相反,肠胃病用药重组(包括原癌基因)的表达提高precardiac (Flk-1,趋化因子受体CXCR4和Mesp1/2)和心脏(Nkx2.5、Mef2c Myocardin)基因。分化的细胞显示连续击败活动在培养皿中。因此,重组缺乏原癌基因TF往往优先生成心脏组织(38]。

人类iPS感应也通过添加一些其他因素,如TBX3, microrna - 291 - 3 - p, mir - 294和miR295。成年蝾螈可以再生镜头从色素上皮细胞去分化(胸大肌)。这就像重组iPS在活的有机体内没有任何外生因素。作者感兴趣的看到哪些基因被激活/表示在去分化过程。他们孤立mrna和建造cDNA图书馆。在分析时,他们发现细胞凋亡和癌症相关基因的表达和得出的结论是,癌症和apoptosis-related基因表达在纽特去分化(可能是一个标志39]。维生素C增强了代的iPS在老鼠和人类体细胞。它可能扮演辅助角色逆转衰老和促进pre-iPS细胞完成编程的细胞(40]。血统重组一直是研究的一个重要工具在分化细胞命运的选择。几个TFs可以驱动细胞从一个天堂到另一个(41]。诱导表达的白血病致癌基因在斑马鱼胚胎AML1-ETO重组造血祖细胞从骨髓红细胞。

5.5。小分子化学

小分子化学物质这一目标酶的细胞重新编程通路已经被识别,控制细胞的命运像干细胞维护、重组,和分化42]。通过使用合成化学小分子可以诱导多能性状态称为化学诱导多能性细胞(cips) [43]。李等人建议小分子不仅应该能够重新编程细胞体外,但他们也可以交付到身体和常规治疗目标病人自身的组织治疗退化性疾病,伤害,和癌症(针对癌症干细胞)44]。肿瘤细胞抵抗化疗药物。已经表明,重组的胃肠道肿瘤细胞的异位表达TFs导致重组。诱导多功能癌症(iPC)细胞对化疗药物敏感,也回应了differentiation-inducing治疗在短期细胞培养45]。重编程体细胞也是可能的融合与成年细胞胚胎干细胞。fusion-induced重组,OCT4复活后1 - 2天内开始ES细胞和体细胞融合(46]。重组融合的融合是通过mef小鼠ES细胞利用红血球凝聚日本病毒信封(HVJ-E)。微卫星分析表明他们拥有稳定的细胞系基因来自MEF和ES。融合细胞是四倍体和碱性磷酸酶阳性(美联社)和干细胞标记(OCT3/4, NANOG SOX2)但不是成纤维细胞细胞标记(Col1a1和Col1a2) (47]。肠上皮细胞和巨噬细胞癌症之间融合背景下导致核重编程(48]。端粒的染色质的结构是动态的,变化在细胞转换到癌症。端粒是在每个细胞周期缩短,直到达到危机阶段它进入细胞凋亡(49]。端粒表达式是沉默的大多数成年体细胞组织除了成年干细胞隔间。在重组端粒的染色质重建和端粒延长端粒酶(50),在重组过程中虽然有一些异质性对端粒长度(51]。

5.6。重组的分化转移

分化转移被定义为一个细胞类型的转换到另一个地方。埃伯哈德等人使用合成糖皮质激素地塞米松和重组胰腺细胞肝细胞(52]。Cobaleda C肉瘤成人B细胞成多能祖细胞然后重组替代血统T细胞和巨噬细胞(53]。麦等人使用哺乳动物亲和纯化和慢病毒表达(枫)提供一些蛋白复合物参与转录(RNA聚合酶II相关联的因素,消极伸长因素,积极转录延长因子b,瑞士/ SNF复合物)。他们表明TF KLF4促进染色质重塑与瑞士/ SNF复合物[54]。

由SCNT动物的一代表明,表观基因组分化的细胞可以重置为多能性状态。体细胞的细胞核插入一个无核的鸡蛋和可以转换成一个胚胎阶段(多功能)。卵子的细胞质是足以重置表观基因组和DNA序列依然没有改变。供者细胞和主机之间的兼容性的线粒体DNA单卵母细胞改善重组效率可能通过表观遗传修饰。增加SCNT可行性、治疗等化学物质引起染色质修饰Trichostatin-A (TSA)减少组蛋白脱乙酰酶的表达(HDAC1和HDAC2)和DNA甲基化(种能阻碍DNMT3b DNMT3a和),增加组蛋白乙酰化作用的表达式(P300和CBP),多能性(OCT4和NANOG)基因(55]。组蛋白脱乙酰酶抑制剂丙戊酸(VPA)启用重组人成纤维细胞只有Oct4和SOX2 [56]。在抑制Wnt信号结果GSK-3细胞质和稳定β- - - - - -连环蛋白。小分子抑制剂GSK-3可以模仿wnt信号的激活和维护mES的多能性(57- - - - - -59]。免疫系统蛋白质,activation-induced胞嘧啶核苷脱氨酶(援助)有助于重组DNA甲基化。因此重要的重组Oct4基因和nanog是诱导。李等人已经能够重组体细胞Sox2特遣部队。TFs Oct4、KLF4单独培养时可以重组MEF与糖原合成酶激酶3 (GSK-3)抑制剂CHIR 99021。他们的结论是,GSK-3抑制剂可能取代TF SOX2在老鼠和人类重组。此外,CHIR 99021结合parnate TFs Oct4、KLF4足以改变人类主要的角化细胞(60]。

6。体外分化的诱导多能干细胞分化细胞

多能“诱导多能性”就像一个中心在不同谱系分化类型是可能的。从iPS生成成熟的神经元细胞,细胞分化诱导培养基包含的因素。表达的区别是由存在的标志α光滑的肌肉肌动蛋白,α胎蛋白,β三世微管蛋白。如果iPS细胞的生存是一个问题,与岩石抑制剂治疗“诱导多能性”细胞的y - 27632之前收获增加生存能力是可能的。最近细胞可以诱导分化转移治疗一些转录因子和改变细胞从一个血统(成纤维细胞)到另一个神经元(功能性)绕过多能干细胞的阶段的转换(61年]。

7所示。发展的胚胎,多能干细胞和癌症细胞

胚胎多能干细胞和癌症细胞有相似的行为。他们正在积极分裂和扩散。许多基因沉默(未表达的)在分化成人组织中重新激活细胞重新编程(iPS)和癌症。回到过去,第一个多能细胞来源于畸胎癌(生殖系肿瘤)。当(移植)生长在组织培养、畸胎癌产生的胚胎细胞癌。这种情况由于重组的癌症细胞多能性状态(62年]。因此,它需要仔细观察对恶性肿瘤/限制iPS的增长。

iPS在临床设置的成功将取决于安全、基因组完整性、编程效率,等等。Rb-p53-p16 (INK4a)是一个非常重要的途径,细胞周期进展,细胞增殖,scenescence。在分子水平上,癌症的各种收敛p53通路。由于突变的Rb, p53或控制不住地p16细胞周期的进展和不合时宜的。p53肿瘤抑制基因和基因组中都可称为《卫报》。大约50 - 80%的肿瘤的各种有p53的突变63年]。蛋白质快速退化(半衰期约30分钟)。然而,这种蛋白质快速激活(稳定)在病毒感染,不计时的细胞周期进展,在DNA损伤和其他压力(63年]。DNA损伤后蛋白质磷酸化的ATM / ATR激酶和稳定。p21蛋白的表达上调基因刹车从G1 S期细胞周期进程。在许多基因,它还上调伯灵顿表达式,proapoptotic基因。在细胞周期中堵塞,p53评估学位/ DNA损伤的程度。如果它是可修复的,那么它新兵/移植DNA修复蛋白和恢复基因组的完整性。但如果DNA损伤是重要的,那么它将对细胞凋亡的细胞。ES也“诱导多能性”细胞增殖迅速,完整的p53通路的障碍有效的重组。细胞周期和细胞凋亡作为病原在重编程步骤。任何加速细胞分裂,有助于更快的重新编程。 It can be done if p53 is knocked down temporarily by p53 or p21 specific short hairpin (shRNA). This may facilitate faster reprogramming but also increases the chance of tumor development. Several labs have used temporary p53 knockdown for faster reprogramming, and then/later on restoring p53 pathway after iPS generation helps to guard against the development of any cancer [64年]。

Rem 2是一个抑制hESC p53通路和表达更高的。Rem2通过加速细胞周期,同时通过影响细胞周期蛋白D1保护从细胞凋亡。Rem 2是一个主要的球员hESC多能性和自我更新。Rem 2是一样有效的原癌基因,提高重编程效率来自人类体细胞iPS的8倍。

8。Epigenetical修改

Epigenetical修改已广泛观察到癌症,在胚胎发生和细胞重新编程。在哺乳动物开发全基因组表观遗传重编程发生体内体外但表观遗传重编程不是那么有效。这就是为什么它需要很长时间才能重新编程。表观遗传变化,修改DNA和DNA包装蛋白质(称为组蛋白)改变基因表达模式和调节细胞的身份(65年]。重新编程细胞iPS我们需要了解细胞重新编程过程以及基因组的表观遗传变化,重组的步骤。表观遗传学的定义是可遗传的的变化表型或基因表达除了改变底层机制造成的DNA序列。表观遗传机制被认为是另一个维度/语言以外的DNA。重组不仅是监管由4 RFs还后生修改。表观遗传修饰DNA甲基化DNA水平上可能发生的启动子甲基化/乙酰化作用的蛋白质包裹DNA(组蛋白);基因表达或沉默。蛋白质乙酰化作用促进RNA合成机械访问启动子。肿瘤抑制基因沉默已发表在各种癌症表观遗传机制导致细胞无限制的生长。SCNT异常的DNA甲基化(表观遗传学)模式导致了在开发过程中无法达到其多能性状态到胚泡在牛66年]。在这种情况下,组蛋白脱乙酰酶抑制剂trichostatin (TSA)治疗提高了开发的效率(SCNT胚胎67年]。Oct3/4的促进者和nanog是高度甲基化和成纤维细胞开始沉默,但脱甲基和活跃在“诱导多能性”细胞。iPS效率可以通过表观遗传修饰增加了治疗药物。这些可能是DNA甲基转移酶抑制剂5′-Azacytidine RG108,组蛋白脱乙酰酶抑制剂如丙戊酸和TSA,和组蛋白甲基转移酶抑制剂bix - 01294。预计,“诱导多能性”细胞胚胎干细胞一样的表观遗传修饰。后来发现,有71个差异甲基化区域(dmr)胚胎干细胞和诱导多能干细胞68年]。“诱导多能性”细胞并不等于ES细胞在某些方面和“诱导多能性”细胞有一些记忆的组织来源。这是证明由ES comperative基因表达分析和“诱导多能性”细胞。康H和卢武铉年代显示,尽管小鼠胚胎SCNT激活重组有或没有TSA(强烈的组蛋白脱乙酰酶抑制剂),TSA(治疗11 H)显示更高的囊胚率(21.1%)相比,参与胚胎(3.4%)。TSA-treated胚胎表明组蛋白脱乙酰酶的表达下降(HDAC1和HDAC2)和DNA甲基化基因(种能阻碍DNMT3b DNMT3a和)表达水平的增加表达组蛋白乙酰转移酶(P300和CBP)和多能性标记(OCT4和NANOG)。因此化学物质如TSA可用于弥补的缺点iPS (55]。表观遗传变异发生在分化的多能性和发生反之亦然(69年]。“诱导多能性”细胞,实现多功能标准可能含有异构影响lineage-specific分化的概要文件。此外,由iPS细胞重新编程可能含有残留的记忆持续从原始亲本来源以及一些残余的编程过程本身导致的偏见可能分化成心脏之类的组织(70年]。TFs通过执行表达式,它已经表明,尽管不同的iPS殖民地形态看起来像胚胎干细胞,在分子水平上他们非常异构表达各种stage-specific分化潜能。他们发现,只有一种类型的细胞,是真正的“诱导多能性”细胞和其他重组中间体。种能阻碍DNMT3B表达细胞标记,如TRA-1-60 REX1可以在完全重新编程细胞。我们理解美联社相反,SSEA-4、GDF3 hTERT, NANOG标记不足。多能性细胞是由国家保持开放的彩色。可能是实现两种方式(a)因素,保持染色质开放全球促进机械基因启动子的转录的条目,并在本地(b)因素,沉默特定基因谱系,直到开始分化(71年]。干细胞生物工程可以用于替代组织的疾病和显示疗效在移植动物模型(72年]。Tursun等人能够把各种神经元类型(glutamatergic、胆碱能和gaba ergic)只有一个异位表达的转录因子秀丽隐杆线虫。这是通过组蛋白的清除伴侣LIN-53(同源人类RbAp46/48)是组蛋白重塑和修改复杂。它可以模仿化学抑制组蛋白去乙酰酶抑制剂(73年]。

9。重编程的分子机制

细胞重新编程的详细分子机制还不知道。几个重组因子与蛋白质的相互作用。这些基因结合几个基因的启动子。表观遗传修饰促进酶/蛋白质获得启动子。有两组基因与反对功能:upregulation具备干细胞的基因参与STAT3和ZIC3 [74年的基因差别),对这些负责分化像PAX6 ATBF1, SUZ12 [75年]。MEF重组期间,感应Thy-1 SSEA-1和镇压的基因在早期阶段发现的重编程(76年]。更多的后期内生多能标记OCT3/4 SOX2以及表达端粒酶,端粒的染色体。完全重新编程细胞多能阳性标记SSEA-4和消极TRA-1-60和纤维母细胞标记,CD13。他们也应该灭活逆转录病毒启动子。“诱导多能性”已经从各种来源的成年细胞产生像老鼠的肝脏77年),胰腺β细胞(78年]。工作在Wnt信号通路显示调制/β连环蛋白、MAPK / ERK TGF -β,PI3K / AKT信号通路增加了体细胞重编程的可能性79年]。

Prigione 2010和•阿贾耶已经证明人类ES和iPS未分化状态和分化的各个阶段都有类似的线粒体明显的成纤维细胞的属性。这是由全球转录分析,表明线粒体概要文件仍类似于分化(80年]。

10。不完整的编程

不完整的鼠标殖民地编程往往表达lineage-specific基因。CD13标记丢失的早期阶段iPS GFP的表达减少和增加的表达SSEA4 TRA-1-60。赫斯特染色也减少后期的重组干细胞往往泵出这个核染色染料。总之,从CD13 +人类成纤维细胞去分化的第一和第二阶段,都有GFP +,赫斯特聪明,TRA-1-60负面的。但在第二阶段SSEA-4积极消极的第一阶段。阶段2和3,都有CD13、SSEA4 +;GFP在第三阶段是消极的,但在第二阶段积极;TRA-1-60在第三阶段积极和消极的第二阶段;赫斯特在第三阶段暗淡,但明亮的第二阶段。然而,上述标记并不总是足够的细胞表达这些标记有时无法扩大。 Together with these markers and growth properties they help to identify the real iPS cell lines.不完全重编程细胞自我更新由于原癌基因的存在。删除原癌基因的重组因子显示显著减少数量的不完全重编程殖民地在老鼠和人类10]。因此,汉娜等人用可溶性wnt3a促进iPS再生原癌基因的缺失。Wnt-3a条件媒体可以重组MEF细胞(36]。在抑制Wnt信号结果GSK-3细胞质和稳定β连环蛋白。

李等人创造了iPSC从体细胞基因转导保持均匀。他们开发了一个方法,人类和老鼠(riPSCs)的细胞则可以维持生活和鸡尾酒ALK5抑制剂,GSK3抑制剂,MEK抑制剂(60]。

11。确定后iPS细胞的完整性

在使用ip lineage-specific分化之前,确定质量和“诱导多能性”细胞的遗传完整性。细胞核型排除任何染色体畸变和细胞应该确认为二倍体,正常。表达外源多能性的标记和nonintegration LGNSO基因的宿主染色体是由rt - pcr和标准吸去南部,分别。检查的coexpression Lin28, Nanog Sox2, Oct4、转染细胞进行免疫印迹和免疫荧光分析。多能性决定在体外和在活的有机体内。EB形成的标志之一在体外胚胎干细胞的分化。畸胎瘤的形成在活的有机体内是多能性的测试。MC-iPS细胞自发分化为中胚层,内胚层和外胚层血统检测到免疫荧光和rt - pcr基因特定的分化。检查在活的有机体内通过重组发展潜力的人类“诱导多能性”细胞生成,细胞被注入的背侧6周大的职业SCID-beige老鼠。8周后,畸胎瘤形成评估。

12。结论

虽然“诱导多能性”细胞很容易在实验室里创造胚胎干细胞是黄金标准。ES细胞更有效地比iPS派生其他类型的组织。然而,使用胚胎干细胞由于道德原因并非易事。iPS以来作为替代ESC,干细胞研究开辟了一条新途径。现在细胞可以自体重组为治疗多能性的应用程序。任何成年细胞如皮肤细胞、肌肉细胞和脂肪组织细胞用于重组。原病毒转导方法已经进化到重组方法,重组因子可以被交付没有病毒载体从而基因组保持镇定。这是由质粒、蛋白质、信使rna转染,minicircle nucleofection。不同的细胞类型有不同水平的重编程能力和重组因子的不同层次的需求。这可能表明,仍有未被发现的因素仍然需要有效的ip和快速生成。 On the other hand, some cells express few factors abundantly than other kind of cells thus obviating the necessity of the reprogramming factor for that cell type. Teratoma formation from iPS is a drawback and needs careful screening of iPS that gives rise to teratoma在活的有机体内。直接重编程(iPS)在萌芽阶段。进一步的研究将促进iPS的可能性在广泛的组织工程和再生医学技术更有效治疗的目的。

引用

1. f . Nottebohm“从鸟的歌到神经发生,”科学美国人,卷260,不。2、74 - 79年,1989页。视图:谷歌学术搜索
2. j·b·古尔”核从肠道上皮细胞的发育能力的蝌蚪,”胚胎学和实验形态学》杂志上,10卷,第640 - 622页,1962年。视图:谷歌学术搜索
3. 威尔穆特。a . e . Schnieke j . McWhir a . j .,和k·h·坎贝尔,“可以存活的后代来自胎儿和成人哺乳动物细胞,”自然,卷385,不。6619年,第813 - 810页,1997年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. b·a·雷诺兹和s.w”一代的神经元和星形胶质细胞从孤立的成年哺乳动物中枢神经系统的细胞,”科学,卷255,不。5052年,第1710 - 1707页,1992年。视图:谷歌学术搜索
5. Gunaseeli, m . x床铺,c . Antzelevitch j . Hescheler和a . Sachinidis“诱导多能干细胞作为加速病人的模型,针对疾病的药物发现,“当前药物化学,17卷,不。8,759 - 766年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. p . j .仙童n·j·罗伯逊,浪漫,k . f·诺兰和h . Waldmann”细胞替代疗法和破坏性免疫逃避,“干细胞的评论,1卷,不。2、159 - 168年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. k .高桥和美国Yamanaka”诱导多能干细胞从小鼠胚胎和成年纤维母细胞的文化因素,定义”细胞,卷126,不。4、663 - 676年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. f·贾,k·d·威尔逊:太阳et al .,”源自人类“诱导多能性”细胞的病毒的minicircle向量,”自然方法,7卷,不。3、197 - 199年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. l·沃伦·p·d·诺斯t Ahfeldt et al .,“高效重组多能性和定向分化的人类细胞合成改性mRNA,”细胞干细胞,7卷,不。5,618 - 630年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. j·w·汉和y s Yoon“诱导多能干细胞:新兴技术对核重编程”抗氧化剂和氧化还原信号,15卷,不。7,1799 - 1820页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. c . y .方k Gauthaman, a . Bongso”畸胎瘤多能干细胞:临床障碍”细胞生物化学杂志》上,卷111,不。4、769 - 781年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. n, n . j .帕内塔·d·m·古普塔et al .,“Feeder-free推导诱导多能干细胞的成人脂肪干细胞,”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷106,不。37岁,15720 - 15725年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. s . g . Dubois, e . z .弗洛伊德s Zvonic et al .,“孤立的人类脂肪干细胞从活检和吸脂手术标本,”分子生物学方法卷,449年,第79 - 69页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. g·r·埃里克森j . m .平衡台d·m·富兰克林·h·e·大米、h·阿瓦德和f . Guilak”Chondrogenic潜在的脂肪tissue-derived基质细胞在体外和体内,”生物化学和生物物理研究通信,卷290,不。2、763 - 769年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. 郑胜耀Suh m . j . Seo, y . c . Bae和j·s·荣格,“人类脂肪基质细胞的分化成肝血统在体外和体内,”生物化学和生物物理研究通信,卷328,不。1,第264 - 258页,2005。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. s . Rangappa j . w . c . Entwistle a . s .韦氏j.y. Kresh,“Cardiomyocyte-mediated接触项目人类间充质干细胞表达心原性的表现型,”胸心血管外科杂志》上,卷126,不。1,第132 - 124页,2003。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. k . m . Safford k.c. Hicok, s·d·Safford et al .,”神经源性分化的小鼠和人脂肪基质细胞,”生物化学和生物物理研究通信,卷294,不。2、371 - 379年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. t·朔尔茨,美国Satyanarayan、美国达和g·r·d·埃文斯“快速表型变化的相关性和胰岛素生产人类脂肪tissue-derived干细胞分化,“年报的整形手术,卷63,不。4、436 - 440年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 表哥,m·安德烈e . Arnaud l . Penicaud和l . Casteilla”调整的致命辐照小鼠细胞从脂肪组织,分离”生物化学和生物物理研究通信,卷301,不。4、1016 - 1022年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. 松井,d .梁h . Miyashita et al .,”前病毒的沉默在胚胎干细胞需要组蛋白甲基转移酶的分野,”自然,卷464,不。7290年,第931 - 927页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. k .高桥k .田边m . Ohnuki et al .,“诱导多能干细胞从成人人类成纤维细胞因素,定义”细胞,卷131,不。5,861 - 872年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. k . Okita、t . Ichisaka和美国,“代细胞系诱导多能干细胞”自然,卷448,不。7151年,第317 - 313页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. c·a·萨默a·g·萨默·t·a·Longmire et al .,“切除重组转基因提高生成“诱导多能性”细胞的分化潜能与单个可割取的向量,”干细胞,28卷,不。1,第74 - 64页,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. t·s·米凯尔森,j .汉娜x Zhang et al .,“解剖直接重编程通过综合基因组分析,“自然,卷454,不。7200年,49-55,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. g . j . Hannon“RNA干扰”,自然,卷418,不。6894年,第251 - 244页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. e·阿里身上g . Rechavi s Rozenblatt, d . Givol“重组人成纤维细胞多能干细胞使用信使rna的四个转录因子,”生物化学和生物物理研究通信,卷394,不。1,第193 - 189页,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. p·a·祖克m·朱p Ashjian et al .,“人类脂肪组织是一个多功能干细胞的来源,”细胞的分子生物学,13卷,不。12日,第4295 - 4279页,2002年。视图:谷歌学术搜索
28. c . Bichsel d . k . Neeld t Hamazaki et al .,“细菌提供核蛋白质成多能和分化细胞,”《公共科学图书馆•综合》》第六卷,没有。1,文章ID e16465, 2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. c . Voelkel m·盖拉族t Maetzig et al .,“从逆转录病毒呕吐前体蛋白转导。”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷107,不。17日,第7810 - 7805页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. 杨j .汉p元,h . et al .,“Tbx3提高诱导多能干细胞的细胞能力,”自然,卷463,不。7284年,第1100 - 1096页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. 郑胜耀蔡,c . Clavel s . Kim et al .,“Oct4、Klf4重组真皮乳头细胞诱导多能干细胞,”干细胞,28卷,不。2、221 - 228年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. j·h·Ng和h·h·Ng LincRNAs加入多能性联盟”自然遗传学,42卷,不。12日,第1036 - 1035页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. y宋和d . j . Mangelsdorf,积累“核受体调节具备干细胞和干细胞分化,“实验和分子医学第41卷。。8,525 - 537年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. l .黄:风扇,j . Cai et al .,“建立猪Oct-4 promoter-driven EGFP记者猪的多能性干细胞,监测系统”细胞重新编程,13卷,不。2、93 - 98年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. s . Sugii y重击,w·t·尼尔森和r·m·埃文斯“Feeder-dependent feeder-independent iPS细胞派生从人类和小鼠脂肪干细胞,”自然的协议》第六卷,没有。3、346 - 358年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. j·汉娜,美国Markoulaki, p . Schorderet et al .,“直接重编程的终末分化成熟的B淋巴细胞多能性,”细胞,卷133,不。2、250 - 264年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. e . p . Papapetrou m . j . Tomishima s·m·钱伯斯et al .,“Oct4的化学计量和时间要求,Sox2 Klf4,和原癌基因表达人类iPSC诱导和分化,有效”美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷106,不。31日,第12764 - 12759页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. a . Martinez-Fernandez t·j·尼尔森,a . Terzic“核重编程策略调节分化诱导多能干细胞的潜力,”心血管转化研究杂志》上,4卷,不。2、131 - 137年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. n . Maki j·马丁森o .西村et al .,“表达谱在纽特镜头去分化再生表达序列标签所显示的,”分子的愿景》16卷,第78 - 72页,2010年。视图:谷歌学术搜索
40. b m·a·埃斯特万t . Wang秦et al .,“维生素C增强了代的老鼠和人类诱导多能干细胞,”细胞干细胞》第六卷,没有。1,第79 - 71页,2010。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. t·格拉夫和t·恩”,迫使细胞改变血统。”自然,卷462,不。7273年,第594 - 587页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. x元(w·李,叮,“小分子在细胞重新编程和分化,”药物研究进展卷,67年,第266 - 253页,2011年。视图:谷歌学术搜索
43. l·阿纳斯塔西娅·g·Pelissero、b . Venerando和g . Tettamanti”细胞重编程:期望和挑战在干细胞生物学和再生医学,化学”细胞死亡和分化,17卷,不。8,1230 - 1237年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
44. h·w . Li, r . Abujarour et al .,“代人为多能干细胞在缺乏外源Sox2,”干细胞,27卷,不。12日,第3000 - 2992页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. k Nagai, h Ishii:三好et al .,“长期文化精原gene-induced重组后引发激进的表型变异cholangiocellular癌细胞,”生物化学和生物物理研究通信,卷395,不。2、258 - 263年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. j·t·h . r . Scholer,”细胞fusion-induced重组。”分子生物学方法卷,636年,第190 - 179页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. x曰,m . Fujishiro m .丰田t . Akaike y Ito,“重编程体细胞融合引起的胚胎干细胞的使用使红血球凝聚日本病毒信封(HVJ-E)”生物化学和生物物理研究通信,卷394,不。4、1053 - 1057年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. a·e·鲍威尔·e·c·安德森,p·s·戴维斯et al .,“肠上皮细胞和巨噬细胞癌症之间融合背景下导致核重编程”癌症研究,卷71,不。4、1497 - 1505年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. r . s .微波激射器和r . a . DePinho“连接染色体,危机,癌症,”科学,卷297,不。5581年,第569 - 565页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
50. r·m·马里昂和m . a . Blasco“端粒和端粒酶在成人干细胞和多能胚胎干细胞,”实验医学和生物学的发展卷,695年,第131 - 118页,2010年。视图:谷歌学术搜索
51. s . t . Suhr e·a . Chang r·m·罗德里格斯et al .,“在人类细胞中端粒动态重组多能性”,《公共科学图书馆•综合》,4卷,不。12篇文章ID e8124 2009。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. d·埃伯哈德k . O ' neill z d·伯克和d .废话,“胰腺细胞的体外重组肝细胞,”分子生物学方法卷,636年,第292 - 285页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. c . Cobaleda“B细胞的重编程”,分子生物学方法卷,636年,第250 - 233页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
54. A . b . Mak z倪,j . A .宝石即使et al .,“慢病毒功能蛋白质组学的方法识别染色质重塑复合物重要的诱导多能性的,”分子和细胞蛋白质组学,9卷,不。5,811 - 823年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. h·康和美国卢武铉扩展接触trichostatin后激活改变基因的表达重要的核移植小鼠胚胎的早期发展,”兽医医学科学杂志》上,卷73,不。5,623 - 631年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
56. d . Huangfu k . Osafune r . Maehr et al .,“诱导多能干细胞主要人类成纤维细胞只有Oct4、Sox2”自然生物技术,26卷,不。11日,第1275 - 1269页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
57. 佐藤n, l·梅耶尔l . Skaltsounis·格林加德和a . h . Brivanlou”维护人类和小鼠胚胎干细胞多能性的通过激活Wnt信号的药理GSK-3-specific抑制剂,”自然医学,10卷,不。1,55 - 63、2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
58. h . Umehara t .木村,s Ohtsuka et al .,“高效的胚胎干细胞来源的抑制糖原合成酶激酶3,“干细胞,25卷,不。11日,第2711 - 2705页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
59. h . k .骨头,t·达s . Bartlett et al .,“GSK-3参与调节小鼠胚胎干细胞自我更新由一系列bisindolylmaleimides透露,“化学和生物学,16卷,不。1、15 -,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
60. w·李和s .叮”一代的小说老鼠和人类多能干细胞重编程和化学方法,”分子生物学方法卷,636年,第300 - 293页,2010年。视图:谷歌学术搜索
61. b m·西蒙·c·e·默多克和c t·斯科特,“多功能专利使黄金时间:一个新兴的景观的分析,“自然生物技术,28卷,不。6,557 - 559年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
62. b·l·m·霍根”行为的变化畸胎癌细胞体外培养,“自然,卷263,不。5573年,第137 - 136页,1976年。视图:谷歌学术搜索
63. a·j·莱文,c·a·芬利和p·w·希德“P53是一种肿瘤抑制基因,”细胞补充2卷。116年,S67-S69, 2004页。视图:谷歌学术搜索
64. a . Banito j·吉尔,“诱导多能干细胞和衰老:学习生物学改善技术,”EMBO报告,11卷,不。5,353 - 359年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
65. 公元戈德堡,c, d . a和e·伯恩斯坦“表观遗传学:景观成形,”细胞,卷128,不。4、635 - 638年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
66. j .铃木Jr . j . Therrien f . Filion et al .,“损失的甲基化段H19 DMD是与biallelic表达式和牛派生发展减少了体细胞核移植,”生物的繁殖,卷84,不。5,947 - 956年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
67. t·海j ., a . Jouneau l . Wang和周问:“在小鼠体细胞核移植胚胎多能性维护和改善治疗组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA,”细胞重新编程,13卷,不。1,47-56,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
68. a . Doi: h .公园,b .温家宝et al .,“微分组织和癌症特异性的甲基化CpG岛海岸区分人类诱导多能干细胞,胚胎干细胞和成纤维细胞,”自然遗传学第41卷。。12日,第1353 - 1350页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
69. a . Martinez-Fernandez t·j·尼尔森,a . Terzic“核重编程和多能性”,自然卷,441年,第1067 - 1061页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
70. a . Martinez-Fernandez t·j·纳尔逊池田y和a . Terzic”c-MYC-independent核重编程支持心原性的诱导多能干细胞的潜力,”心血管转化研究杂志》上,3卷,不。1,13-23,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
71. a . Gaspar-Maia a Alajem、大肠Meshorer和m . Ramalho-Santos“开放染色质在多能性和重组,”自然评论分子细胞生物学,12卷,不。1,36-47,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
72. t·j·纳尔逊·a . Martinez-Fernandez山田,池田y . c . Perez-Terzic和a . Terzic“诱导多能干细胞:进步到应用程序”,干细胞和克隆:进展和应用程序,3卷,不。1,29-37,2010页。视图:谷歌学术搜索
73. b . Tursun, t·帕特尔,p . Kratsios, o . Hobert“秀丽隐杆线虫的生殖细胞的直接转换成特定类型的神经元,”科学,卷331,不。6015年,第308 - 304页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
74. 洛杉矶波伊尔,即l .通m·f·科尔et al。”核心转录监管电路在人类胚胎干细胞,”细胞,卷122,不。6,947 - 956年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
75. 洛杉矶波伊尔,k .普拉斯j . Zeitlinger et al .,“Polycomb复合体抑制发育小鼠胚胎干细胞的监管机构,”自然,卷441,不。7091年,第353 - 349页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
76. m . Stadtfeld n . Maherali d·t·Breault和k . Hochedlinger”定义“诱导多能性”细胞重编程的分子基础在成纤维细胞在老鼠,”细胞干细胞,卷2,不。3、230 - 240年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
77. t . Aoi、k . Yae m .中川et al .,“一代的多能干细胞从成年小鼠肝脏和胃部细胞,”科学,卷321,不。5889年,第702 - 699页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
78. m . Stadtfeld k Brennand, k . Hochedlinger胰腺癌的“重新编程β细胞诱导多能干细胞”,当代生物学,18卷,不。12日,第894 - 890页,2008年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
79. d .唱歌和M.-P。Cosma”,重新编程细胞多能性的命运:决策的信号途径,”国际发育生物学杂志》上,54卷,不。11 - 12,1575 - 1587年,2011页。视图:谷歌学术搜索
80. ,a . Prigione和j•阿贾耶”调制的线粒体生物起源和生物能量学代谢体外和体内分化人类胚胎的“诱导多能性”细胞,”国际发育生物学杂志》上,54卷,不。11 - 12,1729 - 1741年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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