川陈皮素变弱通过激活PPAR病理性心肌梗死后的心脏重塑γ和PGC1α

文摘

基本原理。病理性心脏重构作为重要机制在心肌梗死(MI)的进展慢性心力衰竭(CHF)。川陈皮素(头),一个活跃的单体提取柑橘类水果的皮,据报道有有利影响心血管疾病。我们的研究旨在描述头的具体机制防止病理性心肌梗死后的心脏重构。材料和方法。C57BL / 6小鼠冠状动脉结扎处理以生成一个MI模型,其次是治疗3周与大人物(50毫克/公斤/天)或车辆(50毫克/公斤/天),有或没有的过氧物酶体proliferator-activated受体(PPARγγ)抑制剂T0070907(1毫克/公斤/天)。心脏功能(超声心动图、存活率、伊文思蓝和氯化三苯四唑染色法),纤维化(马森的三色的染色定量实时聚合酶链反应(存在)和免疫印迹(WB)),肥大(haematoxylin-eosin染色、麦芽凝集素染色和存在),和细胞凋亡(WB和末端转移酶的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法)进行了评估。低氧诱导细胞凋亡(TUNEL WB)和去甲肾上腺素- (PE)引起的病理性肥大(免疫荧光染色中存在)模型建立了小学新生大鼠心室细胞(NRVMs)。头的影响有或没有T0070907检查了PPAR的表达γ和PPARγ共激活剂1α(PGC1α世行在小鼠和NRVMs)。PPAR的潜在下游效应器γ进一步分析了世行在老鼠身上。结果。在小鼠心肌梗死之后,头干预增强心脏功能在三个主要维度病理性心脏重构,这反映在减少心脏纤维化,细胞凋亡和肥大代谢失调。头干预也减轻细胞凋亡和NRVMs肥大。头干预调节PPARγ和PGC1体内α和在体外。此外,PPARγ抑制剂废除了大人物的保护作用与病理性心脏重塑发展中MI瑞士法郎。PPAR的潜在下游效应器γ核转录因子红细胞两个相关因子2 (Nrf-2)和血红素加氧酶1 (HO-1)。结论。我们的研究结果表明,球形门柄减轻通过PPAR病理性心肌梗死后的心脏重构γ和PGC1αupregulation。

1。介绍

慢性心力衰竭(CHF)与高发病率和死亡率全球(1]。心肌梗死的最突出的原因是瑞士法郎(2]。虽然动脉再灌注通过经皮冠状动脉介入治疗(PCI)可以显著减少急性死亡率,心脏不良事件经常发生,幸存者易受病态心脏重构(3]。

病理性心肌梗死后的心脏重构基于瑞士法郎的发展代表了一个关键机制,涉及到三个主要途径4]。细胞损失途径与心肌细胞坏死和凋亡有关,失代偿性的心脏肥大通路是氧化应激和能量代谢异常引起,和纤维化通路被激活myofibroblasts体现出来和单核细胞浸润5]。暴露在心肌梗死后心肌细胞缺氧和缺血条件扰乱了Ca^{2 +}收缩压和舒张压稳定需要调节强度,导致线粒体损伤。由于心肌细胞的再生能力有限,心脏梗塞经常导致疤痕组织的发展,从而导致病理性心脏重构(6,7]。虽然心脏重塑的机制很容易理解,一些治疗靶点存在缓解心肌梗死后发生的病理性心脏重构;因此,新靶点的识别仍然是一个紧急的目标。

研究中药qiliqiangxin胶囊的影响揭示了通过PPAR cardiac-protective功能介导γ规定(8]。Citri reticulataePericarpium (CRP),组件的qiliqiangxin胶囊,抑制病理性心脏肥大引起的多种因素(9,10]。川陈皮素(头)是活性单体CRP隔绝,分子式C₂₁H₂₂O₈(化学结构如图1(一))。头被报道具有抗炎(11],凋亡[12],antineurotoxic [13)功能。在心血管系统中,头一直报道减弱不利心肌梗死后大鼠的心脏重构通过恢复自噬流量(14)和调节c-Jun n端激酶(物)15]。然而,研究主要集中在老鼠和大人物的潜在机制防止病理性心肌梗死后的心脏重构没有被充分研究。

使用草药数据库(16)(http://herb.ac.cn/)、过氧物酶体proliferator-activated受体(PPARs)是大人物的潜在目标。PPARs由PPARα,PPARβ/δ,PPARγ。的PPAR总科充当ligand-inducible转录因子调节各种生物过程(17]。其中,PPARγ结合PPARγ共激活剂1α(PGC1α),形成一个复杂的激活多个转录因子和调节几位和心血管疾病有关的新陈代谢过程18]。研究发现,ligand-activated PPARγ减少炎症反应在动脉损伤后内皮细胞(19)和变弱心脏重构在老鼠的心脏压力过载(20.]。相比之下,PPAR的差别,对这些基因γ导致心脏衰竭(21]。因此,它是必要的调查与大人物mi的干预期,以及其下游效应器。

在目前的研究中,我们观察到,头可以减弱病理性心肌梗死后的心脏重构通过upregulation PPARγ和PGC1α。丰富的在活的有机体内和在体外实验证据表明,大人物可能未来临床使用的应用程序。

2。材料和方法

2.1。动物的准备

雄性C57BL / 6小鼠(8 - 10周,g - 26)从北京获得至关重要的实验动物技术公司。所有的老鼠都保持在一个温度( )和湿度( )动物中心12 h光明和12 h黑暗循环下特定的无菌(SPF)条件。

所有实验过程在本研究伦理委员会批准的南京医科大学(iacuc - 1803016)和依法进行指导的实验室动物发表的美国国家卫生院(NIH没有出版。85 - 23,1996年修订)。

2.2。建立心肌梗死模型

与3%戊巴比妥钠小鼠腹腔麻醉和固定在仰卧位进行气管切开术。第35 - 37体温维持在一个正常范围的°C,和老鼠在每分钟120中风使用人工通风交织小动物呼吸机(视觉声波,加拿大)。横向切口是在第三,第四肋间隙暴露心脏。MI组,左冠状动脉前降(小伙子)结扎2毫米从左心耳的使用以丝绸缝合。下面的心肌结扎脸色变得苍白,局部心肌运动减弱,表明成功建立心肌梗死模型。虚假的操作组,我们穿过丝下童子没有进行结扎。手术后,老鼠分配在一个绝缘垫自然觉醒。

2.3。在活的有机体内实验设计

头是购自南京曹本有限公司(中国南京)及其纯度> 98%,由高效液相色谱分析。头在生理盐水溶解含0.05%渐变- 80(σ,美国)。的PPARγ抑制剂(T0070907)收购Selleck化学品(美国圣路易斯)和溶解在二甲亚砜。

评估anti-CHF MI后大人物的保护功能,39实验小鼠随机分为四组( ,分别为8、12和12):假+车辆,假+头,MI +车辆,MI +头。MI手术后三天,生理盐水或头(50毫克/公斤/天,剂量是如前所述22])是管理intragastrically 3周每天一次。

头是否可以保护心脏功能评估急性心肌梗死(AMI)后,12小鼠随机分为两组( 每个):心肌梗死+车辆和心肌梗死+头。生理盐水或头(50毫克/公斤/天)被填喂法管理老鼠开始后立即手术,3天每天一次。

探索是否头施加cardiac-protective影响后通过PPAR MIγupregulation,另一个在活的有机体内实验进行,涉及42实验小鼠被随机分为四组( ,分别为12、10和12):假+车辆,MI +车辆,MI +头,MI +头+ PPARγ抑制剂。车辆或头管理如上所述,PPARγ抑制剂是腹腔内(1毫克/公斤/天)注入小鼠3周每天一次。

在整个实验过程中,条件(生存或死亡)的老鼠记录,生成和存活曲线,进一步说明了存活率。

2.4。超声心动图

执行经胸廓的超声心动图评估左心室功能使用Vevo 2100(视觉超音速Inc .,多伦多,安大略省,加拿大)配备了35 MHz换能器在老鼠牺牲。与1.5% - -2%异氟烷麻醉诱导后,二维辆模型观察图像的水平midpapillary肌肉,和心脏参数记录,包括左心室射血分数(LVEF)、左心室部分缩短(LVFS),左心室内部直径结束舒张(LVIDd)和左心室内部直径收缩(LVIDs)。

2.5。心收获

超声心动图后,老鼠的身体重量测量,老鼠牺牲。心中灌注了磷酸盐(PBS)胸后彻底暴露,和心灵收获的排斥心包,胸腺,相邻器官。心被重,重量记录。然后用4%多聚甲醛溶液固定或心在液态氮冷冻。

2.6。苏木精和伊红染色(他)和麦胚凝集素(WGA)染色

收获的心和4%多聚甲醛固定的解决方案。石蜡包埋后,心被切成5μ米厚的部分。评估肌细胞大小、幻灯片被苏木精和伊红染色(他)和fluorescein-conjugated麦胚凝集素(WGA)。他和WGA的幻灯片数字化扫描,观察使用CaseViewer软件。至少10个领域的观点被随机捕获每个HE-stained和WGA-stained部分,和ImageJ软件被用来计算心肌横截面积和评估和心肌细胞大小形态变化。

2.7。马森的三色的(马森)染色

马森的三色的(马森)染色进行测量心脏纤维化。心脏的peri-infarct区域评估马森染色。染色后,幻灯片进行扫描和Image-Pro + 6.0(美国马里兰州)软件用于计算心脏纤维化的程度(纤维化区域心肌总面积的比值)。

2.8。伊文思蓝和氯化三苯四唑(TTC)染色

检测头的影响AMI,老鼠牺牲了3天完成后大人物干预,和1毫升伊文思蓝(10毫克/毫升,溶解在PBS,σ,美国)是慢慢地注入到腹主动脉。注射后,心里立即删除,梗塞大小决定与TTC染色(10毫克/毫升,溶解在PBS,σ,美国)。梗塞面积的比值(正)区域风险(AAR)和AAR比左心室(LV)面积计算使用ImageJ (NIH)基于五个部分在整个心。

2.9。新生大鼠心室肌细胞(NRVM)隔离

新生儿Sprague-Dawley老鼠来自南京医科大学实验动物中心的伦理审批。新生大鼠心室单核细胞(NRVMs)从左心室通过消化分离胰蛋白酶、胶原酶II型,其次是Percoll离心如前所述[23]。NRVMs被镀到gelatine-coated文化菜high-glucose杜尔贝科修改鹰的介质(DMEM Gibco,帕萨迪纳市、钙、美国)和10%的马血清(HS Gibco,卡尔斯巴德,CA,美国)和5%胎牛血清(美国的边后卫,Gibco,卡尔斯巴德,CA) 24 h。

2.10。在体外实验设计

调查的影响减轻的大人物病理性心脏肥大,NRVM介质被替换为无血清DMEM饿死NRVMs 12 h。NRVMs随后处理苯肾上腺素(PE、100μM;美国密尔沃基σ)或头(20μ米)48 h,其次是收获。进一步探索是否PPARγ介导的保护作用,对心脏肥大引起的PE头在体外NRVMs被分为以下组:PE、PE +头、PE +头+ PPARγ抑制剂(T0070907), PE +头+ PPARγ受体激动剂(罗格列酮)。试剂剂量如下:100μM PE, 20μ头,1μM T0070907, 1μ罗格列酮。

检查头对细胞凋亡的影响,NRVMs被分为四组:控制,大人物,缺氧,缺氧+头。NRVMs在所有组在血清DMEM培养8 h。缺氧和缺氧+头组治疗缺血性缓冲区,和模拟缺血进行调湿细胞培养孵化器(5%啊₂,95%的公司₂8小时,37°C)。执行功能实验得失,PPARγ抑制剂和兴奋剂,组划分如下:缺氧,缺氧+头,缺氧+头+ PPARγ抑制剂,缺氧+头+ PPARγ受体激动剂。NRVMs收获结束时所有的实验。

2.11。免疫荧光染色

培养结束时,我们放弃了介质和三次洗NRVMs PBS (1×, pH值7.2 - -7.4),其次是在4%多聚甲醛固定20分钟。细胞然后permeabilised 0.2% Triton x - 100在PBS 30分钟和屏蔽10%在PBS山羊血清1 h。NRVMs孵化了一只老鼠α辅肌动蛋白单克隆抗体(Sigma-Aldrich 1: 200年,圣路易斯,密苏里州,美国)在一夜之间在4°C。三洗后用PBS, NRVMs孵化与FITC-labelled二级免疫球蛋白抗体(1:200年,杰克逊,美国)37°C在黑暗中2 h。最后,4 ,Sigma-Aldrich 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI 1: 100年,圣路易斯,美国)用于标签细胞核。使用荧光显微镜细胞图像捕获(卡尔蔡司、从、德国)。,每组至少1000心肌细胞数,细胞表面区域使用ImageJ软件进行了分析。

2.12。TUNEL染色

终端deoxynucleotide转移酶dUTP缺口末端标记(TUNEL)试验用于检测心肌细胞凋亡率。NRVMs和peri-infarct心脏组织准备作为免疫荧光染色的描述。与二次抗体标签后,TUNEL分析工具包(美国Promega)凋亡细胞核染色,根据制造商的指示。

2.13。定量逆转录聚合酶链反应(存在)

检测相对mRNA表达水平在心脏组织和NRVMs,试剂盒试剂用于提取总RNA,根据制造商的协议(豆类、日本)。反转录进行使用500 ng总RNA合成互补DNA(互补)使用iScript™互补脱氧核糖核酸合成装备(Bio-Rad、大力神、钙、美国)。使用适当的比例混合SYBR绿色qPCR大师的工具包(Bio-Rad、大力神、钙、美国),cDNA、去离子水,abi - 7900实时PCR检测系统(美国7900 ht,应用生物系统公司,CA)被用来量化mRNA表达,这是正常的看家基因3 -磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)使用比较量化的方法( )。所有的引物用于放大补充表中列出1。

2.14。免疫印迹(WB)

从左心室组织总蛋白或培养NRVMs收集使用radioimmunoprecipitation化验(里帕)裂解缓冲(P0013C Beyotime,中国上海)补充了1毫米phenylmethylsulfonyl氟化物(PMSF、ST505 Beyotime,上海,中国。同等数量的蛋白质分离10%钠十二烷基sulfate-polyacrylamide凝胶电泳(sds - page)和转移到聚乙二烯二氟化物薄膜(PVDF)(美国微孔,Billerica的)。后阻断特异性的结合位点与5%的脱脂奶粉干2 h在室温条件下,膜是孵化主要抗体一夜之间在4°C。与二次孵化后抗体(室温下2小时),蛋白质带的强度得到了使用进行软件(美国Bio-Rad)和分析利用ImageJ软件。本研究中使用的主要抗体列出如下:proliferator-activated受体(PPARγγ1:1000年,Proteintech集团,武汉,中国),PPARγ共激活剂1α(PGC1α1:1000年,罗福斯生物制剂,利特尔顿,科罗拉多州,美国),b细胞淋巴瘤2 (bcl - 2, 1: 1000年,细胞信号技术,波士顿,麻萨诸塞州,美国),Bcl-2-associated X蛋白(伯灵顿,1:1000年,细胞信号技术,波士顿,麻萨诸塞州,美国),1型胶原蛋白(胶原蛋白1,1:1000年,Proteintech集团,武汉,中国),α光滑的肌肉肌动蛋白(αsma, 1: 1000年,Proteintech集团,武汉,中国),裂解caspase-3 (CC3 1: 1000年,细胞信号技术,波士顿,麻萨诸塞州,美国),核转录因子红细胞两个相关因子2 (Abcam Nrf-2, 1: 1000年,剑桥,英国),血红素加氧酶1 (Abcam HO-1, 1: 1000年,剑桥,英国),β微管蛋白(1:1000,Bioworld技术,明尼苏达州,美国),和3 -磷酸甘油醛脱氢酶抗体(GAPDH 1: 1000年,康晨、上海、中国)。

2.15。统计分析

所有数据都表示为 (SD)。所有使用GraphPad Prism 6.0软件进行统计分析。统计比较在多个组检查使用单向方差分析(方差分析)其次是Bonferroni事后测试,和两组之间的差异进行了分析使用一个独立的样本 - - - - - -测试。的差异 被认为是显著的。

3所示。结果

3.1。头MI后防止瑞士法郎

确定头的保护作用与瑞士法郎MI后,我们建立了一个MI小鼠模型。头或车辆intragastrically注射小鼠3周,术后3天开始。老鼠的数量的虚假+车辆,假+头,MI +车辆,和MI +头组7,8日,12日和12日,分别在实验的开始,3周后,数字7,8,6和8位。六老鼠牺牲MI +汽车集团和四个牺牲在心肌梗死+头组。每个组的生存率分别为100%,100%,50%,和66.7%,显示头增加了MI(图后小鼠存活率在瑞士法郎1 (b))。如图所示,超声心动图与虚假的集团相比,LVEF和LVFS MI组明显减少,和LVIDd LVIDs被放大。头后干预,显著改善心功能和心脏参数(数字1 (c)和1 (d))。此外,心脏重量/体重比增加心肌梗死组的价格相比头干预组,确认失代偿性肥大后缓解头干预(图1 (e))。

心肌梗死后建立小鼠模型、头或车辆立即被管理和持续了3天。伊文思蓝和TTC染色进行评估和缺血性梗塞面积。结果表明正/ AAR和AAR / LV比率没有显著不同心肌梗死+车辆和心肌梗死+头组( ),表明大人物干预后未能防止急性心衰AMI(图1 (f))。

3.2。头,缓解了病理性心肌梗死后的心脏重构

马森染色peri-infarct区域的心脏的显示率显著增加纤维化MI老鼠,这是减少头管理(图2(一个))。免疫印迹(WB)被用来评估古典纤维化标志物的蛋白质含量,这表明我和胶原蛋白α光滑的肌肉肌动蛋白(αsma)在心肌梗死后心脏组织,增加后下降头干预(图2 (b))。同样,第三我胶原蛋白和胶原蛋白的表达在mRNA水平蛋白质(图显示相同的趋势2 (c))。这些结果表明,头可以减轻心肌梗死后心肌纤维化。

古典病理性心脏肥大生物标记,包括心房利钠肽(ANP)和脑利钠肽(BNP),调节心肌梗死组和减少在大人物干预组(图2 (d))。他和编剧协会的染色结果表明,心肌细胞的横截面积较大的MI组,这些大人物后缩小政府(图2 (e))。这些结果进一步表明,大人物可能缓解失代偿性的心肌梗死后心脏肥大。

世行是用来检测凋亡蛋白表达的变化。伯灵顿/ Bcl2比率和裂解的表达caspase-3显著增加在心肌梗死心脏组织,可以减少头干预(图2 (f))。此外,apoptosis-positive MI组心肌细胞率升高与虚假但相比下降头干预3周后,TUNEL染色(图显示2 (g))。总的来说,这些结果表明,球形门柄函数作为心脏的负调节细胞凋亡。

3.3。头变弱诱导细胞凋亡,在NRVMs PE-Induced心脏肥大

评价函数NRVMs的大人物,我们首先构造一个低氧诱导细胞凋亡模型。凋亡的比例生物标志物伯灵顿/ Bcl2缺氧组明显升高,而头干预减少的比率(图3(一个))。TUNEL染色法被用来专门评估凋亡NRVMs。缺氧后,TUNEL-positive率增加了5%,这可能被大人物干预(图减半3 (b))。这些结果进一步表明,大人物减轻低氧诱导细胞凋亡。

评价函数头的病理性心脏肥大,我们用体育来构造一个NRVM肥大模型。计算细胞大小使用免疫荧光染色后,扩大体育组的细胞大小头管理局(图后明显下降3 (c))。的MI-induced upregulation ANP、BNP,由存在决定的,与头减少干预(图3 (d))。这些结果表明,球形门柄改善PE-induced病理性心脏肥大。

3.4。头激活PPARγ和PGC1α体内和体外

改变PPARγ和PGC1α表达式被发现在能量代谢的调节中起到至关重要的作用。PPAR的表达水平γ和PGC1α被世界银行检查,表明心脏组织中的表达水平(图4(一))和NRVMs(图4 (b))是一致的。心脏受损组织或NRVMs导致PPARγ和PGC1αdownregulation,而头干预可以扭转这些趋势,PPAR的确认γ和PGC1α可能参与了大人物的具体机制防止病理性心肌梗死后的心脏重构。

3.5。PPARγ抑制剂(T0070907)削弱了头对低氧诱导细胞凋亡的保护作用和PE-Induced NRVMs病理性心脏肥大

PPAR的差别,对这些γ和PGC1αMI后可以逆转的大人物。因此,我们研究是否PPARγ监管是必不可少的大人物的保护作用与病理性心脏重塑MI后执行功能得失NRVMs实验使用PPARγ抑制剂和兴奋剂。结果表明,调节PPAR的表情γ和PGC1α干预组中表达下调后PPAR的管理γ抑制剂检测到白平衡(图5(一个))。减少NOB-induced apoptotic-related蛋白质之间的比例,伯灵顿/ Bcl2, PPAR的出现逆转γ抑制剂;然而,受体激动剂未能提高细胞凋亡的减少,和伯灵顿/ Bcl2大人物之间的比率类似干预和受体激动剂组(图5 (b))。TUNEL染色法被用来计算NRVM细胞凋亡率,这表明PPARγ抑制剂调节TUNEL-positive率与干预组相比。相比之下,没有区别观察之间的干预和受体激动剂组(图5 (c))。当我们重复病理性肥大实验,减少细胞大小(图5 (d))和ANP、BNP水平(图表达下调表达5 (e))观察头干预后被PPAR的出现逆转γ抑制剂。这些结果表明,PPARγ抑制剂消除头的保护作用与细胞凋亡和心脏肥大在体外。

3.6。PPARγ抑制剂(T0070907)逆转大人物在瑞士法郎MI的保护作用

基于的结果在体外实验中,我们进一步研究了PPAR的功能γ抑制剂在老鼠身上。生理盐水或头被填喂法管理MI感应手术后的第三天开始,持续3周。的PPARγ抑制剂是每天腹腔注射一次,持续了3个星期。老鼠抑制剂组经历了更高的死亡率比大人物干预组基于存活曲线(图6(一))。超声心动图显示心脏功能恶化抑制剂组,包括恶化LVEF和LVFS扩张左心室直径(数字6 (b)和6 (c))。失代偿头引起的心肌肥大的改进被PPAR消除γ抑制剂,导致一个增强HW / BW比率(图6 (d))。

3.7。PPARγ至关重要的保护作用,对心肌梗死后的心脏重构头

马森peri-infarct面积心脏的染色显示增加纤维化率抑制剂组与干预组(图7(一))和生物标志物的表达增加,包括我和胶原蛋白αsma(图7 (b))。第三次我胶原蛋白和胶原蛋白的mRNA水平(图7 (c))保持一致,这表明PPARγ抑制剂可能损害保护作用对纤维化的大人物。大人物的有利影响与失代偿性的心脏肥大PPAR也逆转了γ抑制剂,如增强ANP、BNP表达评估中存在(图7 (d))和心肌细胞的横截面积增大了他和WGA的染色(图7 (e))。伯灵顿/ Bcl2比率和裂解caspase-3 PPAR表达水平都是调节γ抑制剂组(图7 (f)),减少apoptotic-positive心肌细胞中观察到的大人物干预组被PPAR调节γ抑制剂注入(图7 (g)),确认PPARγ抑制剂逆转大人物对细胞凋亡的保护作用。世行分析显示,PPAR的表达γ和PGC1α表达下调的PPAR吗γ抑制剂组与干预组头(图7 (h))。消除对病理NOB-mediated保护作用的PPAR心肌梗死后的心脏重构γ抑制剂建议PPARγ和PGC1α的保护作用是不可或缺的大人物对病理性心肌梗死后的心脏重构。此外,世行分析表明,Nrf-2的表达和HO-1 MI后降低,增加头干预后,而PPARγ抑制剂注入逆转这个upregulation(图7(我))。因此,我们推测Nrf-2 / HO-1可能是潜在的PPAR下游效应器γ在头的保护机制减轻病理性心肌梗死后的心脏重构。

4所示。讨论

最近减轻病态心脏重构策略主要集中在血管紧张素系统抑制剂,交感神经系统,neprilysin [24]。然而,病理性心肌梗死后的心脏重构的发病率仍然很高;因此,识别潜在的治疗目标是至关重要的(25]。

川陈皮素(头)被认为是主要活性成分提取c反应蛋白。最近的研究阐明大人物在心血管系统的保护作用。头变弱心脏功能障碍、氧化应激和炎症在糖尿病心肌病模型链脲霉素引起的(22,26]。在这项研究中,我们发现头防止瑞士法郎和病理性心肌梗死后小鼠的心脏重构。头也改善缺氧引起的细胞凋亡和NRVMs肥大和PE,分别。

病理性心脏重塑的机制是复杂的,和心肌纤维化,细胞凋亡,失代偿性肥大有重要的影响27]。与神经内分泌因子或生长因子刺激心肌细胞蛋白质合成增加,导致心肌肥大(28,29日]。同时,增加心肌细胞蛋白表达导致ER应激,代表细胞凋亡的关键调节器(30.]。此外,心肌成纤维细胞增殖是通过转化生长因子诱导的β(TGF -β)通路、肾素血管紧张素醛固酮系统(老城)overactivation和其他途径,引发的持续释放profibrotic因素(31日,32]。

在缺血性心肌病的早期阶段,心肌能量代谢是不够的。PPARγ一起,共激活剂PGC1α,是一个著名的心脏能量体内平衡的调节器18]。研究表明,PGC1α表达水平与肥胖、糖尿病、脂质代谢紊乱和心血管疾病(33]。PPARγ配体依赖性转录因子是一个属于PPAR核受体家族,调节脂质和糖代谢,免疫炎症、细胞增殖和分化34,35]。在心血管疾病中,PPAR的激活γ减少心肌纤维化(36和细胞凋亡37),改善心肌缺血再灌注损伤(38,抑制心肌肥大(39]。此外,PPARγ活动的监管具有重要的临床应用,PPARγ受体激动剂使用那些药物(40,41]。然而,是否PPARγ和PGC1α调解大人物的保护作用与心肌梗死后的心脏重构仍不清楚。在我们的研究中,我们证明了PPARγ和PGC1α在MI和调节头后干预后表达下调。功能性得失实验进一步表明,PPARγ抑制可能会阻止头的保护作用与病理性心脏重塑。

此外,验证Nrf-2的表达和HO-1 mi后小鼠的心脏组织中白平衡,我们观察到的表达PPAR Nrf-2和HO-1显示相同的趋势γ和PGC1α头的保护过程。Nrf-2是一个关键的转录因子,通过抑制氧化应激调节心脏内稳态。新兴证据证实其重要的作用在调节缺血性心脏病、心力衰竭、心肌梗塞、心房纤颤、心肌炎(42]。HO-1已被广泛公认为Nrf-2的下游,在细胞中扮演着重要角色适应压力通过抗氧化、抗凋亡、抗炎作用的代谢产物(43,44]。陈等人。45防止急性心肌infarction-induced白藜芦醇苷)发现浸膏得心脏损害Nrf-2 / HO-1激活的信号。进一步地,Polvani介绍等。46总结,PPARγ可以激活Nrf-2直接或间接通过一个上游的路线。基于这一理论,吴et al。47)发现,过度的高机动组蛋白AT-hook 2 (HMGA2)改善心脏重构,以应对压力通过激活PPAR过载γ/ Nrf2信号通路。因此,我们推测,大人物的antipathological心脏重构效果通过激活PPAR MI后γ和PGC1α;PPAR的潜在下游效应器γ在保护过程中可以Nrf-2 / HO-1。

然而,这项研究有一些局限性。首先,PPAR的使用γ基因敲除小鼠仍然需要进一步验证我们的发现。第二,尽管PPARγ和PGC1α被认为是潜在的目标头的保护作用与病理性心肌梗死后的心脏重构和我们最初验证Nrf2 / HO-1可能的潜在下游效应器PPAR吗γ在保护过程中,它们之间的交互和其他下游效应器是否存在值得进一步调查。

5。结论

总之,我们的研究证明了大人物的保护作用缓和的病理性心脏重塑跨三个维度(心脏纤维化、细胞凋亡和失代偿性肥大)MI后老鼠。此外,头在NRVMs干预减少细胞凋亡和肥大。这种保护作用是由PPAR的upregulationγ和PGC1α。功能性得失PPAR实验显示γ抑制剂废除了保护头的事件在活的有机体内和在体外。此外,Nrf-2 / HO-1可能作为潜在的PPAR下游效应器γ在保护的过程。我们的研究表明,头可以代表一个潜在的临床治疗治疗病理性心肌梗死后的心脏重构的减轻。

缩写

头:	川陈皮素
小姐:	心肌梗死
瑞士法郎:	慢性心脏衰竭
英孚:	射血分数
FS:	部分缩短
LVIDd:	左心室内部直径心脏舒张期结束
LVIDs:	左心室内部直径收缩
TTC):	氯化三苯基四唑
ANP:	利钠肽A型
法国巴黎:	利钠肽B
NRVMs:	新生大鼠心室心肌细胞
体育:	苯肾上腺素
TUNEL:	终端原位dUTP-biotin尼克结束标签
PPARγ:	过氧物酶体proliferator-activated受体γ
PGC1α:	PPARγ共激活剂1α。

数据可用性

使用的数据来支持我们的研究的结果可从co-first作者Yufei周新利Ting阴和相应的作者李在合理的请求。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

新利李、张海丰和Hongcai商负责概念和设计。新利李和张海丰负责行政支持。周Yufei Ting阴、施Mengsha和Iokfai Cheang负责在活的有机体内实验建设。Mengli陈、吴小东凯王,《李负责在体外实验建设。所有的作者都是负责数据分析和解释。所有作者负责手稿写作。Iokfai Cheang负责编辑的语言。所有作者给了手稿的最终批准。尹Yufei周和Ting同样这项工作。

确认

这项研究得到了国家自然科学基金资助的中国(81730106和81670347张新利李,81770396海丰)。

补充材料

补充表1:在我们的研究中使用的引物列表。图形文摘:川陈皮素变弱通过激活PPAR病理性心肌梗死后的心脏重塑γ和PGC1α。(补充材料)

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