在上述论文中,PPAR的表达γ错误的决定是基于量化的50 kD乐队在西方的屁股。这乐队与被认为是一个积极的控制带在整个U937细胞提取、控制试剂供应商推荐的主要抗体,sc - 7196(圣克鲁斯生物技术,圣克鲁斯,CA)。基于最近的信息被工头et al。1),很明显,这个乐队不是PPARγ但是是一个非特异性免疫反应性的蛋白质检测到sc - 7196。这种特异性的蛋白质被大量发现sc - 7196 U937和COS-1细胞以及所有人类胎儿蛋白样品。免疫沉淀反应COS-1细胞溶解产物使用agarose-conjugated sc - 7196导致一乐队Coomassie中凝胶。这个乐队受到消化、肽提取、使用MALDI-MSMS和序列分析,蛋白质被确认为细胞质肌动蛋白与决定性的分数(人类SwissProt数据库,60%的蛋白质覆盖使用得分最高的15肽组和两个得分较低,但可接受的肽)。

一个特定的PPAR的乐队γ(人类PPAR分子量计算γ1 = 54.55 kD)被发现在我们的西方印迹进行新的实验在人类PPAR体外翻译γ1(由j·彼得斯,宾夕法尼亚州立大学)与人类的胎儿组织溶解产物(图1)。这些实验还包括COS-1细胞溶解产物是一种消极控制和U937细胞溶解产物。胎儿组织的西方的屁股都重新分析使用~ 55 kD乐队与人类PPAR体外翻译γ1。在此基础上再分析,PPAR的表达γ蛋白(c)所示的数字1 - 9图所取代2。的数据总结表1中描述的上述论文关于PPAR的变化γ蛋白表达与胎儿年龄是表所取代1。

图1

免疫印迹显示COS-1细胞溶解产物条带模式的比较,U937细胞溶解产物,人类PPAR体外翻译γ1,组织溶解产物从人类胎儿胃样品。~ 55 kD人类PPAR的乐队γ1和相应的乐队在胃组织中溶解产物标有星号(*)。非特异性,细胞质肌动蛋白乐队使用箭头标记。

(一)

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(h)

(我)

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图2

PPARγ蛋白表达是在胎儿年龄范围为每个组织。免疫印迹密度规范化glyceraldehyde-3-phophate脱氢酶(GAPDH)。如果只有一个样本用于一个特定的年龄,然后一个误差项无法计算和SEM栏所示。随着年龄的增长回归分析评估变化。虚线是95%置信区间。

作者后悔这意想不到的错误。澄清的初级抗体的识别模式应该有价值的调查检测PPAR感兴趣γ蛋白质。