寡肽的抗氧化机制(FWKVV和FMPLH)的水解肌Miiuy HUVECs喊冤者对抗氧化损伤

文摘

在这个工作中,生物活性寡肽的抗氧化机制(FWKVV和FMPLH)蛋白水解物的miiuy喊冤者肌肉对H₂O₂破坏人类脐静脉内皮细胞研究系统(通过传代形成细胞。这项发现证明了HUVEC可行性处理十抗氧化肽(M1 M10)为100.0μM 24 h相比没有明显影响与正常组( )。此外,FWKVV和FMPLH为100.0μ米可以明显提高异常( 和 )的oxidative-damaged HUVECs H₂O₂与模型组相比 )( )。结果表明,FWKVV和FMPLH起到了保护功能通过提高抗氧化酶水平包括超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(氧化酶)和减少活性氧的水平(ROS),丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)在oxidative-damaged HUVECs剂量依赖性的方式。此外,彗星试验表明FWKVV FMPLH可以剂量依赖性保护脱氧核糖核酸(DNA)从HUVEC的氧化损伤模型。这些结果表明,抗氧化剂五肽(FWKVV和FMPLH)可以作为潜在的抗氧化添加剂应用于食品,药品,保健品。

1。介绍

生物活性肽(BPs)生产从食物资源是短的氨基酸序列与2到20残留,不活跃的原蛋白质的序列(1- - - - - -3]。一般来说,BPs被蛋白酶水解解放在食品加工或胃肠道消化体内(4,5]。基于类型的氨基酸序列,和空间结构,基点可以有效地执行多种功能,如抗癌、抗氧化剂,血管紧张素转换酶(ACE)抑制、免疫调节、抗血栓形成的hypocholesterolemic、抗菌、降血压药、降血脂药活动(2,6,7),他们的有益的功能,特别是在高营养价值、健康促进、和慢性疾病辅助治疗和预防,日益被[4,8]。

抗氧化肽(APs)是最受欢迎的类型的基点和孤立的从动物,植物,微生物(9- - - - - -11]。刘等人准备抗氧化肽分数榛子加工的副产品,是由DWDPK、ETTL, ADGF, AGGF AWDPE, SGAF,显示高的抗氧化和保护能力对血管紧张素(Ang)从而氧化剂破坏移植的超氧化物歧化酶(SOD)水平和血红素oxygenase-1 (HO-1)和表达下调的黄嘌呤oxidase-1 (XO-1)来控制生成活性氧(ROS)在人类脐静脉内皮细胞(HUVECs) [12]。抗氧化肽YD1芽孢杆菌amyloliquefaciens平均分子量(MW) 1.0∼kDa会强烈降低活性氧和一氧化氮(NO)水平和提高抗氧化酶的水平提高的转录和转译能力NF-E2-related因子2 (Nrf-2)小鼠巨噬细胞(原始264.7)(13]。核桃EVSGPGLSPN显示高保护PC12细胞对H₂O₂通过控制核转录因子kappa-B使得神经毒性(NF -κB) /半胱天冬酶途径和提高抗氧化酶的活性,包括谷胱甘肽过氧化物酶(氧化酶),SOD、过氧化氢酶(CAT) (14]。

目前,蛋白玉米胚芽蛋白酶解物和基点已经准备从繁杂的加工副产品食用海洋生物,如软体动物,鱼,和海藻,其中许多重大活动(2,15- - - - - -17]。锅等人发现,四个寡肽(冲程体积,IEPH、LEEEE IEEEQ)从红黄貂鱼软骨的蛋白水解物表现出强烈的脂质过氧化抑制活动,铁^{2 +}螯合能力,减少权力,和自由基清除活性7]。哦等人的研究表明,蓝贻贝α胰凝乳蛋白酶水解物(BMCH)显示高自由基清除活性和抑制铜的活动^{2 +}调节低密度脂蛋白(LDL)氧化。此外,BMCH可以改善的可行性HUVECs和降低ROS生成通过p53的表达下调基因表达和caspase-3,以及减少的比率b细胞淋巴瘤2 - (bcl - 2 -)相关的X(伯灵顿)/ bcl - 2 (18]。此外,YPPAK PIIVYWK、TTANIEDRR FSVVPSPK从蓝色水解贻贝表现出很强的自由基清除活性,和PIIVYWK FSVVPSPK可以激活HO-1基因表达发挥王亚南效应(15,19]。陈和侯报道,太平洋鳕鱼水解明胶可以保护皮肤由紫外线(UV)辐射造成的损害,因为明胶水解物能抑制内源性antioxidases的减少和抑制促炎细胞因子的表达和NF -κB (20.]。这些研究证实了APs可以作为抗氧化剂代理抑制与氧化应激相关的影响在食品和生物通过提高内源性抗氧化酶水平防止或修复氧化过程中产生的活性氧(9,15]。此外,这些APs表明优良性能包括容易吸收,低兆瓦,更少有毒或具有副作用少,成为健康产品的优质原料和食品加工/保护产业[21,22]。

在我们以前的工作,十个抗氧化肽(M1 M10)已经准备从木瓜蛋白酶水解物miiuy喊冤者肌肉和他们的氨基酸序列测定YASVV (M1), NFWWP (M2), FWKVV (M3), TWKVV (M4) FMPLH (M5) YFLWP (M6) VIAPW (M7) WVWWW (M8) MWKVW (M9)和IRWWW (M10) [3]。,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)可以极大地控制脂质过氧化和显示强大的还原能力和自由基清除能力。因此,这项工作的目的是评估FWKVV的保护功能(M3)和FMPLH (M5)对过氧化氢- HUVECs (H₂O₂-)诱导氧化损伤和照亮他们的保护机制。

2。材料和方法

2.1。试剂

HUVECs类型文化的细胞库买来收藏的中国科学院(中国上海)。Bicinchoninic酸(BCA),杜尔贝科修改鹰的介质(DMEM)、赫斯特33342年,溴化乙锭(EB)、磷酸盐(PBS, pH值7.2)、甘油、溴酚蓝、乙酰半胱氨酸(NAC)、谷酰胺,3 - (4 5-dimethylthiazol-2-y1) 2, 5-diphenyltetrazolium溴化(MTT)和二甲亚砜(DMSO)从Sigma-Aldrich购买(上海)贸易有限公司(中国)。十个抗氧化肽(M1-M10)是合成多肽在中国有限公司(苏州、中国),和纯度超过98% ( )。

2.2。文化和HUVECs的可行性分析

HUVECs和细胞培养法的可行性分析进行了按照前面的方法,Cai et al。23)和Lim et al。24]。MTT测定三次被复制,应用于确定HUVECs的可行性。总之,基底HUVECs孵化在24小时的96孔板。之后,基底HUVECs示例解决方案中培养了100的浓度μm . 12 h后,井与PBS冲洗两次和MTT添加到井最终浓度为0.5毫克/毫升。孵化后4 h,甲瓒晶体形成的活跃细胞,添加到150年μL (DMSO和总和。最后,细胞生存能力是决定根据吸光度在空白对照组(570海里 )和样本组( )由以下公式:

2.3。保护FWKVV (M3)和FMPLH (M5) HUVECs的氧化损伤模型

HUVECs的氧化损伤模型,建立了符合描述的方法由Cai et al。23]。培养24小时后,HUVEC的上层清液井是吸气。随后,H₂O₂添加和其最终浓度分别达到100,200,300,400,500毫米。24小时后,HUVEC的可行性每个测量三次。此外,H₂O₂浓度诱导细胞生存能力;约50%被选建立HUVECs的氧化损伤模型。

建立后的氧化损伤模型优化下HUVECs H₂O₂条件下,肽样品最终浓度为10.0,50.0和100.0μg / mL被添加到DMEM和总和。培养24小时后,被抹去了HUVEC的上层清液井。之后,100年μL多肽样品的浓度在保护团体。8 h后,肽样本清理和h₂O₂在给定的浓度是模型和HUVECs肽样本组和治疗24 h。100年μL (NAC(1.5毫米)在100年的地方使用μL(肽样本阳性组中。

2.4。的影响FWKVV (M3)和FMPLH (M5) HUVECs的形态

赫斯特33342年依法进行染色试验方法所描述的Cai et al。23]。被胰蛋白酶化处理后,HUVECs种植和孵化24 h 6-well板。被抹去了6-well板上层清液,和300年μL的NAC FWKVV (M3), FMPLH (M5)解决方案分别加入不同6-well盘子。孵化2 h后,南汽,FWKVV (M3),和FMPLH (M5)被移除和300年μL H₂O₂分别放在盘子里。孵化24 h后,赫斯特33342年加入盘子赫斯特33342年8毫克/毫升的浓度。孵化后30分钟,赫斯特33342年清除板和HUVECs使用无血清DMEM清洗三次。LSM710的荧光显微镜是用来观察HUVECs的形态,和550 nm和460 nm设计激发和发射波长,分别。

2.5。的影响FWKVV (M3)和FMPLH ROS (M5), SOD,氧化酶,不,和MDA

空白的ROS水平控制,模型,和样品组按照描述的方法测量了Cai et al。23]。此外,antioxidases的水平(SOD和氧化酶)和oxidation-related指标(NO和MDA)测量使用分析工具按照制造商的协议(南京建成生物工程研究所有限公司,中国),和BCA法来确定蛋白质浓度正常化的水平antioxidases (SOD和氧化酶)。ROS水平和空白对照值的百分比表示。antioxidases的水平(SOD和氧化酶)被表示为U / mg普罗特(酶活性单位/毫克蛋白)。

2.6。影响FWKVV (M3)和FMPLH (M5)氧化损伤的脱氧核糖核酸(DNA) H₂O₂

FWKVV的防护能力(M3)和FMPLH (M5)超螺旋pBR322质粒DNA对H₂O₂按照描述的方法测量的损害Cai et al。23和赵et al。25]。谷胱甘肽(GSH)作为阳性对照的实验。

DNA彗星试验是按照描述的方法进行Cai et al。23),应用于分析FWKVV的防护能力(M3)和FMPLH (M5) DNA损伤HUVECs的氧化损伤模型。

2.7。统计分析

所有化验进行三次以上,以及由此产生的数据被表示为 (SD)。每个处理的平均值进行了分析使用方差分析测试(SPSS 22.0统计软件)。邓肯的多个范围测试应用于分析不同群体的显著差异( , ,和 )。

3所示。结果与讨论

3.1。APs (M1-M10)对HUVEC的可行性

HUVECs分离脐带静脉和发挥重要作用的模型系统分析调节内皮细胞和抗氧化剂对内皮细胞的影响和过氧化免受氧化损伤,通过测量细胞生存能力及其对细胞凋亡的影响(5,12]。

图1展示了APs (M1-M10)对细胞活力的影响。在100年的浓度μ米,HUVECs孵化的可行性与IRWWW (M10) 24小时 ,这是劣质的空白控制和其他肽组。相反,细胞培养的可行性与YFLWP (M6) ,这是优于空白控制和其他肽组。然而,对照组没有显著区别和peptide-treated组在同等条件下( )。细胞生存能力是活的还是死的决心细胞,根据总细胞样本。可行性分析有一个巨大的数量的应用程序,尤其是计算抗肿瘤药物对肿瘤细胞的影响和正常细胞的细胞毒性化合物的活性(26- - - - - -28]。因此,十孤立APs (M1-M10) miiuy喊冤者透露的可能性利用nontumor健康产品,因为他们没有显著影响传统HUVECs扩散。

在实验中,H₂O₂被用来产生羟基自由基(^∙OH)和氧自由基,进一步导致细胞氧化应激(27]。氧化损伤模型,用H₂O₂通常是用于评价抗氧化活性并研究其分子机制ROS-caused氧化损伤的发病机理有关。图2表明HUVECs的可行性与H的增加减少₂O₂当H浓度₂O₂浓度范围从100μM - 350μm .此外,发现HUVECs减少的可行性 在H₂O₂200的浓度μ米,与其他测试组有显著性差异( )。然后,200年μM是公认的最佳浓度₂O₂建立HUVECs的氧化损伤模型。

3.2。保护作用的APs (M1-M10)氧化损伤HUVEC的H₂O₂

10 APs的防护能力(M1-M10) HUVEC的氧化损伤模型引起的H₂O₂呈现在图3。结果表明,细胞的异常的范围从M1-M10-treated组 来 ,这是优于氧化损伤模型组( )。然而,细胞的异常M1-M10-treated组低于( )阳性对照组(NAC)。此外,HUVEC的可行性FWKVV - (M3)和FMPLH (M5)治疗组 和 100.0的浓度μ米,非常显著( )优越的氧化损伤模型组( );NFWWP (M2), YFLWP (M6) WVWWW (M8) MWKVW (M9)和IRWWW (M10)增加了HUVEC可行性 , , , ,和 ,分别和peptide-treated组显著的异常( )高于氧化损伤模型组。因此,这些结果说明FWKVV (M3)和FMPLH (M5)最高防护能力对氧化损伤诱导HUVEC的H₂O₂在10 APs (M1-M10)当APs (M1-M10)的浓度为100.0μM。

结果在图4说明FWKVV的浓度(M3)和FMPLH (M5)和H的防护能力₂O₂全身的HUVEC损伤模型显示积极的关系。FWKVV HUVEC的可行性——(M3)孵化组增加 来 当它的浓度从10.0μM和100.0μm .此外,HUVEC可行性非常显著( )和显著( )高于氧化损伤模型组的浓度为50.0μM和100.0μM,分别。的HUVEC可行性FMPLH——(M5)治疗组在测试浓度显示出类似的趋势。然而,FWKVV之间没有显著性差异(M3)和FMPLH (M5)孵化组和氧化损伤模型组10.0的浓度μ米( )。

空白的图像控制(H₂O),氧化损伤模型(H₂O₂),FWKVV (M3), FMPLH (M5),和积极的控制(NAC)沾染了赫斯特33342年呈现在图5。孵化后24 h, HUVECs丰满的形状,大小均匀,呈现空白对照组(图中蓝色荧光5(一个))。然而,HUVECs模型组(图5 (b))显示细胞凋亡状态因为HUVECs的数量明显减少,细胞变得较小,大部分剩余的贴壁细胞的荧光变得明亮。与模型组相比,数字5 (d)和5 (e)目前,大多数HUVECs FWKVV (M3)和FMPLH (M5)组织粘在墙上。此外,只有少数HUVECs被大水冲走,其他少量的HUVECs呈现蓝色荧光明亮。然而,FWKVV的防护能力(M3)和FMPLH (M5) oxidative-damaged HUVECs由H₂O₂比的积极控制较弱。目前的结果表明,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)显示一个重要防护能力H₂O₂损坏HUVECs,同意结果在图中找到2。

3.3。影响FWKVV (M3)和FMPLH (M5) ROS水平HUVECs的氧化损伤模型

空白的ROS水平控制(H₂O),氧化损伤模型(H₂O₂),FWKVV (M3), FMPLH (M5),和积极的控制(NAC)组呈现在图6。数据表明,有一个极其( )空白对照组之间的显著差异和氧化损伤模型组( 空白的控制)。这一发现证明了诱导氧化损伤引起的H₂O₂导致显著增加ROS水平模型组。肽组,细胞内ROS水平显著下降了FWKVV (M3)和FMPLH (M5)预处理浓度的方式。此外,FWKVV ROS清除活动(M3)显示强于FMPLH (M5)。浓度的10μ50米,μ米,100μM,细胞内ROS水平FWKVV——(M3)孵化组 , ,和 的空白对照组。数据表明,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)可能扮演重要的角色在帮助HUVECs从氧化应激损伤通过减少活性氧的水平。

3.4。影响FWKVV (M3)和FMPLH (M5)的水平Antioxidases (SOD和氧化酶)和Oxidation-Related指标(NO和MDA) HUVECs的氧化损伤模型

等内源性抗氧化酶SOD,氧化酶,猫,和GSH-Rx,非酶的抗氧化剂形成人体内源性防御机制保护至关重要的生物分子,最终身体组织免受氧化损伤细胞中通过催化反应中和活性氧(29日]。氧化应激下,不受控制的ROS的生成将超出正常的处理能力的内生防御机制,需要和其他抗氧化剂来帮助控制氧化应激损伤(2,30.]。因此,FWKVV的影响(M3)和FMPLH (M5)的水平antioxidases (SOD和氧化酶)和HUVECs oxidation-related指标(NO和MDA)测定和图所示7对H HUVECs解释他们的保护行动₂O₂全身的氧化损伤。

数据7(一)和7 (b)显示的水平antioxidases (SOD和氧化酶)在H₂O₂全身的HUVEC损伤模型 和 ,分别的数据非常明显低于正常HUVEC的控制( )。此外,数据7(一)和7 (b)表明antioxidases的水平之间存在正相关性(SOD和氧化酶)和肽(FWKVV (M3)和FMPLH (M5))浓度。SOD的含量( 和 )和氧化酶( 和 )HUVECs孵化的FWKVV (M3)浓度的50.0μM和100.0μ很明显( )和显著( )高于氧化损伤模型组。在同一浓度的影响FMPLH (M5)的水平antioxidases (SOD和氧化酶)是略低于FWKVV (M3)。SOD的含量( 和 )与FMPLH HUVECs孵化(M5)浓度为50.0μM和100.0μ明显( )和非常显著( )高于的H₂O₂受损的组织。此外,氧化酶水平HUVECs对待FMPLH (M5) 100.0的浓度μ米,水平非常显著( )大于( )氧化损伤模型组。因此,目前的发现表明FWKVV (M3)和FMPLH (M5),特别是在高度集中,对增加的水平有重大影响antioxidases (SOD和氧化酶)HUVECs处理氧化应激的损伤。

ROS生成氧化应激可以破坏细胞膜和至关重要的大分子,导致MDA也没有增加。如数据所示7 (c)和7 (d)oxidation-related指标的内容,包括没有和MDA氧化损伤模型组明显高于(MDA, ;不, )空白对照组( )。结果表明,H₂O₂导致氧化应激在HUVECs 200的浓度μM和严重破坏细胞膜。我们兴奋,MDA的水平之间有负相关性,没有和肽(FWKVV (M3)和FMPLH (M5))浓度数据7 (c)和7 (d)。MDA浓度的100.0的内容μM是 和 ,分别,那些数据明显低于氧化损伤模型组( )。的影响FWKVV (M3)和FMPLH (M5)在没有内容oxidative-damaged HUVECs MDA含量比那些更重要。没有的内容与FWKVV HUVECs孵化(M3)和FMPLH (M5) 50.0的浓度μ米非常显著低于氧化损伤模型组( )。在FWKVV——(M3)和FMPLH——(M5)治疗组,MDA的含量减少,没有在oxidative-damaged HUVECs进一步证明FWKVV (M3)和FMPLH (M5)可能会增加抗氧化酶清除活性氧的水平和减轻氧化损伤细胞。

以前的文献表明,一些蛋白玉米胚芽蛋白酶解物和BPs显示细胞内抗氧化功能通过控制的抗氧化酶基因表达水平和细胞和生物体(2]。Homayouni-Tabrizi等人报道,YLEELHRLNAGY从骆驼奶蛋白水解物能显著提高SOD和CAT的基因表达对HepG2细胞(31日]。抗氧化肽来源于种fucata蛋白质发挥了保护作用ultraviolet-induced小鼠皮肤光老化的显著控制脂质过氧化反应的速度和SOD的活性,减少氧化酶,羟脯氨酸,和猫32]。IYVVDLR和IYVFVR水解大豆蛋白可以保护Caco-2细胞对H₂O₂全身的氧化损伤通过统计上显著下调细胞内ROS生成和脂质过氧化反应,移植减少总谷胱甘肽(GSH)合成,增强活动的猫和氧化酶,压制ROS-mediated炎症反应通过抑制interleukin-8分泌( )(33]。在一个在活的有机体内实验中,牛头发玉米胚芽蛋白酶解物(必和必拓)(主要CERPTCCEHS序列)(34牡蛎肉和玉米胚芽蛋白酶解物由Alcalase (OMA) [35)显示出强大的能力,降低MDA水平,提高水平的内源性细胞antioxidases,包括SOD、猫和氧化酶。这些发现在实验中表明FWKVV (M3)和FMPLH (M5)也有类似的cytoprotective功能与报道抗氧化肽因为他们都可以增强内源性抗氧化防御系统来帮助细胞对H₂O₂损害。

3.5。防护能力FWKVV (M3)和FMPLH (M5) DNA

3.5.1。质粒DNA保护能力

在氧化应激产生的多余的活性氧可以增加氧化DNA损伤的水平,这是进一步涉及发展的各种癌症,包括结肠癌、乳腺癌、前列腺癌和(25,36,37]。因此,保护作用的FWKVV (M3)和FMPLH (M5)质粒DNA (pBR322 DNA)对氧化损伤的H₂O₂显示在图8。发现质粒DNA (pBR322 DNA)是主要的超螺旋(SC)在正常情况下(图形式8(a))。轻松打开循环(OC)形式产生当一个磷酸二酯链的质粒DNA裂解时发生氧化应激,进一步围绕第一个打破切开,导致生成的线性(林)双链DNA分子。林和OC形成双链的DNA特征,长串的休息时间,分别为(25]。

在实验中,pBR322 DNA裂解产生的羟基自由基分解的H₂O₂由铁^{2 +},改变了SC形成OC(图形式8(h))。此外,跟踪林形式的pBR322 DNA被发现如图8(h),这表明,微量的双链DNA被割开的多余的羟基自由基。如数据所示8(b) -8(g), FWKVV (M3)和FMPLH (M5)积极影响的数量的SC形式pBR322 DNA剂量依赖性的方式当他们的浓度范围从0.5毫克/毫升2.0毫克/毫升。相应地,OC的pBR322 DNA浓度的增加逐渐降低FWKVV (M3)和FMPLH (M5)。然而,SC的质粒DNA的数量(pBR322 DNA) FWKVV (M3)和FMPLH (M5)集团在2.0毫克/毫升的浓度低于积极的控制(谷胱甘肽)组(图8(我)),建议对DNA氧化损伤的保护作用FWKVV (M3)和FMPLH (M5)弱于积极的控制(谷胱甘肽)。因此,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)可能会导致铁的化学反应^{2 +}与H₂O₂和/或直接清除羟基自由基生成通过给出氢原子或电子玩他们的防御功能的超螺旋质粒DNA。这个结果同意我们以前的报告,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)铁还原能力强,能有效地清除羟基自由基在体外(3]。

3.5.2。对H DNA保护能力₂O₂全身的伤在HUVEC模型中

由于氧化剂和抗氧化剂之间的不平衡,多余的活性氧生成,然后攻击DNA在细胞,进而导致不良的生理和生化反应。目前,有几种方法可用于评估细胞的DNA损伤,和彗星试验被认为是一个相当简单的,敏感的,多才多艺的单个细胞定量和定性评价DNA损伤和DNA修复的影响37]。在分析,电流应用于一个幻灯片,展示了细胞在凝胶。破碎的DNA链将远离他们的初始位置对正电荷,留下一个彗星,这将很容易可见通过荧光38]。彗星小道可以给出许多DNA损伤程度的量化数据,可以用来评价保护性的抗氧化化合物对DNA的影响。

空白对照组,明亮的彗星头和几乎没有彗星尾巴(图9(一)表明,DNA HUVEC处于正常状态,但是长和大的彗星的尾巴在氧化损伤模型组(图9(b))表明,DNA被H严重受伤₂O₂和H₂O₂全身HUVECs氧化损伤模型的成功建立。与氧化损伤模型组相比,彗星尾巴的长度和面积oxidative-damaged HUVECs一步一步减少了FWKVV浓度的增加(M3)和FMPLH (M5)从50.0μ米至200.0μ(数据9(d) -9(我))。更有趣的是,彗星尾巴的长度和面积FWKVV——(M3)和FMPLH——(M5)孵化组在200的浓度μ米的长度和面积约等于NAC-treated组(图9(c))。

在图的图像9在彗星尾长或彗星区域可以显示视觉实验结果。此外,彗星试验采用一些指标包括转矩类指标(橄榄尾巴的时刻,移动),头DNA (HDNA),尾部DNA (TDNA)更有利于准确的分析结果(表1和2)。这些索引证明HDNA非常显著低于空白对照组( );尾巴(TM),尾长(TL),移动,和TDNA氧化损伤模型组非常显著高于空白对照组( ),和彗星长度(CL)氧化损伤模型组明显高于空白对照组( )。的浓度增加FWKVV (M3)和FMPLH (M5)从50.0μ米至200.0μM、TDNA CL、TL、TM、和移动逐渐下降,但彗星的HDNA逐步增加。此外,所有的测量指标FWKVV (M3)和FMPLH (M5)集团在100年和200年的浓度μ米,除了FMPLH的CL (M5)组100人μ米,显示与模型组极显著差异( )。在50的浓度μ米,HDNA TL, TM FWKVV (M3)和FMPLH (M5)组显示非常重要( )分别与模型组差异;TDNA和移动FWKVV (M3)和FMPLH (M5)组与模型组非常显著差异,分别为( );的移动FWKVV (M3)和FMPLH (M5)组显著( )分别与模型组差异,但FWKVV的CL (M3)和FMPLH (M5)组没有显著差异与氧化损伤模型组( )。结果是,彗星试验的结果表明,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)显示显著的防护能力引起的DNA氧化损伤模型组H₂O₂。此外,FWKVV (M3)的DNA显示更强的保护作用₂O₂全身的HUVEC损伤模型比FMPLH (M5)在相同的浓度。

攻击DNA ROS产生的条件下氧化应激可以诱导链断裂,DNA DNA和DNA蛋白质交联,并至少20修改基地加合物的形成,起到关键作用的老化,癌症、动脉硬化、神经退行性疾病、糖尿病(39,40]。抗氧化水解和BPs逐步接受食品组件应用于功能性食品和保健品有效地调整和控制保护DNA氧化损伤,脂质,蛋白质在人体41- - - - - -43]。Hoki框架蛋白水解物(APHPH)可以降低叔丁基hydroperoxide-caused人类胚胎肺成纤维细胞的细胞毒性和醒目地保护DNA免受自由radical-induced受伤44]。同样,从尼罗罗非鱼蛋白玉米胚芽蛋白酶解物的准备(45和虾壳46)能有效地抑制DNA分离造成的H₂O₂和过氧化氢激进的剂量依赖性的方式。YGDEY可以保护对alcohol-caused HepG2细胞氧化损伤通过控制氧化应激包括减少DNA损伤的程度。抗氧化机理可能与一种蛋白激酶/ NF -κB / MAPK信号转导途径(47]。Sheih报道,VECYG (VG5)提出了防护能力对氧化损伤的DNA,这进一步强化了APs的容量来保护羟基radical-caused损伤(48]。WAFAPA和MYPGLA准备blue-spotted黄貂鱼的蛋白质水解物在他们控制的能力优于肌肽脂质氧化造成的H₂O₂。此外,WAFAPA和MYPGLA有助于质粒DNA氧化损伤引起的芬顿试剂(21]。在我们以前的报告,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)被发现具有很强的抑制脂质过氧化,减少权力,和自由基清除活性3,目前的研究发现表明,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)可能会削弱氧化损伤引起的HUVECs H₂O₂通过增强内生antioxidases的内容(SOD和氧化酶),降低oxidation-related指标(NO和MDA)的内容,并帮助DNA氧化损伤。

4所示。讨论

氧化应激导致细胞发病机理(49),ROS-mediated DNA损伤(39,40),和线粒体功能的改变50]。DNA的氧化损伤被认为是一个关键因素在血管疾病(51,52]。我们的研究结果表明,细胞生存能力明显下降,伴随着DNA损伤DNA彗星试验检测到的质粒DNA化验后200年培养μM H₂O₂媒介24 h, h₂O₂全身的细胞毒性和DNA损伤有显著抑制与FWKVV HUVECs coincubated时(M3)或FMPLH (M5)。研究还发现,HUVECs 200的曝光μM H₂O₂24 h导致活性氧产量大幅增加,诱导细胞凋亡。然而,治疗M3和M5 200一起μM H₂O₂显著抑制活性氧的形成和HUVECs DNA损伤和细胞凋亡减少。这些数据表明,M3和M5改善影响H₂O₂在HUVECs全身的血管内皮损伤。

过度氧化消耗组织谷胱甘肽和损害人体抗氧化防御系统53,54]。如何提高谷胱甘肽的水平就变得很重要。在这个实验中,我们观察到的谷胱甘肽水平HUVECs与治疗组显著增加M3或M5。结果的潜在机制促进生产谷胱甘肽的M3或M5可能导致一个更广泛的生物效应保护性质的关于环境的一般解毒代理。没有证据表明发现谷胱甘肽能够自由通过细胞膜;因此,M3或M5必须调节通过刺激细胞合成谷胱甘肽细胞谷胱甘肽的水平。结果表明,M3或M5保护细胞不受氧化应激损伤,和保护包括其刺激谷胱甘肽合成的能力。

细胞是在稳定状态称为氧化还原在正常生理条件下体内平衡。氧化还原内稳态是由平衡连续ROS生成和维护几个机制在抗氧化活性30.,55]。压倒性的生产活性氧导致prooxidant也称为氧化应激状态,这是一个主要因素在血管疾病并发症的发病机理2,56,57]。氮氧化物是主要的贡献者在内皮细胞活性氧生成(58]。Nrf2-dependent恰恰证明了离散区划的氧化还原信号激活。Nrf2 redox-sensitive转录因子是由细胞质中的氧化信号激活。Nrf2通路在细胞中被认为是最重要的防止氧化应激(40,59]。在细胞外的刺激,Nrf2诱发核易位的几种抗氧化基因的转录,如NADPH quinineoxidoreductase-1 (NQO-1)、血红素加氧酶1 (HO-1), SOD (60- - - - - -62年]。SOD和氧化酶是两个重要的抗氧化酶,去除有毒的自由基(29日,47]。我们的研究表明细胞内ROS在200年显著增加当HUVECs培养μM H₂O₂媒体。M3或者M5减少治疗H₂O₂全身的活性氧产量。目前的研究还表明,SOD和HUVECs氧化酶活力明显降低,MDA水平的关键细胞毒性过氧化脂质增加,没有生产时暴露于200年μM H₂O₂24小时,被M3或M5 cotreatments。主要的细胞内的抗氧化防御是谷胱甘肽池和ROS-scavenging酶如氧化酶和草皮。增加这些内源性抗氧化剂的水平或激活或酶可以保护细胞免受氧化损伤。在这项研究中,确实发生在谷胱甘肽水平明显下降后治疗H₂O₂;因此,谷胱甘肽水平降低可能是由于更少的减少氧化酶的活性。不平衡的H₂O₂全身抗氧化剂在HUVECs地位,如改变抗氧化酶的活性和谷胱甘肽的耗竭,可能是细胞损伤的主要原因。然而,cytoprotective M3或M5可能介导的影响,在某种程度上,由redox-regulated Nrf2激活的转录因子结合抗氧化反应元素(是)。这些数据表明,H₂O₂全身的活性氧产量超过了天然抗氧化剂能力,导致氧化应激和M3或M5可能发挥其保护作用HUVECs通过减少活性氧积累和提高抗氧化酶活性。

最后,在这项研究中,我们表明,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)可以显著保护细胞免受H₂O₂全身的氧化应激、DNA损伤和细胞凋亡在培养HUVECs。M3治疗或者M5减少细胞生存能力的损失,提高抗氧化能力,减少HUVECs的氧化损伤。此外,我们假设M3的保护作用或M5似乎是由Nrf2信号通路的调节和维护细胞氧化还原内稳态。这一发现进一步支持这一概念,M3或M5可能潜在的血管保护药物。

5。结论

在这部作品中,保护活动和抗氧化机制FWKVV (M3)和FMPLH (M5) HUVECs对H₂O₂使得氧化损伤被仔细研究。孵化24 h时,没有发现显著差异的可行性HUVECs空白对照组和美联社之间(M1-M10)组100人μ米( )。此外,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)能显著防止HUVECs H₂O₂全身的氧化损伤,提高内生antioxidases的内容,降低氧化产品的水平,并帮助DNA氧化损伤。这些结果表明,FWKVV (M3)和FMPLH (M5)可以作为卫生保健产品的巨大潜力的抗氧化剂。此外,分子机制在活的有机体内抗氧化实验FWKVV (M3)和FMPLH (M5)也将在我们实验室进行。

数据可用性

相对应的数据集可从作者合理的请求。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

BW和氯氟化碳设计实验。YZW YMW, XP进行实验和分析实验数据。YZW,氯氟化碳,BW写和修改了手稿。所有作者知识内容和批判性回顾了手稿给了最后批准出版的版本。

确认

这项工作是由中国国家自然科学基金(82073764)和浙江省一万人才计划(2019号r52026)。

引用

1. a . Pihlanto和h . Korhonen“生物活性肽和蛋白质,”食品和营养研究进展47卷,第276 - 175页,2003年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. 答:尸罗和a . Bougatef”从海洋副产品:抗氧化肽分离、鉴定和应用在食品系统。审查。”《功能性食品卷。21日,选手,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. y, x, c . f .气k . l .太阳和b .王”,十个新五肽的蛋白质水解miiuy喊冤者(Miichthys miiuy肌肉:准备、识别、和抗氧化活性评价轻型-食品科学和技术卷,105年,页1 - 8,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. p . a . Harnedy m·b·奥基夫和r . j .菲茨杰拉德“分离和鉴定抗氧化肽的酶水解Palmaria palmata分离蛋白”,食品研究国际,第100卷,第1部分,416 - 422年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. y .问:赵,l . Zhang j . t c . f .气和b .王,“八肽从南极磷虾的水解蛋白(Euphausia superba):隔离、识别和评估活动对人类脐静脉内皮细胞(HUVECs)”食品研究国际卷,121年,第204 - 197页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. x, y .问:赵,f . y, b .王,“准备和识别蛋白水解物的抗氧化肽滑冰(拉贾porosa软骨。”《功能性食品25卷,第230 - 220页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. l . x y, y . m . Wang, c . f . Chi和b .王,“四抗氧化肽水解蛋白质的红黄貂鱼(Dasyatis akajei)软骨:分离、识别、和在体外活动评估,”海洋药物,17卷,不。5日,第263条,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. y . m . c . f . Chi, b . Wang Wang b . Zhang和s . g .邓”隔离和表征的三种抗氧化肽蛋白水解物的蓝鳍金枪鱼的蛆(Navodon septentrionalis),“《功能性食品》12卷,1 - 10,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. j·m·洛伦佐p e . s . Munekata b·戈麦斯et al .,“生物活性肽作为天然抗氧化剂在食品产品——复习一下,”食品科学与技术的趋势卷,79年,第147 - 136页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. j .盛x, j . Chen等人“抗氧化效果和机制的研究从脱脂核桃生物活性肽(胡桃regia水解l .)饭。”农业与食品化学杂志》上,卷67,不。12日,第3312 - 3305页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. w·m·你美国Cheng Lu, m·杜”发展和前景的生物信息学分析研究从休蛋白生物活性肽:序列,结构,功能,“TrAC-Trends在分析化学7 - 17,105卷,页2018。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. 李任d . c . Liu, j . et al .,“Cytoprotective效应和净化的小说从榛子抗氧化肽(c . heterophyllaFisch)蛋白玉米胚芽蛋白酶解物。”《功能性食品,42卷,第215 - 203页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. m . s .拉赫曼y庆熙崔崔y Seok m·b·阿拉姆·汉Lee和j . Cheol柳”,一种新颖的抗氧化肽,纯化芽孢杆菌amyloliquefaciens显示,强大的抗氧化剂可能通过Nrf-2介导血红素oxygenase-1表情,“食品化学卷,239年,第510 - 502页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. 郭y . c . Liu, f .赵et al .,“潜在的保护作用机制调解从核桃肽(胡桃效果格言。)对过氧化氢诱导PC12细胞神经毒性,”食品与函数,10卷,不。6,3491 - 3501年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. c·f·l . b . Wang Li Chi, j·h·马h . y .罗和y . f .徐”,净化和描述的一种新型抗氧化肽来自蓝贻贝(贝壳类蛋白质水解物,“食品化学,卷138,不。2 - 3、1713 - 1719年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. c·b·安·j·g·金,j . y .我“净化和八肽的抗氧化特性的鲑鱼副产品由胃肠道消化水解蛋白质,”食品化学卷,147年,第83 - 78页,2014年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. j·b·张y .问:赵,y . m . Wang c . f . Chi和b . Wang”八个水解胶原蛋白肽的鲅鱼的皮肤:分离、识别、和体外抗氧化活性评价”,海洋药物,17卷,不。4、第224条,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. y哦,c·b·安,k . h .南y . k . Kim n . y . Yoon和j . y .我”氨基酸组成、抗氧化剂和cytoprotective蓝贻贝(效果贝壳类水解)通过抑制氧化stress-mediated caspase-3激活的内皮细胞损伤,”海洋药物,17卷,不。2、第135条,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 郑胜耀公园,y s . Kim c·b·安和j . y .我”部分纯化和鉴定三种抗氧化肽与蓝贻贝(王亚南效果贝壳类)水解消化性水解。”《功能性食品,20卷,第95 - 88页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. t·陈和h .侯”,保护作用的凝胶从太平洋鳕鱼多肽(Gadus勒瓦)对紫外线irradiation-induced损失通过抑制炎症和改善转化生长因子-β/ Smad信号通路。”光化学与光生物学B生物学》杂志上卷,162年,第640 - 633页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. f . c . Wong j .肖·m·g·l·昂et al .,“识别和表征的抗氧化肽的水解blue-spotted黄貂鱼及其对热稳定,pH值和模拟胃肠消化治疗,”食品化学卷,271年,第622 - 614页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. s . j . j . y . Li Li, z . s .杨和H . x金”,由微波辅助制备抗氧化肽水解胶原蛋白及其保护作用对H₂O₂全身的RAW264.7细胞的损伤。”海洋药物,17卷,不。11日,第642条,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. 郑胜耀Cai, y, y .问:赵,c . f . Chi和b . Wang”Cytoprotective蛋白水解物的抗氧化效果五肽游泳的膀胱miiuy喊冤者(Miichthys miiuy对H)₂O₂介导的人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)受伤,”国际分子科学杂志》上,20卷,不。21日,第5425页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. 崔Lim, a . h . m . Kwon et al .,“评价各种溶剂提取物的抗氧化活动海藻serratifolium,其主要的抗氧化成分。”食品化学卷,278年,第184 - 178页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. 曾l . y .问:赵,z s .杨f·f·黄g . f .丁和b .王”,抗疲劳效果由蛋白质水解肽分数croceine喊冤者(稚鱼鱼鳔通过抑制氧化反应包括DNA损伤,”海洋药物,14卷,不。12,221页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. l . j .戈麦斯:戈麦斯,j·e·萨帕塔a . Cilla g·洛佩斯-加西亚和a .喜悦”,体外抗氧化能力和cytoprotective /对红罗非鱼Caco-2细胞(细胞毒性影响Oreochromis spp)内脏玉米胚芽蛋白酶解物。”食品研究国际卷。120年,52 - 61年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. j . t y .问:赵,c . f . Chi和b . Wang”美丽smoothhound软骨蛋白水解物的生物活性肽及其抗氧化活性在体外”,海洋药物,16卷,不。4、第100条,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. 郑胜耀李和s . j .户珥,”神经保护作用的不同分子量肽分数从牛肉与商业酶水解获得SH-SY5Y细胞,”食品研究国际卷,121年,第184 - 176页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. o . m . Ighodaro和o . a . Akinloye”第一线防御antioxidants-superoxide歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX):他们在整个抗氧化防御电网的基本作用,”亚历山大医学杂志,54卷,不。4、287 - 293年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. w·h·赵问:罗,x, c . f .气k . l .太阳和王,“准备、识别、和活动评估十从蛋白质水解物抗氧化肽的游泳的膀胱miiuy喊冤者(Miichthys miiuy),“《功能性食品47卷,第511 - 503页,2018年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. m . Homayouni-Tabrizi a Asoodeh, m . Soltani“细胞毒性和抗氧化能力的骆驼奶,肽:孤立的肽对超氧化物歧化酶和过氧化氢酶基因的表达,”食品和药物分析杂志》上,25卷,不。3、567 - 575年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. y,田,l .李et al。”抗氧化肽来源于的抑制作用种fucata在小鼠蛋白质ultraviolet-induced光老化,”《功能性食品,5卷,不。2、527 - 538年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. 问:张x, y李et al .,“从Alcalase-hydrolyzed大豆抗氧化肽的纯化和表征(大豆水解l .)及其在人类肠道Caco-2 cytoprotective效应细胞,”农业与食品化学杂志》上,卷67,不。20日,第5781 - 5772页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. w·c·曾问:太阳,w·h·张x p .廖和b·史”抗氧化活性在活的有机体内和生物安全性评价的小说从牛的头发玉米胚芽蛋白酶解物抗氧化肽,”生物化学过程,56个卷,第198 - 193页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. z, g .苏周,l .林x Liu和m .赵”Alcalase-hydrolyzed牡蛎(Crassostrea rivularis)肉增强抗氧化和春药活动在正常雄性老鼠,”食品研究国际卷,120年,第187 - 178页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. m . s .库克,m·d·埃文斯,m . Dizdaroglu和j . Lunec“氧化DNA损伤:机制、变异和疾病,”美国实验生物学学会联合会杂志,17卷,不。10日,1195 - 1214年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. 诉Gunasekarana g . v . Raj, p .集“彗星试验的临床应用,综合评估”临床与诊断研究杂志》上,9卷,不。3,GE01-GE05, 2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. n·辛格“彗星试验:反思其发展、演变和应用程序,”突变突变研究研究评述卷。767年,23-30,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. m·a·洛弗尔和w·r·Markesbery氧化DNA损伤在轻度认知障碍和晚期阿尔茨海默氏症,”核酸的研究,35卷,不。22日,第7504 - 7497页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. 董y, b、n彭日成和j .胡”ROS生成和DNA损伤导致abamectin-induced老鼠巨噬细胞细胞细胞毒性,”光化层卷,234年,第337 - 328页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. l . r . Liu,傅,g . h .周和w·g·张,“回顾抗氧化肽来源于肉类肌肉和副产品,”抗氧化剂(巴塞尔),5卷,不。3,32页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. l .张赵g . x, y .问:赵,y . t .秋c . f . Chi和b . Wang”识别和积极评价抗氧化肽蛋白玉米胚芽蛋白酶解物的鲣鱼(Katsuwonus pelamis头,“抗氧化剂(巴塞尔),8卷,不。8日,第318条,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. a Sannasimuthu和j . Arockiaraj”细胞内自由基清除活性和保护作用的哺乳动物细胞抗氧化肽的二硫化硫氧还蛋白还原酶Arthrospira platensis”,《功能性食品第103513条,卷。61年,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
44. 郑胜耀Kim j . y .我和美国k金”,从hoki纯化和表征的抗氧化肽(Johnius belengerii框架由胃肠道消化蛋白质,”营养生物化学杂志》上,18卷,不。1,31-38,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. s Yarnpakdee s Benjakul H . g . Kristinsson和H·e·巴肯“预防效应的尼罗罗非鱼水解物对HepG2细胞和DNA的氧化损伤由H₂O₂,AAPH。”食品科学与技术杂志》上,52卷,不。10日,6194 - 6205年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. p . Ambigaipalan和f . Shahidi”,从虾壳处理丢弃:生物活性肽抗氧化和生物活动,“《功能性食品7 - 17,34卷,页2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. m·f·陈龚,y y . Zhang et al .,“预防效果的YGDEY罗非鱼鱼皮明胶玉米胚芽蛋白酶解物对饮酒导致的伤害通过ROS-mediated HepG2细胞信号通路,”营养物质,11卷,不。2,p。392年,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. I.-C。Sheih”新氧化抗氧化特性的生化肽(VG5)在不同氧化系统、“营养与食品科学杂志》上,8卷,第553 - 546页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. h . z盘,h·张,d . Chang h·李和h .隋”的变化产品氧化应激在糖尿病和糖尿病性视网膜病变,“英国眼科学杂志的,卷92,不。4、548 - 551年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
50. r . a . Kowluru和p . s . Chan“氧化应激和糖尿病性视网膜病变,”实验性糖尿病研究文章ID 43603卷,2007年,12页,2007。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. r . a . Kowluru“糖尿病视网膜病变:线粒体功能障碍和视网膜毛细血管细胞死亡,”抗氧化剂和氧化还原信号,7卷,不。11 - 12,1581 - 1587年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. r . a . Kowluru l . Atasi和y s . Ho”线粒体超氧化物歧化酶在糖尿病性视网膜病变的发展,“调查眼科及视觉科学卷,47号4、1594 - 1599年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. g . Bounous“乳清浓缩蛋白(WPC)及谷胱甘肽调制在癌症治疗中,“抗癌的研究,20卷,不。6 c, 4785 - 4792年,2000页。视图:谷歌学术搜索
54. l . c .土地、v . l .灰色和a . a . Smountas”补充与半胱氨酸捐赠者对肌肉的影响性能,”应用生理学杂志,卷87,不。4、1381 - 1385年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. w·Luczaj a Gegotek,大肠Skrzydlewska“抗氧化剂和氧化还原内稳态HNE,”自由基生物学和医学卷,111年,第101 - 87页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
56. t . Szasz k . Thakali g·d·芬克和s w·瓦,“氧化应激的动脉和静脉的比较:生产者、驱逐舰、功能、和疾病,”实验生物学和医学,卷232,不。1,27-37,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
57. i . g . Obrosova“山梨糖醇途径活性产生氧化应激增加组织网站的糖尿病并发症,”抗氧化剂和氧化还原信号,7卷,不。11 - 12,1543 - 1552年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
58. 答:诗,t . Djordjevic m . Weitnauer t . Kietzmann j·a·赫斯和a . Gorlach”NOX2 NOX4调解内皮细胞增殖反应,”抗氧化剂和氧化还原信号,8卷,不。9 - 10,1473 - 1484年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
59. a·k·贾斯瓦尔,”Nrf2信号协调激活抗氧化基因的表达,”自由基生物学和医学,36卷,不。10日,1199 - 1207年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
60. j . h . m . t .做h . g . Kim崔和h . g .,在“二甲双胍诱发microRNA-34a Sirt1 / Pgc-1表达下调α/ Nrf2通路,导致野生型p53肿瘤细胞的氧化应激的敏感性和治疗药物,”自由基生物学和医学卷。74年,还是,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
61. f·雪,j·w·黄,p . y .丁et al .,“Nrf2 /抗氧化防御通路参与了Sirt1的神经保护效应与局灶性脑缺血大鼠高压氧预处理后,“大脑研究行为卷,309年,页1 - 8,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
62. y . w .叮,g . j .赵x l .李et al。该文就近年来关于百草枯所致损伤发生“SIRT1产生保护作用对鼠标II型肺泡上皮细胞的脱去乙酰基NRF2在体外”,国际分子医学杂志》上,37卷,不。4、1049 - 1058年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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