文摘
有害影响的snp基因编码转录因子,以及抗氧化和解毒酶,是有讨论余地的;然而,他们的功能意义似乎修改透明细胞肾细胞癌的风险(ccRCC)开发和进展。我们研究了具体的影响Nrf2,SOD2,GPX1基因变异和GSTP1ABCD单体型ccRCC风险及预后和评估问题和监管之间的关系(JNK1/2)和执行人(caspase-3)凋亡分子表达ccRCC组织样本和存在问题:JNK1/2蛋白质:蛋白质相互作用。223年基因分型结果进行ccRCC PCR-CTTP和qPCR病人和336个匹配控制。蛋白表达进行了分析使用免疫印迹,而存在的问题:JNK1蛋白质:蛋白质相互作用被免疫沉淀反应的实验研究。风险增加ccRCC发展变异的基因型携带者中被发现SOD2rs4880和问题rs1695多态性。Nrf2rs6721961遗传多态性结合rs4880和rs1695显示ccRCC风险较高。单体型分析发现重大风险ccRCC发展的航空公司GSTP1C单体型。此外,GSTP1变体形式似乎影响ccRCC患者的总生存期,拟议中的分子机制GSTP1预后作用可能存在的问题:JNK1/2蛋白质:蛋白质相互作用。
1。介绍
细胞氧化还原体内平衡是维持恒定的代谢通量和氧化还原反馈组成的亲电子分子产生的各种各样的压力,激活不同的机制,旨在重建亲核环境(1]。扰动的精细平衡活性氧(ROS)生产及其解体导致氧化应激和细胞损伤在多个层面上(2]。为了适应,表型开关已经发生(1]。细胞增殖率很高,比如癌细胞,需求持续的能源生产维护大分子的生物合成。为了适应和支持他们的基本需求,内在和外在的分子机制参与修改细胞新陈代谢(3]。而不断迅速增殖,癌症细胞,与此同时,暴露于增加活性氧水平,进一步上调抗氧化系统和创建环境中他们能够开发新的氧化还原平衡和抗氧化损伤(3]。
透明细胞肾细胞癌(ccRCC)仍然是一个最频繁和最激进的成人肾恶性肿瘤,占90%的肾肿瘤(4,5]。因为改变新陈代谢是ccRCC标志之一,有人建议,除了RCC的组织学分类,某些分子亚型也应该被确定(6,7]。精确的分类是非常重要的,因为它可能会或多或少揭示类型与积极的临床特征,因此指出哪些患者应该更严密监控和跟踪8]。
透明细胞碾压混凝土属于类型的癌与Keap1 / Nrf2 (Kelch-like ECH-associated蛋白质1 /核因子(erythroid-derived 2) -like2)通路改变(8]。即,当细胞活性氧与亲电试剂水平增加,激活特定的适应性cytoprotective响应,包括Keap1的变化/ Nrf2通路(9,10]。诱导变构Keap1的变化导致减少蛋白酶体降解的转录因子Nrf210]。一旦累积,Nrf2进入细胞核和结合抗氧化反应元素(是)Nrf2目标基因的DNA序列,进一步引起了众多转录酶,包括解毒酶、代谢酶,和压力反应蛋白(8,10,11]。尽管起初视为一个抗癌分子,一些作者强调Nrf2癌症细胞生存的作用,甚至认为它应该被视为一个可能的目标为未来的抗癌治疗方法(9,12,13]。
在各种酶由Nrf2目标基因和编码由绑定到阿瑞斯谷胱甘肽S-transferases(销售税)。他们代表一个家庭的多功能酶参与催化和非催化过程,还是传统上公认的二期细胞解毒系统酶(3,14]。肝、肺、肾,器官与强烈的代谢活动,已知高表达的胞质消费税,尤其是π(GSTP)形式,由Nrf2基因激活的(14,15]。向大分子GSTP1也具有约束力的活动,以及小分子,并显示能力参与大信号转导通路(14,16]。具体来说,GSTP1充当消极的监管机构kinase-dependent凋亡信号通路形成蛋白质:蛋白质复合物等监管增殖激酶JNK1 (c-Jun NH2-terminal激酶)(14,17]。特定问题:JNK1交互,受到关注功能调节问题和恶性表型之间的联系3]。此外,问题有可能形成一个问题/ Nrf2蛋白质复杂,暗示GSTP1蛋白质可能帮助Nrf2稳定和它的进一步行动18]。当考虑它的作用在癌症新陈代谢,除了解毒的潜在致癌的物质,GSTP1能够增加药物流出从细胞从而导致药物抗性(19]。
由于癌细胞依赖资源,代谢重编程的基础是他们的食物7]。为了跟上高能源需求和保卫自己免受许多活性分子,肿瘤细胞依赖酶,使两个过程(20.,21]。有三个同功酶SOD,一个主要的抗氧化酶(22]。在反应中催化由线粒体SOD2 H2O2著名小说功能的分子在细胞增殖、分化、迁移,正在生产。除了充当信号分子,H2O2促进活化的活化激酶,促进糖酵解的关键改变肿瘤细胞(20.,22]。因此,通过控制H2O2生产、SOD2在众多途径中起着重要的作用。
虽然SOD2导致H2O2合成,另一个重要抗氧化剂酶,谷胱甘肽过氧化物酶(GPX),导致的进一步降低和生产中性水分子(23]。八个组成GPX家人(24]。通过帮助癌细胞消除有害的过氧化氢,GPX1作为最丰富的GPX形式的作用可能是矛盾的25]。即其活动增加保护正常细胞免受氧化损伤,而这可能有利于肿瘤细胞逃避ROS也(25]。
Nrf2基因和基因编码问题,SOD2和GPX1功能多态性,改变特定的蛋白质的表达水平或影响合成蛋白质的活动。分析了广泛Nrf2SNP多态性rs6721961涉及替换C的,定位在-617的近端启动子26]。明确的功能变化仍未解,并讨论是否高或低转录活动与variant-type基因型aa (-617) [27]。然而,由于这个SNP位于基因的上议院的主题,自感的重要性Nrf2是强调在整个文学(26,28,29日]。在的情况下问题基因多态性,两个最常见snp rs1695和rs1138272 [30.]。替换A313G rs1695引起变化的异亮氨酸和缬氨酸在105位置(Ile105Val) [31日]。这瓦尔等位基因变异代表一个更有力的c-Jun n端激酶1 (JNK1)抑制剂和抗凋亡效应较强,32]。T代替C 341位置的存在导致编码的蛋白质与缬氨酸代替丙氨酸(rs1138272 Ala114Val) [33]。假设GSTP可能减少活动的341 t变体或修改后的底物特异性34]。的单体型GSTP1ABCD代表这两种多态性的组合。当涉及到SOD2多态性,rs4880对应于外显子2替换C > T导致变化从丙氨酸、缬氨酸位置16 (35]。因为有一个频道内线粒体膜内不能导入Val16变体SOD2 Ala16一样有效,Val16变体仍然被困,后来由蛋白酶体降解[35]。主要研究了SNP的情况GPX1基因是rs1050450 (Pro200Leu)。由于变化的脯氨酸和亮氨酸,GPX1的二级和三级结构改变,导致酶的构象变化作为一个整体(36]。脯氨酸是至关重要的,因为它未被取代的氨基上α碳原子使形成特定的扭结;因此,当缺席,整个结构修改(36]。
考虑到潜在的重要功能多态性基因编码Nrf2转录因子,以及抗氧化剂SOD2 GPX1,和解毒GSTP1酶透明细胞RCC的发病和预后,本研究的目的是评估特定的效果Nrf2,SOD2,GPX1基因变异和GSTP1ABCD单体型上的风险、开发和术后患者的预后ccRCC。此外,目的是评估问题之间的关系表达式,表达式的监管(JNK1/2)和执行人(caspase-3)凋亡分子在人类ccRCC组织样本,以及存在的问题:JNK1/2蛋白质:蛋白质相互作用。
2。材料和方法
2.1。参与者
组织学证实的病例对照研究包括223例透明细胞肾细胞癌的治疗,临床泌尿外科的临床中心的塞尔维亚贝尔格莱德。事件例招募在诊断时包括怀恶意的存在增强病变检测成像技术和组织学证实了诊断。获得血液和组织样本评估在生物实验室中形成功能基因和蛋白质组学研究所的医学和临床医学院生物化学,贝尔格莱德大学。招收了336名控制性别和年龄的癌症。这些人以前没有癌症的历史经历了手术良性的条件在同一临床中心,与良性的和恶性泌尿条件无关。参与者把他们的知情同意列入研究。研究符合赫尔辛基宣言,协议是医学院伦理委员会的批准,贝尔格莱德大学(没有。29 / - 3)。这两种情况下和控制使用一个标准的流行病学问卷调查访谈为了获得信息ccRCC发展的危险因素。吸烟者被定义为那些有一段至少60天的消费香烟之前加入这项研究。 Pack-years was calculated by the formula 。总体生存时间被定义为从肾切除术死亡日期或最后随访(2018年11月)。
2.2。DNA隔离
从200年基因组DNA分离μl整个血液样本或从25毫克的遥远nontumor肾组织样本,使用QIAamp DNA迷你包(美国CA试剂盒,就是查)。孤立的DNA是储存在-20°C。浓度,以及纯度的孤立的DNA,用分光光度法在230年,260年,280年,320 nm GeneQuant pro (Biochrom,英国剑桥大学)。
2.3。分析了基因型
的多态性rs6721961Nrf2检查了PCR-CTTP(与面对两双引物聚合酶链反应)方法根据shinmoyama教授等。37]。产品的放大除以与2%琼脂糖凝胶电泳。可视化的PCR产品启用了SYBR®安全DNA凝胶染色(美国加州卡尔斯巴德,英杰公司公司)在紫外线ChemiDoc相机(Bio-Rad,赫拉克勒斯,加州,美国)。一个车道,其中包含282年和113年英国石油公司被认为是一个C / C基因型;巷,282、205和113个基点,杂合的基因型;巷,282和205个基点,a /基因型。
基因分型的问题(rs1695和rs1138272),SOD2(rs4880),GPX1(rs1050450)是由应用定量聚合酶链反应(qPCR) Mastercycler ep realplex(埃普多夫,汉堡,德国)使用适当的应用生物系统公司化验TaqMan药物代谢的基因(生活技术,应用生物系统公司,卡尔斯巴德,CA,美国)。化验C_3237198_20的情况问题rs1695, C_1049615_20问题rs1138272, C_8709053_10被用于SOD2。为GPX1专门设计的试验序列5 rs1050450多态性VIC-ACAGCTGGGCCCTT-MGB-3和5FAM-ACAGCTGAGCCCTT-MGB-3是使用。
2.4。免疫印迹分析
细胞溶质从ccRCC获得肿瘤( )和各自nontumor肾脏组织样本。池nontumor肾组织是由混合等量的六种不同的样品。50μ克总蛋白每样本进行免疫印迹分析JNK1/2 GSTP1,裂解caspase-3表达式(38,39]。膜被封锁在一夜之间,治疗主要抗体JNK1/2 (Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国),GSTP1 (Abcam,剑桥,英国),裂解caspase-3(美国马萨诸塞州细胞信号,丹弗斯),和家政蛋白质β肌动蛋白(Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)。之后,膜被孵化与适当的二次抗体,用化学发光检测底物(英杰公司公司,卡尔斯巴德、钙、美国),和暴露在x射线电影(Amersham Hyperfilm ECL,通用电气医疗集团,白金汉郡,英格兰)。使用ImageJ微密度分析(美国贝塞斯达国家健康研究所的)。为了获得相对定量,结果规范化使用β肌动蛋白管家蛋白。
为了研究问题的存在:JNK1蛋白质:蛋白质相互作用在肿瘤ccRCC样本,免疫沉淀反应实验研究使用捕获和释放®v2.0高吞吐量(HT)免疫沉淀反应分析工具- 96(北部为默克密理博生物技术公司,达姆施塔特,德国)根据制造商的指示。即96 -滤板是用于预涂过程提供20% 泥浆辞职和亲和配体。选择细胞溶质,包含1μ克/μl细胞总蛋白质,以前量化使用Bicinchoninic酸蛋白质分析工具包(BCA-1 Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)与2孵化μg的主要抗体GSTP1(美国马萨诸塞州细胞信号,丹弗斯),紧随其后的是几个清洗步骤。最后,样本resuspended 30μl 2 x Laemmli缓冲区(Bio-Rad、大力神、钙、美国),在90°C五分钟变性,离心收集的1500 rpm一分钟。浮在表面的部分进一步进行sds - page及免疫印迹分析根据前面描述的协议。
2.5。统计分析
计算进行了这次调查使用SPSS软件版本17.0(美国芝加哥,IL)。连续变量表示为 (SD)或中值(最小最大)。频率( ,%)计数被用于分类变量。分配不同的变量被使用Kolmogorov-Smirnov测试测试。对于每个检测多态性,哈迪温伯格平衡测试。风险计算了每个基因变异携带ccRCC发展优势比(或)和95%置信区间(CI)通过逻辑回归分析。还是调整年龄、性别、和变量表示承认ccRCC风险因素是潜在的混杂因素。生存分析使用kaplan meier方法估计累积的生存概率。评估的执行生存率较生存的差异根据不同类别的变量。问题之间的关系和裂解caspase-3表达式使用枪兵的线性相关系数进行了分析。
3所示。结果与讨论
3.1。分析基因型
分析样本包括223名ccRCC患者总数和336岁——准确性控制相同的地理起源。病人的主要人口和临床特征和控制表进行了总结1。
提出,ccRCC公认的危险因素,肥胖史,高血压,和吸烟状态进行评估。虽然没有显著差异发现组间关于肥胖和吸烟状况,超过50%的患者呈现高血压高血压控制相比,35%。此外,受试者有高血压史展出的风险增加2.45倍ccRCC发展相比,血压正常的受试者( - - - - - -4.435, )。II级,根据Fuhrman评分系统,注册中是最普遍病例(106例,55%)。当上演了根据TNM系统时,我们发现pT1和pT3最大量的阶段(93 pT1病例和87例pT3病例)。
ccRCC患者特定基因型的分布和控制表所示2。
没有明显的ccRCC风险揭示了受试者携带C / A和A / ANrf2基因型相比与运营商的C / C基因型( , -1.295, )。相反,ccRCC发展高度的风险增加个人至少有一个SOD2Val等位基因或精确的阿拉巴马州/ Val和Val /瓦尔SOD2基因型( , -9.432, )。关于GPX1多态性,ccRCC发展的风险降低受试者携带Pro /低浓缩铀和亮氨酸/低浓缩铀基因型相比,个人与Pro / Pro基因型( , -0.994, )。问题多态性rs1695和rs1138272研究单独和组合,以及GSTP1ABCD单体型。提出,受试者Ile / Val和Val / Val rs1695基因型结合阿拉巴马州/ Ala rs1138272基因型有超过三倍的风险增加发展中透明细胞肾细胞癌相比与运营商的参照基因型多态性( , -6.331, )。
作为一个极其复杂的氧化还原体内平衡维护系统的一部分,研究酶及其基因多态性(表结合起来进行评估3)。当完全观察时,受试者与C / CNrf2基因型的人,与此同时,阿拉巴马州/ Val或者Val /瓦尔SOD2基因型,表现出三倍增加ccRCC风险(或3.234, -7.280, ),而主题C / A或A / ANrf2结合阿拉巴马州/ Val或者Val /瓦尔SOD2基因型有ccRCC发展风险增加2.9倍( , -7.532, )。几乎同样被发现在风险较高的载体结合C / CNrf2和Ile / Val或者Val /瓦尔问题rs1695基因型( ,95%可信区间1.516 - -6.814, )。逻辑回归没有实质性的风险Nrf2分析了基因型结合GPX1和问题rs1138272基因型。
当ccRCC风险增加最明显SOD2,要么问题rs1695或rs1138272多态性检测。阿拉巴马州/ Val和Val /瓦尔SOD2基因型结合Ile / Val和Val / Val rs1695基因型与近20倍(风险增加相关 , -91.165, ),虽然4倍ccRCC发展风险增加时观察到阿拉巴马州结合/阿拉巴马州问题rs1138272基因型( , -9.508, )。最后,的存在GPX1Pro / Pro基因型结合阿拉巴马州/ Val或者Val /瓦尔SOD2基因型和Ile / Val或者Val /瓦尔问题rs1695基因型导致癌症的风险更高( , -11.630, 和 , -14.102, ,分别)。
在下一步中,单体型分析的问题rs1695 rs1138272多态性进行,提出了表4。的GSTP1A基因型代表A313和C114,意味着酶有105处异亮氨酸和丙氨酸,享年114岁。基因型与G313 C114或缬氨酸在114年是105年,丙氨酸GSTP1B。G313和T114或在105年和114年代表缬氨酸GSTP1C组成的,而形式在105位置异亮氨酸和缬氨酸在114 (A313和T114)GSTP1D(40]。的野生型等位基因组成的单体型一个和C是ccRCC患者最常见(56%)和控制(64%)。关于影响GSTP1ABCD单体型ccRCC易感性,组成的单体型变异等位基因的多态性G和T与风险增加3.5倍( , -8.22, )。
3.2。后续的分析
223 ccRCC情况下,后续的数据获得了215名(96%)患者在一个时期从2005年到2018年。总数有80人死亡(37%)和135年的残留在平均随访期间 个月(从1到161个月)。表5礼物Nrf2、SOD2 GPX1, GSTP1基因型分布在生活和已故ccRCC病人。
统计上的显著差异在运营商之间的频率观察Pro /低浓缩铀和亮氨酸/低浓缩铀基因型的检查GPX1多态性( )。关于GSTP1ABCD单体型,统计上的显著差异在运营商之间的频率观察至少参照基因型变异等位基因和运营商之一问题多态性(表5)。
表6代表了不同的检测基因型的分析潜在的整体死亡率的预测。两个模型的分析,基于不同的调整。虽然没有达到统计学意义问题- - - - - -变体至少一个Val105等位基因组成的基因型在rs1695为例,结合至少rs1138272 Val114等位基因之一,表示最高的风险比ccRCC病人(模型1 , -3.986, ;模型2 , -22.304, )。另一方面,没有其他的调查研究中,基因型显示任何预测潜在ccRCC总体死亡率。
kaplan meier生存曲线整体死亡率根据Nrf2,问题,SOD2,GPX1基因ccRCC病人呈现在图1。这个分析总体存活率没有显示显著缩短患者的生存时间携带一个特定的Nrf2,SOD2,或GPX1基因型( ,数据1(一),1 (c),1 (d))。然而,患者携带任何变体问题基因型被认为较短的患者总生存期(log-rank )(图1 (b))。
(一)
(b)
(c)
(d)
3.3。分析蛋白表达
因为GSTP1蛋白质可能负调节物,因此影响凋亡的活动,尤其是在肿瘤组织中,我们分析了GSTP1蛋白表达在一个游泳池nontumor肾脏组织样本ccRCC组织样本,但是独立的问题基因型。此外,潜在的存在问题:JNK1/2复合物是评估在肿瘤组织标本来自20 ccRCC患者。尽管表达在肿瘤的成绩逐渐增加(G1-G3),没有发现显著差异既不为GSTP1蛋白质含量仅在ccRCC组织样本(图2, )nontumor肾组织之间也没有游泳池和ccRCC组织样本( )。
虽然JNK1/2 nontumor肾组织池中表达明显高于与ccRCC相比组织样本(图3),结果没有统计学意义( )。
不过,遗嘱执行人的表达裂解caspase-3逐渐减少在肿瘤年级(G1-G3),只在G3达到统计学意义,相比nontumor肾脏组织样本(图4, )。
然而,弱正相关(相关系数, )被发现只有GSTP1之间和裂解caspase-3表达式( , )。
为了研究问题的存在:JNK1蛋白质:蛋白质相互作用,肿瘤组织样本被分成三组,根据肿瘤的品位。尽管的影响问题多态表达式没有评估,分析样本包含所有三个GSTP基因型。即GSTP1 IleIle基因型出现在30%,GSTP1 IleVal在40%,GSTP1 ValVal在30%的样品。蛋白质免疫沉淀反应,其次是免疫印迹分析,显示JNK1/2 / GSTP1复合物的存在在所有评估ccRCC样品(图5)。
4所示。讨论
近年来,注意力已提高了对遗传变异,通常被称为“量化特征位点”,可能导致一个小,但意义重大,风险不仅对发展也对复杂疾病如癌症的进展(41]。SNP的毒害效应多态性基因编码转录因子,以及抗氧化和解毒酶,仍有讨论余地的;然而,他们的功能意义似乎修改碾压混凝土发展的风险。此外,有越来越多的证据表明谷胱甘肽转移酶可能参与肿瘤恶化,影响患者的生存通过调节许多细胞过程通过蛋白质:蛋白质相互作用为内源性蛋白激酶的负调控16,17,42- - - - - -45]。
在这项研究中,我们审查的角色Nrf2转录因子的基因多态性和基因编码SOD2 GPX1,以及GSTP1在ccRCC发展。我们注意到的风险增加ccRCC开发运营商之间变异的基因型SOD2rs4880和问题rs1695多态性。Nrf2rs6721961遗传多态性结合rs4880和rs1695显示为这种类型的肿瘤风险更高。因为两个检测snp问题rs1695 rs1138272,接近他们的立场,单体型分析。它显示重大风险的ccRCC开发与基因型组成的变体形式的多态性,而背后的分子机制GSTP1形式在碾压混凝土中的作用进展可能解释的存在问题:JNK1/2蛋白质:蛋白质相互作用。
已经表明,Nrf2缺乏减少正常组织的反应接触氧化与亲电压力46]。SNP rs6721961进一步Nrf2活性的重要性已被证明,因为这多态性是定位在中间的图案和影响Nrf2的绑定。纯合子的/一个主题表现出低水平的Nrf2 mRNA这进一步导致低蛋白活动(47]。铃木等人证明smokers-carriers的A / ANrf2genotype-had增加肺癌的风险开发(47),同时,绒等人甚至提出,应该考虑这种多态性在肺腺癌患者预后的生物标志物来评估预后[29日]。更重要的是,这个特定的基因型的妇女患乳腺癌的风险更高发展和减少蛋白表达在癌组织(48]。
没有研究的Nrf2-617 c / A多态性对碾压混凝土的发展产生影响。当谈到泌尿道肿瘤,Reszka等人没有发现SNP rs6721961和膀胱癌症风险之间的联系(27]。同样,我们的结果没有任何明显的差异在不同基因型的频率ccRCC病人和相应的控制。不过,在已经发达的肾细胞癌,Nrf2蛋白质的载体的高表达C / C基因型似乎指出了预后不良和较短的患者总生存期(49]。此外,当Nrf2的表达升高,RCC转移不足和不满意对治疗的反应导致不利的结果(50]。根据我们的跟踪分析,患者C / C基因型相比有较短的总生存期C /一个和/一个运营商,尽管它并没有统计学意义。
许多基因的目标Nrf2编码酶的抗氧化应激反应使细胞适应新的条件(47]。谷胱甘肽S-transferases酶受Nrf2活动参与防御压力(51]。尽管荟萃分析没有发现之间的联系问题rs1695多态性和碾压混凝土发展(31日,52],我们之前研究的结果在RCC病人确实表现出显著增加患癌症病人携带的发展问题- - - - - -变体(Ile / Val + Val /瓦尔)基因型16),这是符合的结果分组人口ccRCC患者(53]。除了rs1695,在这项研究中,我们分析了rs1138272 SNP。分布有显著差异rs1695基因型患者和控制,但没有ccRCC和rs1138272之间的联系。四个单涉及这两个多态性已定义。Maniglia等人发现单GSTP1A和GSTP1D在更高的频率在头颈部鳞状细胞癌病例中控制(54]。由于消费税的整体功能还包括调节细胞信号,GSTP1C单体型已经被认为是一个更好的c-Jun氨基端激酶抑制剂比参考GSTP1A单体型(32]。根据这些结果,我们的研究显示对ccRCC运营商的风险更高GSTP1C单体型。
基于建立的角色GSTPi类JNK1及其凋亡的抑制效应(17,45),我们评估问题的表达和表达的监管(JNK1/2)和执行人(caspase-3)凋亡分子在人类ccRCC组织样本,以及存在问题:JNK1/2蛋白质:蛋白质相互作用,然而不论问题基因型。首先,我们注意到问题逐步增加蛋白质在肿瘤的成绩,尽管没有显著差异。其次,我们的研究结果显示,低水平的JNK1/2表达肿瘤组织相比,nontumor肾脏组织。此外,caspase-3裂解,的表达的一个关键实施中的酶导致细胞凋亡,在统计学上显著减少3年级相比,表达nontumor组织。此外,我们发现了一个软弱,然而积极联系GSTP1裂解caspase-3表达式。最后,通过分析ccRCC组织匀浆,我们发现了问题:JNK1/2复合物在所有评估样本。特定的相互作用被发现在人类白血病、肝癌、膀胱癌、神经母细胞瘤细胞(55]。据推测,肿瘤与调节问题,如碾压混凝土,可以他们kinase-dependent凋亡信号通路抑制,拥有- JNK1监管。戴维南等人表明,蛋白质中产生Val105和Val114基因型携带者的充当一个更好物抑制剂(32]。事实上,我们的研究结果表明,航空公司的GSTP1-variant类型的基因型(Ile / Val + Val /瓦尔)(阿拉巴马州/ Val + Val /瓦尔)多贫穷的生存。重要的是要注意,GSTP-JNK交互显示redox-dependent GSTP可能形成低聚物的形式和其他thiol-containing蛋白质,如Prdx 1和6 (56,57]。因为Prdx6似乎负责大量抑制GSTP1 heterodimerization,独立的等位基因变异,虽然Prdx1,一旦释放GSTP-JNK复杂,维护其过氧化物酶活性,在Prdx似乎可信的基因变异,1和6,可能发挥重要作用在这种情况下(57]。
另一个酶受Nrf2是锰超氧化物歧化酶的影响。多态性rs4880参与癌症易感性进行了广泛的调查。王等人的全面的荟萃分析显示SOD2rs4880多态性与肺癌有关(58]。各种各样的荟萃分析没有发现这个SNP和膀胱之间的关联或乳腺癌的风险21,59]。这些研究实际报告的风险增加乳腺癌通常报道阿拉巴马州/ Ala基因型是最常见的,虽然Val16变体的航空公司预计将在更大的患癌症的风险60]。同样,一些作者发现积极形式的前列腺癌相关阿拉巴马州和阿拉巴马州基因型(61年]。Atilgan等人发现,任何形式的发展风险增加肾细胞癌的组织学亚型阿拉巴马州/瓦尔和阿拉巴马州和阿拉巴马州基因型(35]。在我们的研究中,只有透明细胞癌观察时,航空公司的阿拉巴马州/瓦尔和Val /瓦尔基因型明显被暴露于更大的风险。当结合分析Nrf2,GPX1,rs1695和rs1138272问题单核苷酸多态性,重大风险也指出。此外,根据我们的结果,总生存期较短的患者阿拉巴马州/瓦尔和Val /瓦尔基因型仍然没有统计学意义。建议Val16 SOD2的不同组成部分β表结构,因此效率运输到线粒体细胞溶质减少其功能不足,进一步导致超氧化物阴离子中和(62年]。然而,达斯古普塔等人发现,过度的H2O2生产会导致灵敏度降低肿瘤坏死因子-α介导细胞凋亡(63年]。因此,它仍然是辩论是否高或低SOD2蛋白质活动应被视为一个明确的危险因素。
谷胱甘肽peroxidase-1被认为是一个看门人能够阻止不利造成的损害2O2由高级SOD2活动(64年]。在致癌作用的不同阶段,监管GPX1水平是至关重要的65年]。许多作者提倡的SNP rs1050450GPX1基因为易受各种癌症(36,66年]。即,荟萃分析调查这种多态性透露,变异基因型的影响(Pro /低浓缩铀和低浓缩铀/低浓缩铀)与风险增加有关肺癌,膀胱癌、前列腺癌、头颈部癌症,和脑癌21,67年,68年]。然而,Nikic等人没有发现的影响GPX1多态性在转移性膀胱移行细胞癌患者的总生存期(69年]。我们的结果没有显示运营商的风险增加Pro /低浓缩铀和低浓缩铀/低浓缩铀;相反,风险减少在这些科目。后续分析显示,这些变异基因等位基因携带者短累积生存,但这并没有统计学意义。这已经不是第一次遇到,列伊等位基因与保护。考虑到变体GPX1展览酶活性降低,这种现象的解释ccRCC是具有挑战性的。然而,随着最近建议,过氧化氢在信号转导和监管的角色参与长寿的基因可能会优先级相比,其可能造成氧化损伤(70年]。的机制还需要进一步的研究来阐明变更在H2O2减少与更好的生存和降低对透明细胞肾细胞癌的易感性。
就在最近,在RCC GPX1蛋白质的表达评估时,高GPX1水平是正相关,肿瘤阶段,远处转移、淋巴转移,和更短的总生存期(24]。这些相互矛盾的结果的影响GPX1多态性对酶合成和活动应该进一步检查和显示。
这项研究也有一些局限性,需要解决。病例对照研究设计,因此选择性偏差,以及回忆偏倚,对于ccRCC发展公认的危险因素可能会影响研究结果。同时,对照组是相对较小的,由医院的病人。此外,种族的可能效果无法评估的研究小组由白种人。
5。结论
一些重要的关于小说方面的作用在编码转录因子Nrf2基因单核苷酸多态性,线粒体SOD2, GPX1和GSTP1ABCD单体型ccRCC病理生理学的研究中提供。即观察ccRCC易感性增加运营商的个体变异的基因型SOD2rs4880和问题rs1695多态性,以及结合Nrf2rs6721961遗传多态性。此外,GSTP1ABCD单体型分析发现重大风险ccRCC发展的航空公司GSTP1C组成的单体型两GSTP1多态性变异形式包括单体型。我们的研究也提供了证据支持假设某些销售税变体基因型代表不仅ccRCC发展重要的遗传风险因子,也是一个重要的预后因素。在这条线,GSTP1变体形式似乎影响到患者的总体生存ccRCC和拟议中的分子机制的作用问题形式在碾压混凝土发展可能存在的问题:JNK1/2蛋白质:蛋白质相互作用。
数据可用性
的数据支持本研究的发现可以从相应的作者(MPE)在合理的请求。
信息披露
部分结果摘要(免疫印迹分析)是一种从维斯纳Coric博士论文的一部分,医学博士,为医学院,贝尔格莱德大学。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。
确认
感谢患者参与研究和临床工作人员协助收集的样本。这项研究是由教育部、科学和技术发展的塞尔维亚(批准号175052)。