文摘
在这项研究中,环磷酰胺腹腔注射建立免疫抑制小鼠模型研究的免疫调节作用Durio zibethinusMurr皮多糖(DZMP)通过蛋白质组学和肠道菌群。结果表明,胸腺和脾脏指数的高剂量DZMP(200毫克/公斤)组显著增加,和脾脏组织结构的改进与模型组相比,( )。- 2的内容,il - 4、il - 6和TNF -α在高剂量组DZMP显著增加( )。活动的酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T-AOC)增加血清中( )。在肝脏,过氧化氢酶(CAT)活性增加( )而丙二醛(MDA)含量降低和免疫活动增加( )。蛋白质组学研究表明,药物组能显著提高低亲和力免疫球蛋白伽马Fc受体III (FcγRIII)蛋白质和蛋白激酶C -α(PKC -α与模型组相比)( )。此外,结果表明,这些蛋白质有可能参与调节自身免疫性甲状腺疾病的代谢途径,金黄色葡萄球菌感染,NF -κB信号通路。肠道微生物研究表明,短链脂肪酸(SCFA)内容增加以及相对丰富的有益的细菌Akkermansia,拟杆菌,Paraprevotella,而相对丰度瘤胃球菌属和Oscillospira较模型组下降( )。结果表明,DZMP可能发挥有益作用的免疫调节通过改善肠道菌群。
1。介绍
免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子(1]。免疫系统的压力响应外界刺激被认为是人体的一个重要防御策略预防和抗击外国感染、炎症和癌症(2,3]。研究表明,多糖的免疫调节机制主要是帮助宿主形成一个强烈的免疫应答通过激活宿主的免疫反应(4,5]。先前的研究表明,多糖灵芝atrum能显著提高免疫器官指数(6),淫羊藿brevicornu马克西姆多糖可以发挥重要作用的免疫佐剂(7),而马吕斯hallianaKoehne花多糖可以调节细胞因子的含量和提高免疫抑制小鼠的免疫功能8]。
肠道菌群是一个复杂的microecosystem,包括微生物相互作用,营养代谢、免疫功能、疾病(9,10]。肠道微生物群落的代谢密切相关的健康主机,其中有益的细菌可以调节营养物质在肠道的吸收和利用率(11,12]。在某些疾病领域,如癌症、结肠炎、辅助治疗和肥胖的有益的细菌起着良好的监管作用[13]。此外,现有的研究表明,果实morji果胶多糖及其代谢物有益的影响通过调节肠道有益菌的生长拟杆菌taiotaomicron(14]。短链脂肪酸(SCFAs)是关键因素调节肠道菌群(15]。研究表明,SCFAs有重要的生理功能,包括维护能源;调整结肠和细胞内的pH值;和调节细胞离子运输、增殖、分化和基因表达(16]。SCFAs盲肠和结肠腔的浓度可以显著改变了高剂量的管理侧耳属eryngii多糖,可以调节胃肠功能(17]。
在这些研究中,许多蛋白质组学等组学技术、基因组和转录组已经被用来研究某些天然产物在疾病的作用机理。蛋白质组学技术着重于表达水平的差异,数量,和修改状态的蛋白质组学在不同实验小组识别特定的蛋白质,这是相关疾病诊断和蛋白质药物治疗的目标18- - - - - -21]。王等人执行2 d-dige对小鼠的肝脏蛋白质凝胶电泳分析正常组和实验组的管理石斛兰huoshanense多糖,发现18个差异表达蛋白质参与葡萄糖代谢、氨基酸代谢、和其他代谢途径(22]。曹国伟等人相比,蛋白质表达谱与小鼠脾脏单核细胞的增殖前后总多糖的影响灵芝孢子,并发现目标蛋白质的功能细胞生存和增殖,细胞活化和迁移,细胞骨架结构(23]。魏等人研究了Hedysarum polybotrys多糖对小鼠的免疫功能蛋白质组学水平,并发现其显著改善影响胸腺细胞的蛋白质表达谱和蛋白质合成的起始因子的关系4、酚脱水酶,还原酶,蛋白酶体和小鼠的胸腺免疫调节(24]。
环磷酰胺(CTX),免疫抑制剂在诊所,通常是作为一个普通的化疗药物降低脾指数、淋巴细胞增殖,吞噬细胞活性(25]。同时,多糖常用来改善这个化疗药物引起的副作用。例如,在治疗肠道肿瘤的老鼠,羧甲基多糖可以减轻化疗药物的副作用,提高小鼠的免疫(26]。此外,黄芪多糖、人参多糖、地区香菇多糖,灵芝多糖广泛用作癌症治疗的辅助药物。
的d . zibethinus在木棉科皮是榴莲的壳,当前的研究主要集中在其表面化学吸附功能(27,28]。药理研究表明,榴莲皮提取物有镇咳,肠泻药,镇痛,抗氧化和抗菌活性29日- - - - - -31日]。研究化学DZMP主要集中在类黄酮。结果发现preexperiment DZMP有免疫调节作用。
因此,在本文中,蛋白质组学和肠道菌群研究免疫DZMP对免疫抑制小鼠模型的影响在活的有机体内。
2。材料和方法
2.1。材料和化学物质
CTX(批号:19012825)是购自江苏恒瑞药业有限公司有限公司地区香菇多糖平板电脑(批号:1903010)是来自湖北Guangren药业有限公司有限公司d . zibethinus皮收集从超市在开封城市,河南省,被李教授Changqin国家食用菌加工技术中心,河南大学。然后,d . zibethinus皮切碎,干,用于提取后的DZMP过程从一个先前的研究(30.]。
2.2。动物实验设计
60 SPF昆明小鼠(男,20 ~ 22 g)从河南省实验动物中心购买以下许可证号码:SCXK (Yu) 2017 - 0004。在实验之前,这些老鼠被允许适应1周(温度: ,光照明:12 h / 12 h黑暗,和湿度:40% ~ 45%)在实验之前。
这些老鼠被随机分为6组:空白组(BC)、模型组(MC),阳性对照组(PC), DZMP高剂量组(HD)的DZMP中等剂量组(MD)和DZMP低剂量组(LD)(每组10只老鼠)。
BC和MC组被给予生理盐水每天0.1 mL / 10 g BW。在个人电脑集团Lentinula多糖的平板电脑,一个常见的免疫抑制调制器在诊所,是管理3毫克/公斤体重口服填喂法。高清,医学博士和LD组被给予口头DZMP在200年,100年和50毫克/公斤,分别一天一次。所有组治疗21天如上所述。在18、19、20和21天,BC组腹腔注射生理盐水,而另一组被腹腔注射建模与CTX 70毫克/公斤体重。
2.3。样品收集
治疗后,大鼠体重和禁食过夜(12 - 14小时)。血从眼球,放置30分钟,在3500 g离心10分钟,然后从上层清液和血清收集储存在-20°C到分析。脾脏和胸腺,称重器官指数。老鼠的部分脾脏抗氧化能力降低和冲洗PBS的器官。每个老鼠的肝脏被削减和存储在-80°C在蛋白质组学研究中,供以后使用。每个鼠标的盲肠切除,0.3 g盲肠的内容被放置在一个4毫升离心管,然后样本存储在-40°C SCFA决心。确定细菌菌群,3的盲肠的内容随机收集每个笼子里的老鼠,总共18样本存储在-80°C到(0.2 g /样本)进行DNA提取。
2.4。胸腺指数和脾脏指数
脾脏和胸腺,清洁,和体重。脾脏和胸腺指数是按照下列公式计算:
2.5。细胞因子测定内容
- 2的内容,il - 4、il - 6和TNF -αELISA试剂盒测定。
2.6。测定抗氧化应激能力
约50毫克的脾脏被组织均匀化,和MDA含量和猫的活动,分别根据装备检测指令。SOD和T-AOC检查的活动根据设备的指令。的活动值乳酸脱氢酶(LDH)和酸性磷酸酶(ACP)是由microenzyme标签和微型板块方法根据指令相应的包,分别。
2.7。组织学评价
小鼠胸腺和脾脏的部分和放置在4%多聚甲醛溶液清洗24 h。之后,他们脱水,嵌入到常规石蜡切片。Hematoxylin-eosin染色的组织切片进行了5分钟,然后进行脱水。与中性树胶封片。
2.8。蛋白质组学研究
从公元前、MC和HD组、9老鼠随机选择从每组肝脏。每3老鼠的肝脏组织组合在一起作为一个样本,和共9为蛋白质组学研究获得的样本。
2.8.1发布。蛋白质的提取
蛋白质提取过程如下:300 - 500毫克的肝脏组织,添加两个钢球和溶解产物,把它放在冰5分钟,并添加二硫苏糖醇(德勤)。断裂和裂纹组织使用研磨装置(力量:60 Hz,时间:2分钟)。之后,在25000 g和4°C离心机15分钟,取上层清液。继续添加德勤,碘乙酰胺,冷丙酮、十二烷基硫酸钠L3 (SDSL3)依次提取蛋白质和重复离心。蛋白质将被从上层清液获得的解决方案。需要30μg蛋白溶液从每个样本以确定蛋白质浓度的sds - page方法。
2.8.2。蛋白水解作用
100年μg蛋白的解决方案是添加到1.5毫升离心管。稀释用0.5米三乙基碳酸氢铵(TEAB),直到最后的十二烷基硫酸钠(SDS)在蛋白质溶液浓度低于0.1%。添加到解决方案的胰蛋白酶酶1:20比例的酶(μg)和基质蛋白(μg)。涡流振荡后,在低速离心机1分钟和孵化它在37°C 2 h。脱盐后消化肽冻干,目标肽将获得。
2.8.3。肽标记和分离
每个管2毫克等压标签(IBT)试剂与80年解散μL异丙醇,动摇了超过1分钟完全溶解。酶消化和海水淡化后,肽溶解在0.2 M TEAB溶液的浓度4μ克/μL和动摇了超过1分钟充分溶解肽。100年μg肽和80μL (IBT试剂快速混合和离心机,和pH值应该在7.0和8.0之间。每个通道的肽标签操作重复IBT试剂,和每个标记。然后,他们被放置在室温下2小时足够让肽标签。日本岛津公司的LC-20AB液相系统用于分离肽通过双子C18柱的样品(5μ米, )。
2.8.4。LC分析
提取肽样本重新溶解在流动相(甲酸乙腈2%,0.1%),在20000 g离心10分钟,和样品的上层清液被注入。使用热极限3000 UHPLC分离了。样本第一丰富和脱盐陷阱列,其后一系列分离self-loaded C18柱(75μm内径,> 3μ米粒子直径,25岁μ米列长度)在一系列有效的梯度洗脱程序300 nL /分钟的流量(表1)。一个质谱仪是位于nanoliquid相分离过程的结束。
2.8.5。MS分析
液相分离后,肽被nanoESI电离离子源,然后转移到Q Exactive HF-X(热费希尔科学、圣何塞,CA)在串联质谱检测视数据采集(DDA)模式。的主要参数设置如下:离子源电压设置为1.9 kV,一级质谱的扫描范围是350 ~ 1500/ 60000年一项决议,和最初的/的二级质谱是100年/ 与30000年的一项决议。条件下的电荷从2+到6+,最高的前20父离子离子峰的强度超过20000,被归类为父离子二级碎片。HCD离子碎片模式设置,在Orbitrap碎片离子检测。此外,动态排斥时间设置为30年代和自动增益控制(agc)的目标主要质谱和二级质谱3 e6和1 e5,分别。
从提取的工作分析是由深圳华大基因研究院集团。
2.9。西方墨点法
大约30毫克的老鼠的肝脏,完全在•瑞帕溶解产物,离心机在4°C和12000转/分钟10分钟。浮在表面的拍摄和蛋白质浓度由BCA决定蛋白质定量分析工具(Solarbio)。两个俱乐部γRIII蛋白质和PKC -α通过这种方法进行了分析。
2.10。SCFAs通过高效液相色谱法测定
0.3克的盲肠的内容去离子水溶解成1毫升、5毫升醚添加,下层的水相萃取丢弃。的解决方案是reextracted 500 L, 1 M氢氧化钠,其次是通过0.22过滤器过滤后添加100 L盐酸。SCFAs的浓度在盲肠的内容包括乙酸、丙酸和丁酸被Shimazu LC-20A高效液相色谱分析用C18柱根据先前的研究30.]。
2.11。16 s rRNA测序
合并后的盲肠的量子位(200毫克)评价的内容®dsDNA BR检测工具进行DNA提取。30 ng合格的基因组DNA样本V3-V4地区放大,测序和HiSeq平台选择。DNA提取和排序是由深圳华大基因研究院集团。
2.12。生物信息学和统计分析
蛋白质IBT量化,确定蛋白和肽段获得1%的错误发现率(罗斯福)过滤(PSM水平: )。欧氏距离和分层集群方法用于集群的微分蛋白质。获得的差异蛋白质与NR数据库相比,功能得到了注释。此外,KEGG通路数据库被用于分析代谢异常。
读取从测序获得盲肠的内容被FLASH软件拼接成对标签。质量检查后,OTU集群进行相似度为97%,Greengene用于比较和参考数据库。数据分析由核糖体数据库项目(RDP)分类学的分类器。主成分分析(PCA)的基础上也进行了一个相似系数矩阵,和β多样性比较是由QIIME (V1.80)。
所有的结果 。统计学意义是由SPSS 19.0软件,单因素方差分析(ANOVA)。
3所示。结果
3.1。DZMP对胸腺指数和脾脏指数的影响
在表2,MC组脾脏指数和胸腺指数明显低于那些在BC集团( )表明该模型是成功的。与MC组相比,胸腺和脾脏指数HD组显著增加( )。MD组的胸腺指数和LD组高于MC集团虽然在无意义的水平。
3.2。DZMP对小鼠细胞因子含量的影响
在表3- 2的水平,il - 4、il - 6和TNF -α在MC组显著低于在BC集团( ),表明CTX可以抑制免疫活性。- 2的水平下降,il - 4、il - 6和TNF -α通过CTX后被改进填喂法诱发小鼠不同剂量的DZMP;HD组尤其有最好的效果,这是类似于PC组。结果表明,DZMP可以提高免疫力CTX-induced免疫抑制的情况下通过调节细胞因子的水平。
3.3。DZMP对老鼠ACP和LDH的活性
在表4、ACP的血清活动和MC组LDH低于在BC组。在其他组相应治疗后,机场核心计划的活动在所有其他4组显著增加( )而LDH活动只有在HD和MD组显著增加( )。其中,LDH在HD和医学团体的活动以及ACP HD组高于在PC组。结果表明,DZMP可以显著提高小鼠ACP和LDH的活性。
3.4。DZMP对小鼠抗氧化能力的影响
在表5、SOD和T-AOC MC组明显低于那些在BC集团( ),表明抗氧化能力被CTX成功地抑制。SOD和T-AOC活动显示近水平的PC,高清,BC组。因此,与MC组相比,政府与大剂量DZMP SOD和T-AOC(几乎可以恢复活动 )。此外,MD和LD组SOD活性也显著增加( )。
在表6与BC组相比,猫的活动MC组显著减少( )和MDA活性显著增加( ),表明该模型成立。与MC组相比,猫活动电脑集团的美联储地区香菇多糖平板电脑是最高的,其次是高清,医学博士和LD团体,都显著高于MC集团( )。与此同时,这些组织的MDA活动明显低于MC集团( )和HD组MDA含量低至PC组。因此,DZMP抗氧化能力。
3.5。DZMP对小鼠的免疫器官的病理变化
在图1、脾组织BC组小鼠的正常形状,没有异常的细胞排列,细胞排列紊乱,有MC组的数量减少。与MC组相比,管理DZMP高清,医学博士和LD组增加细胞密度和细胞紧密有序的安排。这一结果表明,DZMP可以减轻免疫器官的损伤CTX所致。
(一)(BC集团)
(b) (MC组)
(c) (PC组)
(d) (HD组)
(e) (MD组)
(f) (LD组)
3.6。浓缩微分蛋白质功能分析
总共有9个样本与功能差异蛋白质的浓缩,形成共生718399二次色。总共36679肽和6229蛋白质被确定在“1%罗斯福”过滤标准。在图2组中,平均误差值是0.19和团体之间的CV值的平均值为0.12。此外,蛋白质与CV值占87%不到20%,表明生物样品组之间重复性很好。不同群体之间的差异蛋白质筛选差异倍数和意义。基于功能富集分析结果的差异蛋白质,它可以表明FcγRIII和PKC -α调解倍数之间的影响。
(一)
(b)
聚类分析是与重要的条目进行浓缩。在图3,大多数的差异表达蛋白质MC组和HD组的生物过程,细胞组件,和分子功能,和最显著的差异是细胞过程中,细胞组件,分别和绑定。
HD和MC组织中的差异表达的蛋白质主要是参与20 KEGG通路,以及10-45差异表达蛋白质参与每个通路(图4(一))。图4 (b)表明蛋白质upregulation绝大多数在前10名丰富通路。RichFactor是一个参数计算除以带注释的所有蛋白质差异表达蛋白质的数量确定在这个通路,RichFactor越高,比例越大差异蛋白质的途径。在图4,这四个途径,移植物抗宿主病,I型糖尿病,同种异体移植物排斥反应,和自身免疫性甲状腺疾病,拥有最高的微分蛋白质比例,而巴尔病毒感染,吞噬体,结核病是最高的途径许多不同的蛋白质。分析差异蛋白质之间的相互作用,他们进口到字符串,蛋白质相互作用数据库,和比较。蛋白质相互作用排名在前100名诚信被绘制在图5。
(一)
(b)
蛋白可能参与细胞的各种生命活动只有当他们被运送到了正确的地方在核糖体合成后。狼PSORT PSORTb被用来预测蛋白质的亚细胞位置真核生物和原核生物。在图6,HD和MC差异蛋白质的亚细胞定位结果表明微分蛋白质更广泛分布在细胞核(诊断),细胞液体(阶段),细胞外液(extr),线粒体(水)和质膜(塑料)。
3.7。蛋白质的验证
Fc的结果γRIII和PKC -α蛋白质在图7表明,该蛋白表达在MC组明显低于在BC组。与MC组相比,HD组蛋白表达明显增加,与蛋白质组学的结果一致。
3.8。评价微生物16 s rRNA基因测序
基因测序和数据质量筛选后,共有2301428个高质量的阅读,和大约1143,329标签被拼接在一起。这些标签是集群与97%相似,辣子鸡,共有756个辣子鸡。在图8(一个),横向弯曲线宽,线最终往往是平的,表明测试样品的物种组成是丰富的和统一的。在图8 (b),上升趋势的顶部OTU累积曲线逐渐稳定,表明抽样的数量足以代表社区社区在这个实验中,样品的结构和数据分析是可行的。
(一)
(b)
在不同环境中微生物群落物种分布有一定的相似性和特异性。根据OTU丰富信息,维恩图解分析比较不同组之间的共性或独特性的辣子鸡。在图9,每组有其特殊的社会表示。其中,BC组和HD组有更具体的比MC集团的辣子鸡。
(一)
(b)
α多样性和β多样性的分析结果如图10和11,分别。在图10、观察到的物种指数、Chao1指数,ACE指数和香农指数BC, LD,和医学团体都高于HD, MC,和PC组。它表明,物种丰富度低的高清,MC,和PC组。好每组的保险价值是高于99%,表明样本库有一个高覆盖率和测序结果可靠和可行的。的相似或差异样本菌群的构成提出了主成分分析在图(11日)。结果表明,第一主成分占47.35%的主要贡献是HD组。层次聚类的结果(图11 (b))表明,各治疗组的微生物群互相接近总体上虽然MC组是远离HD组。
(一)
(b)
为了更好地确定每个样本的社区组成,进行了分类分析微生物群落的信息。在图12,厚壁菌门和拟杆菌门这两类占主导地位的细菌样本,约占85% ~ 95%的细菌,紧随其后的是吗变形菌门。观察显示的相对丰度厚壁菌门和拟杆菌门BC组(72.09%,20.77%)接近,相应的细菌物种MC组(74.36%,20.71%),表明CTX的腹腔注射在两个占主导地位的细菌组几乎没有什么影响。HD组的相对丰度厚壁菌门明显降低(50.78%),而的拟杆菌门和变形菌门相对增加(35.17%、6.86%),相比之下,BC组。
所有样品检测属的物种信息级别是策划作为一个集群热图。在图13这两个属相对丰度最高的Oscillospira和普氏菌,紧随其后的是瘤胃球菌属和拟杆菌门。的相对丰度变形菌门在公元前HD组高于组。与此同时,的相对丰度拟杆菌,Paraprevotella,Akkermansia,Roseburia,CF231,幽门螺杆菌,Sutterella,CoprobacillusHD组高出MC组,而的瘤胃球菌属和Oscillospira在HD组低。
3.9。DZMP SCFA内容的影响
在图14的内容,与BC组相比,乙酸,丙酸,丁酸和MC显著降低,而在高清内容和PC组接近BC组和MC组明显高于。结果表明,DZMP和Lentinula多糖对SCFA内容有很强的影响。
(一)
(b)
(c)
4所示。讨论
免疫反应是一系列免疫反应的免疫活性细胞的免疫系统,包括识别外部刺激和活化,增殖,分化32- - - - - -34]。免疫器官,包括胸腺、脾脏和骨髓,是重要的人类免疫细胞的增殖和生长。胸腺和脾脏指数的变化可以直观地反映出身体的免疫功能,而免疫功能的下降通常伴随免疫器官的收缩(35]。以前的研究已经表明柑橘果皮和荔枝果肉多糖可以显著提高小鼠的胸腺和脾脏指数(36,37]。在这个实验中,小鼠的胸腺和脾脏指数明显降低MC组,当他们治疗后显著提高DZMP HD组,表明DZMP可以减轻CTX胸腺和脾脏损伤,提高身体的免疫能力。
巨噬细胞,免疫细胞的一个重要类型,可以参与免疫反应,保护身体的正常操作通过识别抗原,杀死/席卷外国病原体,释放细胞因子,或分泌细胞毒性分子被激活后(38]。ACP和LDH的活性可以直接反映了激活的巨噬细胞39,40]。在这项研究中,ACP和LDH活性明显增强HD和MD组与MC组。结果表明,DZMP可以调节LDH和ACP对小鼠的活动,激活巨噬细胞参与免疫反应。之前的研究表明,细胞因子有多种免疫功能(41]。在这个实验中,- 2、il - 4、il - 6和TNF -αMC组明显减少,表明CTX免疫抑制效应,这是符合唐等人的结果。42]。Th1、Th2子组的老鼠可以分泌il - 4, - 2, - 2和il - 4能促进T细胞的增殖(43,44]。此外,il - 4也可以促进B细胞的表达,增强B细胞的抗原表达能力,增加IgG1和IgE水平,使免疫系统对抗原刺激的反应(45,46]。龚等人发现白芨baicalensis多糖能显著提高的水平和免疫抑制小鼠il - 4 - 247)这是类似于DZMP本文的影响。肿瘤坏死因子-α和巨噬细胞的主要细胞因子il - 6。肿瘤坏死因子-α,促炎细胞因子,可以直接杀死肿瘤细胞(48),而il - 6可促进淋巴细胞的增殖和分化49],他们扮演了一个重要的角色在不同的免疫反应。这个实验的结果表明,DZMP可以显著提高- 2的水平,il - 4、il - 6和TNF -α在小鼠血清,从而发挥免疫调节作用。
肝脏是一个重要的代谢器官生物转化的一个强大的功能(50]。许多化疗药物的细胞毒性在身体的代谢过程可以很容易地导致有机损害肝脏的代谢酶的活动51- - - - - -53]。CTX主要转化为4-hydroxycyclophosphamide和醛磷酰胺CYP450酶在肝脏,然后分布在整个身体。之后,CTX可以进入靶细胞和烷基化物DNA,产生强烈的细胞毒性(50,54]。临床上,多糖经常用作辅助药物与化疗药物来降低它们的毒性,提高人体的免疫功能,加强经济复苏(55- - - - - -57]。多糖通常有许多药理活性,如多目标和广泛的影响22,58]。出于这个原因,蛋白质组学技术是用于在整个基因蛋白的表达水平,和IBT定量分析的关键差异蛋白质,研究提供分析依据特定蛋白质药物作用的目标和他们的相互作用。在这项研究中,未经处理的差异蛋白,免疫抑制,DZMP-treated老鼠相比,发现蛋白质的目标。
结果表明,FcγRIII和PKC -α施加监管对多个通路的影响。足球俱乐部γRIII由CD16a CD16b,表达了俱乐部γR NK细胞和其他免疫细胞(59]。CD16a和CD16b都可以绑定到免疫球蛋白,单体在目标细胞,它扮演着一个重要的角色在清除免疫复合物和NK细胞的功能,分别为(60,61年]。这两种亚型可迅速进行蛋白质水解当中性粒细胞和NK细胞受到各种刺激,并从表面脱落的人类白细胞(62年,63年]。研究表明,CTX能增强巨噬细胞的吞噬活动来治疗肿瘤的upregulation FcγRIII [64年]。在这项研究中,与MC组相比,Fc的表达γRIII受体在治疗组显著调节,提供一个理论依据DZMP治疗癌症的功能。蛋白激酶C (PKC)是一种多功能酶参与生化反应的规定通过激活一些细胞质中的酶。与此同时,它也作用于核转录因子,参与基因表达的调控。达斯等人证明,PKC参与宿主保护性免疫反应通过TLR2 / PKC信号预处理的十字丝TLR2受体激动剂,一个Arabinosylated lipoarabinomannan (Ara-LAM),可以显著提高传统PKC的表达在感染巨噬细胞(65年]。Mohammd等人表明,PKC的提取物对大鼠和益生菌和免疫调节作用增强了老鼠的肝脏的抗氧化能力(66年]。有三种亚型,PKC -αPKC -β和PKC -θ,造成lymphocyte-specific效应响应的本质在活的有机体内(67年]。采取PKC -α例如,酸性磷酸酶可以激活它的刺激活动通过磷酸化(68年]。在这项研究中,PKC的表达α是增加DZMP的HD组。上述结果表明,DZMP可能发挥作用在移植免疫调节Fc的表达γRIII和PKC -α调节药物代谢相关通路如自身免疫性疾病,金黄色葡萄球菌感染,和NF -κB信号通路。
植物共存的人类胃肠道microecosystem构成相对稳定。拉赫曼等人提出,肠道菌群物种数量的变化与免疫功能异常(69年]。许多先前的研究还表明,益生菌结合药物能更好地治疗胃炎、炎症性肠病、过敏性哮喘、儿童和其他疾病,增强人体的免疫功能70年]。天然植物多糖是一种益生菌,已被证明能调节人体的生理和免疫功能以及提高植物的结构和组成,并维持肠道微生物的平衡(14,67年- - - - - -74年]。这项研究的结果表明,特定数量的辣子鸡HD组显著高于MC组及其α多样性指数低于BC组,显示的监管效果DZMP HD组中占主导地位的细菌。
为了更准确地确定改变肠道微生物区系的组成、相关的评估进行了在不同分类水平。研究结果表明,厚壁菌门和拟杆菌门两个占主导地位的细菌,通过碳水化合物促进多糖代谢酶,使宿主吸收和储存能量75年,76年]。恩伯等人显示的相对丰度厚壁菌门来拟杆菌门在肥胖小鼠的肠道菌群而增加拟杆菌门减少(77年]。在我们的研究中,高剂量的DZMP可以显著降低的相对丰度厚壁菌门和增加的相对丰度拟杆菌门,在肠道菌群发挥有益的监管作用。
植物多糖也有有益的影响微生物发酵的碳水化合物,如短链脂肪酸(SCFAs),调节身体健康(78年,79年]。在消化的植物纤维,是一种特殊的细菌(Roseburia)在肠道产生丁酸,这已经被证明是大肠细胞的代谢能量的主要来源,帮助大肠细胞维持正常的代谢,控制肠道炎症,并支持基因组稳定性(80年,81年]。丙酸,主要是由拟杆菌在人类肠道共生菌,可以减少脂肪的降解,血清胆固醇水平,和其他组织的致癌效果81年,82年]。普氏菌和Coprococcus可以降低碳水化合物和多糖保护肠道健康83年- - - - - -85年]。普氏菌还参与多种维生素的合成(86年]。Akkermansia是一个有益的细菌,它可以减少肥胖的风险,糖尿病、炎症,和其他疾病,维护肠道健康(87年- - - - - -89年]。本文与MC组相比,相对丰富的拟杆菌,普氏菌,Coprococcus,Akkermansia的内容以及SCFAs HD组明显增加,与这些提到的研究结果是一致的。除此之外,瘤胃球菌属已知生产醋酸和甲酸和移植宿主肠道上皮细胞的屏障功能治疗后表达下调DZMP摘要(90年,91年]。同样,的相对丰度Oscillospira,直接与健康(92年,93年),增加了MC集团(符合研究唐代et al。42])和减少DZMP HD组治疗后(BC组略高于)。上面所有这些结果显示DZMP的平衡作用在这些小鼠肠道肠道特色。
5。结论
DZMP可以保护免疫抑制小鼠的免疫器官,提高小鼠免疫因素的内容,增强抗氧化能力,改变SCFAs的内容,上调FcγRIII和PKC -α蛋白表达,促进能量代谢,平衡植物成分,保持肠道健康,免疫调节中发挥作用。基于这项研究的结果,我们将进一步探索靶向作用的多糖在免疫细胞代谢途径,和益生菌的监管机制Akkermansia在免疫力。
数据可用性
使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。
的利益冲突
所有作者声明没有利益冲突有关的出版。
作者的贡献
惠民江泽民和王Jinmei贡献同样这项工作。
确认
我们要感谢所有参与这项研究。这项工作是由消化道Microecosystem药理学和毒理学的研究单位,中国医学科学院医学科学和凸轮创新基金(2019 - i2m 5 - 055)。