氧化医学和细胞寿命

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氧化医学和细胞寿命/2020年/文章
特殊的问题

生物活性化合物的食物:他们在2020年疾病的预防和治疗作用

把这个特殊的问题

研究文章|开放获取

体积 2020年 |文章的ID 4057841 | https://doi.org/10.1155/2020/4057841

张Chunxiu林,肖颖,斜槽溜浇壮族、浴柜林、勇曹,Yunjiao陈, 健寿的改善秀丽隐杆线虫与中国传统草药茶”,氧化医学和细胞寿命, 卷。2020年, 文章的ID4057841, 13 页面, 2020年 https://doi.org/10.1155/2020/4057841

健寿的改善秀丽隐杆线虫与中国传统草药茶

学术编辑器:费利佩•l . de Oliveira
收到了 2020年1月27日
修改后的 2020年11月15日
接受 2020年11月29日
发表 2020年12月16日

文摘

寻找自然与健康和安全的花草茶已经吸引了越来越多的关注,这对减少疾病风险具有十分重要的意义。中国传统草药茶(HT)从天然植物中提取活性成分丰富。大量药理研究表明,HT有可能改善健康状况,包括antidepression和抗氧化作用。在这项研究中,我们提出了一个战略探索HT的作用和基本机制改善健寿的秀丽隐杆线虫模型。首先,我们发现HT显著延长蠕虫的寿命而不降低生育率。第二,压力阻力(氧化应激和热应力)和提高β- - - polyQ-induced毒性被HT治疗明显松了一口气。脂肪沉积和老年斑积累在HT-treated蠕虫发现显著降低。提高了运动在中后期阶段,表明行为流动也显著增强。此外,HT的主要组件是十八岁多酚和两个萜类化合物。最后,发现这种保护机制呈正相关,胰岛素/胰岛素样生长因子信号——(IIS)依赖的方式,它通过促进核本地化DAF-16及其下游SOD-3表达式。这些结果表明,HT在改善健康有重要的作用,这可能会成为一个有前途的健康茶。

1。介绍

增加健寿的年龄是一个重要的风险因素,比如进步组织和器官功能下降,神经衰弱,代谢紊乱。抗氧化剂是重要的策略来延缓衰老和老龄化带来的退化性疾病(1]。天然活性物质,特别是在草药,赋予抗氧化活动,从而提供有益的影响。根据世界卫生组织的一份报告,发展中国家80%的人口依赖传统医学提供初级卫生保健,和85%的传统药物来自草提取物(2]。最近,越来越多的草药探索通过促进健康的食品工业福利作为现成的草药茶或作为功能食品和饮料添加剂的来源(3]。因此,草药extract-based成分有巨大的潜力可以开发成一个水库的天然抗氧化添加剂和创新促进健康的产品。

在这里,我们探讨中国传统草药茶的健康影响(HT)天然草药与现代科技相结合。HT,成立于清朝(1828年),是公认的第一个祖先在中国花草茶。HT已经广泛用于治疗历史悠久“Shanghuo”(一种身体的不平衡响应细胞压力导致的一系列破坏体内平衡)在中药4]。近年来,HT被发现有各种各样的健康福利,包括反应力的、抗炎和抗氧化效果(4- - - - - -6]。其主要原料是“三花,草,叶子”,也就是说,摘要通过(拉马特。)Tzvel。金银花粳稻研究。红花鸡蛋花l .简历。Acutifolia,乌拉尔甘草Fisch医生,扁桃体脓肿寻常的lMesona对Benth。,Microctis叶(公式中的每个植物物种的比例是3.5:3:5:1:3:5:5)。这七个提取物被认为是最有前途的天然抗氧化剂,可以提高健康(7- - - - - -13]。令人信服的证据表明,植物的天然抗氧化剂具有重要潜在减轻细胞压力和维持内环境稳定14]。因此,它是一个有吸引力的问题,HT与抗氧化活性可以改善健寿。

调查HT的生物活性物质和药理研究,高效的生物模型秀丽隐杆线虫是应用。秀丽隐杆线虫被认为是一个好的模型为研究衰老和筛查药物和促进健康的影响(15]。它有许多优点,如结构简单、易于饲养,很短的生命周期,快速繁殖,大量的后代,和独特的分子信号通路15]。特别是,衰老的过程秀丽隐杆线虫在进化过程中是相当保守的。例如,秀丽隐杆线虫展示人类相似的生理功能,如运动减少和有害代谢物随年龄增加。的衰老的作用机制,多途径控制寿命和压力阻力是保守的秀丽隐杆线虫人类,所以获得的知识秀丽隐杆线虫一般适用于哺乳动物(包括人类16,17]。

因此,本研究的目的是使用秀丽隐杆线虫,其中一个最有价值的和有吸引力的生物模型,评估潜在的改进HT的寿命和健寿和探索潜在的作用机制。这个结果将提供一个科学依据HT的好处在改善健康和延缓疾病发作,有价值的其他植物性产品的研究。

2。材料和方法

2.1。秀丽隐杆线虫的文化

秀丽隐杆线虫应变N2-Bristol(野生型);菌株CL4176 (dvIs27 [myo-3p::一个β(1-42)::让- 851 3 UTR + rol-6 (su1006)] X) CL2355 ([smg-1 ts (snb-1 /β(1-42)/长3 - - - - - -UTR)]), CL2122 (unc-54向量+ mtl-2:: GFP),和AM140 (rmIs132 [unc-54p: Q35:: YFP]);转基因蠕虫CF1553 (muIs84 (pAD76 (sod-3: gfp)));和大肠杆菌OP50 (大肠杆菌OP50)从秀丽隠获得遗传学中心(公司治理文化,明尼苏达大学)。TJ356 (zIs356 IV (pdaf-16-daf-16:绿色荧光蛋白;VC433 rol-6)) (sod-3(gk235) X)和CF1038 (daf-16(mu86) I)清华周教授提出的(生物医学转化研究学院、暨南大学、广东,中国)。所有菌株都种植在线虫生长培养基(NGM)琼脂板上播种大肠杆菌OP50 20°C,除非另有说明。蠕虫同步是先前建立的协议中描述18]。在虫繁殖时期,蠕虫被转移到一个新的板块每一天,其余的时间,蠕虫被转移到一个新的板块每隔一天。

2.2。样品制备

HT股票的解决方案是由广州Wanglaoji制药有限公司(广东,中国)和储存在4°C (HT的各种化学成分的分析总结了在补充表S1)。HT股票的解决方案是混合大肠杆菌OP50,蠕虫的食物来源,分散在NGM板块(测试浓度10毫克/毫升,30毫克/毫升,和50毫克/毫升)。HT治疗从卵开始阶段,和样本后7 - 12 -,结束治疗,除非另有说明。

2.3。寿命试验

像之前描述的那样进行寿命试验(18]。大约60个人(菌株N2、VC433 CF1038)治疗有或没有HT的蛋在20°C。死虫子每天计算和删除(从孵化的第一天)。线虫体内孵化胚胎(所谓的“内部孵化”)或逃离盘子不计入统计(18]。我们执行了三个复制。

2.4。生育能力分析

生育能力的测量与前面的协议(18]。有或没有HT治疗48小时后,野生型N2蠕虫被转移到一个新的控制或HT板每24小时每两条虫子(板)。每天下蛋的数量计算,直到没有更多的蛋。鸡蛋每天的总和作为线虫代数的总数。10个人每三个独立试验进行了试验。

2.5。压力阻力分析
2.5.1。抗氧化应激试验

如前所述(19),治疗中有或没有HT十天,虫子被转移到氧化应激盘子额外10毫米百草枯。生存是监控每12小时。三个独立的生物复制进行共有180蠕虫。

2.5.2。耐热应力分析

如前所述(19),野生型N2蠕虫治疗有或没有HT蛋在20°C的4天,然后被转移到35°C的文化环境。死虫子的数量每小时记录一次。六十蠕虫在每个实验中用于三重复测试。

2.6。神经保护试验对β全身的毒性
2.6.1。一个β全身瘫痪化验

CL4176菌株培养在NGM板块包含HT或车辆(控制)36小时16°C,然后转移到25°C诱导β表达与少量修改(如前所述20.]。蠕虫被归类为瘫痪,没有移动或只是把白金圈头轻轻地摸。麻痹得分每隔两个小时直到所有虫子都瘫痪了。三个生物复制的试验进行了60蠕虫每审判。

2.6.2。一个β全身的趋化功能障碍分析

一个β如前所述(执行全身的趋化性试验21]。鸡蛋CL2355或CL2122(控制应变)转基因菌株有或没有HT治疗16°C 36 h然后25°C 36 h。大约60蠕虫被放置在中心的趋化性琼脂板(9厘米)。在放置之前,1μl 0.25叠氮化钠和1μ有气味的l(0.1%的苯甲醛100%乙醇)被添加到盘子的一边(“引诱剂”点)。在相反的位置,1μl的控制有气味的东西(100%乙醇)和1μl(0.25添加了叠氮化钠。盘子被孵化1 h 25°C,然后,虫子的数量在每个象限(2厘米从斑点半径)得分。趋化性指数(CI)计算(CI =(引诱剂的蠕虫象限的虫子数量控制象限)/得分总数蠕虫)。

2.7。polyQ-Dependent瘫痪化验

培养在寿命试验,所述AM140转基因蠕虫培养有或没有HT被定义为瘫痪,如果他们未能前进在尾巴刺激如前所述[22]。三个独立试验的试验进行了60蠕虫每审判。

2.8。老年斑荧光分析

评估老年斑的积累,age-synchronized蠕虫(N2应变)治疗有或没有HT 7、12、17天。随后,虫子是麻醉和安装在载玻片上。动物被随机选中提交与GFP荧光显微法滤波器(Axio成像仪Z2,卡尔蔡司AG)、耶拿,德国)。考虑到很容易混淆强劲濒死绿色与增加自体荧光GFP蠕虫绿色自体荧光(通过GFP过滤器组)23),线虫的个体选择有强大的生命力和能够快速响应刺激。图片来自至少15蠕虫每组10倍的目标。ImageJ软件图像(NIH)是用于分析每个虫的平均像素强度四个独立的试验。

2.9。肠道脂肪沉积试验

正如前面建立的,油红O染色法被用来确定脂肪含量,但冻融的步骤都省略了24]。短暂,蠕虫在4%多聚甲醛固定,在60%异丙醇脱水,然后沾油红O染色解决方案12小时在黑人与温和的摇摆。存款肠道脂肪的成像40倍的单反相机(佳能Eos 5 d Mark II)和量化使用ImageJ软件(NIH)形象。三个独立的试验进行了试验与至少45野生型N2蠕虫。

2.10。运动分析

运动试验是在三个不同的生命阶段(初、中、和中后期)描述(25]。蠕虫观察和分类(类A、B和C)由一个立体显微镜根据蠕虫对刺激的反应。60蠕虫检测的运动行为一分钟后恢复期。三个独立的实验进行。

2.11。咽抽水试验

咽泵频率测量通过监测咽的移动终端灯泡立体显微镜下30年代(15蠕虫)。三个独立的实验中进行复制。

2.12。大肠杆菌OP50细菌生长试验

的细菌生长试验大肠杆菌如前所述(执行OP5024]。决心是OD600 12 h ( )。

2.13。样品由液相色谱表征加上四极飞行时间质谱(LC-Q-TOF-MS / MS)分析

LC-Q-TOF-MS / MS分析被用来调查样本组件。一个Eclipse + C18色谱系统是由( 1.8毫米,μ米,安捷伦)二元泵,脱气器,柱温箱,autosampler执行uplc1290 - 6540 b Q-TOF(美国安捷伦科技,帕洛阿尔托,CA)。HT的分离实现了在一个30分钟的线性梯度乙腈(a)和0.2%的甲酸超纯水(B),从5提高到95% B, B 2分钟维持在95%,4分钟postrun B .注射量是1 10%μl,流速为0.4毫升/分钟40°C。对在线TOF-MS和TOF-MS / MS分析,实验操作参数设置如下:喷嘴电压,500 V;除油船,65 V;气体流量、8 l / min;气体温度,300°C;和喷雾器,45 psi。碰撞能量被设定为0 eV -和正离子模式。质量扫描的范围 105 - 1700两种模式。使用安捷伦数据分析进行了大规模猎人定性软件(版本B.07.00)。准确质量扫描数据开采利用找到的分子特性,发现公式,找到有针对性的MS / MS和分子式发生器算法。

2.14。SOD-3:: GFP可视化和定量分析

评估SOD-3: GFP表达,CF1553蠕虫治疗有或没有HT 96小时(如前所述)(25]。的荧光SOD-3: GFP是使用荧光显微镜成像与合适的过滤器和10倍目标(Axio成像仪Z2,卡尔蔡司AG)、耶拿,德国)和分析使用ImageJ软件图像(NIH)全身地区(> 15蠕虫/试验中,共有3试验)。

2.15。DAF-16:: GFP可视化和非局部化分析

的亚细胞定位DAF-16: GFP, TJ356蠕虫治疗有或没有HT 96小时(如前所述)(26]。DAF-16的荧光::绿色荧光蛋白成像使用徕卡TCS SP8(布法罗格罗夫,IL)激光扫描共焦显微镜放大100倍(激发波长:488海里;发射波长:510 - 550 nm)。30每治疗蠕虫被得分为胞质,中间,和核。蠕虫在每个类的数量计算出至少三个生物复制。

2.16。统计分析

它被认为是一个统计上的显著差异 采用单向方差分析(Tukey-Kramer测试),其次是事后比较多重比较和独立样本 - - - - - -测试了两组比较(SPSS软件,版本16)。生存曲线进行了分析使用Mantel-Cox生存率较利用GraphPad棱镜(GraphPad棱镜,5.00版本的Windows)。使用两阶段过程有一个十字路口时存活曲线(27]。所有的数据表示为 ,计算三个独立的实验。不同的字母列表明值明显不同( )。存活曲线, , , 相比之下,控制检查(CK)组。

3所示。结果与讨论

3.1。秀丽隐杆线虫的HT对寿命的影响

首先,我们研究了HT的寿命的影响秀丽隐杆线虫。有趣的是,这三个测试的寿命曲线浓度(10 mg / ml, 30毫克/毫升,和50毫克/毫升)所有显示显著的改变相比对照组( 的生存率较10毫克/毫升和30毫克/毫升, 的生存率较50毫克/毫升),这表明HT样有延长寿命的好处秀丽隐杆线虫(图1(一))。此外,HT的长寿最重要的效应被发现在10毫克/毫升的浓度,这增加了意味着寿命20%(26.09天、21.70天)和最大寿命延长了7.50天(37.00天、29.50天)(表1)。很明显,HT可能延长的寿命秀丽隐杆线虫


基因型 治疗(毫克/毫升) 平均时间(1) 最长时间(2) %的效果(3) p价值(4)

N2 0 一个 一个 / /
10 b b 20. < 0.0001
30. ab b 16 < 0.0001
50 ab ab 8 0.0260
0(百草枯) 一个 一个 12 0.0034
10(百草枯) b b
0(热) 一个 一个 15 < 0.0001
10(热) b b
CL4176 0 一个 一个 16 < 0.0001
10 b b
AM140 0 一个 一个 9 < 0.0001
10 1 b b
VC433 0 / /
10
CF1038 0 / /
10

(1)平均时间= ,在哪里 是年龄范畴, 是虫子的数量,死于年龄区间( , ), 蠕虫的总数。(2)的最长时间是生存的时间分数= 0%。(3)%计算效果 ,在哪里 的平均时间和HT和蠕虫治疗吗 的平均时间控制。(4) 值的计算使用的生存率较比较治疗组和控制。

自从HT的最佳寿命扩展效应观察到剂量10毫克/毫升,我们进一步使用浓度调查和测试HT是否有不利影响后代的数量。如图1 (b),没有显著差异在日常的后代数量和总数量的后代与控制或HT蠕虫治疗,表明HT延迟或抑制生育能力。所以HT没有产生明显的reprotoxicity蠕虫和HT的有利影响寿命可能是独立的生殖能力秀丽隐杆线虫剂量的10毫克/毫升。

3.2。HT对氧化的影响,热,Proteotoxic强调在秀丽隐杆线虫

大量的可靠的证据表明,长寿是常常伴随着抵抗环境压力的增加,阻力和压力可能是一个寿命的决定性因素秀丽隐杆线虫(28]。首先,我们研究了两个应力条件,全面评估强调宽容,该文就近年来关于百草枯所致氧化发生的应力和热应力。考虑到大量的线虫的弑母的死亡(“包装”)会发生如果线虫暴露于百草枯在生殖时期(29日),氧化应激是在生殖时期(第十天),以避免弑母的死亡。热应力测量在生命周期的第四天,成人虫生命力的高峰期。HT治疗的生存曲线是不同于对照组( 的生存率较氧化应力和热应力,分别数据2(一个)2 (b))。在氧化应激和热应力分析的保护,HT治疗显著增加平均寿命(分别延长12个和15%,表1扩展)和最大寿命(从21.67到23.35天,7.50天,9.00天,分别表1)。这意味着HT有可能防止压力。

越来越清楚的是,蛋白质错误折叠,这是由于细胞压力,导致细胞功能障碍(30.]。当这些事件发生在神经元,他们随着时间的推移可能会导致神经退行性疾病(30.]。其次,确定HT proteotoxic压力的影响,我们应用转基因秀丽隐杆线虫CL4176,它表达了一个聚合淀粉样β蛋白(3-42)肽(Aβ(3-42))在肌肉组织(31日]。在人类,β(3-42)聚合被认为是阿尔茨海默病的主要病理因素(32]。我们发现HT治疗组表现出明显右移瘫痪在CL4176曲线( 生存率较,人物2 (c)),建议整体瘫痪显著延迟时间。HT治疗显著延迟平均麻痹时间16%,与最大麻痹时间从14.33到15.44小时CL4176(表1)。随后,我们研究了HT的效果β使用CL2355应变表达人体全身的神经毒性β1-42在神经细胞(一种现象导致趋药性的功能障碍)。如图2 (d)的CI空白应变CL2122(没有一个β表达式)低于未经处理的β应变CL2355。这些数据表明,CL2355线虫神经元敏感诱食剂苯甲醛中遭受更大的伤害。引人注目的是,CL2355应变处理的CI HT比未经处理的CL2355高出很多。这些结果显示,HT对神经的影响β全身瘫痪秀丽隐杆线虫。此外,另一个转基因AM140线虫模型应用。受到多麸醯胺酸AM140虫表达(polyQ)蛋白在体壁肌肉细胞,这是一些神经系统疾病的特征(32]。类似的抑制麻痹效果也在AM140观察(图2 (e))。在polyQ-dependent瘫痪,不仅展出了一个瘫痪曲线明显不同的HT-treated AM140蠕虫,但也意味着麻痹时间和最大麻痹时间明显延长(图2 (e)和表1)。集体、HT授予压力抵抗不同的压力,包括氧化应激、热应力,proteotoxic压力,可能会缓解蛋白质错误折叠和维持体内平衡。

3.3。HT对减少脂肪堆积的影响和秀丽隐杆线虫的老年斑

肥胖的患病率急剧上升,影响健康长寿在整个生命周期(33]。因为过多的脂肪积累对生活质量有严重的影响,我们研究了HT的脂肪堆积的影响秀丽隐杆线虫。HT-treated线虫的染色强度明显低于对照组,进行油红O染色(图3(一个))。使用ImageJ染色强度的定量分析,结果表明在HT治疗组降低23%(图3 (b))。建议HT有可能减少脂肪积累秀丽隐杆线虫

老化的一个保守的特点是年龄色素的积累随着年龄(34]。这些荧光化合物包括自体荧光脂褐质和先进的糖化终端产品(34]。年龄的积累色素,衰老的生物标志物,健寿的秀丽隐杆线虫全面评估在不同阶段(7天、12和17代表早期,中间,和中后期阶段,分别)。在野生动物、年龄色素积累随着年龄(数字3 (c)3 (d))。然而,HT治疗显著减轻色素的沉积年龄19%,21%,和16%,分别在不同阶段(数字3 (c)3 (d))。

3.4。HT在秀丽隐杆线虫行为的流动性的影响

我们进一步研究了对流动行为的影响。首先,根据三个层次运动进行了研究。我们专注于运动早期,中期,和中后期阶段。17天,与对照组相比,HT治疗组显著增加自由虫子的数量但降低个体的数量不可能完整的系统性运动刺激后(图4(一))。第二,咽虫喂养的主要器官,所以它的肌肉收缩影响细菌和HT的吸收和代谢35]。我们进一步研究了咽的频率跳动,食物摄入量的标记,在三个不同的时期。引人注目的是,没有观察到显著差异之间的治疗和控制组织(图4 (b))。考虑到HT的抗菌潜力,我们推测,缺乏改善咽泵频率蠕虫的生长抑制大肠杆菌OP50,作为食品供应的标志秀丽隐杆线虫。然而,这种投机的结果表明,发展以来被拒绝大肠杆菌OP50 9小时(图后并没有受到影响4 (c))。显然,HT治疗可以显著提高线虫的运动,但没有影响摄食行为如前所述木槿sabdariffal .提取(36]。它还表明,卡路里限制的效果可能不是HT的抗衰老的关键原因。

3.5。HT对延缓衰老的影响可能归因于它的组件

为了进一步分析HT的成分,LC-Q-TOF-MS /女士。代表总离子色谱图(TIC) HT图所示S1。20个化合物初步确认在HT根据先前的报道(18多酚和两个萜类化合物,表2)[5]。主要成分是茶多酚,比如rosmarinic酸,isochlorogenic酸B, C isochlorogenic酸,甘草酸,protocatechualdehyde。在之前的调查(37),我们发现rosmarinic酸提高抗氧化活性和健寿秀丽隐杆线虫。Isochlorogenic酸,金银花的生物活性成分研究。,has a wide range of biological activities, including antioxidant, antibacterial, and antiviral [38]。引人注目的是,研究表明,isochlorogenic B酸对肝纤维化有保护作用与非酒精性脂肪肝炎小鼠。和isochlorogenic酸C发现预防感染肠病毒71年通过调节氧化还原内稳态的谷胱甘肽(39]。甘草酸和protocatechualdehyde已经被证明具有强大的抗氧化作用,它被认为是有前途的潜在的人类延缓衰老的化合物(40,41]。一般来说,天然抗氧化剂抗衰老的被认为是一个有效的策略。几项研究表明,补充抗氧化剂从自然资源,如植物提取物,可以延长寿命的许多生物模型(42];然而,抗氧化剂的效果是否可以作为一个指标的长寿剧照尚不清楚。例如,双关等人指出,没有内在的抗氧化活性和寿命之间的关系的线虫暴露于六个植物提取物(43]。在这项研究中,我们也想知道是否HT-mediated长寿在线虫与抗氧化活性增加有关。我们发现HT该文就近年来关于百草枯所致氧化应激发生的线虫抗性增强。HT对延缓衰老的影响可能是由于优秀的耐氧化应激能力和改善健康潜在的组件。但HT是否延长寿命的主题通过改善抗氧化防御机制值得进一步讨论。


RT(分钟) 质量 Abund 结构百分比 公式 Diff (ppm) 重大IonMz 初步鉴定

7.045 516.1273 354272年 6.00944 C25H24O12 1.11 515.1202 异构di-O-caffeoylquinic酸
7.625 404.1326 150559年 2.5539 C17H24O11 1.72 403.1253 Secoxyloganin
8.569 610.1543 160513年 2.722748 C27H30.O16 1.56 609.1472 芦丁
8.793 464.0954 150392年 2.551067 C21H20.O12 -0.14 465.1029 异槲皮苷
8.901 448.1006 186538年 3.164204 C21H20.O11 0.01 449.1079 Trifolin
8.909 462.0797 102139年 1.732562 C21H18O12 -0.21 463.0872 黄岑素
8.909 154.0266 102139年 1.732562 C7H6O4 -0.1 463.0872 原儿茶酸
9.273 594.1594 247027年 4.190266 C27H30.O15 1.53 593.1523 1-Hydroxybenzotriazole
9.274 198.0528 159629年 2.707753 C9H10O5 -0.02 595.1658 Syringic酸
9.298 516.1279 602707年 10.22359 C25H24O12 2.13 515.1208 Isochlorogenic酸C
9.431 138.0317 446001年 7.56542 C7H6O3 0.17 137.0244 Protocatechualdehyde
9.513 516.1276 243848年 4.136341 C25H24O12 1。6 515.1204 Isochlorogenic酸了
9.803 718.1547 173276年 2.939244 C36H30.O16 1.81 717.1476 Salvianolic酸乙
9.944 516.1277 666790年 11.31062 C25H24O12 1。7 515.1206 Isochlorogenic酸乙
10.11 360.0859 755269年 12.81147 C18H16O8 3.75 719.1636 Rosmarinic酸
10.59 418.127 192063年 3.257924 C21H22O9 1.38 417.1198 甘草甙
10.773 446.0847 275568年 4.674401 C21H18O11 -0.4 447.0921 黄芩苷
10.797 718.1545 229366年 3.890686 C36H30.O16 1.56 717.1473 Salvianolic酸E
11.477 592.1801 148132年 2.512731 C28H32O14 1.58 637.1786 Linarin
14.94 822.4041 549030年 9.313078 C42H62年O16 0.32 823.4114 甘草酸

3.6。SOD-3 HT对蛋白表达的影响::GFP在秀丽隐杆线虫

线粒体铁/锰超氧化物歧化酶SOD-3,使用ROS作为衬底产生细胞损伤的物质转化为更安全的化合物(44]。探索SOD-3健康福利的贡献由HT,我们应用一个SOD-3:: GFP记者应变CF1553 SOD-3可视化的表达。HT-treated组显示更高强度的SOD-3:: GFP表达比对照组(数字5(一个)5 (b))。为了进一步验证是否基因sod-3参与HT-mediated长寿,我们测量的寿命sod-3零变异VC433。符合这个结果,我们的结果表明,寿命延长是完全废除sod-3突变株,露出一个SOD-3-dependent机制HT-mediated长寿(图5 (c))。因此,我们推测,细胞内压力减轻的HT呈正相关,增加SOD-3表达式,这降低了细胞的内在压力来维持体内平衡(45]。

3.7。HT的影响在秀丽隐杆线虫DAF-16的亚细胞定位

秀丽隐杆线虫转录因子DAF-16,哺乳动物的直接同源FoxO3a(也称为FKHR-L1),是一个关键的监管机构的寿命以及抗氧化或热应力响应胰岛素/胰岛素样生长因子信号通路(IIS) [46]。和sod-3是一种直接的下游基因吗daf-16(44]。调查是否daf-16可以通过HT在延长寿命的研究中发挥作用,我们研究了HT作用于的寿命吗daf-16突变体(GR1307)。HT未能延长的寿命daf-16缺失突变体,这表明DAF-16可能是长寿的一个关键因素在HT-dependent长寿机制(图6(一))。考虑到核本地化DAF-16 DAF-16转录激活的前提条件是(47),我们检查了HT的影响的核本地化DAF-16利用DAF-16:: GFP转基因蠕虫TJ356。发现HT DAF-16亚细胞分布的影响和诱导易位DAF-16从细胞质到原子核(数字6 (b)6 (c))。具体来说,HT治疗诱导增加核能和中间DAF-16:: GFP易位,特别是核本地化从20%到57%(数据6 (b)6 (c))。与此同时,胞质DAF-16: GFP比率从46%下降到20%(数据6 (b)6 (c))。因此,这些结果共同表明HT-mediated改善寿命和健寿会积极与IIS通路,可以激活目标基因sod-3通过调节核DAF-16的本地化秀丽隐杆线虫

4所示。结论

在这项研究中,我们发现,10毫克/毫升HT没有产生明显的毒性蠕虫、延长寿命和改善的健康状况秀丽隐杆线虫没有显著的生理功能受损。首先,寿命提高了HT在不影响生育能力。与此同时,压力阻力和proteotoxicity-induced麻痹都显著提高。此外,HT显著抑制脂质和年龄色素的积累。最后,我们初步阐明HT-mediated增进健康效应与增加SOD-3呈正相关表达式和增强核易位的DAF-16 IIS-dependent方式。总之,这项工作提供了第一个洞察HT的健康促进作用和阐发其潜在机制。进一步的研究在小鼠模型或人类摄入膳食HT值得未来研究。

缩写

一个β: 阿尔茨海默β淀粉样蛋白
秀丽隐杆线虫: 秀丽隐杆线虫
置信区间: 趋化性指数
CK: 控制检查
大肠杆菌OP50: 大肠杆菌应变OP50
IIS: 胰岛素/胰岛素样生长因子信号
LC-Q-TOF-MS /女士: 液相色谱加上四极飞行时间质谱分析
NGM: 线虫生长培养基
polyQ: Polyglutamine
抽搐: 总离子色谱图
HT: 花草茶。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果中包括文章和文件的补充信息。

伦理批准

这篇文章不包含任何与人类或脊椎动物研究。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

作者的贡献

CL设计进行研究,分析数据,进行统计分析,起草了手稿。XZ和CZ进行研究、分析数据,并进行统计分析。我们负责图表制作。YC曹(勇)构思实验和修订后的手稿。YC(陈Yunjiao)提供了重要的知识贡献,设计和监督研究,并修改了手稿。所有作者批准了最终版本的手稿。

确认

这项研究得到了国家自然科学基金(31700501)、广东省创新和创业研究小组计划(2019 zt08n291),和广州的科技计划项目(201803010105)。我们非常感谢清华教授周(生物医学转化研究学院、暨南大学、广东省中国)给TJ356转基因蠕虫和VC433 CF1038突变株。另一个秀丽隐杆线虫提供的菌株秀丽在明尼苏达大学的遗传学中心。

补充材料

图S1:代表HT的抽搐。表S1: HT中各种化学成分的分析。(补充材料)

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