钙离子之间的串扰和醛固酮导致炎症、细胞凋亡,通过AIF-1 / NF - VSMC的钙化κB通路尿毒症

文摘

血管钙化是维持血液透析患者的主要并发症。研究已经证实,钙化主要发生在血管平滑肌细胞(VSMC)的血管媒体。然而,VSMC钙化的确切发病机制仍不清楚。这项研究表明,钙和醛固酮之间的串扰通过同种异体移植物炎性因子1 (AIF-1)途径有助于钙稳态和VSMC钙化,这是一个小说在尿毒症血管钙化的机制。在活的有机体内结果表明,醛固酮和炎症因子水平的增加钙化动脉,而周边血液中没有观察到显著变化。然而,炎症因子的表达显著增加外周血的尿毒症的老鼠没有主动脉钙化和逐渐恢复正常水平恶化的主动脉钙化。在体外结果表明,钙离子之间的相互作用,醛固酮在巨噬细胞或VSMC。反过来,钙诱导合成醛固酮,醛固酮也引发了细胞内钙含量upregulation在巨噬细胞或VSMC。此外,激活巨噬细胞诱导炎症、细胞凋亡和VSMC的钙化。激活VSMC也对未经处理的VSMC的类似的效果。最后,AIF-1增强醛固酮——或者calcium-induced VSMC钙化,和NF -κB抑制剂抑制VSMC AIF-1的效果。这些在活的有机体内和在体外结果表明,钙离子之间的串扰和醛固酮中扮演一个重要的角色在VSMC钙化通过AIF-1 / NF -尿毒症κB通路。当地钙化VSMC诱导VSMC周围相同的病理过程,从而导致钙稳态和加速血管钙化。

1。介绍

心血管疾病引起的血管钙化的主要并发症是慢性肾脏疾病(CKD),特别是在维护血液透析(磁流体动力)患者(1- - - - - -3]。越来越多的证据表明,醛固酮中扮演着重要的角色在血管钙化,和醛固酮受体拮抗剂减轻血管钙化(4]。然而,由于副作用如血钾过高、醛固酮受体拮抗剂在CKD的使用是有限的。因此,阐明醛固酮在血管钙化的机制将提供一个理论依据开发新的可行的解决方案。

醛固酮是参与各种组织的炎症5,6]。我们之前的研究也相继证实,醛固酮导致炎症的不同组织参与慢性肾病,如心脏,肾脏,和腹膜7]。这表明,醛固酮是一种慢性炎症的重要原因。研究表明,炎症反应和巨噬细胞激活下游醛固酮的目标。醛固酮激活人类巨噬细胞和诱导炎症反应(8]。然而,醛固酮上调炎症因子的表达(IL-16和CTLA4)在人类通过MR-dependent VSMC通路(9,10]。醛固酮受体拮抗剂缓解炎症反应(11vec()和障碍12]。然而,醛固酮也通过那个独立通路对VSMC产生促炎的影响,这是一个快速和nongenomic响应(9]。此外,醛固酮的快速和nongenomic效果不被对手先生13,14]。在病理条件下,醛固酮抑制的表达的肌浆网钙泵VSMC [15),导致细胞内钙超载、细胞损伤,细胞凋亡,钙化(16]。基督和皮特(17)提出,醛固酮调节淋巴细胞钙离子浓度,vec, VSMC。然而,细胞外钙离子对VSMC中醛固酮合成的影响还没有被调查。高et al。18]表明,细胞内和细胞外钙离子可以调节肾上腺醛固酮的合成。这表明,细胞外钙也能影响醛固酮的合成。因此,有必要确认VSMC中醛固酮和钙离子之间的相互作用。

越来越多的证据表明,血管钙化的过程类似于炎症反应(19,20.]。有普遍的炎症和心脏瓣膜钙化及磁流体动力患者的主动脉。然而,炎症和异位钙化(血管钙化)之间的关系尚不清楚。血管钙化慢性肾病主要发生在动脉和涉及的媒体巨噬细胞之间的相互作用,vec, VSMC。激活巨噬细胞坚持vec和跨内皮迁移到参与血管钙化(21]。炎症等因素的表达il - 1β,il - 6, MCP-1, THF-alpha显著增加大鼠模型血管钙化的22),这些直接或间接参与血管钙化(23]。新和Aikawa之前定义的血管钙化慢性炎性疾病(24]。

同种异体移植物炎性因子1 (AIF-1)是一个类ef - hand域及其钙结合蛋白。此外,这类ef - hand域结合钙离子的能力。当这类ef - hand结合钙离子,它经历了一个构象的变化,导致AIF-1激活(25,26),导致巨噬细胞激活和血管炎症(27]。萨默维尔等人提出,AIF-1是inflammation-responsive protein-activated VSMC在AIF-1超表达小鼠(28]。在绑定到Ca^{2 +}AIF-1被激活,诱发炎症、细胞凋亡、氧化应激等病理过程。在正常生理条件下,AIF-1不是表达VSMC但外源性刺激后迅速调节(29日- - - - - -31日]。AIF-1调节细胞周期蛋白的过度表达,和细胞骨架蛋白导致细胞迁移和表型转换32),导致血管炎症反应和动脉粥样硬化。AIF-1介导atherogenesis-initiated信号和激活的巨噬细胞(33]。AIF-1的结构,编码基因位于染色体的主要组织相容性复合体第三类地区6 . 3,这也是人口稠密的各种炎症反应蛋白基因等TNF-α,TNF-β,NF-κB基因(34,35]。NF -κB在炎症反应起着至关重要的作用。已经证实,慢性炎症反应通过NF -介导的κB加速血管钙化(36)和参与VSMC钙化的发病机制37]。因此,可能存在AIF-1和NK -之间的交互κB在炎症和VSMC的钙化。

临床,观察到总钙含量是正常的,高或低磁流体动力正常患者血清钙浓度(38,39]。因此,血清钙浓度不能反映总钙含量(40]。钙平衡更复杂的慢性肾功能衰竭患者。先前的研究已经证实,在大多数情况下,总钙含量高的永磁病人和与肾钙排泄,透析液钙浓度、继发性甲状旁腺功能亢进,维生素D代谢产物(41- - - - - -43]。积极的钙平衡容易导致钙盐沉积在软组织,特别是在动脉。因此,血管钙化在磁流体动力的病人也可能会导致钙稳态。

因此,醛固酮,AIF-1 / NK -κB,炎症参与钙在磁流体动力平衡和血管钙化。然而,这种现象的潜在机制仍不清楚。我们目前的研究显示,钙离子之间的串扰和醛固酮AIF-1 / NK -介导的κB通路,从而导致炎症、细胞凋亡和VSMC的钙化。

2。材料和方法

2.1。病人

按照临床研究项目哈尔滨医科大学的伦理委员会批准,1964年赫尔辛基宣言的道德标准,我们随机收集了2毫米丢弃桡动脉从40磁流体动力病人自体动静脉瘘手术第一次和20名患者没有任何潜在疾病由于紧急前臂创伤手术。然后,收集到的血管标本在4%多聚甲醛固定,嵌入在石蜡,用于后续分析。同时,丢弃所有登记患者的血清样本收集和低温贮藏后常规测试。所有的患者签署知情同意书允许使用手术丢弃的血管和术前血清标本。

2.2。腹主动脉钙化评分

腹主动脉钙化(AAC)评估所有登记患者的侧腹部x光照片,其中包括11 - 12胸椎,1 - 5腰椎,1 - 2骶椎骨中描述的一项研究[44]。腹部动脉是一个管状结构的脊柱。腹主动脉钙化的对应1 - 4腰椎是由两个独立得分蒙蔽放射科医生,和每个主动脉的两个分数的平均值作为最终的得分。评分方法基于钙化的范围如下:没有钙化,0分;<动脉长度的1/3,1分;1/3和2/3的动脉之间的长度,2分;和> 2/3的动脉长度,3分。AAC在每个病人的总得分范围从0到24分。根据AAC得分和线的分割方法研究中,AAC≤4 noncalcification或轻度钙化, 温和的钙化,AAC≥16是严重钙化(45]。

2.3。动物模型

价格等人先前表明,合成的饮食(2.5%蛋白质的饮食含有0.75%)腺嘌呤产生一致的和戏剧性的内侧钙化在成年大鼠4周内(46]。此外,我们之前也验证了该方法的可行性[47]。因此,尿毒症与主动脉钙化的老鼠模型建立了喂养SD大鼠(八周大SD大鼠,重量范围:150 - 200克,男性和女性都同样分裂)与calcification-induced饮食(2.5%的蛋白质的饮食含有0.75%腺嘌呤)2、4、8、12周之前的研究中描述(46,47]。老鼠被分为两组:模型组再辅以calcification-induced饮食;治疗组患者给予eplerenone(50毫克/公斤·d,辉瑞公司),这是一个选择性的盐皮质激素受体拮抗剂。在实验的最后,老鼠麻醉(戊巴比妥钠150毫克/公斤)腹腔内注射安乐死。胸主动脉和血液标本收集尽快从每个鼠(47]。整体动物实验研究显示协议通过哈尔滨医科大学动物伦理审查委员会和坚持原则的指导所发表的实验动物保健和使用由美国国立卫生研究院。未经处理的大鼠被用作控制。

2.4。细胞培养

大鼠巨噬细胞(Sciencell研究实验室,圣地亚哥,加利福尼亚,美国)和VSMC(美国写明ATCC)是在一个特殊的培养基培养每个细胞株根据制造商的指示。confluency细胞达到80%时,细胞培养基被替换为无血清培养基细胞同步24 h。然后,细胞暴露在高浓度的钙离子(CaCl₂1.5更易/ L)或醛固酮(100 nM,σ,美国)12 h, 24小时和48小时。未经处理的细胞培养上清液的细胞治疗与醛固酮或钙离子。细胞和上层的收集和分析。钙化VSMC的评估使用红色年代染色试验(Sciencell研究实验室、美国)。

2.5。质粒结构和转染

AIF-1基因超表达构建生成所述在我们之前的研究47]。AIF-1编码序列是放大和subcloned pcDNA3.1向量(表达载体),生成AIF-1超表达载体(pcDNA3.1-AIF-1)。通过质粒pcDNA3.1-AIF-1转染到细胞转染剂(riboFECT™CP,中国)。所有的构建质粒测序验证。

2.6。西方墨点法

组织或细胞的总蛋白提取使用总蛋白质提取工具和量化BCA工具包(Solarbio生命科学,中国)。50微克的总蛋白被加载到12% sds - page凝胶和孤立。然后,在sds - page凝胶分离出蛋白质转移到PVDF膜(美国微孔,Billerica的)。膜是孵化为西方墨点法阻断缓冲区(Solarbio生命科学、中国)在室温下密封袋1 h,然后主要抗体AIF-1, NF -κB p65 p-NF -κB p65 (Abcam Ser536稀释1:1000年,英国),CYP11B2 CCR-2,β肌动蛋白(圣克鲁斯稀释1:1000年,美国)在一夜之间在4°C。主要抗体是移除后,膜被山羊anti-rat孵化或山羊anti-rabbit抗体(稀释1:10000年,DyLight®800,免疫试剂、美国)在室温下1 h和洗Tris-buffered盐水渐变(TBST)。乐队是可视化和分析的奥德赛成像系统(美国LICOR生物科学)。

2.7。组织病理学分析钙沉积

人类丢弃的径向动脉或大鼠主动脉和4%多聚甲醛固定,石蜡嵌入式,切割(4微米厚)。钙化血管组织的部分是由冯Kossa装备根据制造商的指示。然而,VSMC在6-well板固定在4%多聚甲醛。细胞钙化评估了茜素红染色设备根据制造商的指示。最后,染色评估,在显微镜下显微照片被抓获(日本尼康Corp .)。

2.8。量化的钙含量和高山活动

或主动脉VSMC在HNO溶解₃使用组织和细胞,钙含量测定比色法包(Genmed科学,美国)如前所述[48]。随后,钙离子的测量是根据总蛋白质标准化。此外,主动脉的高山活动组织和VSMC测量使用一个高山比色测定工具包(英国Abcam),根据制造商的协议。

2.9。免疫组织化学染色进行组织学分析

标本的废弃人体桡动脉与10%缓冲福尔马林固定石蜡和嵌入式,准备和4-micron组织部分。石蜡切片脱蜡,内源性过氧化物酶活动被用3%过氧化氢在室温下10分钟(黑暗)。抗原修复的微波和阻塞正常山羊或兔血清(同源第二抗体动物血清)37°C,持续15分钟。然后,组织部分与初级孵化抗体CYP11B2,先生,AIF-1 (Abcam 1: 1000年,英国)在一夜之间在4°C。与PBS冲洗后,组织部分与山羊anti-rat孵化或山羊anti-rabbit抗体在37°C 1 h。最后,immunocomplexes沾轻拍,在显微镜下观察(日本尼康Corp .)。免疫组织化学染色法由两名有经验的独立评估,盲目的病理学家。基于相对免疫染色强度,结果分为四类:“0”为负数,“+ 1”温和,温和的“+ 2”,“+ 3”一样强烈。最后结果取平均值。

2.10。巨噬细胞表型(M1 / M2)分析

巨噬细胞M1传授促炎效应,而M2巨噬细胞具有抗炎作用。有人建议,巨噬细胞表型的交换(M1 / M2)与慢性低度炎症有关。因此,整体平衡M1和M2巨噬细胞与炎症的平衡状态。M1 / M2巨噬细胞的比率可能因此被利用在预测水平的炎症。简单地说,400年μ血液样本被L和离心机在4°C,和包含红细胞的颗粒收集和4%甲醛固定。M1巨噬细胞和抗体标记CD68、CCR2和M2巨噬细胞被标记抗体CD163和CX3CR1。随后,血液中的M1 / M2巨噬细胞的比例被流式细胞术检测并计算。

2.11。细胞凋亡检测

实验细胞收获和洗两次PBS和化验的膜联蛋白V-FITC /π凋亡检测装备(北京Solarbio科技有限公司有限公司,中国)。简单地说,300年μL(绑定缓冲了resuspend细胞,和5μL的膜联蛋白V-FITC是补充道。在室温下混合后,细胞培养,持续15分钟。5毫升的π添加5分钟前检测。最后,200年μL 1×绑定缓冲了。细胞凋亡率分析了流式细胞术(BD Accuri C6,美国)。相同的并行实验重复三次。

2.12。ELISA

醛固酮的含量,高灵敏度的c反应蛋白(hs-CRP) MCP-1,和AIF-1血清或浮在表面的检测使用酶联免疫试剂盒,根据制造商的指示。

2.13。统计分析

采用SPSS 19.0软件的所有实验数据的统计分析。正态分布的测量数据的 ,和非正态的分布数据表示为中间值和四分位间距。单向方差分析或Wilcoxon rank-sum测试是用于比较组间,卡方检验是用于列举数据。差异与 被认为是具有统计学意义。

3所示。结果与讨论

3.1。磁流体动力患者的血清的临床病理因素

因为钙和磷的主要原材料是钙化,这些发挥关键作用在血管钙化(49]。表1显示Ca的水平^{2 +},高山活动,巨噬细胞极化(M1 / M2), hs-CRP,醛固酮,AIF-1, MCP-1,血清中白蛋白没有显著改变除了磁流体动力磷酸患者动脉钙化。这表明没有明显异常指标在磁流体动力患者的外周血中,这是早期研究的结果不一致的(50]。这种差异的一个可能的解释是血管钙化的程度。我们建议的水平钙、醛固酮、和炎症在外周血和局部血管组织有所不同。

众所周知,钙稳态是由肠钙吸收,骨钙重构和肾钙排泄。特别是,钙代谢更复杂的CKD患者或磁流体动力(51,52]。例如,在慢性肾病阶段2 - 5,酸中毒或肾小管损伤导致管状钙重吸收减少,和1,25 (OH)₂D合成减少或高磷血症导致肠钙吸收减少(53- - - - - -55]。管状钙重吸收和肠钙吸收减少导致低钙血症。然而,磁流体动力促进积极的钙平衡,导致血钙过多,有以下原因:肾小球滤过率下降导致肾钙排泄减少,进步的继发性甲状旁腺功能亢进导致骨吸收的增加和管状钙重吸收,对含钙磷酸盐粘结剂的使用或维生素D代谢产物会导致肠钙吸收,增加和透析液中钙离子存在56]。骨头不能缓冲过量的钙(57),因此存储在软组织(异位钙化血管钙化等),这有利于维持血清钙水平。因此,血管钙化可能也有助于钙平衡磁流体动力的病人。已经证实,钙沉积在血管壁是一个活跃的过程,但确切的机制尚不清楚。基于之前的研究,我们假设可能超出正常水平的钙离子激活巨噬细胞释放炎性因子在磁流体动力患者中,进而导致炎症和VSMC的钙化。

3.2。生产过剩的醛固酮和炎症因素钙化动脉

有显著的异位钙化主动脉、冠状动脉,和磁流体动力患者心脏瓣膜58,59]。血管钙化是心血管意外的主要原因以及动静脉瘘的损失。调查动脉钙化的发病机理,我们评估动脉钙化基于AAC分数和桡动脉的组织形态学,被抛弃在自体动静脉内瘘的操作。与健康人相比,AAC分数显示40磁流体动力明显腹主动脉钙化的病人。在40磁流体动力患者,11例(27.5%)患者轻度钙化,19例(47.5%)患者有中度钙化,10例(25%)患者有严重钙化。此外,冯Kossa染色的结果清楚地表明存在的钙沉积的桡动脉磁流体动力患者(数字1(一)和1 (b))。同时,醛固酮系统(CYP11B2)先生和炎症因子(AIF-1)显著调节钙化桡动脉和与钙化(数据的严重程度有关1 (c)- - - - - -1 (h)、表2)。失调的矿物质代谢促进动脉钙化在尿毒症患者(60]。数据从磁流体动力明显动脉钙化患者显示没有明显增加的血钙水平,醛固酮和炎症因素导致血管钙化。它也间接表明,血管钙化发生在当地的血管。此外,本研究证实,醛固酮合酶和AIF-1在钙化患者桡动脉的磁流体动力AAC≥5。

尿毒症的鼠模型中有相似的变化与主动脉钙化。图2(一个)显示显著主动脉钙化尿毒症的老鼠。积极的钙平衡可能会导致钙盐沉积在软组织,包括动脉墙壁,和,因此,可能预示着血管钙化的严重性(9,47,61年]。可以评估血管钙化钙含量。与此同时,CYP11B2,先生,AIF-1,NF-κB,CCR-2在主动脉钙化明显调节(数字2 (b)- - - - - -2 (g))。盐皮质激素受体拮抗剂治疗预防和减轻主动脉钙化在老鼠模型中。这些发现表明,醛固酮系统的本地生产过剩(CYP11B2)先生和炎症因素(AIF-1, NF -κB, MCP-1和CCR-2)导致钙代谢及血管钙化。

AIF-1是一个重要的炎症因子,导致炎症,与多种疾病相关(62年]。然而,AIF-1是否也参与了血管钙化仍不清楚。如鼠模型结果所示,AIF-1-related炎性因子在血液循环增加主动脉钙化和减少主动脉钙化。然而,AIF-1-related炎症因子的表达在主动脉钙化显著调节。这个观察表明,系统性炎症影响VSMC的开始钙化,而当地的动脉壁炎症导致的不断进展VSMC钙化。说明动脉的炎症的发病机制可能有助于减轻VSMC的钙化63年]。

在CKD维持钙平衡是一个复杂的过程。而低钙血症常见于nondialysis CKD患者积极的钙平衡可能会遇到在磁流体动力病人40,51,55,64年,65年]。内侧动脉层可以容纳大量的钙,我们建议血管钙化可能导致磁流体动力患者的钙平衡。然而,动脉钙化的长期持久性也会导致心血管事故。有人建议,当地的醛固酮和AIF-1参与桡动脉钙化。研究也表明aldosterone-induced炎症反应在多个细胞,导致肝纤维化、钙化(66年,67年]。然而,醛固酮引起的炎症机制和AIF-1 VSMC需要进一步调查。

3.3。相互作用的钙离子和醛固酮炎症,VSMC凋亡,钙化

尽管研究已经证实,有一个钙离子之间的相互作用和醛固酮在许多细胞,血管钙化过程中其确切作用尚不清楚。阐明钙离子的作用,醛固酮在炎症、细胞凋亡,VSMC的钙化,我们培养的VSMC在体外如下。当VSMC暴露在高浓度的钙离子(CaCl₂1.5更易为0 h / L), 12小时、24小时、48 h,而0 h,钙化结节形成和VSMC凋亡显著增加24小时和48小时后(数字3(一个)和3 (b))。此外,醛固酮的生产、AIF-1 NF -κ活动,MCP-1, CCR-2钙化VSMC调节(数字3 (c)- - - - - -3 (h))。反过来,当VSMC被暴露于醛固酮(奥尔多,100海里)12 h, 24小时和48小时(图4),细胞内钙离子的含量,AIF-1, NF -κB活动、MCP-1 CCR-2增强在24小时和48 h与12 h(数字4(一)- - - - - -4 (f))。相比之下,一个盐皮质激素受体拮抗剂治疗抑制炎症,VSMC凋亡,钙化。这些结果表明,钙离子之间的相互作用和醛固酮导致炎症,VSMC凋亡,钙化。AIF-1 / NF -κB / MCP-1 / CCR-2-pathway可能调解钙离子之间的串扰和醛固酮。

3.4。激活巨噬细胞诱导VSMC的引发炎症和钙化

以前的在体外和动物研究已经证实,慢性炎症引起醛固酮参与血管钙化在尿毒症。临床研究证实,重要动脉钙化发生在磁流体动力的病人。仍然没有明显的巨噬细胞表型交换(M1 / M2),炎症因子,在外周血和醛固酮水平。先前的研究已经证实,巨噬细胞极化(M1和M2)中扮演一个重要的角色在炎症68年,69年]。M1 / M2的比例有助于预测慢性炎症。表1表明,巨噬细胞(M1 / M2)和炎症因子在尿毒症患者血液循环明显血管钙化没有增加。然而,这些显著增加的早期尿毒症的老鼠没有动脉钙化和逐渐恢复正常水平动脉钙化发生和进展(表3)。然而,醛固酮和炎症因子的表达在动脉钙化的调节。这些结果表明,醛固酮和炎症在动脉血管钙化的发展发挥重要作用。我们的团队推测,系统性炎症不是动脉钙化的主要原因,和局部炎症可能促进血管钙化的进步。失调calcium-activated导致巨噬细胞释放炎性因子和醛固酮诱导细胞内钙离子超载、细胞损伤、炎症、细胞凋亡和钙化。激活VSMC合成和分泌醛固酮和炎症因素放大炎症信号VSMC的巨噬细胞和诱导钙离子存储。

探讨巨噬细胞和VSMC在血管钙化的作用,治疗VSMC的上层清液培养的巨噬细胞,刺激的高浓度的钙离子。图5表明,激活巨噬细胞的上清液促进钙化结节形成,诱发细胞内钙离子超载和上调表达的醛固酮,AIF-1, NF -κB、MCP-1 CCR-2 VSMC(数字5(一个)- - - - - -5 (c))。未经处理的VSMC培养了VSMC的上层清液受到激活巨噬细胞的上清液。激活VSMC的上层清液也促进钙化结节形成,激活醛固酮,诱导VSMC的炎性因子的表达(数字5(一个),5 (d),5 (e))。这些结果表明,激活VSMC拥有能力类似于未经处理的VSMC激活巨噬细胞。然而,没有明显的变化在醛固酮和巨噬细胞炎症因素暴露VSMC的上层清液激活。这表明,VSMC没有直接影响巨噬细胞的活性。这些结果表明,巨噬细胞激活高浓度的钙离子诱导炎症、细胞凋亡和钙化VSMC通过醛固酮/如果−1 / NF -κB通路。此外,激活VSMC扮演相同角色周围正常VSMC但没有直接影响巨噬细胞的活性。因此,建立和自我维持的的恶性循环,导致VSMC钙化的不断进展,不再依赖于巨噬细胞。这些动力学可以解释为什么血液中炎性因子的水平并没有改变有严重血管钙化。

3.5。AIF-1介导Aldosterone-Induced VSMC炎症、细胞凋亡和通过NF -钙化κB通路

的基因编码AIF-1周围是各种炎症基因,包括NF-κB。AIF-1调节炎症反应的激活周围的炎症基因。已经确认了NF -κB信号中扮演着重要的角色在血管钙化。此外,我们先前的研究证明AIF-1导致巨噬细胞活动作为炎症因子。因此,我们假设AIF-1参与通过NF -血管钙化的过程κB通路。确定AIF-1 / NF -的作用κB在炎症反应、细胞凋亡和钙化的VSMC由醛固酮诱导,AIF-1-overexpressing VSMC暴露于醛固酮48 h,导致增强的钙化结节,细胞凋亡,细胞内的钙离子,高山活动,NF -κB活动,炎症因素(MCP-1 / CCR-2)(图6)。此外,抑制NF -κB活动减少炎症和钙化引起醛固酮在VSMC AIF-1-overexpressing VSMC。当AIF-1的表达抑制VSMC的醛固酮,NF -的活性κB是表达下调,炎症因子(MCP-1 / CCR-2)和细胞凋亡减少,和钙化(钙化结节,细胞内的钙离子和高山活动)是缓解(图6)。这些结果表明,AIF-1有助于aldosterone-induced炎症、细胞凋亡和钙化的VSMC通过调节NF -κB的活动。通过这种机制,钙离子超载的不断沉积在中间膜动脉导致动脉钙化和维护钙稳态。

4所示。结论

第一次,我们已经表明,钙离子之间的串扰和醛固酮导致炎症、细胞凋亡,通过AIF-1 / NF - VSMC的钙化κ在尿毒症B通路。此外,当地的钙化VSMC促进周围的VSMC的相似的病理过程,从而导致血管钙化。这项研究强烈表明,抑制AIF-1 / NF -κB途径有助于防止炎症、细胞凋亡和VSMC的钙化。

数据可用性

所有的数据用于支持本研究的结果包括在本文中。如果你有任何对我们的数据请求,请放心使用。

的利益冲突

作者没有利益冲突的声明。

确认

我们感谢LetPub (http://www.letpub.com)的语言帮助在准备这个手稿。这项工作是由黑龙江省博士后科学基金的资助(LBH-Z18180)、中国博士后科学基金会(2018 m641866),中国国家自然科学基金(81870503)和黑龙江省卫生科研项目和计划生育委员会(2017 - 019)。

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