文摘

本研究旨在调查脱脂洋麻籽的抗氧化和消炎作用餐(DKSM)及其phenolic-saponin-rich提取(PSRE) hypercholesterolemic老鼠。高胆固醇血症是引起使用粥样硬化饮食喂养,和饮食干预进行了合并DKSM(15%和30%)或PSRE(2.3%和4.6%,分别地。的总含量,相当于DKSM-phenolics和皂甙DKSM组)粥样硬化饮食。经过十周的干预,血清总抗氧化能力hypercholesterolemic老鼠被DKSM显著增强,PSRE补充( )。同样,DKSM和PSRE补充调节肝抗氧化基因的mRNA表达(Sod2, Nrf2, Sod1 Gsr,和Gpx1) hypercholesterolemic老鼠( ),除了Gpx1 DKSM组。循环氧化低密度脂蛋白的水平和促炎生物标志物也明显抑制由DKSM和PSRE补充( )。总的来说,DKSM PSRE减毒hypercholesterolemia-associated氧化应激和系统性炎症的老鼠,可能通过增强肝内源性抗氧化防御通过Nrf2-ARE通路的激活,这可能是由酚醛树脂的丰富内容和皂甙在DKSM PSRE。因此,DKSM和PSRE潜在功能性食品配料的潜在缓解患hypercholesterolemic个体风险。

1。介绍

心血管疾病(心血管病)是全球死亡率的主要原因在过去的15年。2015年,心血管病已造成1770万人死亡,占大约45%的全球非传染性疾病死亡和所有死亡人数的31% (1]。动脉粥样硬化是心血管病基础核心病理因素,导致全世界80%的CVD-related死亡(2];虽然高胆固醇血症是动脉粥样硬化发展最突出的风险因素之一(3]。尽管高胆固醇血症与过度高浓度的循环和非高密度脂蛋白胆固醇在血液,它不仅仅是胆固醇体内平衡的代谢紊乱。相反,高胆固醇血症是必不可少地与氧化应激和炎症的恶化,到了高潮障碍的血管反应性和血管硬化的进展(4]。hypercholesterolemic环境激活oxidant-producing酶主要包括黄嘌呤氧化酶,NADPH氧化酶类(NOX)和髓过氧化物酶,导致的过度生成活性氧(ROS),因而氧化应激。氧化应激废除内皮一氧化氮(NO)可用性,解开内皮一氧化氮合酶(以挪士),并提高了裹入的氧化低密度脂蛋白(LDL)皮下内空间,从而诱发血管炎症反应通过招募单核细胞内膜层。不受监管的吸收氧化低密度脂蛋白(oxLDL)分化的单核细胞(巨噬细胞)会导致泡沫细胞的形成,产生大量的促炎和氧化应激标记,细胞因子,生长因子,进一步加剧粥样硬化过程(4- - - - - -7]。

改善心血管病的认识,他们的风险因素,在世界各地和预防行为明显。上诉在饮食与健康之间的关系,再加上消费者接受功能性食品的概念,并更好的理解其决定因素,刺激了最近全球功能性食品市场的指数增长。根据最新市场报告,全球心血管健康市场在2016年价值82亿美元8]。由于高胆固醇血症之间的关联度,氧化应激,炎症在动脉粥样硬化的发病机制,寻找心血管功能食品成分,具有很强的抗氧化和消炎作用除了降胆固醇效果从有关部门获得越来越多的关注,研究人员、制造商和消费者(9- - - - - -13]。

洋麻(木槿cannabinusl .)是一个商业纤维作物,栽培的生产主要以其茎和茎biocomposites,纸张、纤维董事会和生物塑料和生物燃料。红麻种子从洋麻纤维种植园的主要副产物之一,和它的籽油广泛研究了其潜在的功能性食用油(14- - - - - -17]。脱脂红麻种子粉(DKSM)是二次废料产生的洋麻籽油提取工艺,占超过75%的种子质量。最近,DKSM越来越证明,证明小说功能性食用面粉和高营养,抗氧化,antihypercholesterolemic和抗癌特性。此外,我们的研究结果还表明,酚醛树脂和皂甙是两个主要bioactives DKSM对应于上述营养食品属性(18- - - - - -22]。除了前面的报告DKSM抗氧化性能及其bioactive-rich提取基于化学分析,其抗氧化效果在生理或病理条件下没有钻研。此外,研究DKSM消炎和PSRE hypercholesterolemic在活的有机体内模型还没有报道迄今为止。因此,本研究的目的是探讨抗氧化和消炎作用DKSM和PSRE补充通过hypercholesterolemic鼠模型。此外,他们的调节对肝脏抗氧化基因的mRNA水平的影响也进行了研究。PSRE准备和测试在DKSM同等水平的总DKSM-phenolics和皂甙为了确定可能的贡献两bioactives的角色在活的有机体内DKSM抗氧化和消炎作用。到目前为止,这是第一个研究报告补充抗氧化和消炎作用DKSM和PSRE hypercholesterolemic鼠模型。

2。材料和方法

2.1。材料

大鼠饮食的成分,即标准的鼠粮,胆固醇、胆酸、棕榈油、玉米淀粉、全脂奶粉、和鸡蛋,从专业饲料购买(格伦·福勒斯特、澳大利亚),Amresco(梭伦,哦,美国),圣克鲁斯生物技术有限公司(美国达拉斯,TX),绮李食用油Sdn。有限公司(马来西亚霹雳州),Thye Huat成龙Sdn。有限公司马来西亚(槟城),Eaga出口企业有限公司(南澳大利亚珀斯),和躺在香港有限公司(巴生,雪兰莪州,马来西亚),分别。辛伐他汀是购买辉瑞(美国纽约)、过硫酸钾,6-hydroxy-2, 5, 7, 8-tetramethylchroman-2-carboxylic酸(Trolox),和2 2 -azino-bis (3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic酸)(abt)从Sigma-Aldrich有限公司购买(圣路易斯,密苏里州,美国)。溶剂的分析级都从默克公司购买(达姆施塔特,德国)。固定剂的解决方案(RCL2®)从Alphelys购买(整容项目、法国)。大鼠氧化低密度脂蛋白(oxLDL)和白介素6 (il - 6) ELISA试剂盒购自Cusabio(武汉、湖北,中国),而大鼠肿瘤坏死因子-α(TNF -α)和c反应蛋白(CRP) ELISA试剂盒购自EMD微孔,默克公司(达姆施塔特,德国)。肿瘤基因GenomeLab™开始装备和RNA隔离工具包(gf - tr - 100 RNA隔离设备)从贝克曼库尔特公司购买。(沥青、钙、美国)和Vivantis(马来西亚雪兰莪州),分别。氯化镁(MgCl2)和DNA聚合酶是购自热费希尔科学(美国宾夕法尼亚州匹兹堡)。

2.2。DKSM和PSRE做准备

红麻种子(各种V 36)从马来西亚获得洋麻纤维和烟草委员会在东巴西Putih,吉兰丹、马来西亚、和DKSM脱脂过程后产生了我们之前的研究(19]。短暂、地面红麻种子均质在9500 rpm (Ultra-turrax T25基础,IKA®-WERKE GmbH & Co .公斤,Staufen,德国)与正己烷的比率1:2 (w:v为15分钟)。然后,混合物是透过绘画纸2号滤纸。残渣(DKSM)两次reextracted因此在烤箱和干50°C 3 h去除残留溶剂。最后,DKSM经过30-mesh筛和保存在−20°C为进一步使用。近似分析表明DKSM包含碳水化合物57.09%,蛋白质26.19%,水分9.34%,灰分6.65%,和0.73%的脂肪19]。此外,DKSM还含有粗纤维16.95%。

Phenolic-saponin-rich提取(PSRE)包含总酚醛树脂和皂甙DKSM准备根据提取过程在我们以前的工作18]。总之,DKSM在50%含水乙醇回流比例的3 h 1: 15 (w:v)。然后,混合物是通过绘画纸滤纸过滤2号。最后,滤液的溶剂蒸发减少压力(Rotavapor R210, Buchi, Flawil,瑞士)其次是冻干法(K VirTis台式冷冻干燥机、SP行业,沃敏斯特市,PA,美国)获得PSRE。为了估计DKSM-phenolics的复苏和皂甙在PSRE DKSM残留物获得上述过程与甲醇提取声波降解法1 h。然后,混合物在7500转离心10分钟25°C。随后,上层清液受到测定总酚和皂素内容,分别由Folin-Ciocalteu试剂和vanillin-sulphuric酸化验(18,23,24]。酚醛树脂的复苏和皂甙在PSRE DKSM估计为97.2±0.1%和92.5±1.8%,分别。

描述的目标bioactives PSRE,酚醛树脂和皂甙,据报道在我们以前的工作(18),同样的一批DKSM PSRE用于本研究。从我们的研究18),总酚含量PSRE估计在34.44毫克/克样品,p香豆酸样品(27.72毫克/克)、咖啡酸(5.75毫克/克样品),(+)儿茶素(0.86毫克/克样品),和没食子酸(0.11毫克/克样品)检测到的主要酚醛树脂。此外,PSRE被发现含有薯蓣皂苷配基总甾体皂苷的128.66和0.83毫克当量/ g样本,分别。相应地,DKSM包含大约5.29毫克/克样品的总酚醛树脂,由4.26毫克p香豆酸,咖啡酸的0.88毫克,0.13毫克(+)儿茶素和0.02毫克的没食子酸。总皂苷、甾体皂苷含量薯蓣皂苷配基DKSM估计在19.76和0.13毫克当量/ g样本,分别。

2.3。动物研究

批准的动物研究机构动物保健和使用委员会(IACUC)马来西亚Putra大学(动物伦理批准文号:芬欧蓝/ IACUC / AUP-R065/2013)。这项研究是按照指南进行动物的使用。42男性Sprague-Dawley老鼠(6周大,130 - 150 g)被安置在个人塑料笼子里12/12的控制条件下h光/暗周期,在25到30°C。在驯化期间(1周),所有老鼠喂养与标准的鼠粮(随意)和免费的水。之后,老鼠被随机分配到7个不同的团体,每个组成的6大鼠,也就是说,NC:老鼠喂养与标准的鼠粮;广告:老鼠患饮食含有20%的棕榈油,2%胆固醇、胆酸和0.4%;DKSM-Low DKSM-High:老鼠与广告组类似的饮食除了更换的鼠粮与DKSM(饮食总量的15%和30%,分别地);PSRE-Low PSRE-High:老鼠与广告组类似的饮食除了更换的鼠粮PSRE分别在2.3%和4.6%的水平,总饮食(基于DKSM萃取率15.36%,对应的等效水平总DKSM-phenolics和皂甙DKSM组);和他汀类药物:老鼠患饮食和管理与辛伐他汀(10毫克/公斤体重/天)通过口服填喂法。所有的饮食成分和热量值表中描述1。如表所示1、更换DKSM和PSRE的鼠粮不显著改变患饮食的能量分布。食物是基于每天100千卡/克体重等热量的价值为10周,water-dispensing瓶装和预滤器的自来水供应随意。经过10周的饮食干预,所有老鼠安乐死(通过心脏穿刺放血氯胺酮麻醉下(100毫克/公斤)和甲苯噻嗪(10毫克/公斤))后一夜快。空腹血清得到通过离心收集血液。老鼠的肝脏切除很仔细、清洗和保存在RCL2®方案在−80°C。

表1
组成(g / 100 g的饮食)和能量分布的饮食。

DKSM和PSRE补充的影响胆固醇代谢实验老鼠从目前的研究报道22]。对老鼠的生化分析表明血清粥样硬化饮食喂养成功诱导大鼠高胆固醇血症和肝脏脂肪变性,就是明证显著海拔hepatosomatic指数和肝脂质含量以及循环总水平和低密度脂蛋白胆固醇,而数控组。膳食补充剂DKSM (DKSM-Low和DKSM-High组),PSRE (PSRE-Low和PSRE-High组),和辛伐他汀(他汀类药物组)对优越的老鼠,antihypercholesterolemic属性与道达尔和低密度脂蛋白胆固醇水平升高的重要方案。此外,补充DKSM和PSRE显著提高了高密度脂蛋白(HDL)胆固醇水平hypercholesterolemic老鼠。此外,建立DKSM、PSRE和辛伐他汀已经成功地提高了hypercholesterolemic hepatosteatosis显著降低大鼠的hepatosomatic索引和肝脂含量。

2.4。血清总抗氧化能力

实验大鼠血清总抗氧化能力是评估使用修改后的Trolox等效抗氧化能力所描述(问题)测定Katalinic et al。25和成龙等。18]。abt•+股票的解决方案是由反应7毫米的abt过硫酸钾的2.45毫米。18 h(孵化后在黑暗中在室温下,股票的解决方案是用磷酸缓冲盐稀释0.70±0.02在734 nm的吸光度(PharmaSpec uv - 1700,日本岛津公司,京都,日本)。随后,50μ与950年L稀释血清的反应μL (abt调整•+解决方案10分钟,吸光度测量在734 nm (PharmaSpec uv - 1700,日本岛津公司,京都,日本)。Trolox作为标准,实验大鼠的血清总抗氧化能力表示为毫克Trolox等效抗氧化能力(问题)/毫升血清。

2.5。肝脏抗氧化基因的mRNA水平

基因表达研究的引物指的是设计的鼠形基因序列的国家生物技术信息中心网站(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide/)和带有18-nucleotide普遍正向和19-nucleotide普遍反向序列,分别。引物由集成(新加坡)和重组DNA技术RNAse-free水。5抗氧化基因的引物序列,3看家基因,内部控制(Kanr)大鼠肝多路传输面板如表所示2。

表2
加入基因名称、号码和肿瘤基因引物序列用于多元分析。

鼠肝RNA提取使用RNA隔离设备根据制造商的指示,而反转录的过程(RT)和聚合酶链反应(PCR)进行根据GenomeLab™肿瘤开始包协议。多元环球反向引物和50 ng提取RNA在XP热循环用于RT(骏科技,杭州,浙江,中国)在下列条件:48°C 1分钟,5分钟37°C, 42°C 60分钟,5分钟95°C,然后在4°C。随后,互补产品(9.3μL)和2μL 200海里的通用引物,4μL 25毫米MgCl2,0.7μL(热开始Taq DNA聚合酶,4μL 5 x PCR主缓冲区和受到PCR在XP热循环(骏科技,杭州,浙江,中国)在下列条件:初始变性为10分钟在95°C,紧随其后的是两步的循环94°C 30年代和55°C 30年代,在68°C的单扩展循环结束1分钟。

PCR产品来自前面的步骤进行了分析使用肝GenomeLab遗传分析系统(贝克曼库尔特公司,沥青、钙、美国)。总之,1μ38.5 L的PCR产品混合μL和0.5示例加载解决方案μL DNA大小标准400(提供的肿瘤基因GenomeLab启动工具包)在96孔样板在装货前的机器上。结果肿瘤基因的片段分析模块分析系统软件和规范化表达分析器软件。

2.6。循环氧化低密度脂蛋白和促炎生物标志物

空腹血清的老鼠受到免疫测定(ELISA试剂盒)测定循环氧化低密度脂蛋白(oxLDL)和促炎生物标记根据制造商的指示。的水平循环oxLDL和c反应蛋白(CRP)在ng / mL和表达μg / mL血清分别,而水平的循环肿瘤坏死因子-α(TNF -α)和白介素6 (il - 6)测定血清pg / mL。

2.7。统计分析

所有结果报告为平均值±标准偏差( )。单向方差分析(方差分析),伴随着图基的多重比较检验(GraphPad Prism 6.01, GraphPad软件公司,拉霍亚,CA,美国),进行了确定样本之间的显著差异( )。

3所示。结果与讨论

3.1。血清总抗氧化能力

氧化应激与动脉粥样硬化的发病机制密切相关6]。因此,血清/血浆总抗氧化能力(TAC)可能代表一个有用的工具在评估全球氧化应激和抗氧化防御水平在实验动物和人类受试者26- - - - - -30.]。Trolox等效抗氧化能力(问题)试验是最常见的一种化验工作的评估血清TAC基于abt的光谱光度测量的测量•+降低阳离子(衰变的蓝绿色发色团吸光度)血清抗氧化成分,控制抗氧化剂相比,Trolox(亲水模拟的维生素E) [31日]。

图1描述了实验大鼠血清TAC经过10周的饮食干预。粥样硬化饮食喂养显著降低血清TAC hypercholesterolemic老鼠的广告组( )。这一发现是在协议与几个在活的有机体内研究涉及食源性hypercholesterolemic / hyperlipidemic老鼠[10,32,33]。血清TAC的损耗可能是由于覆盖在活的有机体内抗氧化防御过度代氧化剂/ ROS hypercholesterolemic条件下。相比之下,辛伐他汀治疗显著提高血清TAC hypercholesterolemic老鼠( ),确认辛伐他汀的多效性的抗氧化性质(34]。


图1
血清总抗氧化能力经过10周的饮食干预。数据代表每组的均值,伴随着标准差。符号” ”和“#”分别代表显著区别样品相比,广告和NC组( )。

广告组相比,补充DKSM和PSRE有效地中和血清TAC的减少引起高胆固醇血症( )。改善血清TAC hypercholesterolemic老鼠可能是由于高的抗氧化性能DKSM PSRE,这是由我们的先前的研究使用在体外分析基于不同的机制(18,19]。消费的富含抗氧化剂的食物(如水果和蔬菜富含多酚)强烈与抗氧化状态的改善和硬化的风险在人类主体的衰减28,35- - - - - -37]。

在目前的研究中,酚醛树脂和皂苷可能大大促成了在活的有机体内抗氧化性能DKSM和PSRE DKSM组之间血清TAC及其相应的PSRE组(包含水平相当于DKSM-phenolics和皂甙DKSM组)是无关紧要的不同( )。在我们之前的研究[协议18)、酚醛树脂和皂苷明显导致PSRE和DKSM的抗氧化性能。这个假定是进一步支持大量的研究报道在活的有机体内主要酚类化合物的抗氧化特性的生化检测DKSM PSRE,也就是说,p香豆酸、咖啡酸、(+)儿茶酸和没食子酸。例如,口服p香豆酸和没食子酸的剂量100毫克/公斤体重为2周发现大大提高健康大鼠的心脏和肝总抗氧化能力(38,39),而饮食补充咖啡和香豆酸(饮食总量的0.2%)有效地提高了6周在活的有机体内抗氧化能力hypercholesterolemic老鼠的40]。另一方面,血浆和尿液TAC Wistar鼠明显增加后10天的腹腔内的儿茶素混合物(23毫克/公斤体重)(41]。除了酚类化合物,皂甙也被提出作为一个群体的饮食与独特的植物化学物质在活的有机体内抗氧化性能(42,43]。例如,补充总皂甙提取三个药用物种薯蓣属干燥根块茎瓜kirilowii被发现有效地改善在活的有机体内心肌缺血大鼠的抗氧化能力和碳tetrachloride-intoxicated小鼠,分别为(44,45]。

3.2。肝脏抗氧化基因的表达

内源性抗氧化防御中起关键作用恢复细胞氧化还原平衡氧化造成的侮辱,虽然消费高抗氧化植物化学物质(特别是酚类化合物)与增强内源性抗氧化防御通过调制多个氧化还原机制(46,47]。表3显示肝抗氧化基因的mRNA水平(核转录因子红细胞两个相关因子2 (Nrf2或Nfe2l2),胞质超氧化物歧化酶(Sod1),线粒体超氧化物歧化酶(Sod2) glutathione-disulfide还原酶(Gsr)、谷胱甘肽过氧化物酶1 (Gpx1))在实验老鼠,由于受到不同的饮食干预措施。

表3
肝脏抗氧化基因表达后10周的饮食干预。

经过10周的粥样硬化饮食喂养,肝抗氧化基因表达(Gsr Nrf2, Sod1, Sod2, Gpx1)广告组的不利改变( )与NC组相比,这意味着hypercholesterolemia-induced氧化应激在这些老鼠的表现。相反,他汀组肝脏抗氧化基因表达明显增强( )。与先前的研究一致,食源性高胆固醇血症与氧化应激的恶化,有关损害实验动物内源性抗氧化防御,而他汀类药物治疗的有效药物的方法扭转这些有害的影响10,13,32,48,49]。

在目前的研究中,补充和DKSM PSRE显著提高了老鼠的内源性抗氧化防御hypercholesterolemic通过肝脏抗氧化基因的转录调控。广告组相比,肝Nrf2基因表达的DKSM和PSRE-supplemented老鼠明显升高了1.5——1.8倍( )。DKSM补充导致肝Sod1的upregulation Sod2,和Gsr表情,特别是DKSM-High集团( )。然而,补充DKSM没有改善肝Gpx1 hypercholesterolemic老鼠的基因表达( )。同样,PSRE补充调节肝Sod1基因表达式,Sod2, Gsr, Gpx1 hypercholesterolemic老鼠2 -三倍( )。除了Nrf2 PSRE团体表现出优越upregulatory效果在所有研究肝脏抗氧化基因的表达比相应的DKSM组,含有同等水平的总DKSM-phenolics和皂苷( )。这可能是由于释放bioactives增强(酚醛树脂和皂甙)从DKSM矩阵在加热回流提取过程中,这可能会导致生物利用度和bioefficiency PSRE越好。适当增加萃取温度会破坏细胞壁的完整性,从而促进释放的绑定bioactives矩阵和增强的溶解度和扩散系数bioactives萃取溶剂,导致提取的最优恢复bioactives [50,51]。例如,加热回流提取(80°C)Pterodon emarginatus沃格尔种子70%含水乙醇提供最高的酚醛复苏而非热能的萃取过程(52),而更高的复苏chickpeasaponin B1观察当aqueous-ethanolic提取过程进行加热回流条件下(90°C)相比,非热能的超声波提取(53]。

在目前的研究中,一共进行肝脏抗氧化基因表达分析的结果表明,补充和DKSM PSRE可以激活肝Nrf2-ARE通路在实验老鼠,因此提高了内源性抗氧化防御hypercholesterolemia-induced氧化应激。此外,补充与PSRE同等水平的DKSM-phenolics和皂苷相似或优越的调节影响肝脏抗氧化基因表达式比相应的DKSM同行。这一发现表明酚醛树脂的贡献的角色和皂甙作为膳食DKSM Nrf2-ARE-activating因素和PSRE。近年来,激活Nrf2-ARE的靶向治疗途径提出了一系列广泛的退行性和免疫性疾病,特别是心血管病,同时大量的膳食植物化学物质尤其是茶多酚,异硫氰酸酯,organosulfur化合物,皂甙,姜黄素是著名的天然催化剂的途径(46,54- - - - - -56]。Nrf2是一个关键的转录因子,调节抗氧化抗氧化反应的侮辱。一旦激活,Nrf2结合抗氧化反应元素(是)在细胞核移植大量抗氧化与亲电试剂的解毒基因,如Sod, Gsr, Gpx [57]。抗氧化酶是内源性抗氧化防御的核心支柱,团结地保护我们的身体免受氧化损伤及其相关发病机制(58]。例如,Sod是最有效的一个主要抗氧化剂酶催化作用的转换超氧化物阴离子过氧化氢,而Gpx呈现过氧化氢和其他有机氢过氧化物(如过氧化脂质)为惰性终端产品。另一方面,Gsr作为重要的辅助抗氧化酶,保持适当的主要抗氧化酶的函数(例如,Gpx)催化还原过程二硫化谷胱甘肽(GSSG)的谷胱甘肽(GSH)和NADPH作为减少辅助因子。

有趣的是,辛伐他汀治疗和PSRE补充不仅中和血胆脂醇过多的有害影响肝脏抗氧化基因的转录,但他们的肝脏抗氧化基因的表达被调节到一个更高的学位比NC组( )。在目前的研究中,PSRE补充和辛伐他汀治疗显著改善高胆固醇血症的严重程度在实验老鼠,从而产生一个温和的氧化应激条件相比广告组。轻/中度氧化应激、辛伐他汀和多酚曾被报导过的活化剂Nrf2-ARE途径诱导离解的Nrf2 Kelch-like ECH-associated蛋白1 (Keap1)因此上调其下游抗氧化基因的表达(55,59,60]。虽然肝Nrf2表达式数控和PSRE组之间的冷漠( ),其他肝抗氧化基因的高表达PSRE和他汀类药物组可能可以解释为增强Nrf2-ARE激活通过改善氧化应激状态的组合效应以及辛伐他汀的归纳推理或PSRE bioactives。在协议中,类似的研究成果曾被观察到在食源性hyperlipidemic老鼠,补充了phenolic-rich提取物Clinacanthus高寒草场和辛伐他汀10]。

3.3。循环氧化低密度脂蛋白和促炎生物标志物

慢性血胆脂醇过多引发过多的活性氧生成,妥协内源性抗氧化防御,因此导致氧化修饰低密度脂蛋白的形成/氧化低密度脂蛋白(oxLDL) [4]。循环oxLDL水平是最重要的一个氧化与压力相关的生物标志物,这是动脉粥样硬化性心血管疾病的患病率密切相关(61年- - - - - -63年]。循环oxLDL和促炎生物标志物水平的实验老鼠经过10周的饮食干预中描述表4。数控组相比,患饮食喂养的循环oxLDL水平显著升高广告集团( ),表明成功的感应和先进的表现在这些老鼠hypercholesterolemia-induced氧化应激。相比之下,膳食补充剂和DKSM PSRE有效降低循环oxLDL hypercholesterolemic老鼠34%至57%的水平,在剂量依赖性的方式DKSM-High≥PSRE-High≥他汀≥DKSM-Low≥PSRE-Low >广告( )。值得注意的是,补充浓度较高的DKSM (DKSM-High组)表现出优越的抑制低密度脂蛋白氧化活性比辛伐他汀治疗( )。因为没有显著差异之间的循环oxLDL水平DKSM组和相应的PSRE组( ),建议酚醛树脂和皂苷可能导致的抗氧化和抑制低密度脂蛋白氧化性能DKSM PSRE。这个推理是进一步支持我们的以前的研究,其中phenolic-saponin-rich分数获得通过的部分纯化DKSM ethanolic提取物表现出优越的抗氧化性能比bioactive-deficient同行(18]。此外,一些主要的酚醛树脂在DKSM和PSRE,也就是说,p香豆酸、咖啡酸和(+)儿茶素,曾被报告为有前途的天然抑制剂对低密度脂蛋白氧化通过在体外和在活的有机体内模型(64年- - - - - -67年]。

表4
循环氧化低密度脂蛋白和促炎生物标记后10周的饮食干预。

由于循环TNF -的关键角色α、il - 6、CRP在动脉粥样硬化的发病机制,这些促炎生物标记经常用作心血管风险的评估有前途的面板(68年,69年]。在目前的研究中,高胆固醇血症有明显诱导系统性炎症实验老鼠患饮食。数控组相比,循环的重要海拔TNF -α、il - 6、CRP水平,4 - 1.4,和1.3倍,分别观察hypercholesterolemic从广告组大鼠( )。经过10周的DKSM和PSRE补充、循环肿瘤坏死因子-α水平的hypercholesterolemic老鼠明显减少39 60%订单存在剂量依赖的相关性,也就是说,PSRE-High≥DKSM-High≥DKSM-Low≥PSRE-Low≥他汀类>广告( )。显著降低循环实验观察大鼠il - 6水平的DKSM-High (−33.4%), PSRE-Low(−23.5%),和PSRE-High(−18.5%)组相比,广告组( ),而辛伐他汀治疗(他汀类药物组)和下级DKSM补充(DKSM-Low组)产生微不足道的降低对循环的影响il - 6水平( )。类似的趋势TNF -α水平,有效补充和DKSM PSRE压抑的循环CRP水平hypercholesterolemic老鼠剂量依赖性的方式,也就是说,DKSM-High≥他汀≥PSRE-High≥PSRE-Low≥DKSM-Low >广告( )。此外,没有明显的促炎生物标志物的水平差异DKSM组和相应PSRE组( ),这表明酚醛树脂和皂苷可能导致了消炎的关键bioactives DKSM PSRE。

高水平的upregulation oxLDL与促炎介质(例如,TNF -α、il - 6、CRP)在人类受试者62年]。在目前的研究中,水平循环oxLDL强烈与CRP的水平( )和TNF -中度相关α( )和il - 6 ( )的水平,因此肯定hypercholesterolemia-induced的病因作用在诱发系统性炎症和氧化应激大鼠患风险更高。此外,这些相关性还表明,降低系统性炎症中观察到DKSM——和PSRE-supplemented老鼠可能部分是由于抑制低密度脂蛋白氧化,这些饮食干预措施。补充和DKSM PSRE调制upregulation肝抗氧化基因表达式以及增强循环非酶的低分子量抗氧化剂水平(就是明证改善血清TAC) hypercholesterolemic老鼠。因此,它是假定这些抗氧化效应可能会有利地控制hypercholesterolemia-induced ROS生产过剩的老鼠,因此降低低密度脂蛋白氧化损伤和系统性炎症的严重程度。尽管PSRE补充显示优越upregulatory效应比其DKSM对应肝抗氧化基因的表达,没有发现类似的效果在TAC, oxLDL,促炎生物标志物检测。这可能是由于相对高水平的DKSM PSRE使用在目前的研究中,因此导致最优在活的有机体内抗氧化和抗炎作用(即。,plateau portion of the dose-response curve) observed under the tested physiological condition. On the other side, DKSM and PSRE supplementation might have exhibited an all-or-none effect notwithstanding the transcriptional changes in the在活的有机体内模型。这可能是由于转录后的修改产生治疗效果相同的程度上无论转录诱导变化的程度。调查DKSM饮食的影响,PSRE内源性抗氧化防御hypercholesterolemic在转录后的动物模型,转化水平提出了进一步的研究。

4所示。结论

DKSM及其派生PSRE补充改善在活的有机体内抗氧化防御hypercholesterolemic老鼠可能通过转录激活肝Nrf2-ARE途径和改善血清TAC。因此增强内源性抗氧化防御极好抑制低密度脂蛋白氧化和系统性炎症反应hypercholesterolemic老鼠。酚醛树脂和皂甙是建议的关键抗氧化和消炎bioactives DKSM PSRE。最后,DKSM和PSRE可能会作为心血管功能食品成分抵消hypercholesterolemia-associated氧化应激和系统性炎症。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者感谢生命科学学院、马来西亚Putra大学所有的建设性的技术支持和帮助。这个项目资助的科学,技术和创新(MOSTI),马来西亚,通过eScienceFund(项目没有。02-01-04-SF1597)。