文摘

阿霉素(阿霉素)是一种有效的化疗药物剂量依赖性和严重的副作用,如毒性和myotoxicity。Dox-induced毒性(DIC)和肌肉毒性(DIMT)研究了;然而,比目鱼肌Dox-induced细胞凋亡的机制不是很好。与阿霉素治疗,我们的数据表明,有一个显著增加氧化应激、细胞凋亡,proapoptotic蛋白质伯灵顿,pPTEN水平,和wnt3aβ连环蛋白活动( )。此外,阿霉素治疗也引起抗氧化水平,减少凋亡BCL2 (pAKT, p-mTOR,内源性sFRP2比目鱼肌肌肉组织( )。frizzled-related分泌蛋白2 (sFRP2)治疗减毒DIMT的副作用和比目鱼肌细胞凋亡,通过减少氧化应激、细胞凋亡,伯灵顿,pPTEN, wnt3a和β连环蛋白的活动,以及增加抗氧化剂、BCL2 pAKT p-MTOR, sFRP2水平( )。这些数据表明,Dox-induced氧化应激和细胞凋亡介导通过Akt-mTOR和wnt /β连环蛋白通路。此外,数据还显示,sFRP2调节这两个通路通过增加信号Akt-mTOR和wnt信号降低/β连环蛋白通路。因此,我们的数据表明sFRP2宝贵的治疗潜力扭转Dox-induced氧化应激和细胞凋亡在比目鱼肌通过Akt-mTOR通路介导。

1。介绍

阿霉素(阿霉素)是一个著名的药物用于治疗各种类型的癌症,包括那些有关乳腺癌、肺癌、胃癌、和血1]。虽然有效的作为antimalignancy剂,有多个与使用相关的严重副作用,包括损害心脏(毒性),骨骼组织(myotoxicity),脱发,和心律失常2]。因此,阿霉素的使用是有限的,和各种替代策略计划。

阿霉素被发现诱发心脏的急性和迟发性的功能障碍,最终导致心脏衰竭和潜在的死亡3,4]。Dox-induced肌肉毒性(DIMT)也会导致肌肉功能障碍存在剂量依赖的相关性;然而,DIMT与骨骼肌组织不利的变化,导致影响如疲劳、肌肉萎缩,最终细胞死亡(5- - - - - -8]。重大损失在肌肉会导致对治疗的反应降低,预后恶化,降低生活质量(5,7]。虽然机制Dox-induced毒性已被广泛的研究,在比目鱼肌的确切机制负责DIMT尚未完全了解。

阿霉素治疗引起心脏毒性和涉及多个机制,如诱导氧化应激、炎症、坏死,细胞凋亡,肝纤维化1,2]。然而,它仍然未知是否阿霉素毒性在骨骼肌包括这些机制或如果采用不同的途径。因此,我们提出了一个调查比目鱼肌的氧化压力诱导细胞凋亡。此外,这些研究扩展到调查Akt-mTOR凋亡机制介导的通路。

此外,wnt /β连环蛋白通路是传统上认为服务在发展中的作用[9]。然而,心脏是现在激活wnt /等各种途径β连环蛋白信号通路在应力状态(10]。在心脏重构,抑制wnt信号通路的可溶性卷曲的受体水平已被证明是有益的在修复受损组织10]。这个途径也被证明有参与骨骼肌重建(11]。最近的一项研究显示,骨骼肌纤维类型的转变,股四头肌和比目鱼肌的肌肉在扩张型心肌病(DCM)小鼠模型,导致骨骼肌病(11]。诱导组织损伤和修复还取决于特定的实际上wnt激活。例如,wnt3a激活可以诱导细胞凋亡在心脏12]。因此,我们还设计了研究调查如果Dox-induced骨骼肌的细胞凋亡涉及wnt3a通路。

frizzled-related分泌蛋白(sFRP)被认为是对手的wnt信号通路9,13]。因此,这些蛋白质可以用来抑制wnt信号通路在疾病状态和已被证明是有益的(12,14- - - - - -16]。sFRP2 sFRP家族的一部分,是为了减少纤维化和改善心脏的左心室功能在大鼠心肌梗死模型15]。此外,sFRP2已被证明是一个重要的旁分泌因素干细胞,协助在心肌的修复(16]。这表明,如果参与DIMT wnt信号,这可能会是一个临床上重要的治疗选择除了心脏肌肉组织。

阿霉素引起的明显的副作用迫切需要了解疾病的分子机制的状态,以产生新的治疗方法,提高患者的生活质量。我们所知,没有研究的角色sFRP2 doxorubicin-induced毒性的比目鱼肌介导通过Akt-mTOR wnt3a /β连环蛋白通路。因此,本研究旨在探讨氧化应激细胞凋亡是否介导通过Akt-mTOR wnt3a /β连环蛋白通路的比目鱼肌以及理解sFRP2是否可以抑制这一过程。

2。材料和方法

2.1。学习小组

治疗的C57BL / 6小鼠被分为三组:控制(生理盐水),阿霉素和强力霉素+ sFRP2, 在每一个组。机构的动物保健和使用委员会中央佛罗里达大学的批准在这项研究中使用的动物协议。

2.2。阿霉素和sFRP2治疗

C57BL / 6雄性和雌性小鼠的8到10周的年龄接种一剂4毫克/公斤阿霉素(费舍尔科学、猫。BP 2516 - 50)每隔一天一次(M, W, F)通过腹腔注射(IP),导致累积剂量12毫克/公斤。重组鼠标sFRP2(嘉汉生物公司,猫。50028号- m08h)是根据制造商的指示和重组通过尾静脉注射在一天一天(D1)和6 (D6)后最后阿霉素注射的剂量40μ克/公斤,80年的累积剂量μ克/公斤。

2.3。组织获取和Paraffinization

老鼠牺牲,双边比目鱼肌是收获14天(D14)。左侧比目鱼肌是保存在RNA后,正确的比目鱼肌在10%多聚甲醛(PFA)存储。石蜡块的样品,和块切割(5μ米),放在ColorFrost加上显微镜载玻片(费舍尔科学、猫。号码12-550-17)。

2.4。过氧化氢酶、MnSOD和脂质过氧化的化验

过氧化氢酶活性测定如前所报道(3)使用比色测定试剂盒(Abcam,猫。ab83464)。比色测定测量在570 nm,这些调整的总蛋白浓度。

Manganese-containing线粒体超氧化物歧化酶(MnSOD)水平进行分析之前报道(3]使用分析工具(应用生物分析实验室,猫。sod - 560)。制造商的协议后,样品的吸光度测量在560海里,用一个盘子读者。

脂质过氧化物进行了分析后,LPO-CC化验设备/制造商的指令(Kamiya生物医药有限公司的猫。cc - 004)数量和之前报道的这个实验室(3]。这个示例分析在675 nm Bio-Rad板读者。

2.5。Dihydroethidium染色

Dihydroethidium(她)(表达载体的猫。D23107)染色进行如前所报道(17]。样本deparaffinized和她(1孵化μ米/毫升)在黑暗中在室温下15 - 25分钟。样本然后洗与磷酸盐(PBS)和复染色DAPI为了确定细胞核总数。用于代表共聚焦显微镜成像。

2.6。肌凝蛋白染色

肌凝蛋白染色显示执行比目鱼肌组织。deparaffinized和染色之前,部分患者使用顺序降低酒精浓度。然后他们被封锁在10%正常山羊血清(上天)提供1小时之后。Sigma-Aldrich Antimyosin(在兔子,猫。M7523)添加10%门店在1:50浓度。这是孵化一夜之间在4°C。1 x PBS的部分被洗,和Alexa萤石488山羊anti-rabbit(表达载体,猫。A11008)添加数量1 x PBS室温1小时。最后,部分与1 x PBS洗。

2.7。TUNEL染色

TUNEL染色法进行确定的百分比凋亡细胞核(咯红、罗氏、猫。号码12156792910)。幻灯片准备与比目鱼肌肌肉组织部分deparaffinized permeabilized和蛋白酶K (25μ在100毫米Tris-HCl g / mL),如前所述[17]。不变色的部分是复染色和安装安装中有4 ,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)(向量实验室、猫。号码h - 1200)来显示总核。凋亡细胞的比例量化TUNEL-positive细胞的数量除以总核。共焦显微镜是用来获得肌肉组织的代表图像。

2.8。Caspase-3免疫组织化学和ELISA

Abcam Caspase-3染色利用anti-caspase-3(兔子,猫。ab13847)证实了细胞凋亡的执行参与DIMT。这个污点进行标准染色程序后,如前面发表(2]。总之,样本与门店和洗1 x PBS阻塞,主要抗体,anti-caspase-3(1: 50),总会被稀释10%,一夜之间在4°C的环境。幻灯片是洗1 x PBS,二级抗体,Alexa萤石568山羊anti-rabbit,添加并允许在室温下孵化一小时。幻灯片洗一遍,最后安装和DAPI染色。

Caspase-3活动进行了分析使用的酶联免疫试剂盒BioVision根据制造商的指示和之前报道(17]。比目鱼肌是洗1 x PBS和均质细胞裂解缓冲。样本然后离心机分离出上层清液。然后,确定蛋白质浓度的样品进行了分析使用板读者405海里。

2.9。pPTEN、pAKT Wnt3A,β连环蛋白ELISA分析

分析了pPTEN使用PathScan Phospho-PTEN (Ser380)夹心酶联免疫试剂盒(细胞信号技术,猫。7285号)之前报道(3]。总之,比目鱼肌组织均质。然后,使用布拉德福德测定蛋白质浓度估计,并组织孵化2小时37°C。接下来,进行比色测定后,制造商的指示。一旦完成,停止的解决方案是添加,样本使用ELISA板读者阅读450海里。数据表达任意单元(AU)。

pAKT活动测量使用商用设备(Exalpha生物制品公司,猫。X1844K数量),之前报道(3]。总之,比目鱼肌肌肉组织均质,和蛋白质执行评估。示例2小时孵化,进行比色测定每个制造商的指示。使用Bio-Rad板读者,样本分析在450海里。数据是在非盟表示。

一个WNT3A酶联免疫试剂盒(USCN生命科学公司,猫。E83155Hu)是用来确定WNT3A活动/制造商的指示。总之,装备的检测试剂添加到样品和他们孵化37°C 1小时。解决方案是洗,然后检测试剂B添加和孵化30分钟37°C。样本再洗,衬底的解决方案是添加到样品和孵化为10 - 15分钟37°C。最后,停止的解决方案是添加,样本分析使用板读者在450海里。

β分析了连环蛋白使用商用酶联免疫试剂盒(恩佐生命科学,猫。adi - 900 - 135)后,制造商的指示。总之,样本添加到分析缓冲区和允许在室温1小时坐在一个振动器。主要抗体是添加到每个好,孵化瓶为一个小时。盘子洗了5次,100μ我增加了蓝色的共轭。盘子洗了5次,100μL可溶性底物添加和孵化瓶在室温下另一个30分钟。最后,停止添加解决方案,使用板样品进行了分析读者在450海里。

2.10。免疫印迹分析p-mTOR sFRP2, BCL2和伯灵顿

sFRP2存在与免疫印迹分析,证实了使用标准免疫印迹的过程。总之,sFRP2抗体(Abcam猫。ab111874数量)1:250浓度进行了分析β肌动蛋白(1:1000)作为加载控制。二次抗体的浓度是anti-rabbit 1: 1000个。

分析p-mTOR除以总mTOR使用免疫印迹,执行以下标准技术。主要抗体,p-mTOR和mTOR使用浓度1:1000和1:分别为750(细胞信号,猫。数字2971 l和2972年代)。二次抗体都是HRP-conjugated anti-rabbit,浓度1:1000和1:750年,分别。

免疫印迹分析分析BCL2,凋亡蛋白,和伯灵顿,proapoptotic蛋白质,标准蛋白免疫印迹过程(细胞信号技术,猫。数字sc - 492和2772,分别地)。主要的抗体是BCL2和伯灵顿,两个1:100浓度。二次抗体HRP-conjugated anti-rabbit BCL2和伯灵顿,在浓度为1:1000。定量微密度分析西方墨点法进行使用ImageJ软件(NIH)。

2.11。统计分析

数据表示为 。统计学意义时确定 用单向方差分析和图基的测试。

3所示。结果

3.1。sFRP2对氧化应激的影响(脂质氧化酵素)和抗氧化剂(MnSOD和过氧化氢酶)

图1(一)显示定量ELISA分析氧化应激的标记,脂质过氧化物酶。脂质氧化酵素的强力霉素治疗显示了显著增加;然而,这增加明显减少了sFRP2治疗(图1(一), )。此外,我们进行elisa检测抗氧化剂的水平,MnSOD和过氧化氢酶。阿霉素治疗后,有抗氧化剂显著减少,而sFRP2治疗显著增加MnSOD和过氧化氢酶(数字1 (b)和1 (c), )。这些数据表明,sFRP2治疗改善抗氧化水平Dox-treated比目鱼肌(数字1 (b)和1 (c), )。

3.2。sFRP2治疗对氧化应激标志物的影响她

图2(一个)显示了总在蓝色细胞核染色DAPI (A、D、G),红色污点在确定过氧化物水平(B, E、H),和合并后的图像(C、F和我)。DHE-positive细胞的定量分析表明,强力霉素治疗,过氧化物水平显著增加(图2 (b), )。这显著增加减毒sFRP2治疗,进一步表明sFRP2治疗抑制氧化应激增加(图2 (b), 与脂质过氧化物酶),以类似的方式观察到在图1(一)。

3.3。sFRP2对细胞凋亡的影响和Caspase-3活动

图3(一个)显示了TUNEL染色法检测细胞凋亡。肌凝蛋白在绿色的肌肉组织是彩色,E,和我;凋亡细胞核染色在红见B, F,和J。总核染色在C、G、K;和合并后的图像在D H和L(图3(一个))。

定量分析的凋亡细胞核。图3 (b)显示一个图表的凋亡细胞核的百分比。我们的数据显示了一个在凋亡细胞核的数量显著增加阿霉素治疗组相比,控制;然而,这种增加治疗后显著降低sFRP2 ( )。

执行一个额外的染色确定存在caspase-3凋亡肌肉,见图3 (c)。从左到右,肌凝蛋白、caspase-3 TUNEL, DAPI,和合并图像表明,TUNEL-positive比目鱼肌也积极与caspase-3,表明Dox-induced比目鱼肌细胞凋亡发生。此外,我们进行了caspase-3 ELISA量化这些比目鱼肌细胞凋亡细胞(图3 (d))。图3 (d)显示了一个在caspase-3活动与强力霉素治疗后显著增加;然而,这种增加caspase-3活动与sFRP2减毒治疗( )。明显,TUNEL染色符合caspase-3活动的额外方法ELISA分析,表明细胞凋亡发生在比目鱼肌,细胞凋亡是由sFRP2减毒的。

3.4。影响的sFRP2 Proapoptotic蛋白质伯灵顿和凋亡BCL2

图4(一)伯灵顿显示了西方的污点和BCL2,β肌动蛋白的加载控制。定量免疫印迹分析显示阿霉素诱发proapoptotic蛋白质伯灵顿的增加和减少凋亡蛋白BCL2 ( )。伯灵顿水平sFRP2治疗后明显下降,BCL2水平相比显著增加阿霉素组(数字4 (b)和4 (c)分别地, ),这表明sFRP2比目鱼肌由阿霉素抑制细胞凋亡。

3.5。PTEN sFRP2治疗,一种蛋白激酶,mTOR

图5显示了elisa的定量数据上执行pPTEN pAKT,而免疫印迹分析检测p-mTOR。当使用阿霉素治疗,pPTEN水平显著增加;然而,这减轻了增加添加sFRP2(图5(一个), )。相反,当使用阿霉素治疗,pAKT水平显著下降,然后这种减少是减毒的sFRP2(图5 (b), )。免疫印迹在图5 (c)在p-mTOR显示明显降低,而总mTOR被用作加载控制。微量化显示显著减少p-mTOR强力霉素治疗;然而,这种p-mTOR sFRP2治疗后显著增加(减少 )。这些数据表明Akt-mTOR通路参与Dox-induced比目鱼肌细胞凋亡。

3.6。sFRP2 Wnt3a和治疗的影响β连环蛋白

图6显示定量ELISA分析wnt3a和β连环蛋白。我们的数据显示了一个在wnt3a和显著增加β连环蛋白与强力霉素治疗;然而,这增加了sFRP2治疗(数字6(一)和6 (b)分别地, )。这是表明wnt3a /β连环蛋白通路参与Dox-induced细胞毒性的比目鱼肌和sFRP2 wnt3a /变弱β连环蛋白通路。

3.7。确定比目鱼肌的sFRP2水平

图7(一)免疫印迹分析显示sFRP2比目鱼肌肌肉组织的存在,有或没有强力霉素治疗,β肌动蛋白的加载控制。我们的数据显示了一个减少在sFRP2强力霉素治疗组相比,控制(图7 (b), )。这减少sFRP2减毒后sFRP2管理局(图7 (b), )。

我们还开发了一个流程图表明wnt3a和Akt-mTOR通路参与Dox-induced比目鱼肌细胞凋亡。

4所示。讨论

阿霉素是一种化疗药物诱导毒性和myotoxicity主要副作用(2,18,19]。一项研究报道,当使用阿霉素治疗,增加骨骼肌产生肌肉疲劳和减少血流量,干扰actin-myosin交互和收缩变化,结果在整体功能下降19]。上述不利影响保证研究的潜在疗法减弱肌肉阿霉素引起的毒性。主要的新的和重要的信息在当前的工作,之后阿霉素毒性sFRP2比目鱼肌和防护效果的治疗,包括(1)氧化应激标记,减少脂质过氧化,和她;(2)抗氧化水平增加MnSOD和过氧化氢酶;(3)减少比目鱼肌细胞凋亡;(4)减少proapoptotic蛋白质伯灵顿和凋亡蛋白BCL2增加;(5)减少PTEN的负调控和细胞存活率增加蛋白质pAKT p-mTOR;(6)对wnt3a /影响β连环蛋白通路通过减少wnt3a和β连环蛋白活动;(7),最后,一个进步的减少内源性sFPR2 Dox-treated动物。发现sFRP2抑制氧化应激,提高抗氧化水平的比目鱼肌是一致的与其他出版研究减少氧化应激和细胞凋亡在运动后骨骼肌,据Smuder et al。20.,21]。此外,增加氧化应激的作用和抗氧化储备减少肌肉损伤后的杜氏肌肉营养不良症(DMD)也被报道,这是在协议变更后的氧化和抗氧化防御阿霉素毒性在肌肉22- - - - - -25]。它已被证明在肌肉萎缩和肌肉不活动的研究有一个增加活性氧(ROS)和减少抗氧化剂26- - - - - -29日]。相比之下,最近的数据立即去神经研究表明抗氧化基因增加由于活性氧增加,表明肌肉萎缩和弱点是独立于氧化应激通路(28]。此外,他们进一步确认过程不是通过氧化应激介导的抗氧化剂trolox和白藜芦醇显示没有影响氧化应激萎缩和肌肉无力28]。去神经支配我们的数据不同,研究抗氧化剂和脂质过氧化物酶的决心。例如,在他们的研究中,脂质过氧化物酶水平没有评估与氧化应激和抗氧化水平没有改变(28DIMT模型),而我们的数据显示了显著增加脂质过氧化水平以及减少抗氧化剂Dox-treated组。因此,预计在肌肉损伤介导的氧化应激的作用通过两个独立的途径:通过增加氧化应激介导和降低抗氧化储备报道在最近的研究中,另一个通过nonoxidative压力在去神经的研究中,正如前面发表(28]。总体而言,我们的数据也符合Dox-induced毒性和其他各种肌肉萎缩等病症,包括氧化应激和抗氧化剂的变化(2- - - - - -4,15,16,18,27,30.]。此外,我们建议sFRP2从未报道过,可能是一个潜在的目标,减少氧化应激和强力霉素治疗后增加抗氧化储备。

细胞凋亡是一种程序性细胞死亡由线粒体蛋白质,caspase-3和9,已报道的各种骨骼肌运动性肌肉损伤等疾病,炎性肌病,缺血性萎缩,脊髓性肌肉萎缩症31日- - - - - -36]。细胞凋亡的存在被TUNEL证实,伯灵顿,BCL2染色,细胞凋亡明显导致这些疾病的发展和进展(32]。此外,最近的一项研究表明,阿霉素诱导细胞凋亡在大鼠比目鱼肌(20.,21]。数据从另一个最近的研究表明,肿瘤坏死因子-α全身的细胞凋亡在C2C12成肌细胞细胞包括BCL2伯灵顿比下降,这与我们的数据是一致的(37]。目前的研究证实了以前公布的肌肉研究Dox-induced肌肉细胞凋亡。细胞凋亡的存在在当前的研究中也证实了TUNEL染色,caspase-3活动,proapoptotic伯灵顿,和凋亡BCL2协议与其他研究发表在肌肉细胞凋亡(32]。此外,在肌肉细胞凋亡的存在进一步证实了caspase-3和TUNEL发生在单一的肌肉细胞,与阳性证实蛋白质、肌凝蛋白和核染色,DAPI(图3)。因此,该数据证实,细胞凋亡存在于阿霉素治疗后受伤的比目鱼肌细胞。

接下来,我们确认是否通过Akt-mTOR比目鱼肌细胞凋亡是介导途径和/或wnt3a /β连环蛋白通路。Akt-mTOR通路中起着重要作用的细胞过程,如细胞增殖、生存、生长和死亡(3,16,30.,38,39]。一个在活的有机体内发表在《自然细胞生物学研究表明Akt-mTOR通路中起着重要作用在骨骼肌肥大,增加活动的途径导致减少肌肉萎缩(38]。此外,Akt-mTOR通路激活的作用也已被证明能够在减少DMD-associated纤维化和炎症中发挥作用(39]。此外,一项研究表明,mTOR / PI3K / Akt通路参与Dox-induced细胞凋亡在心脏和过程是被移植的胚胎干细胞3]。然而,在Dox-induced Akt-mTOR通路的作用在比目鱼肌细胞凋亡并不明确。因此,在本研究中,根据我们所知,我们是第一个报告,pAKT p-mTOR相比显著降低阿霉素治疗后的控制,而sFRP2治疗显著( )增加一种蛋白激酶和mTOR,暗示Akt-mTOR通路参与DIMT比目鱼肌。

PTEN、Akt通路的内源性抑制剂已被证明是调制在不同的肌肉和心脏疾病(3,40]。观察PTEN的显著增加和细胞凋亡在胰岛素抵抗骨骼肌细胞胰岛素刺激后(40]。PTEN的增加是抑制细胞用二甲双胍治疗时,常见的治疗糖尿病的药物,这表明PTEN调节细胞凋亡在胰岛素抵抗肌肉模型(40]。与这些研究协议,PTEN在当前的研究中是显著增加( )Dox-treated小鼠细胞凋亡,而PTEN和凋亡水平明显减毒后sFRP2管理局( )。这些数据表明,PTEN通路参与调控细胞凋亡介导的比目鱼肌Akt-mTOR通路。

wnt家庭由19个成员与离散类型的细胞功能,如干细胞分化、肌细胞生成,细胞生存,肌肉纤维化,细胞凋亡,在器官发展(41- - - - - -44]。实际上wnt取决于他们的同种型的功能类型的伤害,和器官发展(44]。Wnt3a治疗沉积增加肌肉的结缔组织(43,44]。此外,缺乏的小鼠胚胎wnt1 wnt3a证明异常生长和减少的肌肉蛋白的表达,Myf5 [44,45]。此外,wnt3a已经发表在心肌infarction-induced凋亡的先前的研究,在水平的提高wnt3a观察梗塞后生成,而sFRP2政府减毒wnt3a活动(15]。值得注意的是,没有发表的报告在DIMT wnt3a和sFRP2。因此,我们的数据的增加细胞凋亡以及wnt3aβ连环蛋白活动是在协议与心肌梗死模型,提供了新颖的信息发表在Dox-induced肌肉毒性。此外,目前的研究表明,增加wnt活动明显减弱sFPR2治疗后,也同意研究发表在心脏,和在某些形式的癌症如成神经管细胞瘤(15,46]。

接下来,我们检查是否强力霉素治疗外源性比目鱼肌的sFRP2水平下降,这可能会扮演一个角色在DIMT增加氧化应激和细胞凋亡。我们的数据在图7显示阿霉素治疗显著降低sFRP2比目鱼肌,而治疗sFRP2注入带回这种蛋白质水平接近控制值( )。这表明,基线水平的sFRP2存在于健康的骨骼肌和发挥保护作用对各种肌肉疾病。

有研究表明显著减少肌肉发表在早期和晚期阶段的癌症恶化,最终导致了肌肉功能下降(47- - - - - -50]。已经观察到,这个过程可以通过炎症介导的肿瘤(47,48]。有趣的是,最近的一项研究玉等人报告,复合的生长素是证明抑制Dox-induced腓肠肌肌细胞凋亡,暗示治疗作用相关的癌症恶病质(51]。值得注意的是,在这项研究中我们建议在比目鱼肌sFRP2抑制细胞凋亡,这可能是诱导的一部分肌肉恶病质玉等人也报告在腓肠肌肌细胞凋亡。根据我们的数据在细胞凋亡的减少Dox-induced肌肉恶病质,我们预料sFRP2可能是一个潜在的治疗目标癌症恶病质的形成是由于肿瘤的形成。

总之,我们的数据表明,强力霉素诱导氧化应激和细胞凋亡过程是通过Akt-mTOR和wnt3a /介导的β连环蛋白通路。我们还提出了一个流图8描述两个通路参与Dox-induced肌肉毒性和细胞凋亡:Akt-mTOR和wnt3a /β连环蛋白。有趣的是,wnt7a绑定的链接使卷曲protein-7激活PI3K-Akt-mTOR通路报道(44,52]。然而,在当前的研究中我们不提供wnt3a之间的联系和Akt-mTOR通路在细胞凋亡的规定,我们建议未来研究由美国或其他。最后,在大型动物,需要进一步的研究来证实这些发现,所以sFRP2可能用于临床。

数据可用性

本研究中生成的数据是可用的。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

这项工作是支持的,在某种程度上,由美国国立卫生研究院(1 r01hl090646-01 5 r01hl094467-02, 1 r01ca221813-01a1 Dinender k . Singla)。作者感谢杰西卡Hellein协助起草的手稿。