文摘
营养因素,表现出抗氧化性能,比如那些包含在绿色植物,可以预防癌症。叶绿素和其他tetrapyrrolic化合物结构与血红素和胆红素(胆汁色素抗氧化活性)是那些分子据称负责这些影响。因此,我们的研究的目的是评估抗增殖和抗氧化的影响叶绿素(叶绿素一个/b、叶绿酸、脱镁叶绿素一个)在实验胰腺癌。叶绿素已被证明产生抗增殖效果在胰腺癌细胞系(patu - 8902、MiaPaCa-2 BxPC-3)剂量依赖性的方式(10 - 125μmol / L)。叶绿素也被观察到抑制血红素加氧酶(HMOX) mRNA表达和HMOX酶活性,显著影响胰腺癌细胞的氧化还原环境,包括线粒体/全细胞活性氧的生产,并改变reduced-to-oxidized谷胱甘肽的比例。重要的是,chlorophyll-mediated抑制胰腺癌细胞的生存能力已经被复制在活的有机体内实验中,叶绿素的管理一个显著减少了在异种器官移植裸鼠胰腺癌肿瘤大小。总之,这些数据表明chlorophyll-mediated变化对胰腺癌细胞的氧化还原状态可能会负责他们的抗增殖和抗癌效果,从而有助于减少癌症的发病率在个人消费绿色蔬菜。
1。介绍
生物活性营养因素,如那些包含在绿色植物,可能参与癌症的保护的个人发展(1]。事实上,一个明显的癌症保护效应已经观察到当绿色蔬菜的摄入量增加(2]。叶绿素和其他tetrapyrrolic化合物,结构与胆红素(强有力的抗氧化剂胆汁色素)3),是重要的候选分子被认为是负责这种保护作用[1,4]。叶绿素,phytol-esterified镁卟啉,是地球上最丰富的生物分子之一5]。几个叶绿素物种在自然界中,叶绿素一个和叶绿素b最重要(4,6]。此外,叶绿酸,更极半合成叶绿素,是作为添加剂在食品工业中,因此相当部分地区的丰富人类的食物链(4]。这一特点也适用于脱镁叶绿素一个不含金属的导数膳食叶绿素代谢产物,是著名的新鲜和加工食品,以及膳食补充剂(4)(图1)。
由于多种生物效应,包括antigenotoxicity [7],诱变剂诱捕[8),免疫调节,抗氧化剂和凋亡活动(审查,请参阅[4]),叶绿素已经被提议作为重要的膳食chemopreventive代理(4]。叶绿素紧密地绑定到各种致癌物质在肠道内腔阻止他们的体内吸收1]。这种机制在一个是在中国进行的临床研究,叶绿酸的补充大大减少黄曲霉毒素暴露科目的可用性(9]。同样,在临床研究在荷兰,病人的饮食摄入量叶绿素的经验增加结肠癌的发病率下降(10]。在后者的研究中,作者们提出,叶绿素在阻塞的潜在致癌血红素在肠道内腔11]。虽然通常叶绿素从肠道流明,缝合时认为是可能的一个重要部分叶绿素及其衍生品可能生物利用率,从而活跃甚至在外围组织(4]。
血红素加氧酶1 (HMOX1)和胆绿素还原酶(BLVRA)血红素分解代谢的关键酶和胆红素形成系统性的浓度有直接和消极的关系在癌症的患病率12]。HMOX1是一个重要的cytoprotective和抗氧化酶,不仅在人类13)而且在植物王国(14),尽管它的潜在致癌作用尚未得到解决(15]。大量的流行病学研究表明,增加HMOX1表达与减少癌症的发病率(16]。另一方面,HMOX1表达式被发现对胰腺癌(干扰抗癌治疗17]。此外,它已建议BLVRA扮演的角色在促进致癌作用18]。事实上,增加BLVRA表达式被观察到在肝细胞癌患者19)在乳腺癌和肺癌细胞系(20.]。
以来很少有公布的数据,描述了叶绿素的抗增殖效果,我们的研究的目的是评估这些影响并确定他们是否可以通过HMOX1调制调解和/或氧化还原信号通路。
2。材料和方法
2.1。化学物质
螺旋藻platensis (Arthrospira)从马丁·鲍尔GmbH购买(Vestenbergsgreuth,德国)。氯高铁血红素是获得前沿科学(美国UT Logan)和叶绿酸、叶绿素一个、叶绿素b溴化、水晶紫、蓝色噻唑基四唑(MTT)、二甲亚砜(DMSO),补充细胞培养基,买来Sigma-Aldrich(圣路易斯,密苏里州,美国)。丙酮、甲醇、二氧六环、乙腈和戊二醛溶液(25%)中使用的所有实验都来自五(布拉格,捷克共和国)。甲醇和乙腈是来自默克(达姆施塔特,德国)。
2.2。准备脱镁叶绿素一个
制备的脱镁叶绿素一个藻青菌,集胞藻属PCC 6803(写明ATCC,马纳萨斯,弗吉尼亚州,美国文化(4 L)是收获。细胞破碎的使用玻璃珠在20毫米K-phosphate缓冲区(pH值7.8)。细胞的膜分数与可溶性蛋白质通过高速离心分离(65000 g×20分钟)。一夜之间,颗粒状膜被冻干。干膜的色素提取2×2.5毫升的甲醇和使用安捷伦- 1200高效液相色谱系统分离(美国安捷伦,圣克拉拉,CA)。
反相柱上的分离进行了(卢娜C8, 5μ米、250×10毫米;Phenomenex)用35%甲醇和乙腈15% 0.25吡啶(溶剂)和20%甲醇和乙腈20%的丙酮溶剂(B)。颜料被筛选了通过溶剂B的线性梯度(30 - 95%在25分钟)之后,95%的溶剂B 2毫升的流量最小−1在40°C。峰代表叶绿素一个收集,最终解决方案(8毫升)酸化(pH ~ 3)与醋酸将叶绿素一个对脱镁叶绿素一个。为了去除吡啶和其他极性杂质,解决方案是混合在一个1:1比0.25 M氯化钠添加10毫升hexan紧随其后。混合后,解决方案是孵化15分钟在室温和上层hexan阶段包含脱镁叶绿素一个拍摄。hexan在旋转蒸发器蒸发,然后干脱镁叶绿素是溶解在DMSO溶液。
所有颜料的纯度(氯高铁血红素、叶绿酸、叶绿素一个、叶绿素b,脱镁叶绿素一个)用于本研究检查色谱,高效液相色谱法。
2.3。细胞培养
下面的人胰腺癌细胞株用于在体外研究:patu - 8902 (DSMZ,布伦瑞克,德国),MiaPaCa-2, BxPC-3(写明ATCC)。细胞系都保持在湿润的气氛中(5%股份有限公司2在37°C)含10%胎牛血清的DMEM培养基(MiaPaCa-2 patu - 8902)或RPMI (BxPC-3)。细胞系是验证在写明ATCC STR分析分布和同时reauthenticated年底前由一个外部实验室研究(Generi生物技术,Hradec Kralove,捷克共和国)。
2.4。细胞生存能力分析
每个肿瘤细胞的生存能力线使用MTT试验确定。24小时后孵化细胞系的测试化合物,包含麻省理工的文化媒体新媒体取代(1毫克/毫升)。产生额外的孵化2 h后,甲瓒复杂在DMSO溶液溶解。吸光度是日出然后以540海里使用ELISA读者,和数据评估使用Magelan-6程序(Tecan、奥地利)。
2.5。血红素加氧酶活性测定
patu - 8902年人类胰腺癌细胞孵化24 h与实验化合物。孵化后,细胞用磷酸盐(PBS, 0.1米,pH值7.4),收获,离心机,resuspended PBS。细胞悬液,存储在冰,打乱了声波降解法和孵化15分钟与methemalbumin 37°C (50μ米)和NADPH(1.5毫米)。HMOX活动是由测量一氧化碳生产使用气相色谱法,如前所述[21]。细胞治疗氯高铁血红素被用作一个积极控制HMOX活动归纳。
2.6。RNA隔离和实时PCR
经过四个小时的孵化与实验化合物,信使RNA patu - 8902年人类胰腺癌细胞分离使用PerfectPure RNA细胞工具包(5 ',汉堡,德国),根据制造商的指示。孤立的信使rna被溶解在nuclease-free水,其质量和浓度测量Nanodrop 2000分光光度计(热费希尔科学,富兰克林,妈,美国)。的信使rna逆转录cDNA执行使用高容量cDNA工具包(5 ',汉堡,德国)。的HMOX1,BLVRA,产生HPRT引物序列(表1)使用,如前所述22]。
确定的相对表达水平HMOX1和BLVRA,产生HPRT表达水平测量作为一个内部控制。两个参考基因(产生HPRT和GAPD)选择观察四个常数中最稳定的基因(产生HPRT,GAPD,18 s RNA,哥伦比亚大学),基于DNA的分析外周血白细胞从10健康人类控制使用geNORM 3.5 (https://genorm.cmgg.be/(2018年5月27日)访问)。基于类似的表达水平与目标基因,产生HPRT被选为更合适的控制基因。相对变化是计算为2−ΔΔCT。qPCR 20了μL反应体积,包含4μL的互补脱氧核糖核酸模板稀释5倍的完成逆转录(RT)反应,1 x SYBR绿色主人混合(美国应用生物系统公司,培育城市,CA),和200 nM正向和反向引物。所有在96 - rt - pcr进行光学板和上运行一式三份ABI棱镜7500序列检测器系统(应用生物系统公司)。自行车在95°C条件包括聚合酶激活10分钟,其次是40 95°C的周期为15秒和60°C 60年代(22]。
2.7。测定线粒体超氧化物生产
生产线粒体超氧化物阴离子的矩阵计算的时间选择性MitoSOX染料的荧光强度增加(美国生活技术,而CA)细胞被孵化的潜在的治疗。最后的决定是由流式细胞术(BD LSRII BD生物科学,圣何塞,CA,美国)。24 h后孵化与感兴趣的疗法,MitoSOX被加入到细胞15分钟。每次测量前,细胞治疗与10μ米鱼藤酮为了增加线粒体超氧化物的生产。荧光的变化测量每隔一分钟就一段16分钟。
2.8。测定谷胱甘肽(GSSG比例
patu - 8902细胞样本收获,颗粒状,用PBS。离心分离后的细胞悬液(200 g×5分钟),移走了PBS和颗粒细胞溶解在溶液中乙腈:水(62.5:37.5,v/v)和适当的混合。溶菌产物在20000×g离心20分钟在4°C;然后,glutathione-containing上层清液收集,液氮快速冻结,储存在液氮直到分析。样本分析了毛细管电泳(安捷伦7100)配有polyimide-coated熔融石英毛细管(60厘米×50μ米)。分离的40毫米磷酸盐缓冲剂(pH值7)(Sigma-Aldrich) 30千伏的电压和测量的波长195 nm。减少,氧化谷胱甘肽作为独立的山峰和被检测出比较商业标准(Sigma-Aldrich)。二硫化谷胱甘肽(GSSG)的比例计算,从个人的峰谷胱甘肽(GSH)和GSSG。
2.9。测定H2O2生产
过氧化氢的生产从patu - 8902细胞的氧化速率测定fluorogenic Amplex红色指示器(生命技术)的辣根过氧化物酶(合、类型VI-A Sigma-Aldrich),如前所述[23]。简单地说,与色素细胞被preincubated 24 h,然后用PBS resuspended石英试管。Amplex红(5μ米)和合(10 U /毫升)被添加到悬挂,和荧光(565/585)在10分钟内测量spectrofluorimetrically (rf - 5301 pc,日本岛津公司公司,京都,日本)。
2.10。抗氧化能力测定
的过氧化氢自由基清除能力的测定在不同浓度的各种叶绿素解决方案,基于抗氧化剂的比例相对于Trolox消费,如前所述[24]。
2.11。还原测定羧化作用
还原羧化作用的程度和glutaminolysis是评估如前所述25]。细胞被孵化,直到达到80%的融合之后,媒介是新鲜中包含所取代13C-L-glutamine(剑桥同位素实验室Inc .,剑桥,妈,美国)和孵化37°C的额外6个小时。最后,这些细胞被收获,颗粒与水提取/甲醇/氯仿(1:1:2v/v/v;五、捷克共和国)和离心机在1000 g×10分钟。上极相在一夜之间被转移到一个玻璃小瓶和冻干。分析物被derivatized吡啶/ N -(三甲基硅烷基)乙酰胺/三(9:3:1,v/v/v;Sigma-Aldrich)在65°C的一个小时。derivatized样本被直接注入气相色谱/质谱设备(GC - ms, 6890 n博士5973年,安捷伦)配备crossbond二苯二甲基聚硅氧烷(Restek列)。温度梯度(每分钟10°C)期间使用GC分析和选择离子监测质量检测器。还原羧化作用的活动是由速度决定13C公司从谷氨酰胺柠檬酸(米/z273年和274年)和苹果酸(米/z335年和336年)。此外,2-hydroxyglutarate (米/z349年和350年)综合观察。还原羧化作用的速度计算的百分比13C-metabolite(柠檬酸、苹果酸)以及2-hydroxyglutarate合成的速率。乳酸浓度(每百万细胞乳酸pmol)测量根据类似的协议有两个例外:(1)细胞治疗前12 h收获和补充新鲜nonlabelled介质(没有文化13C-labelled谷氨酰胺)和(2)内部标准(草酸,米/z前190年,Sigma-Aldrich)添加分析颗粒的制备。
2.12。测定ERK和AKT激活
细胞生长在50% confluency细胞溶解在里帕缓冲区是补充与磷酸酶、蛋白酶抑制剂(蛋白酶抑制剂混合G和Phosphatase-Inhibitor-Mix我,美国赛瓦,海德堡,德国)。细胞溶解产物被离心澄清,通过sds - page分离,涂抹至0.45μ硝化纤维膜,阻止在PBS 5%脱脂牛奶,和探测主要抗体。荧光标记anti-rabbit IRDye 700和anti-mouse IRDye 800二级抗体(美国东北LI-COR生物科学,林肯)被用于可视化使用奥德赛红外成像系统(LI-COR生物科学)。兔子phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2),兔子phospho-Akt (Ser473),鼠标p44/42 MAPK (Erk1/2)抗体和兔AKT主要来源于细胞信号技术(丹弗斯、马、美国)。鼠标p120RasGAP抗体从ECM获得生物科学公司(美国肯塔基州凡尔赛宫)。
2.13。体内实验
在活的有机体内研究进行无胸腺的ν/ν老鼠(查尔斯河Wiga Sulzfeld,德国)异种器官移植与人类胰腺腺癌皮下patu(10 - 8902细胞7细胞/鼠标;对照组( )和治疗组( ))。后到达基底肿瘤大小(0.15 - 0.2厘米3异种移植后7天),叶绿素一个治疗是由胃内的政府每天一次通过胃管(1.5毫克/公斤体重/天)30天。叶绿素一个溶解在少量的96%乙醇,用干净的植物油稀释到适当的体积。对照组接受纯植物油。肿瘤大小的测量评估的两个最大的垂直直径皮下肿瘤用测径规测量每三天(26]。这些动物研究的各个方面,以及所有的协议,符合公认的标准护理和实验使用实验动物和动物研究委员会批准的第一医学院,布拉格查尔斯大学。
2.14。统计分析
变量之间的差异被Mann-Whitney等级评估和测试。集团的意思是肿瘤大小的差异用重复测量方差分析(RM方差分析)与Holm-Šidak事后测试时值是显著的。线性回归分析是用来比较的影响答:platensis治疗总peroxyl-scavenging活动在体外。根据他们的常态,并给出了数据均值±SD或中间值和25 - 75%的范围内。时被认为是具有统计学意义的差异值小于0.05。
3所示。结果
3.1。叶绿素在胰腺癌细胞生存能力的影响
所有的叶绿素检测细胞生存能力降低剂量依赖性的方式在一个浓度范围介于10到125之间μmol / L(表2)。一般来说,生物相关效应一直观察到50μ米在叶绿素浓度一个和b,而脱镁叶绿素的影响一个和叶绿酸是边际或缺席(表2)。胰腺癌细胞系最敏感的抗增殖影响叶绿素是patu - 8902(表2),用于进一步的研究。
3.2。叶绿素的影响在HMOX1和BLVRA mRNA表达在人类胰腺癌
由于叶绿素之间的结构相似度和人体胆汁色素和血红素分解代谢的通路的巨大作用在氧化应激和氧化还原生物学的调制,我们研究了叶绿素的影响HMOX1和BLVRA信使rna表达patu - 8902年人类胰腺癌细胞。虽然没有影响BLVRA信使rna表达观察治疗后的叶绿素测试,HMOX1所有叶绿素mRNA表达显著下调(图2(一个))。因此,HMOX活动也显著抑制胰腺癌细胞的叶绿素( )和叶绿酸成为最有力HMOX抑制剂(44±10%, (图2 (b)))。
(一)
(b)
3.3。叶绿素的影响参数的氧化应激和氧化还原状态的人类patu - 8902胰腺癌细胞
接下来,我们研究了叶绿素的抗氧化活性。使用一个在体外化验,叶绿素检测显示剂量依赖性的方式清除过氧化氢自由基的能力与叶绿酸是最有效的(图3)。
(一)叶绿素
(b)叶绿素b
(c)叶绿酸
基于这些结果,我们调查是否叶绿素可以减少在治疗胰腺癌细胞线粒体超氧化物的生产。事实上,在所有的测试叶绿素,浓度低至10μM大幅减少线粒体超氧化物生产在胰腺癌细胞(图4)。此外,当接触到的任何测试叶绿素,增加的比例减少谷胱甘肽在胰腺癌细胞,观察表明一个减毒生产胞内氧化剂(图5)。此外,过氧化氢生产人类胰腺癌细胞也显著影响叶绿素浓度更高的测试(50μmol / L(图6)(10),而低浓度没有影响μmol / L,数据未显示)。
3.4。叶绿素在还原羧化作用的影响和人类patu Glutaminolysis - 8902胰腺癌细胞
由于明显抑制叶绿素对生产的影响线粒体活性氧(ROS),我们感兴趣的叶绿素能否调节线粒体glutaminolysis和还原羧化作用导致线粒体的抗氧化保护(25,27]。在这些研究中,人类patu - 8902的曝光胰腺癌细胞叶绿素一个、叶绿素b,脱镁叶绿素一个和叶绿酸(50μmol / L的所有颜料)没有导致任何重大的变化13C从谷氨酰胺为2-hydroxyglutarate和合并α酮戊二酸活性glutaminolysis(标记),也为柠檬酸和苹果酸还原羧化作用(标记)。此外,没有观察到生产乳酸的变化,表明线粒体呼吸之间的不平衡和糖酵解(数据未显示)。
3.5。叶绿素的影响对ERK和AKT激活人类patu - 8902年胰腺癌细胞
据报道,由于叶绿酸抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖的绝大ERK (28),以及通过下调PI3K / Akt信号通路(29日),我们测试是否这种抗增殖机制可能在胰腺癌细胞也有一些作用。然而,人类patu - 8902的曝光胰腺癌细胞叶绿素一个或叶绿酸(50μmol / L) 1 h不导致任何重大变化的磷酸化,从而激活一种蛋白激酶ERK(图7)。
3.6。叶绿素的影响人类胰腺癌异种移植小鼠的生存能力
由于叶绿素显著降低胰腺癌细胞的生存能力,我们测试了叶绿素的影响一个在一个肿瘤的生长在活的有机体内研究无胸腺的异种移植小鼠皮下注射patu - 8902人类胰腺癌细胞。每日口服治疗叶绿素一个导致治疗肿瘤大小在很大程度上减少动物(图8)。的注意,经过一个月的治疗,胰腺肿瘤是大约三分之一的治疗与安慰剂(1.04±0.8和2.86±1.6厘米3, (图8)表示,即使是口服的可溶性叶绿素相对不佳一个是一个非常有效的方法来防止这种恶性肿瘤的进展。
4所示。讨论
叶绿素,地球上最丰富的颜料内在纳入人类的食物链,代表天然化合物与一个强大的生物效能。虽然他们可能对人类健康有益的影响已经公布上半年的20世纪(30.)如果他们也考虑一个丰富,令人信服的实验和临床数据的数量对这个话题非常稀缺。人们普遍认为,叶绿素的chemopreventive效应最有可能是由于他们的潜在陷阱致癌物质在肠道内腔(1作为在中国[9)和荷兰的临床研究(10]。
尽管讨论其生物利用度,叶绿素似乎重要的潜在的系统性预防癌症的影响(31日]。事实上,最近的研究报道,叶绿素的生物相关的分数(或其衍生品)甚至出现在外围组织(4]。这是所示Gandul-Rojas和同事的一项研究发现,dephytylated叶绿素的生物利用度是孕产妇色素(相比增长了65倍32]。
尽管叶绿素一个叶绿素是主要物种存在于植物王国,各种各样的其他叶绿素及其代谢产物存在于各种植物、藻类和动物(6],从而找到途径进入人的食物链。此外,植物生命周期期间,叶绿素叶绿素积极植物细胞内代谢和这些衍生品,作为强有力的抗氧化剂,被认为在衰老起着重要的作用,在某种程度上类似于人体的胆红素(5]。此外,叶绿素是转换为脱镁叶绿素,pyropheophytin,和pheophorbide加工蔬菜食品,摄入后,似乎人类可能受益于他们的潜在的生物效价33]。事实上,不含金属的和metallo-chlorophyll衍生品,代表饮食叶绿素代谢产物普遍在新鲜和加工食品(以及膳食补充剂),已被证明具有抗氧化,抗诱变剂的,和抗癌活性34,35]。此外,部分代谢叶绿素,如植烷酸,可能产生一个特定的核receptor-modulating活动(6,36通过它可以导致的生物效应观察在实验和临床研究。然而,它应该强调人体中叶绿素的命运以及他们潜在的生物效应本质上仍然是未知的。事实上,它不是目前已知,叶绿素的潜在的抗癌作用是否与本机tetrapyrrolic化合物单独或降解产物(或两者),形成于人类的消化系统。此外,绿色植物,可能有大量的其他生理活性化合物,有助于或修改抗癌效果。
然而,一系列chemopreventive活动已经报道了叶绿酸,最常见的叶绿素衍生物,研究影响多种细胞内的目标和途径导致致癌作用(审查,请参阅[37])。事实上,在我们的在体外在人类胰腺癌细胞的研究中,我们展示了强大的抗增殖活动对所有测试发现叶绿素和叶绿素一个是最有效的。我们还描述了这些抗癌效应在活的有机体内研究异种器官移植的裸体小鼠patu - 8902细胞(最敏感的人类胰腺癌细胞株在我们的实验)。
抗氧化效果是最牢固确立活动产生叶绿素。例如,它已经证明,叶绿酸带来更高程度的保护自由基相比其他抗氧化剂抗坏血酸、谷胱甘肽等(38]。事实上,我们最近发现的抗氧化效果四吡咯,胆红素和藻青素显著不同于其他抗氧化剂。他们的行动的最突出的特征是线粒体ROS的衰减生产(39,40]。在这里,我们表明,叶绿素的也是如此。所有叶绿素检测不仅持续改善总过氧化氢自由基清除活动也抑制线粒体ROS和总细胞过氧化氢的生产到癌细胞,伴随着的谷胱甘肽氧化还原状态转向减少。
重要的是,线粒体ROS控制细胞氧化还原信号,增加其生产对于肿瘤发生[已被证明是至关重要的41,42]。然而,癌细胞也上调抗氧化保护为了保持氧化信号之间的平衡和氧化应激43]。事实上,一些报告显示,补充抗氧化剂包括防治和生育酚可能,事实上,促进癌症的进展通过防止氧化应激(44,45]。然而,在这里,我们报告,叶绿素,与其他抗氧化剂相比,抑制胰腺癌的进展。这种效果是伴随着减毒HMOX1表达和活动,一个关键组成部分的内在细胞抗氧化系统。他们的抗癌效果,这可能真的有相关性HMOX1据报道,以防止响应的表达式胰腺癌细胞抑制剂治疗(17]。有趣的是,这种效应可能(癌症)的特异性,因为相反的活动对观察HMOX1表达式chlorophyllin-treated人类脐静脉内皮细胞(46]。我们的观察似乎并不奇怪的植物中叶绿素和HMOX[之间的相互关系47]。BLVRA,另一个重要的酶在血红素分解代谢的途径,提出了促进致癌作用[18]。事实上,表达的增加BLVRA已经证明在肝细胞癌患者19),以及在乳腺癌和肺癌细胞系(20.]。然而,在我们的在体外在人类胰腺癌细胞的研究中,我们没有观察到任何叶绿素的影响BLVRA表达式。
有趣的是,我们没有观察到任何影响叶绿素的glutaminolysis或还原羧化作用,表明糖酵解和线粒体呼吸影响叶绿素治疗(25]。因此,叶绿素的抗增殖作用似乎抑制活性氧的生产和相关细胞生物能学无关。
据报道,在先前的研究中,叶绿酸表达下调PI3K / Akt信号通路(29日),显示抑制MCF-7乳腺癌细胞的增殖的绝大ERK (28]。然而,无论是叶绿素一个在一种蛋白激酶和叶绿酸有抑制作用或ERK的磷酸化胰腺癌细胞的研究。
5。结论
叶绿素调解的胰腺癌细胞的氧化还原状态变化可能部分负责他们的抗癌效果和有助于减少癌症的发病率在消费者临床研究中观察到的绿色蔬菜。
数据可用性
所有原始数据支持结果完全可以要求从相应的作者。
的利益冲突
作者宣称他们没有金融或商业利益冲突。
确认
作者要感谢Kolar Zadinova博士和博士:帮助动物研究和数据分析,分别。他们也感谢贾斯珀·e·曼宁仔细阅读手稿和编辑的援助。格兰特RVO-VFN64165/2017支持的研究是由捷克卫生部和赠款普洛古莱Q25 / LF1和SVV查尔斯大学提供的260370 - 2017。罗马索博特卡被捷克教育部支持(项目LO1416和LM2015055)。